Calcium Transient Measurements in hiPSC-CMs

Fura-2 AMアリコートをタイロード溶液に溶解して、細胞に追加する最終濃度1マイクロモルのFura-2 AMにします。培地を吸引し、Fura-2 AMを含むタイロード溶液と交換します。インキュベーターまたは光学ベースの測定システムで摂氏37度で15分間インキュベートします。Fura-2 AMを含むタイロード溶液を取り除き、新しいタイロード溶液でウェルを2回洗浄します。

最後に、Tyrodeの溶液中の細胞を摂氏37度でさらに5分間インキュベートして、Fura-2 AMの脱エステル化を可能にします。プレートを光学ベースの測定システム内に配置して、収縮性測定を続行します。井戸を選択し、井戸内の収縮と弛緩が同期して観察する領域を選択してから、[開始]をクリックして測定値を追加します。収縮性の痕跡に加えて、リアルタイムのレシオメトリックカルシウム過渡現象が画面に表示されます。