Per iniziare, cattura immagini di glomeruli marcati con un microscopio a fluorescenza confocale o a foglio luminoso. Importare i file di immagine nel software di analisi delle immagini. Fare clic sul pulsante Superficie per creare una nuova superficie.
Segui la guida nella parte in basso a sinistra dello schermo. Fare clic sul pulsante Avanti. Selezionare la casella relativa all'opzione Arrotonda e immettere un numero per controllare i dettagli della superficie.
Selezionare la sottrazione dello sfondo in thresholding e riempire la casella con il diametro medio approssimativo dei glomeruli. Fare clic sul pulsante Avanti, regolare se necessario e fare clic sul pulsante Avanti. Selezionate l'intervallo corretto e fate clic sul pulsante Avanti (Next) per creare una superficie.
Quindi fare clic su Filtro, seguito dal pulsante Aggiungi per aggiungere sfericità per filtrare gli oggetti non sferici. Fate clic sul pulsante Duplica (Duplicate) per copiare la nuova superficie. Fare clic sul pulsante delle statistiche, seguito dal pulsante generale.
Il software presenterà il numero di glomeruli come numero totale di superficie. Per calcolare il volume dei glomeruli, fare clic sul pulsante di selezione per selezionare gli oggetti di destinazione e presentare il volume di ogni oggetto. Esporta le statistiche in un foglio di calcolo per ulteriori analisi.
Per calcolare il volume della fetta o dell'intero rene, per prima cosa, importare le immagini nel software di analisi delle immagini. Dopo aver fatto clic sul pulsante della superficie e aver immesso un numero nell'opzione Arrotonda, selezionare l'intensità assoluta e la soglia. Fare clic sul pulsante Avanti.
Regolare la superficie fino a coprire l'intero tessuto e fare clic sul pulsante Avanti per creare la superficie. Fare clic sul pulsante di selezione per selezionare la superficie dell'intero tessuto e presentare il volume del tessuto. Infine, esporta le statistiche in un foglio di calcolo.
Utilizzando un software di elaborazione delle immagini, il numero e il volume dei glomeruli sono stati contati in una fetta di rene in un rene intero o in una striscia. Utilizzando questi valori, è stato possibile calcolare il rapporto di volume e la frequenza dei glomeruli.
