1. 土壌サンプルの準備

1. まず、一晩の湿った土の量は、既知の乾燥と乾燥土壌を計り直しによって土の初期含水率を決定します。土の初期含水率を決定する式です。
   
   (関係式 1)
   どこ：
   MC = 水分
   W = 重量
   D = 乾燥重量
2. 土壌水分乾燥重量ベースで 10% を増加する土の 25 g に追加しなければならない水の量を計算します。
3. 次に、土の 25 g に水の量を追加します。
4. プラスチック製のラップのコンテナーをカバーし、潜伏中に通気できるようにプローブを数回フィルムに穴をあけます。ゴムのバンドが付いているフィルムを固定します。
5. 土の重量を量る、ラップし、一週間室温でサンプルをインキュベートします。

2. 菌接種と培養

1. 孵化が完了したら、ラップと輪ゴムで土のサンプルの重量を量る。水分の損失による体重の減少を計算します。
2. 新しい土壌含水率を計算します。
3. 次に、図 2に示すように、土の 1/10 希釈系列を調製します。これは 10 の^-5 (チューブ E) g 土壌懸濁液 mL あたり、10^-4 (D 管)、10^-3 (C 管) 10^-2 (チューブ B) 10^-1 (ボトル A) の希釈液になります。
4. 寒天滅菌ローズ ベンガル ストレプトマイシンを準備します。ローズ ベンガルおよびストレプトマイシンの両方は、細菌の増殖を抑制します。非常に肥沃な土壌は、土壌微生物の個体数が多いの選ばれた希釈が高くすべきすなわち、10^-3、^-410、10^-5、プレートごと土壌 g。
5. 10^-3の各プレート、希釈チューブ 10^-2、0.1 mL を追加し、エタノール炎を用いた寒天培地の表面に広がって滅菌ガラス スプレッダー。0.1 mL の量をメッキすると、ために、効果的な希釈 10^-3。すべての希薄のためには、この手順を繰り返します。
6. 1 週間板室温で孵化させなさい。

3. コロニーを数えると顕微鏡による検討

1. 各土壌の 1 つと 1 つだけの希釈でコロニー カウントを確認します。数えられるプレート控えめな可算植民地が必要です。草に覆われたプレートをカウントされませんする必要があります。同様に、未満 10 植民地板はカウントされませんする必要があります。注意してください、3 つの異なる植民地の文化的な特性を記述します。
2. 次の手順を使用して詳細な顕微鏡に関する圧力 (透明テープ) マウント スライドを準備します。
   1. きれいなガラス スライドの中央に流体をマウント葉身のドロップを入金します。
   2. セロハン テープのストリップをカット素材のロールから約 3 cm 長い。テープの粘着面が汚れない、テープの処理時に鉗子を使用します。解剖針は鉗子からテープを解放に役立ちます。
   3. テープの接着面は、基部の菌コロニーの表面に適用されます。テープまたは菌糸の塊も高密度に過度の圧力を避けるために世話をして胞子が収集されます。
   4. 菌のコロニーが付いている接触からテープを削除し、液をスライド ガラスに取付のドロップ ダウン、それは、粘着面を適用します。特急気泡に滑らかで平ら楽器でテープを優しくこする。
   5. 油で油浸対物レンズの顕微鏡下のテープのマウントを確認します。
   6. 指定された真菌の同定のキー (図 4) を使用して 2 つの異なる真菌属を識別します。

図 4。真菌の同定のキー。