Vorremmo ringraziare Chantal Lau per consigli sulla valutazione assunzione di latte, Klaus Miczek per consigli sull&#39;uso di stress sociale, e Sheryl Goodman per il feedback sulla rilevanza clinica di stress sociale cronico. Lo sviluppo di questo protocollo è stato sostenuto da NICHD K99/R00 HDO59943 alla BCN.

Adulti Sprague Dawley femmine sono allevati nella nostra struttura animale, cucciolate sono abbattuti a 8-10 cuccioli con un rapporto anche il sesso, e la cura materna e test aggressione avviene nella casa ratti gabbia. Soggetti sperimentali rimangono nella stessa stanza attraverso lo studio. Un pollice separatori alti gabbia in plexiglass trasparente vengono inseriti nella gabbia il giorno 20 o 21 di gestazione. Questi si dividono la gabbia in 4 quadranti per evitare cuccioli di eseguire la scansione fino alla madre, quando sono immessi nella gabbia. Tipico comportamento materno è confermata per tutte le dighe sul giorno di nascita (giorno 1 di lattazione) attraverso l&#39;osservazione diretta di reperimento cucciolo, governare, di cura, di sé e governare. Maschi Intruder sono più piccoli o di dimensioni simili Sprague Dawley maschi, e le femmine non sono mai presentati con lo stesso maschio due volte. La maternità e l&#39;aggressività materna sono video registrato la mattina dei giorni 2, 9, e 16 della lattazione, come descritto di seguito: <ol><li> Rimuovere la lettiera dalla diga, pesare i maschi e le femmine serenziato e luogo intera cucciolata in una gabbia tenuta pulita per 60 min. </li><li> Alla fine della separazione min 60, pesare i maschi e cuccioli femminili separatamente prima di sostituire lettiera in casa gabbia della diga, che divide i cuccioli più uniformemente possibile tra i 3 quadranti non-nido della gabbia. Avviare la registrazione video prima che venga ripristinato al fine di garantire tutti reperimento cucciolo viene registrato. </li><li> Video record di cura materna per 30 min. Consentire dighe per interagire con i loro cucciolate per un altro 90 min. 120 min (30 min di registrazione + addizionale 90 min) dopo aver piazzato cuccioli nella gabbia della diga, pesare di nuovo per determinare l&#39;assunzione di latte durante il periodo di due ore. Un cucciolo è eutanasia da ogni disordine sul comportamento giorni di test dopo il periodo dell&#39;allattamento min 120 per estrarre un campione di latte dallo stomaco. Lo scopo della raccolta del latte dai cuccioli è quello di valutare i livelli di ormoni e altri fattori che possono mediare gli effetti comportamentali e / o di fisiologia dello stress sociale cronico sulla prole. </li&gt; <li> Cuccioli tornare alla diga dopo la pesatura, e di introdurre un romanzo maschio intruso più piccola o di dimensioni simili alla gabbia per 30 minuti per verificare l&#39;aggressione materna. Avviare la registrazione video durante l&#39;introduzione di assicurare che ogni aggressione è registrato. Per i soggetti di controllo, il maschio viene rimosso dopo la registrazione di 30 min. Per i soggetti cronici stress sociale, i maschi vengono lasciati in per altri 30 min. Sulla non-comportamentali giorni di test durante il periodo di 2-16 giorni, i maschi intrusi romanzo sono collocati in gabbie di soggetti CSS per un&#39;ora senza registrazione video. Le esposizioni di stress sociali vengono arrestati se lesione si verifica, e di animali feriti vengono curati e rimossi dallo studio. </li><li> Una bottiglia con 0,02% saccarina viene aggiunto alla casa gabbia diga alle 03:00 nei giorni 2, 9, e 16 alternando tra il lato destro e sinistro. Sia l&#39;acqua di rubinetto e bottiglie saccarina sono pesati a 3:00, poi di nuovo alle 8 del mattino successivo per determinare la preferenza saccarina. </li><li> I cuccioli sono svezzati il ​​giorno 23, e dighe ari euthanized a questo punto per ottenere campioni plasmatici basali ed estrarre il cervello per l&#39;analisi di espressione genica di fisiologicamente rilevanti e comportamentale nuclei bersaglio. </li></ol> Maternal Behavior Scoring Le cure materne comportamenti aggressione specificati nelle tabelle 1 e 2 sono segnati dai video utilizzando ODLog software di analisi comportamentale. Le chiavi sono assegnate a ciascun comportamento, e il tasto viene tenuto premuto mentre ogni comportamento viene eseguita per registrare la durata di tale comportamento. Frequenze sono la somma dei tratti chiave per ogni comportamento. Questo programma crea sia un file di dati di tempo completo timbrato cinque bidoni seconda e una tabella riassuntiva con le frequenze e le durate totali per i comportamenti definiti sulla registrazione 30 min. Sia l&#39;aggressività materna e cure materne sono segnati per i video aggressione materna, come le dighe rispondono maternamente per i cuccioli, mentre l&#39;intruso maschio è nella gabbia. </p&gt; Subito dopo aver piazzato i cuccioli nella gabbia, la diga recupererà ogni cucciolo individualmente al nido. Recupero completo è segnato una volta quando tutti cuccioli sono nel nido. Mentre il recupero completo è solitamente segnato solo una volta, a volte può essere segnato due volte se la diga trasferisce l&#39;intera cucciolata in un nuovo sito, dopo un recupero completo iniziale. Comportamento di nidificazione viene segnato ogni volta che il materiale di nidificazione è manipolato dalla diga con la bocca o le zampe. Toelettatura Pup include leccare o manipolazione del pelo del cucciolo dalla diga con le zampe. Scoring Infermieristica è iniziata dopo la diga è stata in una accovacciato fermo o postura di cura incline per 10 secondi. Questo per dare il tempo per i cuccioli di iniziare da latte. Totale cura materna è la durata combinata di nidificazione, toelettatura cucciolo, e di cura, ma può limitarsi a governare e di cura di concentrarsi sul comportamento pup-diretto. Auto toelettatura è definita come la manipolazione della propria pelliccia della diga con la bocca o le zampe. L&#39;attività è segnato durzione qualsiasi attività locomotoria non associato ai comportamenti precedentemente definiti. Aggressione materna consiste di attaccare, mordere, calciare, e pinning. Attaccare è definito come la boxe o di lotta del maschio intruso. Mordere è segnato quando la diga usa i denti su l&#39;intruso, e pinning viene registrato quando la diga tiene il maschio verso il basso con le sue arti o del corpo. Aggressione totale è la somma di attaccare, mordere, calciare, e pinning. Statistiche Comportamenti materni, l&#39;assunzione di latte, e la preferenza saccarina del controllo e CSS dighe sono stati confrontati ogni giorno di lattazione con una coda t-test per valutare gli effetti dei CSS sui singoli giorni. Dati di crescita nei giorni 2, 9, e 16 della lattazione, sono stati confrontati con una coda t-test su peso (in grammi) al giorno 2 o la crescita percentuale rispetto al giorno 2 (giorno 9 o 16 peso / giorno 2 x peso 100). I livelli di espressione di mRNA OXT sono stati normalizzati contro tre combinata housekgeni eeping, b-actina, ipoxantina fosforibosiltransferasi (HPRT) e gliceraldeide-3-fosfato deidrogenasi (GAPDH). Livelli di espressione di mRNA oxt relativi sono stati confrontati con i singoli test t su ciascun peptide o recettore per ciascuna regione del cervello. Tutti i risultati grafici sono presentati come gruppo significa + SEM, e il livello di significatività statistica è stata p ≤ 0.05.

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Gli autori non hanno interessi finanziari in competizione.

I dati ottenuti dal paradigma CSS è più probabile che sia coerente e ripetibile in un ambiente di ricerca comportamentale stabile. Si sostiene che la custodia e l&#39;allevamento di animali da laboratorio è un componente che deve essere più considerato con attenzione, in ogni tipo di studio, in particolare studi comportamentali. Abitazioni e allevamento pratiche che possono introdurre confonde includono: partendo con dighe in gravidanza spediti dal fornitore, muovendosi dighe tra camere giornaliere per i test comportamentali, la variazione nel tempo della giornata di test comportamentali, l&#39;eccessiva esposizione di dighe a nuove visioni, suoni, odori o , non si usa a casa gabbia per il test comportamentale, una mancanza di materiale di nidificazione o incoerenti, e poveri di routine la cura degli animali (ad esempio, l&#39;esposizione a letto bagnato e sporco). Inoltre, l&#39;inclusione di altri test comportamentali durante l&#39;allattamento (per esempio forzato nuotare test o elevated plus maze) può introdurre confonde. Tuttavia, l&#39;uso di un ambiente gabbia romanzo o altrafattore di stress acuto può essere utile per rivelare differenze comportamentali non apparenti con sede prove in gabbia a causa di potenziali interazioni tra stress cronico, stress acuto, e il comportamento. Il protocollo attualmente descritta è efficace con ratti Sprague Dawley, ma può essere necessaria modifiche del protocollo per altri ceppi e specie. Ad esempio, i cuccioli devono essere protetti con una barriera di maschi molto aggressivi lunghi Evans per evitare lesioni. Pratiche critiche per la somministrazione stress sociale includono l&#39;uso di maschi più piccole o di dimensioni simili e aventi la prima interazione di un intruso maschio con una giornata altamente aggressivo 2 diga per garantire sconfitta e costante comportamento sottomesso nei maschi. Se i maschi si attaccano una cucciolata, devono essere rimossi dallo studio, in quanto è probabile che attaccheranno cucciolate successive. Una possibilità per ridurre la probabilità di maschi troppo aggressivi è di averli sconfitti da un maschio più grande prima dell&#39;inizio della study. Per il punteggio comportamentale, è necessario fornire un quadro completo del comportamento della registrazione e l&#39;analisi sia della frequenza e della durata della maggior parte dei comportamenti, e l&#39;uso di intervalli di registrazione più brevi o di controlli può comportare la raccolta di dati sufficienti per testare a fondo il ipotesi. Formazione approfondita e coerente dei marcatori può essere realizzato con l&#39;uso precedentemente segnato video comportamentali. L&#39;applicazione principale del modello CSS è la sperimentazione di trattamenti farmacologici attuali e nuovi per la depressione post-partum e l&#39;ansia. Un uso ulteriore di questo modello è quello di studiare gli effetti di pratiche e procedure in materia di cure materne, come ad esempio taglio cesareo nascite, parto indotto, e vari programmi allattamento comuni. Ulteriori indagini dei potenziali effetti dello stress sulla lattazione sarà prezioso data la mancanza di studi su questo argomento. Mentre campioni di latte dalle dighe sarebbe utile, la necessità di anestesia e OXT esogenonella raccolta di questi campioni introduce diverse confonde comportamentali e fisiologiche, quindi studi sugli effetti dello stress sulla lattazione possono non essere favorevole alla analisi comportamentale simultanea. Il potenziale per gli studi transgenerazionali con il modello CSS è grande, e queste indagini può anche includere differenti trattamenti stress della prole adulta per indagare potenziali interazioni tra primi stress della vita e in seguito l&#39;esposizione allo stress. L&#39;importanza del modello CSS e associati centri di test comportamentali sulla rilevanza etologiche e traslazionale. Si ipotizza che la mancanza di efficacia degli attuali trattamenti per la depressione e ansia è dovuta ad una mancanza di sovrapposizione tra etologici studi su animali e umani. I modelli animali di depressione e ansia spesso si basano su solidi fattori di stress fisici o ceppi altamente selezionati che possono spiegare la constatazione che gli attuali trattamenti antidepressivi sono più efficaci con depressione grave. Ph<html> fattori di stress ico come moderazione e l&#39;esposizione a una vasta gamma di fattori di stress randomizzati non simulano esperienze umane comuni. Il razionale per l&#39;esposizione randomizzato utilizzato su paradigmi di stress lieve cronica è quello di prevenire l&#39;acclimatazione. Questa è una preoccupazione significativa, ma la situazione ideale può essere quella di utilizzare un protocollo che gli animali non adatti alla che assomiglia più da vicino l&#39;eziologia della depressione e ansia negli esseri umani, come lo stress sociale. Oltre a promuovere l&#39;uso di fattori di stress più etologici, un altro vantaggio del modello CSS è l&#39;uso di una misura rilevante di anedonia, comportamento materno. Questo è un robusto comportamento mediato premio che media direttamente gli effetti negativi della depressione nella madre sulla prole. L&#39;integrazione combinata di fattori di stress etologiche e di misure di anedonia in depressione e l&#39;ansia della ricerca sarà particolarmente vantaggioso nella individuazione delle misure preventive e trattamenti sicuri ed efficaci. &quot;&gt; Lo stress sociale è stato utilizzato con successo in maschi e femmine nullipare per diversi anni, e l&#39;espansione di questo lavoro in femmine materna è in grado di produrre una grande quantità di nuovi dati per la depressione post-partum e presto lo stress della vita dei disturbi associati sia nei maschi e femmine. Si ipotizza che il maggiore uso di modelli animali etologici nella depressione e l&#39;ansia della ricerca porterà a trattamenti più efficaci a causa della raccolta di dati comportamentali che è etologicamente e translationally rilevante, meno variabile e più ripetibile.

L&#39;eziologia dei disturbi dell&#39;umore, tra cui la depressione post-partum, spesso comporta l&#39;esposizione a 1,2 stress cronico. Anche se la depressione nelle madri ha effetti negativi sia sulla genitorialità 3 e lo sviluppo psicologico della prole 4, la stragrande maggioranza degli studi sulla depressione e ansia attenzione su animali maschi e gli esseri umani. Anche se ci sono un paio di modelli animali di comportamento materno alterato con lo stress cronico, la maggior parte sono componenti fisiologiche sostanziali che non possono riguardare fattori di stress psicosociale cronico comunemente vissuti dagli esseri umani o di concentrarsi principalmente sul periodo pre-parto. Stress cronico moderazione nei ratti in gravidanza aumenta la maternità e l&#39;ansia e riduce l&#39;aggressività materna in alcuni studi 5, ma diminuisce la cura materna in altri 6. Lo stress Restraint è un potente fattore di stress fisico 7, e alcuni rapporti sono incompatibili con il attenuato cura materna osservata in mot umanolei con la depressione post-partum 4. Prenatal ultramild lo stress non influisce cura cucciolo, ma non riduce l&#39;aggressività materna 8. Ultramild paradigmi di stress usano una varietà di fattori di stress randomizzati (ad esempio 30 gradi di inclinazione della gabbia, invertito ciclo di luce, confino, durante la notte l&#39;illuminazione, e la gabbia sporca) per diversi giorni, e l&#39;effetto dei singoli componenti è spesso poco chiaro. E &#39;probabile che alcuni fattori di stress utilizzati in ultramild paradigmi di stress, come la rovesciata ciclo di luce e durante la notte l&#39;illuminazione direttamente influenzare la cura materna indipendente da eventuali effetti dello stress, come la cura materna nei topi ha un ritmo circadiano. L&#39;esposizione a letto umido è un significativo stress termico per i cuccioli, e può provocare mortalità dei cuccioli, in meno di 24 ore in giovani cucciolate (osservazioni personali). Recenti studi sui roditori si sono concentrati sull&#39;uso di fattori di stress etologicamente rilevanti, come ad esempio lo stress sociale cronico (CSS), per lo studio degli effetti dello stress su offpring comportamento e disturbi dell&#39;umore 9-13. Nel tentativo di sviluppare un modello etologico per la depressione post-partum, ridurre la componente fisiologica del fattore di stress utilizzati, e generare i risultati comportamentali e fisiologici consistenti, il nostro laboratorio si è concentrata sull&#39;uso di stress sociale. Mentre sconfitta sociale cronica viene efficacemente utilizzato come modello per il social depressione indotta da stress nei roditori maschi 14, questo non è un modello di comportamento ecologicamente rilevanti per molti roditori materni se si utilizzano gli intrusi maschili, come una singola sconfitta sociale di un roditore materna di solito si traduce nel cannibalismo della cucciolata dalla intruso maschile. Tuttavia, l&#39;esposizione acuta ad un romanzo intruso maschio, senza sconfitta sociale della diga, suscita forti risposte di stress comportamentali ed endocrino in allattamento femmine 15-18. Vi sono anche prove che lo stress cronico durante l&#39;allattamento, compresa l&#39;esposizione a un intruso maschio, danneggia direttamente la produzione di latte 19,20, che possono avere un impatto crescita della prole.Questi risultati nei ratti materni sono supportate da studi in femmine vergini, dove l&#39;instabilità sociale cronica (variando l&#39;isolamento e l&#39;affollamento) aumenta l&#39;attività dell&#39;asse ipotalamo-ipofisi-surrene 11,21, altera la regolazione della temperatura del corpo, riduce il saccarosio e l&#39;assunzione di cibo, ed è stato proposto come modello animale per la depressione femmina 11. Auto grooming, una misura di ansia 22,23 è inoltre sensibile alle manipolazioni stress sociale 24,25. Stress sociale cronico (CSS) durante l&#39;allattamento può interrompere il comportamento materno e attenuare la crescita della diga e la prole. La presentazione quotidiana di un romanzo intruso maschio durante l&#39;allattamento diminuisce cura materna, aumenta l&#39;aggressività materna nei confronti di un romanzo intruso maschio e di auto governare, e inibisce la crescita sia la diga e la sua stirpe 10. Questi effetti indicano che CSS è un modello etologico pertinente ed efficace per i disturbi dell&#39;umore che coinvolgonodanni nella cura materna, anedonia, ansia elevata, e la crescita prole attenuato, come la depressione post-partum. Sia la cura materna e dati prole indicano che i CSS possono avere effetti duraturi sulle generazioni future, e di ricerca sugli effetti dello stress cronico sul comportamento materno sostenere l&#39;ipotesi che gli effetti dello stress cronico sul comportamento materno sono ormonale mediata (Murgatroyd e Nephew 2012 ). Inoltre, i recenti dati del femminile figli adulti di dighe stressati supporta l&#39;ipotesi che i CSS come una forma di stress primi anni di vita provoca cambiamenti nel centro di ossitocina (OXT) e prolattina (PRL), che sono associati con comportamenti di cura inefficiente 12. Il modello CSS integra altri modelli efficaci di stress interruzioni indotte nel comportamento materno, ad esempio limitando materiale di nidificazione 26,27 e la separazione materna 28,29. Aspetti unici del modello CSS sono che è etologicamente rilevanti sia nei roditori e nell&#39;uomo,ha una componente fisiologica relativamente minore, e può essere combinato con fattori di stress simili in altre fasi della vita (la sconfitta, l&#39;instabilità sociale cronico sociale). Gli obiettivi primari nello sviluppo del paradigma CSS dovevano usare un rilevante fattore di stress etologicamente e clinicamente, indurre anedonia (come misurato da cure materne e la preferenza saccarina), aumentare le misure comportamentali di ansia, e di mettere in pericolo lo sviluppo fisiologico, comportamentale e o endocrino cucciolo. Lo scopo del modello è quello di testare i trattamenti e le pratiche per la depressione post-partum e l&#39;ansia attuali e romanzo.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Material Name </td>
 <td>Company </td>
 <td>Catalogue Number </td>
 <td>Comments </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>ODlog video analysis </td>
 <td>Macropod software </td>
 <td>Version 2.7.2 </td>
 <td>Available for PC or Mac </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Video recorder </td>
 <td>Sony </td>
 <td>HDR-CX130 </td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

using chronic social stress to model postpartum depression in lactating rodents

L&#39;esposizione a stress cronico è un fattore predittivo affidabile di disturbi depressivi, e lo stress sociale è un comune fattore di stress etologicamente rilevanti sia negli animali e nell&#39;uomo. Tuttavia, molti modelli animali di depressione sono stati sviluppati nei maschi e non sono applicabili o efficaci in studi di donne post-partum. Recenti studi hanno riportato effetti significativi di stress sociale cronico durante l&#39;allattamento, un fattore di stress etologicamente pertinente ed efficace, il comportamento materno, la crescita, e comportamentali neuroendocrinologia. Questo manoscritto descrive questo paradigma cronica stress sociale utilizzando l&#39;esposizione ripetuta di una diga in allattamento per un romanzo intruso maschio, e la valutazione degli effetti comportamentali, fisiologici, e neuroendocrina di questo modello. Stress sociale cronico (CSS) è un modello utile per studiare gli effetti dello stress sul comportamento e la fisiologia della diga, così come la sua stirpe e per le generazioni future. L&#39;esposizione di cuccioli di CSS può essere utilizzato anche come un precocela vita di stress che ha effetti a lungo termine sul comportamento, fisiologia e neuroendocrinologia.

Esposizione di una diga in allattamento al CSS deprime la durata del grooming cucciolo e totale cura materna nel corso di una 30 minuti di registrazione video il giorno 9 di lattazione (Nephew e Ponti 2011, figura 2). Il giorno 16 di lattazione, l&#39;aggressività e l&#39;auto toelettatura, una misura di ansia, sono aumentati (Nephew e Ponti 2011, figura 3). Assunzione di latte da parte dei cuccioli di CSS dighe è del 40% meno di dighe di controllo nei giorni 9 e 16 di lattazione (Figura 4), ​​e la crescita dei piccoli è attenuato in questi due giorni (Nephew e Ponti 2011, Figura 5). Saccarina preferenza è più basso il giorno 16 nelle femmine trattate CSS (Figura 6). Nell&#39;adulto F1 femminile prole di madri trattate CSS, l&#39;assunzione di latte (Figura 7) e la saccarina preferenza (Figura 8) sono depressi nei giorni 2 e 16. Espressione genica ossitocina nel nucleo supraoptic è inferiore in queste dighe (Figura 9 </strong&gt;), e risultati simili sono stati riportati nel nucleo paraventricolare, centrale dell&#39;amigdala, mediale e amigdala (Murgatroyd e nipote, 2012). <table border="1"><tbody><tr><td> COMPORTAMENTO </td><td> DESCRIZIONE </td></tr><tr><td> Retrieval </td><td> Di carico di cuccioli di nuovo al nido </td></tr><tr><td> Recupero completo </td><td> Tempo necessario per recuperare tutti gli 8 cuccioli </td></tr><tr><td> Nesting </td><td> Manipolazione di biancheria da letto in zona nido con la bocca o zampe </td></tr><tr><td> Grooming Pup </td><td> Leccare o manipolazione del pelo del cucciolo con le zampe </td></tr><tr><td> Infermieristica </td><td> Quando diga è in una posizione accovacciata o infermieristico prona </td></tr><tr><td> Total Care materna </td><td> Totale durazione di Nesting, Grooming Pup, e infermieristica </td></tr><tr><td> Auto Grooming </td><td> Manipolazione di dighe propria pelliccia con la bocca o zampe </td></tr><tr><td> Attività </td><td> Qualsiasi attività locomotoria non associata a comportamenti di cui sopra </td></tr></tbody></table> Tabella 1. Cure materne. <table border="1"><tbody><tr><td> COMPORTAMENTO </td><td> DESCRIZIONE </td></tr><tr><td> Attaccare </td><td> Boxing o lotta di intruso maschio </td></tr><tr><td> Mordere </td><td> L&#39;uso di denti per attaccare intruso maschio </td></tr><tr><td> Kicking </td><td> Uso dei piedi per colpire intruso maschile, simile ad un coniglio calci </td></tr><tr><td> Pinning </td><td> Femminile materno tenendo maschio giù con gli arti o il corpo </td></tr><tr><td> AAggressione Tal </td><td> Somma delle durate di attaccare, mordere, calciare, e pinning </td></tr></tbody></table> Tabella 2. Aggressione materna. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. Pianificare il protocollo cronica stress sociale. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura 2. Stress sociale cronico diminuisce cure materne il giorno 9 di lattazione. Esponendo una diga in allattamento per un romanzo intruso maschio per un&#39;ora al giorno per 7 giorni ha ridotto il tempo dedicato alla toelettatura cucciolo e totale cura materna, che include grooming cucciolo, assistenza infermieristica, e comportamenti di nidificazione nel corso di un 30 min materna comportamento di registrazione video (Nephew e Ponti, 2011). * Indica una differenza significativa tra il controllo e lo stress gruppi, p &lt;0.05, di n = 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig3.jpg" alt="Figura 3" /> Figura 3. Stress sociale cronico aumenta l&#39;aggressività materna e ansia il giorno 16 di lattazione. Esposizione di una diga in allattamento per un romanzo intruso maschio per un&#39;ora al giorno per 14 giorni ha aumentato la durata (A) e la frequenza (B), di aggressione e di auto toelettatura e diminuito locomotore attività nel corso di un 30 min aggressione materna di registrazione video (Nephew e Ponti, 2011). * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig4.jpg" alt="Figura 4" /> Figura 4. Stress sociale cronico diminuisce l&#39;assunzione di latte da parte della prole. Assunzione totale di latte da cucciolate di 8-10 cuccioli in un intervallo di due ore di cura è stato ridottonelle madri stressate nei giorni 9 e 16 di lattazione. * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig5.jpg" alt="Figura 5" /> Figura 5. Stress sociale cronico attenua crescita della prole nei giorni 9 e 16 di lattazione. Esponendo le dighe di stress sociale cronico per 15 giorni durante l&#39;allattamento risultati in crescita del cucciolo attenuato (Nephew e Ponti 2011). * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig6.jpg" alt="Figura 6" /> Figura 6. Stress sociale cronico induce diminuita assunzione saccarina il giorno allattamento 16. Quindici giorni di stress sociale, diminuisce l&#39;apporto percentuale di saccarina relativa all&#39;acqua per un periodo di 17 ore. * Indica una significativa differenza tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig7.jpg" alt="Figura 7" /> Figura 7. Cronica precoce stress sociale vita diminuisce l&#39;assunzione di latte da parte nati da madri di F1. Assunzione di latte totale per la prole di dighe F1 (cucciolate di 8-10 cuccioli) in un intervallo di cura due ore è stato ridotto nei giorni 2 e 16 della lattazione. * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig8.jpg" alt="Figura 8" /> Figura 8. Cronica precoce stress sociale vita induce assunzione saccarina diminuito nei giorni di lattazione 2 e 16. Quindici giorni di stress sociale, diminuisce l&#39;apporto percentuale di saccarina relativa all&#39;acqua per un periodo di 17 ore. * Indica una differenza significativa tra il controllo e lo stressgruppi, p &lt;0.05, n = di 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig9.jpg" alt="Figura 9" /> Figura 9. Cronico primi anni di vita stress sociale diminuisce l&#39;espressione di mRNA ossitocina nel nucleo supraoptic. Femmina adulta nati da madri esposte a stress sociale cronico hanno attenuato centrale attività ossitocina, che è associato con l&#39;efficienza di cura è diminuito (Murgatroyd e nipote, 2012). I livelli di espressione di mRNA OXT sono stati normalizzati contro tre geni housekeeping combinati, b-actina, ipoxantina fosforibosiltransferasi (HPRT) e gliceraldeide-3-fosfato deidrogenasi (GAPDH). * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, di n = 16-18.

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Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Questo articolo descrive l&#39;uso dei residenti intruso stress sociale cronico come un paradigma etologicamente rilevanti per modello post-partum la depressione e l&#39;ansia in lattazione roditori.

Utilizzando cronica stress sociale a modello depressione post-partum in lattazione Roditore

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

24.5K Views.  Tufts University Cummings School of Veterinary Medicine. Questo articolo descrive l'uso dei residenti intruso stress sociale cronico come un paradigma etologicamente rilevanti per modello post-partum la depressione e l'ansia in lattazione roditori.

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A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of depression is essential. Because there are several types of depression, various animal models are needed for a deeper understanding of the disorder. Previously, a mouse model of subchronic and mild social defeat stress (sCSDS) using a modified chronic social defeat stress (CSDS) paradigm was established. In the paradigm, to reduce physical injuries from aggressors, the duration of physical contact between the aggressor and a subordinate was reduced compared to in the original CSDS paradigm. sCSDS mice showed increased body weight gain, food intake, and water intake during the stress period, and their social behaviors were suppressed after the stress period. In terms of the face validity of the stress-induced overeating and overdrinking following the increased body weight gain, the sCSDS mice may show some features related to atypical depression in humans. Thus, a mouse model of sCSDS may be useful for studying the pathogenic mechanisms underlying depression. This protocol will help establish the sCSDS mouse model, especially for studying the mechanisms underlying stress-induced weight gain and polydipsia- and hyperphagia-like symptoms.

Here, methods for developing a mouse model of subchronic and mild social defeat stress are described and used to investigate the pathogenic features of depression including hyperphagia- and polydipsia-like symptoms following increased body weight.

Un modello murino di subcronica e Mild Sconfitta sociale stress per la comprensione deficit comportamentali e fisiologiche allo stress indotto

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

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Comportamento

Quantifying Social Motivation in Mice Using Operant Conditioning

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered shuttle boxes were equipped with two operant levers (left and right) and a food receptacle in one chamber, which was then divided from the second chamber by an automated guillotine door covered by a wire grid. Different stimulus mice, rotated across testing days, served as a social stimulus behind the wire grid, and were only visible following the opening of the guillotine door. Test mice were trained to lever press in order to open the door and gain access to the stimulus partner for 15 sec. The number of lever presses required to obtain the social reward progressively increased on a fixed schedule of 3. Testing sessions ended after test mice stopped lever pressing for 5 consecutive minutes. The last reinforced ratio or breakpoint can be used as a quantitative measure of social motivation. For the second paradigm, test mice were trained to discriminate between left and right lever presses in order to obtain either a food reward or the social reward. Mice were rewarded for every 3 presses of each respective lever. The number of food and social rewards can be compared as a measurement of the value placed upon each reward. The ratio of each reward type can also be compared between mouse strains and the change in this ratio can be monitored within testing sessions to measure satiation with a given reward type. Both of these operant conditioning paradigms are highly useful for the quantification of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

This article describes a new protocol for the quantitative measurement of social motivation in mice using operant conditioning for a social reward. The protocol is useful for the measurement of social motivation in mouse models of autism and other disorders of social behavior.

Quantificare motivazione sociale nei topi mediante condizionamento operante

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered ...

The Social Dimension of Stress: Experimental Manipulations of Social Support and Social Identity in the Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations supportive behavior of other people as well as positive social relationships can act as powerful resources to cope with stress. In order to study the interplay between these variables, this protocol describes two effective experimental manipulations of social relationships and supportive behavior in the laboratory. In the present article, these two manipulations are implemented in the Trier Social Stress Test (TSST)&#8212;a standard stress induction paradigm in which participants are subjected to a simulated job interview. More precisely, we propose (a) a manipulation of the relationship between different protagonists in the TSST by making a shared social identity salient and (b) a manipulation of the behavior of the TSST-selection committee, which acts either supportively or unsupportively. These two experimental manipulations are designed in a modular fashion and can be applied independently of each other but can also be combined. Moreover, these two manipulations can also be integrated into other stress protocols and into other standardized social interactions such as trust games, negotiation tasks, or other group tasks.

Previous research on the social dimension of stress has focused on two important variables: social identity and social support. This protocol introduces an effective experimental manipulation of these two social variables and describes their implementation in a standard stress induction paradigm (Trier Social Stress Test).

La dimensione sociale dello stress: manipolazioni sperimentali di sostegno sociale e identità sociale nella Trier Social Stress Test

In many situations humans are influenced by the behavior of other people and their relationships with them. For example, in stressful situations ...

An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression have been reported, the unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol is an established translationally-relevant model for inducing behavioral symptoms commonly associated with clinical depression, such as anhedonia, altered grooming behavior, and learned helplessness in rodents. The UCMS protocol also induces physiological (e.g., hypercortisolemia, hypertension) and neurological (e.g., anhedonia, learned helplessness) changes that are clinically associated with depression. Importantly, UCMS-induced depressive symptoms can be ameliorated through chronic, but not acute, treatment with common SSRIs. As such, the UCMS protocol offers many advantages over acute stress protocols or protocols that utilize more extreme stressors. Our protocol involves randomized, daily exposures to 7 distinct stressors: damp bedding, removal of bedding, cage tilt, alteration of light/dark cycles, social stresses, shallow water bath, and predator sounds/smells. By subjecting rodents 3-4 hr daily to these mild stressors for 8 weeks, we demonstrate both significant behavioral changes and poor health outcomes to the cardiovascular system. This approach allows for in-depth interrogation of the neurological, behavioral, and physiological alterations associated with chronic stress-induced depression, as well as for testing of new potential therapeutic agents or intervention strategies.

The unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol is a validated method for studying behavioral and physiological changes associated with chronic stress and depressive symptoms. Eight weeks of imposition of the UCMS protocol induces behavioral changes and poor health outcomes in rodents of either gender.

Un Imprevedibile cronica protocollo stress lieve per i sintomi depressivi Istigazione, cambiamenti comportamentali e negativi risultati di salute in Roditore

Chronic, unresolved stress is a major risk factor for the development of clinical depression. While many preclinical models of stress-induced depression ...

Examining Recall Memory in Infancy and Early Childhood Using the Elicited Imitation Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is commonly assessed using verbal report paradigms in adults, studying the development of this ability in preverbal infants and children proved challenging. Over the past 30 years, researchers have developed a non-verbal means of assessing recall memory known as the elicited or deferred imitation paradigm. In one variant of the procedure, participants are presented with novel three-dimensional stimuli for a brief baseline period before a researcher demonstrates a series of actions that culminate in an end- or goal-state. The participant is allowed to imitate the demonstrated actions immediately, after a delay, or both. Recall performance is then compared to baseline or to performance on novel control sequences presented at the same session; memory can be assessed for the individual target actions and the order in which they were completed. This procedure is an accepted analogue to the verbal report techniques used with adults, and it has served to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood. In addition, the elicited or deferred imitation procedure has been modified and adapted to answer questions relevant to other aspects of cognitive functioning. The broad utility and application of imitation paradigms is discussed, along with limitations of the approach and directions for future research.

The elicited imitation procedure was established to examine the development of recall memory in infancy and early childhood. This procedure has been widely used to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood.

Esaminando Richiamo Memoria in prima e seconda infanzia Utilizzando il suscitato imitazione Paradigma

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by many patients prompts the need to develop new therapeutic alternatives and to better understand the etiology of the disorder. Pre-clinical models with translational merits are rudimentary for this task. Here we present a protocol for the unpredictable chronic mild stress (UCMS) method in mice. In this protocol, adolescent mice are chronically exposed to interchanging unpredictable mild stressors. Resembling the pathogenesis of depression in humans, stress exposure during the sensitive period of mice adolescence instigates a depressive-like phenotype evident in adulthood. UCMS can be used for screenings of antidepressants on the variety of depressive-like behaviors and neuromolecular indices. Among the more prominent tests to assess depressive-like behavior in rodents is the sucrose preference test (SPT), which reflects anhedonia (core symptom of depression). The SPT will also be presented in this protocol. The ability of UCMS to induce anhedonia, instigate long-term behavioral deficits and enable reversal of these deficits via chronic (but not acute) treatment with antidepressants strengthens the protocol&#39;s validity compared to other animal protocols for inducing depressive-like behaviors.

Here we present the unpredictable chronic mild stress protocol in mice. This protocol induces a long-term depressive-like phenotype and enables to assess the efficacy of putative antidepressants in reversing the behavioral and neuromolecular depressive-like deficits.

Il protocollo di sforzo delicato cronico imprevedibile per indurre anedonia in topi

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Enactive Phenomenological Approach to the Trier Social Stress Test: A Mixed Methods Point of View

The single Trier Social Stress Test (TSST) and the TSST for groups (TSST-G) are the most used protocols to experimentally induce psychosocial stress. These tests are based on uncontrollability and social-evaluative threat, inducing psychological and physiological consequences (e.g., anxiety, emotional states, salivary cortisol increases). Many quantitative experimental studies have investigated these stress inducers and these consequences. But, as far as we know, this study is the first to provide a qualitative analysis to access the participants' voices so as to understand the dynamics of their experience throughout the TSST and the TSST-G. This paper outlines a mixed methods approach to the TSST. This approach can help to maximize the information that can be gained from the TSST, which researchers often use without looking more closely at what is qualitatively happening psychologically for participants during the stressor itself. In this way, this protocol is an example of mixed methods, showing the added value of using the enactive phenomenological approach to analyze experimental protocols more deeply. This kind of mixed methods is helpful to access the experience, to understand the actor's point of view, and to analyze in-depth the dynamics of cognitive processes like intentions, perceptions, enacted knowledge, and emotion. The discussion section shows the different uses of a mixed methods protocol, exploiting the enactive phenomenological approach to analyze a protocol or to give a cross vision of the same research subject. This section deals with different existing applications, pointing out some critical steps in this mixed methods approach.

Here, we present an original mixed method combining a quantitative and a qualitative approach to examine accurately participants&#39; experiences during the Trier Social Stress Test and the Trier Social Stress Test for groups.

Approccio fenomenologico enattive per la prova di sforzo sociale di Treviri: un punto di vista metodi misti

The single Trier Social Stress Test (TSST) and the TSST for groups (TSST-G) are the most used protocols to experimentally induce psychosocial stress. ...

Using Facial Electromyography to Assess Facial Muscle Reactions to Experienced and Observed Affective Touch in Humans

"Affective" touch is believed to be processed in a manner distinct from discriminatory touch and to involve activation of C-tactile (CT) afferent fibers. Touch that optimally activates CT fibers is consistently rated as hedonically pleasant. Patient groups with impaired social-emotional functioning also show disordered affective touch ratings. However, relying on self-reported ratings of touch has many limitations, including recall bias and communication barriers. Here, we describe a methodological approach to study affective responses to touch via facial electromyography (EMG) that circumvents the reliance on self-report ratings. Facial EMG is an objective, quantitative, and non-invasive method to measure facial muscle activity indicative of affective responses. Responses can be assessed across healthy and patient populations without the need for verbal communication. Here, we provide two separate datasets demonstrating that CT-optimal and non-optimal touch elicit distinct facial muscle reactions. Moreover, facial EMG responses are consistent across stimulus modalities, e.g. tactile (experienced touch) and visual (observed touch). Finally, the temporal resolution of facial EMG can detect responses on timescales that supersede that of verbal reporting. Together, our data suggest that facial EMG is a suitable methodology for use in affective tactile research that can be used to supplement, or in some cases, supplant, existing measures.

We describe a protocol to assess facial muscle activity in response to experienced and observed tactile stimulation using facial electromyography.

Usando l'elettromiografia facciale per valutare le reazioni del muscolo facciale tatto affettiva esperto e osservati in esseri umani

"Affective" touch is believed to be processed in a manner distinct from discriminatory touch and to involve activation of C-tactile (CT) afferent fibers. ...

A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, therapeutic treatments for depression or research on depression is scarce. Thus, in the present paper, we propose a mouse model of depression induced by movement restriction. Chronic mild stress (CMS) is a well-known technique to induce depressive-like behavior. However, it necessitates a complex procedure consisting of a combination of various mild stresses. In contrast, chronic immobilization stress (CIS) is a readily accessible chronic stress model, modified from a restraint model that induces depressive behavior by restricting movement using a restrainer for a certain period. To evaluate the depressive-like behaviors, the sucrose preference test (SPT), the tail suspension test (TST), and the ELISA assay to measure stress marker corticosterone levels are combined in the present experiment. The described protocols illustrate the induction of CIS and evaluation of the changes in behavior and physiological factors for the validation of depression.

This article provides a simplified and standardized protocol for induction of depressive-like behavior in chronically immobilized mice by using a restrainer. In addition, behavior and physiological techniques to verify induction of depression are explained.

Un protocollo di stress cronico per indurre comportamenti simili alla depressione nei topi

Depression is not yet fully understood, but various causative factors have been reported. Recently, the prevalence of depression has increased. However, ...

A System for Tracking the Dynamics of Social Preference Behavior in Small Rodents

Exploring the neurobiological mechanisms of social behavior requires behavioral tests that can be applied to animal models in an unbiased and observer-independent manner. Since the beginning of the millennium, the three-chamber test has been widely used as a standard paradigm to evaluate sociability (social preference) and social novelty preference in small rodents. However, this test suffers from multiple limitations, including its dependence on spatial navigation and negligence of behavioral dynamics. Presented and validated here is a novel experimental system that offers an alternative to the three-chamber test, while also solving some of its caveats. The system requires a simple and affordable experimental apparatus and publicly available open-source analysis system, which automatically measures and analyzes multiple behavioral parameters at individual and population levels. It allows detailed analysis of the behavioral dynamics of small rodents during any social discrimination test. We demonstrate the efficiency of the system in analyzing the dynamics of social behavior during the social preference and social novelty preference tests as performed by adult male mice and rats. Moreover, we validate the ability of the system to reveal modified dynamics of social behavior in rodents following manipulations such as whisker trimming. Thus, the system allows for rigorous investigation of social behavior and dynamics in small rodent models and supports more accurate comparisons between strains, conditions, and treatments.

Described here is a novel automated experimental system that offers an alternative to the three-chamber test and also solves several caveats. This system supplies multiple behavioral parameters that enable rigorous analysis of small rodent behavioral dynamics during the social preference and social novelty preference tests.