isolation-and-culture-of-adult-epithelial-stem-cells-from-human-skin

Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

The homeostasis of all self-renewing tissues is dependent on adult stem cells. As undifferentiated stem cells undergo asymmetric divisions, they generate ...

University of Massachusetts Medical School

Les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires qui contr&#xF4;lent la croissance des cheveux humains et de la perte de cheveux cuir chevelu sont mal comprises. En criblant environ 350.000 personnes dans deux populations de la r&#xE9;gion Volga-Oural de la Russie, nous avons identifi&#xE9; une mutation du g&#xE8;ne dans les familles qui font preuve d&#x26;#39;une forme h&#xE9;r&#xE9;ditaire de la perte de cheveux et d&#x26;#39;un d&#xE9;faut de croissance des cheveux. Les personnes touch&#xE9;es &#xE9;taient homozygotes pour une d&#xE9;l&#xE9;tion dans le g&#xE8;ne 3q27 sur le chromosome LIPH, caus&#xE9;s par un court entrecoup&#xE9; nucl&#xE9;aire &#xE9;l&#xE9;ment r&#xE9;trotransposon m&#xE9;di&#xE9;e par recombinaison. Le g&#xE8;ne est exprim&#xE9; LIPH dans les follicules pileux et code pour une phospholipase appel&#xE9;e lipase H (&#xE9;galement connu sous associ&#xE9;e &#xE0; la membrane acide phosphatidique-s&#xE9;lective A1alpha phospholipase), une enzyme qui r&#xE9;gule la production de lipides bioactifs. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que la lipase H participe &#xE0; la croissance des cheveux et le d&#xE9;veloppement.

Human d&#xE9;ficit de croissance de cheveux est li&#xE9;e &#xE0; un d&#xE9;faut g&#xE9;n&#xE9;tique dans le g&#xE8;ne LIPH phospholipase

Die molekularen Mechanismen, die Steuerung menschlichen Haar Wachstum und Kopfhaut Haarausfall sind oft missverstanden. Durch screening etwa 350.000 Menschen in zwei Populationen aus der Wolga-Ural-Region von Russland, haben wir eine Genmutation in Familien, die ein geerbtes Formular des Haarausfalls und ein Haar-Wachstum-Mangel zeigen identifiziert. Die betroffenen waren homozygot f&uuml;r eine L&ouml;schung im LIPH gen auf Chromosom 3q27, verursacht durch kurze eingestreuten nukleare Element-Retrotransposon-vermittelten Rekombination. Das LIPH gen dr&uuml;ckt sich im Haarfollikel und kodiert eine Phospholipase genannt Lipase H (Alternativ bekannt als Membran-assoziierte Phosphatids&auml;ure S&auml;ure-selektive Phospholipase A1alpha), ein Enzym, das die Produktion von bioaktive Lipide regelt. Diese Ergebnisse legen nahe, dass diese Lipase H Haarwachstum und Entwicklung beteiligt.

Menschliches Haar-Wachstum-Mangel ist ein genetischer Defekt im Gen Phospholipase LIPH verkn&uuml;pft.

I meccanismi molecolari di controllo della perdita di capelli crescita e cuoio capelluto capelli umani sono mal capiti. Da circa 350.000 persone in due popolazioni provenienti dalla regione del Volga-Ural della Russia di screening, abbiamo identificato una mutazione del gene in famiglie che presentano una forma ereditaria di perdita di capelli e un difetto di crescita dei capelli. Gli individui affetti erano omozigoti per una delezione del gene LIPH sul cromosoma 3q27, causata dalla breve nucleare sparpagliato ricombinazione mediata da elemento-retrotrasposoni. Il gene LIPH &egrave; espressa in follicoli piliferi e codifica una fosfolipasi chiamato lipasi H (alternativamente conosciuto come associata di membrana fosfatidico fosfolipasi selettivo, acido A1alpha), un enzima che regola la produzione di lipidi bioattivi. Questi risultati suggeriscono che lipasi H partecipa lo sviluppo e la crescita dei capelli.

Deficit di crescita di capelli umani &egrave; legato a un difetto genetico nel gene LIPH fosfolipasi.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x9AEA;&#x306E;&#x6BDB;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x982D;&#x76AE;&#x306E;&#x8131;&#x6BDB;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x30ED;&#x30B7;&#x30A2;&#x306E;&#x30F4;&#x30A9;&#x30EB;&#x30AC;&#xB7;&#x30A6;&#x30E9;&#x30EB;&#x5730;&#x57DF;&#x304B;&#x3089;&#x306E;2&#x96C6;&#x56E3;&#x306F;&#x7D04;35&#x4E07;&#x4EBA;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8131;&#x6BDB;&#x3068;&#x9AEA;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x7D99;&#x627F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x500B;&#x4EBA;&#x306F;&#x3001;&#x77ED;&#x3044;&#x6563;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x6838;&#x8981;&#x7D20;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x5A92;&#x4ECB;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;3q27&#x4E0A;&#x306B;LIPH&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6B20;&#x5931;&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; LIPH&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x6BDB;&#x5305;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;H&#xFF08;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x819C;&#x7D50;&#x5408;&#x578B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30F3;&#x9178;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;A1alpha&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#xFF09;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x6D3B;&#x6027;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;H&#x306F;&#x9AEA;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x767A;&#x5C55;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x6BDB;&#x9AEA;&#x306E;&#x767A;&#x80B2;&#x4E0D;&#x5168;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;LIPH&#x306B;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x6B20;&#x9665;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;

&#xC0AC;&#xB78C;&#xC758; &#xBAA8;&#xBC1C; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xB450; &#xD53C; &#xD0C8;&#xBAA8;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC11C; &#xD22C;&#xB974; &#xAC8C; &#xC774;&#xD574;. &#xB7EC;&#xC2DC;&#xC544;&#xC758; &#xBCFC;&#xAC00;-&#xC6B0;&#xB784; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C; &#xC57D; 350000 &#xAC1C;&#xC778; &#xC2EC;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC190;&#xC2E4;&#xACFC; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC131;&#xC7A5;&#xC758; &#xACB0;&#xD568;&#xC758; &#xC0C1;&#xC18D;&#xB41C; &#xB41C; &#xD3FC;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xC774; &#xD30C;&#xC545;. &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; &#xAC1C;&#xC778; homozygous &#xC9E7;&#xC740; interspersed &#xD575; &#xC694;&#xC18C; retrotransposon &#xC911;&#xC7AC; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778; &#xD55C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 3q27&#xC5D0; LIPH &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AD;&#xC81C; &#xD588;&#xB2E4;. LIPH &#xC9C4; &#xBAA8; &#xB0AD; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; lipase H (&#xB610;&#xB294; &#xB9C9; &#xAD00;&#xB828; phosphatidic &#xC0B0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; phospholipase a1alpha&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;), &#xB77C;&#xB294; phospholipase &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xD65C;&#xC131; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xD6A8;&#xC18C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; lipase H&#xB294; &#xBA38;&#xB9AC;&#xCE74;&#xB77D;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBA38;&#xB9AC;&#xCE74;&#xB77D; &#xC131;&#xC7A5; &#xACB0;&#xD54D; phospholipase &#xC720;&#xC804;&#xC790; LIPH&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los mecanismos moleculares que controlan el crecimiento del cabello humano y la p&#xE9;rdida de pelo del cuero cabelludo son poco conocidos. En la detecci&#xF3;n de alrededor de 350.000 personas en dos poblaciones de la regi&#xF3;n del Volga-Urales de Rusia, hemos identificado una mutaci&#xF3;n gen&#xE9;tica en familias que muestran una forma hereditaria de p&#xE9;rdida de cabello y un defecto de crecimiento del cabello. Los individuos afectados son homocigotos para una deleci&#xF3;n en el gen del cromosoma 3q27 en LIPH, causada por cortos intercalados nucleares elemento retrotranspos&#xF3;n mediada por recombinaci&#xF3;n. El gen se expresa LIPH en los fol&#xED;culos pilosos y codifica una fosfolipasa llamada lipasa H (tambi&#xE9;n conocido como membrana asociada a &#xE1;cido fosfat&#xED;dico selectivo A1alpha fosfolipasa), una enzima que regula la producci&#xF3;n de l&#xED;pidos bioactivos. Estos resultados sugieren que la lipasa H participa en el crecimiento del cabello y el desarrollo.

Deficiencia humana del crecimiento del pelo se relaciona con un defecto gen&#xE9;tico en el gen de la fosfolipasa LIPH

&#x63A7;&#x5236;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5934;&#x53D1;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5934;&#x76AE;&#x8131;&#x53D1;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x4E86;&#x89E3;&#x5F97;&#x5F88;&#x5C11;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7B5B;&#x9009;&#x4E24;&#x4E2A;&#x79CD;&#x7FA4;&#x4ECE;&#x4F0F;&#x5C14;&#x52A0;-&#x4E4C;&#x62C9;&#x5C14;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x4FC4;&#x7F57;&#x65AF;&#x7EA6; 350,000 &#x4E2A;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x663E;&#x793A;&#x7EE7;&#x627F;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53;&#x7684;&#x8131;&#x53D1;&#x548C;&#x5934;&#x53D1;&#x751F;&#x957F;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x7EAF;&#x5408;&#x4E3A; LIPH &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; 3q27&#xFF0C;&#x81F4;&#x77ED;&#x7A7F;&#x63D2;&#x6838;&#x5143;&#x7D20;&#x53CD;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x5220;&#x9664;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x3002;LIPH &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x6BDB;&#x56CA;&#x4E2D;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x79F0;&#x4E3A;&#x8102;&#x80AA;&#x9176; H &#xFF08;&#x6216;&#x8005;&#x79F0;&#x4E3A;&#x78F7;&#x8102;&#x819C;&#x76F8;&#x5173;&#x78F7;&#x8102;&#x9178;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x9176; A1alpha&#xFF09;&#x3001; &#x78F7;&#x8102;&#x9176;&#x8C03;&#x8282;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x8102;&#x7684;&#x9176;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8102;&#x80AA;&#x9176; H &#x53C2;&#x52A0;&#x6BDB;&#x53D1;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7684;&#x5934;&#x53D1;&#x751F;&#x957F;&#x7F3A;&#x6302;&#x94A9;&#x4E2D;&#x78F7;&#x8102;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0; LIPH &#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;

The molecular mechanisms controlling human hair growth and scalp hair loss are poorly understood. By screening about 350,000 individuals in two populations from the Volga-Ural region of Russia, we identified a gene mutation in families who show an inherited form of hair loss and a hair growth defect. Affected individuals were homozygous for a deletion in the LIPH gene on chromosome 3q27, caused by short interspersed nuclear element-retrotransposon-mediated recombination. The LIPH gene is expressed in hair follicles and encodes a phospholipase called lipase H (alternatively known as membrane-associated phosphatidic acid-selective phospholipase A1alpha), an enzyme that regulates the production of bioactive lipids. These results suggest that lipase H participates in hair growth and development.

Human hair growth deficiency is linked to a genetic defect in the phospholipase gene LIPH.

We previously demonstrated that keratin 15 expressing cells present in the bulge region of hair follicles exhibit properties of adult stem cells. We have now established and characterized an immortalized adult epithelial stem cell line derived from cells isolated from the human hair follicle bulge region. Telogen hair follicles from human skin were microdissected to obtain an enriched population of keratin 15 positive skin stem cells. By expressing human papillomavirus 16 E6/E7 genes in these stem cells, we have been able to culture the cells for >30 passages and maintain a stable phenotype after 12 mo of continuous passage. The cell line was compared to primary stem cells for expression of stem cell specific proteins, for in vitro stem cell properties, and for their capacity to differentiate into different cell lineages. This new cell line, named Tel-E6E7 showed similar expression patterns to normal skin stem cells and maintained in vitro properties of stem cells. The cells can differentiate into epidermal, sebaceous gland, and hair follicle lineages. Intact beta-catenin dependent signaling, which is known to control in vivo hair differentiation in rodents, is maintained in this cell line. The Tel-E6E7 cell line may provide the basis for valid, reproducible in vitro models for studies on stem cell lineage determination and differentiation.

Multi-potentiality of a new immortalized epithelial stem cell line derived from human hair follicles.

Nous avons d&#xE9;j&#xE0; d&#xE9;montr&#xE9; que la k&#xE9;ratine 15 cellules exprimant pr&#xE9;sents dans la r&#xE9;gion du bombement de follicules pileux pr&#xE9;sentent des propri&#xE9;t&#xE9;s de cellules souches adultes. Nous avons maintenant &#xE9;tabli et caract&#xE9;ris&#xE9; un adulte immortalis&#xE9; &#xE9;pith&#xE9;liale lign&#xE9;e de cellules souches d&#xE9;riv&#xE9;es de cellules isol&#xE9;es &#xE0; partir de la r&#xE9;gion renflement du follicule pileux humain. Follicules pileux de la peau humaine t&#xE9;log&#xE8;nes ont &#xE9;t&#xE9; microdiss&#xE9;qu&#xE9;es pour obtenir une population enrichie de 15 k&#xE9;ratiniques positifs cellules souches de la peau. En exprimant virus du papillome humain 16 E6/E7 g&#xE8;nes dans ces cellules souches, nous avons pu &#xE0; la culture des cellules pendant plus de 30 passages et de maintenir un ph&#xE9;notype stable apr&#xE8;s 12 mois de passage en continu. La lign&#xE9;e cellulaire a &#xE9;t&#xE9; compar&#xE9; &#xE0; des cellules souches primaires pour l&#x26;#39;expression des prot&#xE9;ines de cellules souches sp&#xE9;cifiques, pour les propri&#xE9;t&#xE9;s in vitro de cellules souches, et pour leur capacit&#xE9; &#xE0; se diff&#xE9;rencier en diff&#xE9;rents lignages cellulaires. Cette nouvelle lign&#xE9;e cellulaire, nomm&#xE9;e Tel-E6E7 a montr&#xE9; des profils d&#x26;#39;expression similaires &#xE0; la normale des cellules souches de la peau et maintenu dans les propri&#xE9;t&#xE9;s in vitro de cellules souches. Les cellules peuvent se diff&#xE9;rencier en glandes s&#xE9;bac&#xE9;es &#xE9;pidermique, et lignages du follicule pileux. Intact beta-cat&#xE9;nine d&#xE9;pendante, qui est connu pour contr&#xF4;ler la diff&#xE9;renciation des cheveux in vivo chez les rongeurs, est maintenu dans cette lign&#xE9;e cellulaire. La ligne de Tel-E6E7 cellule peut fournir la base pour des raisons valables, reproductible dans des mod&#xE8;les in vitro pour les &#xE9;tudes sur la d&#xE9;termination de la lign&#xE9;e de cellules souches et diff&#xE9;renciation.

Multi-puissance d&#x26;#39;une nouvelle ligne de cellules souches &#xE9;pith&#xE9;liales immortalis&#xE9;es D&#xE9;riv&#xE9; de follicules pileux humains

&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x8868;&#x660E;&#x89D2;&#x86CB;&#x767D; 15 &#x8868;&#x793A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x6BDB;&#x56CA;&#x51F8;&#x8D77;&#x5730;&#x533A;&#x5C55;&#x793A;&#x6210;&#x4EBA;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x6210;&#x7ACB;&#xFF0C;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x6E90;&#x81EA;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6BDB;&#x56CA;&#x51F8;&#x8D77;&#x533A;&#x57DF;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x6210;&#x4EBA;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3002;&#x975E;&#x6BDB;&#x56CA;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x4F53;&#x76AE;&#x80A4;&#x88AB;&#x95F4;&#x83B7;&#x5F97;&#x6D53;&#x7F29;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x89D2;&#x86CB;&#x767D; 15 &#x79EF;&#x6781;&#x76AE;&#x80A4;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8868;&#x793A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E73;&#x5934;&#x72B6;&#x7624;&#x75C5;&#x6BD2; 16 E6/E7 &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x80FD;&#x591F;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE; &gt; 30 &#x901A;&#x9053;&#x548C; 12 mo &#x7684;&#x8FDE;&#x7EED;&#x4F20;&#x4EE3;&#x540E;&#x4FDD;&#x6301;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x88AB;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E3B;&#x8981;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x5C5E;&#x6027;&#x548C;&#x5176;&#x5206;&#x5316;&#x6210;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8C31;&#x7CFB;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6B64;&#x65B0;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#xFF0C;&#x540D;&#x4E3A;&#x7535;&#x8BDD; E6E7 &#x663E;&#x793A;&#x6B63;&#x5E38;&#x76AE;&#x80A4;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EF4;&#x6301;&#x4F53;&#x5916;&#x6027;&#x8D28;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5206;&#x5316;&#x6210;&#x8868;&#x76AE;&#x3001; &#x76AE;&#x8102;&#x817A;&#x817A;&#x548C;&#x6BDB;&#x56CA;&#x8C31;&#x7CFB;&#x3002;&#x5B8C;&#x597D;&#x8FDE;&#x73AF;&#x4ECE;&#x5C5E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; &#x6240;&#x77E5;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5934;&#x53D1;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x556E;&#x9F7F;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x7559;&#x5728;&#x6B64;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x3002;&#x7535;&#x8BDD; E6E7 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E3A;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x3001; &#x53EF;&#x91CD;&#x73B0;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBF;&#x88AD;&#x51B3;&#x5FC3;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5960;&#x5B9A;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

&#x65B0;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7684; multi-potentiality &#x6765;&#x81EA;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6BDB;&#x56CA;&#x3002;

Wir zuvor bewiesen, dass Keratin 15 auszudr&uuml;cken Zellen in der Region Ausbuchtung der Haarfollikel Eigenschaften von adulten Stammzellen aufweisen. Wir haben jetzt hergestellt und charakterisiert eine verewigt Erwachsenen epithelialen Stammzellen-Linie von Zellen isoliert aus der menschlichen Haarfollikel Ausbuchtung Region abgeleitet. Telogen Haarfollikel aus menschlicher Haut waren Microdissected eine angereicherte Bev&ouml;lkerung von Keratin 15 positive Haut-Stammzellen zu erhalten. Zum Ausdruck bringen, humanes Papillomavirus 16 E6/E7-Gene in diese Stammzellen, wir konnten die Zellen f&uuml;r Kultur &gt; 30 Passagen und pflegen einen stabilen Ph&auml;notyp nach 12 Mo kontinuierliche Passage. Die Zelllinie wurde im Vergleich zu prim&auml;re Stammzellen f&uuml;r Ausdruck der Stammzellen-spezifische Proteine, f&uuml;r in-vitro-Stammzell-Eigenschaften und f&uuml;r ihre F&auml;higkeit, in andere Zelle &Uuml;bertragungslinien zu unterscheiden. Diese neue Zelle-Linie, mit dem Namen Tel-E6E7 zeigte &auml;hnliche Ausdrucksmuster auf normale Haut-Stammzellen und gepflegt in-vitro-Eigenschaften der Stammzellen. Die Zellen k&ouml;nnen in epidermale, sebaceous Dr&uuml;se und Haarfollikel &Uuml;bertragungslinien unterscheiden. Intakt Beta-Catenin abh&auml;ngigen signalisiert, die bekannt ist, in-vivo Haar Differenzierung bei Nagern, Steuern in dieser Zelllinie verwaltet. Die Tel-E6E7-Zelllinie k&ouml;nnte die Basis f&uuml;r g&uuml;ltig, reproduzierbare in-vitro-Modelle f&uuml;r Studien &uuml;ber Stammzellen Herkunfts-Bestimmung und Differenzierung sein.

Multi-potentiality einer neuen Linie verewigt epithelialen Stammzellen aus menschlichen Haarfollikel abgeleitet.

Abbiamo precedentemente dimostrato che 15 cellule che esprimono cheratina presente nella regione del rigonfiamento dei follicoli piliferi presentano propriet&agrave; delle cellule staminali adulte. Ora abbiamo stabilito e caratterizzato una linea immortalata sulle cellule staminali epiteliali adulte derivata da cellule isolate dalla regione di rigonfiamento del follicolo pilifero umano. Follicoli dei capelli telogen da pelle umana erano microdissected per ottenere una popolazione arricchito di cheratina 15 positivo pelle cellule staminali. Esprimendo il papillomavirus umano 16 E6/E7 geni in queste cellule staminali, siamo stati in grado di coltura le cellule per &amp;gt; 30 passaggi e mantenere un fenotipo stabile dopo 12 mo di passaggio continuo. La linea cellulare &egrave; stata confrontata con le cellule staminali primarie per l&#39;espressione di proteine specifiche della cellula formativa, per le propriet&agrave; delle cellule staminali in vitro e per la loro capacit&agrave; di differenziarsi in linee cellulari diverse. Questa nuova linea di cellule, denominata Tel-E6E7 ha mostrato i modelli di espressione simili a cellule staminali della pelle normale e mantenuto propriet&agrave; in vitro di cellule staminali. Le cellule possono differenziarsi in ghiandola sebacea, epidermico e lignaggi del follicolo pilifero. Beta-catenina intatta dipendenti dalla segnalazione, che &egrave; noto per controllare la differenziazione dei capelli in vivo nei roditori, &egrave; mantenuto in questa linea cellulare. La linea cellulare Tel-E6E7 pu&ograve; fornire la base per validi, riproducibile in vitro modelli per gli studi sulle cellule staminali lignaggio determinazione e differenziazione.

Multi-potentiality di una nuova linea immortalata sulle cellule staminali epiteliali derivate dai follicoli di capelli umani.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x6BDB;&#x5305;&#x306E;&#x30D0;&#x30EB;&#x30B8;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3;15&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x4F53;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4ECA;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x6BDB;&#x5305;&#x306E;&#x30D0;&#x30EB;&#x30B8;&#x9818;&#x57DF;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x76AE;&#x819A;&#x304B;&#x3089;&#x4F11;&#x6B62;&#x671F;&#x6BDB;&#x5305;&#x306F;&#x3001;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3;15&#x967D;&#x6027;&#x306E;&#x76AE;&#x819A;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BB;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x30D2;&#x30C8;&#x30D1;&#x30D4;&#x30ED;&#x30FC;&#x30DE;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;16 E6/E7&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x26;gt; 30&#x7D99;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x3001;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x901A;&#x8DEF;&#x306E;12&#x30AB;&#x6708;&#x5F8C;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C6;&#x30EB;&#x30A2;&#x30D3;&#x30D6;E6E7&#x3068;&#x540D;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x76AE;&#x819A;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4F3C;&#x305F;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x4FDD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x8868;&#x76AE;&#x3001;&#x76AE;&#x8102;&#x817A;&#x3084;&#x6BDB;&#x5305;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;&#x3052;&#x3063;&#x6B6F;&#x985E;&#x306E;in vivo&#x6BDB;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x4FDD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C6;&#x30EB;&#x30A2;&#x30D3;&#x30D6;E6E7&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB;&#x8B5C;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;in vitro&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x6709;&#x52B9;&#x306A;&#x3001;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x6BDB;&#x5305;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xAC01; &#xC9C8; 15 &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xBAA8; &#xB0AD;&#xC758; &#xB3CC;&#xCD9C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC131;&#xCCB4; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xC785;&#xC99D;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBA38;&#xB9AC;&#xCE74;&#xB77D;&#xC744; &#xBAA8; &#xADFC; &#xB3CC;&#xCD9C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBD88;&#xBA78; &#xD558; &#xAC8C; &#xC131;&#xC778; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xAC83;&#xC774; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD53C;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD734;&#xC9C0;&#xAE30; &#xBAA8; &#xB0AD; &#xAC01; &#xC9C8; 15 &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD53C;&#xBD80; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; microdissected &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC778;&#xAC04; &#xC720; &#xB450; &#xC885; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 16 E6/E7 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC140; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; &amp;gt; 30 &#xAD6C;&#xC808; 12 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xC5F0;&#xC18D; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD6C4; &#xC548;&#xC815; &#xB41C; &#xD615;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;, &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xC140; &#xD608;&#xD1B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. Tel-E6E7 &#xB77C;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC140; &#xC904;&#xC774; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD53C;&#xBD80; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC720;&#xC9C0; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC140; &#xD53C;, &#xD53C;&#xC9C0; &#xC120;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBA38;&#xB9AC;&#xCE74;&#xB77D; &#xBFCC;&#xB9AC; &#xACC4;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xD638; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin&#xC774; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xC720;&#xC9C0; &#xB418;&#xB294; &#xC124;&#xCE58;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBA38;&#xB9AC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. Tel E6E7 &#xC140; &#xC120; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xACC4;&#xBCF4; &#xACB0;&#xC815;&#xACFC; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xD6A8; &#xD558; &#xACE0; &#xC7AC;&#xD604;&#xD560; &#xC218; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBD88;&#xBA78; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; multi-potentiality&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBAA8; &#xB0AD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;.

Hemos demostrado previamente que las c&#xE9;lulas que expresan queratina 15 presentes en la regi&#xF3;n bulbo de los fol&#xED;culos pilosos presentan propiedades de c&#xE9;lulas madre adultas. Ahora hemos establecido y caracterizado un adulto inmortalizada epitelial l&#xED;nea de c&#xE9;lulas madre derivadas de c&#xE9;lulas aisladas de la regi&#xF3;n protuberancia cabello humano fol&#xED;culo. Fol&#xED;culos tel&#xF3;geno de la piel humana se microdissected para obtener una poblaci&#xF3;n enriquecida de c&#xE9;lulas de queratina 15 positivos madre de la piel. Al expresar el virus del papiloma humano 16 E6/E7 genes en estas c&#xE9;lulas madre, hemos sido capaces de cultivar las c&#xE9;lulas durante m&#xE1;s de 30 pasajes y mantener un fenotipo estable despu&#xE9;s de 12 meses de paso continuo. La l&#xED;nea celular se compar&#xF3; con las c&#xE9;lulas madre primarios para la expresi&#xF3;n de prote&#xED;nas de c&#xE9;lulas madre espec&#xED;ficas, para propiedades in vitro de c&#xE9;lulas madre, y por su capacidad para diferenciarse en linajes de c&#xE9;lulas diferentes. Esta nueva l&#xED;nea celular, el nombre de Tel-E6E7 mostraron patrones similares de expresi&#xF3;n para c&#xE9;lulas normales de la madre de la piel y mantiene propiedades in vitro de c&#xE9;lulas madre. Las c&#xE9;lulas pueden diferenciarse en la gl&#xE1;ndula seb&#xE1;cea epid&#xE9;rmica, y los linajes del fol&#xED;culo piloso. Intacto beta-catenina se&#xF1;alizaci&#xF3;n dependiente, que se sabe que el control de la diferenciaci&#xF3;n del pelo in vivo en roedores, se mantiene en esta l&#xED;nea celular. El Tel-E6E7 l&#xED;nea celular puede servir de base para reproducir v&#xE1;lida, en modelos in vitro para el estudio de determinaci&#xF3;n de linaje de c&#xE9;lulas madre y la diferenciaci&#xF3;n.

Multi-potencialidad de una nueva l&#xED;nea de c&#xE9;lulas epiteliales Inmortalizado madre derivadas de fol&#xED;culos pilosos humanos

Mediante programmi informatici di bioinformatica, sono state analizzate tutte le sequenze dei genoma foot and mouth disease virus (FMDV) nei database di pubblico dominio. Sulla base dei risultati dell&#39;analisi di omologia, 2 specifico piccolo d&#39;interferenza RNA (siRNA) targeting regioni 3D e 2B1 omogenee di 7 sierotipi di FMDV erano vettori di espressione siRNA preparato e 2 pSi-FMD2 e pSi-FMD3, sono stati costruiti. I vettori che esprimono siRNA sono stati utilizzati per testare la capacit&agrave; di inibire la replicazione del virus nelle cellule renali (BHK-21) di baby hamster e allattamento topi, un modello animale piccolo comunemente usato siRNA. I risultati hanno dimostrato che transfezione di BHK-21 celle con siRNA-esprimendo plasmidi indebolito notevolmente l&#39;effetto citopatico (CPE). Inoltre, le cellule BHK-21 transitoriamente transfected con short hairpin RNA (shRNA)-esprimere plasmidi sono stati specificamente resistente all&#39;infezione del FMDV sierotipi A, O e Asia, io e questo gli effetti antivirali persistette per quasi 48 ore. Abbiamo misurato i titoli virali, la dose infettiva di coltura del tessuto 50% (TCID50) nelle celle transfected con anti-FMDV siRNA &egrave; stata trovata per essere inferiore a quello delle cellule di controllo. Inoltre, iniezione sottocutanea di plasmidi siRNA-esprimendo il collo dei topi suckling li ha resi meno sensibili alle infezioni da O e Asia sierotipi di FMDV.

Inibizione della replicazione del virus foot and mouth disease in vitro e in vivo di piccolo RNA interferente.

&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30DE;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D4;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x75AB;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; &#x30D1;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; &#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x7A2E;&#x306E; 3 D &#x3068; 2B1 &#x5730;&#x57DF; FMDV &#x306E; 7 &#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 2 siRNA &#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; 2 &#x7279;&#x5B9A;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6E09; RNA (siRNA) &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066; pSi FMD2 &#x3068; pSi FMD3 &#x5EFA;&#x8A2D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;SiRNA &#x767A;&#x73FE;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x8D64;&#x3061;&#x3083;&#x3093;&#x306E;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x814E;&#x81D3; &#xFF08;BHK-21) &#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x54FA;&#x4E73;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B; siRNAs &#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x793A;&#x5506; BHK-21 &#x306E; siRNA &#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5909;&#x6027;&#x52B9;&#x679C; (CPE) &#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5F31;&#x4F53;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;21 BHK &#x7D30;&#x80DE;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x77ED;&#x3044;&#x30D8;&#x30A2;&#x30D4;&#x30F3; RNA &#xFF08;shRNA&#xFF09; &#x5C0E;&#x5165;-&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30C9;&#x3044;&#x305F;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x8010;&#x6027; FMDV &#x8840;&#x6E05;&#x578B; A&#x3001;O&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E;&#x79C1;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x307B;&#x307C; 48 &#x6642;&#x9593;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x4FA1;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1; FMDV siRNAs &#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067; 50 &#xFF05; &#x7D44;&#x7E54;&#x57F9;&#x990A;&#x611F;&#x67D3;&#x7528;&#x91CF; (TCID50) &#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4F4E;&#x304F;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;siRNA &#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E;&#x9996;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x76AE;&#x4E0B;&#x6CE8;&#x5C04;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092; O&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30B8;&#x30A2;&#x306E; FMDV &#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x3092;&#x578B;&#x3068;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x306B;&#x304F;&#x304F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8907;&#x88FD; in vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vivo &#x3067;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6E09; RNA &#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC0DD;&#xBB3C; &#xC815;&#xBCF4;&#xD559; &#xCEF4;&#xD4E8;&#xD130; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACF5;&#xACF5; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBC1C;-&#xC564;-&#xC785; &#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (FMDV) &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. 2 &#xD2B9;&#xC815; &#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA (siRNA) &#xC900;&#xBE44; &#xD558; &#xACE0; 2 siRNA-&#xC2DD; &#xBCA1;&#xD130; &#xD588;&#xB2E4; FMDV&#xC758; 7 serotypes&#xC758; &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; 3D &#xBC0F; 2B1 &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; homology &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; pSi fmd2&#xC640; pSi FMD3 &#xAC74;&#xC124; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xAE30; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xC2E0;&#xC7A5; (BHK 21) &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC720;&#xC544; &#xC950;, &#xC790;&#xC8FC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC740; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; Sirnas&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB294; siRNA &#xD45C;&#xD604; &#xBCA1;&#xD130; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xADF8; transfection BHK 21&#xC758; siRNA &#xD45C;&#xD604; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC640; &#xC140; &#xD06C;&#xAC8C; cytopathic &#xD6A8;&#xACFC; (CPE) &#xC57D;&#xD654;. &#xB610;&#xD55C;, BHK 21 &#xC140; transiently &#xC9E7;&#xC740; &#xD5E4;&#xC5B4;&#xD540; RNA (shRNA)&#xC640; &#xD398;-&#xD45C;&#xD604; plasmids &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB0B4;&#xC131;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4; FMDV serotypes A, O, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC544;&#xC2DC;&#xC544;&#xC758; &#xB098; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC720;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC70;&#xC758; 48 &#xC2DC;&#xAC04;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; titers &#xCE21;&#xC815;, &#xC548;&#xD2F0; FMDV Sirnas&#xC640; &#xD398; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; 50% &#xC870;&#xC9C1; &#xBB38;&#xD654; infective &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; (TCID50) &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC720;&#xC544; &#xC950; &#xBAA9;&#xC5D0; Sirna&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; plasmids&#xC758; &#xD53C;&#xD558; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xB35C; O, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; FMDV&#xC758; serotypes &#xC544;&#xC2DC;&#xC544; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xCDE8;&#xC57D; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC791;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;-&#xC564;-&#xC785; &#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC758; &#xC800;&#xD574;.

&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x4FE1;&#x606F;&#x5B66;&#x8BA1;&#x7B97;&#x673A;&#x7A0B;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x5728;&#x516C;&#x5171;&#x57DF;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x4E2D;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x53E3;&#x75C5;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2;) &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x8FDB;&#x884C;&#x90FD;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;2 &#x5177;&#x4F53;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; RNA (siRNA) &#x5747;&#x5300;&#x7684; 3D &#x548C; 2B1 &#x5730;&#x533A;&#x7684; 7 &#x79CD;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x662F;&#x51C6;&#x5907;&#x548C; 2 &#x7684; siRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x8F7D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE; FMD2 &#x548C;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;-FMD3&#xFF0C;&#x5EFA;&#x9020;&#x4E86;&#x3002;SiRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7528;&#x4E8E;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684; siRNAs &#x80FD;&#x529B;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x5728;&#x5E7C;&#x4ED3;&#x9F20;&#x80BE; (BHK-21) &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E73;&#x9F20;&#xFF0C;&#x5E38;&#x7528;&#x7684;&#x5C0F;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7684; BHK 21 &#x4E0E; siRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x8D28;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5927;&#x5927;&#x524A;&#x5F31;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x53D8;&#x6548;&#x5E94; (CPE)&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;BHK 21 &#x7EC6;&#x80DE;&#x77AC;&#x6001;&#x67D3;&#x77ED;&#x53D1;&#x5939; RNA (shRNA)-&#x8868;&#x8FBE;&#x8D28;&#x7C92;&#x662F;&#x4E13;&#x95E8;&#x6297;&#x611F;&#x67D3;&#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; A&#x3001; O&#x3001; &#x548C;&#x4E9A;&#x6D32;&#x7684;&#x6211;&#x548C;&#x8FD9;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6548;&#x679C;&#x6301;&#x7EED;&#x5C06;&#x8FD1; 48 &#x5C0F;&#x65F6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6548;&#x4EF7;&#x3001; &#x6297;&#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2; siRNAs &#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; 50%&#x7EC4;&#x57F9;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x5242;&#x91CF; &#xFF08;TCID50&#xFF09; &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x4F1A;&#x4F4E;&#x4E8E;&#x63A7;&#x5236;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;siRNA &#x8868;&#x8FBE;&#x8D28;&#x7C92;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E73;&#x9F20;&#x9888;&#x90E8;&#x76AE;&#x4E0B;&#x6CE8;&#x5C04;&#x4F7F;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x6613;&#x53D7; O&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4E9A;&#x6D32;&#x6211; serotypes &#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;

&#x53E3;&#x8E44;&#x75C5;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x6270; RNA &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

By using bioinformatics computer programs, all foot-and-mouth disease virus (FMDV) genome sequences in public-domain databases were analyzed. Based on the results of homology analysis, 2 specific small interfering RNA (siRNA) targeting homogenous 3D and 2B1 regions of 7 serotypes of FMDV were prepared and 2 siRNA-expression vectors, pSi-FMD2 and pSi-FMD3, were constructed. The siRNA-expressing vectors were used to test the ability of siRNAs to inhibit virus replication in baby hamster kidney (BHK-21) cells and suckling mice, a commonly used small animal model. The results demonstrated that transfection of BHK-21 cells with siRNA-expressing plasmids significantly weakened the cytopathic effect (CPE). Moreover, BHK-21 cells transiently transfected with short hairpin RNA (shRNA)-expressing plasmids were specifically resistant to the infection of the FMDV serotypes A, O, and Asia I and this the antiviral effects persisted for almost 48 hours. We measured the viral titers, the 50% tissue culture infective dose (TCID50) in cells transfected with anti-FMDV siRNAs was found to be lower than that of the control cells. Furthermore, subcutaneous injection of siRNA-expressing plasmids in the neck of the suckling mice made them less susceptible to infection with O, and Asia I serotypes of FMDV.

Inhibition of foot-and-mouth disease virus replication in vitro and in vivo by small interfering RNA.

&Agrave; l&#39;aide de programmes informatiques de bio-informatique, toutes les s&eacute;quences de g&eacute;nome &ndash; foot and mouth disease virus (fi&egrave;vre aphteuse) dans le domaine public bases de donn&eacute;es ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;es. Selon les r&eacute;sultats d&#39;analyse d&#39;homologie, 2 des petits ARN interf&eacute;rents (siARN) ciblant des r&eacute;gions homog&egrave;nes 3D et 2 b 1 7 s&eacute;rotypes du virus aphteux sont des vecteurs d&#39;expression siARN pr&eacute;par&eacute;s et 2, FMD2-pSi et pSi-FMD3, ont &eacute;t&eacute; construits. Les vecteurs exprimant le siARN ont servi &agrave; tester la capacit&eacute; des siARN &agrave; inhiber la r&eacute;plication du virus dans les cellules r&eacute;nales (BHK-21) de b&eacute;b&eacute;s hamsters et souris suckling, un petit mod&egrave;le animal couramment utilis&eacute;. Les r&eacute;sultats ont d&eacute;montr&eacute; que la transfection de BHK-21 cellules avec des plasmides exprimant le siARN a consid&eacute;rablement affaiblissement l&#39;effet cytopathog&egrave;ne (ECP). En outre, les cellules BHK-21 transitoirement transfect&eacute;es avec &eacute;pingle &agrave; cheveux court RNA (shARN)-plasmides exprimant &eacute;taient particuli&egrave;rement r&eacute;sistants &agrave; l&#39;infection par des s&eacute;rotypes de fi&egrave;vre aphteuse A, O et Asie j&#39;ai et cela les effets antiviraux persistant pendant presque 48 heures. Nous avons mesur&eacute; les titres viraux, la dose infectieuse de culture de tissus de 50 % (DICT50) dans les cellules transfect&eacute;es avec le siARN anti-fi&egrave;vre aphteuse s&#39;est av&eacute;r&eacute;e pour &ecirc;tre inf&eacute;rieur &agrave; celui des cellules contr&ocirc;le. Par ailleurs, l&#39;injection sous-cutan&eacute;e de plasmides exprimant le siARN dans le cou des souris des t&eacute;t&eacute;es rendre moins vuln&eacute;rables &agrave; l&#39;infection avec O et en Asie, j&#39;ai des s&eacute;rotypes du virus aphteux.

Inhibition de la r&eacute;plication du virus &ndash; foot and mouth disease in vitro et in vivo par les petits ARN interf&eacute;rents.

Mithilfe von Computerprogrammen Bioinformatik wurden alle Genomsequenzen der Fu&szlig; - und - Klauenseuche-Virus (FMDV) in Public-Domain-Datenbanken analysiert. Basierend auf den Ergebnissen der Homologie-Analyse, 2 bestimmte kleine interfering RNA (SiRNA) gezielt homogene Regionen 3D und 2B1 7 Serotypen des FMDV wurden vorbereitet und 2 SiRNA-Expressionsvektoren, wurden pSi-FMD2 und pSi-FMD3, errichtet. Die SiRNA-Ausdruck Vektoren wurden verwendet, um die F&auml;higkeit des SiRNAs Virus-Replikation in Baby Hamsterzellen Niere (BHK-21) und Spanferkel-M&auml;use, eine h&auml;ufig verwendete kleine Tiermodell hemmen. Die Resultate zeigten, dass Transfektion von BHK-21 Zellen mit SiRNA-Ausdr&uuml;cken Plasmide bedeutend geschw&auml;cht den zytopathischen Effekt (CPE). Dar&uuml;ber hinaus BHK-21-Zellen vor&uuml;bergehend die transfected mit kurzen Hairpin RNA (ShRNA)-Ausdruck Plasmide wurden speziell widerstandsf&auml;hig gegen die Infektion der FMDV Serotypen A, O und Asien ich und dies die antivirale Wirkung beibehalten f&uuml;r fast 48 Stunden. Wir die virale Titer gemessen, die 50 %-Gewebekultur Infektionsdosis (TCID50) in die mit Anti-FMDV SiRNAs transfected Zellen erwies sich niedriger als die der Kontrolle Zellen. Dar&uuml;ber hinaus machte sie subkutaner Injektion von SiRNA-Ausdr&uuml;cken Plasmide in den Hals der Spanferkel M&auml;use weniger anf&auml;llig f&uuml;r Infektionen mit O und Asien, die ich von FMDV Serotypen.

Hemmung der Fu&szlig; - und - Klauenseuche-Virus-Replikation in vitro und in vivo von small interfering RNA.

Mediante el uso de programas inform&aacute;ticos de Bioinform&aacute;tica, se analizaron todas secuencias del genoma del virus (VFA) del pie - y - boca disease en bases de datos de dominio p&uacute;blico. Basado en los resultados del an&aacute;lisis de homolog&iacute;a, 2 espec&iacute;fica ARN interferente peque&ntilde;o (siRNA) dirigidos a regiones homog&eacute;neas de 3D y 2B1 de 7 serotipos del VFA fueron vectores preparados y 2 siRNA-expresi&oacute;n, pSi-FMD2 y pSi-FMD3, fueron construidos. Los vectores de siRNA-expresi&oacute;n se utilizaron para probar la capacidad de inhibir la replicaci&oacute;n del virus en c&eacute;lulas de ri&ntilde;&oacute;n (BHK-21) beb&eacute; h&aacute;mster y ratones de lechal, un modelo animal peque&ntilde;o utilizado de siRNAs. Los resultados demostraron que la transfecci&oacute;n de BHK-21 c&eacute;lulas con pl&aacute;smidos siRNA-expresando debilitaron significativamente el efecto citop&aacute;tico (CPE). Por otra parte, las c&eacute;lulas BHK-21 transfectadas transitoriamente con short hairpin RNA (shRNA)-expresando pl&aacute;smidos fueron especialmente resistentes a la infecci&oacute;n de los serotipos del VFA A, O y Asia I y esto los efectos antivirales persistieron durante casi 48 horas. Medimos los t&iacute;tulos virales, la dosis infectiva de cultivo de tejidos de 50% (TCID50) en c&eacute;lulas transfectadas con anti-VFA siRNAs result&oacute; para ser m&aacute;s baja que la de las c&eacute;lulas control. Adem&aacute;s, la inyecci&oacute;n subcut&aacute;nea de pl&aacute;smidos de siRNA-expresando en el cuello de los ratones de amamantamiento hac&iacute;a menos susceptibles a la infecci&oacute;n con O y Asia serotipos del VFA.

Inhibici&oacute;n de la replicaci&oacute;n del virus pie - y - boca disease in vitro e in vivo por ARN interferente peque&ntilde;o.

Hemos construido 2 peque&ntilde;o interferentes RNAs (siRNAs) dirigidos espec&iacute;ficamente contra regiones homog&eacute;neas de 3D y 2B1 de 7 serotipos de los virus de la fiebre aftosa (VFA) y prueba la capacidad de inhibir la replicaci&oacute;n del virus en c&eacute;lulas de ri&ntilde;&oacute;n (BHK-21) beb&eacute; h&aacute;mster y ratones de amamantamiento de siRNAs. En este estudio, hemos generado modelos de rat&oacute;n transg&eacute;nico integraci&oacute;n short hairpin RNA (shRNA) dirigidos a microinfected VFA. Cuando se examina en el paso 7 en ratones transg&eacute;nicos, el gene de destino fue encontrado todav&iacute;a por PCR para integrarse en el genoma. En comparaci&oacute;n con los ratones de control, los ratones transg&eacute;nicos demostraron patolog&iacute;a s&oacute;lo ligeramente anormal cuando estaban infectados con el serotipo Asia 1 del VFA. El n&uacute;mero de virus en los tejidos del rat&oacute;n transg&eacute;nico fue muy bajo y en algunos tejidos virus no podr&iacute;an ser detectadas por inmunohistoqu&iacute;mica.

Modelo de rat&oacute;n transg&eacute;nico integraci&oacute;n siRNA contra el virus de la fiebre aftosa.

&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF09; &#x306E; 7 &#x306E;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x306E;&#x5747;&#x8CEA;&#x306A; 3 D &#x3068; 2B1 &#x5730;&#x57DF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; 2 &#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x5E72;&#x6E09;&#x306E; RNAs (Sirna) &#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x3001;&#x8D64;&#x3061;&#x3083;&#x3093;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x814E; (BHK-21) &#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x54FA;&#x4E73;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x7981;&#x3058;&#x308B;&#x305F;&#x3081; siRNAs &#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, microinfected FMDV &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x77ED;&#x9396;&#x30D8;&#x30A2;&#x30D4;&#x30F3;&#x578B; RNA &#xFF08;shRNA&#xFF09; &#x7D71;&#x5408;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; 7 &#x65E5;&#x7D4C;&#x904E;&#x6642;&#x70B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3068;&#x3053;&#x308D;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x7D71;&#x5408; PCR &#x307E;&#x3060;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x75AB;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8840;&#x6E05;&#x578B; 1 &#x30A2;&#x30B8;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;, &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x307F;&#x3084;&#x3084;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x75C5;&#x7406;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4F4E;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x514D;&#x75AB;&#x67D3;&#x8272;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x53E3;&#x8E44;&#x75C5;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; siRNA &#x3092;&#x7D71;&#x5408;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC; 2 &#xC791;&#xC740; &#xBC29;&#xD574; RNAs (siRNAs) &#xD2B9;&#xD788; &#xBC1C;&#xACFC; &#xC785; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (FMDV)&#xC758; 7 serotypes&#xC758; &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; 3D &#xBC0F; 2B1 &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC74;&#xC124; &#xD558; &#xACE0; &#xC544;&#xAE30; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xC2E0;&#xC7A5; (BHK 21) &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC720;&#xC544; &#xC950; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; Sirnas&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC9E7;&#xC740; &#xD5E4;&#xC5B4;&#xD540; RNA (shRNA) microinfected FMDV&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950;&#xC5D0; 7 &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xB418;&#xB294; PCR &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; FMDV serotype &#xC544;&#xC2DC;&#xC544; 1&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950;&#xB9CC; &#xC57D;&#xAC04; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC218;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB0AE;&#xC740; &#xACE0; &#xC77C;&#xBD80; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC80;&#xCD9C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378; &#xBC1C; &#xBC0F; &#xC785; &#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; Sirna&#xB97C; &#xD1B5;&#xD569;.

Abbiamo costruito 2 piccolo interferenti RNAs (siRNAs) specificamente destinati regioni 3D e 2B1 omogenee di 7 sierotipi di afta epizootica virus della malattia (FMDV) e testato la capacit&agrave; di inibire la replicazione del virus nelle cellule renali (BHK-21) di baby criceto e suckling topi siRNA. In questo studio, abbiamo generato modelli murini transgenici integrando short hairpin RNA (shRNA) microinfected FMDV di targeting. Quando esaminata al settimo passaggio nei topi transgenici, il gene bersaglio ancora &egrave; stato trovato da PCR per essere integrato nel genoma. Rispetto ai topi di controllo, i topi transgenici hanno mostrato solo leggermente anormale patologia quando vennero infettati con il sierotipo FMDV Asia 1. Il numero di virus nei tessuti del mouse transgenico &egrave; stata molto basso e in alcuni tessuti no virus potrebbe essere rilevato da immunohistochemistry.

Modello di topo transgenico integrando siRNA targeting per il virus della malattia di afta epizootica.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5EFA;&#x9020; 2 &#x5C0F;&#x5E72;&#x6270; Rna (siRNAs) &#x4E13;&#x95E8;&#x9488;&#x5BF9;&#x540C;&#x7C7B; 3D &#x548C; 2B1 &#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x624B;&#x8DB3;&#x53E3;&#x75C5;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2;) &#x7684; 7 &#x79CD;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x53CA;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x6291;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x5728;&#x5E7C;&#x4ED3;&#x9F20;&#x80BE; (BHK-21) &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E73;&#x9F20; siRNAs &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x6210;&#x96C6;&#x6210;&#x77ED;&#x53D1;&#x5939; RNA (shRNA) microinfected &#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x65F6;&#x5728;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x7B2C; 7 &#x6B21;&#x901A;&#x8FC7;&#x5BA1;&#x67E5;&#xFF0C;&#x4ECD;&#x53D1;&#x73B0;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0; pcr &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x96C6;&#x6210;&#x3002;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0E;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x4EC5;&#x7A0D;&#x6709;&#x5F02;&#x5E38;&#x75C5;&#x7406;&#x65F6;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x611F;&#x67D3;&#x4E86;&#x53E3;&#x8E44;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8840;&#x6E05;&#x578B;&#x4E9A;&#x6D32; 1&#x3002;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x662F;&#x975E;&#x5E38;&#x4F4E;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x6CA1;&#x6709;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53EF;&#x901A;&#x8FC7;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;

&#x96C6;&#x6210; siRNA &#x9488;&#x5BF9;&#x624B;&#x8DB3;&#x53E3;&#x75C5;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

We have constructed 2 small interfering RNAs (siRNAs) specifically targeting homogenous 3D and 2B1 regions of 7 serotypes of the foot and mouth disease virus (FMDV) and tested the ability of siRNAs to inhibit virus replication in baby hamster kidney (BHK-21) cells and suckling mice. In this study, we generated transgenic mouse models integrating short hairpin RNA (shRNA) targeting microinfected FMDV. When examined at the 7th passage in transgenic mice, the target gene was still found by PCR to be integrated in the genome. Compared to the control mice, the transgenic mice showed only slightly abnormal pathology when they were infected with the FMDV serotype Asia 1. The number of viruses in the tissues of the transgenic mouse was very low and in some tissues no virus could be detected by immunohistochemistry.

Transgenic mouse model integrating siRNA targeting the foot and mouth disease virus.

Nous avons construit 2 petits ARN interf&eacute;rents (siARN) ciblant sp&eacute;cifiquement les r&eacute;gions homog&egrave;nes de 3D et 2 b 1 7 s&eacute;rotypes du virus de la fi&egrave;vre aphteuse maladie (fi&egrave;vre aphteuse) et test&eacute; la capacit&eacute; des siARN &agrave; inhiber la r&eacute;plication du virus dans les cellules r&eacute;nales (BHK-21) de b&eacute;b&eacute;s hamsters et les souris des t&eacute;t&eacute;es. Dans cette &eacute;tude, nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; des mod&egrave;les de souris transg&eacute;niques int&eacute;grant l&#39;&eacute;pingle &agrave; cheveux courts RNA (shARN) ciblant les microinfected de fi&egrave;vre aphteuse. Lorsque examin&eacute;s au 7e passage chez des souris transg&eacute;niques, le g&egrave;ne cible a &eacute;t&eacute; encore trouv&eacute; par PCR &agrave; int&eacute;grer dans le g&eacute;nome. Par rapport aux souris contr&ocirc;le, les souris transg&eacute;niques ont montr&eacute; seulement l&eacute;g&egrave;rement anormal pathologie lorsqu&#39;ils ont &eacute;t&eacute; infect&eacute;s par le s&eacute;rotype du virus aphteux Asie 1. Le nombre de virus dans les tissus de la souris transg&eacute;nique a &eacute;t&eacute; tr&egrave;s faible, et dans certains tissus aucun virus ne pouvait &ecirc;tre d&eacute;tect&eacute;e par immunohistochimie.

Mod&egrave;le de souris transg&eacute;nique int&eacute;grant des siARN ciblant le virus de la fi&egrave;vre aphteuse.

Wir haben 2 kleine interferierender RNAs (SiRNAs) speziell auf homogene Regionen f&uuml;r 3D und 2B1 7 Serotypen von Maul- und Klauenseuche Virus der Krankheit (FMDV) gebaut und getestet die F&auml;higkeit der SiRNAs, Virus-Replikation in Baby Hamsterzellen Niere (BHK-21) und Spanferkel-M&auml;use zu hemmen. In dieser Studie erzielten wir transgene Mausmodelle kurze Haarnadel RNA (ShRNA) Microinfected FMDV gezielt zu integrieren. Wenn im 7. Passage in transgenen M&auml;usen untersucht, fand das Ziel-gen noch durch PCR im Genom integriert werden. Im Vergleich zu den Steuerelement-M&auml;usen, die transgene M&auml;use zeigte nur geringf&uuml;gig abnorme Pathologie, wenn sie mit dem FMDV Serotyp Asien 1 infiziert wurden. Die Anzahl der Viren in den Geweben der transgenen Maus war sehr gering, und in manchen Geweben konnte kein Virus von Immunohistochemistry erkannt werden.

Zhiru Guo

Department of Cancer Biology

University of Massachusetts Medical School

Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

Zhiru Guo

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University of Massachusetts Medical School

Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

Department of Cancer Biology