80% 에탄올을 사용하여 마우스 피부를 멸균하고 마우스를 멸균된 생물 안전 후드로 옮기는 것으로 시작합니다. 꼬리 힘줄 코어 외엽을 분리하려면 메스를 사용하여 꼬리 밑부분을 자릅니다. 그런 다음 핀셋으로 꼬리 끝을 잡고 흔들어 피부를 찢습니다.
핀셋을 부드럽게 당겨 힘줄 코어 외식을 노출시킵니다. 힘줄 코어 외식물을 표준 배양 배지에 넣고 새 메스 칼날을 사용하여 꼬리에서 분리합니다. 다음으로 힘줄 섬유아세포를 분리하기 위해 메스를 사용하여 쥐의 발 중앙을 횡단 절개합니다.
이 절개의 양쪽 끝에서 뒷다리 측면을 따라 엉덩이까지 수직으로 자릅니다. 그런 다음 핀셋을 사용하여 발의 피부 덮개를 고정하고 종아리 근육을 덮고 있는 피부를 벗겨냅니다. 새 메스 칼날로 종골에서 아킬레스건을 분리합니다.
느슨한 끝을 핀셋으로 고정하고 다른 쪽 끝을 비복근에서 분리합니다. 힘줄을 PBS로 옮기고 남아 있는 근육 조직을 제거합니다. 그런 다음 힘줄을 소화 배지로 옮깁니다.
그런 다음 가위를 사용하여 고관절을 자르고 뒷다리를 몸에서 분리합니다. 차가운 PBS로 뒷다리를 씻으십시오. 메스로 근육을 제거하고 얼음 위의 페트리 접시에 넣으십시오.
페트리 접시가 얼음 위에 있는 동안 근육 조직을 1mm 큐브보다 작은 조각으로 다집니다. 다진 근육 조직을 소화 배지로 옮깁니다. 남은 근육 조직을 제거한 후 남은 뼈를 차가운 PBS로 씻습니다.
뼈를 신선하고 차가운 PBS에 넣고 골수를 노출시키기 위해 골단을 점차적으로 제거합니다. 주사기에 0.4 x 25mm 주사 바늘을 장착하고 10ml의 대식세포 배양 배지를 채웁니다. 각 뼈를 50밀리리터의 플라스틱 튜브 위에 놓고 바늘을 위에서부터 골수에 약 1mm 깊이로 삽입합니다.
주사기를 비워 골수를 씻어냅니다.
