虚血性脳卒中の病態生理学を理解することは、ヒトに高品質の組織データがないために制限されています。このようなサンプルは入手が不可能であるため、適切に管理された動物モデル研究が代理として役立ちます。このプロトコルで使用されるウサギモデルは、虚血性脳卒中の尋問のための一貫した高品質のデータを提供します。
ここで説明する技術は、虚血性脳卒中の病態生理学への影響を評価するために血行動態因子の正確な制御および調節を可能にする。よく計画された手順は、薬理学的予防と効果的な血管造影技術の組み合わせを通じて、特に動脈の血管れん縮を軽減するための戦略を採用することにより、高品質の結果につながる可能性があります。はじめに、ウサギを透視検査と互換性のある手術台の上に仰臥位に置きます。
ヘッドを伸ばして、後続の血管造影ビューの位置決めを最適化します。血管れん縮を軽減するには、麻酔導入後に0.5インチの経皮ニトログリセリンを耳の内側に置きます。電気バリカンを使用して両方の鼠径部から毛皮を取り除いた後、クロルヘキシジンとアルコールのスクラブで皮膚を準備します。
通常の無菌様式で皮膚をドレープし、両側の大腿動脈脈拍を触診する。リドカインが注射された部位に10番の刃で5センチの外科的切開を行います。鈍的解離を使用して神経血管束を露出させ、必要に応じて切開部を伸ばして、アクセスに十分な大きさの動脈セグメントを露出させます。
神経血管束を分離したら、血管れん縮を防ぐために動脈に1%リドカインを数滴滴落とします。鉗子を使用して動脈を静脈および隣接する神経から穏やかに分離します。静脈の薄い壁と比較した筋肉壁の特徴的な外観によって動脈を識別します。
動脈を隔離した後、直角鉗子を血管の下に通します。次に、器具で2つの血管ループをつかみ、動脈の下にそっと通します。露出した容器の上流端と下流端にそれぞれ1つずつ配置します。
血管ループを引っ張って動脈を穏やかな牽引にさらし、穏やかな解剖で除去する残留組織がないか血管を検査し、アクセスが成功する可能性を高めます。血管を解剖し、血管カテーテルを準備した後、再び血管にリドカインを滴下します。動脈は目に見えて拡張し、セルディンガー技術を使用してシースへのアクセスと配置を成功させる可能性が高くなります。
下流の血管ループに穏やかな牽引力を適用して、流出を減らし、アクセス試行のために血管を安定させることにより、動脈を充血させます。次に、血管カテーテルの針を露出した動脈セグメントの中央にゆっくりと進めます。血管カテーテルとハブチャンバーに血液の閃光が見えたら、カテーテルを動脈内腔に進めます。
血管カテーテルをうまく配置したら、コープマイクロワイヤーを血管カテーテル内腔を通って大動脈に進めます。次に、ワイヤー上の血管カテーテルを取り外し、5つのフレンチスリムな親水性シースと交換します。三方弁を開いて、サイドアームチューブを介した動脈血の戻りを確認します。
バルブを閉じロックし、シースを0.9%生理食塩水で洗い流します。追加の3.0シルク縫合糸でシースハブを隣接する皮膚に固定し、反対側の大腿動脈に対してこのプロセスを繰り返します。透視下で、左大腿骨シースに挿入された0.035インチのグライドワイヤーの上に4つのフランスのグライドカテーテルを進めます。
グライドカテーテルの先端を左椎骨動脈近位に配置した。ワイヤーを取り外した後、ヘパリン処理した0.9%生理食塩水でカテーテルを洗い流します。葉拡大下でヨード化造影剤を左椎骨動脈に注入して血管造影を行い、頭頸部全体を可視化します。
左椎骨注射の場合は、通常の生理食塩水で希釈した50%造影剤を、3CCシリンジからの穏やかなクレッシェンドで注入します。右椎骨動脈から右鎖骨下動脈への逆流を確認して注入量を決定します。この注射の間、後大脳動脈または上大脳動脈にも注意し、そのうちの1つがマイクロカテーテルで閉塞するターゲットになります。
0.010インチのマイクロワイヤーを備えた2.4フレンチフロー指向マイクロカテーテルを準備し、マイクロワイヤーの先端にC字型を作成します。ロードマップのガイダンスの下で、右大腿骨シースを使用して4つのフランスのグライドカテーテル内でマイクロカテーテルを進め、ワイヤーを越えて右椎骨動脈に進めます。マイクロカテーテルを左椎骨動脈の頸部を通して進めます。
V2からV3セグメントへの急旋回を通過するには、マイクロワイヤーがその先端の近位に戻ったときに、マイクロカテーテルだけを進めます。V2からV3への急旋回を通過した後、マイクロカテーテルはしばしば近位基底または動脈に容易に通過する。この時点で、マイクロワイヤーを進め、頭蓋内動脈の脆弱な性質のためにマイクロカテーテル注射はお勧めできないため、目的の後大脳動脈と上小脳動脈を選択します。
マイクロカテーテルをさらにマイクロワイヤーを介して標的動脈に進め、その起点での角度のために後方で通信するのが通常最も安全であるため、近位位置を選択します。上小脳動脈では、より深い位置が可能です。頭部に高倍率の左椎骨動脈カテーテルを注入して血管造影を繰り返し、標的動脈の閉塞を確認します。
最適なイメージングのために、すべての頭蓋内動脈の鎮静化に適した全強度のコントラスト(通常は1CC以下)を注入します。透視下でマイクロカテーテルからマイクロワイヤーをそっと取り外し、安定した位置を確認します。マイクロカテーテルのハブに活栓を置き、活栓を閉じて逆行性血流による失血を防ぎます。
左椎骨カテーテルを取り外して、左大腿骨アクセスシースを使用できるようにします。その後の閉塞期間中に、断続的な透視画像を取得して、閉塞マイクロカテーテルの安定した位置を確認します。3時間後に閉塞性マイクロカテーテルを取り外します。
次に、動脈血圧の測定と調節を追加の所望の期間継続します。大動脈のバルーンカテーテルを膨らませて収縮させ、血圧の変動を監視します。即時脳収穫を伴う急性処置では、後頭隆起から始めて、脳が無傷で収穫できるようになるまで前方に働きかけて、ロンジュールで少しずつ頭蓋骨を取り除きます。
必要な組織分析の種類に応じて、脳をホルマリンまたは瞬間凍結に入れます。全動物において脳の採取に成功し,病理組織学的解析を行い,右小脳に梗塞を認めた.血圧は腎下大動脈に配置されたFogartyバルーンカテーテルから追跡され、約1時間のモニタリングからのデータは、バルーンインフレーションの変化に伴うリアルタイムの動脈圧変化を示しています。
血圧の短期間の追跡は、心周期全体の圧力変化を示しています。さらに、生理学的に正常な呼吸変動から小さな急速な変化が認められた。バルーンの膨張に続いて、測定された血圧の即時のほぼ2倍が認められました。
この手順を試みる際には、血管カテーテルへのアクセス中の血管れん縮を防ぐために、細心の注意を払った鈍的解剖とリドカインの滴下が重要です。また、左椎骨動脈の血管造影は、標的の頭蓋内動脈への効率的な血管内アクセスのためのロードマップを提供します。血行動態は、薬理学的方法で、または大動脈のバルーンカテーテルを膨らませることによって調節することができる。
採取された脳標本は、組織病理学や空間トランスクリプトミクスなどのさまざまな手法で分析できます。
