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<em>In vivo</em> Imaging of Transgenic <em>Leishmania</em> Parasites in a Live Host

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

University of Iowa, and the VA Medical Center

&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x975E;&#x7ED3;&#x6784;&#x6027;&#x86CB;&#x767D; NSP1 &#x662F;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x6700;&#x5C11;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5728;&#x590D;&#x5236;&#x5468;&#x671F;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x96C7;&#x7528; NSP1 &#x4F5C;&#x4E3A;&#x8BF1;&#x9975;&#x5728;&#x9175;&#x6BCD;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x9677;&#x9631;&#x4E2D;&#x786E;&#x5B9A;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x8702;&#x7A9D;&#x4F19;&#x4F34;&#x7684; NSP1 &#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7EBF;&#x7D22;&#x3002;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 3 (IRF-3) &#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A; NSP1 &#x4EA4;&#x4E92;&#x65B9;&#x3002;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5408;&#x6210;&#x7684; NSP1 &#x7ED1;&#x5B9A; IRF 3 &#x4E2D;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD; S-&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x62C9;&#x4E0B;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x4E92;&#x52A8;&#x4E0D;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6DF7;&#x5408;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#x7535;&#x5B50;&#x6218; NSP1 &#x8FD8;&#x4EA4;&#x4E92; IRF 3&#x3002;NSP1 &#x5220;&#x9664;&#x548C;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x800C;&#x5174;&#x5EFA;&#xFF0C;&#x8981;&#x5C06;&#x91CD;&#x8981; NSP1 &#x548C; IRF 3 &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E2D;&#x7684;&#x57DF;&#x6620;&#x5C04;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#x6240;&#x5728;&#x7684; NSP1 C &#x603B;&#x7AD9;&#x548C; N &#x7AEF;&#x5B88;&#x6052;&#x950C;&#x624B;&#x6307;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x4F46;&#x5E76;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x8C03;&#x89E3;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x516C;&#x8DEF; 3&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9884;&#x6D4B; NSP1 &#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x6291;&#x5236;&#x6FC0;&#x6D3B; IRF 3 &#x5E76;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 3 &#x662F;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2; NSP1 &#x624B;&#x673A;&#x8FD0;&#x8425;&#x5546;&#x5408;&#x4F5C;&#x4F19;&#x4F34;&#x3002;

The rotavirus nonstructural protein NSP1 is the least conserved protein in the rotavirus genome, and its function in the replication cycle is not known. We employed NSP1 as bait in the yeast two-hybrid interaction trap to identify candidate cellular partners of NSP1 that may provide clues to its function. Interferon regulatory factor 3 (IRF-3) was identified as an NSP1 interactor. NSP1 synthesized in rotavirus-infected cells bound IRF-3 in a glutathione S-transferase pull-down assay, indicating that the interaction was not unique to the two-hybrid system. NSP1 of murine rotavirus strain EW also interacted with IRF-3. NSP1 deletion and point mutants were constructed to map domains important in the interaction between NSP1 and IRF-3. The data suggest that a binding domain resides in the C terminus of NSP1 and that the N-terminal conserved zinc finger is important but not sufficient to mediate binding to IRF-3. We predict that a role for NSP1 in rotavirus-infected cells is to inhibit activation of IRF-3 and diminish the cellular interferon response.

Interferon regulatory factor 3 is a cellular partner of rotavirus NSP1.

Les prot&eacute;ines non structurales du rotavirus NSP1 est la prot&eacute;ine moins conserv&eacute;e dans le g&eacute;nome de rotavirus, et son r&ocirc;le dans le cycle de r&eacute;plication n&#39;est pas connu. Nous avons utilis&eacute; la NSP1 comme app&acirc;t dans le pi&egrave;ge d&#39;interaction de deux-hybride de levure pour identifier des partenaires cellulaires de candidat de NSP1 qui peuvent fournir des indices &agrave; sa fonction. Facteur de normalisation de l&#39;interf&eacute;ron 3 (IRF-3) a &eacute;t&eacute; identifi&eacute; comme un interacteur NSP1. Nsp1 synth&eacute;tis&eacute; dans les cellules infect&eacute;es par le rotavirus li&eacute; IRF-3 dans un essai de pull-down de glutathion S-transf&eacute;rase, ce qui indique que l&#39;interaction n&#39;est pas unique au syst&egrave;me de deux-hybride. Nsp1 de souche de rotavirus murin QU&#39;EW aussi interagi avec IRF-3. Nsp1 suppression et point mutants ont &eacute;t&eacute; construits pour faire correspondre les domaines importants de l&#39;interaction entre la NSP1 et IRF-3. Les r&eacute;sultats sugg&egrave;rent qu&#39;un domaine de liaison se trouve dans la partie C terminale de NSP1 et que le N-terminal conserv&eacute; &agrave; doigt de zinc est importante mais pas suffisante &agrave; la m&eacute;diation de la liaison &agrave; l&#39;IRF-3. Nous pr&eacute;disons que joue un r&ocirc;le NSP1 dans les cellules infect&eacute;es par le rotavirus est pour inhiber l&#39;activation de l&#39;IRF-3 et de diminuer la r&eacute;ponse cellulaire de l&#39;interf&eacute;ron.

Facteur de normalisation de l&#39;interf&eacute;ron 3 est un partenaire cellulaire du rotavirus NSP1.

Interferon regulatory factor 3 ist ein zellul&#xE4;rer Partner von Rotavirus nsP1.

Le proteine non strutturali rotavirus NSP1 sono la proteina meno conservata del genoma di rotavirus, e non &egrave; nota la sua funzione nel ciclo di replicazione. Abbiamo impiegato NSP1 come esca nella trappola due-ibrido interazione lievito per identificare partner cellulare candidato di NSP1 che pu&ograve; fornire indizi per la sua funzione. Fattore regolatore interferone 3 (IRF-3) &egrave; stato identificato come un&#39;interazione NSP1. NSP1 sintetizzata nelle cellule infettate da rotavirus associato IRF-3 in un saggio di pull-down S-transferasi del glutatione, che indica che l&#39;interazione non &egrave; stata unica per il sistema del due-ibrido. NSP1 del ceppo murino rotavirus che EW anche interagito con IRF-3. Mutanti di delezione e punto NSP1 furono costruiti per mappa domini importanti nell&#39;interazione tra NSP1 e IRF-3. I dati suggeriscono che un dominio di legame risiede in C terminale di NSP1 e che il N-terminale conservato zinc finger &egrave; importante ma non sufficiente per mediare associazione IRF-3. Prevediamo che un ruolo per NSP1 in cellule infettate da rotavirus &egrave; di inibire l&#39;attivazione di IRF-3 e diminuire la risposta cellulare interferone.

Fattore regolatore interferone 3 &egrave; un cellulare partner di rotavirus NSP1.

&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x975E;&#x69CB;&#x9020;&#x86CB;&#x767D; NSP1 &#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x7BC0;&#x7D04;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3078;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059; NSP1 &#x306E;&#x643A;&#x5E2F;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x6BCD; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x990C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E; NSP1 &#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x5236;&#x5FA1;&#x56E0;&#x5B50; 3 &#xFF08;IRF-3&#xFF09;&#x3001;NSP1 interactor &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x305F; NSP1 IRF 3 &#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3; s-&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30D7;&#x30EB;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C; 2 &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3002;NSP1 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3072;&#x305A;&#x307F; EW &#x306E;&#x307E;&#x305F; IRF-3 &#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;NSP1 &#x524A;&#x9664;&#x3068;&#x70B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53; NSP1 &#x3068; IRF 3 &#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x5EFA;&#x8A2D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; NSP1 &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066; N &#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x4E9C;&#x925B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x3092;&#x4FDD;&#x5B58; IRF 3 &#x3078;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;IRF 3 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; NSP1 &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x5236;&#x5FA1;&#x56E0;&#x5B50; 3 &#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; NSP1 &#x306E;&#x643A;&#x5E2F;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; nonstructural &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; nsp1&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xCD5C;&#xC18C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xBA70; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; NSP1 &#xD6A8; &#xBAA8; 2 &#xC7A1;&#xC885; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD2B8;&#xB7A9; &#xBBF8;&#xB07C;&#xB85C; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; NSP1 &#xADF8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778; 3 (IRF-3) NSP1 interactor&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD569;&#xC131; NSP1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB450; &#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xC5C6;&#xC74C;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; glutathione S&#xACFC; &#xD480; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; IRF 3 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Murine&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; EW NSP1 &#xB610;&#xD55C; IRF 3&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. NSP1 &#xC0AD;&#xC81C; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; NSP1 IRF 3 &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xD551;&#xD560; &#xAC74;&#xC124; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; nsp1&#xC758; C &#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xBCF4;&#xC874;&#xC740; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; IRF 3 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC911;&#xC7AC; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC608;&#xCE21; nsp1&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; IRF 3&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xCD95;&#xC18C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C; 3&#xC5D0;&#xB294; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; NSP1 &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La prote&iacute;na no estructural de rotavirus NSP1 es la prote&iacute;na menos conservada en el genoma del rotavirus, y se desconoce su funci&oacute;n en el ciclo de replicaci&oacute;n. Empleamos NSP1 como cebo en la trampa de la interacci&oacute;n de dos h&iacute;bridos de levadura a identificar a socios celular candidato de NSP1 que puede dar pistas a su funci&oacute;n. Factor regulador de interfer&oacute;n 3 (IRF-3) fue identificado como un interactiano NSP1. NSP1 sintetizada en c&eacute;lulas infectadas por rotavirus atado IRF-3 en un ensayo de pull-down de glutati&oacute;n S-transferasa, indicando que la interacci&oacute;n no es exclusiva para el sistema h&iacute;brido de dos. NSP1 de cepa de rotavirus murino que EW tambi&eacute;n interactu&oacute; con IRF-3. Se construyeron mutantes de deleci&oacute;n y punto de NSP1 para asignar dominios importantes en la interacci&oacute;n entre NSP1 y IRF-3. Los datos sugieren que un dominio obligatorio reside en la terminal C de NSP1 y el N-terminal conserva zinc finger es importante pero no suficiente para mediar la Uni&oacute;n a la IRF-3. Predecimos que un papel de NSP1 en c&eacute;lulas infectadas por rotavirus es inhibir la activaci&oacute;n de la IRF-3 y disminuir la respuesta celular del interfer&oacute;n.

Factor regulador de interfer&oacute;n 3 es socio celular del rotavirus NSP1.

&#x68C0;&#x75AB;&#x79D1;&#x5B66;&#x9020;&#x6210;&#x4E86;&#x591A;&#x6570;&#x6025;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x80A0;&#x80C3;&#x708E;&#x4E16;&#x754C;&#x6027;&#x6D41;&#x884C;&#x75C5;&#x7684;&#x7206;&#x53D1;&#x3002;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8BFA;&#x6C83;&#x514B;&#x682A;&#x6210;&#x957F;&#x4E0D;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6587;&#x5316;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x78B3;&#x6C34;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x5206;&#x6790;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5F00;&#x59CB;&#x5728;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x591A;&#x4E2A;&#x6297;&#x539F;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E2D;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x8BFA;&#x5982;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8863;&#x58F3;&#x4E2D;&#x5B9A;&#x4E49;&#x529F;&#x80FD;&#x57DF;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x5BF9;&#x57DF;&#x8FDB;&#x884C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#x4E3B;&#x8981;&#x8863;&#x58F3;&#x86CB;&#x767D; VP1 &#x800C;&#x8A00;&#x975E;&#x5E38;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;Genogroups GI.1 &#x548C; GII.2 &#x53C2;&#x8003;&#x83CC;&#x682A;&#x8BFA;&#x6C83;&#x514B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x548C;&#x96EA;&#x5C71;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x5206;&#x522B;&#x88AB;&#x751F;&#x6210;&#xFF0C;&#x963B;&#x6B62;&#x5BF9;&#x4E2D;&#x4E9A;&#x5408;&#x4F5C;&#x7EC4;&#x7EC7; 2 &#x80A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6837;&#x9897;&#x7C92;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51DD;&#x96C6;&#x3002;&#x6A21;&#x4EFF;&#x4EBA;&#x4E0E;&#x751F;&#x7269;&#x5708;&#x65B9;&#x6848;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x662F;&#x4ECE;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x5C55;&#x793A;&#x968F;&#x673A;&#x591A;&#x80BD;&#x5E93;&#x4E2D;&#x9009;&#x62E9;&#x3002;Anti-recombinant &#x8BFA;&#x6C83;&#x514B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53; 54.6 &#x548C; anti-recombinant &#x96EA;&#x5C71;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53; 61.21 &#x516C;&#x8BA4;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x4F4D;&#x4E8E; VP1 &#x7684;&#x51F8;&#x51FA;&#x7684; P2 &#x57DF;&#x4E2D;&#x3002;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230;&#x4EBA;&#x4E0E;&#x751F;&#x7269;&#x5708; 61.21 &#x8F7D;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#xFF0C;&#x5B8C;&#x5168;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x8BFA;&#x6C83;&#x514B;&#x682A;&#x8DE8; genogroups&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x732A;&#x3001; &#x725B;&#x548C;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7269;&#x79CD;&#x5206;&#x79BB;&#x682A;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x6807;&#x8BC6;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8BFA;&#x6C83;&#x514B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x548C;&#x652F;&#x6301;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x68C0;&#x75AB;&#x79D1;&#x5B66;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; VP1 P2 &#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;

&#x6297;&#x539F;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7C07;&#x7684;&#x8BFA;&#x6C83;&#x514B; VP1 P2 &#x57DF;&#x4E2D;&#x627F;&#x8BA4;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#xFF0C;&#x963B;&#x6B62;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Noroviruses cause the majority of epidemic outbreaks of acute viral gastroenteritis worldwide. Human norovirus strains do not grow in cell culture, but recent carbohydrate binding, sequence and structural analyses have begun to define functional domains in the norovirus capsid that may be conserved among multiple antigenic types. The purpose of this study was to localize domains and define sequences in the major capsid protein VP1 that are important for cell interactions. Monoclonal antibodies to genogroups GI.1 and GII.2 reference strains Norwalk virus and Snow Mountain virus, respectively, were generated that blocked binding of recombinant virus-like particles to Caco-2 intestinal cells and inhibited haemagglutination. Peptides that mimicked the mAb binding epitopes were selected from a phage-displayed random nonapeptide library. Anti-recombinant Norwalk virus mAb 54.6 and anti-recombinant Snow Mountain virus mAb 61.21 recognized epitopes located in the protruding P2 domain of VP1. The epitope recognized by mAb 61.21 contained amino acids that are completely conserved among norovirus strains across genogroups, including strains isolated from swine, bovine and murine species. This study identifies the first epitope involved in inhibition of norovirus-cell interactions and supports increasing evidence that interactions between noroviruses and host cells rely on structures in the P2 domain of VP1.

Epitopes in the P2 domain of norovirus VP1 recognized by monoclonal antibodies that block cell interactions.

Les norovirus causent la majorit&eacute; des &eacute;pid&eacute;mies de gastro-ent&eacute;rite virale aigu&euml; dans le monde entier. Les norovirus humains souches ne poussent pas en s&eacute;quence de culture, mais la r&eacute;cente liaison de glucides, cellule et analyses structurelles ont commenc&eacute; &agrave; d&eacute;finir les domaines fonctionnels de la capside des norovirus qui peut-&ecirc;tre &ecirc;tre conserv&eacute;e parmi plusieurs types antig&eacute;niques. Le but de cette &eacute;tude &eacute;tait de localiser les domaines et &agrave; d&eacute;finir des s&eacute;quences dans la prot&eacute;ine majeure de la capside VP1 qui sont importants pour les interactions entre les cellules. Anticorps monoclonaux de g&eacute;nogroupes GI.1 et GII.2 r&eacute;f&eacute;rence souches virus de Norwalk et montagne des neiges, respectivement, ont &eacute;t&eacute; g&eacute;n&eacute;r&eacute;s qui bloqu&eacute; la liaison des recombinants Pseudo-particules virales aux cellules intestinales Caco-2 et inhibe l&#39;h&eacute;magglutination. Peptides qui miment les &eacute;pitopes de liaison mAb ont &eacute;t&eacute; s&eacute;lectionn&eacute;s parmi une biblioth&egrave;que de phage-affiche un nonapeptide al&eacute;atoire. Anti-recombinant mAb de virus de Norwalk 54,6 et anti-recombinant Snow Mountain virus mAb 61,21 reconnus &eacute;pitopes situ&eacute;s dans le domaine de P2 qui d&eacute;passe du VP1. L&#39;&eacute;pitope reconnu par mAb 61,21 contenue des acides amin&eacute;s qui sont totalement conserv&eacute;es parmi les souches de norovirus travers g&eacute;nogroupes, y compris les souches isol&eacute;es de l&#39;esp&egrave;ce porcine, bovine et murin. Cette &eacute;tude identifie l&#39;&eacute;pitope premier impliqu&eacute; dans l&#39;inhibition des interactions cellules norovirus et prend en charge de plus en plus &eacute;vident que les interactions entre les norovirus et cellules h&ocirc;tes s&#39;appuient sur les structures dans le domaine de P2 de VP1.

&Eacute;pitopes du domaine P2 de norovirus VP1 reconnu par anticorps monoclonaux qui bloquent les interactions entre cellules.

Noroviren verursachen die meisten epidemische Ausbr&uuml;che der akute virale Gastroenteritis weltweit. Menschliche Norovirus St&auml;mme wachsen nicht in Zelle Kultur, sondern den letzten Kohlenhydrat-Bindung, Sequenz und Strukturanalysen haben begonnen, funktionelle Dom&auml;nen in das Norovirus-Kapsid zu definieren, die unter mehrere Antigene Arten konserviert werden kann. Der Zweck dieser Studie war die Dom&auml;nen zu lokalisieren und definieren Sequenzen in das wichtigste Kapsidprotein VP1, die f&uuml;r Zelle Interaktionen wichtig sind. Monoklonaler Antik&ouml;rper gegen Genogroups GI.1 und GII.2 Verweis St&auml;mme Norwalkvirus und Schneeberg-Virus, wurden jeweils generiert, die blockiert die Bindung von rekombinanten Virus-&auml;hnliche Partikel zu Caco-2 Darmzellen und gehemmt H&auml;magglutination. Peptide, die die mAb binden Epitopes nachgeahmt wurden aus einer zuf&auml;lligen Nonapeptide Phage angezeigt-Bibliothek ausgew&auml;hlt. Anti-recombinant Norwalk Virus mAb 54,6 und anti-recombinant Snow Mountain Virus mAb 61,21 anerkannten Epitopes befindet sich in der hervorstehenden P2-Dom&auml;ne des VP1. Die Epitope von mAb 61.21 enthaltenen Aminos&auml;uren, die vollst&auml;ndig unter Norovirus St&auml;mme &uuml;ber Genogroups, einschlie&szlig;lich St&auml;mme isoliert von Schweinen, Rindern und Murine Arten konserviert werden erkannt. Dieser Studie identifiziert die erste Epitop Hemmung der Norovirus-Zell-Interaktionen beteiligt und unterst&uuml;tzt zunehmend Hinweise, dass Wechselwirkungen zwischen Noroviren und Wirtszellen auf Strukturen in der P2-Dom&auml;ne des VP1 verlassen.

Epitope im P2 Bereich der Norovirus VP1 erkannt durch monoklonale Antik&ouml;rper Blocks Zelle Interaktionen.

Norovirus causano la maggior parte dei focolai epidemici di gastroenterite virale acuta in tutto il mondo. Norovirus umano ceppi non si sviluppano in sequenza di cultura, ma la recente associazione di carboidrati, cella e analisi strutturali hanno cominciato a definire i domini funzionali nel capside norovirus che pu&ograve; essere conservato tra pi&ugrave; tipi antigenici. Lo scopo di questo studio era di localizzare domini e definire le sequenze della proteina maggiore del capside VP1 che sono importanti per le interazioni delle cellule. Anticorpi monoclonali per genogroups GI.1 e GII.2 riferimento ceppi Norwalk virus e virus Snow Mountain, rispettivamente, sono stati generati che bloccato associazione ricombinante particelle virus-simili a cellule intestinali Caco-2 e inibito emoagglutinazione. Peptidi che imitavano gli epitopi di associazione mAb sono stati selezionati da una libreria dei fagi-visualizzato nonapeptide casuale. Anti-recombinant Norwalk virus mAb 54,6 e anti-recombinant neve montagna virus mAb 61,21 riconosciuti epitopi che si trova nel dominio P2 sporgente di VP1. L&#39;epitopo riconosciuto dagli amminoacidi mAb 61.21 contenute che sono completamente conservate tra i ceppi di norovirus in tutta genogroups, compresi i ceppi isolati da specie suina, bovina e murino. Questo studio identifica il primo epitopo coinvolto nell&#39;inibizione delle interazioni cella norovirus e supporta crescente evidenza che le interazioni tra il norovirus e cellule ospiti si basano su strutture del dominio P2 di VP1.

Epitopi del dominio P2 di norovirus VP1 riconosciuto da anticorpi monoclonali che bloccano le interazioni cellulari.

&#x30CE;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x4E16;&#x754C;&#x4E2D;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6027;&#x80C3;&#x8178;&#x708E;&#x306E;&#x6D41;&#x884C;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EBA;&#x9593;&#x30CE;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x682A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6587;&#x5316;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7CD6;&#x7D50;&#x5408;&#x9806;&#x5E8F;&#x3067;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x3001;&#x69CB;&#x9020;&#x89E3;&#x6790;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30CE;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x306B;&#x59CB;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4E3B;&#x8981;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x86CB;&#x767D; VP1 &#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;.Genogroups GI.1 &#x3068; GII.2 &#x30EA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B9;&#x682A;&#x30CE;&#x30FC;&#x30A6;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3068;&#x96EA;&#x5C71;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; caco-2 &#x8178;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x69D8;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x51DD;&#x96C6;&#x6291;&#x5236;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;MAb &#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x771F;&#x4F3C;&#x305F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0; nonapeptide phage &#x8868;&#x793A;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x304B;&#x3089;&#x9078;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6240;&#x898B;&#x30CE;&#x30FC;&#x30A6;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; mAb 54.6 &#x3068; VP1 &#x306E;&#x7A81;&#x51FA; P2 &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x6240;&#x898B;&#x96EA;&#x5C71;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; mAb 61.21 &#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3002;Genogroups&#x3001;&#x8C5A;&#x3001;&#x725B;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x83CC;&#x682A;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5168;&#x4F53;&#x30CE;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7CFB;&#x7D71;&#x9593;&#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B; mAb 61.21 &#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x30CE;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x305D;&#x306E;&#x30CE;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE; VP1 &#x306E; P2 &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x69CB;&#x9020;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

P2 &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; &#x30CE;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; VP1 &#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7; &#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x305D;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Noroviruses &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xAE09;&#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC704;&#xC7A5;&#xC5FC; &#xC804;&#xC138;&#xACC4;&#xC758; &#xC804;&#xC5FC;&#xBCD1; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC758; &#xC6D0;&#xC778;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB178;&#xB85C;&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC885; &#xC140; &#xBB38;&#xD654;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD5C;&#xADFC; &#xD0C4;&#xC218;&#xD654;&#xBB3C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC640; &#xAD6C;&#xC870; &#xBD84;&#xC11D; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD56D; &#xC6D0; &#xC885;&#xB958; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC874; &#xC218; &#xB178;&#xB85C;&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; capsid &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xAE30; &#xC2DC;&#xC791; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC8FC;&#xC694; capsid &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; VP1 &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xB294;. Genogroups GI.1 &#xBC0F; GII.2 &#xCC38;&#xC870; &#xC885;&#xC790; &#xB178; &#xC6CC;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC640; &#xC124; &#xC0B0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;, &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; Caco-2 &#xC7A5;&#xC758; &#xC140;&#xC744; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC19;&#xC740; &#xC785;&#xC790;&#xC758; &#xCC28;&#xB2E8; &#xBC0F; haemagglutination&#xB97C; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C;. MAb &#xBC14;&#xC778;&#xB529; epitopes &#xC720;&#xC0AC; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC784;&#xC758;&#xC758; nonapeptide &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xC815; &#xB410;&#xB2E4;. Anti-recombinant &#xB178; &#xC6CC;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; mAb 54.6 &#xBC0F; anti-recombinant &#xC124; &#xC0B0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; mAb 61.21 &#xC778;&#xC2DD;&#xB41C; epitopes vp1&#xC758; &#xD280;&#xC5B4;&#xB098;&#xC628; p 2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD53C;&#xD1A0; &#xD504; genogroups, &#xB3FC;&#xC9C0;, &#xC18C;, murine &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC885;&#xC790;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC804;&#xCCB4; &#xB178;&#xB85C;&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAE34;&#xC7A5; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xBCF4;&#xC874; &#xC644;&#xC804;&#xD788; mAb 61.21 &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xC2DD;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB178;&#xB85C;&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; epitope&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00; noroviruses &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xBC0F; VP1 P2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140;.

Epitopes &#xB178;&#xB85C;&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; VP1 P2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB294; &#xBE14;&#xB85D; &#xC140; &#xC0C1;&#xD638; &#xC778;&#xC2DD;.

Los norovirus causan la mayor&iacute;a de los brotes epid&eacute;micos de gastroenteritis viral aguda en todo el mundo. Norovirus humano cepas no crecen en secuencia de cultura, pero la reciente uni&oacute;n de carbohidratos, c&eacute;lula y an&aacute;lisis estructurales han comenzado a definir dominios funcionales en la c&aacute;psida de norovirus que puede conservarse entre m&uacute;ltiples tipos antig&eacute;nicos. El prop&oacute;sito de este estudio era localizar dominios y definir secuencias en la prote&iacute;na de la c&aacute;pside mayor VP1 que son importantes para las interacciones de la c&eacute;lula. Anticuerpos monoclonales para genogroups GI.1 y el virus de Norwalk de cepas de referencia GII.2 y el virus de la monta&ntilde;a de la nieve, respectivamente, se generaron que bloquea la Uni&oacute;n de part&iacute;culas de tipo virus recombinantes a las c&eacute;lulas intestinales de Caco-2 e inhibici&oacute;n de la hemaglutinaci&oacute;n. P&eacute;ptidos que imitaban a los epitopos de atascamiento de mAb fueron seleccionados de una biblioteca de Fago que aparecen al azar nonap&eacute;ptido. Anti-recombinant Norwalk virus mAb 54,6 y anti-recombinant nieve monta&ntilde;a virus mAb 61,21 reconocidos epitopos situados en el dominio que sobresale de la P2 de VP1. El epitopo reconocido por mAb 61.21 contenida amino&aacute;cidos que se conservan totalmente entre cepas de norovirus en genogroups, incluyendo las cepas aisladas de la especie porcina, bovina y murino. Este estudio identifica el epitopo primero implicado en la inhibici&oacute;n de las interacciones de norovirus-c&eacute;lula y apoya la evidencia creciente de las interacciones entre los norovirus y c&eacute;lulas hospedadoras dependen de estructuras en el &aacute;mbito de la P2 de VP1.

Ep&iacute;topos en el dominio de P2 de norovirus VP1 reconocieron por los anticuerpos monoclonales que bloquean las interacciones de la c&eacute;lula.

&#x6709;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#xFF0C;&#x5728;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#x7528;&#x4F5C;&#x5BF9;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x9632;&#x5FA1;&#x7B56;&#x7565;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x5F00;&#x53D1;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x3001; &#x6E29;&#x548C;&#x7684;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7504;&#x522B; (MTS) &#x5B9E;&#x9A8C;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x51CF;&#x5C11;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x63D0;&#x9AD8;&#x56FA;&#x6709;&#x53CD;&#x5E94;&#x53D7;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;

&#x51CF;&#x5C11;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4E2D;&#x7B49;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7B5B;&#x67E5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x5929;&#x7136;&#x4EA7;&#x54C1;&#x3002;

There is widespread interest in the use of innate immune modulators as a defense strategy against infectious pathogens. Using rotavirus as a model system, we developed a cell-based, moderate-throughput screening (MTS) assay to identify compounds that reduce rotavirus infectivity in vitro, toward a long-term goal of discovering immunomodulatory agents that enhance innate responses to viral infection.

Natural products that reduce rotavirus infectivity identified by a cell-based moderate-throughput screening assay.

Il y a un int&eacute;r&ecirc;t dans l&#39;utilisation de modulateurs immunitaires inn&eacute;es comme une strat&eacute;gie de d&eacute;fense contre les agents pathog&egrave;nes infectieux g&eacute;n&eacute;ralis&eacute;. &Agrave; l&#39;aide de rotavirus comme syst&egrave;me mod&egrave;le, nous avons d&eacute;velopp&eacute; un test de d&eacute;pistage (MTS) bas&eacute;s sur les cellules et &agrave; d&eacute;bit mod&eacute;r&eacute; pour identifier des compos&eacute;s qui r&eacute;duisent l&#39;infectivit&eacute; antirotavirus in vitro, r&eacute;alisation d&#39;un objectif &agrave; long terme de d&eacute;couvrir des agents immunomodulateurs qui am&eacute;liorent les r&eacute;ponses inn&eacute;es &agrave; l&#39;infection virale.

Produits naturels qui r&eacute;duisent l&#39;infectivit&eacute; antirotavirus identifi&eacute;e par un test de d&eacute;pistage de d&eacute;bit mod&eacute;r&eacute; sur les cellules.

Es gibt weit verbreitete Interesse an der Verwendung von angeborenen immun-Modulatoren als eine Verteidigungsstrategie gegen infekti&ouml;se Erreger. Mit Rotaviren als Modellsystem, entwickelten wir eine zellbasierte, Moderate-Durchsatz (MTS) screening Assay um Verbindungen zu identifizieren, die reduzieren Rotaviren Infektiosit&auml;t in vitro auf ein langfristiges Ziel immunmodulatorische Agents, die Verbesserung der angeborene Reaktionen auf eine virale Infektion zu entdecken.

Naturprodukte, die Rotaviren Infektiosit&auml;t identifiziert durch eine Moderate-Throughput-Screening zellbasierte Probe zu verringern.

Non c&#39;&egrave; interesse diffuso per l&#39;uso di modulatori immunitarie innate come una strategia di difesa contro agenti patogeni infettivi. Utilizzando rotavirus come sistema di modello, abbiamo sviluppato un test cell-based, moderato-throughput screening (MTS) per identificare i composti che riducono l&#39;infettivit&agrave; di rotavirus in vitro, verso un obiettivo a lungo termine di scoprire agenti immunomodulatori che migliorano la risposta innata all&#39;infezione virale.

Prodotti naturali che riducono l&#39;infettivit&agrave; di rotavirus identificato da un&#39;analisi cell-based moderato-throughput screening.

&#x751F;&#x5F97;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9632;&#x885B;&#x6226;&#x7565;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x95A2;&#x5FC3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x4F53;&#x5916;&#x3001;&#x751F;&#x5F97;&#x7684;&#x306A;&#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x5264;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3059;&#x308B;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x76EE;&#x6A19;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3001;&#x9069;&#x5EA6;&#x306A;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8; (MTS) &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x9069;&#x5EA6;&#x306A;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x81EA;&#x7136;&#x88FD;&#x54C1;&#x3002;

&#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC804;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBD84;&#xC11D; &#xC140; &#xAE30;&#xBC18;, &#xBCF4;&#xD1B5; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; (MTS) &#xC2EC;&#xC0AC; &#xACB0;&#xACFC; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C;, &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558;&#xB294; immunomodulatory &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574;&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; infectivity &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C;&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;.

&#xBCF4;&#xD1B5; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xAC80;&#xC5F4; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C;&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; infectivity &#xAC10;&#xC18C; &#xCC9C;&#xC5F0; &#xC81C;&#xD488;.

Hay un inter&eacute;s generalizado en el uso de moduladores inmunes innatos como una estrategia de defensa frente a pat&oacute;genos infecciosos. Con rotavirus como sistema modelo, hemos desarrollado un ensayo (MTS) de detecci&oacute;n basadas en celdas, rendimiento moderado para identificar compuestos que reducen la infectividad de rotavirus in vitro, hacia un objetivo a largo plazo de descubrir agentes inmunomoduladores que mejoren las respuestas innatas a la infecci&oacute;n viral.

Productos naturales que reducen la infectividad de rotavirus identificado por un an&aacute;lisis de la proyecci&oacute;n de moderado rendimiento basadas en c&eacute;lulas.

&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 3 (IRF3) &#x662F;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8BF1;&#x5BFC; &#xFF08;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#xFF09; &#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x975E;&#x7ED3;&#x6784;&#x86CB;&#x767D; NSP1 &#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x4E0E;&#x65E9;&#x671F;&#x53D7;&#x76EE;&#x6807; IRF3&#x3002;&#x5728;&#x725B;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A; B641 NSP1 &#x5B88;&#x6052; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x950C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#x5185;&#x7684;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x548C;&#x7EC4;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x5E9F;&#x9664; IRF3 &#x9000;&#x5316;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5728; NSP1 &#x950C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x662F;&#x91CD;&#x8981; IRF3 &#x9000;&#x5316;&#x3002;&#x4E0E;&#x725B;&#x5E94;&#x53D8; B641&#xFF0C;&#x76F8;&#x53CD;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x611F;&#x67D3;&#x732A;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A; OSU &#x548C; OSU NSP1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x53EA;&#x5F31;&#x5230; IRF3 IRF3 &#x662F;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;B641 NSP1 &#x548C; OSU NSP1 &#x88AB;&#x7A33;&#x5B9A;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x6216;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63D0;&#x53D6;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x5242; MG132 &#x53CA;&#x950C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x6253;&#x4E71;&#x4E86;&#x5B9A;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x65F6;&#x3002;&#x4ECE; B641 &#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; IRF3 &#x9000;&#x5316;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; NSP1 &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x548C;&#x52A0; IRF3 &#x548C; NSP1 &#x7684;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x950C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x96C6;&#x4F53;&#x652F;&#x6301; NSP1 &#x662F; E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x6570;&#x636E;&#x3002;

&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2; NSP1 &#x950C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x964D;&#x89E3; IRF3 &#x548C;&#x5EF6;&#x7F13;&#x53F6;&#x7247; NSP1 &#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;

Interferon regulatory factor 3 (IRF3) is a key transcription factor involved in the induction of interferon (IFN) in response to viral infection. Rotavirus non-structural protein NSP1 binds to and targets IRF3 for proteasome degradation early post-infection. Mutational analysis of cysteine and histidine residues within the conserved N-terminal zinc-binding domain in NSP1 of bovine rotavirus strain B641 abolished IRF3 degradation in transfected cells. Thus, the integrity of the zinc-binding domain in NSP1 is important for degradation of IRF3. In contrast to bovine strain B641, IRF3 was stable in cells infected with porcine rotavirus strain OSU and OSU NSP1 bound only weakly to IRF3. Both B641 NSP1 and OSU NSP1 were stabilized in cells or cell-free extracts in the presence of the proteasome inhibitor MG132 and when the zinc-binding domain was disrupted by site-directed mutagenesis. Data from the B641 analyses that show IRF3 degradation is dependent on the presence of NSP1 and the integrity of the N-terminal zinc-binding domain, coupled with the regulated stability of IRF3 and NSP1 by the proteasome, collectively support the hypothesis that NSP1 is an E3 ubiquitin ligase.

Zinc-binding domain of rotavirus NSP1 is required for proteasome-dependent degradation of IRF3 and autoregulatory NSP1 stability.

Facteur de normalisation interf&eacute;ron 3 (IRF3) est un facteur de transcription cl&eacute; impliqu&eacute; dans l&#39;induction de l&#39;interf&eacute;ron (IFN) en r&eacute;ponse &agrave; l&#39;infection virale. Prot&eacute;ines non structurales de rotavirus NSP1 lie &agrave; et cibles IRF3 post-infection d&eacute;but de d&eacute;gradation du prot&eacute;asome. Analyse mutationnelle des r&eacute;sidus cyst&eacute;ine et histidine dans le domaine de zinc-liaison N-terminal conserv&eacute; dans NSP1 de souche de rotavirus bovin B641 aboli IRF3 d&eacute;gradation dans les cellules transfect&eacute;es. Ainsi, l&#39;int&eacute;grit&eacute; du domaine liant le zinc dans NSP1 est importante dans la d&eacute;gradation des IRF3. Contrairement &agrave; la souche bovine B641, IRF3 a &eacute;t&eacute; stable dans les cellules infect&eacute;es avec des rotavirus porcine souche OSU et OSU NSP1 limite seulement faiblement &agrave; IRF3. B641 NSP1 tant OSU NSP1 sont stabilis&eacute;s dans les cellules ou acellulaires extraits en pr&eacute;sence de l&#39;inhibiteur du prot&eacute;asome MG132 et lorsque le domaine de liaison de zinc a &eacute;t&eacute; perturb&eacute; par mutagen&egrave;se dirig&eacute;e. Donn&eacute;es des analyses B641 qui montrent la d&eacute;gradation IRF3 d&eacute;pend de la pr&eacute;sence de NSP1 et l&#39;int&eacute;grit&eacute; du domaine N-terminal liant le zinc, le prot&eacute;asome, de pair avec la stabilit&eacute; r&eacute;glement&eacute;e de IRF3 et NSP1 collectivement soutenir l&#39;hypoth&egrave;se que NSP1 est une E3 ubiquitine ligase.

Domaine de liaison au zinc du rotavirus NSP1 est n&eacute;cessaire pour la d&eacute;gradation de prot&eacute;asome d&eacute;pendante de IRF3 et autor&eacute;gulatrice NSP1 stabilit&eacute;.

Interferon ordnungspolitischen Faktor 3 (IRF3) ist ein wichtiger Transkriptionsfaktor, der die Induktion von Interferon (IFN) als Reaktion auf eine virale Infektion beteiligt. Rotaviren Nichttragendes Protein NSP1 bindet an und zielt auf IRF3 f&uuml;r Proteasom Verschlechterung der fr&uuml;hen Stunden. Teilhabende Analyse von Cystein und Histidin R&uuml;ckst&auml;nde innerhalb der konservierten N-Terminal-Zink-Bindung-Dom&auml;ne in NSP1 Bovines Rotavirus-Stamm B641 abgeschafft IRF3 Abbau in transfected Zellen. Daher ist die Integrit&auml;t der Zink-bindende Dom&auml;ne in NSP1 Abbau des IRF3 wichtig. Im Gegensatz zur bovinen-Stamm B641 war IRF3 in Zellen infiziert mit Schweinen Rotavirus Stamm OSU und OSU NSP1 Grenze nur schwach zu IRF3 stabil. B641 NSP1 und OSU NSP1 wurden in Zellen stabilisiert oder zellfreien extrahiert, in Anwesenheit der Proteasom-Inhibitors MG132 und wenn die Zink-bindende Dom&auml;ne von Site-verwiesene Mutagenese gest&ouml;rt wurde. Daten aus den B641-Analysen, die IRF3 Verschlechterung zeigen das Vorhandensein von NSP1 abh&auml;ngig ist, und die Integrit&auml;t der N-terminalen Zink-Bindung Domain, zusammen mit der geregelten Stabilit&auml;t der IRF3 und NSP1 von der Proteasom gemeinsam unterst&uuml;tzen die Hypothese, dass NSP1 eine E3 Ubiquitin Ligase ist.

Zink-bindende Dom&auml;ne von Rotaviren NSP1 ist f&uuml;r Proteasom-abh&auml;ngige Verschlechterung der IRF3 und Autoregulatory NSP1 Stabilit&auml;t erforderlich.

Fattore regolatore interferone 3 (IRF3) &egrave; un fattore di trascrizione chiave coinvolto nell&#39;induzione di interferone (IFN) in risposta all&#39;infezione virale. Proteina non-strutturale di rotavirus NSP1 si lega a e obiettivi IRF3 per post-infection primi del proteasoma degradazione. Analisi mutazionale di cisteina e istidina residui all&#39;interno del dominio di zinco-associazione N-terminale conservato in NSP1 del ceppo rotavirus bovino B641 abolita IRF3 degradazione in celle transfected. Cos&igrave;, l&#39;integrit&agrave; del dominio zinc-binding in NSP1 &egrave; importante per la degradazione di IRF3. Contrariamente al ceppo bovino B641, IRF3 era stabile in cellule infettate con porcine rotavirus strain OSU e OSU NSP1 associato solo debolmente, a IRF3. B641 NSP1 sia OSU NSP1 sono stati stabilizzati in cellule o senza cellula estrae in presenza dell&#39;inibitore del proteasoma MG132 e quando il dominio zinc-binding &egrave; stato interrotto da mutagenesi luogo-diretta. Dati dalle analisi B641 che mostrano IRF3 degradazione dipende dalla presenza di NSP1 e l&#39;integrit&agrave; del dominio N-terminale zinco-associazione, accoppiato con la stabilit&agrave; di IRF3 e NSP1 regolamentata dal proteasoma, collettivamente supportano l&#39;ipotesi che NSP1 &egrave; una E3 ubiquitina ligasi.

Zinc-binding domain di rotavirus NSP1 &egrave; necessario per la degradazione del proteasoma-dipendente di IRF3 e autoregulatory NSP1 stabilit&agrave;.

&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x5236;&#x5FA1;&#x56E0;&#x5B50; 3 &#xFF08;IRF3&#xFF09; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3; &#xFF08;IFN&#xFF09; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30AD;&#x30FC;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x975E;&#x69CB;&#x9020;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; NSP1 &#x306F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;IRF3 &#x3092;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5206;&#x89E3;&#x521D;&#x671F;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x725B;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3072;&#x305A;&#x307F; B641 &#x306E; NSP1 &#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F; N &#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB;&#x4E9C;&#x925B;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x89E3;&#x6790; IRF3 &#x52A3;&#x5316; transfected &#x30BB;&#x30EB;&#x3067;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;NSP1 &#x306E;&#x4E9C;&#x925B;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x306F; IRF3 &#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30B7;&#x306E;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684; B641 IRF3 &#x30D6;&#x30BF; &#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x5927;&#x9808;&#x30FB;&#x5927;&#x9808; NSP1 &#x5F31;&#x3060;&#x3051;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F; IRF3 &#x3068;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;B641 NSP1 &#x3068;&#x5927;&#x9808; NSP1 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x62BD;&#x51FA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; MG132 &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3068;&#x4E9C;&#x925B;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x6307;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E2D;&#x65AD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; IRF3 &#x4F4E;&#x4E0B; B641 &#x5206;&#x6790;&#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x3001;NSP1 &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F; IRF3 &#x3068; NSP1 &#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3068; N &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x4E9C;&#x925B;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066; NSP1 E3 &#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA; &#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; NSP1 &#x306E;&#x4E9C;&#x925B;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; IRF3 &#x3068;&#x591A; NSP1 &#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x5206;&#x89E3;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778; 3 (IRF3) &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; (IFN) &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC8FC;&#xC694; &#xC804;&#xC0AC; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBE44; &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; NSP1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; IRF3 &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC800;&#xD558; &#xCD08;&#xAE30; post-infection&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; B641 nsp1&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC544;&#xC5F0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB0B4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;&#xACFC; &#xD788;&#xC2A4;&#xD2F0;&#xB518; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; mutational &#xBD84;&#xC11D; IRF3 &#xC800;&#xD558; transfected &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD3D0;&#xC9C0;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB144; NSP1 &#xC544;&#xC5F0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; irf3&#xC758; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC18C; &#xBCC0;&#xD615; B641, &#xB2EC;&#xB9AC; IRF3 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB3FC;&#xC9C0;&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778; OSU&#xC640; OSU NSP1 &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xB9CC; &#xC57D;&#xD558;&#xAC8C; IRF3 &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xC815; &#xB410;&#xB2E4;. B641 nsp1&#xC640; OSU NSP1 &#xC140;&#xC5D0; &#xC548;&#xC815; &#xB41C; &#xB610;&#xB294; &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; mg132&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; &#xC544;&#xC5F0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC9C0;&#xC2DC; &#xB41C; mutagenesis&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xB2E8; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. IRF3 &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC8FC;&#xB294; B641 &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; nsp1&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xACE0;, &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; IRF3 nsp1&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; N-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC544;&#xC5F0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; &#xCD1D;&#xCE6D; NSP1 E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;.

&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; nsp1&#xC758; &#xC544;&#xC5F0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; IRF3 autoregulatory NSP1 &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC758; &#xC800;&#xD558; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC885;&#xC18D; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;.

Factor regulador de interfer&oacute;n 3 (IRF3) es un factor de transcripci&oacute;n clave implicado en la inducci&oacute;n del interfer&oacute;n (IFN) en respuesta a la infecci&oacute;n viral. Prote&iacute;nas no estructurales de rotavirus NSP1 se une a y objetivos IRF3 para post-infecci&oacute;n temprana de degradaci&oacute;n proteasomal. El an&aacute;lisis mutacional de residuos de ciste&iacute;na e histidina dentro del dominio de cinc-enlace N-terminal conservado en NSP1 de cepa de rotavirus bovino B641 hab&iacute;a suprimido IRF3 degradaci&oacute;n en las c&eacute;lulas transfected. As&iacute;, la integridad del dominio de cinc-encuadernaci&oacute;n de NSP1 es importante para la degradaci&oacute;n de IRF3. A diferencia de la cepa bovina B641 IRF3 fue estable en c&eacute;lulas infectadas con rotavirus porcino cepa OSU y OSU NSP1 l&iacute;mite solamente d&eacute;bil a IRF3. B641 NSP1 tanto OSU NSP1 fueron estabilizados en c&eacute;lulas o acelulares extractos en presencia del inhibidor de la proteasoma MG132 y cuando el dominio cinc-obligatorio fue interrumpido por mutag&eacute;nesis sitio-dirigida. Datos de los an&aacute;lisis B641 que muestran IRF3 degradaci&oacute;n depende de la presencia de NSP1 y la integridad del dominio N-terminal de cinc-obligatorio, junto con la estabilidad regulada de IRF3 y NSP1 por el proteasoma, colectivamente apoyan la hip&oacute;tesis que NSP1 es una ligasa de ubiquitina E3.

Dominio de cinc-obligatorio del rotavirus NSP1 es necesario para la degradaci&oacute;n de la proteasoma dependiente de IRF3 y hay estabilidad NSP1.

&#x5176;&#x4E2D;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5BF9;&#x4ED8;&#x5148;&#x5929;&#x4E3B;&#x673A;&#x9632;&#x5FA1;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E00;&#x822C;&#x673A;&#x5236;&#x6D89;&#x53CA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6216;&#x591A;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &#xFF08;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#xFF09; &#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x591A;&#x4E2A;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E2D;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x548C;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#x653E;&#x5927;&#x9488;&#x5BF9;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7ED3;&#x5408;&#xFF0C;&#x7531;&#x548C;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x8BB8;&#x591A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x76F4;&#x63A5;&#x6216;&#x95F4;&#x63A5;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x975E;&#x7ED3;&#x6784;&#x86CB;&#x767D; NSP1 &#x5757;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x952E;&#x5165;&#x6211; IFNalpha/&beta; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 3 (IRF3)&#xFF0C;IRF5 &#x548C; IRF7 &#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x8FD9; NSP1 &#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8FD8;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684; NFkappaB &#x548C;&#x8FD9;&#x6837;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x9700;&#x8981; NFkappaB &#x6FC0;&#x6D3B;&#x6291;&#x5236;&#x5242; (IkappaBalpha) &#x6D3B;&#x5316;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;Skp1/Cul1/F-&#x6846;&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D; F &#x6846;&#x5E95;&#x7269;&#x8BC6;&#x522B;&#x86CB;&#x767D;&#x662F; beta transducin &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684; IkappaBalpha &#x662F;&#x57FA;&#x677F;&#x7684; polyubiquitination &#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x94FE;&#x7684; E3 &#x6CDB;&#x7D20;&#x8FDE;&#x63A5;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x91CD;&#x590D;&#x542B;&#x86CB;&#x767D; (&beta;-TrCP)&#x3002;&#x63D0;&#x4EA4;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;IkappaBalpha &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x662F;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x56E0;&#x4E3A;&#x611F;&#x67D3;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x7684; &beta;-TrCP&#x3002; NSP1 &#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x6682;&#x6001;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5206;&#x79BB;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6548;&#x679C;&#x3002;F &#x6846;&#x86CB;&#x767D;&#x7684; E3 &#x8FDE;&#x63A5;&#x9176;&#x590D;&#x6742;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6269;&#x6563;&#x9014;&#x5F84;&#x53D1;&#x6325;&#x7A81;&#x51FA;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x7684;&#x9000;&#x5316;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x514D;&#x75AB;&#x9003;&#x907F;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x6218;&#x7565;&#x3002;

&#x8F6E;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2; NSP1 &#x6291;&#x5236; NFkappaB &#x6FC0;&#x6D3B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x7684; &beta;-TrCP: &#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x65B0;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Mechanisms by which viruses counter innate host defense responses generally involve inhibition of one or more components of the interferon (IFN) system. Multiple steps in the induction and amplification of IFN signaling are targeted for inhibition by viral proteins, and many of the IFN antagonists have direct or indirect effects on activation of latent cytoplasmic transcription factors. Rotavirus nonstructural protein NSP1 blocks transcription of type I IFNalpha/beta by inducing proteasome-dependent degradation of IFN-regulatory factors 3 (IRF3), IRF5, and IRF7. In this study, we show that rotavirus NSP1 also inhibits activation of NFkappaB and does so by a novel mechanism. Proteasome-mediated degradation of inhibitor of kappaB (IkappaBalpha) is required for NFkappaB activation. Phosphorylated IkappaBalpha is a substrate for polyubiquitination by a multisubunit E3 ubiquitin ligase complex, Skp1/Cul1/F-box, in which the F-box substrate recognition protein is beta-transducin repeat containing protein (beta-TrCP). The data presented show that phosphorylated IkappaBalpha is stable in rotavirus-infected cells because infection induces proteasome-dependent degradation of beta-TrCP. NSP1 expressed in isolation in transiently transfected cells is sufficient to induce this effect. Targeted degradation of an F-box protein of an E3 ligase complex with a prominent role in modulation of innate immune signaling and cell proliferation pathways is a unique mechanism of IFN antagonism and defines a second strategy of immune evasion used by rotaviruses.

Rotavirus NSP1 inhibits NFkappaB activation by inducing proteasome-dependent degradation of beta-TrCP: a novel mechanism of IFN antagonism.

Les m&eacute;canismes par lequel virus contrer les r&eacute;actions de d&eacute;fense inn&eacute;e h&ocirc;te g&eacute;n&eacute;ralement impliquent l&#39;inhibition d&#39;un ou plusieurs composants du syst&egrave;me de l&#39;interf&eacute;ron (IFN). Plusieurs &eacute;tapes dans l&#39;induction et l&#39;amplification de signalisation de l&#39;IFN sont cibl&eacute;s pour l&#39;inhibition par des prot&eacute;ines virales, et beaucoup d&#39;entre les antagonistes de l&#39;IFN ont des effets directs ou indirects sur l&#39;activation de facteurs de transcription cytoplasmique latente. Rotavirus prot&eacute;ines non structurales NSP1 blocs transcription du type I IFNalpha/b&ecirc;ta en induisant la d&eacute;gradation du prot&eacute;asome d&eacute;pendante des facteurs r&eacute;glementaires IFN 3 (IRF3), IRF5 et IRF7. Dans cette &eacute;tude, nous montrons que rotavirus NSP1 &eacute;galement emp&ecirc;che l&#39;activation de por et un nouveau m&eacute;canisme pour ce faire. La d&eacute;gradation de l&#39;inhibiteur de kappaB (IkappaBalpha) induite par le prot&eacute;asome est requise pour l&#39;activation de por. IkappaBalpha phosphoryl&eacute; est un substrat de polyubiquitination par une d&eacute;termination complexe E3 ubiquitine ligase, Skp1/Cul1/F-box, dans lequel la prot&eacute;ine de reconnaissance du substrat F-box est b&ecirc;ta-transducin r&eacute;p&eacute;ter contenant des prot&eacute;ines (b&ecirc;ta-PCRC). Le donn&eacute;es pr&eacute;sent&eacute;es montrent que phosphoryl&eacute;e IkappaBalpha est stable dans les cellules infect&eacute;es par le rotavirus, car l&#39;infection provoque la d&eacute;gradation du prot&eacute;asome d&eacute;pendante de b&ecirc;ta-PCRC. NSP1 exprim&eacute;e en isolement dans des cellules transfect&eacute;es transitoirement est suffisante pour provoquer cet effet. D&eacute;gradation cibl&eacute;e d&#39;une prot&eacute;ine F-box d&#39;une ligase E3 complexe avec un r&ocirc;le important dans la modulation de l&#39;inn&eacute; voies de prolif&eacute;ration de signalisation et de cellules immunitaires est un m&eacute;canisme unique de l&#39;antagonisme de l&#39;IFN et d&eacute;finit une deuxi&egrave;me strat&eacute;gie d&#39;&eacute;vasion immunitaire utilis&eacute;e par le rotavirus.

Rotavirus NSP1 inhibe l&#39;activation por en induisant la d&eacute;gradation du prot&eacute;asome d&eacute;pendante de b&ecirc;ta-PCRC : un nouveau m&eacute;canisme de l&#39;antagonisme de l&#39;IFN.

Mechanismen, mit denen Viren angeborenen Host Verteidigung Antworten in der Regel entgegenzuwirken, beinhalten Hemmung der eine oder mehrere Komponenten des Systems Interferon (IFN). Mehrere Schritte in der Induktion und Verst&auml;rkung der IFN Signalisierung sind gezielt f&uuml;r die Hemmung durch virale Proteine, und viele der IFN-Antagonisten haben direkte oder indirekte Auswirkungen auf die Aktivierung von latenten zytoplasmatischen Transkriptionsfaktoren. Rotaviren nonstructural Protein NSP1 Bl&ouml;cke Transkription des Typ I IFNalpha/Beta durch induzieren Proteasom-abh&auml;ngige Verschlechterung der IFN-regulatorische Faktoren 3 (IRF3), IRF5 und IRF7. In dieser Studie zeigen wir, dass Rotaviren NSP1 auch hemmt die Aktivierung von NFkappaB und tut dies durch einen neuartigen Mechanismus. Proteasom-vermittelten Degradation der Inhibitor der KappaB (IkappaBalpha) ist f&uuml;r NFkappaB-Aktivierung erforderlich. Phosphorylierten IkappaBalpha Substrat f&uuml;r Polyubiquitination durch eine exprimierten E3 Ubiquitin Ligase Komplex ist, wiederholen Skp1/Cul1/F-Box, in der das F-Box-Substrat-Anerkennung-Protein ist Beta-transducin enth&auml;lt Protein (Beta-TrCP). Die pr&auml;sentierten Daten zeigen, die IkappaBalpha phosphoryliert ist in Rotaviren-infizierten Zellen stabil, weil Infektion Proteasom-abh&auml;ngige Verschlechterung der Beta induziert-TrCP. NSP1 isoliert in vor&uuml;bergehend transfected Zellen ausgedr&uuml;ckt ist ausreichend, um diesen Effekt zu induzieren. Gezielten Abbau von einem F-Box-Protein des ein E3-Ligase Komplex mit eine prominente Rolle Modulation des angeborenen Immunsystem Signalisierung und Zelle Verbreitung-Bahnen ist ein einzigartiger Mechanismus des IFN Antagonismus und definiert eine zweite Strategie des Immunsystems ausweichen von Rotaviren verwendet.

Rotaviren NSP1 hemmt NFkappaB-Aktivierung durch induzieren Proteasom-abh&auml;ngige Verschlechterung der Beta-TrCP: einen neuen Mechanismus des IFN-Antagonismus.

Meccanismi da cui virus counter risposte di difesa innata host in genere comportano l&#39;inibizione di uno o pi&ugrave; componenti del sistema di interferone (IFN). Pi&ugrave; passaggi nell&#39;induzione e amplificazione di segnalazione IFN sono mirati per inibizione di proteine virali, e molti degli antagonisti IFN hanno effetti diretti o indiretti sulla attivazione di fattori di trascrizione citoplasmici latenti. Trascrizione di blocchi proteine non strutturali NSP1 rotavirus di tipo IFNalpha/beta inducendo degradazione del proteasoma-dipendente di IFN-regolamentazione fattori 3 (IRF3), IRF5 e IRF7. In questo studio, mostriamo che rotavirus NSP1 inoltre inibisce la attivazione di NFkappaB e lo fa da un meccanismo del romanzo. Degradazione mediata dal proteasoma di inibitore del kappaB (IkappaBalpha) &egrave; richiesto per l&#39;attivazione di NFkappaB. IkappaBalpha fosforilato &egrave; un substrato per polyubiquitination da una malattia E3 ubiquitina ligasi complessa, Skp1/Cul1/F-box, in cui la proteina di riconoscimento del substrato F-box &egrave; beta-transducina ripetere contenenti proteine (beta-TrCP). I dati presentati mostrano che fosforilato IkappaBalpha sono stabili in cellule infettate da rotavirus perch&eacute; infezione induce la degradazione del proteasoma-dipendente di beta-TrCP. NSP1 espressi in isolamento in celle transfected transitoriamente &egrave; sufficiente a indurre questo effetto. Mirata degradazione di una proteina della F-scatola di una ligasi E3 complessa con un ruolo importante nella modulazione dell&#39;innato immune delle cellule e segnalazione percorsi proliferazione &egrave; un unico meccanismo di antagonismo IFN e definisce una seconda strategia di evasione immune utilizzato da Rotavirus.

Rotavirus NSP1 inibisce la attivazione di NFkappaB inducendo proteasoma-dipendente dalla degradazione di beta-TrCP: un nuovo meccanismo di antagonismo IFN.

&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x5F97;&#x7684;&#x306A;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x9632;&#x5FA1;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x6297;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x963B;&#x5BB3;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3; (IFN) &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E; 1 &#x3064;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30FB;&#x5897;&#x5E45;&#x306E; IFN &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6291;&#x5236;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x591A;&#x304F; IFN &#x62EE;&#x6297;&#x85AC;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x975E;&#x69CB;&#x9020;&#x86CB;&#x767D; NSP1 &#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E; IFN &#x898F;&#x5236;&#x8981;&#x56E0; 3 (IRF3) 5&#x9818;&#x3068; IRF7 &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x79C1;&#x306F; IFNalpha/&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x305D;&#x306E;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; NSP1 &#x3082;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3066;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x3046;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D1; b (IkappaBalpha) &#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x52A3;&#x5316;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; IkappaBalpha multisubunit E3 &#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EA; &#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; polyubiquitination &#x7528;&#x57FA;&#x677F;&#x306F;&#x3001;Skp1/Cul1/F F &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x57FA;&#x8CEA;&#x8A8D;&#x8B58;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3; &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3059;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (&beta; TrCP) &#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x307E;&#x3059;&#x3002;IkappaBalpha &#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x63D0;&#x793A;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x611F;&#x67D3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x52A3;&#x5316;&#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#x306E;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;-&#x5206;&#x96E2;&#x4E00;&#x904E;&#x6027; transfected &#x30BB;&#x30EB;&#x3067;&#x8868;&#x73FE; TrCP&#x3002; NSP1 &#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;F &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5909;&#x8ABF;&#x751F;&#x5F97;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x8457;&#x540D;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092; E3 &#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D5E;&#x3063;&#x305F;&#x52A3;&#x5316; IFN &#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x306E;&#x56DE;&#x907F;&#x306E; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30ED;&#x30BF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; NSP1 &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248; TrCP &#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;: IFN &#x62EE;&#x6297;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3002;

&#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC751;&#xB2F5; &#xCE74;&#xC6B4;&#xD130; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C;&#xC758; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; (IFN) &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; IFN &#xC2E0;&#xD638; &#xC99D;&#xD3ED;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC0F; IFN antagonists &#xB9CE;&#xC740; &#xC7A0;&#xC7AC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811; &#xB610;&#xB294; &#xAC04;&#xC811; &#xD6A8;&#xACFC;. &#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; nonstructural &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; NSP1 &#xBE14;&#xB85D; &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; IFN &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778; 3 (IRF3) IRF5, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; irf7&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC885;&#xC18D; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; &#xB09C; IFNalpha/&#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC84;&#xC804;&#xC744; &#xC785;&#xB825; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; NSP1 &#xB610;&#xD55C; Nfkappab&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC18C;&#xC124; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. KappaB (IkappaBalpha)&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC758; &#xC800;&#xD558; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC911;&#xC7AC;&#xB294; NFkappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Phosphorylated IkappaBalpha multisubunit E3 &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xC5EC; polyubiquitination&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xD310;&#xC740;, Skp1/Cul1/F-&#xC0C1;&#xC790;&#xB294; F &#xC0C1;&#xC790; &#xAE30;&#xD310; &#xC778;&#xC2DD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xBCA0;&#xD0C0; transducin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xBCA0;&#xD0C0;-TrCP)&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xBC18;&#xBCF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. IkappaBalpha phosphorylated &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xB294; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBCF4;&#xAE30;&#xB294;&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC720;&#xB3C4; &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC885;&#xC18D; &#xC800;&#xD558; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;-TrCP. NSP1 &#xC808;&#xC5F0;&#xC774; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xACBD;&#xC6B0; transiently transfected &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xB294;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC720;&#xBC1C; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xC140; &#xD655;&#xC0B0; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; E3 &#xB9AC;&#xAC00;&#xC758; F &#xC0C1;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC800;&#xD558; IFN &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC774;&#xBA70; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD68C;&#xD53C; rotaviruses&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB85C; &#xD0C0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; NSP1 &#xBCA0;&#xD0C0; Trcp&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC885;&#xC18D; &#xC800;&#xD558;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xC5EC; NFkappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC5B5;&#xC81C;: IFN &#xC801;&#xAC1C;&#xC2EC;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;.

Mecanismos que virus contrarrestar respuestas de defensa innata anfitri&oacute;n generalmente implican inhibici&oacute;n de uno o m&aacute;s componentes del sistema de interfer&oacute;n (IFN). M&uacute;ltiples pasos en la inducci&oacute;n y la amplificaci&oacute;n de se&ntilde;alizaci&oacute;n IFN son destinados a la inhibici&oacute;n por prote&iacute;nas virales, y muchos de los antagonistas IFN tienen efectos directos o indirectos en la activaci&oacute;n de factores de transcripci&oacute;n citopl&aacute;smicos latente. Transcripci&oacute;n de bloques de prote&iacute;nas no estructurales NSP1 rotavirus de tipo I IFNalpha/beta mediante la inducci&oacute;n de la degradaci&oacute;n de la proteasoma dependiente de factores IFN-reguladores 3 (IRF3), IRF5 y IRF7. En este estudio, mostramos rotavirus NSP1 tambi&eacute;n inhibe la activaci&oacute;n de NFkappaB y lo hace por un nuevo mecanismo. Degradaci&oacute;n mediada por proteasoma de inhibidor de kappaB (IkappaBalpha) es necesaria para la activaci&oacute;n de NFkappaB. IkappaBalpha fosforilada es un sustrato para poliubiquitinaci&oacute;n por una ligasa de ubiquitina E3 m&uacute;ltiples subunidades compleja, Skp1/Cul1/F-box, en el que la prote&iacute;na de reconocimiento del sustrato de F-box es Transducina beta repetir que contiene prote&iacute;nas (beta-TrCP). Los datos presentados muestran que fosforila IkappaBalpha es estable en c&eacute;lulas infectadas por rotavirus debido a infecci&oacute;n induce la degradaci&oacute;n de la proteasoma dependiente de beta-TrCP. NSP1 expresada en aislamiento en las c&eacute;lulas transfected transitorio es suficiente para inducir este efecto. Degradaci&oacute;n espec&iacute;fica de una prote&iacute;na F-box de un complejo con un papel destacado en la modulaci&oacute;n de inmunes innatas se&ntilde;alizaci&oacute;n y c&eacute;lula v&iacute;as de proliferaci&oacute;n de ligasa E3 es un exclusivo mecanismo de antagonismo IFN y define una segunda estrategia de evasi&oacute;n inmune utilizado por rotavirus.

Rotavirus NSP1 inhibe la activaci&oacute;n de NFkappaB mediante la inducci&oacute;n de la degradaci&oacute;n de la proteasoma dependiente de beta-TrCP: un nuevo mecanismo de antagonismo IFN.

Joel W. Graff

Department of Biochemistry

University of Iowa, and the VA Medical Center

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

Joel W. Graff

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Biochemistry

University of Iowa, and the VA Medical Center

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

Department of Biochemistry