Il significato del nostro protocollo è che la misurazione dell'elettrocardiogramma può essere eseguita con grande sensibilità in un piccolo topo che è stato manipolato geneticamente o farmacologicamente. Il protocollo è vantaggioso in quanto è semplice, veloce, economico e sensibile. Inoltre, può essere eseguito su piccoli topi, anche neonati.
Crediamo che questo metodo contribuirebbe alla comprensione delle regioni inesplorate di aritmia nell'area cardiovascolare. A dimostrare la procedura sarà Tae Woong Ha del mio laboratorio. Inizia aprendo il software di analisi e configuralo per l'acquisizione dei dati ECG.
Passare a Impostazioni di installazione e canale e impostare la frequenza di campionamento su 2.000 campioni al secondo. Impostare l'intervallo su 20 millivolt e l'amplificatore di ingresso su 200 Hertz di passaggio basso. Passare quindi a Analisi ECG e Impostazioni ECG, quindi scegliere Mouse nel predefinito impostazioni di rilevamento e analisi.
Nel pannello Media, scegliete di concatenare e cicli cardiaci consecutivi in un singolo segnale medio o vista media e in una vista tabella. Nel pannello QTc, selezionate il metodo Bazett, definito come il valore corretto della frequenza cardiaca dell'intervallo QT. Posizionare il mouse sulla scala di precisione e registrarne il peso.
Dopo aver fatto in modo che il mouse sia correttamente anestetizzato inserire elettrodi con aghi di agopuntura negli arti anteriori destro e sinistro e nell'arto posteriore sinistro. Assicurarsi che la profondità e la posizione dell'elettrodo siano coerenti durante gli esperimenti. Collegare le altre estremità degli elettrodi facendo clic su di essi nei tre connettori a scatto all'altra estremità dei fili di piombo del cavo bioamplificatore a tre conduttori e iniettare farmaci circa tre minuti dopo gli anestetici.
10 minuti dopo la somministrazione degli anestetici, iniziare a registrare l'ECG. Una volta completata la registrazione, utilizzare i dati ECG da 12 a 17 minuti dopo l'iniezione di anestetici per l'analisi. Al termine, rimuovere con cura gli elettrodi.
Per determinare se questa misurazione non invasiva dell'ECG riflette l'influenza della modulazione autonomica sul sistema di conduzione cardiaca, i normali topi BALB/c sono stati sfidati con agonisti e antagonisti del sistema nervoso autonomo. Rispetto al controllo del veicolo, la frequenza cardiaca è aumentata significativamente nei topi trattati con atropina e isoprenalina ed è caduta con carbacholo. Inoltre, l'intervallo QTc è aumentato in topi trattati con atropina e isoprenalina e è diminuito nei topi trattati con carbacholo.
Qui vengono mostrate le viste rappresentative del grafico e le viste medie dei segnali ECG in atropina, carbacholo e topi trattati con veicoli. Quando si tenta questo protocollo, la cosa più importante è assicurarsi che gli elettrodi ECG siano inseriti in modo sicuro durante l'esperimento. Eseguire più esperimenti preliminari fino a quando i segnali ECG non sono stabili e coerenti.
Le nostre precedenti pubblicazioni con topi hanno confermato le variazioni dell'ECG che erano state riportate negli studi genetici umani, che supporta l'utilità di questo metodo in aree di ricerca cardiovascolare come l'aritmia.
