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ホール マウントIn Situハイブリダイゼーション

概要

全体マウントの in situハイブリダイゼーション (WMISH) は、胚における発現 Rna の場所を視覚化するために使用される一般的な手法です。このプロセスで総合的に生産の RNA プローブが相補的に最初またはバインド、標的遺伝子の転写産物に「ハイブリダイズ」.免疫組織化学または蛍光性、使用されますこれらの RNA の雑種を検出する遺伝子発現の時空間パターンを明らかに。伝統的なその場で交配の技術、計算的に再構築する必要がありますイメージが薄い切片を必要とするのとは異なり全体マウント テクニックは表現パターン全体胚または構造上評価される遺伝子ができます。

全台紙染色と詳細キー操作手順、プローブの設計と生産、胚の固定や染色、ポスト交配信号検出などの基本的な概念を紹介します。視聴者は、どのように発達生物学者について現在の研究に WMISH を適用について説明します。

手順

全体マウントの in situハイブリダイゼーションは、胚発生の分子基盤を理解する科学者を可能にする強力な手法です。「全体-マウント」は、全体の胚を使用することを示しますだけではなく組織のスライス。「その場で」「ポジション」のラテン語の意味は、します。最後に、「交配」は生物の細胞内 mRNA 転写する総合的作り出された RNA 分子の相補的な結合を指します。

このビデオでは、手順、予期された結果、および発達障害のよりよい理解を可能にすることができますこのテクニックの選択したアプリケーションを示します。

生物の形態形成を根底にある遺伝子は萌芽期の開発の過程で空間制限パターンで表現されます。

Riboprobes と呼ばれる、総合的に生産の RNA プローブを使用すると、相補的な結合によって、Mrna を検出します。Riboprobes は、「皮膚」ジニトロフェノール、ビオチン、digoxygenin などを含む特別なヌクレオチドが付いています。皮膚より大きい分子にアタッチしたときに免疫反応を引き出すこと

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Overview

0:56

Concepts Behind In Situ Hybridization

2:27

Target Identification and Probe Development

5:15

Applications

7:17

Summary

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