whole-mount-rna-fluorescent-situ-hybridization-drosophila

Whole Mount RNA Fluorescent <em>in situ</em> Hybridization of <em>Drosophila</em> Embryos

Assessing  the expression pattern of a gene, as well as the subcellular localization  properties of its transcribed RNA, are key features for ...

Institut de Recherches Cliniques de Montréal (IRCM)

&#x867D;&#x7136;&#x8FB9;&#x754C; (BX-C) &#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x679C;&#x8747; Bithorax &#x7684;&#x5143;&#x7D20;&#x5177;&#x6709;&#x5C5E;&#x6027;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7EDD;&#x7F18;&#x5B50;&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x66FF;&#x4EE3;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5143;&#x7D20;&#x6BD4;&#x5355;&#x7EAF;&#x505A;&#x7EDD;&#x7F18;&#x76F8;&#x90BB;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x7BA1;&#x7406;&#x57DF;&#x3002;&#x8BB8;&#x591A; BX C &#x8FB9;&#x754C;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5242;&#x548C;&#x5176;&#x76EE;&#x6807;&#x7684;&#x63A8;&#x52A8;&#x8005;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5FC5;&#x987B;&#x8C03;&#x8282;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x8BA9;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x7684;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5242;&#xFF0C;&#x5176;&#x76EE;&#x6807;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x4E0E;&#x6C9F;&#x901A;&#x3002;&#x9274;&#x4E8E;&#x6B64;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4E3A;&#x5947;&#x65E0;&#x6570; BX C &#x8FB9;&#x754C;&#x5171;&#x4EAB;&#x5C0F;&#x5E8F;&#x5217;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5143;&#x7D20;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4E86;&#x662F;&#x5426;&#x4E0D;&#x540C; BX C &#x8FB9;&#x754C;&#x5143;&#x7D20;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x66FF;&#x4EE3;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x6362;&#xFF0C;&#x4EA4;&#x6362;&#x4E2D; BX-C.Fab 7 &#x548C; Fab 8 &#x7684;&#x8FB9;&#x754C;&#x867D;&#x7136; Fab 8 &#x8FB9;&#x754C;&#x4EC5;&#x90E8;&#x5206;&#x53EF;&#x4EE5;&#x66FF;&#x6362;&#x7684; Fab 7 &#x8FB9;&#x754C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x5230;&#x7684; Fab 7 &#x8FB9;&#x754C;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D6;&#x4EE3; Fab 8 &#x8FB9;&#x754C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x867D;&#x7136;&#x8FB9;&#x754C;&#x5143;&#x7D20;&#x4E0D;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x53EF;&#x4E92;&#x6362;&#x7684;&#x662F;&#x6709;&#x5171;&#x6027;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x7531;&#x54EA;&#x4E2A;&#x8FB9;&#x754C;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5171;&#x6027;&#x5141;&#x8BB8;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x521B;&#x5EFA;&#x529F;&#x80FD;&#x8FB9;&#x754C;&#x3002;

&#x6362;&#x7528;&#x679C;&#x8747; Bithorax &#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x8FB9;&#x754C;&#x3002;

Although the boundary elements of the Drosophila Bithorax complex (BX-C) have properties similar to chromatin insulators, genetic substitution experiments have demonstrated that these elements do more than simply insulate adjacent cis-regulatory domains. Many BX-C boundaries lie between enhancers and their target promoter, and must modulate their activity to allow distal enhancers to communicate with their target promoter. Given this complex function, it is surprising that the numerous BX-C boundaries share little sequence identity. To determine the extent of the similarity between these elements, we tested whether different BX-C boundary elements can functionally substitute for one another. Using gene conversion, we exchanged the Fab-7 and Fab-8 boundaries within the BX-C. Although the Fab-8 boundary can only partially substitute for the Fab-7 boundary, we find that the Fab-7 boundary can almost completely replace the Fab-8 boundary. Our results suggest that although boundary elements are not completely interchangeable, there is a commonality to the mechanism by which boundaries function. This commonality allows different DNA-binding proteins to create functional boundaries.

Boundary swapping in the Drosophila Bithorax complex.

Bien que les &eacute;l&eacute;ments de fronti&egrave;re de la drosophile de Bithorax complexe (BX-C) ont des propri&eacute;t&eacute;s semblables aux isolateurs de la chromatine, les exp&eacute;riences de substitution g&eacute;n&eacute;tique ont d&eacute;montr&eacute; que ces &eacute;l&eacute;ments n&#39;isolez pas simplement des domaines r&eacute;glementaires cis adjacents. Plusieurs limites de BX-C se situent entre Embellisseurs et promoteur de leur cible et doivent moduler leur activit&eacute; afin de permettre des exhausteurs distales communiquer avec le promoteur de leur cible. Avec cette fonction complexe, il est surprenant que les nombreuses limites de BX-C partagent une identit&eacute; de s&eacute;quence peu. Pour d&eacute;terminer l&#39;ampleur de la similitude entre ces &eacute;l&eacute;ments, nous avons test&eacute; si diff&eacute;rents &eacute;l&eacute;ments fronti&egrave;res de BX-C peuvent remplacer fonctionnellement les uns aux autres. &Agrave; l&#39;aide de la conversion g&eacute;nique, nous avons &eacute;chang&eacute; les limites Fab-7 et de Fab-8 dans le BX-C. Bien que la limite de Fab-8 peut remplacer que partiellement la limite Fab-7, nous trouvons que la limite de Fab-7 peut remplacer presque compl&egrave;tement la fronti&egrave;re Fab-8. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que bien que les &eacute;l&eacute;ments fronti&egrave;res ne sont pas compl&egrave;tement interchangeables, il y a un point commun au m&eacute;canisme par lequel &eacute;voluent les limites. Cette communit&eacute; permet diff&eacute;rentes prot&eacute;ines de liaison &agrave; l&#39;ADN cr&eacute;er des limites fonctionnelles.

Limite de permutation dans le complexe Bithorax de drosophile.

Obwohl die Grenze Elemente der Taufliege Bithorax Komplex (BX-C) Chromatin Isolierungen &auml;hnliche Eigenschaften haben, haben genetische Ersetzung Experimente bewiesen, dass diese Elemente nicht nur benachbarte Cis-regulatorische Dom&auml;nen isolieren. Viele BX-C Grenzen zwischen Geschmacksverst&auml;rker und ihre Ziel-Promotor liegen und m&uuml;ssen modulieren ihre T&auml;tigkeit um distale Geschmacksverst&auml;rker f&uuml;r die Kommunikation mit ihrem Ziel-Projekttr&auml;ger zu erm&ouml;glichen. Angesichts dieser komplexen Funktion, ist es verwunderlich, dass die zahlreichen BX-C Grenzen wenig Sequenz Identit&auml;t teilen. Um das Ausma&szlig; der &Auml;hnlichkeit dieser Elemente zu ermitteln, haben wir getestet, ob verschiedene BX-C Grenze Elemente funktional f&uuml;r einander ersetzen k&ouml;nnen. Mit der Gen-Konvertierung, tauschten wir die Fab-7 und Fab-8 Grenzen innerhalb der BX-C. Obwohl die Fab-8-Grenze f&uuml;r die Fab-7-Grenze nur teilweise ersetzen kann, finden wir, dass die Fab-7-Grenze die Fab-8-Grenze fast vollst&auml;ndig ersetzen kann. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass obwohl Grenze Elemente nicht vollst&auml;ndig austauschbar sind, es eine Gemeinsamkeit zu den Mechanismus, mit denen Grenzen-Funktion gibt. Diese Gemeinsamkeit erm&ouml;glicht verschiedene DNA-bindenen Proteine funktionale Grenzen zu erstellen.

Grenze tauschen in der Taufliege Bithorax-Komplex.

Anche se gli elementi di contorno della drosofila Bithorax complesse (BX-C) hanno propriet&agrave; simili a isolatori della cromatina, esperimenti di sostituzione genetica hanno dimostrato che questi elementi pi&ugrave; semplicemente isolare adiacenti domini cis-regolatori. Molti confini BX-C si trovano tra esaltatori e loro promotore bersaglio e devono modulare la loro attivit&agrave; per consentire distale esaltatori di comunicare con loro promotore bersaglio. Data questa funzione complessa, &egrave; sorprendente che i numerosi limiti BX-C condividano poco identit&agrave; di sequenza. Per determinare l&#39;entit&agrave; della somiglianza tra questi elementi, abbiamo testato se diversi elementi di contorno BX-C possono sostituire funzionalmente per l&#39;altro. Utilizzando la conversione genica, ci siamo scambiati i confini Fab-7 e Fab-8 all&#39;interno del BX-C. Anche se il confine Fab-8 pu&ograve; sostituire solo parzialmente il confine Fab-7, troviamo che il limite di Fab-7 quasi completamente pu&ograve; sostituire il confine Fab-8. I nostri risultati suggeriscono che anche se gli elementi di contorno non sono completamente intercambiabili, c&#39;&egrave; una comunanza al meccanismo di funzione di confini. Questa comunanza permette diversi DNA-binding proteins creare confini funzionali.

Limite di scambio nel complesso Bithorax della drosofila.

&#x5883;&#x754C;&#x8981;&#x7D20; (BX-C) &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8; Bithorax &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D76;&#x7E01;&#x4F53;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5358;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x7D76;&#x7E01;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3053;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x7F6E;&#x63DB;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E; BX C &#x5883;&#x754C;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x9593;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x306E;&#x901A;&#x4FE1;&#x306B;&#x9060;&#x4F4D;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x8003;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x591A;&#x6570;&#x306E; BX C &#x5883;&#x754C;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9; id &#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x9593;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B; BX C &#x5883;&#x754C;&#x8981;&#x7D20;&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x5225;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3092;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x63DB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; BX C. &#x5185;&#x306E; Fab 7 &#x3068; Fab 8 &#x306E;&#x5883;&#x754C;&#x3092;&#x4EA4;&#x63DB;Fab 8 &#x5883;&#x754C;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x3057;&#x304B; Fab 7 &#x306E;&#x5883;&#x754C;&#x3092;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; Fab 8 &#x5883;&#x754C; Fab 7 &#x5883;&#x754C;&#x304C;&#x307B;&#x307C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5883;&#x754C;&#x8981;&#x7D20;&#x306F;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4EA4;&#x63DB;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x5883;&#x754C;&#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x5171;&#x901A;&#x6027;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5171;&#x901A;&#x5225;&#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x5883;&#x754C;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8; Bithorax &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x30B9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x5883;&#x754C;&#x3002;

(BX-C)&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; Bithorax &#xACBD;&#xACC4; &#xC694;&#xC18C; chromatin &#xC808;&#xC5F0;&#xCCB4;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC18D;&#xC131;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;, &#xBE44;&#xB85D; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xB2E8;&#xC21C;&#xD788; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; cis &#xADDC;&#xC815; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xBCF4; &#xC628; &#xD560; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB300;&#xCCB4; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC5F0;. &#xB9CE;&#xC740; BX C &#xACBD;&#xACC4; &#xAC15;&#xD654; &#xBC0F; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774; &#xACE0; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xC99D;&#xAC15; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1; &#xBAA8;&#xD130;&#xC640; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC10;&#xC548;&#xD560; &#xB54C;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xC77C;&#xC774; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; BX C &#xACBD;&#xACC4; &#xC791;&#xC740; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; id &#xACF5;&#xC720;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xAC04;&#xC758; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xB2E4;&#xB978; BX C &#xACBD;&#xACC4; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xC11C;&#xB85C; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xCCB4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; BX-C. &#xB0B4; &#xD339; 7 &#xBC0F; &#xD339; 8 &#xACBD;&#xACC4;&#xB97C; &#xAD50;&#xD658; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD658; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xD339; 8 &#xACBD;&#xACC4; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801; &#xC73C;&#xB85C;&#xB9CC; &#xD339; 7 &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xCCB4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD339; 7 &#xACBD;&#xACC4; &#xD339; 8 &#xACBD;&#xACC4;&#xB97C; &#xAC70;&#xC758; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xB300;&#xCCB4; &#xC218; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xACBD;&#xACC4; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xAD50;&#xD658;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;, &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xACBD;&#xACC4; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xACF5;&#xD1B5;&#xC810;&#xC740; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACF5;&#xD1B5;&#xC810; &#xB2E4;&#xB978; DNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xACBD;&#xACC4;&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACBD;&#xACC4; Drosophila Bithorax &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAD50;&#xD658;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Aunque los elementos de la frontera del complejo Bithorax de Drosophila (BX-C) tienen propiedades similares a los aisladores de la cromatina, experimentos de sustituci&oacute;n gen&eacute;tica han demostrado que estos elementos m&aacute;s que simplemente aislar dominios cis-reguladoras adyacentes. Muchos l&iacute;mites de BX-C mienten entre potenciadores y promotor de su destino y deben modular su actividad para permitir distales potenciadores para comunicarse con el promotor de su destino. Dada esta funci&oacute;n compleja, es sorprendente que los numerosos l&iacute;mites BX-C comparten poco identidad de secuencia. Para determinar el grado de la similitud entre estos elementos, probamos si diferentes elementos de BX-C l&iacute;mite funcionalmente pueden sustituir por uno con el otro. Utilizando la conversi&oacute;n del gene, intercambiamos los l&iacute;mites Fab-7 y Fab-8 en el BX-C. Aunque el l&iacute;mite de la Fab-8 s&oacute;lo parcialmente puede sustituir para el l&iacute;mite de la Fab-7, encontramos que el l&iacute;mite de la Fab-7 puede substituir casi totalmente el l&iacute;mite de la Fab-8. Nuestros resultados sugieren que aunque elementos l&iacute;mite no son totalmente intercambiables, hay una coincidencia que el mecanismo por el cual funci&oacute;n de l&iacute;mites. Esta compatibilidad permite diversas prote&iacute;nas de uni&oacute;n al ADN crear l&iacute;mites funcionales.

L&iacute;mite de intercambio en el complejo Bithorax de Drosophila.

A &gt; 300 kb &#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x76D1;&#x7BA1;&#x533A;&#x57DF;&#x662F;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x9002;&#x5F53;&#x4E09;&#x4E2A; bithorax &#x590D;&#x6742; (BX-C) &#x540C;&#x6E90;&#x5F02;&#x578B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x9057;&#x4F20;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x6A21;&#x578B;&#x63D0;&#x51FA;&#x65E0;&#x6570; BX C &#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x76D1;&#x7BA1;&#x5143;&#x7D20;&#x5728;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E0A;&#x9650;&#x5236;&#x901A;&#x8FC7;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6216;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28; parasegment &#x7279;&#x5B9A;&#x57DF;&#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5242;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x542F;&#x52A8;&#x5668;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x63D0;&#x8BAE;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x8FD9;&#x4E00;&#x590D;&#x6742;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x57DF;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6240;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; InSIRT &#x7684; iab 6 &#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x89C4;&#x7AE0;&#x57DF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x539F;&#x4F4D;&#x5939;&#x5C42;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x521B;&#x5EFA;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F71;&#x54CD; iab 6 &#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5177;&#x4F53;&#x4FEE;&#x6539; iab 6 &#x542F;&#x52A8;&#x5668;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684; iab 6 &#x542F;&#x52A8;&#x5668;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x542F;&#x52A8;&#x5668;&#x51FD;&#x6570;&#x4E0D;&#x6765;&#x76F4;&#x63A5;&#x63A7;&#x5236;&#x540C;&#x6E90;&#x5F02;&#x578B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x800C;&#x662F;&#x63A7;&#x5236;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5242;&#x548C;&#x6D88;&#x97F3;&#x5668;&#x72EC;&#x8054;&#x4F53;&#x7BA1;&#x7406;&#x57DF;&#x5185;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;

&#x542F;&#x52A8;&#x5668;&#x5143;&#x7D20;&#x51FD;&#x6570;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A; BX C &#x4FC3;&#x8FDB;&#x5242;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;

A >300 kb cis-regulatory region is required for the proper expression of the three bithorax complex (BX-C) homeotic genes. Based on genetic and transgenic analysis, a model has been proposed in which the numerous BX-C cis-regulatory elements are spatially restricted through the activation or repression of parasegment-specific chromatin domains. Particular early embryonic enhancers, called initiators, have been proposed to control this complex process. Here, in order to better understand the process of domain activation, we have undertaken a systematic in situ dissection of the iab-6 cis-regulatory domain using a new method, called InSIRT. Using this method, we create and genetically characterize mutations affecting iab-6 function, including mutations specifically modifying the iab-6 initiator. Through our mutagenesis of the iab-6 initiator, we provide strong evidence that initiators function not to directly control homeotic gene expression but rather as domain control centers to determine the activity state of the enhancers and silencers within a cis-regulatory domain.

Initiator elements function to determine the activity state of BX-C enhancers.

A &gt; 300Ko r&eacute;gion cis-r&eacute;gulation est n&eacute;cessaire pour l&#39;expression correcte des trois bithorax complexes (BX-C) hom&eacute;otiques g&egrave;nes. Bas&eacute; sur l&#39;analyse g&eacute;n&eacute;tique et transg&eacute;nique, un mod&egrave;le a &eacute;t&eacute; propos&eacute; dans lequel les nombreux &eacute;l&eacute;ments cis-r&eacute;gulation BX-C sont dans l&#39;espace restreints par le biais de l&#39;activation ou la r&eacute;pression des domaines sp&eacute;cifiques parasegment la chromatine. Particuliers exhausteurs embryonnaires pr&eacute;coces, appel&eacute;s initiateurs, ont &eacute;t&eacute; propos&eacute;es pour contr&ocirc;ler ce processus complex. Ici, afin de mieux comprendre le processus d&#39;activation du domaine, nous avons entrepris une dissection syst&eacute;matique in situe du domaine r&eacute;glementaire cis iab-6 en utilisant une nouvelle m&eacute;thode, appel&eacute;e InSIRT. En utilisant cette m&eacute;thode, nous cr&eacute;ons et g&eacute;n&eacute;tiquement caract&eacute;riser les mutations affectant la fonction CCI-6, y compris des mutations modifiant notamment l&#39;initiateur de la CCI-6. Par le biais de notre mutag&eacute;n&egrave;se de l&#39;initiateur de la CCI-6, nous fournissons des preuves solides que les initiateurs fonctionnent pas pour contr&ocirc;ler directement l&#39;expression des g&egrave;nes hom&eacute;otiques mais plut&ocirc;t en tant que domaine contr&ocirc;le centres afin de d&eacute;terminer l&#39;&eacute;tat de l&#39;activit&eacute; des rehausseurs et silencieux au sein d&#39;un domaine de cis-r&eacute;gulation.

Fonction d&#39;initiateur &eacute;l&eacute;ments pour d&eacute;terminer l&#39;&eacute;tat de l&#39;activit&eacute; d&#39;exhausteurs de BX-C.

A &gt; 300KB Cis-regulatorischen Region ist f&uuml;r den korrekten Ausdruck der drei Bithorax Komplex (BX-C) HOM&Ouml;OTISCHE Gene erforderlich. Auf der Grundlage genetischer und transgenen Analyse wurde ein Modell vorgeschlagen in dem die zahlreiche BX-C-Cis-regulatorischen Elementen r&auml;umlich beschr&auml;nkt durch die Aktivierung oder Unterdr&uuml;ckung der Parasegment-spezifische Chromatin-Dom&auml;nen sind. Bestimmten fr&uuml;hen embryonalen Geschmacksverst&auml;rker, genannt-Initiatoren sind vorgeschlagen worden, um diesem komplexen Prozess zu steuern. Um den Prozess der Dom&auml;ne Aktivierung besser zu verstehen, haben wir hier eine systematische in-situ-Pr&auml;paration der die Iab-6-Cis-regulatorische Dom&auml;ne eine neue Methode namens InSIRT durchgef&uuml;hrt. Mit dieser Methode erstellen und genetisch Mutationen Iab-6-Funktion, einschlie&szlig;lich Mutationen speziell &Auml;ndern des Iab-6-Initiators zu charakterisieren. Durch unsere Mutagenese des Initiators Iab-6 leisten wir zuverl&auml;ssig nachgewiesen, dass die Initiatoren Funktion nicht direkt steuern Homeotic Gen-Ausdruck, sondern eher als Dom&auml;ne steuern Zentren zum Ermitteln des Aktivit&auml;tsstatus der Geschmacksverst&auml;rker und Schalld&auml;mpfer innerhalb einer Cis-regulatorische Dom&auml;ne.

Initiator Elemente Funktion des Aktivit&auml;tsstatus des BX-C Geschmacksverst&auml;rker zu bestimmen.

A &amp;gt; regione cis-regolatori 300 kb &egrave; necessaria per la corretta espressione dei tre bithorax complessi geni omeotici (BX-C). Basato sull&#39;analisi genetica e transgenico, un modello &egrave; stato proposto in cui numerosi elementi cis-regolatori BX-C sono spazialmente limitati attraverso l&#39;attivazione o la repressione dei domini della cromatina parasegment specifici. Particolare esaltatori embrionale precoce, chiamati iniziatori, sono stati proposti per il controllo di questo complesso processo. Qui, al fine di comprendere meglio il processo di attivazione del dominio, abbiamo intrapreso una sistematica dissezione in situ del dominio cis-regolatori iab-6 utilizzando un nuovo metodo, denominato InSIRT. Utilizzando questo metodo, creare e caratterizzare geneticamente mutazioni che colpiscono la funzione iab-6, tra cui le mutazioni in particolare modificando l&#39;iniziatore iab-6. Attraverso il nostro mutagenesi dell&#39;iniziatore iab-6, forniamo forte evidenza che gli iniziatori funzionano non per controllare direttamente l&#39;espressione di gene omeotici, ma piuttosto come dominio di controllo centri per determinare lo stato di attivit&agrave; dei rinforzatori e silenziatori all&#39;interno di un dominio cis-regolatori.

Funzione di iniziatore elementi per determinare lo stato di attivit&agrave; dei rinforzatori BX-C.

A &#x76EE; 300 kb &#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x9818;&#x57DF; 3 bithorax &#x8907;&#x5408;&#x4F53; (BX-C) &#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7FA4;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x5F0F;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x3068;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E; BX C cis &#x898F;&#x5236;&#x8981;&#x7D20;&#x304C;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x307E;&#x305F;&#x306F; parasegment &#x56FA;&#x6709;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x93AE;&#x5727;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x7A7A;&#x9593;&#x5236;&#x7D04;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;.&#x30A4;&#x30CB;&#x30B7;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;.&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F; InSIRT &#x3067;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; iab 6 &#x30B7;&#x30B9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7684; in situ &#x90ED;&#x6E05;&#x3092;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x306E; iab 6 &#x30A4;&#x30CB;&#x30B7;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;iab 6 &#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x5909;&#x7570; iab 6 &#x30A4;&#x30CB;&#x30B7;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30A4;&#x30CB;&#x30B7;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x76F4;&#x63A5;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC; cis &#x898F;&#x5236;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30CB;&#x30B7;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x95A2;&#x6570;&#x306F;&#x3001;BX C &#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

A &amp;gt; 300 kb cis &#xADDC;&#xC81C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC774; &#xC138; bithorax &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; (BX-C) homeotic &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; BX C cis &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB610;&#xB294; parasegment &#xD2B9;&#xC815; chromatin &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xB77C;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30;&#xC790;, &#xD2B9;&#xC815; &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544; &#xAC15;&#xD654; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB354; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC; InSIRT &#xB77C;&#xB294; &#xC0C8; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB0B4; &#xC0AC;-6 ci &#xADDC;&#xC815; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC808; &#xAC1C;&#xB97C; &#xCC29;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xC774; &#xD2B9;&#xD788; &#xB0B4; &#xC0AC; 6 &#xCD08;&#xAE30;&#xC790; &#xC218;&#xC815; &#xB4F1; &#xB0B4; &#xC0AC; 6 &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD2B9;&#xC131;. &#xB0B4; &#xC0AC; 6 &#xCD08;&#xAE30;&#xC790;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; mutagenesis &#xD1B5;&#xD574; &#xCD08;&#xAE30;&#xC790; &#xC9C1;&#xC811; homeotic &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC624;&#xD788;&#xB824; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC13C;&#xD130; &#xAC15;&#xD654; &#xBC0F; cis &#xADDC;&#xC815; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2EC; &#xC558; &#xC8E0;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xAC83;&#xB3C4; &#xC5C6;&#xACE0; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCD08;&#xAE30;&#xC790; &#xC694;&#xC18C; &#xD568;&#xC218; BX C &#xC99D;&#xAC15;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;.

A &gt; 300 kb cis-reguladores de la regi&oacute;n se requiere para la adecuada expresi&oacute;n de los tres (BX-C) bithorax complejos home&oacute;ticos genes. Basado en el an&aacute;lisis gen&eacute;tico y transg&eacute;nico, un modelo se ha propuesto que los numerosos elementos cis-reguladores de BX-C son espacialmente restringidos a trav&eacute;s de la activaci&oacute;n o represi&oacute;n de dominios espec&iacute;ficos parasegment cromatina. Particulares potenciadores embrionarios tempranos, llamados iniciadores, se han propuesto para el control de este complejo proceso. Aqu&iacute;, con el fin de comprender mejor el proceso de activaci&oacute;n del dominio, hemos emprendido una sistem&aacute;tica disecci&oacute;n in situ del dominio cis-regulador iab-6 usando un nuevo m&eacute;todo, llamado InSIRT. Usando este m&eacute;todo, creamos y caracterizar gen&eacute;ticamente las mutaciones que afectan la funci&oacute;n de iab-6, incluyendo mutaciones modificar espec&iacute;ficamente el iniciador de la iab-6. A trav&eacute;s de nuestra mutag&eacute;nesis del iab-6 iniciador, ofrecemos pruebas s&oacute;lidas que iniciadores funci&oacute;n no para controlar directamente la expresi&oacute;n de genes home&oacute;ticos pero algo como dominio controlar centros para determinar el estado de actividad de los potenciadores y silenciadores dentro de un dominio cis-regulador.

Carole Iampietro

Institut de Recherches Cliniques de Montréal (IRCM)

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos