このプロトコルは、ベッドサイドでのRCMおよびRCM-OCTデバイスの画像取得手順を詳述します。皮膚病変の正しい診断と管理のために、高品質の画像を取得することは典型的です。これらのデバイスは、in vivoで組織病理学的分解能で皮膚を画像化し、不要な良性生検を節約しながら、早期の皮膚がんを検出します。
診断はベッドサイドで行われ、患者の待ち時間と不安を軽減します。この顕微鏡によるイメージングは、ベッドサイドの患者の皮膚病変や皮膚がんの検出と診断を非侵襲的に導くのに役立ちます。さらに、この画像は、皮膚病変を表面的な病変とより深い病変にトリアージするのに役立ち、治療の指針となります。
したがって、イメージングは、診断と治療を1回の患者訪問に統合または組み合わせるのに役立ち、現在、ワンストップショップの患者ケアパラダイムと呼ばれています。イメージングを使用して皮膚病変や皮膚がんを検出および診断するだけでなく、患者の口腔病変および口腔がんの検出と診断をガイドするためにイメージングを使用しています。手順を実演するのは、私の研究室の組織技術者であるUcalene Harrisさんです。
まず、体幹や四肢などの皮膚の平らな面にある病変にはWP-RCMデバイスを選択し、鼻、耳たぶ、まぶた、生殖器などの曲面にある病変にはHH-RCMデバイスを選択します。イメージングのために、患者を完全にリクライニングチェアまたはサポート付きの平らな検査テーブルに置きます。次に、病変と周囲の皮膚をアルコールワイプできれいにします。
プラスチックの窓の中央に鉱油を一滴加え、窓の幅全体に注意深く広げます。窓の粘着側から文庫本を取り外し、肌をそっと伸ばして窓を取り付けます。WP-RCMデバイスを使用して画像を取得するには、プローブを病変に対して垂直に配置します。
次に、WP-RCMプローブをプラスチック製のウィンドウキャップの上にかざしてダーモスコピー画像を取得し、プローブの最適な挿入角度を推定します。プローブの側面にある小さな白い矢印を、ダーモスコピーカメラの側面にある矢印に合わせます。ダーモスコピーカメラをプラスチック製のウィンドウキャップに挿入します。
皮膚鏡の画像が病変表面全体を覆っていることを確認し、カメラのトリガーを押して画像を取得します。次に、皮膚鏡を取り外します。次に、エンドウ豆サイズの超音波ゲルを使い捨てのプラスチック製ウィンドウキャップの中に置きます。
鋭いカチッという音がするまで、RCMプローブをプラスチック製の使い捨てキャップに挿入します。前のステップで取得したダーモスコピー画像を使用して、病変の中心を選択し、角質層の無核層である皮膚の最上層または最も明るい層を特定します。このレベルでは、イメージング深度をゼロに設定します。
スタックアイコンを押して、病変の中心にあるスタックを取得します。ドロップダウンメニューから、顔または体の解剖学的部位を選択します。ステップサイズを4.5ミクロン、深さを250ミクロンに設定します。
スタック内の真皮-表皮接合部、またはDEJ層を特定し、病変全体をカバーする8x8ミリメートルの正方形を選択します。次に、モザイクアイコンを押して、DEJで最初のモザイクを取得します。後続のモザイクを取得するには、DEJモザイク上の構造をクリックしてライブビューで表示します。
DEJから下にスクロールして真皮のモザイクを取得し、次にDEJから上にスクロールして表皮のモザイクを取得します。ダーモスコピーで均一なパターンで各象限に1つのスタックと病変の中央に1つのスタックをキャプチャするか、不均一な病変の追加スタックを取得します。画像セッションが完了したら、顕微鏡レンズを囲む保護コーンを取り外します。
対物レンズの先端をアルコール綿棒で拭き、レンズを乾かします。プラスチックコーンを顕微鏡プローブに再度取り付けます。共焦点診断評価レポートを生成するには、[新しい評価] をクリックします。
ドロップダウンメニューで事前に選択されたオプションから診断を入力します。レポートのチェックリストからイメージング中に表示される機能を選択し、該当する管理を選択します。[完了]をクリックして署名します。
レポートを PDF として生成し、印刷します。HH-RCMデバイスを使用して画像を取得するには、最初に患者を配置し、病変部位をきれいにし、紙のリングで病変を一周します。エンドウ豆サイズの超音波ゲルをHH-RCMの対物レンズに塗布し、プラスチックキャップで覆います。
皮膚に触れるプラスチックキャップの側面にミネラルオイルをたっぷりと加えます。プローブを皮膚の病変側にしっかりと押し付けます。HH-RCMデバイスのZ深度コントロールを使用して、病変内のさまざまな深さで上下に移動します。
関心領域内の複数の単一フレーム画像とスタックを取得します。大きな病変の場合は、HH-RCMプローブを病変表面全体に移動し、ビデオキャプチャ記号をクリックして、さまざまな層で連続ビデオを撮影します。血管内の血球の動きを記録します。
イメージングセッションが完了したら、[イメージングの完了]を押します。アルコール綿棒で病変を洗浄し、プローブの対物レンズから超音波ゲルを取り外し、プラスチックキャップを再度取り付けます。患者を画像化のために配置し、病変の境界に過剰な髪の毛や局所不純物がないことを確認します。
前のセクションで説明したようにプローブを準備したら、[イメージング設定]をクリックします。ラインイメージングモードを選択して、RCM画像を取得します。ステップサイズを5ミクロンに設定し、ステップ数を40に設定します。
前のセクションで示したようにスタックを取得するには、[Grab] をクリックします。次に、をクリックします フリーズ 完了後ボタン。[イメージング設定]をクリックし、[ラスターモード]を選択して、病変構造の相関OCTビデオを取得します。
[技術者] タブに切り替えます。完了したら、[グラブ]ボタンをクリックし、すぐに[保存]ボタンを押します。このプロトコルを使用して、高品質のRCM画像が皮膚の関連する深さで取得されました。
気泡、表面の破片、モーションアーチファクトなど、診断評価を妨げるアーチファクトは避ける必要があります。RCMでは、核分裂した角化細胞からなる角質層や、明るい細胞質を持つ密集した有核細胞からなる有核層からなる脊髄層など、さまざまな皮膚層が観察され、典型的なハニカムパターンを形成しました。これに続いて、基底ケラチノサイトのメラニンキャップによって形成された石畳のパターンによって識別される基底層が続きました。
そして、明るいリングパターンを特徴とするDEJ。乳頭状真皮は明るいコラーゲン線維と血管で構成されていました。基底細胞癌のような一般的な皮膚癌のRCM画像は、裂け目と柵状の腫瘍結節を示しました。
扁平上皮癌は、非定型ハニカムパターンおよびボタンホール血管を示した。そして黒色腫は表皮に明るく大きな丸いページ様細胞のクラスターを示しました。基底細胞癌の場合、RCM画像は決定的な腫瘍結節を示すことができませんでした。
一方、スタックとラスターの両方で解釈されたRCM-OCT画像は、裂け目と肥厚したコラーゲン束とともに、表皮に接続された明確な灰色の腫瘍結節を示しました。診断はH&E染色生検によって確認された。WP-RCMイメージングでは、皮膚の5層から診断品質のモザイクを取得することが重要です。
HH-RCMを使用してスムーズなビデオとスタックを撮影し、RCM-OCTデバイスを使用して同じエリア内のスタックとラスターの両方を撮影します。
