잘 분화된 RPE 배양에서 산소 소비율을 모니터링하기 위한 Resipher 시스템 "sandwich" 설정

시작하려면 감지 덮개를 빈 96웰 수신기 플레이트에 놓고 세포 배양 인큐베이터에 놓습니다. 감지 덮개에 장치를 정렬 및 장착하고 제공된 USB 케이블을 통해 허브에 연결하여 Recypher 샌드위치를 만듭니다. 이제 Lucid Lab 웹 사이트로 이동하여 오른쪽 상단 모서리에 있는 새 실험 버튼을 클릭하여 새 실험을 만듭니다.

실험 제목의 이름을 지정하고 연구에 대한 관련 실험 노트를 입력합니다. 다음으로, 치료군에 우물 조건을 만듭니다. 예를 들어, 매체의 다양한 혈청 농도가 산소 소비율에 미치는 영향을 테스트하는 경우 사용할 그룹 이름 중간 혈청 농도에서 혈청을 선택하고 더하기 버튼을 클릭하여 더 많은 혈청 백분율 값을 추가합니다.

그런 다음 특정 혈청 비율을 받을 웰을 할당하고 해당 웰의 색상 패턴을 선택합니다. 그룹 추가 버튼을 클릭하여 필요에 따라 그룹을 더 추가합니다. 다음으로, 플레이트 설정을 정의하고 해당 장치와 플레이트 스타일을 선택합니다.

이렇게 하려면 플레이트 추가 버튼을 클릭하고 장치를 선택한 다음 플레이트 유형을 선택합니다. 처리를 선택하고 해당 우물을 클릭하십시오. 이제 지금 시작 버튼을 클릭하여 실험을 시작합니다.

web사이트의 표시등과 허브의 발광 다이오드가 녹색으로 켜져 있는지 확인하십시오. 시스템을 15-60분 동안 작동시켜 각 센서가 잘 보정되고 대기 산소를 감지하는지 테스트할 수 있도록 합니다. 그런 다음 감지 덮개에서 장치를 제거하고 장치를 인큐베이터에 거꾸로 놓아 장치의 모터가 재설정될 수 있도록 합니다.

이제 감지 뚜껑이 있는 플레이트를 RPE 배양이 들어 있는 96웰 플레이트와 함께 세포 배양 후드에 다시 놓습니다. RPE 배양이 있는 플레이트의 배지를 모든 웰에 대해 동일한 배지 및 부피로 변경하여 각 웰에 대한 기준 산소 소비율 값을 얻습니다. 그런 다음 감지 뚜껑을 세포 배양이 들어있는 플레이트로 옮기고 세포 배양이 들어있는 플레이트의 표준 뚜껑을 빈 96웰 수신기 플레이트에 놓아 표준 뚜껑의 무균 상태를 유지합니다.

세포 배양이 있는 플레이트와 감지 뚜껑을 세포 배양 인큐베이터에 다시 놓습니다. 감지 덮개에 장치를 정렬 및 장착하고 제공된 USB 케이블을 통해 허브에 연결합니다. 웹 사이트 인터페이스와 허브의 표시등이 모두 녹색으로 켜져 있는지 확인하십시오.

장치가 최소 12-24시간 동안 각 웰에서 산소 소비율 또는 OCR을 측정하도록 하여 기준 OCR을 캡처합니다. 실험이 끝나면 세포 배양 후드에서 감지 뚜껑을 70% 에탄올에 10분 동안 담가 살균합니다. 에탄올과 물이 완전히 증발하면 감지 덮개를 새 96웰 수신기 플레이트에 끼웁니다.