Per iniziare, posizionare il ratto anestetizzato in posizione sdraiata laterale sul tavolo chirurgico sterile. Rimuovere i peli degli arti inferiori con un rasoio elettrico. Disinfettare l'area chirurgica con movimenti circolari con una soluzione al 5% di iota quattro, seguita da alcol al 75%.
Dopo aver individuato il femore prossimale e distale, praticare un'incisione di 2,5 centimetri lungo l'asse lungo del femore per tagliare il tessuto cutaneo. Utilizzando una pinza oftalmica e forbici per tessuti, separare lo strato cutaneo dalla fascia. Esporre l'approccio laterale al femore attraverso i bicipiti, i femori e i muscoli femorali laterali.
Individuare l'intersezione dei due setti muscolari e separarla con cura con una lama chirurgica monouso lungo il bordo muscolare fino a raggiungere la superficie femorale. Successivamente, applicare un separatore periostale per separare in modo smussato i muscoli della superficie femorale ed esporre il centro della diafisi femorale. Utilizzando un pennarello sterile, segnare l'area del sito del difetto sulla superficie centrale della diafisi femorale.
Successivamente, utilizzando un manipolo orale a bassa velocità, praticare un piccolo foro perpendicolare alla superficie ossea nel sito contrassegnato, distruggendo il periostio e la corteccia ossea fino a raggiungere la cavità del midollo osseo. Espandere il foro in tutte le direzioni per ottenere una forma a cavità scatolare. Ora tieni una sonda orale marcata parallela al bordo del difetto per determinare il diametro e la morfologia del difetto.
Sutura per chiudere gli strati muscolari e cutanei. Infine, disinfettare l'area chirurgica con il 5%iota quattro dall'interno verso l'esterno.