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01:45 min
September 27th, 2024
DOI :
10.3791/202158-v
필기록
시작하려면 섭씨 80도의 보관 중 최적의 절단 온도 화합물에 보관된 급속 냉동 브레인을 꺼내 저온 유지 장치 챔버 내부에 넣습니다. 샘플이 챔버 온도로 따뜻해지도록 합니다. 외날 면도기를 사용하여 주사 부위의 뇌를 관상동맥으로 절개합니다.
소량의 최적 절단 온도를 사용하여 샘플을 시편 디스크에 장착합니다. 시료의 안정적인 장착을 위해 챔버 내부에 냉각된 무게로 충분한 압력을 가합니다. 장착된 샘플과 시편 디스크를 시편 헤드 위로 이동합니다.
20마이크로미터 절편을 취하여 조직을 원하는 깊이로 자릅니다. 원하는 깊이에 도달하면 저온 유지 장치를 조정하여 샘플의 5-7마이크로미터 섹션을 차지합니다. 그런 다음 사전 라벨이 부착된 유리 슬라이드에 섹션을 장착합니다.
4% 파라포름알데히드의 단면을 15분 동안 고정합니다. 고정 후 이 슬라이드를 DPBS로 세 번 헹굽니다. DAPI가 포함된 장착 매체 40마이크로리터 방울을 슬라이드에 추가합니다.
매체 위에 유리 커버 슬립을 조심스럽게 놓습니다. 형광 현미경 검사에서 DAPI 및 Cy5.5를 사용하여 조직을 시각화합니다. 종양 조직의 생체 외 형광 현미경 검사에서 관찰된 CY 5.5 형광 신호는 자성 나노입자의 전달을 확인했습니다.
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