デング熱抗体NS1検出のための紙ベースのイムノアッセイデバイスの設計

まず、コンピューター上で18のワックスパターンを持つ紙の分析装置を設計します。このデザインをワックスプリンターを使用してセルロース紙に印刷します。ワックス印刷した紙を実験室のオーブンで摂氏150度で75秒間溶かします。

溶融後、さらに使用するまでシリカ箱に保管してください。次に、0.5マイクロリットルの0.025%ポリ-L-リジンをデバイスのテストエリアとコントロールエリアの両方にピペットで移します。次に、デバイスを摂氏65度のオーブンで5分間インキュベートします。

0.5マイクロリットルのそれぞれの抗体溶液をコントロールエリアとテストエリアに塗布します。滴をシリカゲルボックス内で室温で30分間乾燥させます。次に、ブロッキングバッファーをサンプル、コンジュゲート、および検出領域に適用します。

これらの滴をシリカゲルボックス内で室温で30分間乾燥させます。PBS中の10マイクロリットルの抗NS1抗体と1ミリリットルの40ナノモルの金ナノ粒子コロイドを組み合わせます。次に、0.1ミリリットルの0.1モルホウ酸緩衝液を添加します。

混合物を50RPMで60分間回転させます。0.1ミリリットルのBSAをBBSにピペットで混ぜます。インキュベーション前にもう一度回転させます。

溶液を20, 187Gで摂氏4度で30分間遠心分離します。次に、沈殿した金ナノ粒子抗体溶液から上清を慎重に分離します。沈殿物を500マイクロリットルのBBSに再懸濁します。

次に、溶液を超音波処理してナノ粒子を分散させます。遠心分離後、50マイクロリットルのコンジュゲートバッファーを懸濁液に加えます。次に、2マイクロリットルの金ナノ粒子抗体複合体溶液をコンジュゲート領域にピペットで移します。

紙ベースのイムノアッセイを組み立てるには、粘着性のプラスチックバッキングカードの裏側から保護フィルムを慎重に剥がして、接着剤を露出させます。処理したセルロース紙を粘着プラスチックのバッキングカードに合わせ、押します。紙の上にプラスチックフィルムを貼り、フィルムと紙を押し付けてコーティング面を作ります。

シングルチャンネルのイムノアッセイ装置が設計され、製造されました。サンプル溶液はチャネルを通過し、重要なポイントで成分と相互作用し、目に見える診断結果が得られました。