향상된 응고 시각화를 위해 형광 표지된 피브리노겐을 인간 혈액 응고에 통합

먼저, 형광 표지가 부착된 피브리노겐을 구연산된 인간 전혈 3밀리리터에 첨가하여 밀리리터당 60마이크로그램의 최종 농도를 달성합니다. 섭씨 37도의 수조에서 120mm 직경의 드럼으로 챈들러 루프를 설정합니다. 표준 200 마이크로리터 PCR 튜브를 절단하고 튜브의 끝을 연결합니다.

혈액 응고를 시작하려면 전혈 3ml에 200mcalcalcalch chloride 176미리터를 추가합니다. 3밀리리터 주사기를 사용하여 부드럽게 뒤집어 적절하게 혼합한 후 혈액을 튜브에 넣습니다. 즉시 튜브를 Chandler Loop 드럼에 놓고 끝을 연결합니다.

저조도 조건에서 수조에 부분적으로 잠긴 드럼을 40RPM으로 회전시킵니다. 40-60분 후, 튜브에서 혈전을 제거합니다. Gross Chandler Loop FITC 피브리노겐 태그가 지정된 전혈 특성은 자외선 아래에서 형광의 균일한 분산을 보여주었습니다.

또한, 전혈 내에서 FITC 피브리노겐의 정도를 변화시켜도 혈전 중량에는 변화가 없습니다.