アセンブリおよびイオン チャネルをドープした脂質膜から成る分子 Memristors のキャラクタリゼーション

要約

ソフト、低消費電力、生体分子 memristors は活用と同様の組成、構造、およびスイッチング バイオ シナプス機構です。ここで紹介を組み立てるし、生体分子 memristors を特徴付けるプロトコルは絶縁油中水滴間に形成される脂質二重層から取得します。メムリスティブ イオン伝導膜の電圧作動したアラメチシン ペプチド結果定款。

要約

コンピューティング システムを同等の効率と密度と脳の認知力をエミュレートしようとする神経は合成回路においてシナプスの機能を再現する能力が欠かせません。日には、3 端子シリコン トランジスタ、2 端子 memristors 使用されている広く能力共同情報処理およびメモリを検索するための大部分の神経回路で。これらのデバイスは相互接続性、脳の複雑性を達成することはできませんので、まだパワーハングリー、失敗、シナプスの重要な機能を模倣し、高ノイズと高電圧をスイッチングに苦しみます。これらの制限を克服するために開発し、組成、構造、および生物学的シナプスのスイッチング特性を模倣した生体分子 memristor を特徴付けられます。ここで組立のプロセスについて述べる、脂質修飾の水滴はオイルの間に形成され、電圧作動したアラメチシン ペプチドをドープした 5 nm 厚の脂質二重層からなる生体分子 memristors を特徴付けます。液滴インターフェイス層メソッドのために不可欠の主要な修正に焦点を当ててこの記事と同様のアセンブリ プロトコルは、液滴脂質膜と膜結合型イオン チャネルの生物物理学的性質を調べるに使用されてきたが、memristor の一貫性のあるパフォーマンスを達成します。具体的には、我々 は、memristors の全体的な応答のリポソームの調製とアラメチシン ペプチド脂質二分子膜の定款およびその影響と同様に、各成分の適切な濃度をについて説明します。我々 も短期可塑性と同様、サイクリックボルタンメトリー、を介して取得し、ステップごとに応答学習メムリスティブ電流-電圧特性の測定と解析を含む生体分子 memristors の評価プロセスを詳細します。電圧パルス。

概要

それは広く生物学的シナプス高効率と能力を学ぶし、非常に適応の方法で情報を処理するための脳の巨大な並列処理の責任があることが認識されます。この調整機能を両方短期的および長期的なシナプス可塑性^1,2,の^3,4,5そのドライブ、複数の非常に複雑な分子メカニズムから出ています。ニューロ コンピュータ システム レベル脳型コンピューター^6、7の次の世代に必要な密度、複雑さ、および脳のエネルギー効率に近づいているシナプスの機能をエミュレートすることを目指してください。^,8しますただし、事実上⁹、代わりに設計と受信信号に適応でき、記憶の新しいハードウェア要素の作製を必要とするは、伝統的な電子回路素子を用いたシナプスの機能を再現。情報履歴⁹。これらの種類のシナプスに触発されたハードウェアとして知られている mem 要素^9,10,11 (略してメモリ要素) で^119,・ ディ ・ Ventra らによると、受動的、2 端子デバイスが抵抗、キャパシタンス、インダクタンスは外部からの刺激への応答で再構成でき、前の状態¹¹を覚えています。頭脳のそれらに近づいているエネルギー消費レベルを達成するためにこれらの要素は、類似の材料とシナプス可塑性¹²メカニズムを採用すべき。

日には、2 端子 memristors^13,14,15主に高スイッチング電圧および高ノイズによって特徴付けられる補完の金属酸化膜半導体 (CMOS) 技術を使用して構築されています。この技術は、高い消費電力と低密度のためにまたスケーリングしません。これらの制限に対処するため、複数の有機・高分子 memristors を最近構築されています。ただし、これらのデバイスは、導電性高分子マトリックス^16,17まで時間のかかるイオン拡散によるスイッチング速度が遅くダイナミクスを展示します。その結果、両方の CMOS ベースおよび有機メムリスティブ デバイスがシナプスをほうふつさせる機能をエミュレート メカニズムが高い現象、のみいくつかシナプス機能などスパイク タイミング依存可塑性 (STDP)^を網羅18、他のキーを見渡せる機能が脳のシナプス前、短期可塑性¹⁹など、強力で効率的なコンピューターを作ることに重要な役割を果たします。

最近では、紹介したメムリスティブ デバイス¹²生体脂質膜に組み込まれている電圧作動したペプチドを備えた生体分子組成、膜構造、およびイオン チャネル トリガー スイッチを模した新しいクラス生物学的シナプス²⁰のメカニズム。 ここでは、組み立て、電気これら 2 つの端末を調査する方法について述べる学習アプリケーション¹²オンラインの実装の短期可塑性を評価する方法の特定の焦点を。デバイス アセンブリが使用されている広く近年モデル膜²¹と膜結合型イオン チャネル^{22,23の生物物理学の研究に、液滴インターフェイス層 (DIB)21メソッドに基づいてください。 24}, 刺激応答性材料^25,26の開発のためのビルディング ブロックとして。私たちはニューロ アプリケーションに興味のある方膜アセンブリと尋問プロセスの詳細を説明するが、生体材料または膜生物学の経験が限られています。プロトコルにはも²⁷デバイスの動的な再構成可能な電気的特性を与えられたアセンブリ プロセスと同様に重要である評価手順の完全な説明が含まれます。ここで説明した手順と代表の結果は、低コスト、低消費電力、脂質インターフェイスおよびニューラルネットワークコンピューティング、自律構造、システム、アプリケーションの他の生体に基づいたソフト mem 要素の新しいクラスの基礎さらに適応脳-コンピューターのインターフェイス。

プロトコル

1 一般的な説明と注意事項

1. 適している、破損していない測定混合ガラス製品 (フラスコ、ビーカー、等)、他の器具 (へら、スクープ等) 用を選択します。
2. 慎重に損傷を防ぐため、ガラスを処理し、指先から残基とガラス/実験器具の汚染を避けるために、お肌を保護するためにラテックスやニトリル手袋を着用します。
3. きれいな選ばれたガラス製品/実験器具まできれいな柔らかいボトル ブラシとすべての残基をスクラブして洗剤と水を使用して徹底的に削除されます。
4. 水道水と純水 (DI)、徹底的にすすいでください。乾燥空気にラックの場所は乾燥します。
5. オプション:リンス イソプロピル (IPA、99.5%) と洗浄ガラス/実験器具任意の汚染物質 (~ 2 h) の無料であることを確認するすべての残留 IPA の蒸発を真空下で配置します。真空チャンバーから除去し、クリーンな環境に置き。
   注: は、ガラス製品や実験器具を拭くため糸くずのおしりふきを使用します。購入し、材料の準備とサンプルの保管用滅菌の小さなガラスの瓶と安全ロック チューブを使用します。ガラス クリーニング、その他ラボの標準操作手順の詳細については、ゼウス科学教育データベース²⁸を参照してください。

2. 水性緩衝液の調製

1. ラテックスやニトリル手袋をはめて、選択緩衝水溶液 50 mL を準備する適切かつ清潔なガラス容器 (500 mM 塩化ナトリウム (KCl)、10 mM 3-(N morpholino) propanesulfonic 酸 (モップ)、pH 7.0)。
2. デジタル、高精度の質量バランスときれいなヘラを使用して、クリーン計量紙に KCl の 1.86378 g を塗布し、ガラス容器に追加。
   注: KCl とモップの量は目的のボリュームによって異なりますが、最終濃度を必要に応じています。
3. モップの 0.10463 グラムの重量を量るし、ガラスのコンテナーに追加します。その後、追加・ ディ ・水 50 mL ガラス容器と渦に徹底的に KCl とモップを完全に溶解するまで。
4. 室温で緩衝液を格納し、必要なときに使用します。
   注: 緩衝液は、比較的長い期間にわたって保存できますが、お勧め良いとより一貫性のある結果を得るのため作りたての緩衝液を使用します。

3. リポソームの調製

注: 手順 3.1 は、リン脂質として凍結乾燥粉末を取得し、リン脂質をクロロホルムで購入した場合スキップする可能性がある場合にのみ適用されます。

1. 1,2-diphytanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DPhPC) または 5 mL 滅菌バイアルにクロロホルム 1 mL で脳総脂質抽出 (容器) 脂質の 5 mg を溶解します。
2. ゆっくり旋回しながら脂質膜のままバイアルの底まで乾燥窒素の穏やかな流れの下でクロロホルムを蒸発させます。
3. 残留クロロホルムの完全な除去のために 10 〜 12 時間の真空下での脂質膜を含むバイアルを配置します。
4. 真空チャンバーからバイアルを外し、2 mg/mL の最終的な脂質濃度を達成するステップ 2 で準備して水性緩衝液 10 mL を追加することにより、脂質膜を水分補給。
5. (-20 °C) を凍結し、多重リポソーム アセンブリを容易にする脂質懸濁液を 6 回完全に解凍します。
   注: は、混合物は加熱された環境で決して室温で解凍しましょう。
6. 市販押出機を使用すると、強制的に完全な脂質濁液 0.1 μ m の細孔径トラック エッチング膜のリポソーム液を押し出します。適切な脂質単分子膜の形成に必要な c. a. キャスバル 100 nm の直径を持つ単層リポソームを取得するすぐに連続で 11 回懸濁液を押し出します。4 °C のリポソーム懸濁液を保存し、調製後 1 週間以内使用します。シンプルさ、結果のリポソーム液として"A"を参照してください。
   注: 容器リポソームの押出、研究者は容器脂質の 45-50 °C、相転移より高い押出機ウォーム アップすることが推奨温度 (〜 37 °C)^23,29, 容易に押出を有効にします。和容器リポソーム懸濁液も直接用意できます (凍結融解と押出) 代わりに 55 °C ~ 15 分お風呂超音波発生装置内に閉じた懸濁液バイアルを配置することによって。

4. アラメチシン ペプチドの再構成

注: この手順は、1 μ M の最終的な集中にリポソーム内アラメチシン再構成のプロセスをについて説明します。この濃度は nA レベル流れそれらの以前に発行された¹²のように誘導するために十分です。スイッチングのしきい値を削減し、印加電圧²⁹によって引き起こされる流れの振幅を増加ペプチド濃度を増加させます。

1. 2.5 mg/mL、ミックスも、簡単に渦の最終的な集中にエタノール アラメチシン ペプチドを溶解し、冷凍庫 (-20 °C) の原液を格納します。
   注: アラメチシン ペプチドは、粉末の形で通常購入されます。
2. 1.5 mL 安全ロック チューブをリポソーム懸濁液に 13 μ M の最終アラメチシン濃度を達成するためにアラメチシン原液 1 μ l ソリューション"A"の 99 μ L をミックスします。 よく混合する渦。結果として得られるペプチド リポソーム液を"B"と呼びます。
3. 1 mM とし、よく混ぜて渦の最終アラメチシン濃度を達成するためにソリューション B のソリューションを 10 μ l"A"のミックス 117 μ L。"C"としては、結果のソリューションを参照してください。
4. 格納ソリューション"B" 、 "C" 4 °C で必要に応じて使用。

5. Agarose のゲルの準備

1. デジタル、高精度の質量バランスときれいなヘラを使って、きれいな計量紙に agarose 粉末 0.5 g を追加します。
2. 転送は、きれいなガラスを 100 mL ビーカーに agarose の重量を量った、DI 水 50 mL を agarose に追加します。
   注: これは 1% (重量/巻) agarose のゲル溶液になります。
3. ガラス製ビーカーの中きれいな攪拌磁石に、攪拌ホット プレート上ビーカーを置きます。
4. を攪拌しながらアガロースを完全に溶解するまで沸騰する混合物を持参します。
5. 部屋の温度に混合物を冷ますにホット プレートからビーカーを削除します。4 °C で保存し、必要なときに使用します。
6. もう一度を使用して、前にホット プレートや電子レンジでの加熱による agarose を再溶解します。

6. 石油貯留層の作製

注: 以下の手順は、石油貯留層を作製することができる多くの方法の 1 つです。リーダーは、加工機能、および特定のニーズを設計および入手可能な材料に基づく貯留層を作製することをお勧めです。

1. バンド鋸を使用して大きい 12 mm 厚アクリル シートから 12 mm のアクリル キューブ x 12 x 12 カット。
2. アクリル管 (図 1 a) 8-12 mm の深さ 12 mm 径の穴を加工します。

7 電極の作製

1. 銀線 (125 μ m 径) のはさみ、カット 2 個セット (75 mm) を使用します。
2. 軽く開いた炎を使用して、フォームの小さな球状のボール (直径約 250 μ m) にそれぞれの銀線の一方の端を溶かします。
3. 1-2 h 銀 - 塩化銀 (銀/塩化銀) コーティングを作成するための漂白剤のボールの両端を浸します。濃い灰色は銀/塩化銀コーティングが (図 2 a) を形成していることを示します。
4. 漂白剤から両方のワイヤを削除、DI 水で完全にすすぎます、きれいな糸くずのワイプの脇に置きます。
5. 薄層を作成する溶融 agarose のゲルにボール端を浸しなさい。このゲルのコーティングは油の下でワイヤー上に水の滴を固定するのに役立ちます。
6. ガラス カッターを使用すると、10 cm 長く、1/0.58 外/内径 mm ホウケイ酸ガラス 2 5 cm 毛細血管にキャピラリーを分割します。
7. 電極ホルダー (図 2 b, c)、ガラス管の 1 つ挿入し、ガラス管 (図 2 d) に銀/塩化銀のワイヤーの 1 つのフィードします。2 番目のガラス管に他の銀/塩化銀線をフィードします。
8. ガラス マイクロ ピペット ホルダー (図 2 e、 f) に 2 番目のガラス管をマウントします。

8 実験の設定

1. 倒立顕微鏡 (図 1 a) の段階で 1 mm、厚さ 25 × 75 mm ガラス スライドを配置します。
2. ヘキサデカン、スライド ガラスの中央にオイルを数滴を分配し、スライド ガラスに油に直接油タンク。
   注: 明確でシャープな画像を提供するために基板の屈折を合わせて使用ガラス スライドおよびオイル貯蔵所の間にオイルを追加します。
3. ヘキサデカン油油タンクがいっぱい。貯水池は、対物レンズの上にあることを確認します。
   注: 他の疎水性オイルを同様使用可能性があります。
4. 電極ホルダーを電流増幅器のパッチアンプ用アダプターに接続します。マイクロマニピュレーター (図 1 a) 電極の長さを最小限に抑えるため、電気的なノイズ、パッチアンプ用アダプターをマウントしなければなりません。
5. 別マイクロマニピュレーター (図 1 a) の上に 2 番目の銀/塩化銀ワイヤーとガラス マイクロ ピペット ホルダーをマウントします。
6. マニピュレーター、電極その agarose コーティング銀/塩化銀ワイヤーの先端が完全に水没同様垂直面で石油貯留層に位置を使用してください。
7. 2 つの電極を合わせ、数ミリ (図 1 a, b) で区切ります。
   注: 液滴 (手順 13で説明) を追加した後ワイヤ提起しなければならないすべての方法ダウン電極先端が油タンクの底に触れるまで。この手順は、ワイヤ振動を行うし、したがって、測定電流で不要な変動を最小限に抑えることを確認します。

9. 適切な電気ノイズを低減するアース

1. 顕微鏡が (図 3 a) 配置されている防振テーブルにネジをスレッドによって地上のバスを作成します。
   注: 防振テーブルを使用する測定電流で望ましくない変動を引き起こす可能性があります、周囲からの振動を最小限に抑える必要が。
2. 導電性ワイヤーを使用して、アース (図 3 a) にネジを接続し、顕微鏡ステージを地上のバスに接続します。
3. ノイズを低減し、電気地面バス(図 3 b) を接続する実験のセットアップにファラデーケージを置きます。
   注: 常に勧めします不要なグランド ループを回避する、彼らは測定ノイズ レベルの増加につながる可能性があります。

10. フィードバック制御された加熱

1. アルミニウム シェル石油貯留層に合うことができる²⁹ぴったりの暖房機します。
2. 倒立顕微鏡を介してシェルを通じて表示することができるシェルの下部に開口部を残すことを確認します。
3. アルミ シェルの下に 30 × 30 mm ポリイミド柔軟な発熱体を配置します。
4. 下方向の熱損失を低減し、顕微鏡ステージを保護するヒーターの下に絶縁ポリジメチルシロキサン (PDMS) ウェーハを配置します。
5. 油相に熱電対を挿入します。熱電対を確かめるか銀/塩化銀線に触れない後、熱電対データの集録ボードとカスタム プログラミング ソフトウェアを使用してレコードの温度を熱電対ワイヤを接続します。
   注: コントロールを作成、On-Off、比例積分 (PI) フィードバック温度暖房および希望値に油温のパッシブクー リングを有効にします。コードは、要求時に読者に提供できます。

11. ソフトウェアと機器の設定

1. データ集録ソフトウェアを準備するには、コンピューター、顕微鏡、関数発生器、電流増幅器、低ノイズのデータ集録システムに電力を供給します。
   注: 現在センシング機器を使用可能性があります、次の手順、特に材料の表に記載されている 1 つ。自分の現在のアンプを構築する研究者は、Shlyonsky ら³⁰を参照できます。
2. パッチ ・ クランプのフロント パネルに電流アンプ、フロント パネル表示に設定、ソース測定モードダイヤル VHOLD/IHOLD、V クランプ、それぞれ。
3. フロントのパネルでは、0.5 に 1 kHz、出力ゲインを低域通過ベッセル フィルターを設定します。
   注: は、測定ノイズを低減の利得の犠牲の測定範囲を増やすに対し、低出力ゲインにより大きいのより高い電流振幅を記録を選択します。
4. 構成をセル全体 β に設定 1 を =。この値は、大きな振幅電流を記録可能に 0.1 に後で切り替えた可能性があります。
5. ゼロまたは中立的な立場では、他のすべてのコントロール ダイヤルを設定します。
6. デスクトップのアイコンをダブルクリックしてソフトウェアを初期化します。
7. 構成をクリックして |デジタイザー デジタイザー ] ダイアログを開き、[変更] ボタンをクリックします。
8. デジタイザーの変更ダイアログ ボックスで、デジタイザーの種類] の一覧から適切なデジタイザーを選択します。
9. デジタイザーを検出するスキャンボタンをクリックします。
10. 変更デジタイザー ] ダイアログを終了する[ok]をクリックしてし、デジタイザー ] ダイアログを終了する[ok]をクリックします。
11. コン図をクリックして |研究室のベンチ。
12. 研究室のベンチの入力信号タブでは、0.0005 V/Pa に尺度係数を設定します。
    注: 利得または β の値が変更された場合は、この値を更新する必要があります。

12 ピペット オフセット

注: 以下の手順は、表の資料に記載されている現在のアンプにのみ適用されます。

1. 200 の預金、マイクロ ピペットを使用して油の下で各銀/塩化銀のワイヤーの両端に水性脂質液"A"の nL。
2. 連絡先に水滴を取り込んで、両電極にまたがる 1 つのボリュームに、液滴の合体にアンプのフロント パネルの攻撃ボタンを押します。これを誘導する必要があります、応答を短絡します。
3. トラックセットのソース測定モード ダイヤル。
4. フロント パネル表示ダイヤルをV_トラックに変更します。
5. ピペッター オフセットメーター読み取り 0 mV まで (時計回りまたは反時計回り) をダイヤルし、安定して電源を入れます。
6. V クランプにソース測定モード ダイヤルを戻り、前面パネルは、 V_{を保持する保持}/Iにダイヤルを表示します。

13. 脂質二重膜の形成

1. 以前、油相から垂直方向に電極を移動することによって堆積した液滴をリリースします。これは、油に電極から落ちる水滴を発生します。再度水没し、油で電極を配置します。
2. デポジット 200 にマイクロ ピペットを使用して、各ワイヤーの脂質ソリューション"A"の nL。
3. 各水/油の界面で発生する自発的な脂質単分子膜アセンブリを許可する 3-5 分を待ちます。
   注: として脂質単分子膜形態、周辺のオイルが十分に少ない高密度²¹場合をサグに液滴を引き起こすことができます水/脂質/油界面の表面張力が減少。
4. 下が終了するまで両電極の電極 (と液滴) やっと油層 (図 1 b) の底に触れるし、接触に水滴を持って水平に移動します。
   注: 脂質二分子膜が自発的に薄膜接触液滴の間から余分な油を除きます。通常、このプロセスは、1 分以内で発生します。

14 生体分子 Memristor の電気特性評価

1. 脂質二分子膜形成
   1. 液滴間の静電容量の増加に対応する脂質二分子膜形成を記録するには、10 Hz、パッチ クランプの外部入力に接続されているファンクション ・ ジェネレーター (図 4) を用いた 10 mV 三角波電圧を適用します。増幅器です。
      注: 脂質膜の容量性の性質のため結果の現在の応答は方形波 (図 4) をする必要があります。脂質二分子膜形成、ステップ 11.6 中研究者はピーク ・ トゥ ・ ピーク電流振幅の成長を参照してください、また接続された液滴 (図 4) の間の視覚的な変化を観察します。
2. 電流電圧測定
   注: 生体分子 memristor は抵抗とコンデンサー並列^12,21としてモデル化されます。したがって、デバイスの現在の応答は、印加電圧の周波数によって抵抗膜方式と静電容量方式の両方のコンポーネントを含めることができます。メムリスティブ性デバイスを研究してピンチ ヒステリシス電流-電圧特性¹²を取得するには、現在の合計から容量性電流を減算する必要があります。以下のプロトコルでは、この手順について説明します。
   1. 関数発生器を使用して、ソリューション"の A"の液滴と組み立てアラメチシン無料脂質膜に電圧波形 (三角形または正弦波) が適用されます。
   2. 複数の周波数で誘導の現在の応答を記録します。
      メモ: 容量性電流は、10 mHz 以下の周波数で最小限に抑えられます。
   3. どちらかのコンピューターで、脂質膜の直径を測定することによってまたは 10 Hz、10 mV 三角波に起因ピーク-ピーク電流を記録することによって界面脂質二重層のサイズを記録します。現在の振幅は膜容量に比例してある順番膜の面積に比例です。
   4. アラメチシンを含まない液滴を削除します。
   5. ソリューション"C"を使用して新しい滴を追加し、脂質二重層を形成します。
   6. マニピュレーターを使用すると、2 層が以前に形成されたものとして同じような区域 (直径または矩形波電流振幅) があるような液滴間の接触を調整できます。
   7. 14.2.1 と 14.2.2 の手順を繰り返します。
   8. 14.2.7 の手順で記録した現在から現在に記録されたステップ 14.2.2 を減算します。
   9. 各周波数と"ピンチ ヒステリシス「メムリスティブ応答波形印加電圧対誘導電流をプロットします。
3. 光パルス伝送実験
   1. 時間、オンとオフの時間、特定の高、低振幅の電圧パルスを生成カスタム プログラミング ソフトウェアとアナログ電圧ソースを使用する。
      注: これは必要ありません商業関数発生器を使用して電圧パルスを生成することができる場合。
   2. 応用パルス応答電流を記録します。
   3. Memristor の容量性の性質のため、静電容量式のスパイクが記録されます。スパイクを削除するには、適切な通過帯域の低域通過フィルターを適用します。

結果

図 1は、組み立てるし、生体分子 memristor を特徴付けるため実験のセットアップを表示します。石油貯留層の下部に電極の端を下げる、図 1 bに示すようだったが参考に電極と測定電流と二分子膜領域、特に場合は、の変化につながる液滴の振動を最小限に抑えるためどこに暖房油、油の対流を生成できます。図 2は、手順や銀...

ディスカッション

組立のイオン チャネルをドープした合成膜中の水の二液滴の間に形成に基づく生体分子 memristors を特徴付けるためのプロトコルを提案する.ソフトマター、2 ターミナル デバイスを設計および検討: 構造の組成、2) もっと密接に模倣高ノイズ、高エネルギー消費、高電圧の切り替えのように固体状態の技術に関連付けられている 1) 克服の制約、スイッチング機構の生物学的シナプスと 3) メカ?...

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
1,2-diphytanoy-sn-glycero-3-phosphocholine (DPhPC)	Avanti Polar Lipids	850356P/850356C	Purchased as lyophilized powder (P) or in chloroform (C)
Agarose	Sigma-Aldrich	A9539
Agarose (0.5g Agarose Tablets)	Benchmark	A2501	You can either use the powder form or the tablets
Alamethicin	AG Scientific	A-1286
Analytical balance	Mettler Toledo	ME204TE/00
Axopatch 200B Amplifier	Molecular Devices	-
BK Precision 4017B 10 MHz DDs Sweep/Function Generator	Digi-Key	BK4017B-ND
Borosilicate Glass Capillaries	World Precision Instruments	1B100F-4
Brain Total Lipid Extracts (Porcine)	Avanti Polar Lipids	131101
DigiData 1440A system	Molecular Devices	-
Extruder Set With Holder/Heating Block	Avanti Polar Lipids	610000	This includes a mini-extruder, 2 syringes, 100 PC membranes, 100 filter supports, and 1 holder/heating block
Freezer (-20 °C)	VWR International	SCUCBI0420AD
Glassware	VWR International	-
Hexadecane, 99%	Sigma-Aldrich	544-76-3
Isopropyl Alcohol	VWR International	BDH1133-4LP
Microelectrode Holder	World Precision Instruments	MEH1S
MOPS	Sigma-Aldrich	M1254
Nitrogen (N2) Gas	Airgas	UN1066
Parafilm M All-Purpose Laboratory Film	Parafilm	PM999
Powder Free Soft Nitrile Examination Gloves	VWR International	CA89-38-272
Precleaned Microscope Sildes	Fisher Scientific	22-267-013
Refrigirator (4 °C)	VWR International	SCUCFS-0504G
Silver wire	GoodFellow	147-346-94	Different diameters could be used depending on the application
Sodium Chloride (KCl)	Sigma-Aldrich	P3911
Stirring Hot Plate	Thermo Scientific	SP131325
VWR Light-Duty Tissue Wipers	VWR International	82003-820
VWR Scientific 50D Ultrasonic Cleaner	VWR International	13089