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Il saggio di bioluminescenza ATP

Panoramica

Nelle lucciole, l'enzima luciferasi converte un composto chiamato luciferina in ossiluciferina e produce luce o "luminescenza" di conseguenza. Questa reazione richiede energia derivata dall'ATP per procedere, quindi i ricercatori hanno sfruttato l'interazione luciferasi-luciferina per misurare i livelli di ATP nelle cellule. Dato il ruolo dell'ATP come valuta energetica della cellula, il test di bioluminescenza dell'ATP può fornire informazioni sul metabolismo cellulare e sulla salute generale delle cellule.

In questo video, JoVE discute la respirazione cellulare, in particolare esaminando come il metabolismo del glucosio provoca la produzione di ATP. Questo è seguito dai principi alla base del test di bioluminescenza ATP e da un protocollo generalizzato per questa tecnica. Infine, un'indagine su come i ricercatori stanno attualmente utilizzando il test di bioluminescenza ATP per valutare la vitalità cellulare in una varietà di condizioni sperimentali.

Procedura

Il test di bioluminescenza ATP è una tecnica comune utilizzata per quantificare i livelli di ATP e rilevare cellule viventi metabolicamente attive. L'ATP o adenosina trifosfato è la fonte primaria di energia per tutti gli organismi viventi, e per "tutti" intendiamo TUTTI. A livello cellulare, l'ATP viene generato attraverso una serie di processi metabolici chiamati respirazione cellulare.

Oggi discuteremo brevemente i percorsi coinvolti nella respirazione cellulare. Successivamente, introdurremo i principi alla base

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