The Satchi-Fainaro research laboratory is partially supported by The Association for International Cancer Research (AICR), German-Israel Foundation (GIF), THE ISRAEL SCIENCE FOUNDATION (Grant No. 1309/10), Swiss Bridge Award, and by grants from the Israeli National Nanotechnology Initiative (INNI), Focal Technology Area (FTA) program: Nanomedicine for Personalized Theranostics, and by The Leona M. and Harry B. Helmsley Nanotechnology Research Fund.

참고 : 모든 동물 절차 승인 및 의료 기관 동물 관리 및 사용위원회의 텔 아비브 대학 Sackler하십시오 학교 (IACUC)의 표준을 준수 하였다. 1. 조정 배지 준비 <ol><li> 의 체적 10cm 배양 플레이트에 씨앗 2 × 106 U-87 MG 세포를 8 ml의 둘 베코 변형 된 이글 배지, 10 % 소 태아 혈청 (FBS) 및 1 % pencillin / 스트렙토 마이신 / 니 스타틴 용액 보충 (DMEM). </li><li> 37 세포를 품어 C를 °; 48 시간에서 완전 포화 상태를 달성 할 때까지 5 % CO 2. </li><li> 10 ㎖ 주사기를 사용하여, 15 ㎖의 튜브에 0.45 ㎛의 필터를 통해 모든 플레이트로부터 배지를 회수하고 필터링. </li><li> 세포 플레이트를 세척하지 않고, 1 ml의 트립신 용액 (0.25 %)를 첨가하고, 배양한다. </li><li> 모든 세포가 분리되는 경우, 10 % FBS가 보충 된 최소 5 ㎖의 DMEM을 사용하여 트립신을 불 활성화하고 세포 수 프리폼. </li><li<html> &gt; 또는 다른 혈구 세포 계산 장치를 이용하여 세포의 수를 계산하고 사용 계산 방법에 따라 세포의 수를 계산한다. 주 : CM 농도를 정상화하기 위해 나중에 사용됩니다. </li><li> 유리 둥근 바닥 플라스크에 CM을 전송하고 높은 진공 회전 증발기하에 농축. 원하는 경우, 프로세스를 가속화하기 위해, 37 ° C로 욕 온도를 증가시킨다. CM가 붙여 넣기 같은 질감을 달성 할 때까지 계속합니다. </li><li> 400 μL 식염수의 각 문화 판에서 CM을 재현 탁. 하나 이상의 플레이트를 사용하는 경우, 동등한 볼륨을 사용한다. 예를 들어, 2 배양 플레이트를 들어, 800 μl를 사용합니다. 4 마우스 각 플레이트를 사용합니다. </li><li> 다른 세포주 또는 치료를 비교하기 위하여, 단계 160에서 수신 된 셀의 비율에 따라 볼륨을 조정한다. 한 플레이트는 1.5 이상의 셀을 포함하는 경우, 예를 들어, 기존에 400 μL의 생리 식염수 200 μl를 추가. 이 조정 된 CM됩니다 </li></ol>마우스로 제목 &quot;&gt; 2. ECM-모방 젤 플러그 접종 <ol><li> 마우스로 ECM-모방 젤을 접종하기 전에 다음 자료를 준비 : <ol><li> 성장 요인은 (얼음에 4 ° C에서, 실험 전에 하루 밤새 해동) 페놀없는 ECM-모방 젤을 감소시켰다. </li><li> 전기 면도기. </li><li> 쥐를 마취하기 위해 케타민과 자일 라진 (xylazine). </li><li> 얼음처럼 차가운 1,000 μL 멸균 팁. </li><li> 얼음처럼 차가운 1 ML의 주사기와 27 G 바늘. </li></ol></li><li> 각 마우스 CM 조정 80 μl를 포함하는 1.5 에펜 도르프 튜브를 준비하고 얼음에 보관하십시오. </li><li> 각각의 튜브에 600 ㎕의 얼음처럼 차가운 성장 요인을 얼음에, 4 ° C에서 하룻밤 해동 된 감소 페놀없는 ECM-모방 젤을 추가합니다. ECM-모방 젤은 4 ° C에서 액체와 신체 온도에서 응고; 고화 ECM-모방 겔을 방지하기 위해, 빙냉 1000 μL 팁을 사용한다. 조심스럽게 거품을 형성하지 않고 튜브를 혼합하고 얼음에 보관하십시오. </li><li> 육주 된 B를 마취케타민 (100 ㎎ / ㎏)과 자일 라진 (12 ㎎ / ㎏)를 사용하여 ALB / c 마우스. 이전에 실험을 시작하기 제도적 동물 관리 및 사용위원회, 즉에 따라 적절한 마취를 확인합니다. 더 이상 회사 발가락 핀치에 응답하지 않을 때 동물은 마취 자신의 적절한면에 도달했습니다. </li><li> 쥐의 복부를 면도하고 수술 스크럽 / 알코올을 사용하여 소독. </li><li> 에펜 도르프 튜브 피하의 내용을 주입하는 추운 1 ML의 주사기와 27 G 바늘을 사용합니다. 기포 형성을 방지하기 위해 매우 천천히 주입을 수행한다. 모든 볼륨이 투여되면 응고가 발생할 때까지, 몇 분 동안 바늘을 배출하지 않습니다. </li></ol> 초음파를 사용하여 3. 평가 ECM-모방 젤 플러그 혈관 신생 주 : 프로토콜의이 부분은 초음파 촬상 시스템, 또는인가 기술자의 도움을 동작시키는 사전 지식을 필요로한다. <ol><li> 시작하기 전에, F를 가질용 재료 및기구 준비를 따르게 : <ol><li> 전기 면도기. </li><li> 탈모 크림. </li><li> 쥐를 마취하기 위해 케타민과 자일 라진 (xylazine). </li><li> 마이크로 버블 비 대상. </li><li> 정품 인증 장치. </li><li> 55 메가 헤르츠 (708) 프로브와 3D 취득 미세 조작기을 포함하여 미국 이미징 시스템. </li></ol></li><li> 플러그 접종 후 삼주 내 혈관을 측정한다 : 주 : U-87 MG 계 동물 모델에서 3 주에 대한 이상적인 촬상 시각을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 다른 설정에서 플러그 접종 다음 몇 일부터 혈관 반응 속도를 보정. <ol><li> 케타민 (100 ㎎ / kg)과 자일 라진 (/ kg 12 mg)을 사용하여 마우스를 마취. 이전에 실험을 시작하기 제도적 동물 관리 및 사용위원회, 즉에 따라 적절한 마취를 확인합니다. 더 이상 회사 발가락 핀치에 응답하지 않을 때 동물은 마취 자신의 적절한면에 도달했습니다. </li><li> 면도쥐의 복부 및 제모 크림을 취급합니다. </li><li> 마이크로 매니퓰레이터의 무대에 드러 쥐를 수정합니다. </li><li> 1ml의 주사기 함유 식염수 30 G 바늘을 사용하여 꼬리 정맥 내부에 바늘을 배치 단단히 고정시키고 바늘을 주사기를 풀고. </li><li> 대비 3D 모드 이미지 수집 세션에 설정합니다 <ol><li> 눌러 &quot;3D&quot;는 3D 모터 스테이지를 초기화하고, 원하는 스캔 영역의 중간에 트랜스 듀서를 배치한다. </li><li> 보도는 &quot;3D&quot;를 입력 스캔 거리 단계 크기는 다음 &quot;검색&quot;을 누릅니다. </li><li> 전체 플러그가 표시되는 3D 이미지 데이터 검색되는 있는지 확인합니다. 그렇지 않으면 전체 플러그가 스캔 단계를 반복 3.5.2에서 볼 수 있도록, 트랜스 듀서를 조정합니다. </li><li> 보도는 &quot;대비&quot;및 시간 이득 보상을 밀어 (TGC) 이미지를 어둡게 왼쪽으로 제어합니다. </li></ol></li><li> DESI이다 바이알 혼합기를 사용하여 미세 기포를 활성화45 초 미세 기포의 활성화를 위해 gnated. </li><li> 1ml의 50 μL 식염수로 미세 기포 50 μl를 주사기에 섞는다. </li><li> 활성화 된 미세 기포가 들어있는 주사기와 염분 함유 느슨해 주사기를 교체합니다. 3D 취득 모터를 사용하여, 정상 상태에 도달 한 후, 플러그의 3D 조영 증강 시네 루프를 취득 방울이 몇 초 후에 마우스의 꼬리 정맥 내로 희석 미세 기포 주입한다 : <ol><li> 보도는 &quot;3D&quot;와 3D 조영 증강 이미지를 수집 한 다음 이미지 데이터를 저장하기 위해 &quot;시네 저장&quot;을 눌러 &quot;스캔&quot;을 선택합니다. </li><li> 보도는 &quot;3D&quot;를 클릭하여 미세 기포를 소멸하는 &quot;3D를 파괴&quot;. </li><li> 보도는 &quot;3D는&quot;다시하고, 이후 파괴 시네 루프를 취득 &quot;시네 스토어&quot;를 눌러 &quot;스캔&quot;을 선택합니다. </li></ol></li><li> 이미지 프레임이 프리 - 오버레이 및 미세 기포의 사후 파괴를 생성합니다 : <ol><li> 에서 &amp;# 8220; 참조 설정 &quot;참조 만들기&quot;화면의 왼쪽에 클릭 &quot;. </li><li> 보도는 &quot;연구 관리는&quot;인수 사전 파괴 시네 루프를 엽니 다. </li><li> 다음 &quot;3D에로드&quot;를 클릭, 녹색 대비 오버레이를 생성하는 &quot;프로세스 시네&quot;를 클릭합니다. </li></ol></li><li> 플러그 내의 혈액량에 대한 3D 이미지 생성을 정량화하기 위해 US 이미징 소프트웨어를 사용하여 <ol><li> 보도는 &quot;스캔 / 일시 정지&quot;다음 &quot;모드 설정&quot;을 누릅니다. </li><li> &quot;볼륨&quot;을 클릭하고 &quot;병렬&quot;를 선택합니다. </li><li> 윤곽의 시리즈를 분할하여 대상 조직의 3D 볼륨을 만듭니다. </li><li> 분할을 완료하기 위해 &quot;마침&quot;을 클릭합니다. 주 : 조영제의 부피가 화면의 하부 좌측에 표시 될 것이다. </li></ol></li><li> 절차의 끝에서, 거리에서 따뜻하고, 깨끗하고, 건조, 조용한 환경에서 마우스를 배치다른 동물. 설치류에서 12~14인치 거리에 위치 시판 수술 가열 패드 또는 백열 램프 (50~75w)를 사용하여 따뜻함을 제공합니다. 직립 자세를 유지하고 일반적으로 걷는 때까지 계속 마우스를 모니터링합니다. </li></ol></li></ol> 다발, 공 초점 Endomicroscopy를 사용하여 4. 평가 ECM-모방 젤 플러그 혈관 형태학 주 : 프로토콜의이 부분은 바로 다음 US 이미징을 수행하며 다발 촛점 endomicroscopy 촬상 시스템, 또는인가 기술자의 도움을 동작시키는 사전 지식을 필요로한다. <ol><li> 시작하기 전에 다음과 같은 물질 및 악기 준비가 : <ol><li> 집게, 가위 및 흡수 바느질 스레드 같은 수술 도구. </li><li> FITC 접합 된 덱스 트란 (70 KDa의). </li><li> 교정 용액 (세 각 튜브 함유 과산화수소, 물 또는 형광 용액). </li><li> 촬상 시스템 및제조 업체에 따라 혈관의 영상에 적합한 프로브. </li></ol></li><li> 케타민 (100 ㎎ / kg)과 자일 라진 (/ kg 12 mg)을 사용하여 마우스를 마취. </li><li> , 꼬리 정맥을 통해 10 ㎎ / ㎖의 FITC 표지 된 덱스 트란의 200 μl를 관리 IV. </li><li> 수술 스크럽 / 알코올을 사용하여 복부를 소독하고, 플러그에서 약 1cm을 작은 절개를 적용합니다. </li><li> 그대로 플러그를 유지하면서 부드럽게 플러그의 상단에있는 endomicroscopy 프로브를 놓습니다. </li><li> 취득 : <ol><li> 프로브가 플러그에 설정되면, Enter 키를 눌러 발 페달을 사용하여 &quot;레이저를 시작합니다&quot;. 형광 화면에 표시해야한다. </li><li> 화면에 &#39;기록&#39;을 누르거나 풋 페달을 사용하여 &#39;선택&#39;에 의해 (30 초까지) 짧은 동영상을 획득. </li><li> 영화 사이, 튜브 포함 된 물에 팁을 배치하여 프로브를 세척한다. </li><li> 완료되면, 프로브를 제거하고면 팁 팁을 청소합니다. </li></ol></li><li> 평균 VE를 분석하려면SSEL 직경 : <ol><li> 선박 탐지 모듈 창을 열려면 상단 패널에서 &quot;미세 혈관 감지&quot;아이콘을 클릭합니다. </li><li> &quot;환경 설정&quot;을 클릭하고 &quot;관심의 통계&quot;및 &quot;디스플레이 모드&quot;에서 &quot;디스플레이 히스토그램 바&quot;에서 &quot;혈관 직경을 의미&quot;표시합니다. </li><li> 클릭 선택한 측정을 표시 할 &quot;감지&quot;. </li></ol></li><li> 혈관에 인접한 영역에서 형광 신호 강도를 분석하기 : <ol><li> 왼쪽 패널에서 &quot;원 ROI 만들기&quot;를 클릭하고 관심의 영역에서 원을 만듭니다. </li><li> 이 지역에 관련된 값을 계산하기 위해 &quot;투자 수익 (ROI) 내에서 계산 히스토그램&quot;를 클릭합니다. </li></ol></li></ol> 마우스 5. 시술 후 치료 <ol><li> 각각의 이미지를 만드는 절차의 끝에서 멀리 다른 동물에서 따뜻하고, 깨끗하고, 건조, 조용한 환경에서 마우스를 놓습니다. 시중를 사용하여 따뜻함을 제공로만 제공 외과 가열 패드 또는 백열 램프 (50 ~ 75 W)는 설치류에서 멀리에서 12 ~ 14를 배치했다. 직립 자세를 유지하고 일반적으로 걷는 때까지 계속 마우스를 모니터링합니다. </li><li> 추가 시점에서 플러그 &#39;혈관의 추가 분석을 위해, 다음의 복구 조건을 적용 <ol><li> 흡수성 봉합사를 사용하여 작은 절개 봉합. </li><li> 피하 같은 부 프레 노르 핀 (1 ㎎ / ㎏)와 같은 마우스 진통제를주고, 개별 케이지로 돌아갑니다. </li><li> 더 진통제 치료가 필요하고 있는지 확인하기 위해 모든 동물을 준수 모니터링하고 고통에 대해 평가하기 위해 매일 다시 평가합니다. </li></ol></li><li> 실험 종료 시점에서 경추 탈구이어서 제 도포함으로써 마우스를 이소 플루 란, 안락사. </li><li> 추가 영상이 초기 이미징 단계 다음 주에 수행 될 경우, 모든 절차는 가능한 멸균 보관해야합니다. 수술 피부 스크럽을 수행해야 멸균 WA터와 소독면 팁 endomicroscopy 프로브를 청소하는 데 사용되어야하고, 프로브는 멸균 수를 사용하여 각 동물 소독한다. </li></ol>

<ol>
	<li>Kibbey, M. C., Grant, D. S., Kleinman, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+SIKVAV+site+of+laminin+in+promotion+of+angiogenesis+and+tumor+growth:+an+in+vivo+Matrigel+model.">Role of the SIKVAV site of laminin in promotion of angiogenesis and tumor growth: an in vivo Matrigel model.</a> J Natl Cancer Inst. 84, 1633-1638 (1992).</li><li>Passaniti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple,+quantitative+method+for+assessing+angiogenesis+and+antiangiogenic+agents+using+reconstituted+basement+membrane,+heparin,+and+fibroblast+growth+factor.">A simple, quantitative method for assessing angiogenesis and antiangiogenic agents using reconstituted basement membrane, heparin, and fibroblast growth factor.</a> Lab Invest. 67, 519-528 (1992).</li><li>Norrby, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+models+of+angiogenesis.">In vivo models of angiogenesis.</a> J Cell Mol Med. 10, 588-612 (2006).</li><li>Auerbach, R., Lewis, R., Shinners, B., Kubai, L., Akhtar, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+assays:+a+critical+overview.">Angiogenesis assays: a critical overview.</a> Clin Chem. 49, 32-40 (2003).</li><li>Johns, A., Freay, A. 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The authors have nothing to disclose.

상보 촬상 방법을 결합하여 다른 혈관 형성 구성 요소의 미세 혈관의 밀도 및 형태의 기능에 관한 정보의 취득을 허용한다. ECM-모방 겔 플러그에로드 CM은 플러그로 모집 extravasate되어 내피 세포, 같은 다른 세포 집단에서 분리 된 종양 미세 환경을 생성합니다. 병렬로 수행함으로써, 조영 증강 US 이미징 및 다발 촛점 endomicroscopy 이미징 마이크로 버블, 우리는 암세포 자체없이...

마트 리겔 플러그 어 세이는 혈관 신생 제 Kibbey 등에 의해 설명되었다.이 펩타이드 SIKVAV (SER-일드리스 Val으로부터의 Ala-val) 인 (1)에 의해 혈관 신생 자극을 평가하는 데 사용 된 1992 년. 다른 생체 내 혈관 신생 어 세이는 대조적으로, 마우스 각막 신생 병아리 또는 융모 막 세이 원한다면, 상기 분석을 수행이 비교적 용이하다. 주입 ECM-모방 겔 세포 친 혈관 또는 항 혈관 신생 화합물 및 / 또는 요소를 포함 할 수있다. 항 - 혈관 신생 화합물의 활성을 평가할 때, 플러그가 정상적으로 혈관 내피 성장 인자 (VEGF) 및 섬유 아세포 성장 인자 (FGF)의 혼합물을 포함하고, 항 - 혈관 신생 물질 직접 플러그 또는 전신적으로 (3)에 투여 될 수있다, 4. 이 분 이내에 굳은 곳 ECM-모방 젤 피하 주입된다. 그 결과 플러그의 혈관 모집의 평가 typicall입니다Y 형광 염료의 주입 (FITC) 다음 형광 신호의 측정에 의해, 플러그 내에서 헤모글로빈 농도를 측정함으로써 수행이 내피 특이 마커 조직학 섹션의 면역 염색에 의해 또는 정렬 ​​형광 - 활성화 된 세포 (FACS) 2,5-하여, 덱스 트란 - 표지 6. 그러나,이 평가는 단지 종점 분석이 가능하고 혈관의 기능 및 형태에 대한 정보가 부족하다. 혈액 콘텐츠 혈관의 크기와 혈액의 정체 풀의 정도에 의해 영향을 받기 때문에 또한 혈장 부피의 측정 중 헤모글로빈 수치 또는 지표로서 덱스 트란-FITC를 사용함으로써, 잘못 될 수있다. 모집 혈관 투과성을 향상 및 보존 (EPR) 효과 (7)을 특징으로하는 경우에 특히 중요하다. 우리는 본원에서 두 개의 상보적인 이미징을 조합하여 채용 혈관의 시각화를위한 새롭고보다 정확한 방법을 제안한다. HIG혈관 밀도에 대한뿐만 아니라, 자신의 형태와 기능에뿐만 아니라 정보를 제공 할 수있는 생체 내에 섬유질의-공 초점 endomicroscopy과 함께 시간 해상도 미세 기포 조영 증강 초음파 (US). 또한,이 분석함으로써 혈관 형성의 동력학 모니터링을 가능하게 여러 시간 지점에서 수행 될 수있다. US는 혈관 구획 8-11에서만 남아 미세 기포 정맥 내 (IV) 주입 다음 혈관 조영 높은 공간 분해능을 가지고 폭넓게 사용되는 영상 기법이다. 마이크로 버블은 미국 펄스 흥분 때문에 좋은 조영제 역할을 할 때 강한 에코 신호를 생성 가스 충전 마이크로 버블 수 있습니다. 플러그의 3D 영상은 마이크로 버블 파괴 다음 US 이미징 시스템 소프트웨어를 사용하여 획득된다. 결과 이미지는 마이크로 버블의 사전 및 사후 파괴의 이미지 프레임에서 구성 및 색상의 비디오 강도의 차이를 반영합니다. 이러한 오버레이이미지는 소프트웨어에 의해 자동으로 표시됩니다. 따라서, 플러그 내에서 혈관의 기능적 %가 정량화 될 수있다. 공 초점 endomicroscopy 다발, 고해상도 혈관의 형태에보고함으로써 상호 보완적인 영상 기법의 역할을한다. 이 최소 침습적 방법, 이미지는 FITC 접합 된 덱스 트란 (12)의 정맥 투여 후 취득. 중합체 형광 염료 및 혈류에 따라서 혈관의 형태 및 혈류 &#39;조영제&#39;로서 기능한다. 주입 된 중합체의 70 KDa의 크기이기 때문에, 종양 혈관 검색된 더욱이, 그것은 단지 새는 혈관을 통과 할 수있다. 이것은 혈관 외부 FITC 표지 된 덱스 트란의 높은 배경 초래할 것이다. 따라서, 다발, 촛점 endomicroscopy은 평활 말단으로, 종양 내 neovasculature- 확대 누설 고도로 얽힌 혈관 EPR 효과의 전형적인 특성을 시각화 할 수있다. 이 시스템 모델은 descri했다U-87 MG 인간 아교 모세포종과 휴면 클론 (13)의 혈관 전위의 비교 침대. 플러그 내에서 혈관 신생은 3 주 ECM-모방 젤 접종을 게시 평가 하였다. 그것은 보였다 그에서 CM을 포함하는 플러그 내의 혈관 U-87 MG 휴면 종양 생성 세포에서 CM을 포함하는 플러그 내에서 혈관과 비교했을 때 종양 생성 세포가 크게 수, 밀도 및 기능면에서 증가 하였다 빠르게 성장. 따라서 저자는 CM이 분리한다는 결론을 내릴 수 있었다 U-87 MG 빠르게 성장하는 종양 세포 생성하는 휴면 종양 생성 세포에서 CM에 비해 프로 혈관 신생 인자의 높은 수준을 포함​​하고 있습니다. 이러한 요소 (최종적 내피 세포의 관 구조의 형성, 즉, 증식, 발아, 영동) 양 혈관 신생 캐스케이드의 모든 단계에 영향을 미치는 작용하여 혈관 형성을 자극한다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="864">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">Name of the Material/Equipment</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">Company</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">Catalog number</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">Comments/Description&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">Rotary Vacuum Evaporator</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">Growth-factors reduced phenol-free Matrigel</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">BD Bioscience</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">FAL356231</td>
			<td style="width:251px;">Thaw overnight, at 40C on ice&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">Depilatory cream&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">Vevo2100 US imaging system</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">VisualSonics Inc.&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">Requires previous knowledge in operating or the assistance of an authorized technician</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">55 MHz 708 probe</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">VisualSonics Inc.</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">Vevo2100 imaging software</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">VisualSonics Inc.</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">VialMix&#160;</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">DEFINITY Imaging</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">VMIX</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">DEFINITY microbubbles</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">DEFINITY Imaging</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">DE4</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">Activate for 45 seconds using Vialmix before use</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:255px;">CellVizio (Fibered confocal endomicroscope)</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">Mauna Kea Technologies</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">Requires previous knowledge in operating or the assistance of an authorized technician</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">ProFlex MiniO/30 probe</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">Mauna Kea Technologies</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">70 kD FITC-labeled Dextran</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">46945</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">ImageCell software</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">Mauna Kea Technologies</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td dir="LTR" height="40" style="height:40px;width:255px;">Calibration Kit</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">Mauna Kea Technologies</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">-</td>
			<td dir="LTR" style="width:251px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td align="left" height="40" style="height:40px;">Dulbecco&#8217;s modified Eagle&#8217;s medium (DMEM)</td>
			<td align="left">Gibco Life Tecchnologies</td>
			<td dir="LTR" style="width:179px;">41965-039</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="37">
			<td align="left" height="37" style="height:37px;">Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td align="left">Biological Industries&#160;</td>
			<td align="left">04-007-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td align="left" height="39" style="height:39px;">Penicillin-Streptomycin-Nystatin Solution</td>
			<td align="left">Biological Industries&#160;</td>
			<td align="left">03-032-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

monitoring functionality and morphology of vasculature recruited by factors secreted by fast-growing tumor-generating cells

마우스의 피하 마트 리겔 플러그 어 세이는 프로 및 항 - 혈관 신생 인자의 생체 내 평가를위한 선택 방법이다. 이 방법에서는, 원하는 인자, 피하 주사 후 암 환경을 흉내 낸 환경을 형성하도록 응고 초기 액체 ECM-모방 겔에 도입된다. 이 행렬은 내피 세포 및 혈관의 따라서 형성과 같은 숙주 세포의 침투를 허용한다. 여기서 우리는 특정 인자 (예를 들면, VEGF 및 bFGF에) 또는 에이전트는 대조적으로, 암 세포에 의해 분비 인자 풀의 혈관 신생 가능성을 설명하기 위해 이용 될 수있는 새로운 변형 마트 리겔 플러그 어 세이를 제안한다. ECM-모방 젤을 포함하는 플러그 - 빠르게 성장하는 종양 발생 아교 모세포종 세포의 CM에 분비 요인의 풀과 호스트 (즉, 마우스)를 소개하기 위해 사용된다. 우리는 이전의 혈관 전위의 광범위한 비교를 설명했다U-87 MG 부모의 세포에서 유도 된 혈관 신생을 보여주는 U-87 MG 인간 아교 모세포종이 시스템 모델에서의 휴면 유래 복제,,. CM은 48 시간 배양 한 다음 세포주 어느 합쳐진 조직 배양 플레이트로부터 수집 된 매체를 필터링함으로써 제조된다. 그러므로, 세포 자체가없는 세포에 의해 분비되는 유일한 요소가 포함되어 있습니다. 두 영상 방식의 조합이 여기에 설명 된, 플러그 내에서 새로 형성된 혈관의 정확한 실시간 범위, 형태의 특성과 기능을, 조영 증강 초음파 영상 및 생체 내에 다발 - 공 초점 endomicroscopy을 미세 기포.

빠르게 성장하는 혈관 신생 종양 발생 세포주 U-87 MG, 광범위한 혈관 신생의 결과에서 CM으로 ECM-모방 젤 플러그를 주입하는. 이 맥관 광범위 개의 상보 촬상 방법을 사용하여 탐색 될 수있다. 마이크로 버블의 조영 증강 US 이미징 U-87 MG CM로드 플러그, 휴면 종양 발생 세포에서 CM 함유 플러그 내에 탐지 혈류 달리 (도 1) 내에서 광범위한 혈액 흐름을 도시하여 플러?...

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Monitoring Functionality and Morphology of Vasculature Recruited by Factors Secreted by Fast-growing Tumor-generating Cells

We describe a matrigel plug assay to illustrate angiogenic potential of a pool of factors secreted by cancer cells using two complementary imaging modalities, ultrasound and endomicroscopy. The matrigel, an extracellular matrix (ECM)-mimic gel, is utilized to introduce the host (mouse) with angiogenic factors secreted to the conditioned media (C.M.).&#160;

고속 성장하는 종양 생성 세포에 의해 분비 요인에 의해 보충 모니터링 기능 및 혈관의 형태학

The subcutaneous matrigel plug assay in mice is a method of choice for the in vivo evaluation of pro- and anti-angiogenic factors. In this method, desired ...

monitoring-functionality-morphology-vasculature-recruited-factors

Research

JoVE Journal

Biology

9.7K 조회수.  Tel Aviv University. We describe a matrigel plug assay to illustrate angiogenic potential of a pool of factors secreted by cancer cells using two complementary imaging modalities, ultrasound and endomicroscopy. The matrigel, an extracellular matrix (ECM)-mimic gel, is utilized to introduce the host (mouse) with angiogenic factors secreted to the conditioned media (C.M.). 