Contractility Measurements in hiPSC-CMs

まず、光学系ベースの測定システム、顕微鏡発光ダイオード光源、およびコンピューターの電源を入れます。コンピューターでプログラムを起動し、画面の左上にあるファイルの下にある[新規]をクリックして新しいファイルを開きます。収集をクリックし、実験を選択してから、IPSCとカルシウム測定を選択します。

次に、ヒトIPSC心筋細胞培養培地を1ウェル当たり0.5ミリリットルのTyrode溶液と交換する。24ウェルプレートで。プレートの蓋を気候制御の蓋に戻し、摂氏37度の温度に調整されたデバイスの光学ベースの測定システム内にプレートを置きます。

ツールバーの下にある開いているセルファインダーをクリックして、新しい画面が表示されるのを待ちます。画面上部のチャンバータイプとウェルでプレートフォーマットを選択します。井戸を選択し、井戸内の領域を選択して、同期した収縮と弛緩を観察します。

画面の左下にあるスタートを押します。次に、[測定値の追加] をクリックして面積を測定します。24ウェルプレートでウェルあたり約10の領域を測定します。

ベースライン測定のみの場合は、次のウェルから測定を続行します。化合物をテストするには、ウェル内の領域が測定されたら、完了を押します。光学ベースの測定器を開き、目的のストレッサーまたは化合物をウェルに追加します。

希望の時間でインキュベートした後、自動測定をクリックして、ベースライン測定が実行されたウェルの同じ領域でペア測定を実行します。すべての測定が実行されたら、完了を押します。画面の右上から次のウェルを選択し、必要なすべてのウェルの測定を続行します。

必要なウェルをすべて測定したら、[停止]をクリックしてファイルを目的の場所に保存します。