시작하려면 윤활 처리된 직장 프로브를 삽입하여 수술 중 마취된 쥐의 온도를 조절합니다. 쇄골 위 마취된 쥐의 오른쪽 아래 목 부위에 있는 경정맥 부위를 찾은 후 DeBakey Atraumatic Forceps를 사용하여 피부를 부드럽게 잡고 가늘고 날카로운 가위나 메스로 정밀하게 절개합니다. 표준 패턴 집게로 조직을 부드럽게 자릅니다.
경정맥을 찾아 근육 구획에서 부드럽게 풀어줍니다. 4-0 실크 봉합사를 배치하여 경정맥의 말단면을 단단히 결찰합니다. 바늘 홀더가 있는 봉합사를 사용하여 경정맥을 긴장시킵니다.
경정맥의 근위부에 4-0 봉합사를 놓고 조이지 않고 외과 매듭을 준비합니다. Vannas 미세 절개 가위를 사용하여 경정맥을 작게 절개합니다. 작은 집게로 정맥 벽을 조심스럽게 잡은 후 PE50 카테터를 경정맥에 삽입합니다.
카테터를 약간 전진시키고 정맥에 올바른 위치를 확인하기 위해 소량의 혈액을 뽑아 다시 주입합니다. 카테터를 고정하기 위해 미리 준비한 매듭을 조입니다. 절개 부위에 리도카인 한 방울을 바릅니다.
절개 부위를 촉촉한 멸균 거즈 패드로 덮습니다. DeBakey Atraumatic Forceps를 사용하여 왼쪽 다리의 Scarpa 삼각형 피부를 잡고 가늘고 날카로운 가위나 메스로 절개합니다. 표준 패턴 겸자로 조직을 부드럽게 희석시킵니다.
대퇴골 트라이어드를 찾아 트라이어드 아래에 집게 하나를 놓습니다. 그런 다음 두 번째 표준 패턴 겸자를 사용하여 동맥을 신경 및 대퇴 정맥에서 조심스럽게 분리합니다. 4-0 봉합사를 삽입하여 대퇴 동맥을 원위부로 결찰하고 바늘 홀더로 봉합사를 취하여 대퇴 동맥을 긴장시킵니다.
이제 대퇴 동맥의 근위부에 4-0 봉합사를 놓고 닫지 않고 외과 매듭을 준비합니다. 동맥을 고정한 후 Vannas 미세 절개 가위를 사용하여 대퇴 동맥을 가로 절개합니다. 표준 패턴 겸자로 동맥 벽을 잡고 겸자로 대퇴 동맥을 고정하는 카테터로 대퇴 동맥을 캐뉼레이팅합니다.
동맥의 클램프를 부드럽게 풀고 혈액이 카테터로 다시 흐르지 않도록 합니다. 신호가 좋으면 카테터를 동맥 쪽으로 약간 전진시키고 미리 준비한 외과 의사의 매듭을 조입니다. 쥐에게 헤파린을 투여하고 절개 부위에 적신 멸균 거즈 패드를 놓습니다.
10분 안정화 후 5분 동안 기저 혈류역학 값을 기록합니다. 출혈성 쇼크를 유발하려면 1밀리리터 주사기를 사용하여 5분에 걸쳐 대퇴 동맥에서 5밀리리터의 혈액을 채취합니다. 실온에서 50% 젖산 링거 용액과 50% 수집된 혈액을 혼합하여 준비합니다.
혼합물로 채워진 2밀리리터 주사기를 경정맥 캐뉼라 끝에 놓습니다. 출혈성 쇼크 유지를 위해 평균 동맥압이 수은 38mm를 초과할 때 대퇴 동맥에서 200마이크로리터의 혈액을 빼냅니다. 압력이 수은 32mm 이하로 떨어지면 경정맥을 통해 50% 혈액, 50% 젖산 링거 혼합물 200마이크로리터를 주입합니다.
거즈 패드로 꼬리를 멸균 한 후 바늘 끝을 사용하여 꼬리 끝에서 혈액 방울을 뽑아 말초 혈액 젖산을 측정합니다. 마지막으로, 주사기 펌프가 있는 경정맥 카테터를 통해 20밀리리터 주사기를 사용하여 젖산 링거 용액으로 쥐를 소생시킵니다.
