まず、編みこみの絹の縫合糸を取り、それを1つのフィラメントに分けます。マイクロ鈍い先端と鉗子を備えた2つのデュモン5鉗子を使用して、他の鉗子の先端の周りに二重ループを作ります。ループ状の鉗子で、縫合糸の緩い端をつかみ、両方のループを通して慎重に引っ張ります。
vannasスプリングハサミを使用して、両側から余分な縫合糸をトリミングします。安楽死させたラットの首を切った後、腹壁の正中線に沿って縦に切り込みを入れます。次に、腸間膜を外部に押し出します。
幽門括約筋のすぐ下、盲腸の約2〜3センチメートル上の接続部と直腸への接続部を切り取ります。次に、解剖した腸間膜全体を200ミリリットルの氷冷生理学的塩溶液ですすいでください。その後、氷冷した生理食塩溶液を含むシリコンで裏打ちされたシャーレに移して固定します。
実体顕微鏡、デュモン5イノックスファイン鉗子、バンナスプリングハサミを使用して、周囲の脂肪や結合組織から二次腸間膜リンパ管を解剖します。次に、解剖したリンパ管を血管増殖チャンバーに移し、ガラスカニューレにカニューレを挿入します。後で容器をカニューレに固定する準備として、各ガラスカニューレに単一のきれいな結び目をスライドさせます。
脂肪の小片を使用して、リンパ管の方向を向き、遠位端をP1にカニューレ状にできます。結び目をカニューレに滑り込ませ、リンパ管を固定するために締めます。次に、リンパ管を加圧して、灌流チャンバー内のミリメートルの水銀を強化します。7%の二酸化炭素と93%の酸素を含む泡立つ石を浴室に入れて、生理学的pHを維持します。
チャンバーを温度調節器に接続し、摂氏37度に設定します。
