titration-of-human-coronaviruses-using-an-immunoperoxidase-assay

Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay

Determination of infectious viral titers is a basic and essential experimental approach for virologists. Classical plaque assays cannot be used for ...

INRS-Institut Armand-Frappier

&#x6700;&#x8FD1;&#x6709;&#x4EBA;&#x63D0;&#x51FA;&#x5728; mdx &#x9694;&#x819C;&#x808C;&#x6297;&#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x86CB;&#x767D;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x75C7;&#x662F;&#x4E0E;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x5B50;&#x9A6C;&#x8FBE;&#x6570;&#x91CF;&#x53D8;&#x5316;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x52A8;&#x529B;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x8089;&#x7EAF;&#x51C0;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x4E0E;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;&#x5355;&#x4F53;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x662F; mo 9 &#x5C81;&#x7537;&#x6027; mdx (mdx) &#x548C;&#x5E74;&#x9F84;&#x5339;&#x914D;&#x7684;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x5C0F;&#x9F20;&#x808C;&#x8089;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x9694;&#x819C;&#x548C;&#x80A2;&#x4F53; (&#x534A;&#x8171;&#x808C;)&#x3002;&#x6D4B;&#x91CF;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x79FB;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x6D82;&#x5C42;&#x8868;&#x9762; (40 microg/ml&#xFF09; &#x7684;&#x6ED1;&#x52A8;&#x901F;&#x5EA6; microm/s vo&#xFF09;&#x3002;Vo &#x5728;&#x9694;&#x819C;&#xFF0C;&#x660E;&#x663E;&#x6BD4;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x5C0F;&#x9F20; (+ /-0.1 microm s(-1) &#x4E0E; + /-0.1 microm s(-1)&#xFF0C;p &lt; 0.001 1.9 1.2) &#x5728; mdx &#x4E2D;&#x8F83;&#x6162;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x662F; vo &#x63A7;&#x5236;&#x548C; mdx &#x4E4B;&#x95F4;&#x5B58;&#x5728;&#x663E;&#x8457;&#x5DEE;&#x5F02;&#x534A;&#x8171;&#x808C; (+ /-0.1 microm s(-1) &#x4E0E; + /-0.1 micro(-1)) 2.5 2.4&#x3002;&#x6BD4;&#x5BF9;&#x7167;&#x7EC4;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;mdx &#x9694;&#x819C;&#x5C55;&#x51FA;&#x4ECE; IIX MHC &#x8F6C;&#x5411; IIA MHC (p &lt; 0.001) &#x548C;&#x51CF;&#x5C11; IIB MHC (p &lt; 0.01)&#x3002;&#x4ECE;&#x63A7;&#x5236;&#x548C; mdx &#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x534A;&#x8171;&#x808C;&#x8F7D;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168; IIB MHC &#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x662F;&#x597D;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5728;&#x8BE5;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x8425;&#x517B;&#x4E0D;&#x826F;&#x6027;&#x9F20;&#x6807;&#x9694;&#x819C;&#x53D1;&#x751F;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;

&#x8425;&#x517B;&#x4E0D;&#x826F;&#x6027;&#x9F20;&#x6807;&#x9694;&#x819C;&#x7684;&#x964D;&#x4F4E;&#x8089;&#x6ED1;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x3002;

It has recently been suggested that dystrophin deficiency in mdx diaphragm muscle is associated with quantitative changes in the myosin molecular motor. In vitro motility assays were used to study the kinetics of actomyosin interactions between purified actin filaments and myosin molecules. Monomeric myosin was obtained from the diaphragm and limb (semitendinosus) muscles of 9-mo-old male mdx (mdx) and age-matched control mice. The sliding velocity (vo, microm/s) of fluorescent-labeled actin filaments moving over a myosin-coated surface (40 microg/ml) was measured. In diaphragm, vo was significantly slower in mdx than in control mice (1.2 +/- 0.1 microm s(-1) versus 1.9 +/- 0.1 microm s(-1), p < 0.001). Conversely, there was no significant difference in vo between control and mdx semitendinous muscles (2.4 +/- 0.1 microm s(-1) versus 2.5 +/- 0.1 micro(-1)). As compared with control mice, mdx diaphragm exhibited a shift from IIX-MHC to IIA-MHC (p < 0.001) and a reduction in IIB-MHC (p < 0.01). Semitendinous muscle from control and mdx mice contained almost exclusively type IIB MHC. Our results are in good agreement with the proposal that myosin is altered in dystrophic mouse diaphragm.

Velocity of actomyosin sliding in vitro is reduced in dystrophic mouse diaphragm.

R&eacute;cemment, il a &eacute;t&eacute; sugg&eacute;r&eacute; que la lacune de dystrophine dans le muscle diaphragme mdx est associ&eacute;e &agrave; des changements quantitatifs dans le moteur mol&eacute;culaire de la myosine. Essais de motilit&eacute; in vitro ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es pour &eacute;tudier la cin&eacute;tique des interactions de l&#39;actomyosine entre les filaments d&#39;actine purifi&eacute;e et mol&eacute;cules de myosine. Myosine monom&egrave;re a &eacute;t&eacute; obtenue de la membrane et la branche (semitendinosus) muscles de 9-mois-vieux m&acirc;le mdx (mdx) et des souris t&eacute;moins appari&eacute;s selon l&#39;&acirc;ge. La vitesse de glissement (vo, microm/s) des filaments d&#39;actine marqu&eacute;es de fluorescence se d&eacute;place au-dessus d&#39;une surface enduite de la myosine (40 microg/ml) a &eacute;t&eacute; mesur&eacute;e. &Agrave; diaphragme, vo a &eacute;t&eacute; sensiblement plus lente dans les expressions mdx que chez les souris t&eacute;moins (1,2 +/-0,1 microm s(-1) versus 1,9 +/-0,1 microm s(-1), p &lt; 0,001). En revanche, il n&#39;y n&#39;avait aucune diff&eacute;rence significative dans la vo entre contr&ocirc;le et mdx demi-tendineux muscles (2.4 +/-0,1 microm s(-1) versus 2.5 +/-0,1 micro(-1)). Comparativement aux souris t&eacute;moins, mdx diaphragme ont montr&eacute; un changement de IIX-MHC &agrave; IIA-MHC (p &lt; 0,001) et la r&eacute;duction IIB-MHC (p &lt; 0,01). Muscle demi-tendineux de souris contr&ocirc;le et mdx contenue presque exclusivement de type IIB MHC. Nos r&eacute;sultats sont en accord avec la proposition que la myosine est alt&eacute;r&eacute;e dans le diaphragme de la souris dystrophique.

Vitesse de glissement in vitro de l&#39;actomyosine est r&eacute;duite dans le diaphragme de la souris dystrophique.

Velocity Actomyosinaktivit&#xE4;t Gleiten in vitro wird in dystrophischen Maus Membran reduziert.

Recentemente &egrave; stato suggerito che il deficit di distrofina nel muscolo diaframma mdx &egrave; associato con modifiche quantitative nel motore molecolare della miosina. Motilit&agrave; in vitro dosaggi sono stati utilizzati per studiare la cinetica di interazioni actomiosina tra filamenti di actina purificato e molecole di miosina. Miosina monomerica &egrave; stata ottenuta dal diaframma e arto (semitendinoso) muscoli di 9-mo-vecchio maschio mdx (mdx) e topi di controllo di et&agrave; corrispondente. &Egrave; stata misurata la velocit&agrave; di scorrimento (vo, microm/s) dei filamenti di actina con etichetta fluorescente in movimento sopra una superficie rivestita di miosina (40 microg/ml). Nel diaframma, vo era significativamente pi&ugrave; lento in mdx rispetto a topi di controllo (1.2 + /-0,1 microm s(-1) versus 1.9 + /-0,1 microm s(-1), p &lt; 0.001). Al contrario, non non c&#39;era alcuna differenza significativa in vo tra controllo e mdx muscoli semitendinoso (2,4 + /-0,1 microm s(-1) versus 2.5 + /-0.1 micro(-1)). Rispetto ai topi di controllo, mdx diaframma esposto un passaggio da IIX-MHC di IIA-MHC (p &lt; 0,001) e una riduzione dei IIB-MHC (p &lt; 0,01). Muscolo semitendinoso da topi di controllo e mdx contenuta quasi esclusivamente di tipo IIB MHC. I nostri risultati sono in accordo con la proposta che miosina viene alterata in membrana distrofiche del mouse.

Velocit&agrave; di actomiosina scorrevole in vitro &egrave; ridotto nella membrana del mouse distrofiche.

&#x8FD1;&#x5E74;&#x3001;mdx &#x6A2A;&#x9694;&#x819C;&#x7B4B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x6B20;&#x640D;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x91CF;&#x7684;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;In vitro &#x904B;&#x52D5;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x7CBE;&#x88FD;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C8;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; &#x30C0;&#x30A4;&#x30E4;&#x30D5;&#x30E9;&#x30E0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x80A2; (&#x534A;&#x8171;&#x69D8;&#x7B4B;) &#x304B;&#x3089; 9-mo &#x6B73;&#x7537;&#x6027; mdx (mdx) &#x3068;&#x5E74;&#x9F62;&#x3092;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x5BFE;&#x7167;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7B4B;&#x8089;&#x304C;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3; &#x30B3;&#x30FC;&#x30C8; &#x30B5;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B9; (40 microg/ml) &#x4E0A;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x86CD;&#x5149;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; &#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x6ED1;&#x308A;&#x901F;&#x5EA6; &#xFF08;vo&#x3001;microm/&#x79D2;) &#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6A2A;&#x9694;&#x819C;&#x306E; vo &#x306F; mdx &#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; (&plusmn; 0.1 microm s(-1) 0.1 microm s(-1)&#x3001;p &lt; 0.001 &plusmn; 1.9 &#x5BFE; 1.2) &#x3067;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x9045;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x9006;&#x306B;&#x3001;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068; mdx &#x306E; vo &#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306E;&#x5DEE; semitendinous &#x7B4B;&#x8089; &#xFF08;2.4 &plusmn; 0.1 microm s(-1) 0.1 micro(-1)) &plusmn; 2.5 &#x5BFE;&#x3002;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;mdx &#x30C0;&#x30A4;&#x30E4;&#x30D5;&#x30E9;&#x30E0; IIX MHC &#x304B;&#x3089; IIA-MHC &#xFF08;p &lt; 0.001) &#x3078;&#x306E;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3068; IIB-MHC (p &lt; 0.01) &#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x3092;&#x51FA;&#x5C55;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Semitendinous &#x7B4B;&#x8089;&#x5236;&#x5FA1;&#x304A;&#x3088;&#x3073; mdx &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x5C02;&#x3089;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; IIB MHC &#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x826F;&#x3044;&#x4E00;&#x81F4;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x305D;&#x306E;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6A2A;&#x9694;&#x819C;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x901F;&#x5EA6; in vitro &#x6ED1;&#x308A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C8;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x6A2A;&#x9694;&#x819C;&#x306E;&#x77ED;&#x7E2E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; mdx &#xD6A1; &#xACBD; &#xB9C9; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; dystrophin &#xACB0;&#xD54D; &#xC591;&#xC801; &#xBCC0;&#xD654; myosin &#xBD84;&#xC790; &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCB4; &#xC678; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; actomyosin &#xC815;&#xD654; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC640; myosin &#xBD84;&#xC790; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. Monomeric myosin 9 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xB41C; &#xB0A8;&#xC131; mdx (mdx)&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xB098;&#xC774; &#xD1B5;&#xC81C; &#xC950;&#xC758; &#xADFC;&#xC721; &#xD6A1; &#xACBD; &#xB9C9;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC9C0; (semitendinosus)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xD588;&#xB2E4;. Myosin &#xCF54;&#xD305; &#xD45C;&#xBA74; (40 microg/ml)&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC774;&#xB3D9; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD615;&#xAD11; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC758; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB529; &#xC18D;&#xB3C4; (vo, microm/s)&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4; &#xD504; &#xB7A8;, vo&#xB294; &#xD1B5;&#xC81C; &#xC950; (0.1 microm s(-1), p &lt; 0.001 + 1.9 &#xB300; 0.1 microm s(-1) &plusmn; 1.2)&#xC5D0; mdx &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB290;&#xB9B0;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, &#xAC70;&#xAE30;&#xB294; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xACE0; mdx &#xC0AC;&#xC774; vo&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; semitendinous &#xADFC;&#xC721; (2.4 &plusmn; 0.1 microm s(-1) 0.1 micro(-1)) &plusmn; 2.5 &#xB300;. &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; mdx &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4; &#xD504; &#xB7A8; &#xC804;&#xC2DC; IIX MHC&#xC5D0;&#xC11C; IIA-MHC (p &lt; 0.001) &#xADFC;&#xBB34; &#xBC0F; IIB-MHC (p &lt; 0.01)&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;. Semitendinous &#xADFC;&#xC721; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; mdx &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC70;&#xC758; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xD615; IIB MHC &#xD3EC;&#xD568;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548;&#xC11C;&#xC640; &#xC88B;&#xC740; &#xACC4;&#xC57D;&#xC5D0; &#xADF8; myosin dystrophic &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4; &#xD504; &#xB7A8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Dystrophic &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB2E4;&#xC774;&#xC5B4; &#xD504; &#xB7A8; actomyosin &#xCCB4; &#xC678; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB529; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;.

Recientemente se ha sugerido que la deficiencia de distrofina en el m&uacute;sculo diafragma de mdx se asocia a cambios cuantitativos en el motor molecular de miosina. Ensayos de motilidad in vitro fueron utilizados para estudiar la cin&eacute;tica de las interacciones de la actomyosin entre los filamentos de actina purificada y mol&eacute;culas de miosina. Miosina monom&eacute;rica obtuvo del diafragma y extremidades (semitendinoso) m&uacute;sculos de mes-viejo 9 masculino mdx (mdx) y ratones de edad comparable del control. Se midi&oacute; la velocidad de desplazamiento (vo, microm/s) de los filamentos de actina marcado con fluorescente en movimiento sobre una superficie recubierta de miosina (40 microg/ml). En el diafragma, vo era significativamente m&aacute;s lento en mdx que en ratones control (1.2 + /-0,1 microm s(-1) versus 1.9 +/-0.1 microm s(-1), p &lt; 0.001). Por el contrario, no hubo diferencias significativas en vo entre control y mdx semitendinous m&uacute;sculos (2.4 +/-0.1 microm s(-1) versus 2.5 +/-0.1 micro(-1)). En comparaci&oacute;n con los ratones de control, diafragma de mdx exhibi&oacute; un cambio de IIX-MHC IIA-MHC (p &lt; 0,001) y una reducci&oacute;n en el IIB-MHC (p &lt; 0.01). Semitendinous m&uacute;sculos de ratones mdx y control que contiene casi exclusivamente tipo IIB MHC. Nuestros resultados est&aacute;n de acuerdo con la propuesta que miosina est&aacute; alterado en el diafragma del rat&oacute;n distr&oacute;fico.

Velocidad de actomyosin desplazamiento in vitro se reduce en el diafragma del rat&oacute;n distr&oacute;fico.

&#x5149;&#x9631;&#x6280;&#x672F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x624B;&#x6BB5;&#x6765;&#x64CD;&#x7EB5;&#x5982;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3001; &#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x9897;&#x7C92;&#x3002;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x9886;&#x57DF;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C; &#xFF08;&#x5F39;&#x6027;&#xFF09; &#x673A;&#x68B0;&#x6027;&#x80FD;&#x3001; &#x957F;&#x4E1D;&#x72B6;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x4E1D;&#x72B6;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x6700;&#x5177;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x5355;&#x7535;&#x673A;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x5149;&#x5B66;&#x954A;&#x5B50;&#x9677;&#x9631;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8861;&#x91CF;&#x5355;&#x7535;&#x673A;&#x5206;&#x5B50;&#x5982;&#x9A71;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5728; piconewton &#x8303;&#x56F4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9996;&#x6B21;&#x89E3;&#x51B3;&#x5B83;&#x4EEC;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x8E0F;&#x811A;&#x8FD0;&#x52A8;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x529B;&#x3002;

[&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x4E0E;&#x533B;&#x5B66;&#x4E2D;&#x7684;&#x5149;&#x5B66;&#x954A;&#x5B50;]&#x3002;

Optical trapping techniques provide unique means to manipulate biological particles such as virus, living cells and subcellular organelles. Another area of interest is the measurement of mechanical (elastic) properties of cell membranes, long strands of single DNA molecule, and filamentous proteins. One of the most attractive applications is the study of single motor molecules. With optical tweezers traps, one can measure the forces generated by single motor molecules such as kinesin and myosin, in the piconewton range and, for the first time, resolve their detailed stepping motion.

[Optical tweezers in biology and medicine].

Techniques de pi&eacute;geage optique fournissent des moyens uniques pour manipuler des particules biologiques tels que les virus, les cellules vivantes et les organites subcellulaires. Un autre domaine d&#39;int&eacute;r&ecirc;t est la mesure des propri&eacute;t&eacute;s m&eacute;caniques (&eacute;lastiques) des membranes cellulaires, longs brins d&#39;une seule mol&eacute;cule d&#39;ADN et de prot&eacute;ines filamenteuses. Une des applications plus attractifs est l&#39;&eacute;tude des mol&eacute;cules de moteurs uniques. Avec des pinces optiques pi&egrave;ges, on peut mesurer les forces g&eacute;n&eacute;r&eacute;es par des mol&eacute;cules de moteurs uniques comme kin&eacute;sine et la myosine, dans le piconewton vont, pour la premi&egrave;re fois, r&eacute;soudre leur mouvement pas &agrave; pas d&eacute;taill&eacute;.

[Pinces optiques en biologie et en m&eacute;decine].

[Optische Pinzette in Biologie und Medizin].

Tecniche di intrappolamento ottico forniscono unici mezzi per manipolare le particelle biologiche quali virus, cellule viventi e organelli subcellulari. Un&#39;altra area di interesse &egrave; la misura delle propriet&agrave; meccaniche (elastico) delle membrane cellulari, lunghi filamenti di singola molecola di DNA e proteine filamentose. Una delle applicazioni pi&ugrave; interessanti &egrave; lo studio delle singole molecole di motore. Con una pinzetta ottica trappole, uno pu&ograve; misurare le forze generate da singole molecole motore come chinesina e miosina, nel piconewton gamma e, per la prima volta, risolvere loro movimento dettagliata passo-passo.

[Pinzetta ottica nella biologia e nella medicina].

&#x5149;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x6280;&#x6CD5;&#x751F;&#x4F53;&#x7C92;&#x5B50;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x306A;&#x3069;&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x72EC;&#x81EA;&#x306E;&#x624B;&#x6BB5;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x95A2;&#x5FC3;&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x7269;&#x6027; &#xFF08;&#x5F3E;&#x6027;&#xFF09;&#x3001;&#x5358;&#x4E00; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x72B6;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x9577;&#x3044;&#x9396;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306F;&#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x306F;&#x3001;1 &#x3064;&#x3001;&#x30D4;&#x30B3;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x30AD;&#x30CD;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3057;&#x3001;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x529B;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

[&#x5149;&#x30D4;&#x30F3;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3068;&#x533B;&#x5B66;]&#x3002;

&#xAD11;&#xD559; &#xD2B8;&#xB798;&#xD551; &#xAE30;&#xBC95; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;, &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; subcellular organelles &#xAC19;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xC785;&#xC790;&#xB97C; &#xC870;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC218;&#xB2E8; &#xC81C;&#xACF5;. &#xB610; &#xB2E4;&#xB978; &#xAD00;&#xC2EC; &#xBD84;&#xC57C;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; (&#xD0C4;&#xC131;) &#xD2B9;&#xC131;, &#xB2E8;&#xC77C; DNA &#xBD84;&#xC790; filamentous &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE34; &#xAC00;&#xB2E5;&#xC758; &#xCE21;&#xC815;. &#xAC00;&#xC7A5; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xC560;&#xD50C; &#xB9AC; &#xCF00;&#xC774; &#xC158; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBAA8;&#xD130; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B; &#xD2B8;&#xB7A9; &#xD558;&#xB098; kinesin&#xACFC; myosin&#xC740; piconewton&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC94;&#xC704;&#xC640; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC790;&#xC138;&#xD55C; &#xC2A4;&#xD14C;&#xD551; &#xBAA8;&#xC158; &#xD574;&#xACB0; &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBAA8;&#xD130; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xD798;&#xC744; &#xCE21;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

[&#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xBC0F; &#xC758;&#xD559; &#xAD11;&#xD559; &#xD540;&#xC14B;]&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

TECNICAS &oacute;ptico proporcionan medios &uacute;nicos para manipular part&iacute;culas biol&oacute;gicas tales como virus, c&eacute;lulas vivas y organelos subcelulares. Otra &aacute;rea de inter&eacute;s es la medida de propiedades mec&aacute;nicas (el&aacute;sticos) de las membranas celulares, filamentos largos de sola mol&eacute;cula de ADN y prote&iacute;nas filamentosas. Una de las aplicaciones m&aacute;s atractivas es el estudio de las mol&eacute;culas individuales de motores. Con trampas de pinzas &oacute;pticas, se pueden medir las fuerzas generadas por las mol&eacute;culas individuales de motores como kinesin y miosina, en el piconewton gama y, por primera vez, resoluci&oacute;n su movimiento detallado de escalonamiento.

[Pinzas &oacute;pticas en biolog&iacute;a y Medicina].

&#x7814;&#x7A76;&#x76EE;&#x6807;/&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF1A; &#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x6A2A;&#x7EB9;&#x548C;&#x52A8;&#x8109;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x529F;&#x80FD;&#x76EE;&#x524D;&#x5DF2;&#x77E5;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x5FC3;&#x810F;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x53EF;&#x7528;&#x5BF9;&#x6C14;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7684;&#x529B;&#x5B66;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x5FC3;&#x810F;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8D1F;&#x8377;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x57FA;&#x7EBF;&#x7684;&#x6C14;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C; (TSM) &#x7684;&#x529B;&#x5B66;&#x6027;&#x80FD;&#x662F;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x5047;&#x8BF4;&#x3002;

&#x6C14;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x6027;&#x80FD;&#x4E0E;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5FC3;&#x810F;&#x538B;&#x529B;&#x8D85;&#x8D1F;&#x8377;&#x5154;&#x800C;&#x53D7;&#x635F;&#x3002;

STUDY OBJECTIVES/DESIGN: Impaired function of striated and arterial smooth muscle is known to occur in humans and animals with various forms of cardiac diseases, but limited information is available on the mechanical behavior of airway smooth muscle. We tested the hypothesis that the baseline mechanical properties of tracheal smooth muscle (TSM) were impaired at an early stage of cardiac overload.

Mechanical properties of tracheal smooth muscle are impaired in the rabbit with experimental cardiac pressure overload.

OBJECTIFS de l&#39;&eacute;tude/conception : Fonction des muscles lisses art&eacute;riels stri&eacute; est connue pour se produire chez les humains et les animaux avec diverses formes de maladies cardiaques, mais peu d&#39;informations est disponible sur le comportement m&eacute;canique du muscle lisse des voies a&eacute;riennes. Nous avons test&eacute; l&#39;hypoth&egrave;se que les propri&eacute;t&eacute;s m&eacute;caniques de base du muscle lisse trach&eacute;al (TSM) ont &eacute;t&eacute; alt&eacute;r&eacute;es &agrave; un stade pr&eacute;coce de la surcharge cardiaque.

Les propri&eacute;t&eacute;s m&eacute;caniques du muscle lisse trach&eacute;al sont alt&eacute;r&eacute;es chez le lapin avec une surcharge de pression cardiaque exp&eacute;rimentale.

Mechanische Eigenschaften von trachealen glatten Muskulatur sind bei Kaninchen mit experimenteller Herz-Druck &#xDC;berlastung beeintr&#xE4;chtigt.

Gli obiettivi di studio/DESIGN: Alterata funzione del tessuto muscolare liscio striato e arterioso &egrave; noto che si verifica negli esseri umani e animali con varie forme di malattie cardiache, ma limitate informazioni sono disponibile sul comportamento meccanico del muscolo liscio delle vie aeree. Abbiamo testato l&#39;ipotesi che le propriet&agrave; meccaniche di base del muscolo liscio trachea (TSM) erano alterate in una fase iniziale di sovraccarico cardiaco.

Propriet&agrave; meccaniche del tessuto muscolare liscio tracheale sono alterati nel coniglio con sovraccarico di pressione cardiaca sperimentale.

&#x7814;&#x7A76;&#x76EE;&#x6A19;&#x30FB; &#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;: &#x8074;&#x899A;&#x969C;&#x5BB3;&#x6A2A;&#x7D0B;&#x7B4B;&#x53CA;&#x3073;&#x52D5;&#x8108;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x3068;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5FC3;&#x81D3;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x5F62;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x60C5;&#x5831;&#x304C;&#x6C17;&#x9053;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x6319;&#x52D5;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6C17;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B; &#xFF08;TSM&#xFF09; &#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x6027;&#x8CEA;&#x304C;&#x5FC3;&#x81D3;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC; &#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x65E9;&#x3044;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x969C;&#x5BB3;&#x8005;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6C17;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3068;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x5727;&#x8CA0;&#x8377;&#x30A6;&#x30B5;&#x30AE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x969C;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5F0;&#xAD6C; &#xBAA9;&#xD45C;/&#xB514;&#xC790;&#xC778;: &#xC7A5;&#xC560;&#xC778; &#x7D0B;&#xACFC; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC778;&#xAC04;&#xACFC; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC83; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC81C;&#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB294; &#xAE30;&#xB3C4; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xB3D9;&#xC791;&#xC5D0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2EC;&#xC7A5; &#xACFC;&#xBD80;&#xD558;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; tracheal &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; (TSM)&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;&#xC740; &#xC7A5;&#xC560;&#xC778; &#xAC00;&#xC124; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;.

Tracheal &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC555;&#xB825; &#xACFC;&#xBD80;&#xD558;&#xC640; &#xD1A0;&#xB07C;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

OBJETIVOS/dise&ntilde;o del estudio: Deteriorada la funci&oacute;n del m&uacute;sculo liso arterial y estriado se sabe que ocurre en los seres humanos y animales con diversas formas de enfermedades card&iacute;acas, pero poca informaci&oacute;n est&aacute; disponible en el comportamiento mec&aacute;nico del m&uacute;sculo liso de las v&iacute;as respiratorias. Probamos la hip&oacute;tesis que las propiedades mec&aacute;nicas de la l&iacute;nea de base del m&uacute;sculo liso traqueal del (TSM) fueron deterioradas en una etapa temprana de la sobrecarga cardiaca.

Propiedades mec&aacute;nicas del m&uacute;sculo liso traqueal se deterioran en el conejo con sobrecarga de presi&oacute;n card&iacute;aca experimental.

&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6548;&#x4EF7;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B66;&#x5BB6;&#x8868;&#x793A;&#x57FA;&#x672C;&#x53CA;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x53E4;&#x5178;&#x724C;&#x533E;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E0D;&#x80FD;&#x7528;&#x4E8E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x91CD;&#x5927;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x8FD9;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E3A;&#x682A; 229E &#x548C; OC43 &#x4EBA;&#x7C7B;&#x51A0;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2; (HCoV)&#x3002;&#x66FF;&#x4EE3;&#x95F4;&#x63A5;&#x67D3;&#x8272;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x5B9A; (IPA) &#x662F;&#x672C;&#x8BC1;&#x4E66;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x6EF4;&#x5B9A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3002;&#x6613;&#x611F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x7528;&#x4E32;&#x884C;&#x5BF9;&#x6570;&#x7A00;&#x91CA;&#x5EA6;&#x5E76; 96 &#x4E95;&#x677F;&#x4E2D;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x63A5;&#x79CD;&#x3002;&#x540E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684; IPA &#x6536;&#x76CA;&#x7387;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6EF4;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&quot;&#x7EC4;&#x57F9;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x5242;&#x91CF;&quot;&#xFF08;TCID50&#xFF09; &#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x534A;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x4E95;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x5305;&#x542B;&#x590D;&#x5236;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5305;&#x542B;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x7684;&#x7A00;&#x91CA;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x6280;&#x672F;&#x662F;&#x751F;&#x7269;&#x6837;&#x54C1; (&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x6216;&#x6DB2;&#x4F53;&#xFF09; &#x4E2D;&#x7684; HCoV &#x6EF4;&#x5B9A;&#x53EF;&#x9760;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x51A0;&#xFF0C;HcoV 229E &#x548C; HCoV-OC43 &#x95F4;&#x63A5;&#x67D3;&#x8272;&#x6CD5;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x6EF4;&#x5B9A;&#x6CD5;&#x3002;

Calculation of infectious viral titers represents a basic and essential experimental approach for virologists. Classical plaque assays cannot be used for viruses that do not cause significant cytopathic effects, which is the case for strains 229E and OC43 of human coronavirus (HCoV). An alternative indirect immunoperoxidase assay (IPA) is herein described for the detection and titration of these viruses. Susceptible cells are inoculated with serial logarithmic dilutions of samples in a 96-well plate. After viral growth, viral detection by IPA yields the infectious virus titer, expressed as "Tissue Culture Infectious Dose" (TCID50). This represents the dilution of a virus-containing sample at which half of a series of laboratory wells contain replicating virus. This technique is a reliable method for the titration of HCoV in biological samples (cells, tissues, or fluids).

Titration of human coronaviruses, HcoV-229E and HCoV-OC43, by an indirect immunoperoxidase assay.

Calcul des titres viraux infectieux repr&#xE9;sente une approche fondamentale et essentielle exp&#xE9;rimental pour virologues. Dosages plaque classique ne peut pas &#xEA;tre utilis&#xE9; pour les virus qui ne provoquent pas des effets cytopathiques, ce qui est le cas pour les souches 229E et OC43 de coronavirus humain (HCoV). Un test d&#x26;#39;immunoperoxydase alternative indirecte (IPA) est d&#xE9;crite ici pour la d&#xE9;tection et le titrage de ces virus. Cellules sensibles sont inocul&#xE9;s avec des dilutions en s&#xE9;rie logarithmiques d&#x26;#39;&#xE9;chantillons dans une plaque de 96 puits. Apr&#xE8;s une croissance virale, la d&#xE9;tection virale par l&#x26;#39;IPA donne le titre du virus infectieux, exprim&#xE9; ainsi: &#xAB;la dose infectieuse de culture tissulaire&#x26;quot; (DICT50). Cela repr&#xE9;sente la dilution d&#x26;#39;un &#xE9;chantillon contenant le virus au cours de laquelle la moiti&#xE9; d&#x26;#39;une s&#xE9;rie de puits de laboratoire contiennent de la r&#xE9;plication virale. Cette technique est une m&#xE9;thode fiable pour le titrage des HCoV dans des &#xE9;chantillons biologiques (cellules, tissus ou liquides).

Le titrage de coronavirus humains, HCoV-229E et HCoV-OC43, par un dosage immunoperoxydase indirecte

Berechnung der ansteckende virale Titer stellt einen grundlegenden und wesentlichen experimentellen Ansatz f&uuml;r Virologen. Klassische Plakette Proben k&ouml;nnen nicht verwendet werden f&uuml;r Viren, die keine erhebliche zytopathischen Effekte verursachen, was der Fall ist f&uuml;r die St&auml;mme 229E und OC43 menschlichen Coronavirus (HCoV). Ein alternativer indirekte Immunperoxidase-Assay (IPA) ist zum Nachweis und zur Titration von diesen Viren hierin beschrieben. Empf&auml;nglicher Zellen sind mit seriellen logarithmische Verd&uuml;nnung der Proben in einem 96-Well-Platte verimpft. Nach virales Wachstum ergibt Virenabfragung IPA das infekti&ouml;se Virus-Titer, ausgedr&uuml;ckt als &quot;Tissue Culture Infectious Dose&quot; (TCID50). Dies entspricht die Verd&uuml;nnung einer Virus-haltigen Probe, an dem die H&auml;lfte einer Reihe von Labor-Brunnen replizierende Viren enthalten. Diese Technik ist eine zuverl&auml;ssige Methode f&uuml;r die Titration HCoV in biologischen Proben (Zellen, Gewebe und Fl&uuml;ssigkeiten).

Titration von menschlichen Coronaviren, HcoV-229E und HCoV-OC43, durch eine indirekte Immunperoxidase-Probe.

Calcolo dei titoli virali infettivi rappresenta un approccio sperimentale essenziale e virologi. Placca classica dosaggi non possono essere utilizzati per i virus che non provocano significativi effetti citopatici, che &egrave; il caso di ceppi 229E e OC43 di coronavirus umano (HCoV). Un test alternativo immunoperossidasi indiretta (IPA) &egrave; qui descritti per il rilevamento e la titolazione di questi virus. Cellule recettive vengono inoculate con diluizioni seriali logaritmiche dei campioni in una piastra a 96 pozzetti. Dopo una crescita virale, viral detection by IPA produce il titolo di virus infettivo, espresso come &quot;Cultura del tessuto infettive Dose&quot; (TCID50). Questo rappresenta la diluizione di un campione contenente virus presso che la met&agrave; di una serie di pozzi laboratorio contengono replicazione del virus. Questa tecnica &egrave; un metodo affidabile per la titolazione di HCoV in campioni biologici (cellule, tessuti o fluidi).

Titolazione del coronavirus umano, 229E HcoV e HCoV-OC43, mediante un saggio di immunoperossidasi indiretta.

&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x529B;&#x4FA1;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5B66;&#x8005;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x5FC5;&#x8981;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30AF;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;229E&#x3068;OC43&#xFF08;HCOV&#xFF09;&#x306E;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5909;&#x6027;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x306A;&#x3044;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x306F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x5225;&#x306E;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x514D;&#x75AB;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#xFF08;IPA&#xFF09;&#x304C;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3084;&#x5B9A;&#x91CF;&#x306B;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;96&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x4E2D;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x5BFE;&#x6570;&#x5E0C;&#x91C8;&#x6DB2;&#x3092;&#x63A5;&#x7A2E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x5897;&#x6B96;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;IPA&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x691C;&#x51FA;&#x306F;&#x3001; &#x26;quot;&#x7D44;&#x7E54;&#x57F9;&#x990A;&#x611F;&#x67D3;&#x91CF;&#x26;quot;&#xFF08;TCID50&#xFF09;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x4FA1;&#x3092;&#x3001;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x306E;&#x30A6;&#x30A7;&#x30EB;&#x306E;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x306E;&#x534A;&#x5206;&#x304C;&#x8907;&#x88FD;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x542B;&#x6709;&#x8A66;&#x6599;&#x306E;&#x5E0C;&#x91C8;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x624B;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x8A66;&#x6599;&#x4E2D;&#x306E;HCOV&#x306E;&#x6EF4;&#xFF08;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4F53;&#x6DB2;&#xFF09;&#x306E;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x9593;&#x63A5;&#x514D;&#x75AB;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CA;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6EF4;&#x5B9A;&#x3001;HCOV-229E&#x3068;HCOV-OC43&#x3001;

&#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; titers &#xACC4;&#xC0B0; virologists &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD074;&#xB798;&#xC2DD; &#xD328; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; cytopathic &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 229E &#xBC0F; OC43 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCF54;&#xB85C;&#xB098; (HCoV)&#xC758; &#xBCC0;&#xC885;. &#xB300;&#xCCB4; &#xAC04;&#xC811; immunoperoxidase &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; (IPA) &#xC5EC;&#xAE30; &#xAC10;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xC801;&#xC815;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xBA85;. &#xCDE8;&#xC57D; &#xC140; 96-&#xC798; &#xC811;&#xC2DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xC9C1;&#xB82C; &#xB85C;&#xADF8; &#xD76C;&#xC11D;&#xC81C;&#xC640; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC131;&#xC7A5; &#xD6C4; ipa &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC80;&#xCD9C; &quot;&#xC870;&#xC9C1; &#xBB38;&#xD654; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&quot; (TCID50)&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xAC00; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xC6F0; &#xC2A4; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988;&#xC758; &#xC808;&#xBC18;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC0D8;&#xD50C; &#xD76C;&#xC11D;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC0D8;&#xD50C; (&#xC138;&#xD3EC;, &#xC870;&#xC9C1;, &#xB610;&#xB294; &#xCCB4;&#xC561;)&#xC5D0; Hcov&#xC758; &#xC801;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; coronaviruses, HcoV 229E &#xBC0F; HCoV OC43 &#xAC04;&#xC811; immunoperoxidase &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xC801;&#xC815;.

C&#xE1;lculo de los t&#xED;tulos virales infecciosas representa un enfoque experimental b&#xE1;sico y esencial para los vir&#xF3;logos. Los ensayos cl&#xE1;sicos placa no puede ser utilizado para los virus que no causan importantes efectos citop&#xE1;ticos, que es el caso para las cepas 229E y OC43 de coronavirus humano (HCoV). Un ensayo alternativo inmunoperoxidasa indirecta (IPA) se describe aqu&#xED; para la detecci&#xF3;n y titulaci&#xF3;n de estos virus. C&#xE9;lulas susceptibles son inoculadas con diluciones seriadas logar&#xED;tmicas de muestras en una placa de 96 pocillos. Despu&#xE9;s de un crecimiento viral, detecci&#xF3;n viral por el IPA se obtiene el t&#xED;tulo de virus infeccioso, expresado como &#x26;quot;la dosis infecciosa del cultivo de tejidos&#x26;quot; (DICT50). Esto representa la diluci&#xF3;n de una muestra de virus que contiene a la que la mitad de una serie de pozos de laboratorio contienen virus replicante. Esta t&#xE9;cnica es un m&#xE9;todo fiable para la valoraci&#xF3;n de HCoV en muestras biol&#xF3;gicas (c&#xE9;lulas, tejidos o fluidos).

Francine Lambert

Laboratory of Neuroimmunovirology

INRS-Institut Armand-Frappier

Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay

Francine Lambert

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INRS-Institut Armand-Frappier

Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay

Laboratory of Neuroimmunovirology