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Efficient Recombinant Parvovirus Production with the Help of Adenovirus-derived Systems

Rodent parvoviruses (PV) such as rat H-1PV and MVM, are small icosahedral, single stranded, DNA viruses. Their genome includes two promoters P4 and P38 ...

German Cancer Research Center (DKFZ)

Descriviamo un romanzo meccanismo normativo per la polimerasi del DNA beta (Polbeta), una proteina coinvolta nella riparazione del DNA base escissione (BER). Polbeta colocalized in vivo e formano un complesso con il p300 di transcriptional coactivator. P300 interagito con Polbeta attraverso i domini distinti e acetilato Polbeta in vitro. Polbeta acetilazione &egrave; stata inoltre osservata in vivo. Lisina 72 del Polbeta &egrave; stato identificato come il principale bersaglio per acetilazione di p300. &Egrave; interessante notare che, Polbeta acetilato ha mostrato una capacit&agrave; gravemente ridotta di partecipare ad un dosaggio BER ricostituito. Questo era a causa di una svalutazione dell&#39;attivit&agrave; dRP-liasi di Polbeta. Acetilazione del Polbeta cos&igrave; agisce come un meccanismo di regolamentazione intranucleari e implica che p300 svolge un ruolo critico di regolamentazione in BER.

Acetilazione regola l&#39;attivit&agrave; di rimozione della fine del DNA polimerasi del DNA beta.

&#x6211;&#x3005; &#x306F; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; (Polbeta), DNA &#x5869;&#x57FA;&#x9664;&#x53BB;&#x4FEE;&#x5FA9; (BER) &#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x5236;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Polbeta in vivo &#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x30B3;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; p300 &#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;p300 &#x306F; Polbeta &#x3068;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;Polbeta in vitro &#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Polbeta &#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B; in vivo &#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3; 72 Polbeta &#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x3057;&#x3066; p300 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316; Polbeta &#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F; BER &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F; Polbeta &#x306E; dRP &#x30EA;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x6E1B;&#x640D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;Polbeta &#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6838;&#x5185;&#x5C01;&#x5165;&#x4F53;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E; p300 BER &#x3067;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; &#x306E; DNA &#x7D42;&#x4E86;&#x30C8;&#x30EA;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x7BA1;&#x7406;&#x673A;&#x5236;&#x6765; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta (Polbeta) &#x86CB;&#x767D;&#x53C2;&#x4E0E; DNA &#x57FA;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x590D; (BER)&#x3002;Polbeta colocalized &#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5171;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x56E0;&#x5B50; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x3002;300 &#x82AF;&#x7247;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x57DF;&#x4E0E; Polbeta &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x4E59;&#x9170;&#x5316; Polbeta &#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;Polbeta &#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x6709;&#x4EBA;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;300 &#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;Polbeta &#x8D56;&#x6C28;&#x9178; 72 &#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x7684; Polbeta &#x8868;&#x660E;&#x53C2;&#x4E0E;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684; BER &#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x4E25;&#x91CD;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A; Polbeta dRP &#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x635F;&#x5BB3;&#x3002;Polbeta &#x7684;&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x4ECE;&#x800C;&#x5145;&#x5F53;&#x6838;&#x5185;&#x5305;&#x6DB5;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5E76;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x8FD9; 300 &#x82AF;&#x7247;&#x5728; BER &#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x76D1;&#x7BA1;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x4E59;&#x9170;&#x5316;&#x8C03;&#x8282; DNA &#x7AEF;&#x4FEE;&#x6574;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta &#x7248;&#x3002;

We describe a novel regulatory mechanism for DNA polymerase beta (Polbeta), a protein involved in DNA base excision repair (BER). Polbeta colocalized in vivo and formed a complex with the transcriptional coactivator p300. p300 interacted with Polbeta through distinct domains and acetylated Polbeta in vitro. Polbeta acetylation was furthermore observed in vivo. Lysine 72 of Polbeta was identified as the main target for acetylation by p300. Interestingly, acetylated Polbeta showed a severely reduced ability to participate in a reconstituted BER assay. This was due to an impairment of the dRP-lyase activity of Polbeta. Acetylation of Polbeta thus acts as an intranuclear regulatory mechanism and implies that p300 plays a critical regulatory role in BER.

Acetylation regulates the DNA end-trimming activity of DNA polymerase beta.

Les auteurs d&eacute;crivent un nouveau m&eacute;canisme de r&eacute;gulation pour l&#39;ADN polym&eacute;rase beta (Polbeta), une prot&eacute;ine impliqu&eacute;e dans la r&eacute;paration de l&#39;ADN excision de base (BER). Polbeta &eacute;pididymaire in vivo et forment un complexe avec le p300 co-activateur transcriptionnel. P300 interagissait avec Polbeta par le biais de domaines distincts et ac&eacute;tyl&eacute;s Polbeta in vitro. En outre, ac&eacute;tylation de Polbeta a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e in vivo. 72 La lysine de Polbeta a &eacute;t&eacute; identifi&eacute;e comme la principale cible de l&#39;ac&eacute;tylation par p300. Fait int&eacute;ressant, Polbeta ac&eacute;tyl&eacute; montre une capacit&eacute; forte baisse &agrave; participer &agrave; un essai BER reconstitu&eacute;. Cela &eacute;tait d&ucirc; &agrave; une alt&eacute;ration de l&#39;activit&eacute; de dRP-lyase de Polbeta. L&#39;ac&eacute;tylation du Polbeta donc agit comme un m&eacute;canisme de r&eacute;glementation intranucl&eacute;aire et implique que p300 joue un r&ocirc;le de r&eacute;glementation critique dans BER.

Ac&eacute;tylation r&eacute;gule l&#39;activit&eacute; de suppression de la fin de l&#39;ADN de l&#39;ADN polym&eacute;rase b&ecirc;ta.

Acetylierung regelt die DNA-Ende-Trimmen der DNA-Polymerase beta.

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0; (Polbeta), DNA &#xAE30;&#xBCF8; &#xC808;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xAD6C; (BER)&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Polbeta colocalized in vivo &#xBC0F; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; transcriptional coactivator p300 &#xD615;&#xC131;. p300 &#xACE0;&#xC720; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; Polbeta&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xCCB4; &#xC678; Polbeta acetylated. Polbeta acetylation &#xB610;&#xD55C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Lysine 72 Polbeta&#xC758; p300&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; acetylation&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB410;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, acetylated Polbeta &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131;&#xB41C; BER &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC2EC;&#xAC01; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; Polbeta&#xC758; dRP lyase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC7A5;&#xC560; &#xB54C;&#xBB38;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; Polbeta&#xC758; acetylation &#xC5ED;&#xD560; intranuclear &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; p300 BER&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB2F4;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xC758;&#xBBF8;.

Acetylation&#xC740; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; DNA &#xC5D4;&#xB4DC; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xBC0D; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xADDC;&#xC81C;.

Describimos un nuevo mecanismo regulatorio para DNA polimerasa beta (Polbeta), una prote&iacute;na implicada en la reparaci&oacute;n de la base de la supresi&oacute;n del ADN (BER). Polbeta colocalized in vivo y forma un complejo con el p300 coactivador transcripcional. P300 interactu&oacute; con Polbeta a trav&eacute;s de distintos dominios y hab&iacute;a acetilado Polbeta in vitro. Polbeta acetilaci&oacute;n adem&aacute;s observ&oacute; en vivo. Lisina 72 de Polbeta fue identificado como el principal objetivo de acetilaci&oacute;n por p300. Interesante, Polbeta acetilado demostr&oacute; una capacidad seriamente reducida a participar en un ensayo BER reconstituido. Esto fue debido a un deterioro de la actividad de la dRP-liasa de Polbeta. Acetilaci&oacute;n de Polbeta as&iacute; act&uacute;a como un mecanismo de regulaci&oacute;n intranuclear e implica que P300 desempe&ntilde;a un papel regulador cr&iacute;tico en BER.

Acetilaci&oacute;n regula la actividad de ajuste del extremo de la DNA de la DNA polimerasa beta.

&#x5728;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x68C0;&#x67E5;&#x7AD9;&#x3002;&#x8FD9;&#x5C31;&#x8981;&#x6C42; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x5982; Rad &#x5BB6;&#x65CF;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E09;&#x79CD;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x86CB;&#x767D; Rad9&#x3001; Rad1 &#x548C; Hus1 &#x5F62;&#x6210;&#x590D;&#x6742;&#x7684; heterotrimeric &#xFF08;&#x79F0;&#x4E3A; 9-1-1 &#x590D;&#x6742;&#xFF09;&#xFF0C;&#x62DB;&#x8058;&#x5230; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x3002;DNA &#x635F;&#x4F24;&#x4E5F;&#x89E6;&#x53D1;&#x75C5;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x5728; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x62DB;&#x52DF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;9-1-1 &#x590D;&#x6742;&#x7269;&#x7406;&#x4E0A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0E; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; &beta; &#x4F53;&#x5916;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x6CDB;&#x51FD;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;9-1-1 &#x590D;&#x6742;&#x4E86;&#x5BF9; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; &beta; &#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;9-1-1 &#x5B58;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x65E2;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; lambda&#x3001; X &#x5BB6;&#x65CF; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#xFF0C;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x5230;&#x4E24;&#x4E2A;&#x590D;&#x5236; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; &alpha; &#x548C;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x3002;Dna &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta &#x523A;&#x6FC0;&#x9020;&#x6210;&#x5176;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x5E95;&#x6F06;-&#x6A21;&#x677F;&#x548C; 9-1-1 &#x4E92;&#x52A8;&#x589E;&#x52A0;&#x590D;&#x6742;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684; deoxyribonucleotides misincorporation &#x7531; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta &#x7248;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;9-1-1 &#x590D;&#x6742;&#x589E;&#x5F3A; DNA &#x94A2;&#x7EDE;&#x7EBF;&#x4F4D;&#x79FB;&#x5408;&#x6210;&#x7684; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta 1 &#x7684; nt &#x5DEE;&#x8DDD; DNA &#x886C;&#x5E95;&#x4E0A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x63D0;&#x9AD8;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#xFF0C;9-1-1 &#x590D;&#x6742;&#x53EF;&#x80FD;&#x5438;&#x5F15;&#x5230; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x8FDE;&#x63A5;&#x76F4;&#x63A5;&#x68C0;&#x67E5;&#x7AD9;&#x548C; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x7684; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta &#x7248;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7C7B; Rad9/Rad1/Hus1 &#x635F;&#x574F;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x5939; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x52A0;&#x5176; DNA &#x5E95;&#x7269;&#x5229;&#x7528;&#x6548;&#x7387;&#xFF1A; &#x5F71;&#x54CD; DNA &#x7684;&#x4FEE;&#x590D;&#x3002;

In eukaryotic cells, checkpoints are activated in response to DNA damage. This requires the action of DNA damage sensors such as the Rad family proteins. The three human proteins Rad9, Rad1 and Hus1 form a heterotrimeric complex (called the 9-1-1 complex) that is recruited onto DNA upon damage. DNA damage also triggers the recruitment of DNA repair proteins at the lesion, including specialized DNA polymerases. In this work, we showed that the 9-1-1 complex can physically interact with DNA polymerase beta in vitro. Functional analysis revealed that the 9-1-1 complex had a stimulatory effect on DNA polymerase beta activity. However, the presence of 9-1-1 complex neither affected DNA polymerase lambda, another X family DNA polymerase, nor the two replicative DNA polymerases alpha and delta. DNA polymerase beta stimulation resulted from an increase in its affinity for the primer-template and the interaction with the 9-1-1 complex stimulated deoxyribonucleotides misincorporation by DNA polymerase beta. In addition, the 9-1-1 complex enhanced DNA strand displacement synthesis by DNA polymerase beta on a 1 nt gap DNA substrate. Our data raise the possibility that the 9-1-1 complex might attract DNA polymerase beta to DNA damage sites, thus connecting directly checkpoints and DNA repair.

The human Rad9/Rad1/Hus1 damage sensor clamp interacts with DNA polymerase beta and increases its DNA substrate utilisation efficiency: implications for DNA repair.

Dans les cellules eucaryotes, les points de contr&ocirc;le sont activ&eacute;s en r&eacute;ponse aux dommages &agrave; l&#39;ADN. Cela n&eacute;cessite l&#39;action de capteurs de dommages de l&#39;ADN telles que les prot&eacute;ines de la famille Rad. Les trois prot&eacute;ines humaines Rad9, Rad1 et Hus1 forment un complexe h&eacute;t&eacute;rotrim&eacute;rique (appel&eacute; le 9-1-1 complexe) qui est recrut&eacute; dans l&#39;ADN, dommage. Dommages &agrave; l&#39;ADN d&eacute;clenche &eacute;galement le recrutement des prot&eacute;ines de r&eacute;paration de l&#39;ADN sur la l&eacute;sion, y compris des ADN polym&eacute;rases. Dans ce travail, nous avons d&eacute;montr&eacute; que le 9-1-1 complexe peut interagir physiquement avec la b&ecirc;ta de la polym&eacute;rase de l&#39;ADN in vitro. Analyse fonctionnelle a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que le 9-1-1 complexe a un effet stimulant sur l&#39;activit&eacute; b&ecirc;ta de l&#39;ADN polym&eacute;rase. Toutefois, la pr&eacute;sence de 9-1-1 complexe ni touch&eacute;s lambda de l&#39;ADN polym&eacute;rase, autre X famille ADN polym&eacute;rase, ni les deux r&eacute;plicative ADN polym&eacute;rases alpha et delta. Stimulation de l&#39;ADN polym&eacute;rase b&ecirc;ta r&eacute;sulte d&#39;une augmentation de son affinit&eacute; pour le mod&egrave;le de l&#39;appr&ecirc;t et l&#39;interaction avec le 9-1-1 misincorporation complexe de d&eacute;soxyribonucl&eacute;otides stimul&eacute;e par l&#39;ADN polym&eacute;rase b&ecirc;ta. En outre, le 9-1-1 complexe agr&eacute;ment&eacute; synth&egrave;se de d&eacute;placement de brin de l&#39;ADN polym&eacute;rase ADN b&ecirc;ta sur un substrat de l&#39;ADN de gap nt 1. Nos r&eacute;sultats soul&egrave;vent la possibilit&eacute; que le 9-1-1 complexe pourrait attirer l&#39;ADN polym&eacute;rase b&ecirc;ta aux sites de dommages de l&#39;ADN, reliant ainsi directement la r&eacute;parent de l&#39;ADN et les points de contr&ocirc;le.

La pince de capteur de dommages Rad9/Rad1/Hus1 humaine interagit avec l&#39;ADN polym&eacute;rase b&ecirc;ta et augmente l&#39;efficacit&eacute; de l&#39;utilisation de substrat ADN : implications pour l&#39;ADN r&eacute;parent.

Der menschliche Rad9/Rad1/Hus1 Schaden Sensorklemme interagiert mit DNA-Polymerase beta und erh&#xF6;ht seine DNA-Substrat Nutzungseffizienz: Implikationen f&#xFC;r die DNA-Reparatur.

Nelle cellule eucariotiche, checkpoint vengono attivati in risposta a danni del DNA. Ci&ograve; richiede l&#39;azione dei sensori di danni del DNA come le proteine famiglie Rad. Le tre proteine umane Rad9, Rad1 e Hus1 formano un complesso eterotrimerica (chiamato il 9-1-1 complesso) che viene reclutato sul DNA su danni. Il danno al DNA attiva anche l&#39;assunzione di proteine di riparazione del DNA presso la lesione, tra cui le polimerasi del DNA specializzate. In questo lavoro, abbiamo dimostrato che il 9-1-1 complesso pu&ograve; interagire fisicamente con la polimerasi del DNA beta in vitro. Analisi funzionale hanno rivelato che il 9-1-1 complesso aveva un effetto stimolante sull&#39;attivit&agrave; di polimerasi del DNA beta. Tuttavia, la presenza di 9-1-1 complesso n&eacute; colpiti DNA polimerasi lambda, un altro X famiglia della polimerasi del DNA, n&eacute; i due replicativa alfa polimerasi del DNA e delta. Stimolazione beta della polimerasi del DNA provocato da un aumento della sua affinit&agrave; per il modello di primer e l&#39;interazione con il 9-1-1 misincorporation complesso deossiribonucleotidi stimolata dalla polimerasi del DNA beta. In aggiunta, il 9-1-1 complesso migliorata sintesi del DNA strand spostamento dalla polimerasi del DNA beta su un substrato di DNA di gap nt 1. I nostri dati sollevare la possibilit&agrave; che il 9-1-1 complesso potrebbe attirare la polimerasi del DNA beta a siti di danni del DNA, quindi collegare direttamente i checkpoint e DNA di riparazione.

L&#39;umana Rad9/Rad1/Hus1 danni sensore pinza interagisce con la polimerasi del DNA beta e aumenta l&#39;efficienza di utilizzazione del substrato del DNA: implicazioni per il DNA di riparazione.

&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;DNA &#x640D;&#x50B7;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC; Rad &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;3 &#x3064;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; Rad9&#x3001;Rad1&#x3001;Hus1 &#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x4E09;&#x91CF;&#x4F53;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; (9-1-1 &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;) &#x304C;&#x640D;&#x50B7;&#x6642;&#x306B;&#x4E0A;&#x306B; DNA &#x3092;&#x52DF;&#x96C6;&#x3067;&#x3059;&#x3002;DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306F; DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7279;&#x7570;&#x7684; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x75C5;&#x5909;&#x3067;&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;&#x3082;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; 9-1-1 &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x751F;&#x4F53;&#x5916;&#x306E; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306B;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B; 9-1-1 &#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x4FC3;&#x9032;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;9-1-1 &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x3082;&#x5F71;&#x97FF; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30E9;&#x30E0;&#x30C0;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; X &#x3082; 2 &#x3064;&#x8907;&#x88FD; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3068;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x3002;Dna &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; &#x523A;&#x6FC0;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x305D;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC; &#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 9-1-1 &#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x304B;&#x3089;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x523A;&#x6FC0; deoxyribonucleotides misincorporation DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;9-1-1 &#x8907;&#x5408;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F; DNA &#x9396;&#x5909;&#x4F4D;&#x5408;&#x6210; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; 1 nt &#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7; DNA &#x57FA;&#x677F;&#x4E0A;&#x3067;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068; 9 1 1 &#x8907;&#x96D1;&#x306A; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; &#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068; DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x76F4;&#x63A5;&#x3053;&#x3046;&#x3057;&#x3066;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x5F15;&#x304D;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; Rad9/Rad1/Hus1 &#x640D;&#x50B7;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC; &#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; &#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E; DNA &#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x5229;&#x7528;&#x52B9;&#x7387;&#x304C;&#x5411;&#x4E0A;: DNA &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x542B;&#x610F;&#x3092;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC810; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xC13C;&#xC11C; Rad &#xAC00;&#xC871; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB4F1;&#xC758; &#xC870;&#xCE58;&#xAC00; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Rad9, Rad1 &#xBC0F; Hus1 &#xD615;&#xC131; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; heterotrimeric (9-1-1 &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;)&#xB294; DNA&#xC5D0; &#xC190;&#xC0C1; &#xC2DC; &#xBAA8;&#xC9D1;. DNA &#xC190;&#xC0C1; DNA &#xBCF5;&#xAD6C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC804;&#xBB38;&#xB41C; DNA &#xD3F4;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xCC44;&#xC6A9;&#xC744; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 9-1-1 &#xBCF4;&#xC5EC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; 9-1-1 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xB85C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCCE4;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, 9-1-1&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xB78C;&#xB2E4; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;, &#xB2E4;&#xB978; &#xC81C;&#xD488;&#xAD70; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB3C4; 2 &#xC77C;&#xCC28; DNA &#xD3F4; &#xC54C;&#xD30C;&#xC640; &#xB378;&#xD0C0; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC5B4;&#xB290; &#xCABD;&#xB3C4; &#xC544;&#xB2C8; &#xC601;&#xD5A5;. Dna &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC790;&#xADF9; &#xB1CC;&#xAD00; &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF;&#xACFC; 9-1-1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC790;&#xADF9;&#xB41C; deoxyribonucleotides misincorporation. &#xB610;&#xD55C;, 9-1-1&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0; 1 nt &#xAC2D; DNA &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; DNA &#xAC00;&#xB2E5; &#xBCC0;&#xC704; &#xD569;&#xC131; &#xAC15;&#xD654;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; 9-1-1 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC810; &#xBC0F; DNA &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC9C1;&#xC811; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xC720;&#xCE58; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04; Rad9/Rad1/Hus1 &#xC190;&#xC0C1; &#xC13C;&#xC11C; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; DNA &#xAE30;&#xD310; &#xD65C;&#xC6A9;&#xB3C4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; &#xC99D;&#xAC00;: DNA&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC758;&#xBBF8;&#xB97C; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En las c&eacute;lulas eucariotas, puestos de control se activan en respuesta al da&ntilde;o del ADN. Esto requiere la acci&oacute;n de sensores de da&ntilde;o del ADN como las prote&iacute;nas familias Rad. Las tres prote&iacute;nas humanas Rad1, Rad9 y Hus1 forman un complejo heterotrim&eacute;rico (llamado el 9-1-1 complejo) que es reclutado en ADN sobre da&ntilde;os. Da&ntilde;os en el ADN provoca tambi&eacute;n el reclutamiento de prote&iacute;nas de reparaci&oacute;n del ADN en la lesi&oacute;n, incluyendo especializados DNA polimerasas. En este trabajo, se mostr&oacute; que el 9-1-1 complejo puede interactuar f&iacute;sicamente con ADN polimerasa beta in vitro. An&aacute;lisis funcional revel&oacute; que el 9-1-1 complejo ten&iacute;a un efecto estimulante sobre la actividad de DNA polimerasa beta. Sin embargo, la presencia de 9-1-1 complejo ni afectados ADN polimerasa lambda, otra familia ADN polimerasa, ni los dos replicativa ADN polimerasas alfa y delta. Estimulaci&oacute;n de ADN polimerasa beta result&oacute; de un aumento en su afinidad por la plantilla de la cartilla y la interacci&oacute;n con el 1-1-9 misincorporation complejo desoxirribonucle&oacute;tidos estimulada por la DNA polimerasa beta. Adem&aacute;s, el 9-1-1 complejo mejorado s&iacute;ntesis de desplazamiento de filamento de ADN por la ADN polimerasa beta sobre un sustrato de ADN 1 nt brecha. Nuestros datos mencionan la posibilidad que el 9-1-1 complejo podr&iacute;a atraer la DNA polimerasa beta para sitios de da&ntilde;o del ADN, conectando as&iacute; directamente puestos de control y ADN de reparaci&oacute;n.

La abrazadera de sensor de da&ntilde;o de Rad1/Rad9/Hus1 humana interact&uacute;a con la DNA polimerasa beta y aumenta la eficiencia de utilizaci&oacute;n de sustrato de ADN: implicaciones para la DNA reparaci&oacute;n.

&#x809D;&#x8102;&#x9176; (HL) &#x8868;&#x793A;&#x809D;&#x8102;&#x89E3;&#x9176;&#xFF0C;hydrolyzes &#x7518;&#x6CB9;&#x4E09;&#x916F;&#x548C;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x4E2D;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x901A;&#x8FC7;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6574;&#x4E2A;&#x7C92;&#x5B50;&#x548C;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x5438;&#x6536;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x4EA4;&#x8D27;&#x3002;HL &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E5F;&#x4F1A;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5229;&#x7528;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x5408;&#x6210;&#x7CD6;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x5BF9;&#x5782;&#x4F53;&#x4FC3;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5F88;&#x53EF;&#x80FD;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A; HL &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x4FBF;&#x4E8E;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x7684;&#x5916;&#x6E90;&#x6027;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x7CD6;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x7684;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x57FA;&#x7840;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x8BBE;&#x8FD9; HL &#x7F3A;&#xFF0C;&#x4F1A;&#x524A;&#x5F31;&#x5BF9;&#x4FC3;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x7CD6;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x5916;&#x6E90;&#x6027;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x4E5F;&#x4ECE;&#x4F4E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8102;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53; (LDLR) &#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x8BBE;&#x8FD9; LDLR &#x7F3A;&#xFF0C;&#x4F1A;&#x524A;&#x5F31;&#x5BF9;&#x4FC3;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5BF9;&#x516B;&#x4E2A;&#x6BCF;&#x5929;&#x4FC3;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5728; HL &#x7F3A;&#x7684;&#x76AE;&#x8D28;&#x916E;&#x53CD;&#x5E94; (hl-/-)&#x3001; LDLR &#x7F3A; (Ldlr-/-&#xFF09;&#xFF0C;&#x548C; HL-&#x548C; LDLR-&#x53CC;&#x91CD;&#x4E0D;&#x8DB3; (Ldlr-/-hl-/-) &#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; (WT) &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;2&#x3001; 5 &#x548C; 8 &#x5929;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86;&#x8840;&#x6D46;&#x76AE;&#x8D28;&#x916E;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x8840;&#x6D46;&#x76AE;&#x8D28;&#x916E;&#x6C34;&#x5E73;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5206;&#x6790;&#x7531; Kruskal &#x74E6;&#x5229;&#x65AF;&#x5355;&#x5411; ANOVA &#x8B66;&#x8854;&#x548C;&#x6210;&#x5BF9;&#x7684;&#x9093;&#x83B2;&#x5982;&#x8BAE;&#x5458;&#x7684;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; 5 &#x65E5;&#x548C;&#x6316;&#x7A7A;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x7B2C; 8 &#x5929;&#x8840;&#x6D46;&#x76AE;&#x8D28;&#x916E;&#x6C34;&#x5E73;&#x5728;&#x7B2C; 2 &#x5929;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x8D8B;&#x52BF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x524A;&#x51CF;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;5 &#x5929;&#xFF0C;&#x8840;&#x6D46;&#x76AE;&#x8D28;&#x916E;&#x6C34;&#x5E73;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86; 57&#x3001; 70&#x3001; 73%(&#x6240;&#x6709; P &lt; 0.05) &#x548C; 76 &#x5929; 8 &#x7531; 59 &#x548C; 63%&#xFF08;&#x6240;&#x6709; P &lt; 0.05) &#x4E2D; hl-/-&#xFF0C;Ldlr-/-&#xFF0C;&#x548C; Ldlr-/-hl-/-&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; HL &#x7684;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4E4B;&#x5904;&#xFF0C;&#x50CF; LDLR &#x7F3A;&#x8BF4;&#x7684;&#x60C5;&#x8BDD;&#x6162;&#x6027;&#x4FC3;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x523A;&#x6FC0;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x751F;&#x7406;&#x5B66; HL &#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

&#x51CF;&#x6BD2;&#x809D;&#x8102;&#x9176;&#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6162;&#x6027;&#x4FC3;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x76AE;&#x8D28;&#x6FC0;&#x7D20;&#x523A;&#x6FC0;&#x76AE;&#x8D28;&#x916E;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF1A; &#x5728;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x4E2D;&#x809D;&#x8102;&#x9176;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

Hepatic lipase (HL), a liver-expressed lipolytic enzyme, hydrolyzes triglycerides and phospholipids in lipoproteins and promotes cholesterol delivery through receptor-mediated whole particle and selective cholesterol uptake. HL activity also occurs in the adrenal glands, which utilize lipoprotein cholesterol to synthesize glucocorticoids in response to pituitary ACTH. It is likely that the role of adrenal HL is to facilitate delivery of exogenous cholesterol for glucocorticoid synthesis. On this basis, we hypothesized that HL deficiency would blunt the glucocorticoid response to ACTH. Furthermore, because exogenous cholesterol also is derived from the LDL receptor (LDLR) pathway, we hypothesized that LDLR deficiency would blunt the response to ACTH. To test these hypotheses, we compared the corticosterone response to eight daily ACTH injections in HL-deficient (hl-/-), LDLR-deficient (Ldlr-/-), and HL- and LDLR-doubly deficient (Ldlr-/- hl-/-) mice with that in wild-type (WT) mice. Plasma corticosterone levels were measured on days 2, 5, and 8. Differences in plasma corticosterone levels between genotypes were analyzed by Kruskal-Wallis one-way ANOVA on ranks and pairwise multiple comparisons by Dunn's test. Our results demonstrate a trend toward reductions in plasma corticosterone levels on day 2 and significant reductions on day 5 and day 8 in the knockout models. Thus, on day 5, plasma corticosterone levels were reduced by 57, 70, and 73% (all P < 0.05) and on day 8 by 76, 59, and 63% (all P < 0.05) in hl-/-, Ldlr-/-, and Ldlr-/- hl-/- mice, respectively. These results demonstrate that HL deficiency, like LDLR deficiency, blunts the adrenal response to chronic ACTH stimulation and suggest a novel role for HL in adrenal physiology.

Attenuated corticosterone response to chronic ACTH stimulation in hepatic lipase-deficient mice: evidence for a role for hepatic lipase in adrenal physiology.

Lipase h&eacute;patique (HL), une enzyme lipolytique foie-exprim&eacute;, hydrolyse les triglyc&eacute;rides et les phospholipides dans les lipoprot&eacute;ines et favorise la prestation de cholest&eacute;rol au moyen de la particule enti&egrave;re m&eacute;di&eacute;e par les r&eacute;cepteurs et l&#39;absorption s&eacute;lective de cholest&eacute;rol. Activit&eacute; HL se produit &eacute;galement dans les glandes surr&eacute;nales, qui utilisent la lipoprot&eacute;ine-cholest&eacute;rol pour synth&eacute;tiser des glucocortico&iuml;des en r&eacute;ponse &agrave; hypophysaire ACTH. Il est probable que le r&ocirc;le des surr&eacute;nal HL est de faciliter la livraison de cholest&eacute;rol exog&egrave;ne pour la synth&egrave;se des glucocortico&iuml;des. Sur cette base, nous avons &eacute;mis l&#39;hypoth&egrave;se que HL carence s&#39;&eacute;mousser la r&eacute;ponse de glucocortico&iuml;des &agrave; l&#39;ACTH. En outre, parce que le cholest&eacute;rol exog&egrave;ne provient aussi de la voie du r&eacute;cepteur (LDLR) LDL, nous avons suppos&eacute; que LDLR carence s&#39;&eacute;mousser la r&eacute;ponse &agrave; l&#39;ACTH. Pour tester ces hypoth&egrave;ses, nous avons compar&eacute; la r&eacute;ponse de corticost&eacute;rone &agrave; huit injections quotidiennes d&#39;ACTH en HL-deficient (hl-/-), LDLR d&eacute;ficiente (Ldlr-/-) et HL - et LDLR-doublement d&eacute;ficient (Ldlr-/ - hl-/-) souris que chez les souris de type sauvage (WT). Taux de corticost&eacute;rone plasmatique ont &eacute;t&eacute; mesur&eacute;s sur 2, 5 et 8 jours. Diff&eacute;rences dans les taux de corticost&eacute;rone plasmatique entre g&eacute;notypes ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;s par ANOVA &agrave; Kruskal-Wallis sur les rangs et pairwise comparaisons multiples par test de Dunn. Nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent une tendance &agrave; la r&eacute;duction des taux de corticost&eacute;rone plasmatique au jour 2 et des r&eacute;ductions importantes le jour 5 et jour 8 dans les mod&egrave;les knock-out. Ainsi, le jour 5, taux de corticost&eacute;rone plasmatique ont &eacute;t&eacute; r&eacute;duits de 57, 70 et 73 % (tous les P 0,05 &lt;) et sur 8 jours par 76, 59 et 63 % (tous P 0,05 &lt;) en hl-/-, Ldlr-/-et Ldlr souris-/-hl-/-, respectivement. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent que d&eacute;ficit de HL, comme carence LDLR, &eacute;mousse la r&eacute;ponse surr&eacute;nalienne chronique stimulation de l&#39;ACTH et sugg&egrave;rent un r&ocirc;le nouveau pour HL en physiologie de la surr&eacute;nale.

A att&eacute;nu&eacute; corticost&eacute;rone r&eacute;ponse &agrave; une stimulation ACTH chronique chez les souris d&eacute;ficientes en lipase h&eacute;patiques : &eacute;vidence pour un r&ocirc;le pour la lipase h&eacute;patique en physiologie de la surr&eacute;nale.

Hepatische Lipase (HL), eine Leber ausgedr&uuml;ckt lipolytischen Enzym, Spalten, Triglyceride und Phospholipide in Lipoproteinen und f&ouml;rdert Cholesterin Lieferung durch Rezeptor-vermittelte ganze Partikel und selektiven Cholesterin-Aufnahme. HL-Aktivit&auml;t tritt auch in der Nebenniere, die Lipoprotein-Cholesterin um Glukokortikoide als Reaktion auf die Hypophyse ACTH synthetisieren zu nutzen. Es ist wahrscheinlich, dass die Rolle der Nebennieren HL zur Vereinfachung der exogene Cholesterin f&uuml;r Glukokortikoid-Synthese Mittel ist. Auf dieser Grundlage wir die Hypothese, dass HL Mangel w&uuml;rde die Glukokortikoid-Reaktion auf ACTH stumpf. Dar&uuml;ber hinaus, da exogene Cholesterin auch von der LDL-Rezeptor (LDLR)-Pathway abgeleitet ist, wir Hypothese, dass LDLR Mangel w&uuml;rde die Reaktion auf ACTH stumpf. Um diese Hypothesen zu testen, verglichen wir die Corticosteron-Reaktion auf acht t&auml;glichen ACTH-Injektionen bei HL-Defizienz (hl-/-), LDLR-Defizienz (Ldlr-/-), und HL - und LDLR-doppelt mangelhaft (Ldlr-/ - hl-/-) M&auml;use mit dem Wildtyp (WT) M&auml;usen. Corticosteron-Plasmaspiegel wurden an den Tagen 2, 5 und 8 gemessen. Unterschiede zwischen Genotypen in Plasma Corticosteron von Kruskal-Wallis ANOVA unidirektionale, R&auml;nge und paarweise analysiert wurden mehrere Vergleiche von Dunn&#39;s Test. Unsere Ergebnisse zeigen einen Trend zur Reduzierung Corticosteron-Plasmaspiegel an Tag 2 und signifikante Reduktion auf 5 oder 8 Tage in die k.o.-Modelle. So wurden am Tag 5, Corticosteron-Plasmaspiegel von 57 70 und 73 % reduziert (alle P &lt; 0,05) und am Tag 8 von 76, 59 und 63 % (alle P &lt; 0,05) in hl-/-, Ldlr-/-, und Ldlr-/-hl-/-M&auml;use, beziehungsweise. Diese Ergebnisse zeigen, dass HL-Mangel, wie LDLR-Mangel, stumpft die Nebenniere Reaktion auf chronische ACTH-Stimulation und weisen auf eine neuartige Rolle f&uuml;r HL Adrenale Physiologie.

Corticosteron Reaktion auf chronische ACTH-Stimulation hepatische Lipase-defizienten M&auml;usen abgeschw&auml;cht: Beweise f&uuml;r eine Rolle f&uuml;r hepatische Lipase Adrenale Physiologie.

Lipasi epatica (HL), un enzima lipolitico fegato-espresso, idrolizza i trigliceridi e fosfolipidi in lipoproteine e promuove la consegna di colesterolo attraverso la particella intera del recettore-mediata e assorbimento selettivo di colesterolo. Attivit&agrave; HL si verifica anche nelle ghiandole surrenali, che utilizzano il colesterolo lipoproteine per sintetizzare i glucocorticoidi in risposta all&#39;ACTH ipofisi. &Egrave; probabile che il ruolo del surrene HL &egrave; per facilitare la consegna del colesterolo esogeno per la sintesi dei glucocorticoidi. Su questa base, abbiamo ipotizzato che HL deficit sarebbe smussare la risposta ai glucocorticoidi ACTH. Inoltre, poich&eacute; il colesterolo esogeno &egrave; anche derivato dal pathway di LDL receptor (LDLR), abbiamo ipotizzato che LDLR deficit sarebbe smussare la risposta all&#39;ACTH. Per verificare queste ipotesi, abbiamo confrontato la risposta di corticosterone a otto iniezioni quotidiane di ACTH in HL-carenti (hl-/-), deficit di LDLR (Ldlr-/-) e HL - e LDLR-doppiamente carente (Ldlr-/ - hl-/-) topi con che nei topi di wild-type (WT). Nei giorni 2, 5 e 8 sono stati misurati livelli plasmatici di corticosterone. Sono state analizzate le differenze nei livelli plasmatici di corticosterone tra genotipi di Kruskal-Wallis One-way ANOVA su ranghi e pairwise i confronti multipli tramite test di Dunn. Il giorno 5 e 8 di giorno nei modelli knockout i nostri risultati dimostrano una tendenza verso la riduzione nei livelli plasmatici di corticosterone giorno 2 e riduzioni significative. Cos&igrave;, il giorno 5, livelli plasmatici di corticosterone sono state ridotte da 57, 70 e 73% (tutti P &lt; 0,05) e il giorno 8 di 76, 59 e 63% (tutti P 0.05 &lt;) in hl-/-, Ldlr-/-e Ldlr-/-hl-/-mice, rispettivamente. Questi risultati dimostrano che il deficit di HL, come LDLR, deficit ottunde la risposta surrenalica cronica stimolazione di ACTH e suggeriscono un ruolo romanzo per HL in fisiologia surrenalico.

Attenuata risposta corticosterone a stimolazione ACTH cronica nei topi di deficit di lipasi epatici: prova per un ruolo per la lipasi epatica in fisiologia surrenalico.

&#x809D;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC; (HL) &#x809D;&#x81D3;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x8102;&#x80AA;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30EA;&#x30C9;&#x3001;&#x30EA;&#x30DD;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8102;&#x8CEA;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3057;&#x3066;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x7C92;&#x5B50;&#x3068;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x5438;&#x53CE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x914D;&#x4FE1;&#x3092;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HL &#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x526F;&#x814E;&#x3001;&#x4E0B;&#x5782;&#x4F53; ACTH &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30A4;&#x30C9;&#x5408;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x30EA;&#x30DD;&#x86CB;&#x767D;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x3082;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x526F;&#x814E; HL &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30A4;&#x30C9;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304D;&#x3001;&#x305D;&#x306E; HL &#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x7ACB;&#x3066;&#x305F;&#x6B20;&#x4E4F; ACTH &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30A4;&#x30C9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x920D;&#x3089;&#x305B;&#x308B;&#x3068;&#x601D;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; LDL &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (LDLR) &#x7D4C;&#x8DEF;&#x304B;&#x3089;&#x3082;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x305D;&#x306E; LDLR &#x4EEE;&#x8AAC;&#x6B20;&#x4E4F; acth &#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x920D;&#x3089;&#x305B;&#x308B;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;8 &#x3064;&#x306E;&#x6BCE;&#x65E5;&#x306E; ACTH &#x6CE8;&#x5C04; HL &#x6B20;&#x4E4F;&#x306E;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3; &#x30EC;&#x30B9;&#x30DD;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066; (hl-/-)&#x3001;LDLR &#x6B20;&#x640D; (Ldlr-/-)&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; HL- &#x3068; LDLR-&#x4E8C;&#x91CD;&#x6B20;&#x640D; (Ldlr-/- hl-/-) &#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; &#xFF08;WT&#xFF09; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3002;&#x8840;&#x6F3F;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F; 2&#x3001;5&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 8 &#x306E;&#x65E5;&#x306B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x9593;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x3068;&#x30DA;&#x30A2;&#x30EF;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x6563;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EB; &#x30FB; &#x30A6;&#x30A9;&#x30EA;&#x30B9;&#x4E00;&#x65B9;&#x5411;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x30C9;&#x30F3;&#x30BA;&#x8A66;&#x9A13;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; 5 &#x65E5;&#x76EE;&#x3068; 8 &#x65E5;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067; 2 &#x65E5;&#x76EE;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x524A;&#x6E1B;&#x50BE;&#x5411;&#x3068;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x524A;&#x6E1B;&#x3092;&#x30C7;&#x30E2;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;5 &#x65E5;&#x76EE;&#x306B;&#x8840;&#x6F3F;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6; 57&#x3001;70&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 73% &#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F; (&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; P &lt; 0.05) &#x3068;&#x304C; 76&#x3001;59&#x3001;63 &#xFF05; &#x3068; 8 &#x65E5;&#x76EE; (&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; P &lt; 0.05) &#x3067; hl-/-&#x3001;Ldlr-/-&#x3068; Ldlr hl-/-&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; HL &#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306F;&#x3001;LDLR &#x306E;&#x6B20;&#x4E4F;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6162;&#x6027;&#x306E; ACTH &#x523A;&#x6FC0;&#x3078;&#x306E;&#x526F;&#x814E;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;&#x920D;&#x304F;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x65B0;&#x898F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x526F;&#x814E;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x306B; H1 &#x306F;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5F31;&#x6BD2;&#x6162;&#x6027;&#x306E; ACTH &#x523A;&#x6FC0;&#x809D;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x5FDC;&#x7B54;: &#x809D;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x526F;&#x814E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3002;

&#xAC04;&#xC7A5; lipase (HL) &#xAC04; &#xD45C;&#xD604; lipolytic &#xD6A8;&#xC18C; &#xD2B8;&#xB9AC; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC138;&#xB77C;&#xC774;&#xB4DC;&#xC640; &#xC778;&#xC9C0;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; hydrolyzes &#xBC0F; &#xC804;&#xCCB4; &#xC785;&#xC790; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC; &#xBC0F; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864; &#xB0A9;&#xD488;&#xC744; &#xCD94;&#xC9C4; &#xD558; &#xACE0;. HL &#xD65C;&#xB3D9; &#xB2E8;&#xBC31; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864; &#xD569;&#xC131; &#xB1CC; &#xD558; &#xC218; &#xCCB4; ACTH&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBD80; &#xC2E0; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD80; &#xC2E0; HL&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xBC30;&#xB2EC; glucocorticoid &#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC678; &#xC778; &#xC131; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864;&#xC758; &#xCD09;&#xC9C4;&#xC740; &#xB192;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xCD08;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; HL hypothesized &#xACB0;&#xD54D; glucocorticoid &#xC751;&#xB2F5; ACTH &#xBB34;&#xB518; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, exogenous &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864;&#xB3C4; LDL &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (LDLR) &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; LDLR &#xAC00;&#xC0C1; &#xACB0;&#xD54D; ACTH&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xB454; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC; HL &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xC77C;&#xC77C; ACTH &#xC8FC;&#xC0AC; corticosterone &#xC751;&#xB2F5; &#xBE44;&#xAD50; (hl-/-), LDLR-&#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; (Ldlr-/-), HL-&#xBC0F; LDLR-&#xC774;&#xC911; &#xACB0;&#xD54D; &#xD558; &#xACE0; (Ldlr-/-hl-/-) &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; (WT) &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC640; &#xC950;. 2, 5, 8 &#xC77C;&#xC5D0;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; corticosterone &#xC218;&#xC900;&#xC740; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. Kruskal-&#xC6D4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xB2E8;&#xBC29;&#xD5A5; ANOVA &#xC21C;&#xC704;&#xC640; &#xC30D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; genotypes &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; corticosterone &#xC218;&#xC900; &#xCC28;&#xC774; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; &#xB358;&#xC758; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBE44;&#xAD50;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD558;&#xB8E8; 5 &#xBC0F; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; 8 &#xC77C;&#xC5D0; &#xD558;&#xB8E8;&#xC5D0; 2 &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; corticosterone &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xCD94;&#xC138;&#xC640; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC808;&#xAC10;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, 5 &#xC77C;&#xC5D0; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; corticosterone &#xB808;&#xBCA8; 57, 70, 73%&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; (&#xBAA8;&#xB4E0; P &lt; 0.05)&#xC640; &#xD558;&#xB8E8; 8 76 &#xC5EC; 59, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 63% (&#xBAA8;&#xB4E0; P &lt; 0.05) hl-/-, Ldlr-/-, &#xBC0F; Ldlr-/-hl-/-&#xC0DD;&#xC950;, &#xAC01;&#xAC01;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; LDLR &#xACB0;&#xD54D; &#xAC19;&#xC740; HL &#xACB0;&#xD54D;, &#xB9CC;&#xC131; ACTH &#xC790;&#xADF9; &#xBD80; &#xC2E0; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xBB34;&#xB514;&#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; &#xBD80; &#xC2E0; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; HL&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xC785;&#xC99D;.

&#xAC04;&#xC7A5; lipase &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0; &#xB9CC;&#xC131; ACTH &#xC790;&#xADF9; corticosterone &#xC751;&#xB2F5; &#xAC10;&#xC1E0;: &#xBD80; &#xC2E0; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559; &#xAC04;&#xC7A5; lipase&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;.

Lipasa hep&aacute;tica (HL), una enzima lipol&iacute;tica h&iacute;gado expresados, hidroliza los triglic&eacute;ridos y los fosfol&iacute;pidos de las lipoproteinas y promueve la entrega de colesterol a trav&eacute;s de la part&iacute;cula todo mediada por receptor y la absorci&oacute;n selectiva de colesterol. Actividad HL tambi&eacute;n ocurre en las gl&aacute;ndulas suprarrenales, que utilizan el colesterol de la lipoprote&iacute;na para sintetizar glucocorticoides en respuesta a la ACTH hipofisaria. Es probable que el papel de HL suprarrenal es facilitar la entrega de colesterol ex&oacute;geno para s&iacute;ntesis de glucocorticoides. Sobre esta base, presumimos que HL deficiencia embotado la respuesta de glucocorticoides al ACTH. Adem&aacute;s, como colesterol ex&oacute;geno tambi&eacute;n se deriva de la v&iacute;a de LDL (LDLR) del receptor, presumimos que LDLR deficiencia embotado la respuesta al ACTH. Para probar estas hip&oacute;tesis, comparamos la respuesta de corticosterona a ocho inyecciones diarias de las hormonas ADRENOCORTICOTR&Oacute;FICAS en HL-deficiente (hl-/-), deficiencia de LDLR (Ldlr-/-) y HL - y LDLR-doblemente deficiente (Ldlr-/ - hl-/-) ratones con que en los ratones de tipo salvaje (WT). Se midieron los niveles de corticosterona de plasma en los d&iacute;as 2, 5 y 8. Diferencias en los niveles de corticosterona plasma entre genotipos fueron analizadas por ANOVA unidireccional de Kruskal-Wallis en filas y pairwise comparaciones m&uacute;ltiples por test de Dunn. Nuestros resultados demuestran una tendencia hacia la reducci&oacute;n en los niveles de corticosterona plasma en el d&iacute;a 2 y reducciones significativas en el d&iacute;a 5 y 8 en los modelos de octavos de final. As&iacute;, el d&iacute;a 5, se redujeron los niveles de corticosterona plasma por 57, 70 y 73% (todos los P &lt; 0.05) y en el d&iacute;a 8 por el 76, 59 y 63% (todos los P &lt; 0.05) en hl-/-, Ldlr-/-y Ldlr-/-hl-/-ratones, respectivamente. Estos resultados demuestran que la deficiencia HL, como deficiencia LDLR, mitiga la respuesta suprarrenal al est&iacute;mulo de las hormonas ADRENOCORTICOTR&Oacute;FICAS cr&oacute;nico y sugieren un papel nuevo para HL en fisiolog&iacute;a suprarrenal.

Aten&uacute;a la respuesta de corticosterona al est&iacute;mulo de las hormonas ADRENOCORTICOTR&Oacute;FICAS cr&oacute;nico en ratones de deficiencia de lipasa hep&aacute;ticas: evidencia de un papel de lipasa hep&aacute;tica en fisiolog&iacute;a suprarrenal.

&#x6539;&#x5EFA;&#x4E2D; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x4E0E;&#x60A3;&#x764C;&#x51E0;&#x7387;&#x9AD8;&#x3002;DNA &#x57FA;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x590D; (BER) &#x66F4;&#x6B63;&#x635F;&#x574F;&#x7684;&#x57FA;&#x5730;&#x3001; apurinic &#x7F51;&#x7AD9;&#x548C;&#x5355;&#x94FE; DNA &#x65AD;&#x88C2;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x88AB;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta (Pol beta) &#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x5236;&#x3002;Pol beta &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; 6 (PRMT6)&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x7532;&#x57FA;&#x5316; Pol beta PRMT6 &#x7684;&#x5F3A;&#x70C8;&#x523A;&#x6FC0; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x63D0;&#x9AD8; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C; processivity&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5355;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x63D2;&#x5165;&#x548C; dRP &#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0D;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#xFF0C;R83 &#x548C; R152&#xFF0C;&#x88AB;&#x5217;&#x4E3A; Pol beta &#x4E2D;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7684;&#x7F51;&#x7AD9; PRMT6 &#x7684;&#x3002;Pol beta &#x6316;&#x7A7A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x6BCF; 152 K R83 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x4E92;&#x8865;&#x900F;&#x9732;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6B8B;&#x7559; DNA &#x70F7;&#x5316;&#x5242;&#x8702;&#x7A9D;&#x6297;&#x6027;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; PRMT6 &#x4F5C;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x7684;&#x8BEF;&#x7801;&#x7387;&#x3002;

&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x8C03;&#x8282; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta &#x7248;&#x3002;

Alterations in DNA repair lead to genomic instability and higher risk of cancer. DNA base excision repair (BER) corrects damaged bases, apurinic sites, and single-strand DNA breaks. Here, a regulatory mechanism for DNA polymerase beta (Pol beta) is described. Pol beta was found to form a complex with the protein arginine methyltransferase 6 (PRMT6) and was specifically methylated in vitro and in vivo. Methylation of Pol beta by PRMT6 strongly stimulated DNA polymerase activity by enhancing DNA binding and processivity, while single nucleotide insertion and dRP-lyase activity were not affected. Two residues, R83 and R152, were identified in Pol beta as the sites of methylation by PRMT6. Genetic complementation of Pol beta knockout cells with R83/152K mutant revealed the importance of these residues for the cellular resistance to DNA alkylating agent. Based on our findings, we propose that PRMT6 plays a role as a regulator of BER.

Arginine methylation regulates DNA polymerase beta.

Alt&eacute;rations de l&#39;ADN r&eacute;paration conduisent &agrave; l&#39;instabilit&eacute; g&eacute;nomique et un risque accru de cancer. ADN base excision repair (BER) corrige les bases endommag&eacute;es, les sites apuriniques et cassures de l&#39;ADN monocat&eacute;naire. Ici, un m&eacute;canisme de r&eacute;glementation pour l&#39;ADN polym&eacute;rase b&ecirc;ta (b&ecirc;ta Pol) est d&eacute;crite. Pol b&ecirc;ta a &eacute;t&eacute; trouv&eacute; pour former un complexe avec la prot&eacute;ine arginine m&eacute;thyltransf&eacute;rase 6 (PRMT6) et a &eacute;t&eacute; sp&eacute;cifiquement m&eacute;thyl&eacute; in vitro et in vivo. M&eacute;thylation de beta Pol de PRMT6 a fortement stimul&eacute; l&#39;activit&eacute; ADN polym&eacute;rase en am&eacute;liorant la liaison de l&#39;ADN et processivit&eacute;, tandis que l&#39;insertion de nucl&eacute;otide et activit&eacute; dRP-lyase n&#39;affecta pas. Deux r&eacute;sidus, R83 et R152, ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s en version b&ecirc;ta Pol que les sites de la m&eacute;thylation par PRMT6. Compl&eacute;mentation g&eacute;n&eacute;tique des cellules b&ecirc;ta du knock-out Pol avec mutant R83/152 K ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; l&#39;importance de ces r&eacute;sidus pour la r&eacute;sistance cellulaire &agrave; l&#39;agent alkylant ADN. D&#39;apr&egrave;s nos constatations, nous proposons que la PRMT6 joue un r&ocirc;le r&eacute;gulateur des BER.

M&eacute;thylation de l&#39;arginine r&eacute;glemente l&#39;ADN polym&eacute;rase b&ecirc;ta.

&Auml;nderungen in der DNA reparieren zu genomische Instabilit&auml;t und h&ouml;heres Krebsrisiko f&uuml;hren. DNA base Excision Repair (BER) korrigiert besch&auml;digte Basen, Apurinic Sites und Einzelstrangbr&uuml;chen DNA. Hier ist ein Regulierungsmechanismus f&uuml;r DNA Polymerase Beta (Beta Pol) beschrieben. Pol-Beta wurde festgestellt, dass bilden einen Komplex mit dem Protein Arginin Methyltransferase 6 (PRMT6) und wurde speziell in-vitro und in vivo methyliert. Methylierung von Pol Beta von PRMT6 stimuliert stark, DNA-Polymerase-Aktivit&auml;t durch Verbesserung der DNA-Bindung und Processivity, w&auml;hrend Einzel-Nukleotid-Einf&uuml;gung und dRP-Lyase Aktivit&auml;t nicht betroffen waren. Zwei R&uuml;ckst&auml;nde, R83 und R152, wurden die Standorte der Methylierung von PRMT6 in Pol Beta identifiziert. Genetische Erg&auml;nzung der Pol Betazellen k.o. mit R83/152 K Mutant offenbart die Bedeutung dieser R&uuml;ckst&auml;nde f&uuml;r den zellul&auml;ren Widerstand gegen DNA alkylierenden Agent. Aufgrund unserer Erkenntnisse, schlagen wir vor, dass PRMT6 eine Rolle als Regulator des BER spielt.

Arginin-Methylierung regelt DNA Polymerase Beta.

Alterazioni nel DNA di riparazione conducono alla instabilit&agrave; genomica e maggiore rischio di cancro. Riparazione del DNA base escissione (BER) corregge basi danneggiate, apurinic siti e rotture del DNA single-strand. Qui, &egrave; descritto un meccanismo di regolamentazione per la polimerasi del DNA beta (beta Pol). POL beta &egrave; stato trovato per formare un complesso con la proteina arginina metiltransferasi 6 (PRMT6) e in particolare era metilato in vitro e in vivo. Metilazione di beta Pol da PRMT6 fortemente stimolato attivit&agrave; della polimerasi del DNA potenziando il legame del DNA e processivity, mentre inserimento singolo nucleotide e dRP-liasi attivit&agrave; non sono stati colpiti. Due residui, R83 e R152, sono stati identificati in beta Pol come i siti di metilazione di PRMT6. Complementazione genetica delle cellule Pol beta knockout con R83/152 K mutante ha rivelato l&#39;importanza di questi residui per la resistenza all&#39;agente alchilante del DNA cellulare. Basato sui nostri risultati, proponiamo che PRMT6 un ruolo come un regolatore di BER.

Metilazione di arginina regola la polimerasi del DNA beta.

DNA &#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x764C;&#x306E;&#x30EA;&#x30B9;&#x30AF;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x640D;&#x50B7;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x5869;&#x57FA;&#x3001;apurinic &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3001;&#x4E00;&#x672C;&#x9396; DNA &#x5207;&#x65AD;&#x306E; DNA &#x5869;&#x57FA;&#x9664;&#x53BB;&#x4FEE;&#x5FA9; (BER) &#x3092;&#x4FEE;&#x6B63;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; &#xFF08;Pol &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#xFF09; &#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Pol &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; (PRMT6) &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; 6 &#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x7279;&#x306B; in vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vivo &#x3067;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3002;Pol &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; PRMT6 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x3068; dRP &#x30EA;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C; DNA &#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3001;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30AF;&#x3001;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x304F;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3001;R83 &#x3068;&#x56FD;&#x9053; 152 &#x53F7;&#x7DDA;&#x3001;Pol &#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#x3067;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066; PRMT6 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;R83/152 K &#x5909;&#x7570;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x76F8;&#x88DC; Pol &beta; &#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; DNA &#x30A2;&#x30EB;&#x30AD;&#x30EB;&#x5316;&#x5264;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F53;&#x793E;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; PRMT6 BER &#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; &#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

DNA &#xBCC0;&#xACBD; &#xC218;&#xB9AC; genomic &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131; &#xBC0F; &#xC554;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC704;&#xD5D8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8;. DNA &#xAE30;&#xBCF8; &#xC808;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xAD6C; (BER) &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xAE30;&#xC9C0;, apurinic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; DNA &#xB098;&#xB204;&#xAE30;&#xB97C; &#xC218;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC84;&#xC804; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; (Pol &#xBCA0;&#xD0C0;)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Pol &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; methyltransferase 6 (PRMT6)&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xAC20; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;. PRMT6 Pol &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xB294; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC0BD;&#xC785; &#xBC0F; dRP lyase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xB3D9;&#xC548; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; processivity, &#xAC15;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC790;&#xADF9;. &#xB450; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;, R83 &#xBC0F; R152, prmt6&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBA54; &#xD2F8;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB85C; Pol &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. R83/152 K &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC640; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131; Pol &#xBCA0;&#xD0C0; &#xB9C8;&#xB124; &#xC140;&#xC758; DNA alkylating &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, PRMT6 BER&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xC11C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xC870;&#xC808; DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBCA0;&#xD0C0;.

Alteraciones en el ADN de reparaci&oacute;n conducen a la inestabilidad gen&oacute;mica y mayor riesgo de c&aacute;ncer. Reparaci&oacute;n de la base de la supresi&oacute;n del ADN (BER) corrige bases da&ntilde;adas, apurinic sitios y roturas del ADN monocatenario. Aqu&iacute; se describe un mecanismo regulador para DNA polimerasa beta (beta de Pol). Pol beta fue encontrado para formar un complejo con la prote&iacute;na arginina metiltransferasa 6 (PRMT6) y fue desnaturalizado espec&iacute;ficamente in vitro e in vivo. Metilaci&oacute;n de beta Pol por PRMT6 fuertemente hab&iacute;a estimulado la actividad polimerasa de la DNA al fomentar la Uni&oacute;n de ADN y procesividad, mientras que la inserci&oacute;n de un solo nucle&oacute;tido y dRP-liasa actividad no fueron afectados. Dos residuos, R83 y R152, fueron identificados en beta de Pol como los sitios de la metilaci&oacute;n por PRMT6. Complementaci&oacute;n Gen&eacute;tica de las c&eacute;lulas de Pol beta nocaut con R83/152 K mutante revelaron la importancia de estos residuos para la resistencia celular a agente alquilante del ADN. De acuerdo con nuestros resultados, proponemos que PRMT6 act&uacute;a como un regulador de BER.

Metilaci&oacute;n de arginina regula la DNA polimerasa beta.

DNA Polymerase Beta (Pol Beta) ist ein wichtiger Akteur DNA base Excision Repair (BER). Hier beschreiben wir die Komplexbildung von Pol Beta mit dem Protein Arginin Methyltransferase 1 (PRMT1). PRMT1 methyliert spezifisch Pol Beta in vitro und in vivo. Arginin 137 wurde in Pol Beta als wichtiges Ziel f&uuml;r die Methylierung von PRMT1 identifiziert. Weder die Polymerase noch die dRP-Lyase-Aktivit&auml;ten der Pol Beta waren von PRMT1 Methylierung betroffen. Diese &Auml;nderung abgeschafft jedoch das Zusammenspiel von Pol-Beta mit proliferierenden Zellen Nukle&auml;res Antigen (PCNA). Zusammen, belegen unsere Ergebnisse, dass PRMT1-Methylierung von Pol Beta eine regulatorische Rolle in BER spielen k&ouml;nnte, durch die Einbeziehung der Pol-Beta in PCNA-abh&auml;ngige DNA metabolische Ereignisse zu verhindern.

Methylierung von DNA Polymerase Beta von Protein Arginin Methyltransferase 1 regelt seine Bindung an proliferierenden Zellen Nukle&auml;res Antigen.

Polimerasi del DNA beta (beta pol) &egrave; un giocatore chiave nella riparazione del DNA base escissione (BER). Qui, descriviamo la formazione dei complessi di beta pol con il methyltransferase arginina della proteina 1 (PRMT1). PRMT1 metilato specificamente beta pol in vitro e in vivo. Arginina 137 &egrave; stato identificato in beta pol come un&#39;importante destinazione per metilazione da PRMT1. La polimerasi n&eacute; l&#39;attivit&agrave; di dRP-liasi di beta pol sono stati colpiti da metilazione del PRMT1. Tuttavia, questa modifica ha abolito l&#39;interazione di beta pol con antigene nucleare di proliferazione cellulare (PCNA). Insieme, i nostri risultati forniscono prove che PRMT1 metilazione di beta pol potrebbe svolgere un ruolo normativo nel BER impedendo il coinvolgimento di beta pol in eventi metabolici del DNA PCNA-dipendente.

Metilazione del DNA polimerasi beta da proteina arginina methyltransferase 1 regola la sua associazione all&#39;antigene nucleare delle cellule di proliferazione.

Dna &#x805A;&#x5408;&#x9176; beta (pol beta) &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x7403;&#x5458; DNA &#x57FA;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x590D; (BER)&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x590D;&#x6742; pol &beta; &#x4E0E;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; 1 (PRMT1) &#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;PRMT1 &#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x7532;&#x57FA;&#x5316; pol &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178; 137 &#x662F; pol &beta; &#x4F5C;&#x4E3A;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x91CD;&#x8981;&#x76EE;&#x6807;&#x901A;&#x8FC7;&#x6807;&#x8BC6; PRMT1&#x3002;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x65E2; pol beta &#x7684; dRP &#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x53D7;&#x5230; PRMT1 &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4FEE;&#x6539;&#x53D6;&#x6D88;&#x4E0E;&#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x6297;&#x539F; (PCNA) &#x7684; pol &beta; &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BC1;&#x636E; pol beta PRMT1 &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x76D1;&#x7BA1;&#x4F5C;&#x7528; BER &#x901A;&#x8FC7;&#x9632;&#x6B62; pol &beta; &#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684; DNA &#x4EE3;&#x8C22;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;

&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7684; DNA &#x805A;&#x5408;&#x9176; &beta; &#x86CB;&#x767D;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; 1 &#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5176;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x589E;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x6297;&#x539F;&#x3002;

DNA polymerase beta (pol beta) is a key player in DNA base excision repair (BER). Here, we describe the complex formation of pol beta with the protein arginine methyltransferase 1 (PRMT1). PRMT1 specifically methylated pol beta in vitro and in vivo. Arginine 137 was identified in pol beta as an important target for methylation by PRMT1. Neither the polymerase nor the dRP-lyase activities of pol beta were affected by PRMT1 methylation. However, this modification abolished the interaction of pol beta with proliferating cell nuclear antigen (PCNA). Together, our results provide evidence that PRMT1 methylation of pol beta might play a regulatory role in BER by preventing the involvement of pol beta in PCNA-dependent DNA metabolic events.

Methylation of DNA polymerase beta by protein arginine methyltransferase 1 regulates its binding to proliferating cell nuclear antigen.

ADN polym&eacute;rase b&ecirc;ta (b&ecirc;ta pol) est un acteur cl&eacute; dans l&#39;ADN base excision repair (BER). Nous d&eacute;crivons ici la formation d&#39;un complexe de beta pol avec la prot&eacute;ine arginine m&eacute;thyltransf&eacute;rase 1 (PRMT1). PRMT1 m&eacute;thyl&eacute;s sp&eacute;cifiquement b&ecirc;ta pol in vitro et in vivo. Arginine 137 a &eacute;t&eacute; identifi&eacute; en version b&ecirc;ta pol comme une cible importante pour la m&eacute;thylation par PRMT1. La polym&eacute;rase ni les activit&eacute;s de dRP-lyase de beta pol furent affect&eacute;es par m&eacute;thylation de le PRMT1. Toutefois, cette modification a aboli l&#39;interaction de beta pol avec l&#39;antig&egrave;ne nucl&eacute;aire de prolif&eacute;ration cellulaire (PCNA). Ensemble, nos r&eacute;sultats prouvent que PRMT1 m&eacute;thylation de beta pol pourrait jouer un r&ocirc;le r&eacute;gulateur dans BER en emp&ecirc;chant la participation de beta pol en &eacute;v&eacute;nements m&eacute;taboliques PCNA-dependent DNA.

La m&eacute;thylation de l&#39;ADN polym&eacute;rase b&ecirc;ta par la prot&eacute;ine arginine m&eacute;thyltransf&eacute;rase 1 r&eacute;gule sa liaison &agrave; l&#39;antig&egrave;ne nucl&eacute;aire de prolif&eacute;ration cellulaire.

Dna &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; (pol &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;) DNA &#x5869;&#x57FA;&#x9664;&#x53BB;&#x4FEE;&#x5FA9; (BER) &#x3067;&#x306E;&#x30AD;&#x30FC;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E4;&#x30FC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EB; &#x30FB; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x86CB;&#x767D;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; 1 (PRMT1) &#x3068;&#x306E;&#x932F;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PRMT1 &#x306F;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B; pol &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; in vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073; in vivo &#x3067;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; 137 pol &#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#x3067;&#x306F; PRMT1 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3082;&#x30DD;&#x30EB; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E; dRP &#x30EA;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3082; PRMT1 &#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x5897;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x6297;&#x539F; (PCNA) &#x3068; pol &#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C; PRMT1 &#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E; pol &#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x5F79;&#x5272; pol &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; PCNA &#x4F9D;&#x5B58;&#x578B; DNA &#x65B0;&#x9673;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x306B; BER &#x3067;&#x518D;&#x751F;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316; DNA &#x30DD;&#x30EA;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &beta; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; 1 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x6297;&#x539F;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC84;&#xC804; dna &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; (pol &#xBCA0;&#xD0C0;) DNA &#xAE30;&#xBCF8; &#xC808;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xAD6C; (BER)&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xC120;&#xC218; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; pol &#xBCA0;&#xD0C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; methyltransferase 1 (PRMT1)&#xC640; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xAE30;&#xC220;. Prmt1&#xB294; &#xD2B9;&#xD788; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; pol &#xBCA0;&#xD0C0; &#xAC20;. &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; 137 prmt1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3F4; &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD6A8;&#xC18C;&#xB3C4; pol &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; dRP lyase &#xD65C;&#xB3D9; PRMT1 &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xC218;&#xC815; pol &#xBCA0;&#xD0C0; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xC138;&#xD3EC; &#xD575; &#xD56D; (PCNA) &#xC0C1;&#xD638; &#xD3D0;&#xC9C0;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; pol &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; PRMT1 pol &#xBCA0;&#xD0C0; PCNA &#xC885;&#xC18D; DNA &#xB300;&#xC0AC; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD558; &#xC5EC; BER&#xC5D0; &#xADDC;&#xC81C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;&#xB294; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

DNA &#xC911; &#xD569; &#xD6A8;&#xC18C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; methyltransferase 1 &#xBCA0;&#xD0C0;&#xC758; &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBC29;&#xC9C0;&#xD560; &#xC138;&#xD3EC; &#xD575; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC870;&#xC808;.

ADN polimerasa beta (beta pol) es un actor clave en la reparaci&oacute;n de la base de la supresi&oacute;n del ADN (BER). Aqu&iacute;, describimos la formaci&oacute;n de complejos de beta pol con la prote&iacute;na arginina metiltransferasa 1 (PRMT1). PRMT1 hab&iacute;a desnaturalizado espec&iacute;ficamente beta pol in vitro e in vivo. Arginina 137 fue identificado en beta de pol como un objetivo importante para la metilaci&oacute;n por PRMT1. La polimerasa ni las actividades de la dRP-liasa de beta pol fueron afectadas por la metilaci&oacute;n de la PRMT1. Sin embargo, esta modificaci&oacute;n aboli&oacute; la interacci&oacute;n de beta pol con ant&iacute;geno nuclear de proliferaci&oacute;n celular (PCNA). Juntos, nuestros resultados proporcionan evidencia que PRMT1 metilaci&oacute;n de beta pol pudo desempe&ntilde;ar un papel regulador en BER impidiendo la participaci&oacute;n de beta de pol en eventos metab&oacute;licos PCNA dependiente de DNA.

Metilaci&oacute;n de ADN polimerasa beta por prote&iacute;na arginina metiltransferasa 1 regula su uni&oacute;n al ant&iacute;geno nuclear de proliferaci&oacute;n celular.

&#x5927;&#x9F20;&#x7EC6;&#x5C0F;&#x75C5;&#x6BD2; H-1 (H 1PV) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x6297;&#x764C;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x5438;&#x5F15;&#x4E86;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x91CD;&#x89C6;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4E0D;&#x662F;&#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x81F4;&#x75C5;&#xFF0C;&#x6709; oncotropic &#x548C; oncosuppressive &#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x975E;&#x7ED3;&#x6784;&#x6027; NS1 &#x86CB;&#x767D;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8C03;&#x89E3; H 1PV &#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x786E;&#x5207;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x672A;&#x5B9A;&#x4E49;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x529B; H 1PV NS1 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; NS1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x4F7F;&#x5728; G(2) &#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x548C; 3 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#xFF0C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; H 1PV &#x611F;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728; G(2) &#x9636;&#x6BB5;&#x902E;&#x6355;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63A5;&#x53D7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E0E; DNA &#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x66F4;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27; (ROS) NS1 &#x548C; H 1PV &#x611F;&#x67D3;&#x5BFC;&#x81F4;&#x3002;&#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x6CBB;&#x7597;&#x53EF;&#x964D;&#x4F4E;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5F3A;&#x70C8;&#x964D;&#x4F4E; NS1 &#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x963B;&#x6EDE;&#x548C;&#x51CB;&#x4EA1;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A; NS1 &#x8BF1;&#x5BFC; ROS H 1PV &#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x89E3;&#x4EBA;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x975E;&#x7ED3;&#x6784;&#x86CB;&#x767D; NS1&#x3001; &#x7EC6;&#x5C0F;&#x75C5;&#x6BD2; H 1 &#x8BF1;&#x4F7F;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;

The rat parvovirus H-1 (H-1PV) attracts high attention as an anticancer agent, because it is not pathogenic for humans and has oncotropic and oncosuppressive properties. The viral nonstructural NS1 protein is thought to mediate H-1PV cytotoxicity, but its exact contribution to this process remains undefined. In this study, we analyzed the effects of the H-1PV NS1 protein on human cell proliferation and cell viability. We show that NS1 expression is sufficient to induce the accumulation of cells in G(2) phase, apoptosis via caspase 9 and 3 activation, and cell lysis. Similarly, cells infected with wild-type H-1PV arrest in G(2) phase and undergo apoptosis. Furthermore, we also show that both expression of NS1 and H-1PV infection lead to higher levels of intracellular reactive oxygen species (ROS), associated with DNA double-strand breaks. Antioxidant treatment reduces ROS levels and strongly decreases NS1- and virus-induced DNA damage, cell cycle arrest, and apoptosis, indicating that NS1-induced ROS are important mediators of H-1PV cytotoxicity.

Through its nonstructural protein NS1, parvovirus H-1 induces apoptosis via accumulation of reactive oxygen species.

Le parvovirus du rat H-1 (H-1PV) attire une grande attention en tant qu&#x26;#39;agent anticanc&#xE9;reux, car il n&#x26;#39;est pas pathog&#xE8;ne pour l&#x26;#39;homme et poss&#xE8;de des propri&#xE9;t&#xE9;s oncotropic et oncosuppressive. La prot&#xE9;ine non structurale NS1 virale est pens&#xE9; pour servir de m&#xE9;diateur H-1PV cytotoxicit&#xE9;, mais sa contribution exacte &#xE0; ce processus n&#x26;#39;est pas encore d&#xE9;fini. Dans cette &#xE9;tude, nous avons analys&#xE9; les effets de la H-1PV prot&#xE9;ine NS1 sur la prolif&#xE9;ration cellulaire humaine et la viabilit&#xE9; cellulaire. Nous montrons que la prot&#xE9;ine NS1 expression est suffisante pour induire l&#x26;#39;accumulation de cellules dans G (2) de phase, l&#x26;#39;apoptose via la caspase 9 et 3 activation, et la lyse cellulaire. De m&#xEA;me, les cellules infect&#xE9;es par le type sauvage H-1PV arrestation en G (2) de phase et l&#x26;#39;apoptose. En outre, nous montrons aussi que la fois l&#x26;#39;expression de la prot&#xE9;ine NS1 et le plomb infection H-1PV &#xE0; des niveaux plus &#xE9;lev&#xE9;s de intracellulaires esp&#xE8;ces r&#xE9;actives de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne (ROS), associ&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;ADN double-brin. Traitement antioxydant r&#xE9;duit les niveaux de ROS et diminue fortement dommages &#xE0; l&#x26;#39;ADN NS1 et induite par le virus, arr&#xEA;t du cycle cellulaire et l&#x26;#39;apoptose, ce qui indique que la prot&#xE9;ine NS1 induit ROS sont des m&#xE9;diateurs importants de H-1PV cytotoxicit&#xE9;.

Gr&#xE2;ce &#xE0; son prot&#xE9;ine non structurale NS1, le parvovirus H-1 induit l&#x26;#39;apoptose par l&#x26;#39;accumulation des esp&#xE8;ces r&#xE9;actives de l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne

Die Ratte Parvovirus H-1 (H-1PV) zieht hohe Aufmerksamkeit als Anti-Krebs-Agent, weil es nicht pathogen f&uuml;r den Menschen ist und Oncotropic und Oncosuppressive Eigenschaften. Das virale nonstructural NS1-Protein wird angenommen, dass H-1PV Zytotoxizit&auml;t zu vermitteln, aber seine genaue Beitrag zu diesem Prozess bleibt undefiniert. In dieser Studie analysierten wir die Auswirkungen der H-1PV NS1-Protein auf menschliche Zellproliferation und Zellviabilit&auml;t. Wir zeigen, dass NS1 Ausdruck ausreicht, um die Ansammlung von Zellen in Fassung Phase, Apoptose durch Caspase 9 und 3 Aktivierung und Zellenzerst&ouml;rung induzieren. Ebenso mit Wildtyp H-1PV infizierte Zellen in Fassung Phase zu verhaften und Apoptose zu unterziehen. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir auch, dass beide Ausdruck NS1 und H-1PV Infektion f&uuml;hren zu h&ouml;heren Ebenen des intrazellul&auml;ren reaktive Sauerstoffspezies (ROS), DNA-Doppel-Strang-Pausen zugeordnet. Antioxidative Behandlung reduziert ROS Ebenen und stark verringert, NS1 und Virus-induzierte DNA-Sch&auml;den, Zellzyklus Verhaftung und Apoptosis, darauf hinweist, dass NS1-induzierte ROS wichtige Mediatoren der H-1PV Zytotoxizit&auml;t sind.

Durch seine nonstructural Protein NS1 induziert Parvovirus H-1 Apoptosis &uuml;ber Anh&auml;ufung reaktiver Sauerstoffspezies.

Il parvovirus ratto H-1 (H-1PV) attira l&#39;attenzione alta come agente anticancro, perch&eacute; non &egrave; patogeno per l&#39;uomo e ha propriet&agrave; oncotropic e oncosuppressive. La proteina virale NS1 non strutturali &egrave; pensata per mediare H-1PV citotossicit&agrave;, ma suo esatto contributo a questo processo rimane indefinita. In questo studio, abbiamo analizzato gli effetti della proteina H-1PV NS1 sulla proliferazione delle cellule umane e vitalit&agrave; cellulare. Mostriamo che espressione NS1 &egrave; sufficiente a indurre l&#39;accumulo di cellule in fase 05, apoptosis tramite attivazione di caspase 9 e 3 e la lisi delle cellule. Analogamente, le cellule infettate con selvaggio-tipo H-1PV arrestano nella fase 05 e apoptosi. Inoltre, ci mostrano anche che sia espressione di piombo infezione NS1 e H-1PV ai pi&ugrave; alti livelli di specie reattive intracellulare dell&#39;ossigeno (ROS), associato a interruzioni di DNA double-strand. Trattamento antiossidante riduce i livelli di ROS e diminuisce fortemente NS1 - e virus-induced DNA damage, arresto del ciclo cellulare e apoptosi, indicando che il ROS indotta da NS1 sono importanti mediatori di H-1PV citotossicit&agrave;.

Attraverso le proteine non strutturali NS1, parvovirus H-1 induce l&#39;apoptosi tramite accumulo di specie reattive dell&#39;ossigeno.

&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306E;&#x3068;oncosuppressive&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D1;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;H-1&#xFF08;H-1PV&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x764C;&#x5264;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9AD8;&#x3044;&#x6CE8;&#x76EE;&#x3092;&#x96C6;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x975E;&#x69CB;&#x9020;NS1&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;H-1PV&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x306F;&#x672A;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x4E0A;&#x306E;H-1PV NS1&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;NS1&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;9&#x3068;3&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;G&#xFF08;2&#x200B;&#x200B;&#xFF09;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;G&#xFF08;2&#xFF09;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;H-1PV&#x902E;&#x6355;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;NS1&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x9178;&#x7D20;&#x7A2E;&#xFF08;ROS&#xFF09;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;H-1PV&#x611F;&#x67D3;&#x925B;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;DNA&#x4E8C;&#x91CD;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6297;&#x9178;&#x5316;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;ROS&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3068;&#x5F37;&#x304F;NS1-&#x8A98;&#x5C0E;ROS&#x306F;H-1PV&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;NS1&#x3068;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;DNA&#x640D;&#x50B7;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x505C;&#x6B62;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC790;&#xC0AC;&#xC758; nonstructural &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; n s 1 &#xD1B5;&#xD574; parvovirus H 1 &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC885;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; apoptosis&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;.

El parvovirus rata H-1 (H-1PV) atrae la atenci&#xF3;n de alta como un agente anticanceroso, porque no es pat&#xF3;geno para los seres humanos y tiene propiedades oncotropic y oncosuppressive. La prote&#xED;na viral no estructural NS1 se piensa para mediar en H-1PV citotoxicidad, pero su contribuci&#xF3;n exacta a este proceso a&#xFA;n no est&#xE1; definido. En este estudio, se analizaron los efectos de la H-1PV prote&#xED;na NS1 en la proliferaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas humanas y la viabilidad celular. Se demuestra que NS1 expresi&#xF3;n es suficiente para inducir la acumulaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas en G (2) de fase, a trav&#xE9;s de la apoptosis caspasa 9 y 3 de activaci&#xF3;n, y la lisis celular. Del mismo modo, las c&#xE9;lulas infectadas con el tipo salvaje H-1PV arresto en G (2) fase y someterse a la apoptosis. Por otra parte, tambi&#xE9;n muestran que tanto la expresi&#xF3;n de NS1 y H-1PV infecci&#xF3;n favorece mayores niveles intracelulares de especies reactivas del ox&#xED;geno (ROS), asociada con ADN de doble filamento se rompe. Tratamiento antioxidante reduce los niveles de ROS y disminuye en gran medida el da&#xF1;o del ADN y el NS1-inducida por el virus, la detenci&#xF3;n del ciclo celular y la apoptosis, lo que indica que NS1 inducida por ROS son mediadores importantes de la H-1PV citotoxicidad.

A trav&#xE9;s de su prote&#xED;na no estructural NS1, parvovirus H-1 induce la apoptosis a trav&#xE9;s de acumulaci&#xF3;n de especies reactivas del ox&#xED;geno

&#x5927;&#x9F20;&#x7EC6;&#x5C0F;&#x75C5;&#x6BD2; H 1PV &#x662F;&#x526F;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x7684;&#x6297;&#x764C;&#x836F;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8D4B;&#x4E88;&#x5176; oncosuppressive &#x5C5E;&#x6027;&#x548C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5DF2;&#x77E5;&#x3002;H 1PV &#x4F18;&#x5148;&#x590D;&#x5236;&#x5728;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75C5;&#x6BD2;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8F93;&#x5165;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5438;&#x6536;&#x56FA;&#x8FDC;&#x79BB;&#x80BF;&#x7624;&#x76EE;&#x6807;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x5242;&#x91CF;&#x7684;&#x5F88;&#x5927;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x9488;&#x5BF9;&#x5177;&#x4F53; H 1PV &#x8FDB;&#x5165;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x589E;&#x52A0;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x5C0F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x75C5;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x7597;&#x6548;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x9996;&#x6B21;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178; H 1PV &#x6761;&#x76EE;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x7740;&#x5173;&#x952E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7136;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; H 1PV &#x8863;&#x58F3;&#xFF0C;&#x6539;&#x5584;&#x5176;&#x5BF9;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x89E3;&#x51B3;&#x7684;&#x6676;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7EC6;&#x5C0F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5206;&#x949F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x7C7B;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x7845;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x6A21;&#x578B;&#x7684; H 1PV &#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x8863;&#x58F3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x5047;&#x5B9A;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8FDB;&#x5165;&#x4E00;&#x7EA7;&#x7684;&#x5BF9;&#x79F0;&#x7684;&#x8863;&#x58F3;&#xFF0C;&#x6240;&#x8C13;&#x7684;&#x9152;&#x7A9D;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x4E8C;&#x6298;&#x8F74;&#x7684;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x7684;&#x539F;&#x4F4D;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C; H 1PV &#x8FDB;&#x5165;&#x8BB8;&#x53EF;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x9879;&#x7F3A;&#x9677;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8863;&#x58F3;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x63D2;&#x5165;&#x5FAA;&#x73AF; RGD-4 C &#x80BD;&#x5728;&#x5176;&#x4E09;&#x6298;&#x8F74;&#x7A57;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x6B64;&#x80BD;&#x7ED1;&#x5B9A; &alpha;(v)&beta;(3) &#x548C; &alpha;(v)&beta;(5) &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#xFF0C;&#x6297;&#x539F;&#x5728;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x3002;&#x63D2;&#x5165;&#x7684;&#x80BD;&#x6551;&#x51FA;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D70;&#x5411;&#x8D85;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE; &alpha;(v)&beta;(5) &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#xFF0C;&#x7531;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9020;&#x6210;&#x9AD8;&#x6548;&#x88AB;&#x5BB3;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6F14;&#x793A; H 1PV &#x53EF;&#x4EE5;&#x91CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x5B9A;&#x5411;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x8863;&#x58F3;&#x4FEE;&#x6539;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x764C;&#x75C7;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E2D;&#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x5229;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5F88;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x3002;

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The rat parvovirus H-1PV is a promising anticancer agent given its oncosuppressive properties and the absence of known side effects in humans. H-1PV replicates preferentially in transformed cells, but the virus can enter both normal and cancer cells. Uptake by normal cells sequesters a significant portion of the administered viral dose away from the tumor target. Hence, targeting H-1PV entry specifically to tumor cells is important to increase the efficacy of parvovirus-based treatments. In this study, we first found that sialic acid plays a key role in H-1PV entry. We then genetically engineered the H-1PV capsid to improve its affinity for human tumor cells. By analogy with the resolved crystal structure of the closely related parvovirus minute virus of mice, we developed an in silico three-dimensional (3D) model of the H-1PV wild-type capsid. Based on this model, we identified putative amino acids involved in cell membrane recognition and virus entry at the level of the 2-fold axis of symmetry of the capsid, within the so-called dimple region. In situ mutagenesis of these residues significantly reduced the binding and entry of H-1PV into permissive cells. We then engineered an entry-deficient viral capsid and inserted a cyclic RGD-4C peptide at the level of its 3-fold axis spike. This peptide binds Î±(v)Î²(3) and Î±(v)Î²(5) integrins, which are overexpressed in cancer cells and growing blood vessels. The insertion of the peptide rescued viral infectivity toward cells overexpressing Î±(v)Î²(5) integrins, resulting in the efficient killing of these cells by the reengineered virus. This work demonstrates that H-1PV can be genetically retargeted through the modification of its capsid, showing great promise for a more efficient use of this virus in cancer therapy.

Retargeting of rat parvovirus H-1PV to cancer cells through genetic engineering of the viral capsid.

Le parvovirus du rat H-1PV est un agent anticanc&#xE9;reux prometteur compte tenu de ses propri&#xE9;t&#xE9;s oncosuppressive et l&#x26;#39;absence d&#x26;#39;effets secondaires connus chez les humains. H-1PV r&#xE9;plique pr&#xE9;f&#xE9;rentiellement dans les cellules transform&#xE9;es, mais le virus peut p&#xE9;n&#xE9;trer &#xE0; la fois normale et les cellules canc&#xE9;reuses. L&#x26;#39;absorption par les cellules normales s&#xE9;questre une partie importante de la dose administr&#xE9;e virale loin de la cible tumorale. Par cons&#xE9;quent, le ciblage H-1PV entr&#xE9;e sp&#xE9;cifiquement aux cellules tumorales est important d&#x26;#39;augmenter l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de traitements &#xE0; base de parvovirus. Dans cette &#xE9;tude, nous avons d&#x26;#39;abord constat&#xE9; que l&#x26;#39;acide sialique joue un r&#xF4;le cl&#xE9; dans la H-1PV entr&#xE9;e. Nous avons ensuite g&#xE9;n&#xE9;tiquement la capside H-1PV pour am&#xE9;liorer son affinit&#xE9; pour les cellules tumorales humaines. Par analogie avec la structure cristalline r&#xE9;solue du virus minute parvovirus &#xE9;troitement li&#xE9; de souris, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un mod&#xE8;le in silico en trois dimensions (3D) de la H-1PV de type sauvage capside. Bas&#xE9; sur ce mod&#xE8;le, nous avons identifi&#xE9; putatifs des acides amin&#xE9;s impliqu&#xE9;s dans la reconnaissance membrane cellulaire et l&#x26;#39;entr&#xE9;e du virus au niveau de l&#x26;#39;axe 2-fois de la sym&#xE9;trie de la capside, dans la r&#xE9;gion fossette dite. En mutagen&#xE8;se in situ de ces r&#xE9;sidus consid&#xE9;rablement r&#xE9;duit la liaison et l&#x26;#39;entr&#xE9;e de la H-1PV dans les cellules permissives. On puis con&#xE7;u une capside virale entr&#xE9;e de d&#xE9;ficience de et ins&#xE9;r&#xE9; une cyclique RGD-4C peptide au niveau de son pic axe 3 fois. Ce peptide se lie &#x3B1; (v) &#x3B2; (3) et &#x3B1; (v) &#x3B2; (5) int&#xE9;grines, qui sont surexprim&#xE9;es dans les cellules canc&#xE9;reuses et les vaisseaux sanguins en croissance. L&#x26;#39;insertion du peptide sauv&#xE9; infectivit&#xE9; virale vers les cellules surexprimant &#x3B1; (v) &#x3B2; (5) les int&#xE9;grines, qui entra&#xEE;ne la mort efficace de ces cellules par le virus remani&#xE9;. Ce travail d&#xE9;montre que H-1PV peuvent &#xEA;tre g&#xE9;n&#xE9;tiquement r&#xE9;orient&#xE9;es par la modification de sa capside, semble tr&#xE8;s prometteur pour une utilisation plus efficace de ce virus dans le traitement du cancer.

Reciblage du parvovirus H-Rat 1PV &#xE0; cellules canc&#xE9;reuses par le g&#xE9;nie g&#xE9;n&#xE9;tique de la capside virale

Die Ratte-Parvovirus H-1PV ist eine vielversprechende Anti-Krebs-Agent seine Oncosuppressive Eigenschaften und das Fehlen von bekannten Nebenwirkungen beim Menschen gegeben. H-1PV repliziert bevorzugt in transformierten Zellen, aber das Virus kann sowohl Normal als auch Krebs Zellen eingeben. Aufnahme von normalen Zellen Sequester einen erheblichen Teil der viralen administrierten Dosis vom Tumor vorbei. Folglich ist es wichtig, die Wirkung einer Parvovirus-basierte Behandlung zu erh&ouml;hen, Ausrichtung auf H-1PV Eintrag speziell auf Tumorzellen. In dieser Studie fanden wir zuerst die Sialins&auml;ure spielt eine Schl&uuml;sselrolle im H-1PV-Eintrag. Wir entwickelt dann genetisch das H-1PV Kapsid seine Affinit&auml;t f&uuml;r menschliche Tumorzellen zu verbessern. In Anlehnung an die aufgel&ouml;sten Kristallstruktur des eng verwandte Parvovirus Minute Virus von M&auml;usen, entwickelten wir eine in Silico dreidimensionale (3D) Modell der H-1PV Wildtyp Kapsid. Auf der Grundlage dieses Modells wurden vermeintliche Aminos&auml;uren Zellmembran Anerkennung und Virus-Eintrag auf der Ebene der 2-fold Achse der Symmetrie der das Kapsid, innerhalb der sogenannten Gr&uuml;bchen-Region beteiligt. In-situ Mutagenese dieser R&uuml;ckst&auml;nde deutlich reduziert, die Bindung und das Inkrafttreten des H-1PV permissive Zellen. Dann entwickelt ein Eintrag-defizienten virale Kapsid und ein zyklischer RGD - 4 C-Peptid auf der Ebene einer seiner 3-Band-Achse-Spitze eingef&uuml;gt. Dieses Peptid bindet &alpha;(v)&beta;(3) und &alpha;(v)&beta;(5)-Integrine, die in Krebszellen und wachsende Blutgef&auml;&szlig;e Pleuramesotheliom sind. Die Einf&uuml;gung des Peptids gerettet virale Infektiosit&auml;t in Richtung &alpha;(v)&beta;(5)-Integrine, wodurch die effiziente T&ouml;tung dieser Zellen durch das &uuml;berarbeitete Virus &uuml;berexprimierenden Zellen. Diese Arbeit zeigt, dass H-1PV genetisch durch die Modifizierung von seiner Kapsid umgeleitet werden kann, zeigen viel versprechend f&uuml;r eine effizientere Nutzung dieses Virus in der Krebstherapie.

Neuausrichtung der Ratte Parvovirus H-1PV zu Krebszellen durch die Gentechnik von der viralen Kapsid.

Il parvovirus ratto H-1PV &egrave; un promettente agente antitumorale dato le sue propriet&agrave; oncosuppressive e l&#39;assenza di effetti collaterali conosciuti negli esseri umani. H-1PV replica preferenzialmente in cellule trasformate, ma il virus pu&ograve; entrare sia normali e cellule cancerogene. Assorbimento da parte delle cellule normali sequestra una porzione significativa della dose somministrata virale lontano dal bersaglio del tumore. Quindi, targeting H-1PV entrata in particolare per le cellule tumorali &egrave; importante per aumentare l&#39;efficacia dei trattamenti a base di parvovirus. In questo studio, abbiamo trovato prima che l&#39;acido sialico gioca un ruolo chiave nella voce H-1PV. Abbiamo quindi geneticamente il capside H-1PV per migliorare la sua affinit&agrave; per le cellule tumorali umane. Per analogia con la struttura di cristallo risolto del virus parvovirus strettamente correlati minuto dei topi, abbiamo sviluppato un in silico tridimensionale (3D) modello del capside del selvaggio-tipo H-1PV. Basato su questo modello, abbiamo identificato putativi amminoacidi coinvolti nella membrana cellulare voce riconoscimento e virus a livello dell&#39;asse di simmetria del capside, all&#39;interno della regione cosiddetta fossetta 2 volte. Mutagenesi in situ di questi residui ha ridotto significativamente l&#39;associazione e l&#39;entrata di H-1PV in cellule permissive. Abbiamo quindi progettato un deficit di entrata capside virale e inserito un peptide ciclico RGD-4 C a livello del suo picco asse 3 volte. Questo peptide si lega integrine &alpha;(v)&beta;(3) e &alpha;(v)&beta;(5), che sono overexpressed in cellule tumorali e crescita dei vasi sanguigni. L&#39;inserimento del peptide salvato infettivit&agrave; virale verso le cellule con sovraesprimono relativa &alpha;(v)&beta;(5) integrine, causando l&#39;uccisione efficiente di queste cellule dal virus riprogettato. Questo lavoro dimostra che H-1PV pu&ograve; essere ridestinato geneticamente relativo attraverso la modifica del suo capside, mostrando grande promessa per un uso pi&ugrave; efficiente di questo virus nella terapia del cancro.

Nuova destinazione di parvovirus ratto H-1PV alle cellule tumorali attraverso l&#39;ingegneria genetica delle proteine del capside virale.

&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D1;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;H-1PV&#x305D;&#x306E;oncosuppressive&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x6297;&#x304C;&#x3093;&#x5264;&#x3084;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x526F;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; H-1PV&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x8907;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6B63;&#x5E38;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306F;&#x3001;&#x96E2;&#x308C;&#x3066;&#x816B;&#x760D;&#x6A19;&#x7684;&#x304B;&#x3089;&#x6295;&#x4E0E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x91CF;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x3092;&#x9694;&#x96E2;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306B;H-1PV&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x30D1;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305A;&#x3001;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x306F;&#x3001;H-1PV&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x30D2;&#x30C8;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;H-1PV&#x306E;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x30D1;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5206;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x89E3;&#x6C7A;&#x306E;&#x7D50;&#x6676;&#x69CB;&#x9020;&#x304B;&#x3089;&#x985E;&#x63A8;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;H-1PV&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;in silico&#x3067;3&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;3D&#xFF09;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3044;&#x308F;&#x3086;&#x308B;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x3067;&#x3001;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x6027;&#x306E;2&#x500D;&#x306E;&#x8EF8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3084;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;in situ&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x751F;&#x6210;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;H-1PV&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x6B21;&#x306B;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x6B20;&#x640D;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;3&#x500D;&#x306E;&#x8EF8;&#x30B9;&#x30D1;&#x30A4;&#x30AF;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x3001;&#x74B0;&#x72B6;RGD-4C&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x633F;&#x5165;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3066;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x306B;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3B1;&#xFF08;v&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#xFF08;3&#xFF09;&#x3068;&#x3B1;&#xFF08;v&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#xFF08;5&#xFF09;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x6BBA;&#x5BB3;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3B1;&#xFF08;v&#xFF09;&#x306E;&#x3B2;&#xFF08;5&#xFF09;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x6551;&#x52A9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x306F;&#x3001;H-1PV&#x304C;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x764C;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5049;&#x5927;&#x306A;&#x7D04;&#x675F;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;H-1PV&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D1;&#x30EB;&#x30DC;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x5909;&#x66F4;

&#xC950; parvovirus H-1pv&#xC740; &#xC778; &#xAC04;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; oncosuppressive &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xBD80;&#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC; &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xD56D; &#xC554; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;. H-1PV &#xBCC0;&#xD658; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC785;&#xB825;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE00;&#xADC0; sequesters &#xC885;&#xC591; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xB9AC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBD80;&#xBD84;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD2B9;&#xD788; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; H-1PV &#xD56D;&#xBAA9;&#xC744; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; parvovirus &#xAE30;&#xBC18; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC911;&#xC694;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBA3C;&#xC800; &#xADF8; sialic &#xC0B0; H-1PV &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD575;&#xC2EC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791; &#xC778;&#xAC04; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; H-1PV capsid. &#xC950;&#xC758; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; parvovirus &#xBD84; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xACB0;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870;&#xC640; &#xBE44;&#xC720;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC;&#xB0B4; silico 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xAC1C;&#xBC1C; H-1PV &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; capsid&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0C1; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; 2-fold capsid &#xC18C;&#xC704; &#xBCF4;&#xC870; &#xAC1C; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xCE6D; &#xCD95;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xC778;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xC6D0;&#xB798;&#xC758; mutagenesis &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xAD00;&#xB300; &#xD55C; &#xC140; H-1PV &#xC9C4;&#xC785;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4ED;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC74C; &#xD56D;&#xBAA9; &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; capsid &#xC124;&#xACC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC21C;&#xD658; RGD-4 C &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; 3 &#xCD95; &#xC2A4;&#xD30C;&#xC774;&#xD06C;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0BD;&#xC785;. &#xC774; &#xD3A9; &#xD2F0;&#xC774; &#xB4DC; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB294; &#xD608;&#xAD00;&#xC5D0; overexpressed &alpha;(v)&beta;(3) &#xBC0F; &alpha;(v)&beta;(5) integrins&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xC0BD;&#xC785; overexpressing &alpha;(v)&beta;(5) integrins, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC0B4;&#xC778; reengineered &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC140; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; infectivity &#xAD6C;&#xCD9C;. &#xC774; &#xC791;&#xC5C5; &#xB300;&#xC0C1;&#xC774; &#xADF8; H-1PV &#xC218; &#xC218; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC758; capsid &#xC218;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC554; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB354; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xC6A9;&#xC774;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD070; &#xC57D;&#xC18D;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB300;&#xC0C1; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC950; parvovirus H-1PV &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; capsid&#xC758; &#xC720;&#xC804; &#xACF5;&#xD559; &#xD1B5;&#xD574; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC758;.

El parvovirus ratas H-1PV es un agente prometedor contra el c&#xE1;ncer debido a sus propiedades oncosuppressive y la ausencia de efectos secundarios conocidos en los seres humanos. H-1PV se replica preferentemente en las c&#xE9;lulas transformadas, pero el virus puede entrar en c&#xE9;lulas tanto normales como cancerosas. La captaci&#xF3;n por las c&#xE9;lulas normales secuestra una porci&#xF3;n significativa de la dosis administrada viral lejos de la diana del tumor. Por lo tanto, la orientaci&#xF3;n H-1PV entrada espec&#xED;ficamente a las c&#xE9;lulas tumorales es importante para aumentar la eficacia de los tratamientos a base de parvovirus. En este estudio, se encontr&#xF3; por primera vez que el &#xE1;cido si&#xE1;lico juega un papel clave en la H-1PV entrada. A continuaci&#xF3;n, gen&#xE9;ticamente la c&#xE1;psida H-1PV para mejorar su afinidad por las c&#xE9;lulas tumorales humanas. Por analog&#xED;a con la estructura cristalina del virus de resolver el parvovirus minutos estrechamente relacionado con los ratones, hemos desarrollado un modelo in silico de tres dimensiones (3D) de la H-1PV de tipo salvaje c&#xE1;pside. Basado en este modelo, hemos identificado putativo amino&#xE1;cidos implicados en el reconocimiento de la membrana celular y la entrada del virus en el plano del eje 2-pliegue de simetr&#xED;a de la c&#xE1;psida, dentro de la regi&#xF3;n hoyuelo llamada. En mutag&#xE9;nesis in situ de estos residuos reduce significativamente la uni&#xF3;n y la entrada de H-1PV en c&#xE9;lulas permisivas. A continuaci&#xF3;n, dise&#xF1;ado una c&#xE1;pside viral entrada-deficiente y se inserta un c&#xED;clico RGD-4C p&#xE9;ptido en el nivel de su espiga eje 3-pliegue. Este p&#xE9;ptido se une &#x3B1; (v) &#x3B2; (3) y &#x3B1; (v) &#x3B2; (5) integrinas, que se sobreexpresa en las c&#xE9;lulas cancerosas y crecen los vasos sangu&#xED;neos. La inserci&#xF3;n del p&#xE9;ptido rescatado infectividad viral hacia las c&#xE9;lulas que sobreexpresan &#x3B1; (v) &#x3B2; (5) integrinas, resultando en la muerte de estas c&#xE9;lulas eficiente por el virus redise&#xF1;ado. Este trabajo demuestra que H-1PV pueden ser gen&#xE9;ticamente retargeted a trav&#xE9;s de la modificaci&#xF3;n de su c&#xE1;pside, mostrando una gran promesa para un uso m&#xE1;s eficiente de este virus en la terapia del c&#xE1;ncer.

Nazim El-Andaloussi

Tumour Virology Division F010,
Inserm Unit 701

German Cancer Research Center (DKFZ)

Efficient Recombinant Parvovirus Production with the Help of Adenovirus-derived Systems

Nazim El-Andaloussi

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Tumour Virology Division F010,Inserm Unit 701

German Cancer Research Center (DKFZ)

Efficient Recombinant Parvovirus Production with the Help of Adenovirus-derived Systems

Tumour Virology Division F010,
Inserm Unit 701