The authors acknowledge the work that was done by the first author of the IoN-CCI model, Bart Vos&#8224;.

Dichiarazione Etica: animali vengono trattati e curati secondo le linee guida del Comitato per la ricerca e le questioni etiche della IASP 11. Il protocollo è stato approvato dal Comitato Etico istituzionale. 1. Soggetti <ol><li> Utilizzare ratti maschi Sprague-Dawley (250-300 g all&#39;arrivo). </li><li> Ratti Casa in gabbie a fondo in una stanza colonia con una umidità del 40-60% e una RT di 21 ± 1 ° C. </li><li> Rendere l&#39;acqua e cibo disponibile a libitum. </li><li> Tenere ratti sotto una rovesciata 00:12 h scuro ciclo / luce (luce accesa a 20 ore). </li></ol> 2. Chirurgia <ol><li> Per ratto, preparare due pezzi di legatura cromico budello (5-0) di circa 6 cm di lunghezza e metterli in soluzione salina sterile per evitare l&#39;essiccamento e diventare rigido e fragile. </li><li> Anestetizzare l&#39;animale con pentobarbital (60 mg / kg, ip), e trattare con atropina (0,1 mg / kg, ip). Monitorare il livello di anestesia estendendo una gamba e Pinching la rete di pelle tra le dita dei piedi con un unghia per garantire viene applicata una pressione adeguata. Assicurarsi che l&#39;animale non mostrare i arto. Se necessario, somministrare pentobarbital aggiuntivo. </li><li> Radere la testa del ratto in modo che un cuoio capelluto un&#39;incisione-linea può essere di circa 25 mm con distanze uguali anteriore e posteriore al centro degli occhi. </li><li> Fissare la testa del topo in un telaio stereotassico o altrimenti fissare la testa del topo. Posizionare il ratto su un tampone riscaldato per mantenere la temperatura corporea. </li><li> Applicare una pomata oftalmica su entrambi gli occhi per evitare danni da essiccazione. </li><li> Scrub la zona testa rasata con l&#39;alcol, poi Betadine. </li><li> Fare un cuoio capelluto un&#39;incisione linea mediana, esponendo il cranio e l&#39;osso nasale. </li><li> Utilizzare un microscopio operazione per eseguire i passaggi 2,9-2,16. </li><li> Sezionare il bordo dell&#39;orbita libera, formata da mascellare, frontale, lacrimale e ossa zigomatiche, usando un tampone di cotone con punta e un paio di pinze Dumont. Utilizzare il tampone per cosìak sangue da possibili emorragie. </li><li> Per consentire l&#39;accesso allo ione, deviare leggermente il contenuto orbitale con un batuffolo di cotone precisione, facendo attenzione a non tirare troppo il nervo ethmoidal anteriore che attraversa superiore allo ione. Sezionare iOn libera dal tessuto connettivo circostante, usando un tampone di cotone con punta di precisione e un paio di pinze Dumont con un movimento diffusione. Utilizzare il tampone per assorbire il sangue da possibili emorragie. </li><li> Per eseguire una legatura, spingere una estremità di un unico pezzo di budello cromico verso il basso lungo l&#39;osso frontale, mediale allo ione e avanzare pochi millimetri parallelo e inferiore allo ione. La legatura è ora tenuto in posizione tra ioni e l&#39;osso frontale. </li><li> Infilare la punta di un 45 gradi angolo pinze Dumont sotto lo ione collocarlo in prossimità della legatura. Ritrarre delicatamente iOn lateralmente per rivelare la legatura e la punta della pinza. Afferrare la legatura con le pinze e ritirare le pinze lateralmente da sotto lo ione. </li&gt; <li> Estrarre la legatura dalla cavità orbitale finché entrambe le estremità della legatura sono più o meno equidistanti dal IoN. </li><li> Fare un &quot;nodo scorsoio&quot; dalle due estremità della legatura per consentire un perfetto controllo del grado di costrizione e far scorrere il nodo contro ION. Spostare il nodo ulteriormente costrizione ione modo che il diametro del nervo viene ridotto di una quantità appena percettibile. Fare un nodo normale sulla parte superiore del nodo di slittamento in modo che la quantità di costrizione rimane costante (cioè, per evitare che il nodo feritoia di scivolare). </li><li> Tagliare le legature di lasciare circa 2 mm di estremità libere del nodo. </li><li> Ripetere la stessa procedura (punti da 2,11-2,15) per fare una seconda legatura 2 millimetri a parte la prima. </li><li> Per la chirurgia farsa, eseguire i passaggi 2,2-2,10. </li><li> Chiudere l&#39;incisione cuoio capelluto con suture in poliestere (4-0) e lasciare il ratto di recuperare su un tappetino riscaldato. Non lasciare incustodita l&#39;animale fino a che non ha recuperato contro sufficienticattiveria per mantenere decubito sternale e non rispedire l&#39;animale verso la compagnia di altri animali fino a quando non è completamente recuperato. </li><li> Per evitare effetti analgesici di prelazione sullo sviluppo del dolore neuropatico, non somministrare l&#39;analgesia per il dolore post-operatorio. </li></ol> 3. Procedura di prova del comportamento <ol><li> Consentire topi per acclimatarsi per almeno 8 giorni a condizioni abitative prima del test pre-operatoria. </li><li> Abituare ratti alla procedura di prova almeno una volta al giorno per tre giorni prima del test pre-operatorio. </li><li> Test condotta in una stanza buia con luce fornita da una W lampadina rossa 60 sospesa 1 m sopra il centro della zona reattiva illuminazione centro ma lasciando la circonferenza dim e il resto della camera oscura. </li><li> Assicurarsi che ci sia sufficiente rumore di fondo di ridurre le interferenze dalla stimolazione uditiva improvvisa. Se necessario, fornire il rumore bianco. </li><li> Osservazione del comportamento governare faccia <ol><li> TRASPORTI un singolo topo dalla colonia alla camera di prova in una gabbia di plastica coperto senza biancheria da letto. Nota: Idealmente, questo dovrebbe essere un breve viaggio con stimoli esterni minimi. </li><li> Mettere il topo in una coperta, gabbia di plastica trasparente senza biancheria da letto (lxwxh: 24 cm x 14 cm x 17 cm) con una a specchio di nuovo di fronte a una telecamera. </li><li> Effettuare una registrazione 10 min di comportamento dell&#39;animale. Durante la registrazione, assicurarsi che lo sperimentatore non è presente nel locale di prova. </li><li> Pulire la gabbia di osservazione prima di posizionare il prossimo animale. </li><li> Assicurarsi che il comportamento registrato viene analizzato da uno sperimentatore che è cieco alla condizione sperimentale del ratto. </li><li> Fare un record di ogni episodio faccia governare durante la registrazione 10 min. Nota: Faccia governare è definito come schemi di movimento in cui zampe anteriori sono portati a contatto con le zone del viso. </li><li> Fare una distinzione tra due tipi di comportamento volto governare. Se una sequenza non è né preceduta né seguita dacura del corpo (cioè, governare di una zona del corpo diversa dal viso), categorizzare l&#39;episodio come isolato faccia governare. Se il corpo governare viene eseguita immediatamente prima o dopo faccia governare, classificare l&#39;episodio come faccia governare durante il corpo governare. </li><li> Determinare il numero di episodi faccia governare. <ol><li> Categorizzare un periodo di tempo tra le azioni faccia governare che non supera i 4 secondi come spazio intra-episodio (cioè, una pausa tra le azioni faccia governare all&#39;interno di un singolo episodio). </li><li> Categorizzare un periodo di tempo tra le azioni governare faccia che supera 4 sec come spazio inter-episodio (cioè, una completa interruzione di azioni volto grooming tra due episodi). </li></ol></li></ol></li><li> Test stimolazione meccanica <ol><li> Ratti Mezzi di trasporto in gruppi di un massimo di 6 animali della colonia di sala prove in gabbia coperta con biancheria da letto. Assicurarsi che si tratta di un breve viaggio con stimoli esterni minimi. </li><li> Posiziona ilratti singolarmente in gabbie di plastica trasparente con lenzuola (lxwxh: 24 cm x 14 cm x 17 cm) con un coperchio a cerniera in modo che possano essere facilmente aperte e chiuse. </li><li> Utilizzare una serie graduata di cinque peli von Frey. Nota: La forza richiesta per piegare i capelli è 0,015 g, 0.127 g, 0,217 g, 0,745 ge 2.150 g. </li><li> Abituare i topi alla gabbia di osservazione e dei movimenti che raggiungono per 10 min. Ogni 30 sec, aprire il coperchio e toccare delicatamente la parete della gabbia con una bacchetta di plastica. </li><li> Quando l&#39;animale è in un sniffing / no stato locomozione (cioè, con quattro zampe poste a terra, né muoversi né congelamento, ma esibendo sniffing comportamento), applicare la prima capelli von Frey nel territorio ionico in prossimità del centro del pad vibrissal , sulla pelle pelosa che circonda il vibrisse mystacial. </li><li> Punteggio la risposta dell&#39;animale alla stimolazione di appartenere ad una delle seguenti categorie di risposta 4. <ol><li> Categorizzare una completa mancanza di risposta comepunteggio 0. </li><li> Categorizzare una rilevazione stimolo (cioè, il ratto gira la testa verso l&#39;oggetto e l&#39;oggetto stimolante stimolo viene poi esplorata) come punteggio 1. </li><li> Categorizzare una reazione di ritiro (es., Il topo gira la testa lentamente o tira bruscamente all&#39;indietro quando viene applicata la stimolazione, a volte una sola faccia pulire omolaterale alla zona stimolata avviene) come punteggio 2. </li><li> Categorizzare una fuga / risposta di attacco (es., Il topo evita ulteriori contatti con l&#39;oggetto di stimolo, sia passivamente spostando il suo corpo lontano dall&#39;oggetto stimolante per assumere una posizione rannicchiata contro la parete della gabbia, o attivamente attaccando l&#39;oggetto stimolo, rendendo mordere e afferrando movimenti) come punteggio 3. </li><li> Categorizzare faccia asimmetrica grooming (cioè, il ratto visualizza una serie ininterrotta di almeno tre colpi di faccia-wash diretti verso la zona del viso stimolata) come punteggio 4. </li><li> All&#39;interno di ogni animale, si applicano stimuLi in un ordine crescente di intensità. Dopo una intensità dello stimolo è stato applicato ad una faccia, applicarla a lato prima di passare al successivo intensità dello stimolo. Casuale l&#39;ordine in cui i lati ipsilaterale e controlaterale sono stimolati. Si noti che l&#39;animale deve essere in uno sniffing / no stato locomozione prima di ogni stimolo. </li></ol></li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Jensen, T. S., Gottrup, H., Sindrup, S. H., Bach, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+clinical+picture+of+neuropathic+pain.">The clinical picture of neuropathic pain.</a> Eur J Pharmacol. 429 (1-3), 1-11 (2001).</li><li>Meyer Rosberg, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+a+multidimensional+burden+for+patients.">Neuropathic pain a multidimensional burden for patients.</a> Eur J Pain. 5 (4), 379-389 (2001).</li><li>Meyer Rosberg, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+SF+36+and+Nottingham+Health+Profile+in+patients+with+chronic+neuropathic+pain.">Comparison of the SF 36 and Nottingham Health Profile in patients with chronic neuropathic pain.</a> Eur J Pain. 5 (4), 391-403 (2001).</li><li>Vos, B. 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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+between+two+types+of+behavioral+variables+of+non+evoked+facial+pain+after+chronic+constriction+injury+to+the+rat+infraorbital+nerve.">Comparison between two types of behavioral variables of non evoked facial pain after chronic constriction injury to the rat infraorbital nerve.</a> Comp Med. 52 (1), 44-49 (2002).</li><li>Deseure, K., Adriaensen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonevoked+facial+pain+in+rats+following+infraorbital+nerve+injury+a+parametric+analysis.">Nonevoked facial pain in rats following infraorbital nerve injury a parametric analysis.</a> Physiol Behav. 81 (4), 595-604 (2004).</li><li>Deseure, K., Hans, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+study+of+non+evoked+orofacial+pain+following+different+types+of+infraorbital+nerve+injury+in+rats.">Behavioral study of non evoked orofacial pain following different types of infraorbital nerve injury in rats.</a> Physiol Behav. 138, 292-296 (2015).</li><li>Deseure, K., Koek, W., Adriaensen, H., Colpaert, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+administration+of+the+5+hydroxytryptamine1A+agonist+(3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl)+-amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone+(F+13640)+attenuates+allodynia+like+behavior+in+a+rat+model+of+trigeminal+neuropathic+pain.">Continuous administration of the 5 hydroxytryptamine1A agonist (3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl) -amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone (F 13640) attenuates allodynia like behavior in a rat model of trigeminal neuropathic pain.</a> J Pharmacol Exp Ther. 306 (2), 505-514 (2003).</li><li>Zimmerman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethical+Guidelines+for+investigations+of+experimental+pain+in+conscious+animals.">Ethical Guidelines for investigations of experimental pain in conscious animals.</a> Pain. 16, 109-110 (1983).</li><li>Mogil, J. S., Crager, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+should+we+be+measuring+in+behavioral+studies+of+chronic+pain+in+animals.">What should we be measuring in behavioral studies of chronic pain in animals.</a> Pain. 112 (1-2), 12-15 (2004).</li><li>Backonja, M. M., Stacey, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+symptoms+relative+to+overall+pain+rating.">Neuropathic pain symptoms relative to overall pain rating.</a> J Pain. 5 (9), 491-497 (2004).</li><li>Imamura, Y., Kawamoto, H., Nakanishi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+heat+hyperalgesia+in+an+experimental+trigeminal+neuropathy+in+rats.">Characterization of heat hyperalgesia in an experimental trigeminal neuropathy in rats.</a> Exp Brain Res. 116, 97-103 (1997).</li><li>Chichorro, J. G., Zampronio, A. R., Souza, G. E., Rae, G. 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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+bilateral+trigeminal+constriction+injury+using+an+operant+facial+pain+assay.">Characterization of bilateral trigeminal constriction injury using an operant facial pain assay.</a> Neuroscience. 224, 294-306 (2012).</li><li>Anderson, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+Operant+Orofacial+Pain+Assessment+Device+(OPAD)+to+Measure+Changes+in+Nociceptive+Behavior.">Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior.</a> J Vis Exp. (76), 50336 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

L&#39;aspetto più interessante del modello ION-CCI è che esso fornisce una misura unica di spontaneo, (neuropatico) dolore non evocato. La maggior parte degli studi sugli animali di dolore neuropatico, utilizzando i modelli dei nervi spinali, si rivolgono esclusivamente comportamenti nocifensive (ad es., La vocalizzazione e le risposte di astinenza), riflettendo ipersensibilità al stimolazioni meccaniche o termiche 12. Tuttavia, la denuncia clinica principale nei pazienti è dolore in corso, non i...

Danni ai nervi somatosensoriali più spesso porta alla perdita di sensibilità. Non è molto ben compreso come e perché, in alcuni casi, danni ai nervi periferici conduce al dolore cronico. Come risultato, neuropatie dolorose rimangono una condizione difficile da trattare 1 e risultare in una riduzione sostanziale della qualità della vita dei pazienti 2-3. I modelli animali sono uno strumento importante per esaminare l&#39;efficacia dei farmaci esistenti e di nuova concezione e di identificare i meccanismi fisiopatologici coinvolti nello sviluppo e manutenzione del dolore neuropatico. Tra le principali sfide per la ricerca sul dolore traslazionale è l&#39;identificazione e la misurazione del dolore spontaneo negli animali (vale a dire, fisiologica, manifestazioni comportamentali o di altri che indicano la presenza di dolore negli animali che non vengono sfidati con sondare stimolazioni che sono acutamente sovrapposte condizioni basali del soggetto ). L&#39;obiettivo generale di questa procedura è quello di indurre chirurgicamente unlesioni del nervo infraorbitale in un topo che porta allo sviluppo di entrambi spontaneo e evocato comportamento nocifensive che può utilizzato per studiare i meccanismi coinvolti nel dolore neuropatico trigemino e il suo trattamento. Diretto, isolato faccia governare è una misura unica del dolore neuropatico spontanea nei ratti. A seguito di lesione cronica costrizione (CCI) del nervo infraorbitario (ione), ratti mostrano cambiamenti nel comportamento spontaneo e in risposta alla stimolazione tattile che sono indicativi di dolore persistente e allodinia meccanica 4. A seguito di ION-CCI, i ratti mostrano un&#39;attività governare faccia maggiore e asimmetrica, cioè, con volto di lavaggio colpi diretta principalmente al territorio IoN nervo feriti. In contrasto con la stimolazione nociva del volto (ad esempio, l&#39;iniezione formalina) 5, non doloroso disturbi sensoriali (ad esempio, unilaterale ritaglio vibrisse, anestetico blocco del nervo infraorbitale, applicazione di olio minerale su vibriSSAE) hanno fatto, non o solo molto brevemente (vale a dire, i primi minuti dopo l&#39;insorgenza) inducono un cambiamento significativo nel comportamento faccia governare 6. Si è concluso che questa toelettatura anormale dopo ION-CCI è una manifestazione comportamentale di spontanee, sensazioni fortemente aversive nel territorio del nervo feriti. Questo comportamento nei ratti ionico CCI orsi forte somiglianza con dolore spontaneo osservata nei pazienti. Ulteriori studi hanno identificato una differenza importante tra il viso comportamento governare che fa parte di un comportamento governare corpo più generale (cioè, &quot;faccia governare durante corpo grooming&quot;), che rimane in gran parte influenzato da ION-CCI, e faccia nocifensive governare che non è né preceduta né seguita da cura del corpo (cioè, &quot;isolato faccia grooming&quot;), che è significativamente aumentato dopo ionico CCI 7-9. Farmacologicamente, faccia governare durante corpo governare costituisce una misura di controllo eccellente per gli effetti non specifici di droga ( <em&gt; ad esempio, sedazione), che possono alterare la funzione motoria. I movimenti degli arti anteriori durante i due tipi di viso grooming sono esattamente gli stessi. A seguito di ION-CCI, ratti esibiscono anche i cambiamenti in risposta alla stimolazione tattile che sono indicativi di allodinia meccanica 4, 10. Durante la prima settimana (s) dopo ION-CCI, i ratti non rispondono più alla tattile lieve o moderata (ad esempio, von Frey ) stimoli. Questo iporesponsività viene poi bruscamente sostituito da un iperreattività estremo in cui anche le intensità di stimolo molto deboli provocano comportamento nocifensive. L&#39;inizio della iperresponsività può variare tra i ratti, ma la maggior parte dei ratti sono diventati hyperresponsive dopo tre o quattro settimane post-operatorio.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chromic catgut</td>
			<td>Dynek&#160;</td>
			<td>CG504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nembutal&#160; (pentobarbital)</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clippers for small animals - Favorita II</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic instrument</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment (Liposic)</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic monitor system</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>PY8 50-7221-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton applicator</td>
			<td>Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision cotton swab</td>
			<td>Qosina</td>
			<td>10225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operation microscope</td>
			<td>Kaps</td>
			<td>SOM 62</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont forceps - Micro-blunted tips (#5/45)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11253-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors - blunt tips</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14574-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyester sutures - Mersilene (4-0)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>R871H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital video camera</td>
			<td>Sony</td>
			<td>HDR-CX330E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>58011</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chronic constriction injury of the rat's infraorbital nerve (ion-cci) to study trigeminal neuropathic pain

I modelli animali sono strumenti importanti per studiare la fisiopatologia e la farmacologia del dolore neuropatico. Questo manoscritto descrive le procedure chirurgiche e comportamentali per studiare il dolore neuropatico trigeminale nei ratti. Per soddisfare la specificità del trigemino sindromi da dolore neuropatico, il nervo infraorbitale (Ion) viene sottoposto ad una lesione costrizione cronica (CCI) dal liberamente legatura del nervo. Un approccio intra-orbitale è presentato qui per esporre e legare lo ione nella cavità orbitale. Dopo IoN legatura, ratti mostrano cambiamenti nel comportamento spontaneo e in risposta a von Frey stimolazione capelli che sono indicativi di dolore persistente e allodinia meccanica. Due fasi possono essere definite nello sviluppo dei cambiamenti comportamentali. Durante la prima settimana seguente ionico CCI (fase 1), ratti mostrano un&#39;attività governare faccia maggiore e asimmetrica, cioè, con volto di lavaggio colpi diretta principalmente al territorio IoN nervo feriti. Viene fatta una distinzione tra il viso grooming comportamento che fa parte di un comportamento corpo governare più generale, che rimane in gran parte influenzato da ION-CCI, e faccia governare che non è né preceduta né seguita da una cura del corpo, che è significativamente aumentato dopo ION-CCI. Durante questo periodo, la reattività alla stimolazione meccanica del territorio ione è ridotta. Questo iporesponsività è bruscamente sostituito da un estremo iperreattività cui intensità di stimolo anche molto deboli provocare comportamenti nocifensive (fase 2). Le somiglianze fenomenologico tra queste alterazioni comportamentali e segnalati segni di dolore facciale (cioè, risposte a stimolazione nocicettiva del volto) suggeriscono la presenza di disestesia / parestesia e allodinia meccanica nel territorio IoN legatura.

Ratti ION-CCI evidenziano una forte crescita post-operatoria nella quantità di tempo speso sul viso isolato governare (Figura 1). L&#39;aumento di picchi alla fine della prima settimana post-operatorio e poi diminuisce durante le seguenti settimane. La maggior parte degli studi recenti hanno trovato faccia governare essere significativamente aumentato per un massimo di tre settimane. Faccia comportamento governare in sham operati ratti è più o meno inalterati. Ratti ION-C...

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Chronic Constriction Injury of the Rat&#039;s Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain

This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat&#8217;s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia.

Cronica Costrizione Lesioni del Rat infraorbitario Nerve (ION-CCI) per studiare trigemino Dolore neuropatico

Animal models are important tools to study the pathophysiology and pharmacology of neuropathic pain. This manuscript describes the surgical and behavioral ...

chronic-constriction-injury-rat-s-infraorbital-nerve-ion-cci-to-study

Research

JoVE Journal

Medicine

Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve (IoN-CCI) to Study Trigeminal Neuropathic Pain

19.2K Views.  University of Antwerp. This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat’s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia. 

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Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of the population1,2. Symptoms include spontaneous (tingling, burning, electric-shock like) pain, dysaesthesia, paraesthesia, allodynia (pain resulting from normally non-painful stimuli) and hyperalgesia (an increased response to painful stimuli). The sensory symptoms are co-morbid with behavioural disabilities, such as insomnia and depression. To study chronic neuropathic pain several animal models mimicking peripheral nerve injury have been developed, one of the most widely used is Bennett and Xie's (1988) unilateral sciatic nerve chronic constriction injury (CCI)3 (Figure 1). Here we present a method for performing CCI and testing pain hypersensitivity.
CCI is performed under anaesthesia, with the sciatic nerve on one side exposed by making a skin incision, and cutting through the connective tissue between the gluteus superficialis and biceps femoris muscles. Four chromic gut ligatures are tied loosely around the sciatic nerve at 1 mm intervals, to just occlude but not arrest epineural blood flow. The wound is closed with sutures in the muscle and staples in the skin. The animal is then allowed to recover from surgery for 24 hrs before pain hypersensitivity testing begins.
For behavioural testing, rats are placed into the testing apparatus and are allowed to habituate to the testing procedure. The area tested is the mid-plantar surface of the hindpaw (Figure 2), which falls within the sciatic nerve distribution. Mechanical withdrawal threshold is assessed by mechanically stimulating both injured and uninjured hindpaws using an electronic dynamic plantar von Frey aesthesiometer or manual von Frey hairs4. The mechanical withdrawal threshold is the maximum pressure exerted (in grams) that triggers paw withdrawal. For measurement of thermal withdrawal latency, first described by Hargreaves et al (1988), the hindpaw is exposed to a beam of radiant heat through a transparent glass surface using a plantar analgesia meter5,6. The withdrawal latency to the heat stimulus is recorded as the time for paw withdrawal in both injured and uninjured hindpaws. Following CCI, mechanical withdrawal threshold, as well as thermal withdrawal latency in the injured paw are both significantly reduced, compared to baseline measurements and the uninjured paw (Figure 3). The CCI model of peripheral nerve injury combined with pain hypersensitivity testing provides a model system to investigate the effectiveness of potential therapeutic agents to modify chronic neuropathic pain. In our laboratory, we utilise CCI alongside thermal and mechanical sensitivity of the hindpaws to investigate the role of neuro-immune interactions in the pathogenesis and treatment of neuropathic pain.

Due to the simplicity of surgery and the robust behavioural outcome, chronic constriction of the sciatic nerve is one of the pre-eminent animal models of neuropathic pain. Within 24 hrs following surgery, pain hypersensitivity is established and can be quantitatively measured using a von Frey aesthesiometer (mechanical test) and plantar analgesia meter (thermal test).

La costrizione cronica del nervo sciatico e Ipersensibilità Testing Pain in Rats

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of ...

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Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim) for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. It has been extensively used in various clinical settings. Based upon recent discoveries related to the systemic effects of voluntary breathing and intrinsic physiological interactions among systems during voluntary breathing, a new EStim protocol, Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim), has been developed to augment the effects of electrical stimulation. In BreEStim, a single-pulse electrical stimulus is triggered and delivered to the target area when the airflow rate of an isolated voluntary inspiration reaches the threshold. BreEStim integrates intrinsic physiological interactions that are activated during voluntary breathing and has demonstrated excellent clinical efficacy. Two representative applications of BreEStim are reported with detailed protocols: management of post-stroke finger flexor spasticity and neuropathic pain in spinal cord injury.

Breathing-controlled Electrical Stimulation BreEStim for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

The purpose is to present a new method, breathing-control electrical stimulation (BreEStim) for management of neuropathic pain and spasticity.

Respirazione controllata stimolazione elettrica (BreEStim) per la gestione del dolore neuropatico e spasticità

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized by increased urgency and frequency of urination, as well as nocturia and general pelvic pain, especially upon bladder filling or voiding. Despite years of research, the cause of IC/BPS remains elusive and treatment strategies are unable to provide complete relief to patients. In order to study nervous system contributions to the condition, many animal models have been developed to mimic the pain and symptoms associated with IC/BPS. One such murine model is urinary bladder distension (UBD). In this model, compressed air of a specific pressure is delivered to the bladder of a lightly anesthetized animal over a set period of time. Throughout the procedure, wires in the superior oblique abdominal muscles record electrical activity from the muscle. This activity is known as the visceromotor response (VMR) and is a reliable and reproducible measure of nociception. Here, we describe the steps necessary to perform this technique in mice including surgical manipulations, physiological recording, and data analysis. With the use of this model, the coordination between primary sensory neurons, spinal cord secondary afferents, and higher central nervous system areas involved in bladder pain can be unraveled. This basic science knowledge can then be clinically translated to treat patients suffering from IC/BPS.

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized in part by pelvic pain. In order to study nervous system contributions to the condition, a physiological model of urinary bladder pain is used in mice and rats.

Vescica urinaria Distensione Evocati visceromotoria Risposte come un modello per il dolore della vescica nei topi

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

The Sciatic Nerve Cuffing Model of Neuropathic Pain in Mice

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in injured sensory neurons and along the entire nociceptive pathway within the central nervous system. It is usually chronic and challenging to treat. In order to study neuropathic pain and its treatments, different models have been developed in rodents. These models derive from known etiologies, thus reproducing peripheral nerve injuries, central injuries, and metabolic-, infectious- or chemotherapy-related neuropathies. Murine models of peripheral nerve injury often target the sciatic nerve which is easy to access and allows nociceptive tests on the hind paw. These models rely on a compression and/or a section. Here, the detailed surgery procedure for the &#34;cuff model&#34; of neuropathic pain in mice is described. In this model, a cuff of PE-20 polyethylene tubing of standardized length (2 mm) is unilaterally implanted around the main branch of the sciatic nerve. It induces a long-lasting mechanical allodynia, i.e., a nociceptive response to a normally non-nociceptive stimulus that can be evaluated by using von Frey filaments. Besides the detailed surgery and testing procedures, the interest of this model for the study of neuropathic pain mechanism, for the study of neuropathic pain sensory and anxiodepressive aspects, and for the study of neuropathic pain treatments are also discussed.

Neuropathic pain is a consequence of a lesion or disease affecting the somatosensory system. The &#8220;cuff model&#8221; of neuropathic pain in mice consists of the implantation of a polyethylene cuff around the main branch of the sciatic nerve. Mechanical allodynia is tested using von Frey filaments.

Il nervo sciatico ammanettare modello di dolore neuropatico nei topi

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in ...

Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury

The goal of this surgical protocol is to expose the facial nerve, which innervates the facial musculature, at its exit from the stylomastoid foramen and either cut or crush it to induce peripheral nerve injury. Advantages of this surgery are its simplicity, high reproducibility, and the lack of effect on vital functions or mobility from the subsequent facial paralysis, thus resulting in a relatively mild surgical outcome compared to other nerve injury models. A major advantage of using a cranial nerve injury model is that the motoneurons reside in a relatively homogenous population in the facial motor nucleus in the pons, simplifying the study of the motoneuron cell bodies. Because of the symmetrical nature of facial nerve innervation and the lack of crosstalk between the facial motor nuclei, the operation can be performed unilaterally with the unaxotomized side serving as a paired internal control. A variety of analyses can be performed postoperatively to assess the physiologic response, details of which are beyond the scope of this article. For example, recovery of muscle function can serve as a behavioral marker for reinnervation, or the motoneurons can be quantified to measure cell survival. Additionally, the motoneurons can be accurately captured using laser microdissection for molecular analysis. Because the facial nerve axotomy is minimally invasive and well tolerated, it can be utilized on a wide variety of genetically modified mice. Also, this surgery model can be used to analyze the effectiveness of peripheral nerve injury treatments. Facial nerve injury provides a means for investigating not only motoneurons, but also the responses of the central and peripheral glial microenvironment, immune system, and target musculature. The facial nerve injury model is a widely accepted peripheral nerve injury model that serves as a powerful tool for studying nerve injury and regeneration.

We present a surgical protocol detailing how to perform a cut or crush axotomy on the facial nerve in the mouse. The facial nerve axotomy can be employed to study the physiological response to nerve injury and test therapeutic techniques.

Facial assotomia Nerve in topi: un modello per studiare motoneuroni risposta al danno

The goal of this surgical protocol is to expose the facial nerve, which innervates the facial musculature, at its exit from the stylomastoid foramen and ...

Subcutaneous Trigeminal Nerve Field Stimulation for Refractory Facial Pain

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. Neuromodulation techniques for chronic facial pain include deep brain stimulation and motor cortex stimulation, which are complex to perform. Subcutaneous nerve field stimulation is certified for chronic back pain and is the least invasive form of neuromodulation. We applied this technique to treat chronic and neuropathic trigeminal pain as an individual therapy concept. First, trial stimulation is performed. Subcutaneous leads are placed in the painful trigeminal dermatome under local anesthesia. The leads are connected to an external neurostimulator that applies constant stimulation. Patients undergo a 12 day outpatient trial to assess the effect of the stimulation. Electrodes are removed after the trial. If the patient reports pain reduction of at least 50% in intensity and/or attack frequency, a reduction in medication or increase in quality of life, permanent implantation is scheduled. New electrodes are implanted under general anesthesia and are subcutaneously tunneled to an infraclavicular internal pulse generator. Patients are able to turn stimulation on and off and to increase or decrease the stimulation amplitude as needed.
This technique represents a minimal invasive alternative to other more invasive means of neuromodulation for trigeminal pain such as motor cortex stimulation or deep brain stimulation.

Treating chronic or neuropathic facial pain can be challenging when medical or standard treatment fails. Subcutaneous nerve field stimulation is the least invasive form of neuromodulation and is used for chronic back pain. We applied this technology to treat chronic and neuropathic trigeminal facial pain.

Stimolazione del campo nervoso trigeminale sottocutaneo per dolore facciale refrattario

Chronic or neuropathic trigeminal facial pain can be challenging to treat. Neurosurgical procedures should be applied when conservative treatment fails. ...

Development of Recombinant Proteins to Treat Chronic Pain

Chronic pain is difficult to treat and new approaches to resolve persistent pain are urgently needed. Anti-inflammatory cytokines are promising candidates for treating debilitating pain conditions due to their capacity to regulate aberrant neuro-immune interactions. However, physiologically they work in a network of various cytokines, and therefore their therapeutic effect may not be optimal when used as stand-alone drugs. To overcome this limitation, we developed a fusion protein of the anti-inflammatory cytokines IL4 and IL10. Here, we describe the methods for production and quality control of IL4-10 recombinant fusion protein and we test the effectiveness of the IL4-10 fusion protein to resolve pain in a mouse model of persistent inflammatory pain.

In this paper we provide details for the methods of production and quality control of an IL4-10 recombinant fusion protein. We also show how to test the effectiveness of this protein to resolve pain in a mouse model of inflammatory pain.

Sviluppo di proteine ricombinanti per trattare il dolore cronico

Chronic pain is difficult to treat and new approaches to resolve persistent pain are urgently needed. Anti-inflammatory cytokines are promising candidates ...

Partial Sciatic Nerve Ligation: A Mouse Model of Chronic Neuropathic Pain to Study the Antinociceptive Effect of Novel Therapies

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. Chronic neuropathic pain results from lesions or diseases in the somatosensory system. To investigate potential therapies with reduced side effects, animal pain models are the gold standard in preclinical studies. Therefore, well-characterized and well-described models are crucial for the development and validation of innovative therapies. 
Partial ligation of the sciatic nerve (pSNL) is a procedure that induces chronic neuropathic pain in mice, characterized by mechanical and thermal hypersensitivity, ongoing pain, and changes in limb temperature, making this model a great fit to study neuropathic pain preclinically. pSNL is an advantageous model to study neuropathic pain as it reproduces many symptoms observed in humans with neuropathic pain. Furthermore, the surgical procedure is relatively fast and straightforward to perform. Unilateral pSNL of one limb allows for comparison between the ipsilateral and contralateral paws, as well as evaluation of central sensitization. 
To induce chronic neuropathic hypersensitivity, a 9-0 non-absorbable nylon thread is used to ligate the dorsal third of the sciatic nerve. This article describes the surgical procedure and characterizes the development of chronic neuropathic pain through multiple commonly used behavioral tests. As a plethora of innovative therapies are now being investigated to treat chronic pain, this article provides crucial concepts for standardization and an accurate description of surgeries required to induce neuropathic pain.

Partial sciatic nerve ligation induces long-lasting chronic neuropathic pain, characterized by exaggerated responses to thermal and mechanical stimuli. This mouse model of neuropathic pain is commonly used to study innovative therapies for pain management. This article describes in detail the surgical procedure to improve standardization and reproducibility.

Legatura parziale del nervo sciatico: un modello murino di dolore neuropatico cronico per studiare l'effetto antinocicettivo di nuove terapie

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. ...

Migliorare la terapia con FSN nel modello di ratto: minimizzare il disagio e massimizzare l'efficienza

Efficacy of Fu's Subcutaneous Needling on Sciatic Nerve Pain: Behavioral and Electrophysiological Changes in a Chronic Constriction Injury Rat Model

Fu&#39;s subcutaneous needling (FSN), an invented acupuncture technique from traditional Chinese medicine, is used worldwide for pain relief. However, the mechanisms of action are still not fully understood. During FSN treatment, the FSN needle is inserted and retained in the subcutaneous tissues for a long duration with a swaying movement. However, challenges arise from maintaining a posture while manipulating FSN in animal models (e.g., rats) for researchers. Uncomfortable treatment can lead to fear and resistance to FSN needles, increasing the risk of injury and may even affect research data. Anesthesia may also affect the study results too. Hence, there is a need for strategies in FSN therapy on animals that minimize injury during the intervention. This study employs a chronic constriction injury model in Sprague-Dawley rats to induce neuropathic pain. This model replicates the pain induced by nerve injury observed in humans through surgical constriction of a peripheral nerve, mimicking the compression or entrapment seen in conditions such as nerve compression syndromes and peripheral neuropathies. We introduce an appropriate manipulation for easily inserting an FSN needle into the subcutaneous layer of the animal&#39;s body, including needle insertion and direction, needle retention, and swaying movement. Minimizing the rat&#39;s discomfort prevents the rat from being tense, which causes the muscle to contract and hinder the entry of the needle and improves the study efficiency.

Autore in primo piano: Svelare gli effetti terapeutici del trattamento con FSN – Collegare la ricerca e le applicazioni cliniche nel dolore neuropatico

We present a protocol for using Fu's subcutaneous needling in a chronic constriction injury model to induce sciatic nerve pain in rats.

Efficacia dell'agugliatura sottocutanea di Fu sul dolore al nervo sciatico: cambiamenti comportamentali ed elettrofisiologici in un modello di ratto con lesione da costrizione cronica

Fu&#39;s subcutaneous needling (FSN), an invented acupuncture technique from traditional Chinese medicine, is used worldwide for pain relief. However, the ...