Forniamo un metodo preciso e DiCharacter per le valutazioni funzionali degli animali da laboratorio. È sensibile e affidabile e privo di carenze attribuite ad altri metodi per le valutazioni funzionali. Ad esempio, l'indice funzionale sciatico.
Per iniziare, impostare due fogli di plastica trasparente su entrambi i lati del tapis roulant per far camminare un topo LEWIS maschio di 12 settimane in direzione anteriore dritta, quindi accendere la griglia di scosse elettriche. Fare camminare ogni topo sul tapis roulant. Accelerare gradualmente il tapis roulant alla velocità desiderata di 20 centimetri al secondo e lasciare camminare normalmente il topo a questa velocità per cinque minuti.
Dopo ogni sessione di camminata, fornire una pausa di riposo da uno a due minuti. Ripeti questo processo tre volte al giorno cinque giorni alla settimana per una settimana. Mentre il topo riceve anestesia stabile attraverso la maschera anestetica, radere un'area dalla parte bassa della schiena ai malleoli bilaterali utilizzando un rasoio elettrico.
Posizionare il topo nella posizione prona. Usa una pennarello nera per contrassegnare i punti di riferimento ossei sulla pelle rasata, una linea attraverso i processi spinosi dalle vertebre lombari a le vertebre sacrali. Inoltre, usa un pennarello nero per segnare le spine iliache anteriori / superiori, le trochanters maggiori, le articolazioni del ginocchio, i malleoli laterale, le quinto articolazioni falangeali metatarsali e la punta del quarto dito.
Quindi utilizzare un adesivo liquido per attaccare marcatori emisferici a questi punti di riferimento ossei ad eccezione della linea attraverso i processi spinosi dal lombare alle vertebre sacrali e alla punta del quarto dito del piedi. Dopo aver posizionato tutti i marcatori, rimettere il topo nella gabbia. Non mettere il topo sul tapis roulant fino a quando non si riprende completamente dall'anestesia.
Impostare due fogli di plastica trasparente su entrambi i lati del tapis roulant e posizionare la scatola di calibrazione al centro del tapis roulant. Aprire il software di registrazione e quindi fare clic sull'icona dell'immagine di calibrazione sul display. Fare clic sull'icona di registrazione per registrare da uno a due secondi di video da quattro direzioni utilizzando 120 telecamere CCD hertz.
Fare di nuovo clic sull'icona di registrazione per interrompere la registrazione. Aprire i file video nel software di calcolo. Fare clic e trascinare i punti caratteristici dei modelli 3D della casella di calibrazione nell'angolo in basso a destra dello schermo sui marcatori corrispondenti sulle quattro immagini che vengono automaticamente trasformati dal video nel modello di calibrazione.
Quindi clicca sull'icona salva. Ora tosti la scatola di calibrazione dal tapis roulant, accendi la griglia di scosse elettriche e posiziona il topo completamente sveglio sul tapis roulant. Aprire il software di registrazione e inserire le informazioni di base sul ratto, incluso il numero di serie, la velocità di camminata e il nome dell'operatore principale.
Accendere il tapis roulant e impostare la velocità su 20 centimetri al secondo. Dopo che il topo si adatta alla velocità ed è in grado di camminare normalmente, fare clic sull'icona di registrazione sul display per registrare il topo che cammina con le quattro telecamere. Una volta registrati oltre 10 passaggi, fare di nuovo clic sull'icona per interrompere la registrazione e spegnere il tapis roulant.
Rimettere il topo nella camera di induzione dell'anestesia per l'anestesia. Mentre il ratto è in anestesia continua attraverso la maschera anestetica, rimuovere i marcatori emisferici. Aprire il software di calcolo e aprire il file video sull'interfaccia.
Fare clic e trascinare la barra di controllo bilaterale sulla barra di stato del video per assicurarsi che vengano visualizzati solo un record di camminata del tapis roulant in 10 passi. Fare clic e trascinare ogni punto caratteristico dal modello 3D nell'angolo in basso a destra dello schermo al marcatore corrispondente su ciascuna delle quattro immagini iniziali dei video scattate dalle telecamere. Quindi fare clic sull'icona di traccia automatica per avviare il processo di tracciamento automatico dei marcatori.
Se il sistema non traccia con precisione un marcatore, fare clic sull'icona digitalizzare manualmente per passare alla modalità di tracciamento manuale, fare clic sul punto caratteristico di tracciatura nel modello 3D e quindi sul marcatore che risponde nell'immagine. Una volta fatto clic sul marcatore, assicurarsi che l'immagine passi al fotogramma successivo del video. Ora fai continuamente clic sul marcatore fino al completamento del processo di tracciamento dei marcatori.
Una volta terminato, fai clic sull'icona salva. Aprire il software di analisi e quindi aprire il file video elaborato sull'interfaccia. Fare clic sull'icona di impostazione e selezionare e aggiungere parametri designati come l'angolo della caviglia, l'angolo della dito del mouse e lo spostamento pelvico all'elenco di visualizzazione nella finestra popup a destra.
Fate clic su OK in modo che le curve che rappresentano le modifiche al valore nei parametri appaiano sull'interfaccia. Fate clic sull'icona di misura e selezionate Elaborazione uniforme nel menu a discesa. Immettere 20 hertz nella finestra popup per rimuovere le frequenze superiori a 20 hertz all'interno delle curve.
Attraverso l'analisi cinematica 3D, il rapporto medio della posizione o della fase di oscillazione nel ciclo in 10 fasi è stato calcolato e rappresentato automaticamente sull'interfaccia. Ogni posizione bilaterale e fase di oscillazione in periodi di ciclo in 10 fasi per il gruppo di controllo, una settimana dopo l'intervento chirurgico, tre settimane dopo l'intervento chirurgico e sei settimane di gruppi post-chirurgici sono mostrati qui. La normale forma della traiettoria del centro di gravità assomiglia al segno dell'infinito.
La forma della traiettoria del centro di gravità non è tornata a una forma normale fino a sei settimane dopo l'intervento chirurgico. Il valore medio dell'angolo della caviglia o della dita dei dito nella fase di dito del dito suggerito che sono migliorati in una direzione verso l'alto dopo l'intervento chirurgico. Individuare i punti di riferimento ossei sulla pelle rasata nel modo più attento e corretto possibile è la cosa più importante.
l'analisi sul nervo sciatico può essere eseguita e rivelerà la relazione tra cambiamenti funzionali e istologici.
