Gli autori vorrebbero riconoscere il sostegno della Australian National Salute e Medical Research Council e Deakin University. Il lavoro svolto presso il laboratorio sensoriale Deakin University è stato sostenuto dal National Health e il Medical Research Council di Grant (1043780) (RSJK) e Orticoltura Australia Limited (BS12006) (RSJK).

Le seguenti tecniche sono stati approvati per l&#39;uso da parte Human Research Comitato Etico Deakin University. 1. Demografia e Antropometria <ol><li> Informazioni demografiche Record di partecipanti, tra cui la data di nascita e sesso. </li><li> Al basale (e di altri studi punti se disegno dello studio temporale) prendere in altezza e in peso. Assicurarsi che i partecipanti hanno tolto le scarpe, giacche pesanti o altri capi di abbigliamento, e hanno rimosso tutti gli elementi pesanti dalle loro tasche. <ol><li> Misurare l&#39;altezza del partecipante con un stadiometro. Le misurazioni a cm più vicino Record. </li><li> Pesare i partecipanti usando le scale dedicati. Registrare il peso con l&#39;approssimazione di g. </li><li> Calcolare il BMI utilizzando l&#39;equazione: peso (kg) / altezza 2 (m 2). Da questo, i partecipanti sono classificati in base ai valori di BMI definizione standard; sano 18,5-25 kg / m 2, il sovrappeso 25-30 kg / m 2 o obesi &amp; #62; 30 kg / m 2 27. </li></ol></li></ol> I campioni 2. Produzione di Oral Fatty Acid soglia di valutazione <ol><li> Utilizzare non grasso del latte UHT come base per la valutazione degli acidi grassi soglia gustativa. Il prodotto può essere acquistato e conservato in massa, se necessario, e non mancherà di tenere aperto fino a 6 mesi o fino a quando il prodotto ha raggiunto la sua scadenza. Preparare due tipi di veicoli: veicoli con acido grasso aggiunto e un controllo del veicolo. Il volume delle soluzioni preparate per il test dipenderà numero partecipante. Il seguente protocollo prevede importi tipici per 2 partecipanti. </li><li> Preparare una soluzione di latte di base da utilizzare sia per il controllo e grassi veicolo acido posizionando 5% w: v commestibile gomma arabica (ad esempio, 100 g per 2 L di latte) in un becher da 3 L vetro. Se necessario, gomma idrato prima dell&#39;uso (questo può variare a seconda del produttore gomma). </li><li> Aggiungere 0,01% w: v EDTA alla gomma per prevenire l&#39;ossidazione (ad esempio, 200 mg per 2 L di latte). </li><li> Allocare circa 1 L di latte non grasso per partecipante (ad es., Per 2 partecipanti, utilizzare 2 L latte) e versare nel bicchiere. </li><li> Utilizzando un miscelatore da laboratorio con schermo emulsor, omogeneizzare la soluzione a 12.000 rpm per 2 min. Impostare soluzione da parte. </li><li> Preparare soluzioni di acido grasso utilizzando commestibile C18: 1. L&#39;ossidazione può essere valutata mediante gascromatografia se necessario. </li><li> Preparare una serie di 13 varianti del veicolo acidi grassi (non grassi del latte UHT), con concentrazioni crescenti di C18: 1 (0.02, 0.06, 1, 1.4, 2, 2.8, 3.8, 5, 6.4, 8, 9.8, 12, e 20 mM / L). Per fare questo, l&#39;etichetta da 250 ml bicchieri di vetro con ciascuna concentrazione. </li><li> Aggiungere 5% paraffina liquida a ciascun becher (ad esempio, 5 ml di paraffina per 100 ml di soluzione di latte). </li><li> Sulla base C18: 1 concentrazione, aggiungere la giusta quantità di C18: 1 per ciascun becher (vedi Tabella 1). </li></ol><table border="1" cellpadding="0" cellspacing="0"&gt; <tbody><tr><td> C18: 1 concentrazione (mM) </td><td> ml / 100 ml </td></tr><tr><td> 0.02 </td><td> 0.56 </td></tr><tr><td> 0.06 </td><td> 1.9 </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 31.5 </td></tr><tr><td> 1.4 </td><td> 44.1 </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 63.1 </td></tr><tr><td> 2.8 </td><td> 88.4 </td></tr><tr><td> 3.8 </td><td> 119.9 </td></tr><tr><td> 5 </td><td> 157,8 </td></tr><tr><td> 6.4 </td><td> 202 </td></tr><tr><td> 8 </td><td> 250 </td></tr><tr><td> 9.8 </td><td> 309 </td></tr><tr><td> 12 </td><td> 380 </td></tr><tr><td> 20 </td><td> 631,2 </td></tr></tbody></table> . Tabella 1 Esempio C18: 1 concentrazione per 100 ml di soluzione crescente concentrazione (ml / L) di C18: 1. Vengono utilizzati per preparare la serie di 13 emulsioni di acidi grassi orale threshold test. <ol start="10"><li> Dopo l&#39;uso, riempire la C18: 1 contenitore con N 2 per ridurre al minimo l&#39;ossidazione e conservare sotto i 4 ° C. </li><li> Aggiungere la soluzione di latte base per ciascun becher acido grasso ad un volume totale di 100 ml. Mettere da parte. </li><li> Utilizzando la soluzione di base restante, preparare il controllo del veicolo. In un becher di vetro 2 L, aggiungere 5% del volume rimanente in paraffina liquida (ad esempio, 35 ml di paraffina liquida in un volume finale di 750 ml) insieme con la soluzione di base rimasto e omogeneizzare per 30 sec per 100 ml di liquido. </li><li> Omogeneizzare il veicolo di controllo per 30 sec per 100 ml. Questo passo viene effettuato prima che le soluzioni di acidi grassi per prevenire la contaminazione con C18: 1. </li><li> Omogeneizzare ogni veicolo acido grasso, che inizia con la più bassa concentrazione per 30 sec per 100 ml. </li><li> Sterilizzare l&#39;omogeneizzatore sia prima e dopo il test. </li><li> Poiché il processo di omogeneizzazione può aumentare la temperatura del solutions, controllare la temperatura di controllo e di C18: 1 campioni con un termometro. Servire tutti i campioni a temperatura ambiente (20 ° C). </li><li> I campioni di latte devono essere preparate al momento lo stesso giorno come test. Taste ogni soluzione prima del test per valutare la freschezza e l&#39;idoneità. Nota: a seconda del volume richiesto, preparazione della soluzione avrà un minimo di 60 min. </li></ol> 3. Orale test di soglia Fatty Acid <ol><li> Assicurarsi che i partecipanti si sono astenuti dal mangiare o bere (inclusi caffè, gomma, colluttorio, ecc) per almeno 1 ora prima del test. </li><li> Ridurre al minimo segnali non gusto effettuando test in condizioni di illuminazione rossa con i partecipanti di indossare clips naso. </li><li> Utilizzare la procedura forzata triangolo ascendente scelta per determinare le soglie di acidi grassi orali. Etichettare 30 ml tazze parte in plastica con un numero di identificazione di tre cifre. Ciascun partecipante un set di tre soluzioni da 20 ml in ordine casuale; due veicoli di controllo e un aci grassid veicolo con la più bassa concentrazione di C18: 1 (0.02 mM). </li><li> Per determinare la soglia di acido grasso orale di un partecipante, chiedere ai partecipanti di degustare ogni soluzione da sinistra a destra ed espettorare in un lavandino. Chiedere ai partecipanti di non ingoiare i campioni. </li><li> Chiedere al partecipante di individuare quale dei tre campioni è &#39;strano&#39; o &#39;diverso&#39; e se non sono sicuri, devono indovinare (scelta obbligata). </li><li> Chiedete ai partecipanti sciacquare la bocca con acqua deionizzata dopo ogni serie di campioni. </li><li> Se correttamente identificato, fornire il partecipante con una seconda serie di 3 soluzioni (2 controllo e soluzione 1 acido grasso in ordine casuale) con la stessa concentrazione di acido grasso. Se identificato erroneamente, fornire il partecipante con una seconda serie di 3 soluzioni, ma con la successiva più alta concentrazione di C18: 1 (0.06 mM). </li><li> Continuare questa procedura fino a quando il partecipante è in grado di identificare correttamente le &quot;dispari&quot; 3x campione inuna riga alla stessa concentrazione. La concentrazione alla quale sono in grado di identificare correttamente il campione di &#39;strano&#39; viene registrata come i partecipanti C18: 1 soglia di rilevamento. Vedere la Figura 1 per una rappresentazione grafica di questo processo. </li><li> Sulla base di soglia di rilevamento, caratterizzare partecipanti ipersensibili, o iposensibile di C18: 1. In linea con la letteratura precedente, gli individui ipersensibili possono rilevare C18: 1 a concentrazioni &lt;3,8 mm, mentre gli individui iposensibile richiedono concentrazione&gt; 3,8 mm. Nota: A seconda del numero di risposte errate, il collaudo può prendere tra 10-30 minuti per completare. </li></ol><img alt="Figura 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig1.jpg" /> Figura 1. Crescente scelta forzata procedura triangolo utilizzato per determinare il rilevamento di acidi grassi t. hresholds partecipanti vengono forniti con tre soluzioni (due soluzioni di controllo e una C18: 1 soluzione ad una data concentrazione) e ha chiesto di identificare il &#39;campione di strano&#39;. Se corretto, partecipanti viene dato un secondo insieme di campioni con lo stesso C18: 1 concentrazione. Se non corretto, il partecipante viene fornito con un altro set di campioni con una maggiore concentrazione di C18: 1. Questa procedura continua fino a tre soluzioni &quot;dispari&quot; sono identificati correttamente ad una data concentrazione. Questo punto è ritenuto &quot;acido grasso soglia di rilevamento &#39;degli individui. 4. Fat Classifica Task Questa attività coinvolge partecipanti degustazione di quattro campioni di crema pasticcera istantanea, ognuno con differenti contenuti di grassi (0, 2, 6, e 10%) e li classifica in ordine di concentrazione di grasso ascendente percepito. <ol><li> Preparare 1 lotto di crema pasticcera utilizzando non grassa crema alla vaniglia istantanea in polvere secondo le istruzioni del pacchetto. Mescolare due cucchiai di crema pasticcera powder, 1 cucchiaio di zucchero e 2 tazze non grasse del latte in una ciotola per microonde. Se il prodotto proposto non è disponibile, questo può essere sostituito con un non-grasso prodotto solubile simili (per esempio, cucinare e servire crema). </li><li> Utilizzando ad alta potenza, riscaldare la miscela utilizzando un 1.400 W microonde ad intervalli di 30 secondi per un totale di circa 5 minuti, o fino a spessore. Questo può variare a seconda della marca di crema pasticcera e la potenza del forno a microonde utilizzato. Lasciare crema si raffreddi. </li><li> Etichettare quattro ciotole da cucina da 500 ml (o simili) con percentuali di grasso. </li><li> Dividete la crema in 4 distinti da 100 g lotti. </li><li> Aggiungere 0, 2, 6, e 10% di olio vegetale per ogni vasca per ottenere il tenore di grasso desiderato (ad esempio, in un lotto di 100 g, aggiungere 0 ml, 2 ml, 6 ml, e 10 ml di olio vegetale per ottenere rispettive percentuali di grasso ) e combinare. Mescolare bene ciascun campione per garantire che tutti gli ingredienti sono completamente amalgamati. </li><li> Etichettare quattro da 30 ml bicchieri di porzioni di plastica con thre randomizzatoNumeri e cifre. Riempire le tazze porzione di 20 g di ogni crema pasticcera (1 tipo di crema per tazza). </li><li> Refrigerare i campioni prima del test e servire freddo (4 ° C). </li><li> Eseguire il test sotto luci rosse per ridurre al minimo segnali visivi. </li><li> Hanno partecipanti gusto, inghiottire e classificare i 4 creme da percepita basso al più alto contenuto di grassi e ricevere un punteggio di 5 a seconda delle loro risposte. </li><li> Il punteggio per questa attività è riportata nella tabella 2. Nota: tempo di preparazione approssimativa per i campioni crema è di 30 min. Il compito classifica grasso non dovrebbe richiedere più di 10 minuti per completare. </li></ol><table align="left" border="1" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Ordine di Classifica </td><td> Punteggio </td></tr><tr><td> 0, 2, 6, 10 </td><td> 5 </td></tr><tr><td> 2, 0, 6, 10 </td><td> 4 </td></tr><tr><td> 0, 2, 10, 6 </td><td> 3 </td></tr><tr><td> 0, 6, 2, 10 </td><td> 2 </td></tr><tr><td> 1, 6, 10, 2 </td><td> 1 </td></tr><tr><td> 6, 0, 2, 10 </td><td> 1 </td></tr><tr><td> 2, 10, 6, 0 </td><td> 1 </td></tr><tr><td> 2, 6, 0, 10 </td><td> 0 </td></tr><tr><td> 6, 2, 10, 0 </td><td> 0 </td></tr><tr><td> 0, 10, 2, 6 </td><td> 0 </td></tr></tbody></table> Classifica Tabella 2. Fat compito competenza. Partecipanti sono date 4 campioni di crema pasticcera con 0, 2, 6, o 10% di grassi aggiunti. I partecipanti sono invitati a classificare i campioni dal più basso al più alto contenuto di grassi e punteggio da 0 a 5 punti (5 è il massimo). 5. Fatty Cibo Simpatia <ol><li> Preparare piccoli campioni (5-20 g) di entrambe le opzioni regolari e basso contenuto di grassi degli alimenti disponibili in commercio. Gli alimenti sono versioni normali e basso contenuto di grassi di: crema di formaggio (servita su un cracker), mousse al cioccolato, formaggio, biscotti secchi, dip burro di arachidi servita su un pezzo di carota, maionese, insalata dressing (servita su una fetta di cetriolo), e yogurt. </li><li> Etichettare ogni campione con un numero casuale a tre cifre per l&#39;identificazione. </li><li> Campioni presenti in un ordine casuale per prevenire gli effetti di ordine. </li><li> Istruire i partecipanti di degustare ogni campione singolarmente. Prodotti alimentari sono ingeriti, ma i partecipanti possono mangiare tanto o poco di ogni campione come desiderano. </li><li> Sono i partecipanti votare quanto a loro piace o non piace ogni campione. Misurare piacimento utilizzando una edonistico scala di magnitudo generalizzato di 100 mm (MLG, vedi figura 2), che vanno dal più forte antipatia immaginabile per forte che si possa immaginare come. Record piacimento inserendo una linea verticale nel punto che rappresenta i partecipanti come o antipatia del cibo. </li></ol><img alt="Figura 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig2.jpg" /> Figura 2. GlmS edonici.I glmS edonistici 30,31 utilizzati per valutare gradimento dei cibi disponibili in commercio sia regolare e basso contenuto di grassi. I partecipanti gusto e valutano ogni campione e posizionare una linea verticale al punto che meglio rappresenta i loro simili, o antipatia del campione. <ol start="6"><li> Gli ingressi non-gustative non sono minimizzati per questo compito, quindi portare questo compito sotto luce normale e non hanno partecipanti indossano clip naso. </li></ol> 6. Tongue Fotografia <ol><li> Impostare una macchina fotografica e treppiede per la fotografia. Illuminazione interna regolare è sufficiente. </li><li> Impostare la fotocamera in modalità macro (o simile) per chiudere la fotografia. </li><li> Utilizzare un pugno buco per creare un cerchio del diametro di 6 mm su un 1,5 centimetri x 1,5 centimetri (o simili) quadrato di carta da filtro. Etichettare il foglio con il numero di identificazione del partecipante. </li><li> In un becher da 50 ml, combinare colorante alimentare blu con acqua deionizzata ad un rapporto di 1:20. Una piccola quantità è necessaria per partecipante. </li><li> Versare 30 ml food grade etanolo in un bicchiere da 50 ml per pinzette sterilizzazione. </li><li> Utilizzando nastro adesivo, contrassegnare un rettangolo di cm 20 cm x 30 sul lato del tavolo test (questo dovrebbe essere altezza normale scrivania), come mostrato nella figura 3a. </li></ol><img alt="Figura 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig3.jpg" /> Figura 3. A) Tongue photography setup. Dimostrazione del setup tavolo richiesto prima lingua photography. B) Tongue photography. Dimostrazione del metodo di lingua photography <ol start="7"><li> Sono i partecipanti mettere i gomiti sugli angoli marcati del rettangolo, riposare il mento nelle loro mani e di sporgere comodamente la loro lingua, utilizzando le labbra per stabilizzare questa posizione (Figura 3b). Il partecipante deve rimanere in questa posizione per tutta la durata del testing. </li><li> Utilizzando una rettangolare (1,5 cm x 3 cm) striscia di carta filtro, brevemente asciugare la parte inferiore della lingua. </li><li> Immergere un batuffolo di cotone nella soluzione colorante alimentare / acqua e trasferire una piccola quantità di colorante sulla superficie dorsale anteriore della lingua, subito a destra del punto linea mediana e vicino alla punta (vedere Figura 4). Essiccare la lingua per una seconda volta con carta da filtro. </li><li> Etanolo secco pinzetta sterilizzata con carta assorbente e usando pinzette, posizionare il pre-etichettato 1,5 centimetri 2 carta filtro sulla lingua del partecipante, con il foro di 6 mm sopra il colorante alimentare blu (vedere Figura 4). </li><li> Usando il flash, scattare fotografie a tre digitali della lingua del partecipante. Per riservatezza, assicurano solo la bocca del partecipante e la lingua sono visibili. </li><li> Rimuovere la carta da filtro 1,5 centimetri 2 dalla lingua del partecipante con le pinzette che sono stati nuovamente sterilizzati in grado alimentare etanolo. Carica fotos ad un software di editing di foto e con la funzione di zoom, contare tutte visibili papille fungiformi. </li><li> Differenziare papille fungiformi da altri papille come grande forma di fungo, strutture in elevazione. Non prendono sulla soluzione colorante come fortemente, e come tali risultano molto più chiaro. Nota: Tongue fotografia non dovrebbe richiedere più di 10 minuti per completare. </li></ol><img alt="Figura 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig4.jpg" /> Figura 4. Quantificare fungiformi densità di papille. Ubicazione dell&#39;area di 6 mm per la valutazione papille fungiformi. Utilizzando il software di editing fotografia, i dati numerici indicano ogni papilla fungiformi.

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	<li>Bray, G. A., Paeratakul, S., Popkin, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fat+and+obesity:+a+review+of+animal,+clinical+and+epidemiological+studies.">Dietary fat and obesity: a review of animal, clinical and epidemiological studies.</a> Physiol Behav. 83, 549-555 (2004).</li><li>Shikany, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+Dietary+Fat+&#8220;Fattening&#8221;?+A+Comprehensive+Research+Synthesis.">Is Dietary Fat &#8220;Fattening&#8221;? A Comprehensive Research Synthesis.</a> Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 50, 699-715 (2010).</li><li>Maskarinec, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trends+and+Dietary+Determinants+of+Overweight+and+Obesity+in+a+Multiethnic+Population.">Trends and Dietary Determinants of Overweight and Obesity in a Multiethnic Population.</a> Obesity. 14, 717-726 (2006).</li><li>Bachmanov, A. A., Beauchamp, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taste+receptor+genes.">Taste receptor genes.</a> Annu Rev Nutr. 27, (2007).</li><li>Chandrashekar, J., Hoon, M. A., Ryba, N. J., Zuker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+receptors+and+cells+for+mammalian+taste.">The receptors and cells for mammalian taste.</a> Nature. 444, 288-294 (2006).</li><li>Chale-Rush, A., Burgess, J. R., Mattes, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+human+orosensory+(taste?)+sensitivity+to+free+fatty+acids.">Evidence for human orosensory (taste?) sensitivity to free fatty acids.</a> Chem Senses. 32, 423-431 (2007).</li><li>Mattes, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oral+detection+of+short-,+medium-,+and+long-chain+free+fatty+acids+in+humans.">Oral detection of short-, medium-, and long-chain free fatty acids in humans.</a> Chem Senses. 34, 145-150 (2009).</li><li>Mattes, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accumulating+evidence+supports+a+taste+component+for+free+fatty+acids+in+humans.">Accumulating evidence supports a taste component for free fatty acids in humans.</a> Physiol Behav. 104, 624-631 (2011).</li><li>Stewart, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oral+sensitivity+to+fatty+acids,+food+consumption+and+BMI+in+human+subjects.">Oral sensitivity to fatty acids, food consumption and BMI in human subjects.</a> B J Nutr. 104, 145 (2010).</li><li>Newman, L. P., Keast, R. S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+test-retest+reliability+of+fatty+acid+taste+thresholds.">The test-retest reliability of fatty acid taste thresholds.</a> Chemosens Percept. , (2013).</li><li>Tucker, R. M., Mattes, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influences+of+repeated+testing+on+nonesterified+Fatty+Acid+taste.">Influences of repeated testing on nonesterified Fatty Acid taste.</a> Chem Senses. 38, 325-332 (2013).</li><li>Mattes, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+there+a+fatty+acid+taste.">Is there a fatty acid taste.</a> Annu Rev Nutr. 29, 305-327 (2009).</li><li>Stewart, J. E., Newman, L. P., Keast, R. S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oral+sensitivity+to+oleic+acid+is+associated+with+fat+intake+and+body+mass+index.">Oral sensitivity to oleic acid is associated with fat intake and body mass index.</a> Clin Nutr. 30, 838-844 (2011).</li><li>Mattes, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oral+thresholds+and+suprathreshold+intensity+ratings+for+free+fatty+acids+on+3+tongue+sites+in+humans:+implications+for+transduction+mechanisms.">Oral thresholds and suprathreshold intensity ratings for free fatty acids on 3 tongue sites in humans: implications for transduction mechanisms.</a> Chem Senses. 34, 415-423 (2009).</li><li>Kamphuis, M. M., Saris, W. H., Westerterp-Plantenga, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+addition+of+linoleic+acid+on+food+intake+regulation+in+linoleic+acid+tasters+and+linoleic+acid+non-tasters.">The effect of addition of linoleic acid on food intake regulation in linoleic acid tasters and linoleic acid non-tasters.</a> Br J Nutr. 90, 199-206 (2003).</li><li>Stewart, J. E., Keast, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+fat+intake+modulates+fat+taste+sensitivity+in+lean+and+overweight+subjects.">Recent fat intake modulates fat taste sensitivity in lean and overweight subjects.</a> Int J Obes. , (2011).</li><li>Stewart, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marked+differences+in+gustatory+and+gastrointestinal+sensitivity+to+oleic+acid+between+lean+and+obese+men.">Marked differences in gustatory and gastrointestinal sensitivity to oleic acid between lean and obese men.</a> Am J Clin Nutr. 93, 703-711 (2011).</li><li>Stewart, J. E., Feinle-Bisset, C., Keast, R. S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid+detection+during+food+consumption+and+digestion:+Associations+with+ingestive+behavior+and+obesity.">Fatty acid detection during food consumption and digestion: Associations with ingestive behavior and obesity.</a> Prog Lipid Res. 50, 225-233 (2011).</li><li>Miller, I. J., Reedy, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+human+taste+bud+density+and+taste+intensity+perception.">Variations in human taste bud density and taste intensity perception.</a> Physiol Behav. 47, 1213-1219 (1990).</li><li>Delwiche, J. F., Buletic, Z., Breslin, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+of+papillae+number+to+bitter+intensity+of+quinine+and+PROP+within+and+between+individuals.">Relationship of papillae number to bitter intensity of quinine and PROP within and between individuals.</a> Physiol Behav. 74, 329-337 (2001).</li><li>Zhang, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+fungiform+papillae+density+and+detection+threshold+for+sucrose+in+the+young+males.">The relationship between fungiform papillae density and detection threshold for sucrose in the young males.</a> Chem Senses. 34, 93-99 (2009).</li><li>Doty, R. L., Bagla, R., Morgenson, M., Mirza, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NaCl+thresholds:+relationship+to+anterior+tongue+locus,+area+of+stimulation,+and+number+of+fungiform+papillae.">NaCl thresholds: relationship to anterior tongue locus, area of stimulation, and number of fungiform papillae.</a> Physiol Behav. 72, 373-378 (2001).</li><li>Hayes, J. E., Duffy, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revisiting+sugar-fat+mixtures:+sweetness+and+creaminess+vary+with+phenotypic+markers+of+oral+sensation.">Revisiting sugar-fat mixtures: sweetness and creaminess vary with phenotypic markers of oral sensation.</a> Chem Senses. 32, 225-236 (2007).</li><li>Tepper, B. J., Nurse, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fat+perception+is+related+to+PROP+taster+status.">Fat perception is related to PROP taster status.</a> Physiol Behav. 61, 949-954 (1997).</li><li>Tepper, B. J., Nurse, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PROP+taster+status+is+related+to+fat+perception+and+preference.">PROP taster status is related to fat perception and preference.</a> Ann N Y Acad Sci. 855, 802-804 (1998).</li><li>Shahbake, M., Hutchinson, I., Laing, D. G., Jinks, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+quantitative+assessment+of+fungiform+papillae+density+in+the+human+tongue.">Rapid quantitative assessment of fungiform papillae density in the human tongue.</a> Brain Res. 1052, 196-201 (2005).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+Database+on+Body+Mass+Index.+BMI+classification.">Global Database on Body Mass Index. BMI classification.</a> World Health Organisation. , (2006).</li><li>Astrup, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity+as+an+adaptation+to+a+high+fat+diet:+Evidence+from+a+cross+sectional+study.">Obesity as an adaptation to a high fat diet: Evidence from a cross sectional study.</a> Am J Clin Nutr. 59, 350-355 (1994).</li><li>Mattes, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fat+preference+and+adherence+to+a+reduced-fat+diet.">Fat preference and adherence to a reduced-fat diet.</a> Am J Clin Nutr. 57, 373-381 (1993).</li><li>Duffy, V. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+preference+questionnaire+as+a+screening+tool+for+assessing+dietary+risk+of+cardiovascular+disease+within+health+risk+appraisals.">Food preference questionnaire as a screening tool for assessing dietary risk of cardiovascular disease within health risk appraisals.</a> J Am Diet Assoc. 107, 237-245 (2007).</li><li>Duffy, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surveying+food/beverage+liking:+A+tool+for+epidemiological+studies+to+connect+chemosensation+with+health+outcomes.">Surveying food/beverage liking: A tool for epidemiological studies to connect chemosensation with health outcomes.</a> Ann NY Acad Sci. 1170, 558-568 (2009).</li><li>Running, C. A., Mattes, R. D., Tucker, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fat+taste+in+humans:+Sources+of+within-+and+between-subject+variability.">Fat taste in humans: Sources of within- and between-subject variability.</a> Prog Lipid Res. 52, 438-445 (2013).</li><li>Ralston, A. W., Hoerr, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+solubilities+of+the+normal+saturated+fatty+acids.">The solubilities of the normal saturated fatty acids.</a> J Org Chem. 7, 546-555 (1942).</li><li>Parodi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Milk+fat+in+human+nutrition.">Milk fat in human nutrition.</a> Australian Journal of Dairy Technology. 59, 3-59 (2004).</li><li>Pepino, M. Y., Love-Gregory, L., Klein, S., Abumrad, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+fatty+acid+translocase+gene+CD36+and+lingual+lipase+influence+oral+sensitivity+to+fat+in+obese+subjects.">The fatty acid translocase gene CD36 and lingual lipase influence oral sensitivity to fat in obese subjects.</a> J Lipid Res. 53, 561-566 (2012).</li><li>Lawless, H. T., Popper, R., Kroll, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+labeled+magnitude+(LAM)+scale,+an+11-point+category+scale+and+the+traditional+9-point+hedonic+scale.">A comparison of the labeled magnitude (LAM) scale, an 11-point category scale and the traditional 9-point hedonic scale.</a> Food Qual Prefer. 21, 4-12 (2010).</li><li>Bartoshuk, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hedonic+gLMS:+a+new+scale+that+permits+valid+hedonic+comparisons.">Hedonic gLMS: a new scale that permits valid hedonic comparisons.</a> , (2010).</li></ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Le tecniche descritte per la determinazione delle soglie orali acidi grassi, grassi alimentari, simpatia e la lingua densità di papille sono stati convalidati e utilizzato in un certo numero di lavori pubblicati negli ultimi anni e noi suggerire grassi orale di valutazione della soglia di acido, classifica il grasso compito e grassi alimentari simpatia essere eseguite in duplicato in ogni punto rilevante in uno studio. C&#39;è stata qualche discussione per quanto riguarda il metodo ottimale per valutare il rilevamento soglie 32. In particolare, la composizione di soluzioni utilizzate varia tra laboratori, come fa la metodologia stessa. In particolare, l&#39;acido grasso utilizzato in questo protocollo, C18: 1, crediamo è generalmente un rappresentante e facile da usare acido grasso, al contrario di altri acidi grassi, tra cui l&#39;acido linoleico (C18: 2) e acido laurico (C12: 0) , che sono stati utilizzati in precedenza 9. C18: 1 si trova comunemente nel settore alimentare e, a differenza C12: 0 è liquido a temperatura ambiente, ed è più resistente all&#39;ossidazione di C18: 2 9.C18: 1 è stato anche dimostrato di fornire dati affidabili attraverso più sessioni di test, ed è altamente correlato con C18: 2 e C12: 0 10. Inoltre, C18: 1 è stato esaminato ampiamente tutta la letteratura rilevante, ed è quindi più utile per i confronti. Un importante punto di differenza tra il protocollo descritto nel presente documento e le altre procedure utilizzate in altri laboratori sono i veicoli utilizzati per la presentazione di stimoli acidi grassi e l&#39;approccio sistematico con cui soglie di rilevamento sono determinati. Due importanti veicoli di acidi grassi utilizzati nella letteratura sono il latte non grassi 10,17 ed emulsioni acqua 6. Mentre entrambi hanno dimostrato l&#39;efficacia di acidi grassi determinazione della soglia, i partecipanti possono essere più propensi a identificare il sapore del grasso all&#39;interno del latte, cioè, è insolito per gustare gli acidi grassi in acqua, che può portare a livelli più bassi di validità esterna per gli studi che utilizzano una base di acqua. Non grassi del lattefornisce un veicolo per acido grasso chemorecezione, senza compromettere la validità. Sebbene questi due metodi sono ancora essere confrontato direttamente in letteratura, è noto che gli acidi grassi sono scarsamente solubili in acqua 33. Come risultato di solubilità in acidi grassi nelle soluzioni a base di latte, questa emulsione potrebbe sia essere mantenuto più lungo ed essere più omogenea rispetto alle soluzioni a base di acqua, anche se questo è ancora da confermare. Quando si implementa questa metodologia, è importante notare acidi grassi liberi possono essere naturalmente presente nel latte 34 e di conseguenza, il prodotto deve essere utilizzato ampiamente entro la scadenza di impedire l&#39;aumento di acidi grassi liberi (che si sviluppano con l&#39;età) e possibili interferenze con assaggiare le prestazioni soglia. Preparazione di successo delle soluzioni dipende da numerosi fattori. In primo luogo, l&#39;ordine in cui vengono aggiunti i &#39;ingredienti&#39; è un imperativo. Fasi di preparazione del veicolo devono seguire con attenzione quelle descritte in precedenza per garantire la corretta composizione di un veicolond un&#39;emulsione stabile. In secondo luogo, la temperatura deve essere controllata per. Ogni campione deve essere presentato ai partecipanti alla RT per garantire partecipanti non rilevano il &#39;campione&#39; strano &#39;dovuta a fattori diversi dal&#39; gusto &#39;. Infine, tutti i campioni devono essere omogeneizzati correttamente per il tempo indicativo di tempo. Mentre l&#39;emulsione di acidi grassi e latte senza grassi è più efficace se l&#39;acqua fosse utilizzato, vi è ancora la possibilità di separazione emulsione all&#39;interno del campione. Il metodo di prova specifico utilizzato in acidi grassi determinazione della soglia per via orale deve essere considerato. Due metodi sensoriali basati sono stati comunemente descritto in letteratura; uno è scelta obbligata la procedura triangolo ascendente e il supplente, il metodo di scala 35. La crescente scelta obbligata metodologia triangolo è adottata per la determinazione della soglia gusto e può essere considerato utile per diversi motivi, tra cui il fatto che, a differenza del metodo scala,il metodo ascendente inizia con la più bassa concentrazione di C18: 1 (0.02 mM) e aumenta fino a quando il partecipante è in grado di rilevare la presenza di acidi grassi in soluzione 9. Al contrario, il metodo scala comporta aumentando o diminuendo la concentrazione di acido grasso da un punto medio predeterminato 11. Tuttavia, a partire una determinazione di soglia in un punto sopra soglia può provocare una desensibilizzazione di risposta compromettono quelle capacità degustazione. Inoltre, il metodo ascendente ha una minore probabilità di casualità influenzare i risultati (3,7%) rispetto al metodo scale (11,1%) 11. Come tale, si consiglia la forzata metodo triangolo ascendente scelta, combinata con latte non grasso come un veicolo per la prova gusto sembra essere un mezzo efficace per determinare con precisione le soglie orali. Accettazione alimentare o simpatia test è una delle valutazioni più semplici effettuate nell&#39;ambito della ricerca sensoriale e come tale ci sono pochi problemi tcappello tendono a sorgere. Tuttavia, il tipo di scala gradimento utilizzato è un obiettivo importante. In questo caso, un glmS edonico è il più efficace, in quanto ha un buon potere discriminatorio ed è facile per i partecipanti di utilizzare 36. I punti finali dei glmS edonistici sono etichettati con &#39;forte antipatia che si possa immaginare&#39; i descrittori e &#39;immaginabile forte come&#39; ei partecipanti valutano simpatia nei confronti di tutte le esperienze edonistiche, non solo cibi 30,31. Questo è efficace nel controllo degli effetti prodotti dalle scale soffitto 9 punti di tensione, come tutte le esperienze vengono considerati e confrontati. Inoltre, i glmS edonistici è più in grado di dimostrare una maggiore varianza individuale, come la scala è più ampio 36. Cibo accettazione test stesso può essere limitata dai cibi presentati, in che abbiamo solo presenti due opzioni per ogni tipo di cibo. Ulteriori ricerche possono includere diverse altre marche o tipi di ogni alimento, ognuno con differenti contenuti di grassi, o prodotti forse specificamente realizzati dove il grassocontenuto può essere controllato ed è l&#39;unica variabile. È importante notare che l&#39;interpretazione di tutti i dati deve essere fatto con cautela. Mentre un potenziale legame tra gusti, preferenze e l&#39;assunzione è plausibile e intrigante, i risultati vengono generati in un ambiente di laboratorio e ci possono essere limiti alla applicabilità di questi risultati a situazioni del mondo reale. Valutare densità di papille della lingua attraverso la fotografia è un processo più difficile, con misure specifiche che devono essere prese al fine di produrre risultati adeguati e applicabili. In particolare, è importante identificare il tipo papille corretto. Tre tipi di papille gustative sono visibili sulla lingua umana; fungiformi, foliate e circumvallate 4. Papille fungiformi può comunque essere facilmente distinta come strutture a forma di fungo 26, e sono in genere le papille che sono registrati nel corso delle valutazioni di sensibilità. Papille fungiformi tendono a variare in concentrazione 5-60a 6 mm Area 37 (a seconda della sensibilità), anche se ci sono stati studi che indicano che alcuni individui possono avere verso l&#39;alto di 230 papille stessa area 21. Il tipo di macchina utilizzata è fondamentale per ottenere risultati adeguati e può spiegare questa variabilità. Prima l&#39;uso della fotografia digitale in questo settore, videomicroscopia era il gold standard per l&#39;identificazione e la registrazione della densità papille. Tuttavia, è stato determinato che lo stesso livello di identificazione è possibile utilizzando una fotocamera digitale appropriato 26. Inoltre, la fotografia digitale richiede solo alcuni minuti, dove videomicroscopia può richiedere fino a un&#39;ora 26. Non solo, ma la fotografia digitale ha il potenziale di essere molto meno costoso, e più portatile, che può essere utile per l&#39;uso con vari gruppi partecipanti 26. Infine, mentre ci proponiamo di misurare la densità di papille fungiformi per le associazioni con rilevamento di acidi grassi orale, ti consigliamo anche soglie gustative per tlui cinque sapori prototipi essere eseguite anche in parallelo. Dato legame precedente con densità papille e la funzione del gusto, questo potrebbe servire come un ulteriore &#39;controlla misura&#39; che può aggiungere l&#39;integrità dei dati, soprattutto in considerazione questa è una nuova area di ricerca. L&#39;area di ricerca chemorecezione orale, in particolare per quanto riguarda gli acidi grassi, è un emergente, e come tale è importante per tutte le ricerche da eseguire ad un alto livello, preferibilmente con l&#39;uso di protocolli coerenti per consentire confronti diretti.

Eccessivo consumo di grassi alimentari è un potenziale collaboratore di aumento di peso 1-3 e l&#39;obesità è diventata una moderna epidemia globale. La ricerca suggerisce alti livelli di assunzione di grassi, in particolare come parte di una dieta ad libitum, può essere associato con un BMI superiore a 2,3, ma i fattori che influenzano il consumo di grassi alimentari e le preferenze sono tutt&#39;altro che chiare. Ricerca di meccanismi che sottendono il consumo di grassi è quindi un obiettivo ovvio e di particolare interesse è un meccanismo orale responsabili per la rilevazione di grassi, comunemente definito &#39;il gusto acido grasso&#39; 2. Dal punto di vista evolutivo, il sistema del gusto presumibilmente servito da un gatekeeper del sistema digestivo, guidando il consumo di energia nutrienti densi e allontanamento di composti potenzialmente tossici 4. Il senso del gusto è suscitato attraverso le cellule recettori gusto specializzate che sono distribuiti nei tre tipi di linguapapille; fungiformi, foliate, papille e circumvallate, ognuno dei quali può contenere fino a diverse centinaia di papille gustative 5. Oltre ai ampiamente accettata cinque sapori prototipo (dolce, salato, acido, amaro e umami), non è del tutto sorprendente che vi è stato il suggerimento di un meccanismo orale per il rilevamento di acidi loro prodotti di degradazione grassi grasso, o più probabilmente 6. Precedenti ricerche hanno indicato costantemente acidi grassi possono essere rilevati nella cavità orale in un range di concentrazioni 7-11, nonostante il fatto che non è un &#39;gusto&#39; nel senso tradizionale, in quanto non ha un&#39;unica distinguibile qualità percettiva associato (dolce vale a dire.) 12. Lavoro da nostro laboratorio ha messo in luce le implicazioni funzionali di acidi grassi compromessa chemorecezione, vale a dire sul peso corporeo e consumo di grassi alimentari. Coloro che sono meno in grado di rilevare gli acidi grassi (iposensibile) sembrano avere un più alto indice di massa corporea (BMI) e consumare più energia 9, mentre è stata anche osservata una relazione tra la sensibilità di acido grasso orale e consumo di grassi alimentari; cioè, acidi grassi individui iposensibile hanno dimostrato di consumare più grassi animali, tra cui, carne, prodotti lattiero-caseari ad alto grassi e grassi diffonde i quali sono stati implicati come collaboratori di aumento di peso 13. Inoltre, gli individui che sono più sensibili agli acidi grassi sembrano essere meglio attrezzate a differenziare tra i campioni con diversi tenori di materia grassa 9. Mentre altri gruppi di ricerca sono riusciti a trovare associazioni simili 10,14,15, questo settore di crescente ricerca rimane intrigante. Queste differenze individuali nel chemorecezione acidi grassi sembrano essere un po &#39;modulata da fattori ambientali, tra cui la dieta. Grassi abituale è stata associata con insufficiente chemorecezione acido grasso orale e di conseguenza, una preferenza intensificato per e aumento del consumo digrassi alimentari 16. Oltre all&#39;adattamento gustativa, il tratto gastrointestinale (GI) appare anche sensibile a tali variazioni di assunzione di grassi 17 e la sensibilità degli acidi grassi GI compromessa possono essere implicati nella incapacità di generare sazietà opportuno segnalare le risposte che scoraggiano il consumo di energia in eccesso 18. Oltre ai fattori ambientali, chemorecezione acido grasso può essere dettata da differenze genetiche o fisiologiche tra individui, compresa la concentrazione di densità papille fungiformi (e presumibilmente gusto recettori) sulla linguetta di un individuo 19. Maggiore densità di fungiformi papille della lingua è stato collegato alla sensibilità orale per numerosi composti oralmente identificati di cui 6 - n-propiltiouracile (PROP) 20, 21 di zucchero, sale e 22, mentre altri hanno anche notato una associazione con la percezione cremoso 23. Supertasters PROP (che presumaBly avere un numero più elevato di papille fungiformi) sono in grado di distinguere alto contenuto di grassi dal basso condimenti per insalata di grassi 24 e sono in grado di discriminare il contenuto di grassi e la cremosità di latticini in modo più accurato rispetto ai non-assaggiatori 23,25. A questo punto però, il rapporto tra la densità papille fungiformi e &#39;gusto&#39; di rilevamento di acidi grassi orale è sconosciuta. Alla base della ricerca orale chemorecezione acido grasso umano è l&#39;applicazione di varie tecniche sensoriali. Identificazione variabilità individuale nella rilevazione di acidi grassi orale è un obiettivo importante e dipende in gran parte dalla determinazione di soglie di rilevamento di acidi grassi, cioè, il punto più basso in cui l&#39;acido grasso è in grado di essere rilevato in soluzione 9. Mentre il metodo di verifica e stimolo specifico veicolo usato varia letteratura e tra gruppi di ricerca, la procedura tipica prevede la presentazione di un partecipante con un set di acido grasso emulsionato e controllo (senza fsoluzioni acide atty) e identificare quale è il campione &#39;strano&#39;. Qui vi presentiamo uno stabilito, metodo affidabile e riproducibile per la determinazione della soglia del 10 utilizzando soluzioni di latte emulsionati e una forzata procedura di scelta triangolo ascendente. La misura in cui la sensibilità degli acidi grassi orale influenza dieta, vale a dire il consumo di cibi grassi, e la capacità di percepire i grassi nei cibi è anche di interesse e qui abbiamo anche riferire sulle due tecniche consolidate aggiuntive per estendere ulteriormente la nostra comprensione di acido grasso chemorecezione. Grassi alimentari gradimento può essere identificato fornendo individui con campioni di alimenti disponibili in commercio, sia con un regolare e una opzione a basso contenuto di grassi, che sono invitati a indicare gradimento di ogni 16. Per quanto riguarda la percezione di grasso, un compito classifica grasso è stato sviluppato dal nostro laboratorio, progettato per valutare la capacità di un individuo di individuare il grasso in crema, una tipica matrice alimentare 16. Per valutare geneticamentec o differenze fisiologiche tra gli individui, un metodo comunemente usato la lingua photography comporta colorazione, fotografare e quantificare papille fungiformi 26. Durante l&#39;utilizzo di questa tecnica in acido grasso della ricerca è nella sua infanzia, aumentando l&#39;applicazione, soprattutto in entrambi magri e in sovrappeso / obesi gruppi di popolazione possono contribuire a identificare le cause intrinseche del consumo di grassi in eccesso.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:909px;" width="909">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:104px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:471px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Gum Arabic TIC Pretested PRE-HYDRATED FT Powder</td>
			<td style="width:104px;">Alchemy Agencies Ltd. NZ</td>
			<td style="width:119px;">CFR# 21 CFR 184.1330</td>
			<td>Food grade agrigum</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">EDTA (Ethylenediaminetetraacetic acid)</td>
			<td style="width:104px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">1.08418 0250</td>
			<td>Disodium salt dehydrate</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">L4RT Homogenizer</td>
			<td style="width:104px;">Silverson Longmedow, MA</td>
			<td style="width:119px;">L4RT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Liquid Paraffin</td>
			<td style="width:104px;">Fauldings</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>No catalog number as liquid paraffin is a regular consumable product</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Nikon AF-S VR Micro Nikkor 105mm f/2.8G IF-ED camera lens</td>
			<td style="width:104px;">Nikon</td>
			<td align="right" style="width:119px;">2160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">SLIK Sprint Pro II tripod</td>
			<td style="width:104px;">Slik Corporation</td>
			<td>611-849</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Nikon D90 Digital Camera with LCD Protector</td>
			<td style="width:104px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">BM-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nitrogen</td>
			<td style="width:104px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Tanita Body Scan Composition Monitor Scales</td>
			<td style="width:104px;">Tanita, Cloverdale, WA, Australia</td>
			<td style="width:119px;">BC-551</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Seca Stadiometer</td>
			<td style="width:104px;">Medshop Australia, Fairfield, VIC, Australia</td>
			<td style="width:119px;">MED435</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring oral fatty acid thresholds, fat perception, fatty food liking, and papillae density in humans

Emergente prove da un numero di laboratori indica che gli esseri umani hanno la capacità di identificare acidi grassi nella cavità orale, presumibilmente attraverso recettori di acido grasso alloggiati su cellule gustative. Precedenti ricerche hanno dimostrato che la sensibilità orale di un individuo di acido grasso, acido oleico specificamente (C18: 1) è associato con indice di massa corporea (BMI), consumo di grassi alimentari, e la capacità di identificare grassi negli alimenti. Abbiamo sviluppato un metodo affidabile e riproducibile per valutare chemorecezione orale di acidi grassi, utilizzando un latte e C18: 1 emulsione, insieme ad una forzata procedura scelta triangolo ascendente. In parallelo, una matrice alimentare è stato sviluppato per valutare la capacità di un individuo di percepire grasso, oltre ad un metodo semplice per valutare grassi alimentari piacimento. Come misura aggiunto lingua photography è utilizzato per valutare la densità papille, con una maggiore densità essendo spesso associata ad un aumento della sensibilità gusto.

I metodi descritti sopra sono importanti anche alcuni prova emergente ha indicato che chemorecezione acido grasso alterata nella cavità e GI tratto orale può essere associato ad un aumento BMI e lo sviluppo dell&#39;obesità 17. Diversi studi hanno utilizzato i protocolli descritti di indagare il rilevamento di acidi grassi orale e la nostra recente pubblicazione ha mostrato il metodo sia affidabile e riproducibile 10. Gli studi che utilizzano questa metodologia sono stati in grado di determinare in modo affidabile soglie di rilevamento di acidi grassi orali individuali identificando il punto in cui i partecipanti sono in grado di rilevare una differenza tra campioni di latte 9. . Dopo tre sessioni di test che utilizzano questo protocollo, Stewart et al 9 hanno trovato che la soglia di rilevamento medio per C18: 1 era 2.2 ± 0.1, con soglie di rilevamento che vanno 1-6,4 mm (vedi figura 5). Più di recente, abbiamo stabilito un C18: 1 campo di soglia di rilevamento da 00,26-12 mM, (media: 2.64 ± 0,7 mm) 10. Questi risultati supportano l&#39;idea che gli acidi grassi possono essere rilevati nella cavità orale, e che marcate differenze individuali nella sensibilità di C18: 1 esistono. Sulla base di questi risultati, siamo in grado di classificare gli individui ipersensibili o iposensibile di C18: 1. Individui ipersensibili siano in grado di identificare correttamente C18: 1 &lt;di 3,8 mm, mentre i soggetti iposensibile richiedono concentrazione&gt; 3,8 mm. Una ricerca dal nostro laboratorio ha trovato sensibilità orale al C18: 1 è associata con il consumo dietetico di grassi e BMI (Figura 6), dove C18: 1 iposensibile individui consumano più grassi saturi e animali e hanno un BMI superiore 13. È interessante notare che, in uno studio condotto da Stewart e Keast 16, si è constatato che il consumo di una dieta povera di grassi comportato un aumento della sensibilità al C18: 1 di partecipanti sia magri e in sovrappeso (Figura 7). Tuttavia, questo studio ha anche riscontrato che quando i partecipanti consuma<html> med una dieta grassa alta, individui magri avevano ridotta sensibilità al C18: 1, mentre gli individui sovrappeso avevano variazione della sensibilità gusto (Figura 8). Ciò suggerisce che abitualmente consumano una dieta ricca di grassi, che è più probabile per le persone in sovrappeso, può provocare acidi grassi attenuato chemorecezione 28. Tuttavia, poiché non vi erano differenze nella sensibilità al basale tra i partecipanti magri e in sovrappeso, questi risultati potrebbero indicare che le persone magre sono semplicemente più suscettibili a cambiamenti nella dieta per quanto riguarda l&#39;assunzione di grassi. Questo può anche suggerire che era la presenza dell&#39;intervento specifico (alta vs bassa percentuale di grassi) che può aver influenzato risultati, piuttosto che diete abituali, che possono o non possono essere state diverse alla dieta intervento. Nonostante questo, questo studio indica che ci sono alcune differenze fondamentali tra le persone magre e in sovrappeso per quanto riguarda la sensibilità gusto acido grasso, che richiede ulteriori indagini. ONTENUTO &quot;fo: keep-together.within-page =&quot; always &quot;&gt; <img alt="Figura 5" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig5highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig5.jpg" /> Figura 5 C18:. 1 soglie di rilevamento gustative variabilità marcata è stato dimostrato sensibilità per C18:. 1 con i partecipanti in grado di rilevare C18: 1 tutta una serie di concentrazioni (mm 1 mm-6.4). <img alt="Figura 6" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig6.jpg" /> Figura 6 C18:. 1 soglie di rilevamento di gusto e di associazione con BMI un&#39;associazione tra la capacità di rilevare C18:. 1 e la composizione corporea è stato indicato, per cui quelli con soglie di rilevamento più elevati (individui iposensibile) hanno valori di BMI significativamente più alti (p = 0,002 , r 2 = 0,467). <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page = &quot;always&quot;&gt; <img alt="Figura 7" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig7highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig7.jpg" /> Figura 7 C18:. 1 soglie di rilevamento seguito una dieta a basso contenuto di grassi seguito di quattro settimane il consumo di una dieta a basso contenuto di grassi, C18: 1. Soglie di rilevamento sono aumentate per gli individui sia magri e obesi. <img alt="Figura 8" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51236/51236fig8highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51236/51236fig8.jpg" /> Figura 8 C18:. 1 soglie di rilevamento a seguito di una dieta ricca di grassi seguito di quattro settimane il consumo di una dieta ricca di grassi, le persone magre visualizzati ridotta sensibilità al C18:. 1 (P = 0.006), mentre gli individui in sovrappeso hanno mostrato alcuna variazione (P = 0,609) . Analogamente per l&#39;impatto della dieta sulla soglia di rivelazione di acidi grassi, vi è la ricerca di suggest che il cibo gradimento può essere di plastica e alterata dall&#39;esposizione. Ad esempio, risulta che una dieta ricca di grassi aumenta preferenza per un prodotto grasso superiore, con verifichi l&#39;opposto dopo il consumo di una dieta povera di grassi 16. Tuttavia, questi cambiamenti non sono stati coerenti in letteratura. Sembra che modifiche alle preferenze sono mediati dal tempo in cui la persona è stata l&#39;adesione ad una dieta ad alto o basso contenuto di grassi. In particolare, Mattes 29 ha trovato cambiamenti significativi nelle preferenze alimentari dei partecipanti dopo 12 settimane con una dieta di grassi ridotta, mentre Stewart e Keast 16 pensano solo cambiamenti sporadici e marginali dopo quattro settimane con una dieta simile. Consumare una dieta ricca di grassi alterato le preferenze dei partecipanti per yogurt, con preferenze per yogurt magro crescente, converse ai risultati attesi (Baseline (BL): 19.44 ± 5.73, Settimana 4 (WK4): 21.94 ± 5.21, p = 0,046). Inoltre, dopo quattro settimane di una dieta a basso contenuto di grassi, le preferenze per il burro a basso contenuto di grassi sono aumentati in tutte le participants (BL: 6.23 ± 4.26, WK4: 7.32 ± 3.04, p = 0,046). Le preferenze per yogurt magro aumentate per i partecipanti magri solo (BL: 2.51 ± 3.26, WK4: 3.68 ± 4.94, p = 0.07), mentre le preferenze per mousse basso contenuto di grassi è diminuito per tutti i partecipanti (p = 0,01). La capacità di rilevare i grassi negli alimenti viene valutata chiedendo ai partecipanti di degustare e classificare una serie di creme con differenti tenori di materia grassa. Percezione grasso viene identificato in base a quanto bene i partecipanti sono stati in grado di classificare i campioni. Percezione Grasso è stato conosciuto per cambiare con la dieta, per esempio, a seguito di una dieta a basso contenuto di grassi ha portato a miglioramenti delle prestazioni del partecipante nell&#39;individuare e classifica il livello di grasso in ogni campione crema pasticcera 11 correttamente. Inoltre, sembra che vi sia un&#39;associazione tra la sensibilità di C18: 1 e l&#39;identificazione e la classificazione del contenuto di grassi 4. Infatti, le persone che erano ipersensibili a C18: 1 eseguito significativamente migliore on il compito classifica grassi (4,3 ± 0,6) rispetto agli individui iposensibile (2.3 ± 0.1, p = 0.02) (punteggi sono su un massimo di cinque) 9. Questo indica che gli individui che sono più sensibili agli acidi grassi sono stati anche meglio a differenziare tra le quattro diverse concentrazioni di grassi in crema. Mentre c&#39;è stata una tendenza per le prestazioni a migliorare dopo aver consumato la dieta povera di grassi per quattro settimane, questo non è stato un cambiamento significativo (BL: 1.3 ± 0.3, WK4: 2 ± 0.3, p = 0,077) 16. Densità papille cioè il numero di papille (e quindi papille) presenti sulla lingua varia tra individui ed è indicativo della funzione gusto. Maggiore densità di papille fungiformi è stato collegato alla sensibilità gusto accresciuta, per i composti, tra cui saccarosio 21 e la sostanza amara PROP 20. Tongue densità di papille, come determinato dalla lingua photography, varia notevolmente tra i soggetti. Ad esempio, Zhang &lt;em&gt; et al. 21 hanno trovato che ci sono significative differenze individuali tra i partecipanti, che vanno da una concentrazione di 7,07 ± 0.35/cm 2-233,43 ± 0.00/cm 2 (dati era per un singolo partecipante), mentre altri 26 hanno trovato un mezzo fungiformi concentrazione papille essere 156.00 ± 5.86/cm 2. Inoltre, è stato riscontrato che le papille può apparire significativamente diverso nella struttura tra individui, con variazione in altezza, larghezza, e la forma, 21 se prova limitata per quanto riguarda le possibili implicazioni di queste differenze. Dato risultati precedenti collegano numero papille con sensibilità gusto, è plausibile che può anche esistere una relazione simile per sensibilità acido grasso orale, per cui chi è più oralmente sensibili agli acidi grassi possono avere una maggiore densità di papille gustative e quindi un numero maggiore di recettori di acido grasso orali. Anche se questa associazione è ancora da stabilire, si Presents una nuova area di ricerca può aiutare implica i meccanismi sottostanti che guidano l&#39;eccessivo consumo di grassi.

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Measuring Oral Fatty Acid Thresholds, Fat Perception, Fatty Food Liking, and Papillae Density in Humans | Neuroscience | Video

Measuring Oral Fatty Acid Thresholds, Fat Perception, Fatty Food Liking, and Papillae Density in Humans

Chemorecezione orale di acidi grassi e l&#39;associazione con le preferenze alimentari dieta e grassi può consentire l&#39;identificazione dei meccanismi coinvolti con lo sviluppo di obesità e perché cambiamenti nella dieta può essere difficile per molti individui.

Misurazione orale acidi grassi Soglie, Fat Percezione, grasso alimentare Simpatia, e Papille densità di esseri umani

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty ...

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19.8K Views.  Deakin University.  Chemorecezione orale di acidi grassi e l'associazione con le preferenze alimentari dieta e grassi può consentire l'identificazione dei meccanismi coinvolti con lo sviluppo di obesità e perché cambiamenti nella dieta può essere difficile per molti individui. 

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Using Affordable LED Arrays for Photo-Stimulation of Neurons

Standard slice electrophysiology has allowed researchers to probe individual components of neural circuitry by recording electrical responses of single cells in response to electrical or pharmacological manipulations1,2. With the invention of methods to optically control genetically targeted neurons (optogenetics), researchers now have an unprecedented level of control over specific groups of neurons in the standard slice preparation. In particular, photosensitive channelrhodopsin-2 (ChR2) allows researchers to activate neurons with light3,4. By combining careful calibration of LED-based photostimulation of ChR2 with standard slice electrophysiology, we are able to probe with greater detail the role of adult-born interneurons in the olfactory bulb, the first central relay of the olfactory system. Using viral expression of ChR2-YFP specifically in adult-born neurons, we can selectively control young adult-born neurons in a milieu of older and mature neurons. Our optical control uses a simple and inexpensive LED system, and we show how this system can be calibrated to understand how much light is needed to evoke spiking activity in single neurons. Hence, brief flashes of blue light can remotely control the firing pattern of ChR2-transduced newborn cells.

Adult-born neurons expressing ChR2 can be manipulated in slice electrophysiological preparations in order to examine their contribution towards the function of olfactory neural circuits.

Utilizzando conveniente array LED per la foto-stimolazione dei neuroni

Standard slice electrophysiology has allowed researchers to probe individual components of neural circuitry by recording electrical responses of single ...

Ricerca

Neuroscienze

Selective Viral Transduction of Adult-born Olfactory Neurons for Chronic in vivo Optogenetic Stimulation

Local interneurons are continuously regenerated in the olfactory bulb of adult rodents1-3. In this process, called adult neurogenesis, neural stem cells in the walls of the lateral ventricle give rise to neuroblasts that migrate for several millimeters along the rostral migratory stream (RMS) to reach and incorporate into the olfactory bulb. To study the different steps and the impact of adult-born neuron integration into preexisting olfactory circuits, it is necessary to selectively label and manipulate the activity of this specific population of neurons. The recent development of optogenetic technologies offers the opportunity to use light to precisely activate this specific cohort of neurons without affecting surrounding neurons4,5. Here, we present a series of procedures to virally express Channelrhodopsin2(ChR2)-YFP in a temporally restricted cohort of neuroblasts in the RMS before they reach the olfactory bulb and become adult-born neurons. In addition, we show how to implant and calibrate a miniature LED for chronic in vivo stimulation of ChR2-expressing neurons.

Selective Viral Transduction of Adult-born Olfactory Neurons for Chronic in vivo Optogenetic Stimulation

Adult-born neurons of the olfactory bulb can be optogenetically controlled using Channelrhodopsin2-expressing lentiviral injection in the rostral migratory stream and chronic photostimulation with an implanted miniature LED.

Selettiva trasduzione virale di neuroni olfattivi per adulti nati per cronica In vivo Optogenetic Stimolazione

Local interneurons are continuously regenerated in the olfactory bulb of adult rodents1-3. In this process, called adult neurogenesis, neural stem cells ...

MPI CyberMotion Simulator: Implementation of a Novel Motion Simulator to Investigate Multisensory Path Integration in Three Dimensions

Path integration is a process in which self-motion is integrated over time to obtain an estimate of one's current position relative to a starting point 1. Humans can do path integration based exclusively on visual 2-3, auditory 4, or inertial cues 5. However, with multiple cues present, inertial cues - particularly kinaesthetic - seem to dominate 6-7. In the absence of vision, humans tend to overestimate short distances (&lt;5 m) and turning angles (&lt;30&deg;), but underestimate longer ones 5. Movement through physical space therefore does not seem to be accurately represented by the brain.
Extensive work has been done on evaluating path integration in the horizontal plane, but little is known about vertical movement (see 3 for virtual movement from vision alone). One reason for this is that traditional motion simulators have a small range of motion restricted mainly to the horizontal plane. Here we take advantage of a motion simulator 8-9 with a large range of motion to assess whether path integration is similar between horizontal and vertical planes. The relative contributions of inertial and visual cues for path navigation were also assessed.
16 observers sat upright in a seat mounted to the flange of a modified KUKA anthropomorphic robot arm. Sensory information was manipulated by providing visual (optic flow, limited lifetime star field), vestibular-kinaesthetic (passive self motion with eyes closed), or visual and vestibular-kinaesthetic motion cues. Movement trajectories in the horizontal, sagittal and frontal planes consisted of two segment lengths (1st: 0.4 m, 2nd: 1 m; &plusmn;0.24 m/s2 peak acceleration). The angle of the two segments was either 45&deg; or 90&deg;. Observers pointed back to their origin by moving an arrow that was superimposed on an avatar presented on the screen.
Observers were more likely to underestimate angle size for movement in the horizontal plane compared to the vertical planes. In the frontal plane observers were more likely to overestimate angle size while there was no such bias in the sagittal plane. Finally, observers responded slower when answering based on vestibular-kinaesthetic information alone. Human path integration based on vestibular-kinaesthetic information alone thus takes longer than when visual information is present. That pointing is consistent with underestimating and overestimating the angle one has moved through in the horizontal and vertical planes respectively, suggests that the neural representation of self-motion through space is non-symmetrical which may relate to the fact that humans experience movement mostly within the horizontal plane.

An efficient way to gain insight into how humans navigate themselves in three dimensions is described. The method takes advantage of a motion simulator capable of moving observers in ways unattainable by traditional simulators. Results confirm that movement in the horizontal plane is underestimated, while vertical movement is overestimated.

MPI CyberMotion Simulator: Implementazione di un simulatore di movimento Novel per Indagare l&#39;integrazione multisensoriale Percorso in tre dimensioni

Path integration is a process in which self-motion is integrated over time to obtain an estimate of one's current position relative to a starting point 1. ...

Isolation and Culture of Human Fungiform Taste Papillae Cells

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple stimuli and complex chemical molecules contained in foods. In human, individual fungiform papillae contain from zero to as many as 20 taste buds. There is no established protocol for culturing human taste cells, although the ability to maintain taste papillae cells in culture for multiple cell cycles would be of considerable utility for characterizing the molecular, regenerative, and functional properties of these unique sensory cells. Earlier studies of taste cells have been done using freshly isolated cells in primary culture, explant cultures from rodents, or semi-intact taste buds in tissue slices1,2,3,4. Although each of these preparations has advantages, the development of long-term cultures would have provided significant benefits, particularly for studies of taste cell proliferation and differentiation. Several groups, including ours, have been interested in the development and establishment of taste cell culture models. Most attempts to culture taste cells have reported limited viability, with cells typically not lasting beyond 3-5 d5,6,7,8. We recently reported on a successful method for the extended culture of rodent taste cells9. We here report for the first time the establishment of an in vitro culture system for isolated human fungiform taste papillae cells. Cells from human fungiform papillae obtained by biopsy were successfully maintained in culture for more than eight passages (12 months) without loss of viability. Cells displayed many molecular and physiological features characteristic of mature taste cells. Gustducin and phospholipase C &beta;2, (PLC-&beta;2) mRNA were detected in many cells by reverse transcriptase-polymerase chain reaction and confirmed by sequencing. Immunocytochemistry analysis demonstrated the presence of gustducin and PLC-&beta;2 expression in cultured taste cells. Cultured human fungiform cells also exhibited increases in intracellular calcium in response to appropriate concentrations of several taste stimuli indicating that taste receptors and at least some of the signalling pathways were present. These results sufficient indicate that taste cells from adult humans can be generated and maintained for at least eight passages. Many of the cells retain physiological and biochemical characteristics of acutely isolated cells from the adult taste epithelium to support their use as a model taste system. This system will enable further studies of the processes involved in proliferation, differentiation and function of mammalian taste receptor cells in an in vitro preparation.
Human fungiform taste papillae used for establishing human fungiform cell culture were donated for research following proper informed consent under research protocols that were reviewed and approved by the IRB committee. The protocol (#0934) was approved by Schulman Associates Institutional Review Board Inc., Cincinnati, OH. Written protocol below is based on published parameters reported by Ozdener et al. 201110.

We aimed to develop a reproducible protocol for isolating and maintaining long-term cultures of human fungiform taste papillae cells. Cells from human fungiform papillae obtained by biopsy were successfully maintained in culture for more than eight passages (12 months) without loss of viability.

Isolamento e la coltura di cellule umane Gusto papille fungiformi

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple ...

Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice

Foods that are rich in fat and sugar significantly contribute to over-eating and escalating rates of obesity. The consumption of palatable foods can produce a rewarding effect that strengthens action-outcome associations and reinforces future behavior directed at obtaining these foods. Increasing evidence that the rewarding effects of energy-dense foods play a profound role in overeating and the development of obesity has heightened interest in studying the genes, molecules and neural circuitry that modulate food reward1,2. The rewarding impact of different stimuli can be studied by measuring the willingness to work to obtain them, such as in operant conditioning tasks3. Operant models of food reward measure acquired and voluntary behavioral responses that are directed at obtaining food. A commonly used measure of reward strength is an operant procedure known as the progressive ratio (PR) schedule of reinforcement.4,5 In the PR task, the subject is required to make an increasing number of operant responses for each successive reward. The pioneering study of Hodos (1961) demonstrated that the number of responses made to obtain the last reward, termed the breakpoint, serves as an index of reward strength4. While operant procedures that measure changes in response rate alone cannot separate changes in reward strength from alterations in performance capacity, the breakpoint derived from the PR schedule is a well-validated measure of the rewarding effects of food. The PR task has been used extensively to assess the rewarding impact of drugs of abuse and food in rats (e.g.,6-8), but to a lesser extent in mice9. The increased use of genetically engineered mice and diet-induced obese mouse models has heightened demands for behavioral measures of food reward in mice. In the present article we detail the materials and procedures used to train mice to respond (lever-press) for a high-fat and high-sugar food pellets on a PR schedule of reinforcement. We show that breakpoint response thresholds increase following acute food deprivation and decrease with peripheral administration of the anorectic hormone leptin and thereby validate the use of this food-operant paradigm in mice.

The present report details the protocol employed to measure the rewarding effects of high-fat food in mice using a progressive ratio operant conditioning task.

Progressive-ratio di rispondere per alimentare appetibile alto contenuto di grassi e di zuccheri nel Mice

Foods that are rich in fat and sugar significantly contribute to over-eating and escalating rates of obesity. The consumption of palatable foods can ...

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees (Apis mellifera)

This video demonstrates novel techniques of RNA interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees using double-stranded RNA (dsRNA) injections. It also presents a protocol of proboscis extension response (PER) assay for measuring gustatory perception.	
	RNAi-mediated gene knockdown is an effective technique downregulating target gene expression. This technique is usually used for single gene manipulation, but it has limitations to detect interactions and joint effects between genes. In the first part of this video, we present two strategies to simultaneously knock down two genes (called double gene knockdown). We show both strategies are able to effectively suppress two genes, vitellogenin (vg) and ultraspiracle (usp), which are in a regulatory feedback loop. This double gene knockdown approach can be used to dissect interrelationships between genes and can be readily applied in different insect species.	
	The second part of this video is a demonstration of proboscis extension response (PER) assay in honey bees after the treatment of double gene knockdown. The PER assay is a standard test for measuring gustatory perception in honey bees, which is a key predictor for how fast a honey bee's behavioral maturation is. Greater gustatory perception of nest bees indicates increased behavioral development which is often associated with an earlier age at onset of foraging and foraging specialization in pollen. In addition, PER assay can be applied to identify metabolic states of satiation or hunger in honey bees. Finally, PER assay combined with pairing different odor stimuli for conditioning the bees is also widely used for learning and memory studies in honey bees.

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees Apis mellifera

In this protocol, we describe two strategies that simultaneously suppress two genes (double gene knockdown) in honey bees. Then we present how to use the proboscis extension response (PER) assay to study the effect of double gene knockdown on honey bee gustatory perception.

RNAi mediato doppia Gene atterramento e gustative Percezione misura di api mellifere (<em&gt; Apis mellifera</em&gt;)

This video demonstrates novel techniques of RNA  interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees  using double-stranded RNA ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. Structural changes at the NMJ can result in neurotransmission failure, resulting in weakness, atrophy and even death of the muscle fiber. Many studies have investigated how genetic modifications or disease can alter the structure of the mouse NMJ. Unfortunately, it can be difficult to directly compare findings from these studies because they often employed different parameters and analytical methods. Three protocols are described here. The first uses maximum intensity projection confocal images to measure the area of acetylcholine receptor (AChR)-rich postsynaptic membrane domains at the endplate and the area of synaptic vesicle staining in the overlying presynaptic nerve terminal. The second protocol compares the relative intensities of immunostaining for synaptic proteins in the postsynaptic membrane. The third protocol uses Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) to detect changes in the packing of postsynaptic AChRs at the endplate. The protocols have been developed and refined over a series of studies. Factors that influence the quality and consistency of results are discussed and normative data are provided for NMJs in healthy young adult mice.

The neuromuscular junction (NMJ) is altered in a variety of conditions that can sometimes culminate in synaptic failure. This report describes fluorescence microscope-based methods to quantify such structural changes.

La giunzione neuromuscolare: Synapse Misurazione circonferenza, la frammentazione e Variazioni Synaptic Proteine ​​Densità Uso confocale microscopia a fluorescenza

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Non-invasive Assessment of Changes in Corticomotoneuronal Transmission in Humans

The corticospinal pathway is the major pathway connecting the brain with the muscles and is therefore highly relevant for movement control and motor learning. There exists a number of noninvasive electrophysiological methods investigating the excitability and plasticity of this pathway. However, most methods are based on quantification of compound potentials and neglect that the corticospinal pathway consists of many different connections that are more or less direct. Here, we present a method that allows testing excitability of different fractions of the corticospinal transmission. This so called H-reflex conditioning technique allows one to assess excitability of the fastest (monosynaptic) and also polysynaptic corticospinal pathways. Furthermore, by using two different stimulation sites, the motor cortex and the cervicomedullary junction, it allows not only differentiation between cortical and spinal effects but also assessment of transmission at the corticomotoneural synapse. In this manuscript, we describe how this method can be used to assess corticomotoneural transmission after low-frequency repetitive transcranial magnetic stimulation, a method that was previously shown to reduce excitability of cortical cells. Here we demonstrate that not only cortical cells are affected by this repetitive stimulation but also transmission at the corticomotoneuronal synapse at the spinal level. This finding is important for the understanding of basic mechanisms and sites of neuroplasticity. Besides investigation of basic mechanisms, the H-reflex conditioning technique may be applied to test changes in corticospinal transmission following behavioral (e.g., training) or therapeutic interventions, pathology or aging and therefore allows a better understanding of neural processes that underlie movement control and motor learning.

The aim of the present study was to assess changes in transmission at the corticomotoneuronal synapses in humans after repetitive transcranial magnetic stimulation. For this purpose, an electrophysiological method is introduced that allows assessment of pathway specific corticospinal transmission, i.e. differentiation of fast, direct corticospinal pathways from polysynaptic connections.

Valutazione non invasiva dei cambiamenti nella trasmissione corticomoturonale negli esseri umani

The corticospinal pathway is the major pathway connecting the brain with the muscles and is therefore highly relevant for movement control and motor ...

Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae

The goal of the Denver Papillae Protocol is to use a dichotomous key to define and prioritize the characteristics of fungiform papillae (FP) to ensure consistent scoring between scorers. This protocol builds off of a need that has arisen from the last two decades of taste research using FP as a proxy for taste pore density. FP density has historically been analyzed using Miller &#38; Reedy&#8217;s 1990 characterizations of their morphology: round, stained lighter, large, and elevated. In this work, the authors forewarned that stricter definitions of FP morphology needed to be outlined. Despite this call to action, follow up literature has been scarce, with most studies continuing to cite Miller &#38; Reedy&#8217;s original work. Consequently, FP density reports have been highly variable and, combined with small sample sizes, may contribute to the discrepant conclusions on the role of FP in taste sensitivity. The Genetics of Taste Lab explored this apparent inconsistency in counting and found that scorers were individually prioritizing the importance of these characteristics differently and had no guidance for when a papilla had some, but not all, of the reported qualities of FP. The result of this subjectivity is highly variable FP counts of the same tongue image. The Denver Papillae Protocol has been developed to remedy this consequence through use of a dichotomous key that further defines and prioritizes the importance of the characteristics put forth by Miller &#38; Reedy. The proposed method could help create a standard way to quantify FP for researchers in the field of taste and nutritional studies.

Here we present a protocol to measure fungiform papilla density from digital photographs. This method builds prioritization and objective characteristic metrics into the original descriptive work on fungiform papillae by Miller &#38; Reedy (1990).

Denver Papille protocollo per l&#39;analisi Obiettivo papille fungiformi

The goal of the Denver Papillae Protocol is to use a dichotomous key to define and prioritize the characteristics of fungiform papillae (FP) to ensure ...

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate their food environment. The fruit fly, Drosophila melanogaster, is a genetically tractable model organism that is widely used to decipher the molecular, cellular, and neural underpinnings of food preference. To analyze fly food preference, a robust feeding method is needed. Described here is a two-choice feeding assay, which is rigorous, cost-saving, and fast. The assay is Petri-dish-based and involves the addition of two different foods supplemented with blue or red dye to the two halves of the dish. Then, ~70 prestarved, 2-4-day-old flies are placed in the dish and&#160;allowed to choose between blue and red foods in the dark for about 90 min. Examination of the abdomen of each fly is followed by the calculation of the preference index. In contrast to multiwell plates, each Petri dish takes only ~20 s to fill and saves time and effort. This feeding assay can be employed to quickly determine whether flies like or dislike a particular food.

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

We present a protocol for a two-choice feeding assay for flies. This feeding assay is fast and easy to run and is suitable not only for small-scale laboratory research, but also for high-throughput behavioral screens in flies.

Un saggio rapido di preferenza alimentare in Drosophila

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate ...