Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo delle neuroscienze comportamentali, come ad esempio come comprendere meglio i meccanismi biologici sottostanti della PTSD. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è robusta, affidabile, quantitativa e può essere eseguita in più specie. Inizia istituendo una serie di camere di condizionamento della paura per fungere da contesto A e una seconda serie di camere di condizionamento della paura per fungere da contesto B.Posiziona ogni camera di condizionamento della paura all'interno di un cubicolo attenuante del suono per prevenire intrusioni di rumore esterno.
Quindi posizionare i pavimenti della griglia in ogni camera di condizionamento della paura per la consegna degli urti del piede, utilizzando un modello di griglia diverso per ogni contesto per differenziare la trama del pavimento tra i contesti. Posizionare quindi inserti triangolari in plexiglass nero nel contesto B per differenziare il layout interno dei due contesti. Pulire le pareti e le porte della camera e spruzzare le padelle sotto i pavimenti della griglia con una soluzione di pulizia diluita.
Dopo aver pulito il pavimento della griglia, collegare un generatore d'urto e uno scrambler in grado di fornire un ammortizzatore da 1 milliamp o di ampiezza inferiore a ciascun piano della griglia per la consegna degli urti del piede. Infine, utilizzare un multimetro per testare la corrente erogata dal generatore d'urto posizionando ogni sonda su una barra diversa del pavimento della griglia e confermando che viene prodotta l'ampiezza d'urto desiderata. Il primo giorno, impostare il contesto A con pavimenti a griglia e luce visibile.
Assicurarsi che il multimetro sia collegato a diverse barre per confermare l'ampiezza d'urto desiderata. Trasporta gli animali dal vivaio alla stanza sperimentale nelle loro gabbie di casa poste su un carrello e posizionale individualmente nelle quattro camere di condizionamento della paura. Per gli esperimenti sui topi, utilizzare il generatore di urti e gli scrambler per fornire 10 un secondo, un millimetro di shock del piede presentati casualmente per oltre 60 minuti attraverso i pavimenti a griglia delle camere contenenti soggetti con trauma.
Per gli esperimenti sui topi, utilizzare il generatore d'urto e gli scrambler per fornire 15 un secondo, un millimetro di shock del piede presentati casualmente per oltre 90 minuti attraverso le barre della griglia delle camere contenenti soggetti con trauma. Dopo 90 minuti per il topo, o 60 minuti per gli esperimenti sui topi, riportare tutti gli animali nelle loro gabbie di casa e tornare prontamente al vivaio. Il secondo giorno, impostare il contesto A e trasportare gli animali nella sala sperimentale come fatto il primo giorno.
Posizionare gli animali nel contesto A per otto minuti, senza consegna degli urti, e registrare il comportamento durante l'intera sessione. Dopo otto minuti, riportare tutti gli animali nelle loro gabbie di casa e tornare prontamente al vivaio. Il terzo giorno, impostare il contesto B con un diverso set di pavimenti a griglia da quelli utilizzati nel contesto A e inserti in plexiglass curvo triangolare o bianco nero.
Utilizzare la luce infrarossa o vicino all'infrarosso, se necessario, per illuminare le camere e controllare l'ampiezza dell'ammortizzatore con il multimetro. Pulire le camere e spruzzare le padelle sotto i pavimenti della griglia con la soluzione non utilizzata nel contesto A.Successivamente, trasportare gli animali dal vivaio alla stanza sperimentale in una vasca di plastica nera e metterli singolarmente in camere di condizionamento della paura. Dopo un periodo di riferimento di 180 secondi, fornire un solo secondo, uno shock del piede di un milliamp per i ratti o un singolo shock di due secondi, un piede da millepiedi per i topi, a tutti gli animali.
Quindi, rimuovere tutti gli animali 30 secondi dopo la consegna degli urti e tornare prontamente al vivaio. Il quarto giorno della procedura, impostare il contesto B come fatto il terzo giorno. Trasporta gli animali dal vivaio alla sala sperimentale nello stesso trasporto effettuato il terzo giorno.
Posizionare gli animali nel contesto B per otto minuti senza la consegna degli urti e il congelamento dei record video durante la sessione. Infine, rimuovere tutti gli animali dopo otto minuti e tornare prontamente al vivaio. I risultati indicano che gli animali in condizioni di trauma hanno mostrato livelli significativamente più elevati di congelamento nel contesto A rispetto ai controlli senza traumi, indicando l'acquisizione della paura nel contesto del trauma.
Sia il trauma che nessun trauma gli animali hanno mostrato livelli minimi di congelamento che non differivano l'uno dall'altro. Inoltre, gli animali traumat traumattica hanno mostrato una minore reattività agli shock rispetto ai controlli senza traumi e gli animali traumat traumattori hanno mostrato un congelamento maggiore rispetto ai controlli senza traumi, indicando che l'esposizione allo stressante traumatico ha aumentato la paura immediatamente dopo il lieve stressante. Seguendo questa procedura, è possibile eseguire altri metodi come il labirinto più elevato, il campo aperto e la scatola chiaro-scuro per rispondere a domande aggiuntive come come il trauma influisce sui fenotipi simili all'ansia.
