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March 29th, 2024
DOI :
10.3791/201629-v
필기록
먼저 동결 보존된 CSF-CTC의 해동된 배양액을 섭씨 4도에서 257G에서 5분 동안 회전시킵니다. 피펫으로 상층액을 흡입합니다. PBS 1밀리리터를 추가하여 세포 펠릿을 세척합니다.
상층액을 다시 흡입합니다. 다음으로, 450 마이크로리터의 HMC 컨디셔닝 매체에 있는 셀을 96웰 플레이트의 3개의 개별 웰에 재현탁시킵니다. 150 마이크로리터의 셀 현탁액을 96웰 플레이트의 3개의 다른 웰에 피펫팅합니다.
HMC 컨디셔닝된 매체를 3일마다 새 매체로 보충하십시오. 세포 배양이 90% 밀도에 도달하면 웰의 트립신화된 세포를 24웰 플레이트의 빈 웰로 옮깁니다. 종양 세포를 계속 배양하는 동안 추가 실험을 위해 기하급수적으로 변형 및 확장되는 세포의 클론을 선택합니다.
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