カーボーイのセットアップを準備するには、6.4センチメートルのホースバーブボールのバルブを開きます。ホースバーブボールバルブの両端に2センチメートルの長さのシリコンチューブを取り付けます。7.9〜6.4ミリメートルのホースバーブアダプターフィッティングをアセンブリの一方の端に取り付けます。
アセンブリのもう一方の端を8リットルのカーボーイのホースバーブに取り付けます。結束バンドを使用して、カーボーイのホースバーブとチューブの間の接続、およびホースバーブアダプターフィッティングとチューブ間の接続を固定します。必要なメディアコンポーネントを測定し、8リットルのカーボーイに追加します。
必要なpHを調整した後、ホットプレート上で攪拌して成分を均一に混合し、液体を30分間沸騰させます。次に、滅菌済みの10ミリリットルのガラスピペットを窒素ガスマニホールドのセットアップに取り付けます。マニホールドを開いて酸素を抜き、窒素ガスを排出します。
火を止めた後、ピペットチップを液体に入れ、窒素ガスで30分間洗い流します。次に、ピペットチップをCarboyのヘッドスペースに引き上げます。2グラムの重炭酸ナトリウムと4.8グラムの硫化ナトリウム非水和物を加え、レサズリンが無色になるまで待ちます。
レサズリンが無色になったら、ガラスピペットを取り外し、すぐにカーボーイに10番の栓をします。ストッパーの上とカーボーイの唇の周りにワイヤーをねじって、ストッパーを固定します。