Isolation of CNS Cell Types Using Magnetic Beads in Naive and EAE Mice

먼저, 정제된 희석되지 않은 마우스 CNS 세포 현탁액을 두 개의 분획으로 나누어 미세아교세포와 희소돌기아교세포를 추가로 분리합니다. 그런 다음 다양한 CNS 세포 유형에 대한 표면 항원에 특이적으로 자기적으로 표지된 마이크로비드를 각 세포 현탁액에 추가합니다. 컬럼을 자기장에 배치하고 컬럼을 동일시한 다음 결과 셀 현탁액을 컬럼에 추가합니다.

자석으로 라벨링된 셀은 컬럼 내에 유지되고 라벨이 지정되지 않은 셀은 통과합니다. 자기장에서 컬럼을 제거한 후, 자기적으로 표지된 세포를 양성으로 선택된 세포 분획으로 컬럼에서 튜브로 플러시합니다. 희소돌기아교세포의 음성 흐름을 뉴런과 성상교세포의 추가 분리를 위해 두 개의 분획으로 나눕니다.

살아있는 세포 또는 죽은 세포 구별과 결합된 세포 유형 특이적 마커를 사용한 유세포 분석 분석은 미세아교세포, 희소돌기아교세포, 성상교세포 및 뉴런을 생성했습니다. 다양한 세포 집단의 표현형 특성 분석은 모든 주요 CNS 상주 세포 유형에 대해 약 90%의 순도와 생존율을 갖는 단일 세포 현탁액이 얻어졌음을 입증했습니다.