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Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Miltenyi Biotec,GmbH

&#x89E3;&#x8868;&#x793A;&#x4E00;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x7B49;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x4ECE; 41 &#x5230;&#x8D85;&#x8FC7; 80 &#x6B8B;&#x7559;&#x5BCC;&#x542B;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x7684;&#x80BD;&#x548C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#x62EE;&#x6297;&#x5242;&#x3002;&#x89E3;&#x542B; RGD &#x6216;&#x826F;&#x54C1;&#x5E8F;&#x5217;&#x662F;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x805A;&#x96C6;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x53EF;&#x963B;&#x65AD;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x7684; alpha(IIb)beta(3) &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; alpha(IIb)beta(3) &#x76F8;&#x6BD4;&#x77ED;&#x7EBF;&#x6027;&#x80BD;&#x88AB;&#x5F52;&#x4E8E; RGD &#x6216;&#x826F;&#x54C1;&#x5E8F;&#x5217;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4;&#x7ED3;&#x6784;&#x5185;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x7ED3;&#x5FAE;&#x91CF;&#x662F;&#x53EA;&#x6709; 28 40 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x5C0F;&#x5BCC;&#x542B;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x7684;&#x80BD;&#x7684;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7531;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7ED3;&#x5F62;&#x6210;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x6E10;&#x8D8B;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x4E0A;&#x663E;&#x793A;&#x8BB8;&#x591A;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x987A;&#x5E8F;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#x533A;&#x57DF;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x5AC1;&#x63A5; RGD &#x548C;&#x826F;&#x54C1;&#x542B;&#x80BD;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x4E03;&#x4E2A;&#x548C; 11 &#x4E2A;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x7EB3;&#x5165;&#x4E24;&#x4E2A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x7ED3;&#x5FAE;&#x91CF;&#x3001; &#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684; EETI II &#x548C;&#x9ED1;&#x7D20;&#x76AE;&#x8D28;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x57DF;&#x7684;&#x8349;&#x6839;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8C5A;&#x9F20;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x5C0F;&#x53BB;&#x6574;&#x5408;&#x7D20; obtustatin&#x3002;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x539F;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3001; alpha(IIb)beta(3) &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x805A;&#x96C6;&#x65F6;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5AC1;&#x63A5;&#x591A;&#x80BD;&#x4F5C;&#x7528;&#x5F3A;&#x5F97;&#x591A;&#x3002;&#x88AB;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x660E;&#x7ED3;&#x6784;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x548C;&#x90BB;&#x56FD;&#x7684;&#x5AC1;&#x63A5;&#x7684;&#x80BD;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

&#x5AC1;&#x63A5; RGD &#x548C;&#x826F;&#x54C1;&#x5E8F;&#x5217;&#x5C0F;&#x5BCC;&#x542B;&#x4E8C;&#x786B;&#x952E;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x652F;&#x67B6;&#x4E0A;&#x7684;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x805A;&#x96C6;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Disintegrins represent a group of disulfide-rich peptides ranging in size from 41 to over 80 residues and are antagonists of several integrin receptors. Disintegrins containing an RGD or KGD sequence are potent inhibitors of platelet aggregation as they block the binding of fibrinogen to alpha(IIb)beta(3) integrin. The high affinity binding to alpha(IIb)beta(3) in comparison to short linear peptides has been attributed to the localisation of the RGD or KGD sequence within a defined three-dimensional structure. Cystine knot microproteins are members of another family of small disulfide-rich peptides that consist of only 28-40 amino acid residues. They display numerous biological activities depending on the peptide sequence of loop regions that are fixed on a structural scaffold that is stabilised by three knot-forming disulfide bonds. In the present study we grafted RGD and KGD containing peptide sequences with seven and 11 amino acids, respectively, into two cystine knot microproteins, the trypsin inhibitor EETI-II and the melanocortin receptor binding domain of the human agouti-related protein AGRP, as well as into the small disintegrin obtustatin. The engineered proteins were much more potent to inhibit the fibrinogen binding, alpha(IIb)beta(3) activation and platelet aggregation when compared to the grafted peptides. Differences that were observed between the engineered proteins indicate the importance of the structural scaffold and the amino acids neighbouring the grafted peptide sequences.

Inhibition of platelet aggregation by grafting RGD and KGD sequences on the structural scaffold of small disulfide-rich proteins.

D&eacute;sint&eacute;grines repr&eacute;sentent un groupe de peptides riches en disulfure allant de 41 &agrave; plus de 80 r&eacute;sidus et sont des antagonistes des int&eacute;grines plusieurs. D&eacute;sint&eacute;grines contenant une s&eacute;quence RGD ou KGD sont de puissants inhibiteurs de l&#39;agr&eacute;gation plaquettaire comme ils bloquent la liaison du fibrinog&egrave;ne &agrave; l&#39;int&eacute;grine alpha(IIb)beta(3). La liaison de haute affinit&eacute; &agrave; alpha(IIb)beta(3) par rapport &agrave; petits peptides lin&eacute;aires a &eacute;t&eacute; attribu&eacute;e &agrave; la localisation de la s&eacute;quence RGD ou KGD au sein d&#39;une structure d&eacute;finie en trois dimensions. Microproteins noeud de cystine sont membres d&#39;une autre famille de petits peptides riches en disulfure qui se composent de seulement 28-40 r&eacute;sidus d&#39;acides amin&eacute;s. Ils affichent de nombreuses activit&eacute;s biologiques selon la s&eacute;quence peptidique des r&eacute;gions de boucle qui sont fix&eacute;s sur un &eacute;chafaud structurels qui est stabilis&eacute; par trois ponts disulfures formant des noeuds. Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, nous avons greff&eacute; RGD et KGD contenant des s&eacute;quences peptidiques avec sept et 11 acides amin&eacute;s, respectivement, dans les deux microproteins de noeud de cystine, l&#39;inhibiteur de la trypsine EETI-II et le domaine de liaison m&eacute;lanocortine r&eacute;cepteur de la prot&eacute;ine agouti humaine AGPR, ainsi que dans le petit disintegrin obtustatin. Les prot&eacute;ines modifi&eacute;es ont &eacute;t&eacute; beaucoup plus puissants pour inhiber la liaison du fibrinog&egrave;ne, l&#39;activation de la alpha(IIb)beta(3) et l&#39;agr&eacute;gation plaquettaire par rapport aux peptides greff&eacute;es. Les diff&eacute;rences observ&eacute;es entre les prot&eacute;ines modifi&eacute;es indiquent l&#39;importance de l&#39;&eacute;chafaud structurel et les acides amin&eacute;s voisins les s&eacute;quences peptidiques greff&eacute;es.

Inhibition de l&#39;agr&eacute;gation plaquettaire par greffage RGD et KGD s&eacute;quences sur l&#39;&eacute;chafaud structurel de petites prot&eacute;ines riches en sulfure.

Disintegrins sind eine Gruppe von Disulfid-Reich-Peptiden, die Gr&ouml;&szlig;e von 41 bis &uuml;ber 80 R&uuml;ckst&auml;nde und sind Gegenspieler mehrere Integrin-Rezeptoren. Disintegrins mit eine RGD oder KGD-Sequenz sind potente Inhibitoren der Thrombozytenaggregation, wie sie die Bindung von Fibrinogen, alpha(IIb)beta(3) Integrin blockieren. Hohe Affinit&auml;t binden an alpha(IIb)beta(3) im Vergleich zu kurzen linearen Peptide wurden die Lokalisation der RGD oder KGD Sequenz innerhalb einer definierten dreidimensionalen Struktur zugeordnet. Cystin Knot Microproteins sind Mitglieder von einer anderen Familie kleine Disulfid-Reich-Peptide, die von nur 28-40 Aminos&auml;urereste um zu bestehen. Sie zeigen zahlreiche biologische Aktivit&auml;ten je nach der Peptid-Sequenz der Schleife-Regionen, die behoben werden auf strukturelle Leske, die durch drei Knoten-bildenden Disulfidbr&uuml;cken stabilisiert wird. In der vorliegenden Studie wir veredelt RGD und KGD mit Peptidsequenzen mit sieben und 11 Aminos&auml;uren, jeweils in zwei Cystin Knot Microproteins, der Trypsin Inhibitor EETI-II und der Melanocortin-Rezeptor-Bindung Dom&auml;ne des das menschliche Agouti-related Protein AGRP sowie in den kleinen Disintegrin-Obtustatin. Die ver&auml;nderte Proteine waren viel st&auml;rker auf die Bindung von Fibrinogen, alpha(IIb)beta(3) Aktivierung und Thrombozytenaggregation im Vergleich zu die Aufgepfropfte Peptide hemmen. Unterschiede, die zwischen die ver&auml;nderte Proteine beobachtet wurden zeigen wie wichtig das strukturelle Ger&uuml;st und den Nachbarl&auml;ndern der Aufgepfropfte Peptidsequenzen Aminos&auml;uren.

Hemmung der Thrombozytenaggregation durch Pfropfung RGD und KGD-Sequenzen auf dem strukturellen Schafott der kleine Disulfid-reiche Proteine.

Disintegrins rappresentano un gruppo di peptidi ricchi di solfuro che variano nel formato da 41 a oltre 80 residui e sono antagonisti dei recettori integrin diversi. Disintegrins contenente una sequenza RGD o KGD sono potenti inibitori dell&#39;aggregazione piastrinica come bloccano il legame del fibrinogeno al alpha(IIb)beta(3) integrina. L&#39;associazione ad alta affinit&agrave; per alpha(IIb)beta(3) rispetto a brevi peptidi lineari &egrave; stato attribuito per la localizzazione della sequenza RGD o KGD all&#39;interno di una struttura tridimensionale definita. Cistina nodo microproteine sono membri di un&#39;altra famiglia di piccoli peptidi ricchi di solfuro che consistono di soltanto 28-40 residui dell&#39;amminoacido. Visualizzano numerose attivit&agrave; biologiche secondo la sequenza del peptide di regioni loop che sono fissi su un&#39;impalcatura strutturale che &egrave; stabilizzata da tre legami bisolfurico knot-formante. Nel presente studio abbiamo innestato RGD e KGD contenenti sequenze peptidiche con sette e 11 aminoacidi, rispettivamente, in due microproteine di nodo di cistina, l&#39;inibitore della tripsina EETI-II e il dominio di associazione del recettore melanocortina di umana agouti-related protein AGRP, cos&igrave; come nei obtustatin piccolo disintegrin. Le proteine ingegnerizzate erano molto pi&ugrave; potenti di inibire l&#39;associazione di fibrinogeno, alpha(IIb)beta(3) attivazione e aggregazione piastrinica rispetto ai peptidi innestati. Differenze che sono state osservate tra le proteine ingegnerizzate indicano l&#39;importanza dell&#39;impalcatura strutturale e gli amminoacidi vicini le sequenze peptidiche innestati.

Inibizione dell&#39;aggregazione piastrinica mediante innesto sequenze RGD e KGD sul patibolo strutturale delle piccole proteine disolfuro-ricco.

Disintegrins &#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E; 41 &#x304B;&#x3089; 80 &#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30A2;&#x30F3;&#x30BF;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F; alpha(IIb)beta(3) &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3068;&#x3057;&#x3066; RGD &#x307E;&#x305F;&#x306F; KGD &#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3080; Disintegrins &#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x51DD;&#x96C6;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x77ED;&#x3044;&#x7DDA;&#x5F62;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066; alpha(IIb)beta(3) &#x3078;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x69CB;&#x9020;&#x5185; RGD &#x307E;&#x305F;&#x306F; KGD &#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x3073;&#x76EE; microproteins 28 40 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5C0F;&#x898F;&#x6A21;&#x306E;&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F; 3 &#x7D50;&#x3073;&#x76EE;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x30B8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x69CB;&#x9020;&#x8DB3;&#x5834;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30C9; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x6570;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x306F; RGD &#x3068; 7 &#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30C9; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B; KGD &#x63A5;&#x6728;&#x3068; 11 &#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306B; 2 &#x3064;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x3073;&#x76EE; microproteins, &#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; EETI II &#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x30A2;&#x30B0;&#x30FC;&#x30C1;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; AGRP &#x306E;&#x30E1;&#x30E9;&#x30CE;&#x30B3;&#x30EB;&#x30C1;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A; disintegrin &#x306E; obtustatin &#x306B;&#x3002;&#x7D44;&#x307F;&#x63DB;&#x3048;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30CE;&#x30B2;&#x30F3; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;alpha(IIb)beta(3) &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x51DD;&#x96C6;&#x80FD;&#x306B;&#x63A5;&#x6728;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x5F37;&#x529B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7D44;&#x307F;&#x63DB;&#x3048;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5DEE;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x8DB3;&#x5834;&#x3068;&#x8FD1;&#x96A3;&#x306E;&#x63A5;&#x6728;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x914D;&#x5217;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

RGD &#x3068; KGD &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x4E8C;&#x786B;&#x5316;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x8DB3;&#x5834;&#x3092;&#x63A5;&#x6728;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x51DD;&#x96C6;&#x6291;&#x5236;

Disintegrins 80 &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; 41&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAE30;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; integrin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C;&#xB294;. Disintegrins RGD &#xB610;&#xB294; KGD &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC758; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; alpha(IIb)beta(3) integrin &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9E7;&#xC740; &#xC120;&#xD615; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; alpha(iib)beta(3)&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xCE5C; &#xD654;&#xB825; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; RGD &#xB610;&#xB294; KGD &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xAD6C;&#xC870; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD604;&#xC9C0;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. Cystine &#xB9E4;&#xB4ED; microproteins&#xB9CC; 28-40 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC791;&#xC740; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xB610; &#xB2E4;&#xB978; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3 &#xB9E4;&#xB4ED; &#xD615;&#xC131; &#xC774;&#xD669;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC548;&#xC815; &#xAD6C;&#xC870; &#xBE44; &#xACC4;&#xC5D0; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xACE0;&#xC815; &#xB8E8;&#xD504; &#xC601;&#xC5ED; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC21C;&#xC11C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD22C;&#xC785; RGD&#xC640; KGD 7&#xC640; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; 11 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;, &#xC791;&#xC740; disintegrin obtustatin&#xB85C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB450; cystine &#xB9E4;&#xB4ED; microproteins, &#xD2B8;&#xB9BD; &#xC2E0; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; EETI II &#xC778;&#xAC04;&#xC758; agouti &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; AGRP, melanocortin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC01;&#xAC01;. &#xC124;&#xACC4; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;, alpha(IIb)beta(3) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xC600;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xAC15;&#xB825; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC124;&#xACC4; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xCC28;&#xC774; &#xAD6C;&#xC870; &#xBE44; &#xACC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xC2DD;&#xD560;&#xB41C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC774;&#xC6C3; &#xD558;&#xB294; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xB3C4; &#xC9C0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC791;&#xC740; &#xC774;&#xD669;&#xD654; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBE44; &#xACC4;&#xC5D0; RGD&#xC640; KGD &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC811;&#xBAA9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD608;&#xC18C;&#xD310;&#xC758; &#xC800;&#xD574;.

Desintegrinas representan un grupo de ricos en disulfuro de p&eacute;ptidos que var&iacute;an en tama&ntilde;o de 41 a m&aacute;s de 80 residuos y son antagonistas de los receptores de integrina varios. Desintegrinas que contiene una secuencia RGD o KGD son potentes inhibidores de la agregaci&oacute;n plaquetaria que bloquean la Uni&oacute;n de fibrin&oacute;geno a integrina alpha(IIb)beta(3). La alta afinidad de uni&oacute;n a alpha(IIb)beta(3) en comparaci&oacute;n con p&eacute;ptidos cortos lineales se ha atribuido a la localizaci&oacute;n de la secuencia RGD o KGD dentro de una estructura tridimensional definida. Microproteins de nudo de cistina son miembros de otra familia de peque&ntilde;os p&eacute;ptidos ricos en disulfuro que consisten en s&oacute;lo 28-40 residuos de amino&aacute;cidos. Exhiben numerosas actividades biol&oacute;gicas seg&uacute;n la secuencia del p&eacute;ptido de regiones de lazo que se fijan en un andamio estructural que es estabilizado por enlaces de disulfuro de nudo-formando tres. En el presente estudio injertaron RGD y KGD que contiene secuencias de p&eacute;ptidos con siete y 11 amino&aacute;cidos, respectivamente, en dos microproteins de nudo de cistina, inhibidor de la tripsina EETI-II y el dominio de uni&oacute;n de melanocortina del receptor de la prote&iacute;na humana relacionadas con el agut&iacute; AGRP, as&iacute; como en la peque&ntilde;a conclusi&oacute;n obtustatin. Las prote&iacute;nas de ingenier&iacute;a fueron mucho m&aacute;s potentes para inhibir la Uni&oacute;n del fibrin&oacute;geno, alpha(IIb)beta(3) activaci&oacute;n y agregaci&oacute;n plaquetaria en comparaci&oacute;n con los p&eacute;ptidos injertados. Las diferencias que se observaron entre las prote&iacute;nas Ingenier&iacute;a indican la importancia de andamio estructural y los amino&aacute;cidos vecinos las secuencias de p&eacute;ptido injertado.

Inhibici&oacute;n de la agregaci&oacute;n plaquetaria por injerto secuencias RGD y KGD en el andamio estructural de prote&iacute;nas ricas en disulfuro peque&ntilde;as.

Sandy Reiss

Miltenyi Biotec,GmbH

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue