JoVE Logo
저자
연락처

로그인

JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.

기사 소개

  • 요약
  • 초록
  • 서문
  • 프로토콜
  • 결과
  • 토론
  • 공개
  • 감사의 말
  • 자료
  • 참고문헌
  • 재인쇄 및 허가

요약

이 종이 다른 발달 단계에서 phenotypic 출력의 범위에 노출의 영향을 공부 하 고의 목표를 가진 오염 물질을 속 초파리 에서 종 노출 및 이상 한 세대에 대 한 상세한 프로토콜을 제공 합니다.

초록

응급 속성 및 외부 요인 (인구 수준 및 생태계 수준에서에서 상호 작용, 특히) 하지만 그들은 거의 독성 연구에서 고려 생태학적으로 중요 한 끝점, 중재에 중요 한 역할을 재생 합니다. D. melanogaster 이용과, 몇 가지 이름을 행동, 신경, 그리고 유전자에 미치는 영향에 대 한 독성 모델로 떠오르고 있다. 더 중요 한 것은, 속 초파리 에서 응급 속성 및 독성 연구에서 생태학적으로 관련 질문에 응답 하는 통합 프레임 워크 접근을 위한 모델 시스템으로 활용할 수 있습니다. 이 종이의 목적은 phenotypic 출력 및 생태 관련 질문의 범위에 대 한 모델 시스템으로 사용 될 오염 물질을 속 초파리 에서 노출에 대 한 프로토콜을 제공 하는 것입니다. 좀 더 구체적으로,이 프로토콜은 1로 사용할 수 있습니다) 여러 생물학 조직의 수준 연결 및 두 개인 및 인구 수준 피트 니스;에 유독의 영향을 이해 2) 테스트 이용과 발달 노출;의 여러 단계에서의 영향 3) 테스트 대가족제 및 진화 의미 오염 물질; 그리고 4) 동시에 여러 오염 물질과 스트레스 테스트.

서문

매년, 약 1000 새로운 화학 물질 화학 산업1,2;에 의해 소개 된다 그러나, 이러한 화학 물질의 단지 작은 비율의 환경에 미치는 영향 유통2,3전에 테스트 됩니다. 대규모 재해는 일반적인, 오염 물질의 큰 다양 한 sublethal 및 만성 노출은 둘 다 인간과 야생 동물4,5에서 광범위 한. Ecotoxicology 및 환경 독물학의 역사적인 초점 생존6, 에 오염 물질의 영향을 측정 하는 수단으로 치 사 율, 단일 화학 노출, 급성 노출과 노출의 생리 적 효과 테스트 하는 것 이었다 7 , 8 , 9 , 10. 역할 때문에 현재 접근 제한 동물 실험을 윤리적이 고 비-침략 적 접근으로 변화 하지만, 그 개발, 응급 속성 및 외부 요인 (인구 수준 등을 생태계 수준의 상호 작용) 생태학적으로 중요 한 끝점8중재에 재생 합니다. 따라서, 야생 동물 및 실험실에서 척추 동물을 희생 하지 않고 좀 더 전체적인 접근 방식을 통합 하는 방법에 대 한 필요가 있다.

무척 추 동물 모델 시스템, 초파리 melanogaster, 독성 시험에 대 한 좀 더 전체적인 접근에 대 한 필요를 해결 하는 매력적인 대안입니다. D. melanogaster, 전 세기에 대 한 인간 관련 유전자 연구에 대 한 무척 추 동물 모델 시스템으로 원래 개발 되었다11. D. melanogaster 지금 눈에 띄게는 척추 모델 대신 여러 가지 이유로: 1) 유전자와 D. melanogaster 그리고 인간; 사이 통로의 보존 2) 짧은 생성 시간; 척추 모델에 비해 3) 저렴 한 비용, 유지 보수; 4) 큰 샘플 크기; 생성 완화 그리고 5) phenotypic 및 생태학-관련 끝점11,12,13,,1415,16,17 테스트 하기 위해 사용할 수의 과다 .

여러 실험실11,15,16,17,18,19,20,,2122, 23 , 24 , 25 지금 사용 하는 D. melanogaster 척추 모델 대신 독성 테스트에 대 한 오염 인 간에 미치는 영향을 이해 하. 지역 야생 종의 초파리 이용 될 수 있다, 뿐만 아니라, 야생 동물 및 인간 생태학 대답에 대 한 독성 모델-, 행동-, 그리고 조직의 여러 생물 학적 수준에서 진화론 관련 질문. 모델 초파리 속 안에 종을 사용 하 여, 여러 측정 끝점은 가능한11,15,,1618,19,20 ,,2122,23,,2425. In addition, 초파리 모델을 사용 하 여, 독물학 수: 1) 윤리적 조직;의 여러 생물 학적 수준에서 효과 링크 2) 통합 응급 요소와 개발의 역할 연구 3) 생태학적으로 중요 한 끝점 (뿐만 아니라 의학적으로 중요 한 끝점); 4) 동시에; 여러 스트레스 테스트 5) 및 장기 테스트 대가족제 (예: 진화 및 transgenerational) 스트레스의 의미. 따라서, 초파리 모델 시스템으로 사용 하 여 다양을 한 접근, 공부 하는 실험실에 D. melanogaster 의 타고 난된 긴장으로 기계적 접근에 국한 되지 않을 수 있습니다.

이 종이에 우리는 양육 하 고 다양 한 독성에 관한 질문에 대답을 초파리 를 수집 하기 위한 방법을 제시. 좀 더 구체적으로, 우리는 1에 대 한 방법론을 설명) 하나 이상의 오염 물질; 엮 여 매체에 초파리 를 양육 2) 개발 (예: 제 3 탈피 애벌레, 번데기의 경우, 새로 eclosed 성인 그리고 성숙한 어른 방황); 전체 초파리 수집 그리고 3) 장기 toxicant 노출의 진화 의미 뿐만 아니라 테스트 세대간 및 transgenerational 전송, 오염된 매체에 초파리 를 양육. 이 프로토콜, 이전 작가18,19,20,,2122,23,24를 사용 하 여,25 보고 발달의 다른 생리 적, 유전적, 그리고 행동 효과 지도 (Pb2 +) 노출. 이 프로토콜 독물학을 어떻게 오염 물질이 모두 인간 고도 점점 더 오염 된 환경에서 야생 동물에 대 한 위험 요소를 이해 하는 데 필수적 이다 전체 론 독물학 방법을 사용 수 있습니다.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

프로토콜

다음 프로토콜은 독 소의 구강 섭취가 적절 한; 때 오염된 매체에 초파리 속에서 후방에 사용 되는 실험 프로토콜 노출의 다른 형태는 초파리 모델11,15,,1626를 사용 하 여 가능 합니다. 이 프로토콜에서 설명 하는 방법 이전 허쉬 외. 으로 설명 되었습니다. 19 와 피터슨 외. 23 , 24 , 25.

1. 연구 실험실에서 초파리 의 주식 인구를 설정

  1. 일정 온도, 빛: 다크 사이클 및 테스트 종의 환경 설정에 따라 습도 부 화기를 설정 하 여 초파리 의 집 주식 인구는 환경 제어 인큐베이터 (또는 작은 방)을 설정 합니다.
    참고: 기본 환경 조건 연구에 대 한 선택한 종족의 기본 생태에 따라 달라 집니다. 예를 들어 D. melanogaster 이남의 아프리카27 기본 이며 25 ° C, 12시 12분 빛: 다크 사이클, 그리고 약 60% 습도16,18,,1920 에서 일반적으로 유지 관리 , 21 , 22 , 23 , 24 , 25 , 28 , 29 , 30. 디 몬타나 범위 대부분의 캐나다 및 midwest 미국, 많은 추운 지역에 걸쳐 확장 하는 다른 한편으로, 따라서, 디 몬타나 19-20 ° C 그리고 때로는 24 시간 빛 정권 짝짓기 시즌31동안 조건을 시뮬레이션에서 일반적으로 유지 됩니다. 초파리의 다양 한 수 종의 지리적인 범위의 자세한 설명에 대 한 초파리 Speciation 패턴 웹사이트32를 참조 하십시오.
  2. 어느 주식 센터에서 선호 초파리 종 또는 타고 난된 라인을 얻기 (재료의 표 참조), 요청, 또는 수집 야생 현장에서 유전자 변수 인구에 따라 다른 연구소.
    참고: 다음 단계는 연구 실험실에서 유지 하기 위해 초파리 의 유전자 변수, 인구를 수집 하는 방법을 설명 합니다. 이러한 방법은 한 미끼 소스와 대상 특정 종 보다 다양 한 종족을 한 번에 수집 하 Markow 고 O'Grady33 와 베르너와 Jaenike34 에서 수정 되었습니다.
    1. 대여섯 익은 바나나는 냉장고에 하룻밤 동결 하 고 미끼 트랩을 설정 하기 전에 서 리 없애다.
    2. 파리 미끼 병에 탈출 하지 캡처할 수 있도록 병 앞 u 자 모양의 슬릿을 절단 하 여 여러 1-2 L 플라스틱 병을 준비 합니다. 파리는 뚜껑을 통해 이스케이프 하지 않습니다 그래서 그들의 병 뚜껑을 가진 플라스틱 병 모자.
    3. 추가 defrosted 바나나 병의 바닥에 약 1 인치 바나나의 병의 하단에 포함 되어 있습니다. 병에 잘 익은 토마토 슬라이스를 놓습니다. 있도록 바나나 효 모 슬러리에 흡수 되 면 병의 바닥에 바나나를 효 모 슬러리 (맥주 만드는 과정에서 남은 효 모)를 추가 합니다.
    4. 그래서 파리는 효 모 슬러리와 바나나에 걸어 깨끗 한 기판 병 (수직 수직 위치)에 나무 막대기를 추가 합니다.
      그림 1 에서는 이러한 방법의 최종 제품을 보여 줍니다.
    5. 잠시 미끼 나무에서 밤새 병과 24 h. 입 aspirate 모든 병 날아 확인 그리고 개별적으로 iso 여성 라인을 만드는 매체와 튜브에 여성을 배치.
      그러나 참고: 다중 여성 라인 만들 수 있습니다,, 경우에 각 종족의 암컷을 명확 하 게 확인 될 수 있다. 또한, 파리 속 초파리 내 다른 생태 틈새를 점유 하 고 그 틈새 (베르너와 Jaenike34);에 따라 다른 식이 요구 해야한다 다이어트 권장 사항 및 음식 요리법 베르너와 Jaenike34 을 참조 하십시오.
    6. 수집 된 초파리 의 종 식별 해 부 현미경 아래 성인 F1 자식 검사 (Markow 및 O'Grady33 및 다양 한 수 종 식별에 베르너와 Jaenike34 참조 ).

figure-protocol-3032
그림 1 : 트랩 및 미끼 필드에 초파리 의 강포한 인구를 수집 하는 데 사용의 그림 표현. (A) 플라이 트랩 콜로라도에 로컬 필드 사이트에서 설정 합니다. (B)는 파리의 가까이 보기가 필드 사이트 설정 트랩. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

  1. Iso-여성 또는 보육 환경 제어 또는 일정 한 온도 빛: 다크 사이클, 습도에 다 여성 라인을 유지 합니다. 이렇게 하려면 집 튜브에서 파리 또는 병에 매체 그리고 매체에 계란을 낳 기 위해 벗 여성을 허용. 애벌레와 번데기의 존재에 대 한 튜브를 모니터링 합니다.
    참고: 파리 속 초파리 내 다른 생태 틈새를 점유 하 고 다른 식이 요구 사항 및 그 틈새33,34에 따라 환경 비 생물 적인 환경 설정을 해야한다. 환경 및 식이 권장 (환경과 비행 축산에 대 한 추가 지침) 과천시와 밀러28에서 찾을 수 있습니다 섀 퍼 외. 29, stocker 및 용감한30, Markow 및 O'Grady33, 그리고 베르너와 Jaenike34. 야생 종에 사용 하 여, 종 확인 될 수 있다 때까지 로컬 환경 조건은 인큐베이터에서 시뮬레이션할 수 있습니다.
  2. 신선한 매체 주식을 자주 전송, 건강 한 라인을 유지 하 고 진드기에서 감염을 방지 하 오래 된 튜브를 삭제.
    참고: 전송의 주파수는 종의 라이프 사이클에 따라 달라 집니다. 예를 들어 전송 초파리 melanogaster 2 주마다 신선한 매체. 실험실에서 라인을 유지에 관한 자세한 내용은 랜드 외를 참조 하십시오. 16, 과천시와 밀러28, 섀 퍼 외. 29, stocker 및 용감한30, 그린스펀35및 과학 교육 데이터베이스36.

2. 후면 초파리 오염된 매체에

참고: 처음 또는 새로운 contaminant(s)와 초파리 실험실에서 테스트를 하는 경우 식별 치명적인 복용량 (참조 Castaneda 외. 37 그리고 Massie 외. 방법에 대 한 38 )와 LD50 (Castaneda 외를 참조 하십시오. 37 Akins 외. 방법에 대 한 39 ) 첫 번째. 그런 다음 원하는 phenotypic 출력;에 대 한 생물학 관련 농도 식별 하는 복용량 응답 곡선을 실행 허쉬 외를 참조 하십시오. 19 와 저 우 외. 40 방법에 대 한입니다.

  1. 오염 물질의 화학에 따라 원하는 concentration(s)에서 오염 된 매체의 재고 솔루션을 준비 합니다.
    참고: 예: PbAc의 재고 솔루션을 준비: 오염 물에 도달 원하는 농도 매체까지 증류수 (dH20)를 오염 물질을 추가 하 여 납 아세테이트 (PbAc) 매체의 재고 솔루션을 준비. 예를 들어 1000 µ M의 재고 솔루션 PbAc, 준비 될 수 있다 1000 µ M에 도달할 때까지 PbAc dH20을 추가 하 여 PbAc. 또한, 원하는 농도를 재고 솔루션 (예: 는 1000 µ M PbAc 솔루션)를 희석 (500 µ M 같은 PbAc) 재고 또한 이러한 솔루션을 유지 하 고.
  2. 매체, 제어 매체 역할을 다음 제조 업체의 지침을 준비 합니다. 추가 매체, 다음 제조 업체의 지침; 준비 그러나, 보충 dH20 오염 솔루션을 준비.
    참고: 예를 들어 인스턴트 초파리 매체를 사용 하는 경우 추가 약 1 작은 술 인스턴트 중간 플라스틱 병을. 매체를 약 5-5.5 mL dH20을 추가 합니다. 라이브 베이커의 효 모 제어 매체 준비의 몇 알갱이 뿌려. 실험적인 매체를 준비 하려면 재고 솔루션을 보완 (500 µ M 같은 PbAc) dH20.
  3. 컨트롤 및 실험 매체에 전송 주식 인구에서 재생산으로 가능한 성숙한 남성과 여성.
    참고: 생식 성숙 시간 후 일수로 초파리 종41사이 다르다.
    1. 부드럽게 지배적인 손으로 아래로 재고 파리의 유리병을 누릅니다. 파리 자동으로 유리병의 하단으로 이동 확인 하십시오. 다른 한편으로는, 유리병을 도청 하는 동안 유리병의 뚜껑을 제거 하 고 컨트롤 또는 오염 된 매체의 신선한 유리병 파리와 유리병 위에 배치. 튜브를 함께 누른 뒤집어 그들, 부드럽게 도청, 파리 제어 또는 오염 된 매체의 신선한 유리병에 자동으로 전송 되도록 합니다. 아직도 파리와 유리병 도청, 하는 동안 유리병을 모자.
    2. 표준화 각 유리병에 파리의 수를 확인 하 고 더 많은 튜브와 반복.
      참고: 성인의 총 수 이전을 통해 전송 또는 마 취과 밀을 방지 하는 데 사용 하는 튜브의 크기에 따라 달라 집니다.
    3. 표준 환경 조건 (즉, 인큐베이터)에 성인을 품 어 고 성인 친구 및 24-96 h에 대 한 매체에 알 수 있습니다.
    4. 성인 자료실 (미네랄 오일으로 가득 하 고 꽉 끼는 깔때기와 플라스 크)에서 삭제 후 24-96 h, 계란 (실험 과목 나중 될) 테스트를 위한 성숙 수정 된 뒤에 남겨두고. 개발을 알 수 있도록 인큐베이터에 튜브를 놓습니다.
    5. 매체에서 나오는 애벌레를 찾아 방황 탈피 애벌레에 대 한 튜브를 모니터링 합니다.

3. 다양 한 발달 단계에 실험 과목을 수집 합니다.

참고: 실험 과목 어떤 발달 단계, 맹인 코딩된 15 mL 원뿔 튜브에 배치 하 고 축적에 대 한 테스트에서 수집 된 수. 있습니다 오염 물질의 축적을 테스트 하기 위한 방법을 공부 되 고 오염 물질에 따라 달라 집니다. 예를 들어 PbAc의 축적 Inductively-Coupled 플라즈마 질량 분석 (ICP-MS)42를 사용 하 여 테스트할 수 있습니다. 또한, 실험 과목 다양 한 오염 물질의 phenotypic 효과 대 한 테스트할 모든 발달 단계에서 수집 된 수 있습니다. 그림 2 43 초파리 수명 주기 보여 줍니다. 그림 3 에 노출에 대 한 실험 프로토콜 컬렉션에 대 한 서로 다른 발달 단계에서는 보여 줍니다.

figure-protocol-7212
그림 2 : D. melanogaster (가장 일반적으로 사용 되 초파리 모델 시스템)의 라이프 사이클에 대 한 개념적인 개요. Drosophila 라이프 사이클의 단계는: 1) 계란, 2) 첫 번째 탈피 유 충, 유 충 3) 2 차 탈피, 5) 방황 유 충 탈피 3, 4) 제 3-탈피 유 충 6) 동박새과 번데기, 7) 적목 번데기, 8) 새로-eclosed 성인, 및 9) 성숙한 성인. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

figure-protocol-7756
그림 3 : 구두로 보호자 (F0) 후속 세대에 오염된 매체에 초파리 를 노출 하는 방법에 대 한 개념적인 개요 (F1 과 이후). 구두 노출 노출 세대에서 개발 중 (A) 방법. (B) 자손 (F1 을 원하는 세대)에 게 오염 물질의 전송 테스트 방법. 이 그림에서 피터슨 외 수정 되었습니다. 24 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

  1. 방황-3 탈피 애벌레를 수집
    1. 조명 설정, 인큐베이터에서 애벌레 매체에서 등장 하 고 후에 빛 인큐베이터에는 h에서 유리병 측면 위쪽으로 이동 때 튜브를 모니터링 시작 합니다. 이 h 내에서 신중 하 게 나무로 되는 지팡이 또는 핀셋을 사용 하 여 유리병의 측면에서 방황 3 탈피 애벌레를 제거 합니다.
      참고: 컬렉션에 사용할 수 있는 애벌레의 수 "2.3.4"에 누워 계란의 수에 따라 달라 집니다.
    2. 애벌레에서 초과 매체를 제거 하려면 dH2오 부 어 dH2O 비 커에서 작은 비 커에 애벌레를 배치 하 고 섬세 한 작업와이 퍼에 애벌레를 놓습니다. 애벌레에서 초과 dH2O를 제거 부드럽게 섬세 한 작업와이 퍼를 사용 하 여.
    3. 환경 제어 인큐베이터에서 실험적인 인구를 유지 합니다.
  2. 새로-eclosed 성인 수집
    1. 튜브의 측면을 따라 pupae의 채색을 관찰 하 여 일수로 대 한 튜브를 모니터링 합니다.
      참고: 개발 중 Pupae 어두워질 것 이다. 개발 시간, 특히 사전 일수로 테스트 종류에 따라 달라 집니다.
    2. 첫 번째 성인 eclose에 시작, 덤프 하 고 광 유를 포함 하는 영안실으로 이러한 성인을 삭제.
    3. 빛을 켤 때 인큐베이터에 다음 아침, 덤프 하 고 삭제할 수 있는 eclosed 하룻밤 또는 morningbefore 빛 중에 알 수 없는 나이 (또는 순 결)의 어른.
    4. 약 4 시간 후, 새로 eclosed 성인 튜브에 CO2 총으로 등장 하는 어른 anesthetize. 해 부 현미경 공동2 접시에 성인을 놓습니다. 섹스 성인 남성과 여성에서 ovipositors의 앞 발에 섹스 빗에 대 한 보고.
      참고: D. melanogaster 의 짝짓기 피하려고 일수로 6 h 이내를 수집 해야 합니다 하지만 다른 종 이상 개발 시간을 있을 수 있습니다 (그리고 따라서,이 기간 내 수집 필요 하지 않습니다).
    5. 나무 막대기를 사용 하 여 CO2 접시에 별도 성인. 부드럽게 성인 섹스 관련 그룹 중간 일치 기존의 역사에 나무 막대기를 사용 하 여 전송 합니다.
  3. 성숙한 어른 후 일수로 수집
    1. 성인 환경 제어 인큐베이터에서 원하는 나이 사후 일수로 하 계란 단계에서 중간 일치 사전 일수로 노출에 남아 있을 수 있습니다.
    2. 성인 성인 그들의 시체에서 초과 오염된 매체를 손질 하는 것을 허용 하도록 테스트 전에 24 h에 대 한 제어 매체 단독으로 전송.

4. 후면 대가족제의 효과 또는 Transgenerational 노출 테스트 실험 과목.

  1. 후면 부모의 세대 (일명 P0 또는 F0 세대), 전송 성인 주식 인구 제어 및 실험 매체 "2.1" 단계에서 "2.3"와 "3.3" "3.1".
  2. 어른은 재생산으로 성숙 (Pitnick 외를 참조 하십시오. 41), 단독 제어 또는 실험 매체의 신선한 유리병에 남성의 전송 (2.3.1에와 명시) 한 유리병. 단독 지금 남성을 포함 하는 신선한 유리병에 여성의 한 유리병을 전송 합니다. 24-96 h. 덤프에 대 한 친구와 누워 계란 성인 매체에서 허용 광 유를 포함 하는 영안실에 성인을 삭제 하 고 다시 개발 하는 자손 수 있도록 튜브를 품 어.
  3. 4.1 원하는 세대 수에 따라 4.2 통해 단계를 반복 합니다.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

결과

구두 노출 함으로써 초파리 개발을 통해 contaminant(s)에, 다양 한 독성에 관한 질문은 생물 학적 조직의 서로 다른 수준에서 초파리 를 노출 하 여 테스트할 수 있습니다. 이 섹션에서는 이전에 게시 논문23,24에서이 프로토콜을 사용 하 여 얻은 대표적인 결과 합니다. 특히,이 프로토콜은 이전 축적, 제거 및 노출의 같?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

토론

초파리 melanogaster 유전자와 D. melanogaster 그리고 인간13,14사이 통로의 광범위 한 보존으로 인해 생물 학적 과정의 범위에 대 한 강력한 모델로 설립 되었습니다. 같은 이유로 그것은 의료 과학에 대 한 강력한 모델, 초파리 는 독물학 끝점의 범위에 anthropogenic 오염의 영향을 공부 하기 적합 한 모델 시스템으로 떠오르고 있다. 여러 실험...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

공개

저자는 공개 없다.

감사의 말

이 게시는 교육부에서 교부 금에 의해 지원 되었다 (홍보 수상 #P031C160025-17, 프로젝트 제목: 84.031 C) 활성 줄기 구축 참여 (C-베이스)는 콜로라도 주립 대학-토 인 부락 (CSU-남) 지역 사회. 현재 동물학 감사와 대표적인 결과 사용할 수 있는 권한을 제공 하는 Elsevier 출판 정돈의 편집자 뿐 아니라 이전 서류,이 프로토콜을 게시할 수 있는 기회를 제공에 대 한. 우리는 또한 토마스 Graziano, 박사 버나드 Possidente (학과 생물학, Skidmore 대학), 그리고 박사 클레어 Varian 라모스 C 기반 프로그램, 박사 브라이언 Vanden Heuvel (C 기반 및 학과 생물학, CSU-남), CSU 푸에블로 생물학과, 감사 하 고 싶습니다. (학과 생물학, 콜로라도 주립 대학-토 인 부락) 그들의 지원과 도움.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

자료

NameCompanyCatalog NumberComments
Carolina Biological Instant Drosophila Medium Formula 4-24Carolina Biological173204
Drosophila vials, Narrow (PS), Polystyrene, Superbulk, 1000 vials/unitGenessee Scientific32-116SBUsed to store flies
Flugs Closures for vials and bottles, Narrow plastic vialsGenessee Scientific49-102Used to store flies
Cardboard trays, trays only, narrowGenessee Scientific32-124Used to organize populations of flies
Cardboard trays, dividers only, narrowGenessee Scientific32-126Used to organize populations of flies
Thermo Scientific Nalgene Square Wide-Mouth HDPE Bottles with ClosureFischer Scientific03-312DUseful for storage of contaminants
Thermo Scientific Nalgene Color-Coded LDPE Wash BottlesFischer Scientific03-409-17CUseful for storage of contaminants
Eppendorf Repeater M4 Manual Handheld Pipette DispenserFischer Scientific14-287-150Used to prepare medium
Combitips Advanced Pipetter Tips - Standard, Eppendorf Quality TipsFischer Scientific13-683-708Used to prepare medium
Flypad, Standard Size (8.1 X 11.6cm)Genessee Scientific59-114Used to anesthetize flies
Flystuff foot valveGenessee Scientific59-121Used to anesthetize flies
Tubing, green (1 continguous foot/unit)Genessee Scientific59-124GUsed to anesthetize flies
Mineral Oil, Light, White, High Purity Grade, 500 mL HDPE BottleVWR97064-130Used to make a morgue
Glass Erlenmeyer Flask Set - 3 Sizes - 50, 150 and 250ml, Karter Scientific 214U2WalmartNot applicableUsed to make a morgue
BGSET5 Glass Beaker Set Of 5Walmart
Inbred or wildtype line of DrosophilaBloomington Drosophila Stock Center at Indiana Universityhttps://bdsc.indiana.edu
Wild popultions of DrosophilaUC San Diego Drosophila Stock Centerhttps://stockcenter.ucsd.edu/info/welcome.php

참고문헌

  1. Postel, S. Defusing the Toxics Threat: Controlling Pesticides and Industrial Waste. , Worldwatch Institute. Washington, DC. (1987).
  2. Vitousek, P. M., Mooney, H. A., Lubchenco, J., Melillo, J. M. Human domination of earth's ecosystems. Science. 277, 494-499 (1997).
  3. United Nations Environment Program (UNEP). Saving Our Planet: Challenges and Hopes. , UNEP. Nairobi. (1992).
  4. Hansen, L. J., Johnson, M. L. Conservation and toxicology: Integrating the disciplines. Conservation Biology. 13, 1225-1227 (1999).
  5. Johnston, E. L., Mayer-Pinto, M., Crowe, T. P. REVIEW: Chemical contaminant effects on marine ecosystem functioning. Journal of Applied Ecology. 52, 140-149 (2015).
  6. Dell'Omo, G. Behavioral ecotoxicology. , John Wiley & Sons, LTD. West. Sussex, UK. (2002).
  7. Clotfelter, E. D., Bell, A. M., Levering, K. R. The role of animal behaviour in the study of endocrine-disrupting chemicals. Animal Behaviour. 68, 665-676 (2004).
  8. Peterson, E. K., Buchwalter, D. B., Kerby, J. L., LeFauve, M. K., Varian-Ramos, C. W., Swaddle, J. P. Integrative behavioral ecotoxicology: bringing together fields to establish new insight to behavioral ecology, toxicology, and conservation. Current Zoology. 63, 185-194 (2017).
  9. Scott, G. R., Sloman, K. A. The effects of environmental pollutants on complex fish behaviour: Integrating behavioural and physiological indicators of toxicity. Aquatic Toxicology. 68, 369-392 (2004).
  10. Zala, S. M., Penn, D. J. Abnormal behaviors induced by chemical pollution: A review of the evidence and new challenges. Animal Behaviour. 68, 649-664 (2004).
  11. Abolaji, A. O., Kamdem, J. P., Farombi, E. O., Rocha, J. B. T. Drosophila melanogaster as a promising model organism in toxicological studies. Archives of Basic & Applied Medicine. 1, 33-38 (2013).
  12. Jennings, B. H. Drosophila-a versatile model in biology and medicine. Materials Today. 14, 190-195 (2011).
  13. Pandey, U. B., Nichols, C. D. Human disease models in Drosophila melanogaster and the role of the fly in therapeutic drug discovery. Pharmacology Reviews. 63, 411-436 (2011).
  14. Rubin, G. M., et al. Comparative genomics of the eukaryotes. Science. 287, 2204-2215 (2000).
  15. Rand, M. D. Drosophotoxicology: The growing potential for Drosophila in neurotoxicology. Neurotoxicol Teratol. 32, 74(2010).
  16. Rand, M. D., Montgomery, S. L., Prince, L., Vorojeikina, D. Developmental toxicity assays using the Drosophila model. Current Protocols in Toxicology. 59, 1.12.1-1.12.20 (2015).
  17. Burke, M. K., Rose, M. R. Experimental evolution with Drosophila. American Journal of Physiology: Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 296, R1847-R1854 (2009).
  18. He, T., Hirsch, H. V. B., Ruden, D. M., Lnenicka, G. A. Chronic lead exposure alters presynaptic calcium regulation and synaptic facilitation in Drosophila larvae. NeuroToxicology. 30, 777-784 (2009).
  19. Hirsch, H. V., et al. Behavioral effects of chronic exposure to low levels of lead in Drosophila melanogaster. NeuroToxicology. 24, 435-442 (2003).
  20. Hirsch, H. V. B., et al. Variations at a quantitative trait locus (QTL) affect development of behavior in lead-exposed Drosophila melanogaster. NeuroToxicology. 30, 305-311 (2009).
  21. Morley, E. J., Hirsch, H. V. B., Hollocher, K., Lnenicka, G. A. Effects of chronic lead exposure on the neuromuscular junction in Drosophila larvae. NeuroToxicology. 24, 35-41 (2003).
  22. Ruden, D. M., et al. Genetical toxicologenomics in Drosophila identifies master- modulatory loci that are regulated by developmental exposure to lead. NeuroToxicology. 30, 898-914 (2009).
  23. Peterson, E. K., et al. Accumulation, elimination, sequestration, and genetic variation of lead (Pb2+) loads within and between generations of Drosophila melanogaster. Chemosphere. 181, 368-375 (2017).
  24. Peterson, E. K., et al. Asymmetrical positive assortative mating induced by developmental lead (Pb2+) exposure in a model system, Drosophila melanogaster. Current Zoology. 63, 195-203 (2017).
  25. Peterson, E. K. Consequences of developmental lead (Pb2+) exposure on reproductive strategies in Drosophila. , University at Albany-State University of New York. Dissertation (2016).
  26. Chifiriuc, M. C., Ratiu, A. C., Popa, M., Ecovolu, A. A. Drosophotoxicology: An emerging research area for assessing nanoparticles interaction with living organisms. International Journal of Molecular Sciences. 17, 36(2016).
  27. Lachaise, D., Cariou, M. L., David, J. R., Lemeunier, F., Tsacas, L., Ashburner, M. Historical biogeography of the Drosophila melanogaster species subgroup. Evolutionary Biology. 22, 159-225 (1988).
  28. Elgin, C. R., Miller, D. W. Mass rearing of flies and mass production and harvesting of embryos. The Genetics and Biology of Drosophila. Ashburner, M., Wright, T. R. F. 2a, 112-121 (1978).
  29. Shaffer, C. D., Wuller, J. M., Elgin, C. R. Chapter 5: Raising large quantities of Drosophila for biochemical experiments. Methods in Cell Biology. 44, 99-108 (1994).
  30. Stocker, H., Gallant, P. Getting started: an overview on raising and handling Drosophila. Methods in Molecular Biology. 420, 27-44 (2008).
  31. Jennings, J. H., Etges, W. J., Schmitt, T., Hoikkala, A. Cuticular hydrocarbons of Drosophila montana: geographic variation, sexual dimorphism and potential roles as pheromones. Journal of Insect Physiology. 61, 16-24 (2014).
  32. Drosophila Speciation Patterns. , http://www.drosophila-speciation-patterns.com/rangemaps.html. (2018).
  33. Markow, T. A., O'Grady, P. M. Drosophila: A Guide to Species Identification and Use. , Academic Press. London. (2005).
  34. Werner, T., Jaenike, J. Drosopholids of the midwest and northeast. , River Campus Libraries, University of Rochester. Rochester NY. (2017).
  35. Greenspan, R. J. The basics of doing a cross. Fly Pushing: The theory and practice of Drosophila genetics. , 2nd, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor. New York. 3-24 (1997).
  36. JoVE Science Education Database. . Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. Drosophila Maintenance. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
  37. Castañeda, P. L., Muñoz, G. L. E., Durán, D. A., Heres, P. M. E., Dueñas, G. I. E. LD50 in Drosophila melanogaster. fed on lead nitrate and lead acetate. Drosophila Information Service. 84, 44-48 (2001).
  38. Massie, H. R., Aiello, V. R., Whitney, S. J. P. Lead accumulation during aging of Drosophila and effect of dietary lead on life span. Age. 15, 47-49 (1992).
  39. Akins, J. M., Schroeder, J. A., Brower, D. L., Aposhian, H. V. Evaluation of Drosophila melanogaster as an alternative animal for studying the neurotoxicity of heavy metals. BioMetals. 5, 111-120 (1992).
  40. Zhou, S., et al. The genetic basis for variation in sensitivity to lead toxicity in Drosophila melanogaster. Environmental Health Perspectives. 124, 1062-1070 (2016).
  41. Pitnick, S., Markow, T. A., Spicer, G. S. Delayed male maturity is a cost of producing large sperm in Drosophila. Proceedings of National Academy of Sciences USA. 92, 10614-10618 (1995).
  42. Beauchemin, D. Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry. Analytical Chemistry. 82, 4786-4810 (2010).
  43. Tyler, M. S. Development of the fruit fly Drosophila melanogaster. Developmental Biology, a Guide for Experimental Study. Tyler, M. S. , 2nd, Sinauer Associates Inc. Sunderland, MA, USA. 8-27 (2000).
  44. Ortiz, J. G., Opoka, R., Kane, D., Cartwright, I. L. Investigating arsenic susceptibility from a genetic perspective in Drosophila reveals a key role for glutathione synthetase. Toxicological Sciences. 107, 416-426 (2009).
  45. Bonilla, E., Contreras, R., Medina-Leendertz, S., Mora, M., Villalobos, V., Bravo, Y. Minocycline increases the life span and motor activity and decreases lipid peroxidation in manganese treated Drosophila melanogaster. Toxicology. 294, 50-53 (2012).
  46. Guarnieri, D. J., Heberlein, U. Drosophila melanogaster, a genetic model system for alcohol research. International Review of Neurobiology. 54, 199-228 (2003).
  47. Posgai, R., Cipolla-McCulloch, C. B., Murphy, K. R., Hussain, S. M., Rowe, J. J., Nielsen, M. G. Differential toxicity of silver and titanium dioxide nanoparticles on Drosophila melanogaster development, reproductive effort, and viability: size, coatings and antioxidants matter. Chemosphere. 85, 34-42 (2011).
  48. Gupta, S. C., et al. Adverse effect of organophosphate compounds, dichlorvos and chlorpyrifos in the reproductive tissues of transgenic Drosophila melanogaster: 70kDa heat shock protein as a marker of cellular damage. Toxicology. 238, 1-14 (2007).
  49. Wasserkort, R., Koller, T. Screening toxic effects of volatile organic compounds using Drosophila melanogaster. Journal of Applied Toxicology. 17, 119-125 (1997).
  50. Markow, T. A., O'Grady, P. O. Reproductive ecology of Drosophila. Functional Ecology. 22, 747-759 (2008).
  51. Dev, K., Chahal, J., Parkash, R. Seasonal variations in the mating-related traits of Drosophila melanogaster. Journal of Ethology. 31, 165-174 (2013).
  52. Salminen, T. S., Vesala, L., Laiho, A., Merisalo, M., Hoikkala, A., Kankare, M. Seasonal gene expression kinetics between diapause phases in Drosophila virilus group species and overwintering differences between diapausing and non-diapausing females. Nature Scientific Reports. 5, 11197(2015).
  53. Miller, R. S., Thomas, J. L. The effects of larval crowding and body size on the longevity of adult Drosophila melanogaster. Ecology. 39, 118-125 (1958).
  54. Peterson, E. K., Ghiradella, H., Possidente, B., Hirsch, H. Transgenerational epigenetic effects of lead exposure on behavior in Drosophila melanogaster. Abstracts of the IBANGS Genes, Brain and Behavior Meeting, May 16-19, 2012, Boulder, CO, 11, Genes, Brain & Behavior 492-493 (2012).
  55. Soares, J. J., et al. Continuous liquid feeding: New method to study pesticides toxicity in Drosophila melanogaster. Analytical Biochemistry. 537, 60-62 (2017).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

재인쇄 및 허가

JoVE'article의 텍스트 или 그림을 다시 사용하시려면 허가 살펴보기

허가 살펴보기

더 많은 기사 탐색

137ecotoxicologyecotoxicology3transgenerational

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

개인 정보 보호

이용 약관

정책

연락처

사서에게 추천하기

JoVE 뉴스레터

연구

교육

저자

사서

JoVE 소개

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. 판권 소유