Per iniziare, posiziona un ratto rasato anestetizzato in posizione supina su un tavolo chirurgico. Iniettare due millilitri di soluzione salina eparinizzata nella vena dorsale del pene per l'anticoagulazione sistemica. Disinfettare la pelle addominale rasata con una soluzione di iodio povidone e coprire con un panno sterile drappeggiato.
Con un paio di forbici chirurgiche, praticare un'incisione cruciforme nell'addome. Allungando la cavità addominale con la pinza emostatica, capovolgere il fegato verso il diaframma, esteriorizzare il tratto gastrointestinale sul lato destro dell'addome e coprirlo con una garza umida. Separare e tagliare con cura il legamento splenogastrico per esporre l'ilo splenico.
Sezionare gradualmente lungo l'ilo splenico per separare ed esporre l'arteria epatica comune, l'arteria gastroduodenale e l'arteria splenica. Legare e tagliare l'arteria gastroduodenale e l'arteria epatica comune dissociando progressivamente il tessuto circostante. Capovolgere la milza verso il lato destro per esporre l'aorta addominale.
Eseguire delicatamente la dissezione smussata con tamponi di cotone per esporre l'aorta addominale e il tronco celiaco. Posizionare una sutura di seta 3-0 di circa tre centimetri di lunghezza sopra e sotto i rami del tronco celiaco. Quindi, posizionare una sutura di seta 6-0 lunga 10 centimetri sul ramo del tronco celiaco.
Legare l'aorta addominale sotto e sopra i rami del tronco celiaco. Quindi, praticare una piccola incisione nel ramo arterioso. Sollevare delicatamente la sutura di seta 6-0 e inserire un catetere venoso calibro 24 nell'arteria splenica lungo il tronco celiaco.
Fissare il catetere per fissarlo in posizione. Utilizzare una pompa a siringa per infondere 50 millilitri di soluzione fisiologica normale eparinizzata a una velocità di quattro millilitri al minuto. Contemporaneamente, recidere la vena porta come canale di deflusso per consentire al fluido infuso di defluire dalla milza.
Sezionare con cura il tessuto circostante della milza, evitando danni al pancreas e preservando i principali vasi accessori. Verificare la presenza di eventuali perdite intorno alla milza. Quindi, rimuovere la milza e il pancreas e sciacquarli con soluzione fisiologica.
Trasferire la milza in una provetta da centrifuga da 50 millilitri riempita con soluzione fisiologica. E conservalo in un congelatore a 80 gradi Celsius.
