環境試料中のバクテリオファージの検出

ソース: ドクターペッパー イアン博士チャールズ Gerba - アリゾナ大学所
示す著者: アレックス Wassimi

ウイルスは、真核生物と原核生物に感染する生物学的実体のユニークなグループです。代謝能力を持たず、宿主細胞の内部自己組み立てるウイルスの部品を生産する宿主の代謝に依存して、レプリケートするために義務づける寄生虫です。

ウイルスが極微、光学顕微鏡、電子顕微鏡のより高い解像度でのみ表示で閲覧するのには小さすぎます。ウイルスの粒子は DNA や RNA、蛋白質の亜単位または capsomers から成るキャプシドと呼ばれるタンパク質のコートに囲まれた核酸のゲノムから成っています。いくつかのより複雑なウイルスのキャプシドはさらに脂質エンベロープに囲まれた、スパイクのような表面の付属肢や尾があります。

人間や動物の腸管に感染するウイルスは、腸管系ウイルスと呼ばれます。彼らは、糞便中に排泄され、排水から分離することができます。細菌に感染するウイルス、バクテリオファージ、として知られている、大腸菌に感染するものは coliphages (図 1) をいいます。大腸菌の細菌のファージは、大腸菌が見つかったどこでも発見されています。

図 1。ファージ T2。

1. 下水やファージを含む水のサンプルを取得します。
2. サンプル 1:10 と 1: 100 Tris バッファーを使用して希釈します。Tris バッファー 9 mL に文化の 1.0 mL を転送し、2 番目の十倍の希薄によってこれを行います。
3. スチームバスやオートクレーブにそれらを置くことによって軟寒天培地 (0.7% 寒天またはトリプチ豆乳寒天培地 3 mL チューブあたり) の 3 つの管を溶かします。
4. 45 ° c. に調整する寒天培地の温度を許可するように 15 分間 45-48 ° c の水浴の寒天を配置します。
5. 最初のチューブにエシェリヒア属大腸菌¹と原液のサンプル 1 mL のログ相スープ文化の 1 mL を追加します。
6. 水浴と軽く 2-3 s の懸濁液を混合する手の間ロックからチューブを削除します。
7. ペーパー タオルの管から水を拭くし、下の寒天 (通常寒天またはトリプチ豆乳寒天) を含む事前に準備されたペトリ皿に寒天を注ぐ。
8. すぐに上の寒天を広めるためプレートを回転させます。

下水試料の希釈 = 10^-1

得られるプラークの数 = 9

したがって、バクテリオファージ濃度下水サンプル
= 10 × 9 ÷ 1 mL
= 90 プラーク形成単位/mL

未処理下水が通常 10 を含む³ -10 の範囲で、mL 当たり 10⁴ファージ² -10 mL あたり⁸ 。

環境指標としての coliphages の多くの潜在的なアプリケーションがあります。下水の汚染、水や排水処理の効率と腸管系ウイルスおよび環境中の細菌の存続の指標としての使用が含まれます。検出の容易さのため魅力的なずっと存在の指標と腸内細菌と動物ウイルスの動作としてバクテリオファージの使用と低コストのバクテリオファージの試金に関連付けられています。さらに、彼らは数日?...