파충류의 화학 감각 행동을 평가하기 위해 동봉 된 Y-미로를 사용

요약

Y-미로는 연구원이 동물 행동, 특히 다양한 소스에서 격리 된 화학 단서를 구동하는 특정 자극의 관련성을 결정할 수 있게 합니다. 신중한 설계 및 계획은 강력한 데이터(예: 차별, 탐색 정도, 수많은 동작)를 생성할 수 있습니다. 이 실험 장치는 행동 및 생태 학적 질문에 대한 강력한 통찰력을 제공 할 수 있습니다.

초록

파충류는 다양한 환경 단서를 활용하여 식품이나 동포에 의해 생성된 화학 향수 트레일과 같은 동물의 행동을 알리고 유도합니다. 척추동물, 특히 침략적인 종의 향기 후행 동작을 해독하면 탐색적 행동을 유도하고 귀중한 기본 및 적용 된 생물학적 도구의 개발에 도움이 될 수있는 단서의 발견을 가능하게합니다. 그러나 화학 적 단서에 의해 지배적으로 구동되는 행동을 다른 경쟁 환경 단서에 비해 정확하게 하는 것은 어려울 수 있습니다. Y-미로는 다양한 택시에서 척추동물 화학 감각 행동을 정량화할 수 있는 동물 행동 연구에 사용되는 일반적인 도구입니다. 외부 자극을 줄임으로써 Y-미로는 혼란스러운 요인을 제거하고 이진 선택으로 초점 동물을 제시합니다. Y-미로 연구에서 향기로운 동물은 미로의 한 팔로 제한되어 향기 트레일을 남기고 향기를 낳는 매개 변수가 충족되면 제거됩니다. 그런 다음, 시험 유형에 따라, 초점 동물은 미로에 허용되거나 경쟁 향기 트레일이 만들어집니다. 결과는 제시된 화학 단서 사이에서 차별하는 동안 초점 동물의 선택과 행동의 기록입니다. 여기서, 다른 침략파충류 종에 맞춘 두 개의 Y-미로 장치: 아르헨티나 흑백 테구 도마뱀(살바토르메리아나에)과버마 비단뱀(파이썬비비타투스)이설명되어 이러한 Y-미로의 작동 및 세척을 요약한다. 또한, 다양한 생성 데이터, 실험적 단점 및 솔루션 및 제안된 데이터 분석 프레임워크가 요약되었습니다.

서문

Y-미로는 다양한 질문을 해결할 수 있도록 동물 행동에 대한 연구에서 일반적이며 간단한 도구입니다. Y-미로는 실험실 연구에서 널리 사용되는 것 외에도 다양한 현장 환경과 기능적으로 호환되어 비교적 원격 환경에서 야생 동물을 연구합니다. 연구원은 유사하게 다양한 필드 응용 프로그램에 걸쳐 택시의 다양한 Y-미로를 사용하여 야생 척추 동물의 행동을 조사했다 (예를 들어, 램프 레이¹; cichlid 물고기^2;독 개구리^3;lacertid 도마뱀^4;가터 뱀^5).

많은 연구자들은 화학 단서가 생식, 공간 및 포이징 생태^6에서동물의 행동을 유도하는 방법과 정도에 초점을 맞추고 있습니다. 다양한 화학 자극은 농도^7에서약간 다른 두 가지 화학 트레일, 또는 표적 종^8의생식 상태에 기초한 검출 능력과 같은 Y-미로 및 미세 한 비늘에서 테스트될 수 있다. Y-미로 테스트에 사용되는 주요 자극인 화학 트레일은 동특이성으로 자연적으로 생성되거나 정의된 화학 소스^1,5를사용하여 연구원에 의해 환경에 구체적으로 배치될 수 있다. 자극은 또한 큐 프리젠 테이션의 컨텍스트 변경 (공수 대 기판 트레일^9;시각 플러스 화학 단서^10)의변화하는 것과 같은 단서의 다중 모달 영향을 결정하기 위해 독특한 조합으로 테스트 할 수 있습니다. 파충류에서 화학 감각 반응을 평가하기위한 많은 다른 방법이 있지만 (토론 섹션 참조), Y-미로는 검색 행동을 허용하고 여러 시간 적 및 공간 척도에서, 이는 행동 추론의 더 큰 수준으로 이어질 수 있습니다.

파충류는 생식 및 포식 생태학에 있는 화학 단서에 그들의 의존을 위해 광범위하게 시험되었습니다, 연구원은 수시로 이 연구 결과 에서 Y-미로를^11,12를고용합니다. 파충류의 화학 적 생태는 야생 동물 관리자에게 가치있는 다양한 진화 및 행동 문제를 해결하기 위해 Y-미로를 사용하는 연구에 의해 해독되고 있습니다. 예를 들어, 침략적인 뱀과 도마뱀 종을 가진 최근 시험은 화학 단서만으로는Y-미로^13,14,15의새로운 환경 내에서 선택과 시간 할당에 영향을 미칠 수 있음을 밝혔습니다.

적당히 크기의 초점 동물(예를 들어, 대형 바디 파충류)에 대한 대형 Y-미로의 사용은 일반적으로 초점 동물이 장기적으로 쉽게 보관할 수 있는 실험실 설정으로 제한되며, 실험인(예: 기후, 빛, 외부 자극)을 제어할 수 있으며 인프라(예: 전력, 흐르는 물)에 대한 액세스는 무제한입니다. 그러나 야생 동물에 대한 연구는 여러 가지 이유로 특정 위치(예: 물류 허용)로 제한됩니다. 따라서 일관되고 유사한 결과를 유지하기 위해 창의적인 문제 해결 및 방법론 적 조정을 통해 해결해야 하는 문제가 발생합니다.

여기서, 2개의 실험적인 설치는 침략적인 squamate 파충류의 생식 화학 생태를 평가하기 위하여 Y-미로 및 원격 감시 공구를 사용하여 기술되었습니다 (즉,, 뱀과 도마뱀) 다른 필드 시나리오에서 : 야생 잡히고, 포로 아르헨티나 흑백 테구 도마뱀(살바토르 메리아나)게인즈빌, 플로리다, 야생 잡은 버마 비단뱀(파이썬 비비타투스)에버글레이즈 국립 공원, 플로리다. 그 이름으로 암시하듯이, Y-미로 장치는 동물이 주요 통로 (Y의 기지)에 들어가는 실험 환경을 만듭니다. "베이스") 다음 두 개의 서로 다른 통로로 연결 (Y의 팔; "팔"). 이 실험에서, 동물의 두 가지 유형은 단일 시험에 사용됩니다 : 향기 를 낳는 동물 (미로의 제한된 영역에서 자극 향기를 제공) 및 초점 동물 (데이터는 향기 흔적을 탐구로이 동물에 수집).

화학학 연구의 실험 장치로서 모든 Y-미로는 내 동물을 쉽게 제거할 수 있는 방식으로 시공되어야 하며 철저한 세척 및 재설정을 위해 해체될 수 있습니다. 또한 이러한 다양한 테스트 환경(예: 요행성 대 야행성 동물, 인프라 차이)에 내재된 제약 조건이 내재되어 방법론적 조정을 유도하는 데 대해서도 설명합니다. 테구 도마뱀과 버마 비단뱀에 초점을 맞추고 있었지만, 이러한 디자인은 파충류 종의 넓은 범위에 적용 할 수 있습니다. 침략파충류에 대한 이 연구에서 Y-미로는 특정 종에 의해 제기된 침략 위협과 단계적으로 이동하는 관리 목표를 알리기 위해 데이터의 신속한 수집을 가능하게 하기 때문에 추론의 속도와 규모에 도움이 됩니다. 특히, 침략종의 화학학을 연구하는 것은 효과적인 화학 제어 도구의 개발에 매우 중요합니다.

차별은 초점 동물이 두 자극 사이에서 선택하고 의사 결정 과정을 평가하는 Y-미로를 사용하여 경험적 테스트에서 주요 관찰이다. 또한 재판 자체(live) 또는 재판(비디오) 후에 Y-미로 시험에서 다양한 행동을 득점하여 감염력을 확대할 수 있습니다. 주어진 연구의 우선 목표의 복잡성은 라이브 관찰 또는 보관 된 기록이 디자인에 가장 적합한지 여부를 결정합니다. 여기서 Y-미로 방법은 특히 화학 생태학에서 파충류 행동에 대한 유사한 질문에 관심이있는 연구원에 의해 향후 연구를 알리기 위해 화학 학문제를 해결하기위한 세부 사항으로 설명되었습니다.

프로토콜

살아있는 척추 동물의 사용과 관련된 모든 절차는 미국 농무부와 미국 지질 조사의 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다.

참고: 이러한 연구는 침습적 척추동물에 초점을 맞추기 때문에 억제 기준을 준수하는 것 또한 충족되어야 하며, 이는 실험의 설계 및 실행에 대한 특정 제약을 부과합니다. 많은 방법이 두 연구 위치와 일주 대 야간 연구 타이밍 사이에 유사하지만, 다음 두 섹션의 각각에 뚜렷한 방법이 설명되어 있다.

1. 미국 농무부 (USDA) 동물 식물 건강 검사 서비스 (APHIS) 야생 동물 서비스 국립 야생 동물 연구 센터 플로리다 필드 스테이션에 대한 Y-미로 설정 및 주전자 프로토콜 : 야생 잡히고 포로 테거스의 현장 테스트

참고: Y-미로 및 봉쇄 구조의 모든 구성 요소에 대한 계획은 보충 파일 1에제공됩니다.

1. Y-미로 치수 및 디자인
   1. 하단 피스(1.22m x 2.44m 섬유 시멘트 사이딩 패널)를 사용하여 Y-미로를 고정하십시오. 상단 레이어의 구멍을 뚫어 캐리지 볼트가 미로 조각의 부착을 위해 위쪽으로 전달되도록 합니다. 특정 방향은 보충 파일 1을참조하십시오.
   2. 흰색 PVC 트림 보드에서 미로의 벽을 구성; 베이스의 내부 치수는 120cm L(측면 벽) x 42cm W x 14cm H입니다.
      참고: 통로 폭은 2배 의 초점 동물 폭을 수용할 수 있도록 설계되었습니다. 추가 폭을 통해 동물에 증착된 두 개의 향 트레일을 유연하게 만들 수 있습니다.
   3. 팔의 내부 치수가 120cm L(측면 벽) x 40cm W x 14cm H인지 확인합니다.
   4. 평가판을 실행하기 전에 함께 고정된 별도의 하단, 측면 및 상단 구성 요소를 사용하여 미로를 조립합니다. 미로 내에서 동물의 시각화를 가능하게하기 위해 명확한 아크릴의 상단을 확인합니다. 특정 방향은 보충 파일 1을참조하십시오.
      1. 단일 향기 트레일이 만들어지면 베이스의 내부 파티션을 사용하여 향기를 놓는 테구의 공간 액세스를 제한합니다. 특정 방향은 보충 파일 1을참조하십시오.
      2. 두 개의 향기 트레일이 서로 다른 동물에 의해 순증될 때 파티션 시스템을 사용하여 미로의 번갈아 팔을 차단하고 각 동물이 기지의 반쪽을 번갈아 가며 제외합니다. 특정 방향은 보충 파일 1을참조하십시오.
   5. 상자를 사용하여 Y-미로 실험에 사용되는 동물의 운반 및 수집을 허용합니다. 모든 상자가 불투명하고 쉽게 고정되는 탈착식 뚜껑과 아크릴 도어가 장착되어 있는지 확인하십시오.
      1. 베이스 박스(109cm L x 56cm W x 46cm H)가 Y-미로 의 베이스의 개구부에 있는지 확인합니다. 향초 또는 초점 동물을 미로로 옮기고 문을 열고 동물을 미로로 자발적으로 접근할 수 있도록 하기 전에 적응을 위해 사용합니다.
      2. 팔 상자(83cm L x 50cm W x 44cm H)가 Y-미로 팔의 끝부분에 있는지 확인하여 향기 또는 초점 동물을 포획할 수 있도록 하십시오.
      3. 구성 및 조립에 대한 구체적인 지침은 보충 파일 1을참조하십시오.
2. 주가지 비디오 수집을 위한 카메라 설정
   1. 카메라 사양: 프로젝트 카메라가 가변 조명 조건에서 연속 비디오를 녹화할 수 있는지 확인하고 일반적인 온도 및 습도 조건에서 실외 사용에 적합합니다.
      1. 스터디 인클로저의 밑면에 카메라를 장착하면 전체 Y-미로를 카메라 시야에 캡처할 수 있습니다. 카메라의 렌즈 또는 높이를 조정하여 시야를 높이거나 줄입니다. 시야가 설정되면 혀 플릭과 같은 충분한 동작 세부 정보를 캡처할 수 있는지 확인합니다.
         참고: 스터디 인클로저의 높이가 고정된 경우(예: 180cm H)가 고정되어 시야에 대한 조정을 제한하면 여러 카메라를 사용하여 Y-maze 내부의 완전한 커버리지를 얻을 수 있습니다. 실외 응용 프로그램에서 사용할 때 카메라가 "넓은 동적 범위"를 사용하도록 설정되어 있는지 확인합니다.
   2. 전원 사양: 각 카메라에 계획된 평가판 기간 동안 연속 비디오를 녹화할 수 있는 적절한 전원 공급 장치가 있는지 확인합니다(예: 지속적인 전력을 보장하기 위해 내장된 백업 배터리가 있는 무정전 전원 공급 장치(UPS)를 사용하십시오).
      참고: AC 전원 공급 장치가 없는 경우 POE(전원 오버 이더넷) 카메라는 네트워크 비디오 레코더(NVR)를 사용하는 디지털 비디오 레코더(DVR) 또는 POE 스위치에 연결된 네트워크 케이블을 통해 전원을 공급할 수 있습니다.
   3. 기록 사양: DVR 또는 NVR을 선택할 때 는 사용 되는 카메라의 수를 수용할 수 있는 충분한 저장 용량과 충분한 POE 커넥터(DVR) 또는 카메라 채널(NVR)을 포함한 프로젝트 요구 사항을 충족하는지 확인합니다. 원하는 비디오 품질에 맞게 레코딩 매개 변수를 선택하여 데이터 파일의 크기를 염두에 두고(예: H264 압축 속도 및 초당 10프레임의 이미지 속도[FPS])를 유지합니다.
   4. 비디오 획득 및 처리를 위한 프로토콜:
      1. 동물이 미로에 들어가기 시작하는 순간부터 캡처 또는 미리 설정된 기간(1.3.3.4)까지 비디오 녹화를 시작합니다.
      2. 하나 이상의 컴퓨터에 설치할 수 있고 라이브 또는 녹화된 비디오를 볼 수 있는 소프트웨어를 사용하여 선택한 비디오 형식을 사용하여 파일을 내보냅니다.
      3. 여러 피드를 동시에 검토할 수 있도록 사용되는 각 카메라에 대해 동일한 시간 창과 비디오 기간을 내보내야 합니다.
      4. DVR/NVR 파일 저장 용량이 제한되는 경우 많은 시스템에서 이전 데이터를 새 데이터로 덮어쓰기하기 때문에 데이터를 정기적으로 내보내야 합니다.
3. 향기를 낳는 동물을 실행하기위한 프로토콜
   1. 편견 평가
      1. 실험 시험을 실행하기 전에, 미로를 조립하여 편견에 대한 Y-미로를 평가, 아래 설명과 같이, 하지만 종이에 향기를 제시하지 않고. 초점 동물을 적응하고 재판을 시작합니다.
         참고: 연구의 설계(예: 동일한 초점 동물을 이용한 반복된 측정과 매번 새로운 초점 동물의 테스트)에 따라, 편견 시험은 미로 자체가 의도적으로 동물의 선택을 편향시키지 않는다는 것을 확립합니다. 많은 요인이 고도, 햇빛 및 시각적 마커와 같은 바이어스에 기여합니다.
      2. 미로의 다른 물리적 측면을 재조정하거나 조정하는 경우 측면 편향을 제거하지 않는 경우 지정된 암에 무작위로 지정된 암은 주어진 시험에서 실험적인 향기를 수신합니다.
         참고: 정해진 수의 시험에서 편견없는 미로는 어느 팔에 대해0.5의 선택 확률을 초래하고, 이난 성 검사가 수행됩니다(그림 2).
   2. 시험 준비 및 Y-미로 어셈블리
      1. 동물이 향기 오염을 피하기 위해 탐구 할 수있는 표면을 처리 할 때 전체 니트릴 장갑을 착용하십시오. 여러 향기 트레일이 만들어지는 경우 시험 과 시험 설정 내에서 장갑을 변경합니다.
      2. 깨끗한 표면에 새롭고 깨끗한 향종이(백육점 용지, 너비 최소 61cm)를 준비합니다. 각 섹션의 용지가 Y의 접합부에서 겹치고 베이스의 끝과 팔을 지나 상자 아래에 들어갈 수 있도록 적절한 길이로 절단합니다.
      3. 미로의 바닥을 쓸어내고 종이로 직접 또는 종이와 바닥 사이의 경계 층(예: 플라스틱 시트)으로 덮어 동물이 미로에서 배변하거나 사향을 배설하는 경우 청소를 용이하게 합니다.
      4. 바닥에 캐리지 볼트로 관통하여 용지를 제자리에 고정하고 한쪽 끝에서 다른 쪽끝까지 작업하여 표면을 매끄럽게 유지합니다. 기본 용지가 맨 위에 있도록 접합의 용지를 겹칩니다.
      5. 미로의 측면을 캐리지 볼트 위에 배치하지만 바닥에 고정시키지 않습니다.
      6. 시험 유형을 테스트하는 데 필요한 파티션을 삽입하고 고정합니다(단일 향기 1.3.3 대 이중 향기 시험 1.3.4 참조).
      7. 아크릴 탑 피스를 슬롯에 넣고 평평한 머리 손톱으로 고정합니다.
      8. 날개 너트를 캐리지 볼트에 조이면 측면의 측면을 바닥에 고정합니다.
      9. 깨끗한 팔 상자를 제자리에 놓고 엄지 나사로 고정하십시오. 케이블 타이를 사용하여 상자 뚜껑을 고정합니다. 도어가 제거되었는지 확인합니다.
   3. 단일 향 시험
      참고: 이러한 시험의 목적은 기지에서 한 쪽 팔을 통해 실행되는 Y-미로에 단일 향기 트레일을 제시하는 것입니다.
      1. 아크릴 상단을 장착하기 전에 파티션을 고정하여 처리되지 않은 팔을 차단합니다. 향기로운 팔을 무작위로 선택합니다(예: 동전 던지기, 난수 발생기).
      2. 향기를 낳는 동물을 깨끗하고 건조한 베이스 박스에 넣습니다. 베이스 박스(예: 케이블 타이, 볼트) 및 도어(예: 엄지 나사)의 뚜껑을 고정합니다. 홀딩 박스를 스터디 인클로저로 운반하고 엄지 나사로 Y-미로 의 기저끝까지 고정합니다.
         참고: 동물을 적재하기 전에 기본 상자의 문이 제자리에 있는지 확인합니다.
      3. 일관된 기간(예: 60분)에 대해 상자에 동물을 적응시다. 기본 상자 문을 제거하고 동물이 미로에 자유롭게 들어갈 수 있도록 합니다.
      4. 비디오 피드를 사용하여 원격으로 동물 활동을 모니터링합니다(아래 참조). 동물이 베이스 박스에서 팔 상자로 이동한 후 향기가 완성되면 미로에서 동물을 제거하십시오.
         1. 동물이 상자 안에 있으면 이동식 도어를 삽입하고 고정하고 상자를 제거하고 동물을 인클로저로 반환합니다.
         2. 동물이 미로에 다시 있는 경우, 동물이 상자로 돌아오는 것을 볼 때까지 미로 근처에서 기다린 다음 상자를 제거하십시오.
            참고: 스쿼메이트는 방어적으로 배변하고 테스트중인 향기를 오염시키는 경보 신호를 생성하므로 동물을 놀라게하지 마십시오.
         3. 동물이 상자로 돌아오지 않으면 천천히 미로에 접근하여 시각적 신호(예: 느린 손 흔들림)를 사용하여 동물을 상자에 넣은 다음 상자를 제거합니다.
      5. 베이스 박스(1.5.5)를 청소하고 건조시다.
      6. 배변이 발생하면 종이 타월로 가능한 한 많이 수집하고 흡수하지만 확산을 방지하기 위해 닦아하지 마십시오.
      7. 미로를 부분적으로 분해하여 내부 파티션을 제거한 다음 다시 조립합니다. 파티션(1.5.5)을 청소합니다.
      8. 초점 동물을 실행하기위한 프로토콜에 대한 섹션 1.4로 진행합니다.
   4. 이중 향 시험
      참고: 이러한 시험의 목적은 Y-미로에서 동시에 두 가지 다른 향기 트레일을 제시하는 것입니다.
      1. 아크릴 탑을 장착하기 전에 파티션을 고정하여 첫 번째 향기와 차단된 팔 맞은편에 있는 베이스의 절반을 선택하지 않은 암을 차단합니다.
      2. 한 가지 예외를 제외하고 단일 향기 시험(1.3.3 ~ 1.3.3.8)에 대해 위에 설명된 절차를 따르십시오. 아크릴 도어를 제거하면 (1.3.3.3), 향기 동물이 미로의 열린 섹션에서만 이동할 수 있도록 차단 된 상태로 유지되는 측면의 개구부에 반 크기의 문을 삽입하십시오.
      3. 미로를 부분적으로 분해하고 파티션을 제거하고 청소(1.5.5)합니다. 깨끗한 수건으로 건조하십시오.
      4. 파티션을 다시 설치하지만, 미로의 지금 향기 영역을 차단하도록 그들을 뒤집습니다. 아크릴 상단을 다시 설치합니다.
      5. 두 번째 향기를 낳는 동물의 경우 1.3.4.2 단계를 반복하십시오.
      6. 미로를 부분적으로 분해하고 파티션을 제거합니다. 미로를 다시 조립합니다.
      7. 초점 동물을 실행하기위한 프로토콜에 대한 섹션 1.4로 진행합니다.
4. 주부 시간 동안 초점 동물을 실행하기위한 프로토콜
   1. 1.3.3.2에서 1.3.3.3.3 단계를 수행하여 해당 재판을 위해 계획된 초점 동물과 함께 하십시오.
   2. 비디오를 사용하여 동물 활동을 원격으로 모니터링합니다. 탐색 시간의 설정 된 창을 통해 관찰하는 경우, 동물이 베이스 상자에서 완전히 나타났을 때 타이머를 시작합니다.
   3. 시험이 완료되면 동물을 제거하십시오(1.3.3.4).
5. 고장 및 정리
   1. 미로에서 남은 상자를 분리하고 모든 상자를 분해합니다. 분해 및 청소 를 통해 신선한 니트릴 장갑을 착용하십시오.
   2. 아크릴 탑 피스를 제거하고 긁거나 갈라지는 것을 방지하기 위해 청소를위한 안전한 장소에 따로 둡니다. 제거할 때 조각이 긁히지 않도록 해야 합니다(비디오 모니터링 동작에 대한 명확한 시야를 유지해야 합니다). 미로의 측면을 분해하고 청소를 위해 따로 둡니다.
      참고: 항상 그늘을 유지하여 Y-미로 재료에 대한 스크래치 및 UV 분해를 최소화합니다.
   3. 바닥의 오염을 피하기 위해 그것을 압연하여 일관된 동작으로 종이 (및 플라스틱)를 제거하고 폐기하십시오.
   4. 무취 실험실급 비누와 부드러운 스크럽 브러쉬 또는 마이크로 화이버 천을 사용하여 Y-미로 조각과 모든 상자를 청소하십시오. 아크릴 상단 조각과 동일한 비누로 탈착식 도어를 청소하지만 부드러운 스폰지 또는 마이크로 화이버 천으로 긁는 것을 방지하십시오.
      참고: 스쿼메이트 파충류에서 공지된 화학 신호는 지질 수용성 화합물이며, 세제로 세척하는 것은 지상척추동물 연구에서 고분자 기반 장치에서 지질 큐 및 기타 향기를 세척하기 위한 표준 프로토콜이다^11,12,21.
      참고: 현장 응용 프로그램에서는 위생 프로토콜이 필요할 수 있습니다. 그렇다면 미로의 모든 내부 표면(바닥, 벽, 파티션, 아크릴 조각, 상자)을 적절한 위생 용액으로 스프레이하고 10 분 동안 앉아서 마이크로 화이버 천으로 닦아냅니다.
   5. 깨끗하고 젖은 마이크로 화이버 수건으로 표면을 닦아 물로 청소 된 구성 요소를 헹구고 헹구기 전에 비누 잔류물이 건조되는 것을 방지하십시오. 미로에 물을 붓지 마십시오.
   6. 조각을 건조시키거나 신선한 마이크로 화이버 천으로 말리십시오.
   7. 일단 건조하면, 즉시 다른 시험을 실행하는 경우 미로 조각을 다시 조립합니다.

2. 국립 공원 서비스와 공동으로 미국 지질 조사 (USGS) 시험에 대한 Y-미로 설정 및 crepuscular 타이밍 프로토콜 : 야생 잡힌 버마 비단뱀의 상대적으로 원격 테스트

참고: Y-미로 및 봉쇄 구조의 모든 구성 요소에 대한 계획은 보충 파일 2에제공됩니다.

1. USDA 설계 변경에 대한 Y-미로 구성 요소 및 근거
   참고: 기술된 Y-미로는 잠재적인 연구 종 및 고립된 조건에서 확장하기 위하여 현저하게 변경되었습니다. 다양한 종을 수용할 수 있도록 수직 깊이가 증가하였고, 다양한 재료와 시공 방법을 사용하여 실외 내구성과 청소를 개선하였다. 완성된 미로의 시각화는 그림 1을 참조하십시오. 구성 및 조립에 대한 구체적인 지침은 보충 파일 2를참조하십시오.
   1. 흰색 폴리 프로필렌에서 Y-미로 성분을 잘라, 영구적으로 고정될 모든 절단 조각 (예 : 미로 바닥 및 측면 벽)에서 열 용접.
      1. 갑판 나사와 함께 고정 된 합판 시트로 만든 Y-미로 (244cm L x 122cm W)의 바닥을 고정하고 미로의 외부 측면 벽 의 바닥을 따라 리벳 알루미늄 각도 브래킷을 통해 부착합니다.
      2. Y-미로의 베이스가 120cm L x 42cm W x 23cm H이고, 각 외측벽이 120cm L, 내팔 측벽은 108cm L(특정 방향의 경우 보충 파일 2참조)인지 확인합니다.
      3. 아크릴 탑을 30cm마다 나사로 측면 벽에 고정된 알루미늄 각도를 사용하여 제자리에 놓습니다(특정 방향의 경우 보충 파일 2참조).
         참고: Y-미로 측면 벽의 상단 가장자리에 일정한 간격으로 배치된 나사는 시험에서 비디오를 분석하고 스케일을 제공할 때 정적 시각적 마커역할을 합니다.
      4. Y-미로(베이스, 팔)의 각 개구부에는 사이드 월 끝에 추가 베이스 플레이트(42cm W x 30cm H)가 있어 베이스 플레이트가 중앙 개구부(34cm W x 16cm H; 특정 방향의 경우 보충 파일 2참조)를 프레임하도록 합니다.
      5. 파티션 조각을 사용하여 향기 동물의 액세스를 제한합니다(특정 방향의 경우 보충 파일 2참조). 패스너 테이프를 사용하여 블로킹 플레이트(46cm W x 22cm H)를 제자리에 고정합니다. 즉흥적이고 쉽게 청소된 가중치를 사용하여 파티션과 플레이트를 고정하십시오(예: 물로 채워진 플라스틱 주전자; 2.3.6; 그림 1).
      6. 아크릴 조각이 미로의 상단을 구성하는지 확인하십시오 (0.6 cm 두께, 투명). 특정 방향은 보충 파일 2를참조하십시오.
   2. Y-미로 시험에서 동물의 운반 및 수집을 용이하게 할 수 있도록 슬라이딩 도어와 뚜껑이 장착 된 불투명 상자를 사용합니다(그림 1).
      1. 하단에 드레인 구멍이 있는 상자(21.6cm L x 27.9cm W)를 수정하고, 뚜껑에 작은 나사와 견과류를 장착하고, 잉그레/송신(도어)을 위한 단일 개구부를 제공합니다. 특정 방향은 보충 파일 2를참조하십시오.
      2. 볼트와 윙넛 또는 자물쇠를 사용하여 상자 페이스 플레이트를 Y-미로 페이스 플레이트에 부착하여 Y-미로 끝에 상자를 고정합니다.
         참고: 제자리에 있는 경우 상자는 아크릴 탑 피스를 제자리에 고정시합니다.
2. 크레푸스큘러 비디오 수집을 위한 카메라 설정: 보기 카메라 필드의 스냅샷은 그림 1을 참조하십시오.
   1. 카메라 사양: 프로젝트 카메라가 가변 조명 및 온도 조건에서 연속 비디오를 녹화하여 크레푸스및 야행성 연구 종을 수용할 수 있는지 확인합니다.
      1. 프로젝트 카메라가 인클로저의 천장 횡단보에 장착되어 있어 전체 Y-미로를 카메라 시야 내에서 캡처할 수 있도록 합니다. 텐트의 높이를 높이 올리거나 낮춤하여 시야를 높이 올리거나 줄입니다(~3m 높이에 장착된 프로젝트 카메라). 아크릴 상단의 카메라에서 방출되는 적외선의 반사가 밤새 푸티지에서 프레임의 중요한 부분을 가리지 않도록 합니다.
   2. 전원 사양: 각 프로젝트 카메라에 야간 촬영(약 20시간)을 위한 연속 비디오를 녹화할 수 있는 적절한 전원 공급 장치가 있는지 확인합니다.
      참고: AC 전원 공급 장치가 없는 경우 딥 사이클 밀봉 납산 12볼트 배터리(예: 12-V 20-Ah 젤 배터리 2개가 병렬로 유선)를 사용하여 전원을 공급할 수 있습니다.
   3. 녹음 사양: 파일 저장 볼륨을 최소화하려면 Y-미로에서 혀 를 세을 수 있도록 여전히 적절한 가장 낮은 품질의 비디오를 녹화합니다.
      참고: 고해상도 푸티지는 대량의 저장 볼륨을 필요로 하며 해상도를 낮추는 것은 파일 크기를 관리할 수 있도록 하는 매우 효과적인 방법입니다.
      1. 혀 를 감지하는 데 필요한 최소 영상의 프레임 레이트(초당 프레임, FPS)를 제한합니다(예: 최대 프레임 레이트25FPS로 800 x 450의 기록 해상도는 평가판당 약 120GB의 푸티지를 생성합니다).
   4. 비디오 획득 및 처리를 위한 프로토콜
      1. 각 향기 이벤트(2.3.10)의 시작 부분에서 카메라를 무장시키고 초점 이벤트(약 20시간)의 끝까지 지속적으로 녹화할 수 있습니다.
      2. 각 평가판이 완료되면 카메라를 끄고 SD 카드(2.4.4)를 검색합니다. 푸티지를 원하는 저장소 위치로 전송합니다.
      3. SD 카드는 기록 장치를 강제로 5분 클립으로 녹화하므로 처리가 용이하도록 영화 처리 소프트웨어를 사용하여 이러한 클립을 결합합니다.
      4. 가변 재생 속도와 사용자 정의 전진 점프 간격을 허용하는 미디어 파일 검토 프로그램을 사용하여 푸티지를 검토합니다.
         참고: 비디오 처리 중에 미세 한 해상도가 필요하지 않은 경우 검토 시간이 약 20시간에서 최대 1h로 줄어듭니다.
3. 향기를 낳는 동물을 실행하기위한 프로토콜
   참고: 이 섹션의 단계는 야생 파충류의 적응 시간이 길어지기 때문에 완료하는 데 약 1.5 일이 소요됩니다.
   1. 1.3.1 절의 바이어스 서면을 참조하여 미로에서 바이어스를 찾을 수 없도록 합니다.
   2. 표면을 다룰 때 나틀릴 장갑을 착용하거나 동물을 연구하여 향기 오염을 방지하십시오.
   3. 향또는 초점 동물을 수정을 위해 재판을 받기 전에 적어도 24 시간 전에 상자에 넣습니다.
      참고: 스트레스 효과를 최소화하기 위해 상자는 청소 나 기타 활동에 의해 방해받지 않고 가능한 한 미로에 가까운 그늘진 영역에 남아 있습니다. 테스트된 모든 동물(향, 초점)이 이런 식으로 적응되는지 확인합니다.
   4. 깨끗한 표면과 Y의 접합에 겹치기에 충분한 길이의 새롭고 깨끗한 향용지를 준비하고 전체 바닥 표면을 덮습니다(2개의 팔 용지 = 121.9cm; 1 기본 용지 = 152.4cm).
   5. 상자 근처의 용지 끝과 마스킹 테이프로 Y-접합을 고정합니다.
   6. 파티션을 설치하여 기본 팔의 절반을 길게 분할된 기본 팔(왼쪽 또는 오른쪽)을 차단하고 짧은 파티션으로 반대쪽 팔의 입구를 차단합니다. 장벽을 설치할 때 향기 용지를 찢지 마십시오. 큰 향기 동물의 경우 장벽 고장을 방지하기 위해 장벽 뒤에서 쉽게 제거하고 청소 할 수있는 무거운 물체를 부착하십시오 (2.1.1.5).
      참고: 향기 트레일은 항상 베이스의 한쪽에서 시작한 다음 반대쪽 팔로 건너가 서 초점을 초점이 기원하는 동물의 선택이 분명해져야 합니다.
   7. 아크릴 상단을 한 번에 한 섹션으로 밀어 각도가 완전히 충족되도록 합니다. 투명 플라스틱 테이프를 사용하여 틈새를 덮습니다.
   8. 날개 너트 및/또는 자물쇠를 사용하여 페이스 플레이트를 연결하여 암 상자를 미로에 모두 부착하고 문이 열려 있는지 확인합니다.
   9. 일몰 2시간 전에 기본 상자(향기로운 동물 포함)를 부착하고 모든 움직임이 느리고 안정적으로 유지되어 동물의 스트레스를 최소화합니다.
   10. 카메라를 무장시키고 기본 상자로 문을 열어 두 배럴 볼트 잠금 장치를 사용하여 문을 제자리에 고정시하십시오. 동물의 시야에서 벗어나 해당 지역을 빠져나오게 됩니다.
   11. 3 시간 후 (일몰 후 1 시간), 미로 내에서 동물의 위치와 주변 조건에 주의하십시오. 동물이 운송 중이면 상자에 들어갈 때까지 기다립니다.
       1. 동물이 상자에 있는 경우 상자 문을 닫고 고정한 다음 상자를 제거한 다음 동물을 제거하여 상자의 방어적인 향기 침착을 방지합니다.
       2. 동물이 미로의 몸 안쪽에 움직이지 않는 경우 시각적 신호(예: 긴 막대 또는 손 흔들림)를 사용하여 상자로의 움직임을 자극합니다. 동물이 남아있는 경우 아크릴 상단을 제거 할 수 있도록 팔 상자 (es)를 제거하고 동물을 수동으로 수집하고 가방에 옮길 수 있습니다.
          참고: 적절한 개인 보호 장비(PPE)는 대형 동물(예: 펑크 방지 장갑, 눈 보호)을 취급할 때 항상 착용해야 합니다.
   12. 미로를 부분적으로 분해하여 내부 파티션을 제거한 다음(향기 용지를 방해하지 않도록) 다시 조립합니다. 배변이 발생하면 깨끗한 마이크로 화이버 천으로 가능한 한 많이 수집하고 흡수하지만, 이 부위를 씻지 마십시오.
   13. 초점 동물을 실행하기위한 프로토콜에 대한 섹션 2.4로 진행합니다.
4. crepuscular 초점 동물을 실행하기위한 프로토콜
   참고: 이 섹션의 단계는 완료하는 데 약 2일이 걸리며 섹션 2.3의 시작과 같은 시간에 시작되어야 합니다.
   1. 미로에서 실행되기 전에 적어도 24 시간 동안 상자에 예약 된 초점 동물을 적응.
      1. 초점 동물 적응의 마지막 시간 동안, 다음 단계로 이동하기 전에 향기 를 낳는 동물을 실행 (2.3.9).
         참고: 향기를 놓는 단계는 미로에 초점을 둔 동물을 도입할 때 최대한 가깝게 시간을 하여 향기 저하를 줄입니다.
   2. 날개 너트 및/또는 자물쇠를 사용하여 베이스 박스(초점 동물 포함)를 Y-미로 의 기지에 부착합니다. 상자를 잡고 운반할 때 느리고 꾸준한 움직임을 사용하여 초점 동물에 대한 스트레스를 최소화하십시오.
      1. 두 팔 상자 문이 걸려 있는지 확인합니다. 배럴 볼트를 사용하여 베이스 박스 도어를 열고 래칭하여 초점 시험을 시작합니다. 동물의 시야에서 벗어나 해당 지역을 빠져나오게 됩니다.
         참고 : 야생 야행성 파충류 시험으로, 초점 동물은 미로를 탐험 하룻밤 주어진다.
   3. 일출 후 4 시간, 미로로 돌아가 서 섹션 2.3.11.1을 따라 초점 동물을 제거 합니다.
   4. 카메라 SD 카드를 수집하고 필요한 경우 배터리를 충전하십시오. 미로에서 사용된 종이를 버리고 청소를 진행합니다(섹션 1.5).

그림 1. USGS Y-미로의 레이아웃. 왼쪽에는 원근에 대한 스케일 바가 있는 Y-미로의 구성 요소를 회로도가 표시됩니다. 오른쪽에서 비디오 카메라의 스냅샷은 행동 기록의 시야를 보여줍니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

결과

Y-미로 시험에서 다양한 변수를 기록 및/또는 채점할 수 있습니다. 연구의 디자인은 주로 원하는 결과/결과물에 의해 구동되어야 합니다. 또한, 연구가 반복적인 측정(예를 들어, 동일한 초점 동물의 반복사용)에 의존하는 경우 적절한 테스트 및 분석 구조가 필요합니다. 예를 들어, USDA 시험이 초점 테구의 반복적인 테스트에 의존함에 따라 실험 시험의 계획은 완전히 무작위화되었습니다.

선택 데이터: Y-미로를 이용한 대부분의 연구는 간단한 바이너리 선택 데이터를 보고하고 이난 성 테스트와 같은 파라메트릭 통계로 결과를 분석합니다. 여기서 가장 큰 제한사항은 통계 분석의 힘에 직접적인 영향을 미치는 샘플 크기입니다. 그림 2에서,연구 샘플 크기당 일련의 통계 적 임계값은 통계적으로 유의한 결과를 산출하기 위해 주어진 이항 검사를 위해 얼마나 많은 "성공"이 발생해야 하는지 를 보여 줍니다. 이들은 수학적으로 파생되고 따라서 어떤 Y-미로 시험든지 일반화할 수 있습니다. 이노미알 통계는 온라인 프리웨어를 사용하여 쉽게 생성할 수 있습니다. 확률계산을 위해 우선 순위가 부여되는 경우 한 꼬리 분포가 사용됩니다. 그렇지 않으면 두 꼬리 분포를 사용해야 합니다.

팔의 선택은 종종 주어진 팔에 초점 동물이 이동하는 거리에 의해 결정된다. 이 임계값을 설정하는 가장 간단한 방법은 미로 내에 랜드마크를 설정하는 것입니다. 대부분의 Y-미로 연구에서 랜드마크는 팔 상자 입구입니다. 파충류는 헤드의 전방 영역에서 화학 감지 기관과 함께 모든 화학 감각 평가를 수행하기 때문에, 머리는 시험 중에 초점이다. 예를 들어, 버마 비단뱀은 종종 전체 미로 자체보다 길기 때문에 선택이 가장 적합하며 헤드가 랜드마크를 지나가는 움직임에 의해 가장 효율적으로 결정됩니다. 선택을 결정하기위한 다른 옵션은 팔에 소요된 시간과 초점 동물의 완전한 이동을 상자에 넣는 것입니다. 실패는 특정 기간 내에 선택을하지 않는 초점 동물에 의해 결정됩니다.

보다 미세한 해상도 분석은 Y-미로의 선택 데이터에서 파생될 수 있습니다. 예를 들어, 연구원은 선택 페널티 점수^(16)를생성 할 수 있습니다. 여기서, 연구원은 초점 동물이 미로의 비 표적 팔을 탐구하는 정도를 추적해야합니다. 비표적은 연구원이 시험된 대체 가설에 근거하여 포심동물이 선택하지 않을 것이라는 선견점을 결정하는 팔로 정의될 수 있다. 대상이 아닌 팔의 가장 간단한 예는 한 쪽 팔만 대상 향을 포함할 때 무향 팔입니다. 더 복잡한 예는 동일한 소스에서 두 향기 사이의 선택이 될 것입니다,하지만 다른 농도에서 제시^7. 실험 설계가 다단계 및/또는 데이터가 바이너리에서 증분으로 이동하는 경우, 선택 페널티와 마찬가지로 분산(ANOVA) 또는 연속 또는 비례 데이터 집합과 함께 사용되는 다른 방법의 반복적인 측정값과 같은 적절한 통계적 접근 방식을 사용해야 합니다.

동작: 초점 동물이 관찰되는 실험 기간 내내 다양한 개별 행동을 정량화할 수 있습니다. 이러한 변수 수는 데이터^14,15의하위 집합에 대한 예비 관찰 에 따라 알려진¹⁶ 또는 사후 Hoc에 따라 우선 순위를 결정할 수 있다. 연구 목표와 해결 정도는 미로 내에서 어떤 행동 평가를 해야 하는지, 즉 많은 연구에서 선택 데이터만 정량화된^{경우 결정합니다.} 동작은 미로 전체, 섹션 또는 특정 기간 동안 평가될 수 있습니다. 예를 들어, 기지 또는 팔의 접합부에서만 보이는 동작의 우선 순위가^8일수 있습니다. 비디오 녹화는 비디오의 해상도와 비디오 저장소 제약 조건을 부과하는 요소인 실험이 시작되기 전에 고려해야 하지만 행동 점수를 용이하게 합니다.

시간적 변수: 행동 변수와 마찬가지로 Y-미로 시험 중에 동물 성능의 많은 시간적 측면을 정량화할 수 있습니다. 예를 들어 연구원은 대기 시간 기간(예: 대기 시간(예: 상자^8에서나오는 대기 시간)을 시간 할 수 있습니다. 대부분의 측두적인 변수는 각 팔에 소요되는 총 후행 시간 또는 시간과 같은 미로의 탐색과 관련이 있습니다. 이러한 변수는 일반적으로 다중 방향 ANOVA와 같은 다중 계수 분석에서 분석됩니다.

관찰자 편향: 동물 행동과 관련된 모든 연구에서 관찰자 편향은 데이터 수집^18에큰 영향을 미칩니다. 따라서 관찰자는 테스트 중인 치료에 눈이 멀어야 합니다. 이렇게 하는 가장 간단한 방법은 비디오 파일을 숫자로 코딩한 다음 관찰자에게 할당하기 전에 무작위로 정렬(예: 난수 생성기)입니다. 라이브 데이터 수집이 유일한 옵션일 때 관찰자 편향을 제어하는 것은 불가능합니다. 필드 설정에서, 이것은 두 개의 협력자가 필요합니다: 처리에 관찰자 맹인 및 재판을 설정하는 코디네이터. 광범위한 리뷰는 행동 및 생태 학 연구에서 데이터 수집 및 해석에 대한 실험자 편향의 효과를^요약18,19.

그림 2. Y-미로 결과에서 이항 테스트를 위한 샘플 크기와 P 값입니다. 주어진 각 샘플 크기는 향이 Y(대상 암)의 한 쪽 팔에서 테스트되는 세트 수의 시험을 나타내며 다른 하나는 컨트롤(비표적)일 수 있습니다. 각 막대 위의 상단 번호는 대상 암 선택 수에 대한 원 테일 P 값이며, 아래쪽은 두 꼬리입니다. 맨 위 막대 내의 숫자는 전통적으로 통계적으로 유의한 비대상 선택 항목의 최대 수를 나타냅니다(P < 0.05). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

보충 파일 1. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오. 

보충 파일 2. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오. 

토론

Y-미로는 파충류의 화학 생태를 조사하는 매우 강력한 도구이지만 제한된 설계는 다른 조사 방법을 배제 할 수 있습니다. 그러나 다른옵션의 다양성은^{11,12,20,21,22를}사용할 수 있습니다. 예를 들어, 혀-플릭 어약은 악취^{23,24,25,26을}대조하는 화학 자극의 배열에 전시된 동작의 동시 평가를 실행하고 허용하는 것이 더 간단하다. 오픈 필드 테스트는 초점 동물이 화학 단서의 소스를 만날 때까지 인클로저를 자유롭게 탐색하고 행동 반응이^27,28로점수화되는 또 다른 옵션입니다. 이러한 접근법의 조합은^{레푸지아(29)와}함께 인공 및 자연 악취의 혼합을 제시하는 것과 같은 다양한 맥락에서 파충류의 차별적 능력을 평가할 수 있다. Y-미로는 또한 동물을 공중 화학 단서에 단독으로 노출하거나 기판 매개^{큐(16,30)와}함께 변형할 수 있으며, 보관된 비디오 데이터가^31일인 경우 포스트 호크 추론을 사용하여 데이터 수집을 재설계할 수 있다. Bioassays는 데이터 수집을 단순화하고 충돌하는 자극을 최소화하도록 설계되어야 하며, 특히 특정 신호 소스(예: 화학 신호^21)를평가할 때 특히 충돌하는 자극을 최소화해야 합니다.

동물 행동의 연구원은 종종 관찰하고 새로운, 인공 환경에서 초점 동물 반응을 정량화 (예를 들어, 특징없는 풍경과 동봉 된 미로), 주어진 동물이 회피, 동요, 또는 유사한 고민 행동을 대비 자연, 탐사 행동을 전시하고 있는지 여부를 평가하기 위해주의를 기울여야한다. 실험 장치에서 고민 동물 행동은 주로 신공포증에 기인한다 : 참신^32의두려움 . 예를 들어, 초점 동물이 포심을 달성하기 위해 장치의 관절 이나 가장자리에 대해 밀어 탈출 행동이다. 또 다른 예는 수줍음, 어디 초점 동물 미로 입력 하는 것을 꺼려 시연, 미로 항목의 대기 시간에 의해 정량화 될 수 있는 정도. 장치(re)설계는 조난의 이러한 혼동 효과를 피하기 위해 초점 동물의 참여를 용이하게 할 수 있습니다. 가장 일반적인 접근법은 시험이 시작되기 전에 환경의 참신함을 제거하기 위해 장치에 초점 동물의 반복도입이며, 현대 통계 모델(예를 들어, 일반화된 선형 혼합 모델)은 여러 시험에서 테스트 동물을 사용할 수 있도록 한다. 행동 테스트에서 생태학적 고려 사항과 관련된 중요한 점은 감소된 신공포증이 침략적인 종^33의성공과 관련이 있다는 것입니다. 따라서, 문제의 종의 우선 지식에 따라, 신공포증은 실험적 설계 고려사항으로서 가변적 중요성을 가질 수 있다.

비디오에서 행동 데이터를 수집하면 실험 적 시중의 주요 병목 현상이 되는 여러 제약 조건이 부과됩니다. 예를 들어 지정된 평가판의 길이는 데이터 추출 시간을 기하급수적으로 증가시킬 수 있습니다. 한 가지 해결 방법은 임계값이 충족될 때까지만 동작을 분석하는 것입니다(예: 총 활성 시간). 임계값은 지정된 평가판에서 사용할 수 있는 가장 긴 비디오를 기반으로 할 수 있습니다. 또는, 기계 기반 관측(예: 인공 지능)을 개발할 수 있지만, 이는 품질 관리에 필요한 상당한 노력으로 시간과 자원이 소모됩니다. 또 다른 문제는 데이터 관리입니다: 비디오는 행동 점수 및 평가를 가능하게 하기에 충분한 품질이어야 하므로 데이터 저장소 제약 조건이 발생합니다. 클라우드 저장소에 액세스할 수 있지만 업로드/다운로드 속도는 특히 원격 필드 위치에서 데이터 수집이 발생하는 경우 문제가 되는 경우가 많습니다. 행동 관찰의 무결성에 영향을 미치는 기록 도구의 한계에 추가 적인 문제가 나타납니다. 초점 동물 행동의 명확한 보기는 항상 필요하지만, 가시성은 종종 제어 할 수없는 요인 (예 : 습기, 곤충, 바람 운동)에 의해 방해됩니다. 또한, 레코딩이 단일 원근(예: 새의 눈보기)에서 나올 때, 수직 평면에서 발생하는 동작(예: 헤드^14)은평가하기 어렵다. 해결책은 평가판당 여러 카메라 각도를 제공하는 것입니다. 마지막으로, 하루 중 시간은 행동 기록에 크게 영향을 미칩니다. 야간 행동 분석은 Y-미로 표면이나 카메라 피드를 방해할 수 있는 곤충의 매력에 방해가 되는 눈부심을 피하기 위해 야간 모드와 최소한의 조명 프로젝션을 갖춘 카메라가 필요합니다. 위의 점을 고려하여, 연구 사이트 또는 종 생물학의 예아는 어떤 주파수로 발생할 가능성이 있는지 알려서 바람직한 샘플 크기를 알릴 수 있습니다.

행동은 생리학과 밀접하게 결합되고, 다양한 종에서 행동 내분비학의 평가를 위한 Y-미로의 유용성을 입증하고 있다. 그러나,이 논문은 대상 종, 연구 질문 및 사용 가능한 자원에 따라 이러한 실험의 실행에 약간의 변화를 강조한다. 따라서 각 테스트 설정의 재료 및 치수 선택은 잠재적인 후속 연구 확장을 위해 신중하게 고려해야 합니다. 섹션 2는 테거스와 미래의 더 복잡한 행동 시험을 수용하기 위해 통합 된 섹션 1에 설명 된 자료에 대한 수정사항을 설명합니다. 에버글레이즈 미로의 수직 깊이가 증가하면 야생 으로 잡힌 테구의 화학 생태에 대한 새로운 질문이 프로젝트 설계 및 설정을 과도하게 연장하지 않고 답변할 수 있게 되어 이 실험 장치의 번역 가능성을 더욱 입증할 수 있습니다.

위에서 설명한 기술을 비교적 원격 설정(섹션 2 참조)에서 사용하는 경우 고려해야 할 몇 가지 제한 요소가 있으며 프로젝트 계획이 가장 중요합니다. 규정된 치료 실험및 표적 종의 생물학적 타이밍(예: 계절성)에 필요한 통계적 힘에 따라 필요한 자원과 노동력이 영향을 받습니다. 또한, 초점 동물의 단일 또는 반복 사용이 원하는 경우, 잠재적인 스트레스를 줄이기 위해주의가 필요하다. 이러한 각 요소는 프로젝트 타임라인을 확장하거나 노동, 공간 및 재료가 증가해야 합니다. 예를 들어, 섹션 2는 야생 잡히는 수컷 비단뱀을 다른 야생 잡히고 호르몬으로 조작된 수컷의 다른 무리를 따라가는 초점 동물로 사용되며, 모두 스트레스 효과를 최소화하기 위해 상자를 들고 있는 데 약 24시간의 조용한 적응 시간이 필요합니다. 이러한 적응 기간은 시험 기간을 2일 이상으로 연장했지만, 포로및 취급으로 인한 스트레스는 야생 동물의 행동에 영향을 미치며 깨끗한 데이터 세트^34,35를생성하기 위해 최소화되어야 합니다.

요약하자면, Y-미로는 사전 계획이 경계하는 경우, 광범위한 변수 조건에서 다양한 야생 동물의 화학 생태학을 조사하는 데 사용할 수있는 강력하고 적응 가능한 도구입니다. 적절한 질문을 선택하고 주어진 taxa 및 조건에 대한 실험 설정을 적절하게 설계하기 위해 신중하게 고려해야 합니다. 연구원과 관리자는 Y-미로를 사용하여 동물 화학 감각 생물학을 더 잘 이해할 수 있으며, 특히 원격 모니터링 도구와 결합될 때 대량의 미세 규모의 행동 데이터를 제공하는 유연한 실험 설계를 가능하게 합니다.

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
1" Steel zinc-plated corner brace	Everbilt, The Home Depot	13619	See Supplemental File 1, Step 2.1 "90 degree 2.5 cm steel corner brace"
121.92cm W x 304.8cm  L x 1.27cm H white polypropylene Extended Range High-Heat UHMW Sheet	TIVAR	UHMNV SH	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.1. "white polpropylene")
182.88 cm L x 81.28 cm W x 0.64 cm Thick Clear Acrylic Sheet	Plexiglass	32032550912090	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.1.6. "Acrylic pieces")
2.54 cm W x 2.54 cm H x 243.84 cm L Mill-Finished Aluminum Solid Angle	Steelworks	11354	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.1.1. "aluminum angle bracket")
4.5 kg spool of 5 mm Round Polypropylene Welding Rods	HotAirTools	AS-PP5N10	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.1. "heat weld")
5 mm Plain Aluminum Rivets	Arrow	RLA3/16IP	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.1.1. "rivet")
Aluminum angle, 1.9 cm	Everbilt, The Home Depot	802527	See Supplemental File 1, Step 1.2 "aluminum angle (1.9 cm x 1.9 cm x 0.16 cm thick)"
Aluminum angle, 2.5 cm	Everbilt, The Home Depot	800057	See Supplemental File 1, Steps 1.2 and 2.2.2 "aluminum angle (2.5 cm x 2.5 cm x 0.16 cm thick)"
Aluminum angle, 3.2 cm	Everbilt, The Home Depot	800037	See Supplemental File 1, Step 1.2 "aluminum angle (3.2 cm x 3.2 cm x 0.16 cm thick)"
Aluminum flat bar 1" x 1/8" thick	Everbilt, The Home Depot	801927	See Supplemental File 1, Step 3.2.1 "aluminum strap"
Avigilon 2.0 MP camera	Avigilon, a Motorola Solutions Company	2.0C-H4SL-BO1-IR	See "1.5 Camera set-up and video acquisition" (step 1.5.1 "Avigilon 2.0 MP")
Avigilon NVR	Avigilon, a Motorola Solutions Company	HD-NVR3-VAL-6TB-NA	See "1.5 Camera set-up and video acquisition" (step 1.5.3 "NVR")
Clear acrylic sheet (5.6 mm thick)	United States Plastic Corp.	44363	See Supplemental File 1, Step 1.3 "clear acrylic sheet" and step 3.2.1 "clear acrylic door"
Fillet Weld Nozzle 3/16" x 15/32" / 4.5 x 12 mm	TRIAC	107.139	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.1. "heat weld")
Hanging File Folder Box	Sterilite	18689004	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.2.1. "Boxes")
HardiePanel HZ10	James Hardie Building Products	9000525	See Supplemental File 1, Step 1.1 "fiber cement siding"
Heat Welding Gun	TRIAC	141.227	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.1. "heat weld")
Kraft Butcher Paper Roll, 24"	Bryco Goods	24 inch x 175 FT	See "1.2 Protocol for running scent-laying tegus" (step 1.2.1.2 "butcher paper")
Kraft Butcher Paper Roll, 46 cm wide	Bryco Goods	BGKW2100	See "2.3. Protocol for running scent-laying pythons" (step 2.3.4. "scenting paper")
Micro-90 Concentrated Cleaning Solution	International Products Corporation	M-9050-12	See "1.4 Breakdown and clean-up" (step 1.4.4 "laboratory-grade soap")
MKV ToolNix - Matroska tools for linux/Unix and Windows	Moritz Bunkus	v.48.0.0	See "2.2. Camera setup and video acquisition" (step 2.2.4.2. "movie processing software")
Network Camera	Axis Communications	M3104-LVE	See "2.2. Camera setup and video acquisition" (step 2.2.1. "Project camera")
Palight ProjectPVC 1/4"	Palram	159841	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.2.3. "faceplate")
Palight ProjectPVC 1/8"	Palram	156249	See "2.1. Y-maze components and rationale for changes to USDA design " (step 2.1.2.1. "door")
Privacy windscreen (green)	MacGregor	Size to fit	See Supplemental File 1, Step 4.2 "green heavy duty shade cloth"
Protective Glove, Full-Finger	ArmOR Hand	HS1010-RGXL	See "2.3. Protocol for running scent-laying pythons" (step 2.3.11.2. NOTE: "puncture-resistant glove")
REScue Disinfectant	Virox Animal Health	44176	See "1.5. Breakdown and clean-up." (step 1.5.4. NOTE "sanitation solution")
Reversable PVC trim, 1/2" x 24"	UFP Industries, Veranda products	H120XWS17	See Supplemental File 1, Step 2.1 "PVC board partition", and step 3.2.1 "thinner PVC trim boards"
S4S / Veranda HP TRIM	UFP Industries, Veranda products	H190OWS4	See Supplemental File 1, Steps 1.2, 2.2.2, and 2.2.3 "PVC board"
S4S / Veranda HP TRIM (1" x 8" Nominal)	UFP Industries, Veranda products	827000005	See Supplemental File 1, Steps 3.2.1 "PVC trim board"
ScotchBlue 24 in. Pre-taped Painter’s Plastic	3M	PTD2093EL-24-S	See "1.2 Protocol for running scent-laying tegus" (step 1.2.1.3 "plastic sheeting")
Sterilite 114 L tote box	Sterilite Company	1919, Steel	See Supplemental File 1, Step 3.2 "arm box"
Sterilite 189 L tote box	Sterilite Company	1849, Titanium	See Supplemental File 1, Step 3.2 "Base box"
Super Max Canopy	ShelterLogic	25773	See Supplemental File 1, Step 4.3 "white canopy"
VLC Media Player	VideoLAN	v.3.0.11	See "2.2. Camera setup and video acquisition" (step 2.2.4.3. "media file reviewing program")
White Pavilion Tent	King Canopy	BJ2PC	See Supplimental File 2 "3. Enclosure materials and consideratons" (step 3. "pavilion tent")