N.E..Bは、国立環境衛生研究所(5T32ES007126-35、2018)と米国心臓協会の博士前フェローシップ(20PRE35120321)からの訓練助成金によって支援されました。E.S..M.Bは、UNC臨床・トランスレーショナルサイエンス賞K12奨学生プログラム(KL2TR002490、2018)、国立心臓・肺・血液研究所(K01HL145354)の一部の支援を受けたKL2学者でした。著者らは、LSFMを支援してくれたUNC顕微鏡サービス研究所のパブロ・アリエル博士に感謝する。光シート蛍光顕微鏡は顕微鏡サービス研究所で行いました。病理学・検査医学科の顕微鏡サービス研究所は、P30 CA016086がんセンターのコアサポート補助金によって、UNCラインバーガー総合がんセンターに支えられている。

ここに記載されているすべての方法は、ノースカロライナ大学チャペルヒル校の施設動物のケアと使用委員会(IACUC)によって承認されています。
1. 術前の手順
<ol><li>手術器具を殺菌する。手術前に手術器具をすべてオートクレーブ。同じ日に複数の手術を行う場合は、乾燥ビーズ滅菌器を使用して手術の間に器具を殺菌します。</li>
	<li>25%Pluronic-127ゲル(滅菌蒸留水で希釈)で治療を準備します。</li>
	<li>2F Fogartyバルーンカテーテルをインスフレーターに設置し、生理食音溶液で満たされた1mLシリンジにカテーテルのバルーン端を置きます。</li>
	<li>5%のイオブルランを有するチャンバーにラットを入れることによって麻酔を誘発する。<ol>
<li>チャンバーからラットを取り出し、ラットの体重を記録します。腹側首領域に毛皮を剃るためにヘアクリッパーを使用してください。</li>
		<li>5%イソファランでラットをチャンバーに戻し、麻酔の誘導を確実にします。</li>
	</ol>
</li>
	<li>ラットの顔が外科医に向かるように、鼻コーンに顔を挿入し、外科用プラットフォーム上にラットの上に置きます。<ol>
<li>吸入麻酔を1.5%のイオブルランに減らす。4フィートすべてでつま先ピンチ反射で麻酔の深さを確認します。</li>
		<li>手術用プラットフォームに4本の脚をすべてテープで留めます。</li>
	</ol>
</li>
	<li>ヒートランプをオンにします。</li>
	<li>アトロピン(0.01 mg/kg)を皮下に注入して気道分泌物を減らす。</li>
	<li>予防的な痛みの管理のためにカルプロフェン(5mg/kg)皮下に注入してください。抗炎症薬が実験に受け入れられない場合は、ステップ3.2.2および3.2.3を参照してください。</li>
	<li>手術中に角膜が乾燥するのを防ぐために、滅菌綿棒を使用して両眼に潤滑剤の眼軟膏を塗布します。</li>
	<li>70%のエチルアルコールの間で交互に回交する円形の動きで首を3回スワブし、続いて剃った領域の中心から外側にベタジンを回して切開部位を殺菌する。</li>
	<li>0.25%ブピバカインで切開線s.cを浸潤する。</li>
	<li>滅菌手術用器具および消耗品を取り扱う前に、無菌の外科用手袋を着用してください。</li>
	<li>無菌の外科シート上のすべてのオートクレーブ外科器具をレイアウトします。</li>
	<li>無菌7-0プロレン縫合糸の3つの独立した1インチのストランドをカット。</li>
	<li>綿棒とガーゼを外科シートに置きます。</li>
	<li>滅菌された首領域のみを露出する無菌外科シートでラットをドレープする。</li>
	<li>ノーズコーンの一部を露出するシートに小さな開口部を追加で切ります。これは、傷害の間にバルーンカテーテルをテーピングするためのサイトになります。</li>
</ol>2. 手術手順
<ol><li>外科的処置全体の間に、呼吸数を監視することによって麻酔の深さを評価する(速度は一貫しており、正常とみなされるべきである)、また15分ごとにつまみつまみによって。呼吸数が増加するか、つま先ピンチに対する応答がある場合は、外科的操作を一時停止し、イオブルランを最大2.5%まで増加させる。</li>
	<li>一般的な頸動脈(CCA)を公開します。<ol>
<li>ラットの顎骨の間に表面的でまっすぐな縦方向のネックライン切開を行います。切開は約1.5~2cmの長さになります。</li>
		<li>筋肉層が露出するまで、皮膚の下の結合組織を通して切開を行います.皮膚の下の唾液腺を置き換えて、筋肉組織にアクセスする。</li>
		<li>筋肉層と結合組織の間に閉じたはさみを挿入して筋肉から結合組織を鈍く分離し、皮膚を上方に引っ張りながらはさみをそっと開く。</li>
	</ol></li>
	<li>2つの表面筋に垂直に走る第三の筋肉(オモヨイド)が観察されるまで、気管の左側に沿って2つの目に見える筋肉(ステルノヒロイドと胸骨腫)を縦方向に解剖する。</li>
	<li>鉗子を使用して、この垂直筋肉(オモヨイド)と気管の上を走る縦方向筋(ステルノヒョイド)を分離する窓を作ります。気管への鈍い外傷を防ぐために、この分離を穏やかに行います。</li>
	<li>垂直筋肉の下の鉗子に到達し、2つの縦筋を分離し、CCAを露出させるために切断する。</li>
	<li>CCAを解剖する。<ol>
<li>内部頸動脈(ICA)および外頸動脈(ECA)が露出するまで、分岐の近くでCCAを解剖する。</li>
		<li>ECAから分岐する上甲状腺動脈(STA)を解剖する。</li>
		<li>プレカットプロレン縫合糸を使用して、STAとECAをそれぞれの分岐の近くにリゲートします。結び目の片側に縫合糸の大部分を残し、湾曲した止まり糸で各縫合糸をつかむ。</li>
		<li>ICAの周りの解剖を終え、ICAの下および周囲の鉗子に達し、遠位制御を達成するために非破砕の血管クランプを使用する。ICAと一緒に後頭動脈をクランプします。</li>
		<li>CCA近位を分岐に解剖し、迷走神経をCCAから分離することを保証する。</li>
		<li>CCAの下および周囲の鉗子に達し、近位制御を達成するために非破砕の管クランプを使用する。分岐からクランプを5mm以上に配置します。</li>
	</ol></li>
	<li>バルーン損傷を行います。<ol>
<li>各連結動脈枝を保持する湾曲した止血を操縦し、ECAと上位枝の間の分岐を露出させる。</li>
		<li>分岐で組織を穏やかに解剖し、その後、マイクロディションハサミを使用してECAと優れた枝の間の動脈切開を行います。</li>
		<li>綿棒を使用して、CCAからすべての血液を押し出し、動脈切開部位をクリーンアップします。</li>
		<li>膨張していないバルーンカテーテルを動脈切開術を通して挿入し、バルーンの近位端が分岐を過ぎるまでCCAに進みます。</li>
		<li>バルーンがインフレ時に動脈から抜け出さないように、鼻コーンにカテーテルをテープで貼ります。</li>
		<li>ゆっくりと圧力の5気圧に気球を膨らませ、動脈損傷を誘発するために5分間CCAに残します。圧力が5分間一定であることを確認します。</li>
		<li>5分後、バルーンを収縮させ、動脈切開術を通してCCAから静かに取り除きます。</li>
		<li>CCAでクランプを軽く絞ってCCAをフラッシュします。クランプを取り外さない。</li>
		<li>ECA近位を動脈切除術にリゲートし、CCAとICAからクランプを取り外して、CCAからICAへの血流を回復させます。動脈切開術の周りに目に見える出血がなく、CCAが脈動していることを確認してください。</li>
	</ol></li>
	<li>100 μLの治療用またはプルロニックゲル車両を、負傷したCCAに沿って単独で回来して塗布します。CCAの左側に50 μLを塗布し、次に50 μLをCCAの右側に塗布して、損傷した動脈のコーティングを確実にします。</li>
	<li>創傷部位を閉じます。<ol>
<li>余分なプロレン縫合糸をカットします。</li>
		<li>結合組織に沿って中断された4-0または6-0のvicryl層を使用して創傷を閉じます。</li>
		<li>皮膚に沿って4-0ナイロン縫合糸を実行して傷を閉じます。</li>
	</ol></li>
</ol>3. 術後の手順
<ol><li>ラットを暖房ランプの下にケージの半分を持つきれいなケージに一人で入れ、ラットが胸骨の不通を維持するのに十分な意識を取り戻すまで監視します。動物が完全に警戒し、元のケージに戻す前に移動するまで、別のケージにラットを保管してください。</li>
	<li>次の3日間、そして安楽死まで週に3回、ラットを毎日監視する。イソフルランの過剰摂取を用いて安楽死させ、続いて後に、後述するように両側性乳房切除術を行う。<ol>
<li>国立研究研究動物改良&縮小センターを活用して、術後の痛みのレベルを特定します。いずれかの動物が痛みを経験しているか、神経学的妥協を開発しているように見える場合は、すぐに犠牲を払ってください。</li>
		<li>カルプロフェンを受け取らない動物の場合、手術後48時間までに24時間前に飲料水中にアセトアミノフェン6mg/mLを投与する。アセトアミノフェンは、最小限の抗炎症効果と鎮痛を提供します.</li>
		<li>あるいは、抗炎症作用が最小限の他の鎮痛戦略を、ブプレノルフィンまたはブプレノルフィン拡張放出など使用することができる。所属機関の獣医チームに相談してください。</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. 組織の収穫とイメージング
<ol><li>手術の2週間後、麻酔の過剰摂取によってラットを安楽死させる(5%イソファラン)。あるいは、早期の時点でラットを安楽死させ、動脈損傷応答の様々な側面を分析する。<ol>
<li>呼吸停止が終了すると、安楽死の二次的な方法として両側性乳房間術を行う。</li>
	</ol></li>
	<li>腹部を横切りし、横隔膜と肋骨を通して上方に切り、胸腔を露出させる。</li>
	<li>動脈を浸透させ、固定する。<ol>
<li>左心室を通して重力灌流固定システムに取り付けられた18Gカニューレを挿入します。ベンチトップ(120cmの高さ、91±3 mmHgに相当)に対して灌流システムの高さを印示することによって、ラット間の同等の圧力を維持する。</li>
		<li>湾曲した止止まりを使用して、心室と一緒にカニューレをクランプします。</li>
		<li>右心房で切り取り、血管回路を開き、PBSで灌流を開始し、続いて2〜4%パラホルムアルデヒド(それぞれ約250mL)を続けます。</li>
		<li>犠牲の日、またはせいぜい犠牲の前夜にPBSで希釈したパラホルムアルデヒドを準備します。犠牲の日に準備する場合は、パラホルムアルデヒドが灌流を開始する前に室温まで冷却されていることを確認してください。パラホルムアルデヒドを4°Cで保存する。</li>
	</ol></li>
	<li>固定後、左右の頸動脈を抽出し、2〜4%パラホルムアルデヒドで4°Cで2時間保存します。</li>
	<li>動脈を30%スクロースに移し、4°Cで一晩保管する。</li>
	<li>16-24時間後、最適な切断温度(OCT)化合物に動脈を埋め込み、OCT組み込み動脈ブロックを凍結する。<ol>
<li>室温で10分間の10分間の状態動脈。1000で満たされたクリオマールの平面に平行に動脈を置き、動脈分岐が直面しているクライオムドの側面をマークする。液体窒素でスナップフリーズ。</li>
		<li>冷凍ブロックを-80°Cで長期保存。</li>
	</ol></li>
	<li>クライオスタットを使用してブロックを凍結セクション。<ol>
<li>スライド1は分岐から始まる、スライドごとに6μmの厚い動脈断面を収集します。</li>
		<li>過形成が見えなくなるまで、セクション凍結ブロック(約100枚のスライド)。</li>
	</ol></li>
	<li>ヘマトキシリン&エオシン(H&E)の汚れスライド18<ol>
<li>分岐から始まる動脈全体に沿って10回に1回のスライドを染色することによって傷害の領域を見つける(例えば、スライド1、10、20、30、40、50、60、70、80、90、および100)。</li>
		<li>損傷部位の周りに追加のスライドを染色して、ピーク咬合を有するスライドを見つける(例えば、スライド20、30、および40は目に見える過形成を有し、したがって、スライド15、25、35、および45を染色する)。</li>
		<li>ピークオクルージョンスライド前後のピークオクルージョンと等距離スライドでスライドを染色し定量化し(例えば、スライド35で見つかったピークオクルージョン、スライド25、45等)を染色し、ラット当たり合計3〜10枚のスライドを定量する。</li>
	</ol></li>
	<li>光シート蛍光顕微鏡画像処理の場合、ステップ4.4で固定後4°Cで動脈を一晩保存します。<ol>
<li>ウサギ抗CD31一次抗体を1:500希釈して3日間の希釈剤(pH7.4)で動脈をプローブする。次に、抗ウサギアレクサフルオール647二次抗体の1:500希釈で動脈に対して2日間19.</li>
		<li>iDISCO+20を使用して動脈をクリアします。</li>
		<li>光シート蛍光顕微鏡21を用いて動脈を画像化する。ソフトウェア(例えば、イマリス)を使用して画像をレンダリングする19.</li>
	</ol></li>
	<li>新内皮過形成を定量化する。可能であれば、ブラインドで定量を行います。<ol>
<li>ImageJソフトウェアを使用して、上で決定した3〜10スライドのそれぞれ上の動脈のインティマ、内部弾性層(IEL)、および外的弾性層(EEL)の周囲を追跡します(ステップ4.8.3)。</li>
		<li>ImageJ でトレースされた各領域の面積を数値化し、これらの値をエクスポートします。インティマ トレースはルーメン領域を生成し、IEL トレースは IEL 領域を生成し、EEL トレースは EEL 領域を生成します。</li>
		<li>ラット頸動脈あたりの平均傷害(%閉塞、インティマ:培地(I:M)比、新内皮過形成)を得るために3-10スライドから得られた値を平均する。 ネオインティマル過形成 = IELエリア - ルーメンエリア <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/60473/60473eq1.jpg"> <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/60473/60473eq2.jpg">
</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol>
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G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+effect+of+a+short-acting+NO+donor+for+the+prevention+of+neointimal+hyperplasia.">Beneficial effect of a short-acting NO donor for the prevention of neointimal hyperplasia.</a> Free Radical Biology and Medicine. 44 (1), 73-81 (2008).</li><li>Cao, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100B+promotes+injury-induced+vascular+remodeling+through+modulating+smooth+muscle+phenotype.">S100B promotes injury-induced vascular remodeling through modulating smooth muscle phenotype.</a> Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Basis of Disease. 1863 (11), 2772-2782 (2017).</li><li>Madigan, M., Entabi, F., Zuckerbraun, B., Loughran, P., Tzeng, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+inhaled+carbon+monoxide+mediates+the+regression+of+established+neointimal+lesions.">Delayed inhaled carbon monoxide mediates the regression of established neointimal lesions.</a> Journal of Vascular Surgery. 61 (4), 1026-1033 (2015).</li><li>Khurana, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis-dependent+and+independent+phases+of+intimal+hyperplasia.">Angiogenesis-dependent and independent phases of intimal hyperplasia.</a> Circulation. 110 (16), 2436-2443 (2004).</li><li>Tsihlis, N. D., Vavra, A. K., Martinez, J., Lee, V. R., Kibbe, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+is+less+effective+at+inhibiting+neointimal+hyperplasia+in+spontaneously+hypertensive+rats.">Nitric oxide is less effective at inhibiting neointimal hyperplasia in spontaneously hypertensive rats.</a> Nitric Oxide. 35, 165-174 (2013).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+neointimal+hyperplasia+in+the+rat+carotid+artery+injury+model+by+a+HMGB1+inhibitor.">Inhibition of neointimal hyperplasia in the rat carotid artery injury model by a HMGB1 inhibitor.</a> Atherosclerosis. 224 (2), 332-339 (2012).</li><li>Mano, T., Luo, Z., Malendowicz, S. L., Evans, T., Walsh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+GATA-6+downregulation+promotes+smooth+muscle+differentiation+and+inhibits+intimal+hyperplasia+in+balloon-injured+rat+carotid+artery.">Reversal of GATA-6 downregulation promotes smooth muscle differentiation and inhibits intimal hyperplasia in balloon-injured rat carotid artery.</a> Circulation Research. 84 (6), 647-654 (1999).</li><li>Becher, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-Dimensional+Imaging+Provides+Detailed+Atherosclerotic+Plaque+Morphology+and+Reveals+Angiogenesis+after+Carotid+Artery+Ligation.">Three-Dimensional Imaging Provides Detailed Atherosclerotic Plaque Morphology and Reveals Angiogenesis after Carotid Artery Ligation.</a> Circulation Research. 126 (5), 619-632 (2020).</li></ol>

著者らは、この原稿の出版に関して利益相反はないと宣言している。

ラット頸動脈バルーン損傷は、最も広く使用され、研究されたレステノーシス動物モデルの1つです。元のバルーン傷害モデル3および改変された圧力制御性区分損傷変動10はいずれも、ヒトにおいても起こる動脈損傷応答の多くの側面を知らせており、フィブリンが豊富な血栓はめったに発症せず、局所炎症は高コレステロール血症ウサギまたはブタモデル...

心血管疾患(CVD)は、世界的に主要な死因である1.アテローム性動脈硬化症は、ほとんどのCVD関連の罹患率および死亡率の根本的な原因である。アテローム性動脈硬化症は、動脈内のプラークの蓄積であり、管腔が狭くなり、臓器および遠位組織への適切な血液灌流を妨げる2。重度のアテローム性動脈硬化症を治療するための臨床介入には、ステント配置の有無にかかわらずバルーン血管形成術が含まれる。この介入は、バルーンカテーテルをプラークの部位に進め、バルーンを膨らませてプラークを動脈壁に圧縮し、明るい領域を広げることを含む。しかし、この手順は動脈損傷応答3を発する動脈に損傷を与える。この傷害応答の長時間の活性化は、動脈の修復、または再狭小化、新内皮過形成および血管リモデリングに二次的に至る。血管形成術の間、内皮層は、即時血小板の形成および局所炎症をもたらす内皮細胞の脱ヌードである。局所シグナル伝達は、血管平滑筋細胞(VSMC)および発着性線維芽細胞における表皮変化を誘発する。これは、内腔へのVSMCおよび線維芽細胞の内向きの移動および増殖につながり、新内皮過形成4、5に至る。循環前駆細胞および免疫細胞も、全量の休止に寄与する。適用可能な場合、薬物溶出ステント(DES)は、残り性化7を阻害するための現在の標準である。しかし、DESは動脈再血管形成を阻害し、従って、後期ステント血栓症8を生じさせるプロ血栓性環境を作り出す。したがって、動物モデルは、再脳炎の病態生理を理解し、再血管化手順の有効性を延長するためのより良い治療戦略を開発するために不可欠である。
この病理を研究するために、大小の動物モデル9がいくつか利用されている。これらは、動脈の光側のバルーン傷害3、10またはワイヤー傷害11、ならびに動脈の周りの部分結紮12またはカフ配置13を含む。バルーンとワイヤーの損傷は、両方とも動脈の内皮層を脱裸にし、血管形成術後に臨床的に起こることを模倣する。特に、バルーン傷害モデルは、臨床設定(すなわちバルーンカテーテル)と同様のツールを利用する。ラット動脈は市販のバルーンカテーテルに適したサイズであるため、バルーン損傷はラットモデルで最もよく行われます。ここで我々は、圧力制御された細分動脈損傷、ラット頸動脈バルーン損傷の確立された、改変されたバージョンを記載する。この圧力制御アプローチは、臨床血管形成術を密接に模倣し、傷害14、15の2週間後に再現可能な新内皮過形成を可能にする。さらに、この圧力制御動脈損傷は手術後2週間までに完全な内皮層復帰をもたらす16.これは、内皮層が完全なカバレッジ3に戻らないクロウズによって記述された元のバルーン傷害モデルと直接対照的です。
手術後、治療はいくつかのアプローチを通じて、損傷した動脈に適用されるか、または向けられ得る。本明細書に記載される方法は、プルロン酸ゲル溶液に埋め込まれた小分子の回来期適用を使用する。具体的には、100μMシンナミックアルデヒドの溶液を25%プルロニックF127ゲルで動脈に塗布し、新内膜過形成を阻害する損傷直後に動脈に塗布する。Pluronic-F127は、制御された方法で薬物を局所的に送達することができる無毒、熱可逆ゲルである17.一方、動脈損傷は局所的であるため、地方行政はオフターゲット効果を最小限に抑えながらアクティブな原則をテストすることを可能にする。それにもかかわらず、この方法を用いた治療の有効な送達は、使用される低分子または生物学的の化学に依存する。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:776px;" width="776">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">1 mL Syringe</td>
			<td style="width:148px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">14955450</td>
			<td style="width:183px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1 mL Syringe with needle</td>
			<td style="width:148px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">309626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2 French Fogarty Balloon Embolectomy Catheter</td>
			<td style="width:148px;">Edwards LifeSciences</td>
			<td style="width:119px;">120602F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4-0 Ethilon (Nylon) Suture</td>
			<td style="width:148px;">Ethicon Inc</td>
			<td style="width:119px;">662H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4-0 Vicryl Suture</td>
			<td style="width:148px;">Ethicon Inc</td>
			<td style="width:119px;">J214H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">7-0 Prolene Suture</td>
			<td style="width:148px;">Ethicon Inc</td>
			<td style="width:119px;">8800H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">70% ethyl alcohol</td>
			<td style="width:148px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:327px;">Anti-Rabbit Alexa Fluor 647</td>
			<td style="width:148px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">A21245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Atropine Sulfate</td>
			<td style="width:148px;">Vedco Inc</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>for veterinary use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cotton Swabs</td>
			<td style="width:148px;">Puritan</td>
			<td style="width:119px;">806-WC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Curved Hemostats</td>
			<td style="width:148px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">13009-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fine Curved Forceps</td>
			<td style="width:148px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11203-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fine Scissors</td>
			<td style="width:148px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">14090-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Gauze</td>
			<td style="width:148px;">Covidien</td>
			<td style="width:119px;">2252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">IHC-Tek Diluent (pH 7.4)</td>
			<td style="width:148px;">IHC World</td>
			<td style="width:119px;">IW-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Insufflator</td>
			<td style="width:148px;">Merit Medical</td>
			<td style="width:119px;">IN4130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Iodine solution</td>
			<td style="width:148px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lubricating Eye Ointment</td>
			<td style="width:148px;">Dechra</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>for veterinary use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mayo Scissors</td>
			<td style="width:148px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">14010-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro Serrefines</td>
			<td style="width:148px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">18055-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microdissection Scissors</td>
			<td style="width:148px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">15004-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps</td>
			<td style="width:148px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">18057-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Needle Holder</td>
			<td style="width:148px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">12003-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pluronic-127 (diluted in sterile water)</td>
			<td style="width:148px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P2443</td>
			<td style="width:183px;">25% prepared</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:327px;">Rabbit Anti-CD31</td>
			<td style="width:148px;">Abcam</td>
			<td style="width:119px;">ab28364</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Retractor</td>
			<td style="width:148px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:183px;">Bent paper clips work well</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rimadyl (Carprofen)</td>
			<td style="width:148px;">Zoetis Inc</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>for veterinary use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Saline solution</td>
			<td style="width:148px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Standard Forceps</td>
			<td style="width:148px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11006-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile Drape</td>
			<td style="width:148px;">Dynarex</td>
			<td style="width:119px;">4410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">T-Pins</td>
			<td style="width:148px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rat carotid artery pressure-controlled segmental balloon injury with periadventitial therapeutic application

心血管疾患は、アテローム性動脈硬化症の一部により、世界中の死亡および障害の主な原因であり続けている。動脈硬化性プラークは、動脈の発光表面積を狭くし、器官および遠位組織への十分な血流を減少させる。臨床的には、ステント配置の有無にかかわらずバルーン血管形成術などの血管形成術のような再血管形成手順は、血流を回復させることを目的としている。これらの手順は、プラークの負担を軽減することによって血流を再確立するが、それらは、動脈治癒応答を開始する血管壁を損傷する。長期の治癒応答は動脈の修復、または再狭動を引き起こし、最終的にこれらの再血管化処置の長期的な成功を制限する。したがって、前臨床動物モデルは、レステノーシスを駆動する病態生理学的メカニズムを分析するために不可欠であり、新たな治療戦略をテストする機会を提供する。ネズミモデルは、大型動物モデルよりも安価で操作が簡単です。バルーンまたはワイヤー損傷は、マウスモデルで使用される2つの一般的に受け入れられている傷害モダリティです。特にバルーン傷害モデルは、臨床血管形成術を模倣し、修復の発達のために動脈に十分な損傷を引き起こす。ここでは、改変された、圧力制御されたラット頸動脈バルーン傷害モデルを行い、組織学的に分析するための外科的詳細を説明する。さらに、このプロトコルは、新内皮過形成を阻害するためにどのように治療の局所的な来期適用を使用することができるかを強調する。最後に、3次元で動脈損傷を可視化・可視化するための新しいアプローチとして、光シート蛍光顕微鏡を紹介する。

図1は、この手術を行うために使用されるすべての材料および外科用具を示しています。ヘマトキシリン&エオシン(H&E)2週間の損傷した動脈断面の染色は、新内皮肥大の明確な視覚化を可能にする。図2は、健康、負傷、治療された動脈のH&E染色動脈断面の代表的な画像を示しています。図2はまた、画像処理ソフトImageJを用いて...

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A Rat Carotid Artery Pressure-Controlled Segmental Balloon Injury with Periadventitial Therapeutic Application

ラット頸動脈バルーン傷害は、アテローム硬化性血管の血流を回復させるために行われる臨床血管形成術手順を模倣する。このモデルは、動脈壁を遠ざけ、内皮細胞の内皮層を脱脂することによって動脈損傷応答を誘導し、最終的にはリモデリングおよびインティタル過形成応答を引き起こす。

過期治療アプリケーションを用いてラット頸動脈圧制御区分バルーン損傷

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the ...

a-rat-carotid-artery-pressure-controlled-segmental-balloon-injury

Research

JoVE Journal

Medicine

4.9K ビュー.  University of North Carolina at Chapel Hill. ラット頸動脈バルーン傷害は、アテローム硬化性血管の血流を回復させるために行われる臨床血管形成術手順を模倣する。このモデルは、動脈壁を遠ざけ、内皮細胞の内皮層を脱脂することによって動脈損傷応答を誘導し、最終的にはリモデリングおよびインティタル過形成応答を引き起こす。

ビデオ: A Rat Carotid Artery Pressure-Controlled Segmental Balloon Injury with Periadventitial Therapeutic Application

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged mechanical ventilation, contributes to morbidity and mortality of critical illness, and studies on novel genetic or pharmacological targets are areas of intense investigation (1-3, 5, 8, 26, 30, 33-36). ALI is defined by the acute onset of the disease, which leads to non-cardiac pulmonary edema and subsequent impairment of pulmonary gas exchange (36). We have developed a murine model of ALI by using a pressure-controlled ventilation to induce ventilator-induced lung injury (2). For this purpose, C57BL/6 mice are anesthetized and a tracheotomy is performed followed by induction of ALI via mechanical ventilation. Mice are ventilated in a pressure-controlled setting with an inspiratory peak pressure of 45 mbar over 1 - 3 hours. As outcome parameters, pulmonary edema (wet-to-dry ratio), bronchoalveolar fluid albumin content, bronchoalveolar fluid and pulmonary tissue myeloperoxidase content and pulmonary gas exchange are assessed (2). Using this technique we could show that it sufficiently induces acute lung inflammation and can distinguish between different treatment groups or genotypes (1-3, 5). Therefore this technique may be helpful for researchers who pursue molecular mechanisms involved in ALI using a genetic approach in mice with gene-targeted deletion.

A murine model for ventilator induced lung injury is an important tool to study an acute lung injury in vivo. Here, we report an easy applicable in situ model for acute lung injury using high-pressure mechanical ventilation to induce acute failure of the lung.

マウスにおける急性肺障害を誘発するために圧力制御された換気

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

医学

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. Intra-tracheal inoculation of a known amount of bacteria has been successfully used to reproduce the pathogenesis of pneumonia which then develops into sepsis. Monitoring hemodynamic parameters and providing standard clinical treatment including infusion of antibiotics, fluids and drugs to maintain blood pressure is critical to simulate routine supportive care in this model but to do so requires both arterial and venous vascular access. The video details the surgical technique for implanting carotid artery and common jugular vein catheters in an anesthetized rat. Following a 72 hr recovery period, the animals will be re-anesthetized and connected to a tether and swivel setup attached to the rodent housing which connects the implanted catheters to the hemodynamic monitoring system. This setup allows free movement of the rat during the study while continuously monitoring pressures, infusing fluids and drugs (antibiotics, vasopressors) and performing blood sampling.

Vascular accesses to measure hemodynamics, provide fluids and perform blood sampling are important to any small animal model study. We present a technique for implanting catheters into the carotid artery and the common jugular vein in an anesthetized rat for connecting to a system to perform monitoring, infusions and sampling.

配慮ラットモデルにおける血行動態の措置、煎茶や血液サンプリングを実行するために頸動脈と頸静脈のカテーテル

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

マウスにおけるタキサンの薬物動態学的および薬力学的分析のための頸動脈煎茶

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and cellular mechanisms involved in vascular smooth muscle dedifferentiation, neointima formation and vascular remodeling. Male Sprague-Dawley rats are the most frequently employed animals for this model. Female rats are not preferred as female hormones are protective against vascular diseases and thus introduce a variation into this procedure. The left carotid is typically injured with the right carotid serving as a negative control. Left carotid injury is caused by the inflated balloon that denudes the endothelium and distends the vessel wall. Following injury, potential therapeutic strategies such as the use of pharmacological compounds and either gene or shRNA transfer can be evaluated. Typically for gene or shRNA transfer, the injured section of the vessel lumen is locally transduced for 30 min with viral particles encoding either a protein or shRNA for delivery and expression in the injured vessel wall. Neointimal thickening representing proliferative vascular smooth muscle cells usually peaks at 2 weeks after injury. Vessels are mostly harvested at this time point for cellular and molecular analysis of cell signaling pathways as well as gene and protein expression. Vessels can also be harvested at earlier time points to determine the onset of expression and/or activation of a specific protein or pathway, depending on the experimental aims intended. Vessels can be characterized and evaluated using histological staining, immunohistochemistry, protein/mRNA assays, and activity assays. The intact right carotid artery from the same animal is an ideal internal control. Injury-induced changes in molecular and cellular parameters can be evaluated by comparing the injured artery to the internal right control artery. Likewise, therapeutic modalities can be evaluated by comparing the injured and treated artery to the control injured only artery.

This protocol uses a balloon catheter to cause an intraluminal injury on the rat carotid artery and henceforth elicit neointimal hyperplasia. This is a well-established model for studying the mechanisms of vascular remodeling in response to injury. It is also widely used to determine the validity of potential therapeutic approaches.

ラット頸動脈における血管バルーン傷害と管腔内投与

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, obesity and diabetes. Accordingly, when evaluating therapies for stroke in animals, it is important to select a model with excellent face validity. Ischemic stroke accounts for 80% of all strokes, and the majority of these occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), often inducing infarcts that affect the sensorimotor cortex, causing persistent plegia or paresis on the contralateral side of the body. We demonstrate in this video a method for producing ischemic stroke in elderly rats, which causes sustained sensorimotor disability and substantial cortical infarcts. Specifically, we induce permanent distal middle cerebral artery occlusion (MCAO) in elderly female rats by using diathermy forceps to occlude a short segment of this artery. The carotid artery on the ipsilateral side to the lesion was then permanently occluded and the contralateral carotid artery was transiently occluded for 60 min. We measure the infarct size using structural T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) at 24 hr and 8 weeks after stroke. In this study, the mean infarct volume was 4.5% &#177; 2.0% (standard deviation) of the ipsilateral hemisphere at 24 hr (corrected for brain swelling using Gerriet&#8217;s equation, n = 5). This model is feasible and clinically relevant as it permits the induction of sustained sensorimotor deficits, which is important for the elucidation of pathophysiological mechanisms and novel treatments.

Here we present a protocol to produce permanent distal middle cerebral artery occlusion in elderly female rats with simultaneous occlusion of the carotid arteries to generate large cortical infarcts and sustained deficits. We show confirmation of the lesion size using structural MRI at 24 hr and 8 weeks after stroke.

持続的な障害と皮質虚血を研究するために高齢ラットにおける一般的な頸動脈閉塞と永久遠位中大脳の実行

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

A Rat Carotid Balloon Injury Model to Test Anti-vascular Remodeling Therapeutics

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is also a valuable model system to test, and to evaluate therapeutics and drugs that negate maladaptive remodeling in the vessel. The injury, or barotrauma, in the vessel lumen caused by an inflated balloon via an inserted catheter induces subsequent neointimal growth, often leading to hyperplasia or thickening of the vessel wall that narrows, or obstructs the lumen. The method described here is sufficiently sensitive, and the results can be obtained in relatively short time (2 weeks after the surgery). The efficacy of the drug or therapeutic against the induced-remodeling can be evaluated either by the post-mortem pathological and histomorphological analysis, or by ultrasound sonography in live animals. In addition, this model system has also been used to determine the therapeutic window or the time course of the administered drug. These studies can leadto the development of a better administrative strategy and a better therapeutic outcome. The procedure described here provides a tool for translational studies that bring drug and therapeutic candidates from bench research to clinical applications.

The rat carotid balloon injury model described below allows researchers to evaluate drugs or therapeutics that negate injury-induced arterial hyperplasia. Detailed pre-surgical preparation, surgical procedure, and post-surgical cares of the animal are described.

ラット頸動脈バルーン損傷モデルは、抗血管リモデリングの治療薬をテストします

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is ...

The Rabbit Model of Accelerated Atherosclerosis: A Methodological Perspective of the Iliac Artery Balloon Injury

Acute coronary syndrome resulting from coronary occlusion following atherosclerotic plaque development and rupture is the leading cause of death in the industrialized world. New Zealand White (NZW) rabbits are widely used as an animal model for the study of atherosclerosis. They develop spontaneous lesions when fed with atherogenic diet; however, this requires long time of 4 - 8 months. To further enhance and accelerate atherogenesis, a combination of atherogenic diet and mechanical endothelial injury is often employed. The presented procedure for inducing atherosclerotic plaques in rabbits uses a balloon catheter to disrupt the endothelium in the left iliac artery of NZW rabbits fed with atherogenic diet. Such mechanical damage caused by the balloon catheter induces a chain of inflammatory reactions initiating neointimal lipid accumulation in a time dependent fashion. Atherosclerotic plaque following balloon injury show neointimal thickening with extensive lipid infiltration, high smooth muscle cell content and presence of macrophage derived foam cells. This technique is simple, reproducible and produces plaque of controlled length within the iliac artery. The whole procedure is completed within 20 - 30 min. The procedure is safe with low mortality and also offers high success in obtaining substantial intimal lesions. The procedure of balloon catheter induced arterial injury results in atherosclerosis within two weeks. This model can be used for investigating the disease pathology, diagnostic imaging and to evaluate new therapeutic strategies.

Animal models of atherosclerosis are essential to understand the mechanism and to investigate newer approaches to prevent plaque development or rupture, a leading cause of death in the industrialized world. This protocol uses a combination of balloon injury and cholesterol rich diet to induce atherosclerotic plaques in rabbit iliac artery.

加速動脈硬化家兎モデル: 内腸骨動脈バルーン傷害の方法論的視点

Acute coronary syndrome resulting from coronary occlusion following atherosclerotic plaque development and rupture is the leading cause of death in the ...

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves focal endothelial-selective transgenesis, thereby allowing an investigator to determine the biological roles of endothelial-expressed transgenes and to quantify the in vivo transcriptional activity of DNA sequences in large artery endothelial cells. The method uses surgical isolation of rabbit common carotid arteries and an arteriotomy to deliver a transgene-expressing viral vector into the arterial lumen. A short incubation period of the vector in the lumen, with subsequent aspiration of the lumen contents, is sufficient to achieve efficient and durable expression of the transgene in the endothelium, with no detectable transduction or expression outside of the isolated arterial segment. The method allows assessment of the biological activities of transgene products both in normal arteries and in models of human vascular disease, while avoiding systemic effects that could be caused either by targeting gene delivery to other sites (e.g. the liver) or by the alternative approach of delivering genetic constructs to the endothelium by germ line transgenesis. Application of the method is limited by the need for a skilled surgeon and anesthetist, a well-equipped operating room, the costs of purchasing and housing rabbits, and the need for expertise in gene-transfer vector construction and use. Results obtained with this method include: transgene-related alterations in arterial structure, cellularity, extracellular matrix, or vasomotor function; increases or reductions in arterial inflammation; alterations in vascular cell apoptosis; and progression, retardation, or regression of diseases such as intimal hyperplasia or atherosclerosis. The method also allows measurement of the ability of native and synthetic DNA regulatory sequences to alter transgene expression in endothelial cells, providing results that include: levels of transgene mRNA, levels of transgene protein, and levels of transgene enzymatic activity.

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

This method is to introduce a transgene into the endothelium of rabbit carotid arteries. Introduction of the transgene allows the assessment of the biological role of the transgene product either in normal arteries or disease models. The method is also useful for measuring activity of DNA regulatory sequences.

生体内でウサギの一般的な頚動脈内皮細胞への遺伝子導入

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

Phase Contrast Magnetic Resonance Imaging in the Rat Common Carotid Artery

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous studies have shown that abnormal blood flow may be associated with systemic vascular risk. Thus, PC-MRI can facilitate the translation of data obtained from animal models of cardiovascular diseases to pertinent clinical investigations. In this report, we describe the procedure for measuring blood flow in the common carotid artery (CCA) of rats using cine-gated PC-MRI and discuss relevant analysis methods. This procedure can be performed in a live, anesthetized animal and does not require euthanasia after the procedure. The proposed scanning parameters yield repeatable measurements for blood flow, indicating excellent reproducibility of the results. The PC-MRI procedure described in this article can be used for pharmacological testing, pathophysiological assessment, and cerebral hemodynamics evaluation.

The overall goal of this procedure is to measure the blood flow in the rat common carotid artery by using noninvasive phase contrast magnetic resonance imaging.

ラットの総頸動脈で位相コントラスト磁気共鳴イメージング

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous ...

Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, we have translated a vascular injury model from a small animal into a large animal (canine), with slight modifications that can be used for pre-clinical screening of prophylactic and thrombolytic agents. In addition to the surgical methods, the modified protocol describes the step-by-step methods to assess carotid artery canalization by angiography, detailed instructions to process both the brain and carotid artery for histological analysis to verify carotid canalization and cerebral hemorrhage, and specific parameters to complete an assessment of downstream thromboembolic events by utilizing magnetic resonance imaging (MRI). In addition, specific procedural changes from the previously well-established small animal model necessary to translate into a large animal (canine) vascular injury are discussed.

Here, we present the modifications necessary to a well characterized and commonly used small animal ferric chloride-induced (FeCl3) carotid artery injury model for use in a large animal vascular injury model. The resulting model can be utilized for pre-clinical trial assessment of both prophylactic and thrombolytic pharmacological and mechanical interventions.

塩化第二鉄によるイヌ総頚動脈血栓症: 血管損傷の大動物モデル

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...