Resipher System을 사용한 저산소 RPE에서 미토콘드리아 대사의 변화 측정

시작하려면 후드의 세포 배양 플레이트와 함께 감지 덮개를 조립하고 저산소증 챔버로 옮깁니다. 저산소증 챔버에 샌드위치를 설치합니다. 그 후, 습도를 유지하기 위해 저산소증 챔버에 멸균수가 담긴 페트리 접시를 놓습니다.

마지막으로 휴대용 산소 센서를 저산소증 챔버에 놓습니다. 그런 다음 저산소증 챔버를 밀봉합니다. USB 케이블이 저산소증 챔버에서 나오고 케이블이 나오는 구멍이 퍼티 또는 실리콘 그리스로 밀봉되어 있는지 확인합니다.

저산소증 챔버를 산소 저산소 농도와 이산화탄소의 표준 세포 배양 농도가 있는 가스 실린더에 연결합니다. 산소 센서가 원하는 산소 농도(보통 1%에서 10% 사이)를 표시할 때까지 실린더의 1%산소 및 5%이산화탄소 공기로 저산소증 챔버의 공기를 천천히 교환합니다. 그런 다음 실험을 설정하고 시작합니다.

대기 중 산소와 평형을 이룬 매체는 더 높은 부피에서 평형에 도달하는 데 더 오래 걸렸습니다. 저산소증 챔버는 서서히 누출되어 산소 수치가 30시간까지 대기 농도에 근접하게 되었습니다. 산소 용해도는 신선 매체와 조건화된 매체 간에 동일했으며, 이는 시간 경과에 따른 매체 조성 변화가 산소 용해도에 영향을 미치지 않음을 나타냅니다.