11.20 : 고성능 액체 크로마토그래피: 검출기 유형

고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)에서 검출기의 역할은 크로마토그래피 컬럼에서 나오는 용질을 분석하는 것입니다. 검출기는 용질의 특성을 인식하고 해당 전기 신호를 생성하며, 이 신호는 컴퓨터에서 크로마토그램이라고 하는 검출기의 반응 대 용출 시간의 판독 가능한 그래프로 변환됩니다. HPLC 검출기에는 여러 유형이 있으며, 각각 분석물 특성과 필요한 감도에 따라 고유한 장점과 한계가 있습니다. 단일 HPLC 검출 방법으로는 모든 분석물을 검출할 수 없다는 점에 유의하는 것이 중요합니다. 이러한 이유로 HPLC 시스템은 동일한 실행에서 두 개 이상의 검출기를 통합하여 검출 정확도와 감도를 향상시킬 수 있습니다. 일반적으로 사용되는 HPLC 검출기에는 분광 광도 검출기, 굴절률 검출기, 전기화학 검출기, 질량 분석 검출기, 푸리에 변환 적외선(FTIR) 검출기, 광산란 및 광이온화 검출기가 있습니다.

UV-가시광선(UVD) 및 형광 검출기(FLD)는 분광 광도 검출기입니다. UV-가시광선 검출기는 비흡수 이동상이 있는 특정 파장에서 분석물이 흡수한 빛의 양을 측정합니다. 간단하고 신뢰할 수 있으며 감도가 좋기 때문에 널리 사용됩니다. 방향족 또는 공액 이중 결합 시스템이 있는 화합물을 검출하는 데 가장 효과적입니다. 형광 검출기는 특정 파장의 빛에 의해 여기될 때 분석물이 방출하는 형광을 측정합니다. 매우 민감하고 선택적이어서 형광 특성이 있는 화합물을 검출하는 데 적합합니다. 일반적으로 의약품, 환경 오염 물질, 석유 제품 및 천연물 분석에 사용됩니다.

굴절률 검출기(RID)는 검출기를 통과할 때 이동상과 분석물 사이의 굴절률 차이를 측정합니다. 거의 모든 용질에 반응하지만 몇 가지 단점이 있습니다. 압력과 온도의 변화에 ​​민감하고 감도가 낮으며 미량 분석물을 검출할 수 없습니다. 이들은 일반적으로 당, 지질, 폴리머와 같은 비발색성 및 비형광성 화합물을 분석하는 데 사용됩니다.

전기화학 검출기(ECD)는 산화 또는 환원 전위와 같은 분석물의 전기적 특성을 측정합니다. 이러한 검출기는 전류법, 전압법, 전기량법 및 전도도법을 기반으로 합니다. 이들은 일반적으로 신경전달물질, 아미노산, 살충제와 같이 전기화학적으로 활성일 수 있는 화합물을 분석하는 데 사용됩니다.

질량 분석법(MS) 검출기는 질량 대 전하 비율을 기준으로 분석물을 식별하고 정량화합니다. 이들은 매우 민감하고 특이적이어서 미량의 분석물을 검출하는 데 적합합니다. 이러한 검출기의 문제점은 기체 상태 표본이 필요하고 용매를 증발시켜야 한다는 것입니다. 질량 분석기는 일반적으로 단백질, 펩타이드, 대사산물과 같은 복잡한 혼합물을 분석하는 데 사용됩니다. 다른 검출기로는 FTIR, 광산란 및 광이온화 검출기가 있습니다.