저자는 세인트 주입;에 대 한 상담에 감사 Tongalp Tezel, 메릴랜드, 테레사 Swayne, 박사, SHG 현미경;에 관한 상담 그리고 디자인 및 생물 통계학 리소스 및 컬럼비아 대학 의료 센터에서 어 빙 연구소의 Biostatistical 핵심 시설에서 지미 둥.
실명 방지 연구에 의해 및 국가 연구소의 건강 보조금 NCRR UL1RR024156, 네이 P30 EY019007, NCI P30 CA013696, 그리고 네이 R01EY020495 (DCP)에 의해 부분에서 지원. 관련된 지적 재산권을 소유 하는 컬럼비아 대학: 발행 하는 미국 특허 아니오: 8,466,203,: 9,125,856. 국제 특허 출원: PCT/US2015/020276.
이미지는 Confocal에 수집 및 전문 현미경 공유 리소스 컬럼비아 대학, NIH에서 지원에서 허버트 어 빙 종합 암 센터의 #P30 CA013696를 부여 (국립 암 연구소). Confocal 현미경 NIH 함께 구매 #S10 RR025686를 부여.

모든 절차는 그대로 outbred 토끼 머리에서 싱가포르로 토끼 눈을 사용 하 여 수행 되었다. 관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 모든 기관 및 국가 지침 따라 했다.
1입니다. 솔루션의 준비
<ol><li>서울시 의회에 대 한 준비:<ol>
<li>나트륨 중 탄산염 솔루션 (NaHCO3) 솔루션 NaHCO3 파우더는 증류수의 1 mL에 용 해의 0.0165 g를 사용 하 여 0.2 M 농도의 1 mL를 준비 합니다.</li>
		<li>800 mM SMG의 최종 농도를 증류수의 1 mL에 가루 나트륨 hydroxymethylglycinate (서울시)의 0.1016 mg을 디졸브. 나트륨 중 탄산염 해결책 0.1 M NaHCO3 및 400 mM SMG의 최종 농도를 조정 합니다. 원하는 상호 효과 따라 서울시의 농도. 여기에 설명 된 프로토콜에서 우리 사용 40, 100, 400 mM 서울시.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. subTenon의 주입 SMG를 사용 하 여 의회에 대 한
<ol><li>400 µ L 제어와 SMG 솔루션 두 1 mL 인슐린 주사기 (바늘 25 G)를 각각 작성.</li>
	<li>쿠션의 도움으로 프로 파일 평면에서 토끼의 머리를 배치. 스티로폼 또는 종이 스택 최적의 위치에 머리를 해결 하기 위해 사용할 수 있습니다.</li>
	<li>소아 안과 검 경으로 눈 꺼 풀을 철회.</li>
	<li>초기 안구 내부 압력 (IOP) applanation tonometry 장치를 사용 하 여 측정 합니다.</li>
	<li>조직 표시와 함께 limbus의 상단 중간 부분에 의도 된 주사의 사이트를 표시 합니다.</li>
	<li>철회 conjunctival 집게 (또는 톱니 모양의 라운드 팁으로 어떤 겸)과 주사의 사이트를 둘러싼 결 막 및 결 막, 입력 표시 limbal 사이트 (즉, 2-3 단지 약간 넘어 장부의 캡슐을 통해 바늘을 삽입 m m는 limbus에서)입니다. 결 막에 작은 절 개를 통해 장부의 캡슐 바늘의 통과 촉진 하기 위해 아이리스가 위로 만들 수 있습니다.</li>
	<li>한 번 장부의 캡슐 내에서 바늘은 그것에 게 사이드-투-사이드를 이동 하 여 자유롭게 모바일 있는지 확인 합니다. 이 기간 동안, 전 세계 이동 하지 한다. 하위-장부의 (sT)에서 sclera 위에 바늘의 적절 한 배치를 확인 하는이 공간.</li>
	<li>주사기에서 솔루션을 삽입 하 고 바늘을 삭제. 즉시 다음 주입, 액체 결 (즉, chemosis)을 통해 본 앞쪽 볼록한 만드는 sT 공간에 축적 됩니다.</li>
	<li>그것은 세계의 실수로 구멍 뚫 기 때문에 변경 되지 않았다 확인 IOP 측정을 반복 합니다.</li>
	<li>뚜껑 금속을 제거 하 고 약 2-3 분 동안 닫힌된 눈 꺼 풀을 통해 디지털 마사지를 수행 합니다.</li>
	<li>3.5 h의 잠복기에 대 한 머리를 두고 (실내 온도 18 ° C =), 다음 단계로 이동 하기 전에.</li>
</ol>3. 조직 준비
<ol><li>세계에 대 한 액세스를 최적화 하기 위해 눈 꺼 풀 검 경을 사용 하 여 눈 꺼 풀을 철회. 눈의 크기에 따라 최적으로 크기의 금속을 선택 합니다.</li>
	<li>분리는 limbus를 둘러싼 결. 이미 사출 사이트 근처 베인 되었습니다, 원주 확장 테두리 약 1 x 1 cm의 inoculum 크기를 포함 하는 것 그래서.</li>
	<li>Scleral 삽입의 자신의 사이트에 여분의 눈 근육을 잘라.</li>
	<li>안구 후부 측면에서 추진 하는 집게와 함께 상승 합니다. 이 사후 세계에 대 한 액세스를 제공 하 고 안과 동맥 및 정 맥 부근 세계의 후부 극 시 신경의 절단을 촉진 한다.</li>
	<li>잘라는 corneoscleral 복잡 한, 표시 된 주사 사이트를 포함 하 여 외부 테두리와 함께. 얼룩은 여전히는 공 막의 나머지 부분에 표시 되어야 합니다.</li>
	<li>코 퍼스 vitreus 및 조직 집게와 견인을 적용 하 여는 공 막의 안쪽에 연결 된 모든 레이어를 제거 합니다. 참고: 추가 단계는 수행 중인 다음 절차에 따라 달라 집니다.: 4.-DSC 분석, 5.-SHG 현미경 검사 법.</li>
</ol>4. 지역 DSC 분석을 위해
<ol><li>
치료 눈: 4 scleral 분야에서에서 잘라 나머지 scleral 컵은가 위 주사의 사이트 상단 부문에 있으며 중앙 정렬 있도록. 잘라 모두 측면 (즉, 비 강 및 임시), 측면과 하단에서 남은 3 분야. 참고: 그림 1A에 시연은 (1-4) 사각형 (1-16)으로 더 분할 되는 섹터의 번호 매기기.</li>
	<li>약 4 x 4 mm 각의 작은 사각형 (1-16)에 scleral 분야 (1-4) 잘라. 섹터 1 9 사각형 (개별 사각 [스퀘어 2] 주입의 정확한 사이트 확인)으로 나눌 수 합니다. 2 및 3 2 사각형으로 (정사각형 10-11, 12-13) 분야 및 부문 4 3 사각형 (사각형 14-16)으로 나눕니다.</li>
	<li>주입 영역의 위치에서 분석 된 조직의 거리를 지역화 하려면 그림 1A와 같이 각 사각형에 숫자를 할당 합니다.</li>
	<li>
제어 눈: 후 다음 위치에서 조직의 사각형 조각을 잘라 4 scleral 섹터 (치료 조직에 유사한)에 나누어 조직: 3 사각형 상위 섹터 (섹터 1)에서 각 측 (분야 2, 3), 그리고 1에서 1는 하단 부문 (부문 4)입니다.</li>
	<li>나머지 망막과 안 층 떨어져 긁 고 씻어 두 번 신선한 PBS 각 시간 약 10 솔루션에 잠긴 조각을 떠나 한 번에 s.</li>
</ol>5. 대 한 SHG 이미징
<ol><li>가 위를 사용 하 여 중앙 정렬 하는 주입의 사이트는 1 x 1 cm 영역을 만들려면 sclera의 상단 부분을 잘라.</li>
	<li>나머지 망막 및 맥락 막 층 떨어져 긁 고 씻어 두 번 신선한 PBS 약 10 솔루션에서 조각을 떠날 때마다 s.</li>
	<li>장소 1 mL 튜브에 조직 이미징 시설에 수송을 위한 PBS 솔루션으로 가득합니다. 모든 절차, 보육 시간에 따라 안구의 해 부 시작 1 시간 내에서 수행 되어야 합니다.</li>
</ol>6. 현미경 검사 법 프로토콜
참고: 이미지 다시 흩어져 SHG 신호 sclera 조직의 콜라겐에서이 프로토콜은 레이저 현미경 검사에 대 한 지어진 다.
<ol><li>
현미경 검사 법 설정
	<ol>
<li>최대화 하기 위해 신호 및 해상도 렌즈를 사용 하 여 수행 SHG 현미경 빛과 높은 수 가늠 구멍 (NA)와 적외선 전송 최적화. 우리의 목표는 니콘 Apo LWD 25 x / NA1.1 물 침수.</li>
		<li>Coverslip 0.17 밀리미터의 두께이 경우에 샘플의 깊이 맞게 렌즈의 교정 칼라를 조정 합니다.</li>
		<li>25 x 객관적 렌즈를 탑재 하 고 윤 활 샘플을 탑재 하기 전에 이미지 표면 커버를 수성 젤의 관대 한 금액을 추가 합니다. 물 기반 젤 실험 기간 동안 증발 하지 것입니다 하 고 따라서 이미지 품질을 유지 합니다.</li>
		<li>episclera와 coverslip 표면 사이 두 개의 25 m m 라운드 coverslips (episcleral 면이 아래로) 제공 최대한 접촉 사이 건조 하지 않고 PBS 1 mL 튜브에서 scleral 조직을 놓습니다. 참고: 조직의 수 또한 발견에 놓일는 coverslip. PBS의 좋은 금액 이미징 동안 수 화 된 조직을 유지 한다. 이 경우에 cellchamber를 조립 후 조직 조각과 PBS 추가 합니다.</li>
		<li>25 m m 라운드 coverslip, 단일 배치 또는 챔버의 하단 부분에는 샌드위치 기법에 셀 챔버를 조립 하 고 챔버 라운드는 봉인 만들려면 아래로 상단 부분을 나사. 밀접 하 게 사용 될 때 최고 coverslip, 인위적으로 병합을 방지 하 고 조직을 손상 아래로 나사 하지 않습니다.</li>
		<li>현미경 단계에서 조직 샘플 셀 챔버를 탑재.</li>
		<li>에 전송 빛 눈 보기에 대 한 현미경을 설정 합니다.</li>
		<li>무대를 놓고는 샘플의 낮은 표면에 초점, 눈 조각을 통해 밝은 분야 검사에 의해 결정 되는 목표의 높이 조정 합니다.</li>
		<li>컴퓨터 모니터를 제외 하 고 모든 조명을 끄고 알루미늄 호 일 시트 현미경 스테이지에 draped 가능한 모니터에서 많은 빛을 차단. 길 잃은 빛 감지기에 도달 최소화 GaAsP NDD 검출기는 높은 감도 저 잡음 수집, 지킬 것 이다.</li>
		<li>소프트웨어의 Ti 패드 패널에서 렌즈 정의가 올바른지 확인 하십시오.</li>
		<li>A1 소형 GUI 패널 이미징에 대 한 IR 레이저를 선택 하 고 NDD 검출기 선택 DAPI 채널 400-450 nm 대역 통과 필터를 장착을 선택 합니다.</li>
		<li>A 1 MP GUI 패널에서 설정 적외선 레이저의 파장 860 및 오픈 셔터.</li>
		<li>레이저 스캐닝 A1 소형 GUI 패널에서 다음과 같이 설정 합니다. 선택: (a) Galvano 스캐너, (b) 단방향 검색, (c) 픽셀 망설임 시간 6.2 µs, (d) 프레임 크기 1024 x 1024 픽셀, (e) 선 평균 2 배 참고: Galvano 스캐너 및 단방향 검색 하면 정확한 포인트에 의해 정렬. 보기의 전체 필드에 대 한 1024 x 1024의 크기는 0.5 μ m /pixel의 픽셀 크기를 변환합니다. 선 평균 이미지에서 총된 소음을 줄일 것 이다.</li>
		<li>레이저 파워 및 검출기 이득을 조정 하 여 A1 소형 GUI 패널에서 이미지를 설정 합니다. 현재 이미지에서 픽셀 휘도 값의 막대 그래프를 표시 하는 테이블을 보고 패널 (Lut)을 엽니다. "찾기" 모드로 라이브 이미징 켜고 레이저 파워 및 검출기 이득을 조정 하 여 픽셀 값의 감지 범위를 극대화. 채도를 하지 마십시오. 일반적인 값은 2.5% 레이저 전원, 2.35 W 860에서의 총에서 및 100 HV (검출기 이득).</li>
		<li>참고:이 설정에 대 한 내부 전원 측정기로 측정 레이저 파워는 5.2 mW. 실험 수행 때마다 다시 조정 레이저 비율 같은 내부 전력 측정은 5.2에서 일정 이미징 세션 간에 mW. 레이저 파워를 설정할 때 주의 해야 합니다. 카멜레온 II 레이저는 3 W 레이저 800 nm와 10% 또는 더 높은 전원 잠재적으로 조직의 손상을 유발 수.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
이미지 수집
	<ol>
<li>미리 보기 모드에서 XYZ 개요 도구를 사용 하 여 조직 영역을 스캔 합니다.</li>
		<li>이 모드에서 이미지의 인수를 속도를 더 낮은 해상도 (256 x 256 픽셀 및 아무 선 평균)는 이미지를 설정 합니다.</li>
		<li>5 x 5, 3 x 3, 또는 직물의 전체 표면을 커버 하는 보기의 단일 필드를 캡처하십시오. 개요 캡처 전에 각 위치에서 라이브 "스캔" 모드를 설정 하 고 조직 초점을가지고. 참고 조직의 다른 지구 축 방향으로 약간 다른 위치에 있을 것 이다.</li>
		<li>콜라겐 섬유 보기의 전체 필드에서 특정 위치에 단계를 이동 하려면 개요 도구에서 해당 위치를 두 번 클릭 플랫 영역을 찾아.</li>
		<li>라이브 "스캔" 모드, 플레인 초점에는 목표의 Z 위치를 조정 켜고, Ti 패드를 사용 하 여 Z 드라이브 광학 비행기 10-15 μ m이 하단 레이어 위에 이동.</li>
		<li>1024 x 1024 픽셀, 2 x 선 평균, "캡처" 버튼을 사용 하 여 높은 해상도에서 이미지를 취득 합니다.</li>
		<li>"+" 버튼을 사용 하 여 XYZ 개요에 위치를 저장 합니다. 이렇게 하면 조직의 같은 지역 탈환 하지.</li>
		<li>직물의 각 조각을 위해 겹치지 시야의 10 이미지를 캡처하십시오.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. DSC 프로토콜
참고: 조직 준비 지역 DSC 분석을 위해 또는 조직 이미징 SHGM 수행 후에, 완료 되 자 마자이 단계를 진행 합니다.
<ol><li>DSC 팬, 무게와 표시를 준비 합니다. 참고:이 단계 이루어져야 조직 해 부 하기 전에 조직의 건조를 최소화 합니다.</li>
	<li>흡수 성 조직으로 각 scleral 광장을 건조 하 고 이빨된 집게를 사용 하 여 DSC 팬의 바닥에 평평 하다.</li>
	<li>조직 내부와 곱슬 머리 뚜껑 팬 무게 고 무게 젖은 조직을 적용 (샘플의 질량 5 ~ 11 밀리 그램의 범위에 있어야 합니다). 참고: 각 인감 다음 조직 샘플을 진행 하기 전에 뇌관 집게를 사용 하 여 이동 합니다. 팬, 열 분석 이전 물 손실 방지 밀봉 밀폐 된다.</li>
	<li>일단 샘플 구겨지지 DSC 트레이에 지정 된 위치에 놓습니다. 컨트롤에 대 한 6 샘플 및 치료 눈에 대 한 16 이어야 한다.</li>
	<li>소프트웨어 관리, 조직의 무게를 지정 하는 악기를 사용 하 여 메서드를 만들고 실행 하는 다음 매개 변수를 사용 하 여 열 분석: 난방 속도 40 ~ 80 ° C의 온도 범위: 1 ° C/min, 열 흐름: 17.37 mW, 가스 (N2) 흐름: 19.8 mL/min, 가스 압력: 2.2 바.</li>
	<li>완료 되 면, 어떤 열 변성에 전환 온도 피크 발생 관리 소프트웨어 악기를 사용 하 여 추출 하 여 각 샘플에 대 한 데이터를 분석 합니다.</li>
</ol>8. 이미지 분석
<ol><li>
SHG 신호
	<ol>
<li>선택 적어도 5-10의 각 치료 및 그것의 통제에서 가장 대표적인 이미지 같은 이미지의 영역 대부분 콜라겐 섬유에 의해 점유 된다.</li>
		<li>ImageJ 소프트웨어에서 각 이미지를 업로드 하 고 선택 하 여 평균 픽셀 강도 측정 분석 > 측정 활성 이미지에 대 한.</li>
		<li>추출 값 평균 픽셀 강도로 보고 하 고 메뉴에서 선택 하 여 농도의 히스토그램을 그려서 표시 또한 수 있습니다 분석 > 히스토그램.</li>
		<li>따라 모든 측정된 데이터를 문서에 테이블을 만들고 Excel 시트를 사용 하 여 샘플 id입니다.</li>
		<li>평균 및 각 치료 및 제어 조건에 대 한 픽셀 강도의 표준 편차를 계산 합니다.</li>
		<li>학생의를 사용 하 여 t-검정, 농도 (즉, 0과 0 대 400 mM 서울시 대 40 m m SMG)의 모든 인덱스도 비교에 대 한 차이 비교 합니다. [P≤0.05]입니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
파형
	<ol>
<li>콜라겐 섬유를 표시 하는 이미지를 선택 합니다. 샘플 당 적어도 10 이미지 (를 포함 하 여 각 농도-총에서 40 이상에 대 한 컨트롤 샘플) 분석 되어야 합니다.</li>
		<li>오픈 ImageJ > 플러그인 > NeuronJ. NeuronJ 사전 설치를 해야합니다.</li>
		<li>모든 imagesby는 열린된 NeuronJ 창에 드래그를 업로드 합니다.</li>
		<li>마우스로 fibril의 윤곽에 따라 섬유를 따라 추적 선 만들기 (그리기 태블릿 펜 사용 될 수), 총 섬유 길이의 거리를 측정 하는 M을 클릭 합니다.</li>
		<li>접선 직선을 그릴 시작과 이전 그려진된 섬유 윤곽선의 끝 연결을 "옵션"을 선택 합니다. 엔드-투-엔드 길이 측정 하는 M을 클릭 하세요.</li>
		<li>이미지 당 적어도 10 소에 동일한 절차를 반복 합니다.</li>
		<li>10 소의 각각에서 그 두 측정을 수집 하 고 각각 길이 [곡선] 및 [선형], 길이 총 섬유 길이 (윤곽선) 및 엔드-투-엔드 길이 (바로 연결 라인)을 표현 하는 excel 스프레드시트에 데이터를 입력 합니다.</li>
		<li>계산 하는 수식을 사용 하 여 파형 인덱스 (W): W = 길이 [곡선] / [선형] 길이.</li>
		<li>수식을 사용 하 여 컨트롤 샘플에서 이미지와 함께 대우 samples(SMG)의 이미지에서 데이터를 비교 하는 파형의 %를 계산: (W [서울시]-1) / (W [제어]-1)</li>
		<li>통계의 차이점 (p-값) 콜라겐 섬유 형태학의 다른 처리 조건 및 제어를 결정 하기 위하여 파형 인덱스 (W)에 대 한 인덱스도 t-테스트를 수행 합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

실시 실험 콜라겐 cross-linking sclera, cross-linking 치료에 대 한 모니터링 도구로이 기법을 사용 하 여 미래의 가능성 제기에 효과의 평가 위한 방법으로 SHG 신호 현미경의 사용을 지 원하는 증거를 나타났습니다. 그는 콜라겐 단백질을 대상. 메모의 악기는 이미 잠재적으로이 SHG 신호를 캡처할 수 있는 임상 사용 중에서입니다. 이 악기는 주로 이미징 피부 인간의 피에 대 한 설계, 이미지 각 막과 공 막...

으로 콜라겐 효소 cross-linking 차단 실험 양식 부족 (FD)을 증가 시킬 수 있습니다 (광화학 또는 화학), 비 효소 scleral cross-linking를 통해 치료할 수에 진보적인 근 시 가정은-유도 근1. Elsheikh 및 필립스2 최근 타당성과 표준 A 자외선 방사선 (UVA)를 사용 하 여의 가능성 논의-리 보 플 라빈 광화학 cross-linking (드레스덴 프로토콜 라고도 함), 약식 중재 (리 보 플 라빈 CXL) 여기 근 시 축 신장 중단 후부 scleral 안정화. 이 광화학 방법 keratoconus와 포스트 LASIK keratectasia에서 본 앞쪽 글로브 표면 (즉, 불 룩 한 각 막)의 불안을 치료에 성공적으로 사용 되었습니다. 그러나,의 공 막이 CXL 프로토콜 응용 프로그램 액세스는 자외선 (UV) 광원, 뿐만 아니라 훨씬 더 조직 표면 영역을 수정 하려면 필요 후부 sclera에 어려움에 관련 된 문제에 의해 방해 된다. 비록 후부 sclera의 여러 지역 여러 별도 방사선 조사 영역 그 연구3에 필요한 토끼 (tarsorrhaphy)에 의해 박탈 그 말했다 되는, CXL 접근 사용 되었습니다 시각적 형태로 축 신장 중단 하. 대조적으로, 화학 안정화 에이전트의 (즉, cross-linking 대리인) 세인트 공간을 통해 주입 UV 광원 도입에 대 한 필요성을 피하고 후부 sclera를 수정 하는 간단한 방법을 대표할 수 있었다. 이 주입 기술은 백 내장 수술4,,56등 안과 절차 동안 안구 마 취를 유도 하는 유용한 방법으로 유명 하다. Wollensak7 glyceraldehyde (화학 가교 에이전트 에이전트 (FARs)이이 연구에서 설명 공개 포름알데히드 비슷한 개념)를 사용 하 여 성 주사를 사용 하 여 위에서 설명한는 토끼 sclera 및 genipin 완고 하는 FD 기니 피그8,9축 길이 제한 하는 것을 보였다. 이 광화학 CXL 기술을 통해 수용 성 화학 약품을 사용 하 여의 명확한 이점을 설명 했다. 따라서, scleral cross-linking FARs (즉, 광장)를 포함 하 여 어떤 종류의 주 사용 화학 약품을 사용 하 여10, scleral 신장에서 근 시의 진행을 중단 하는 가능한 치료 방법을 제공할 수 있다.
여기에 제시 된 프로토콜, 싱가포르로 토끼 눈의 공 막 엔 세인트 주입을 통해 전달의 나트륨 hydroxymethylglycinate (서울시), 화학 가교 솔루션 사용 하 여. 우리는 각 막에 국 소 화학 cross-linking 이전 유사한 프로토콜을 실행 했다. 그 이전에 보고 된 연구에 특히 집중 효과 cross-linking 종속 얻어질 수 효과 범위를 넘어서는 열 변성 분석11 정한 광화학 CXL와 달성 스패닝 SMG를 사용 하 여 .
여기는 성 주사 scleral 조직, 차동 스캐닝 열 량 측정 (DSC), 그리고 두 번째 고조파 세대 현미경 검사 법 (SHGM)를 사용 하 여 열 변성을 통해 전달 하는 SMG의 가교 효과 평가 하기 위해 프로토콜에 설명 합니다.
차동 스캐닝 열 량 측정 (DSC), 라고도 열 분석를 사용 하 여 열 변성 변화 측정, scleral 조직에는 주로 그들은 대량 대다수 구성 이후 원 collagens의 속성에 의해 유도 단백질. 이 메서드는 콜라겐 분자 구조의 안정성과 교원 질 소 주 3 차 단백질 구조 안정화 복사해올된 채권 평가 합니다. DSC에 난방, 동안 중요 한 전환 온도 트리플 헬릭스, 젤라틴으로 알려져 일반적으로 형성 하는 과정의 풀기 결과 콜라겐 분자의 변성 결과 얻을 수 있다. 이 열 변성 콜라겐 분자를 따라 수소 결합을 방해 하 고 유도 가교 방법12,13더 높은 온도에 이동 될 수 있다. 이 방법은 특히 바이오 산업에에서 많은 십 년간 동안 그리고 가죽 만들기를 포함 하는 프로세스에 대 한 사용 되었습니다. 그러나,이 메서드 sclera 조직 추출 필요 하며 따라서만 수 비보 전 기법으로.
2 차 고조파 생성 현미경 (SHGM) 비 centrosymmetric 분자 환경 특정 재료의 비선형 광학 특성을 기반으로 합니다. 같은 자료, 강렬한 빛에에서 예 빛 레이저에 의해 생성 하, SHG 신호, 사건 빛 주파수에서 두 배가 됩니다 생성 합니다. SHG 신호를 만드는 것으로 알려진 생물학 물자는 콜라겐, microtubules, 및 근육 myosin. 예를 들어 콜라겐 860 nm 파장의 적외선으로 흥분된 430 nm 파장을 가진 보이는 범위에서 SHG 신호를 방출 합니다. 둘째로 고조파 생성 (SHG) 신호 영상 치료 콜라겐 cross-linking 평가 하는 유망한 방법 이다. 그것은 30 년 이상에 대 한 조직에 콜라겐 소 SHG 신호14방출 알려져 있다. 그러나, 최근에 수 고해상도 이미지 얻을 수15 콜라겐 젤19와 조직, 힘 줄16, 피부, 연골17,18, 혈관 등의 다양 한에서.
이 지식을 바탕으로,이 연구 서울시 화학적으로 유도 된 콜라겐의 cross-linking 통해 sclera에 유도 SHG 신호 변화를 평가 합니다. 결과 표시는 공 막의 SMG 수정 SHG 신호 조직 콜라겐 섬유 번들 (높은 순서 제 사기 구조 교원 질 소의 구성)에서 생산을 증가 하 고 또한 콜라겐에 구조적인 형태 론 적 변화를 생산 하 고 섬유 네트워크, 섬유 번들 "교정."에 반영

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1441">
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:245px;">MILLI-Q SYNTHESIS A10 120V</td>
			<td style="width:289px;">EMD Millipore, Massachusetts, USA</td>
			<td style="width:111px;"></td>
			<td style="width:796px;">Double distilled, deionized water. - protocol step 1.1.1</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Sodium hydroxymethylglycinate&#160;</td>
			<td>Tyger Chemicals Scientific, Inc. Ewing, NJ, USA</td>
			<td></td>
			<td>Crosslinking reagent - protocol step 1.1.2</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Injection needle with luer-lock syringe</td>
			<td>BD Eclipse, NJ, USA</td>
			<td></td>
			<td>Syringe for sub tenon injection. - protocol step 2.1</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Rabbit head</td>
			<td>La Granja poultry</td>
			<td>Outbred</td>
			<td>Rabbit head separated and delivered within 1 hour postmortem. - protocol step 2.2</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Tono-pen&#160;</td>
			<td>Reichter Technologies Depew, NY</td>
			<td></td>
			<td>IOP measurements - protocol step 2.4</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">DSC 6000 Autosampler</td>
			<td>Perkin-Elmer Waltham, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td>Thermal denaturation analyzer - protocol step 7.4</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Pyris software&#160;</td>
			<td>Perkin-Elmer, Waltham, MA, USA</td>
			<td>Ver 11.0</td>
			<td>&#160;protocol step 7.5</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">CFI75 Apochromat LWD 25X/1.10 W MP</td>
			<td>Nikon Instruments, Melville, NY, USA</td>
			<td></td>
			<td>A water immersionn objective with high IR transmittance with a working distance of 2.0 mm - protocol step 8.1.1.</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">GenTeal&#160;</td>
			<td>Alcon, Fort Worth, TX&#160;</td>
			<td>B000URVDQ8</td>
			<td>Water-based gel used as objective immersion medium instead of water to prevent evaporation - 8.1.1</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Chameleon Vision II&#160;</td>
			<td>Coherent, Santa Clara,CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>Ti:Sapphire pulsed laser with a 140 fs pulse width at 80 MHz and a tunable range from 680 nm to 1080 nm. - protocol step 8.1.11</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">AttoFluor cell chamber</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Inc</td>
			<td>A7816</td>
			<td>Fixation of the cover slip - protocol step 8.1.3</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">25-mm round coverslips, #1.5</td>
			<td>Neuvitro Corporation, Vancouver, WA, USA</td>
			<td>GG-25-1.5</td>
			<td>protocol step 8.1.3</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Eclipse Ti-E</td>
			<td>Nikon Instruments, Melville, NY, USA</td>
			<td></td>
			<td>protocol step 8.1.4.</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Non-descanned (NDD) GaAsP detector</td>
			<td>Nikon Instruments, Melville, NY, USA</td>
			<td></td>
			<td>Equipped with a 400-450 nm band pass filter - protocol step 8.1.7</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">A1R-MP laser scanning system</td>
			<td>Nikon Instruments, Melville, NY, USA</td>
			<td></td>
			<td>Compatible with infrared (IR) multi-photon excitation. - protocol step 8.1.8</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">NIS Elements software</td>
			<td>Nikon Instruments, Melville, NY, USA</td>
			<td>Ver 4.3</td>
			<td>refered to as &#34;software&#34; in the text - protocol step 8.1.9</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Fiji/ImageJ</td>
			<td>National Institute of Health</td>
			<td></td>
			<td>&#160;protocol step 9.1.2</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;">NeuronJ</td>
			<td style="width:289px;">Eric Meijering, Erasmus University Medical Center, Rotterdam, The Netherlands</td>
			<td></td>
			<td>https://imagescience.org/meijering/software/neuronj/, for protocol step 9.2.2</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Microsoft Excel&#160;</td>
			<td>Microsoft Corporation, Redmond, WA, USA</td>
			<td>Ver 14</td>
			<td>protocol step 9.2.8</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

second harmonic generation signals in rabbit sclera as a tool for evaluation of therapeutic tissue cross-linking (txl) for myopia

치료에 대 한 구조 단백질 (원 collagens)로 화학 채권 (비 효소 cross-linking)을 도입 하 여 조직을 강화 하는 방법 등 광화학 cross-linking 조직 cross-linking (TXL) 방법. 유도 하는 기계적 조직 속성 변경에 대 한 이러한 메서드는 고용 되 고 각 막에 원추 각 막으로 진보적인 근 시에서 sclera (기계적으로 약화) 각 막 숱이 장애에 숱이 고 뒷부분의 약화 공 막과 가능성이 축 신장에 기여 한다. 이러한 조직 강화에 대 한 기본 대상 단백질은 원 collagens 각 막과 공 막에 건조 중량 단백질의 대다수를 구성 하는. 우연히, 원 collagens 조직 세포 외 공간에서 제 2 고조파 발생 신호의 주요 원천입니다. 따라서, 콜라겐 단백질 요법, cross-linking를 통해 유도 등의 수정 수 잠재적으로 감지 되며 두 번째 고조파 세대 현미경 (SHGM) 통해 quantitated. 레이저 적외선 여기 가벼운 현미경 시스템을 스캔을 사용 하 여 신호 모니터링 SHGM 소스는 즐기고 생명 과학 분야에서 광범위 하 게 사용 하는 흥미로운 현대 이미징 방법입니다. 따라서, 현재 연구 에이전트 하위-장부의 공간 (sT), cross-linking 화학 물질의 주입에 따라 토끼 sclera, ex vivo에서 에서 가교 효과 유도 하는 측정 하는 수단으로 SHGM 현미경 검사 법의 사용을 평가 하기 위하여 착수 했다는 사출 접근 즉 안구 마 취 안과 임상 절차 동안에 원인에 대 한 표준 연습. 에이전트 cross-linking 화학 나트륨 hydroxymethylglycinate (서울시), 에이전트 (FARs)를 방출 하는 포름알데히드로 알려진 화장품 방부 제의 클래스입니다. SMG와 반응에 따라 scleral 변경 SHG 신호 증가 귀착되 고 열 변성 온도에 변화를 서로 평가 하는 표준 방법을 유도 효과 cross-linking 조직.

광장 cross-linking 효과 평가 하는 시험 방법으로 열 변성 온도 (Tm): 토끼 눈의 16 쌍의 총 의회 절차에 대 한이 실험에서 사용 되었다. 이 연구의 초기 부분으로 싱가포르로 토끼 머리에 세인트 공간 통해 SMG 상호 에이전트의 단일 주사에 의해 유도 된 가교 효과의 지역화 평가 했다. 실험의이 유형은 하나 이상의 위치에 주사 sclera의 원하는 영역을 안정화 하는 데 ...

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Second Harmonic Generation Signals in Rabbit Sclera As a Tool for Evaluation of Therapeutic Tissue Cross-linking TXL for Myopia

치료 조직 (TXL) 근 시에 대 한 교차 연결의 평가 위한 도구로 토끼 Sclera에 제 2 고조파 발생 신호

이 프로토콜의 둘째로 고조파 생성 이미징 및 차동 주사를 사용 하 여 토끼 sclera cross-linking 화학 평가 기법을 설명 합니다.

Methods to strengthen tissue by introducing chemical bonds (non-enzymatic cross-linking) into structural proteins (fibrillar collagens) for therapy ...

second-harmonic-generation-signals-rabbit-sclera-as-tool-for

Research

JoVE Journal

Medicine

Second Harmonic Generation Signals in Rabbit Sclera As a Tool for Evaluation of Therapeutic Tissue Cross-linking (TXL) for Myopia

7.7K 조회수.  Columbia University College of Physicians and Surgeons. 이 프로토콜의 둘째로 고조파 생성 이미징 및 차동 주사를 사용 하 여 토끼 sclera cross-linking 화학 평가 기법을 설명 합니다.

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Generation of Comprehensive Thoracic Oncology Database - Tool for Translational Research

The Thoracic Oncology Program Database Project was created to serve as a comprehensive, verified, and accessible repository for well-annotated cancer specimens and clinical data to be available to researchers within the Thoracic Oncology Research Program. This database also captures a large volume of genomic and proteomic data obtained from various tumor tissue studies. A team of clinical and basic science researchers, a biostatistician, and a bioinformatics expert was convened to design the database. Variables of interest were clearly defined and their descriptions were written within a standard operating manual to ensure consistency of data annotation. Using a protocol for prospective tissue banking and another protocol for retrospective banking, tumor and normal tissue samples from patients consented to these protocols were collected. Clinical information such as demographics, cancer characterization, and treatment plans for these patients were abstracted and entered into an Access database. Proteomic and genomic data have been included in the database and have been linked to clinical information for patients described within the database. The data from each table were linked using the relationships function in Microsoft Access to allow the database manager to connect clinical and laboratory information during a query. The queried data can then be exported for statistical analysis and hypothesis generation.

A thoracic oncology database was developed to serve as a comprehensive repository for clinical and laboratory data for the purposes of translational research. The database will serve translational cancer researchers within the Thoracic Oncology Research Program. This database is adaptable to other cancer models, as well as other human diseases.

종합 흉부 종양학 데이터베이스의 생성 - Translational 연구 도구

The Thoracic Oncology Program Database Project was created to serve as a comprehensive, verified, and accessible repository for well-annotated cancer ...

연구

의학

Osteopathic Manipulative Treatment as a Useful Adjunctive Tool for Pneumonia

Pneumonia, the inflammatory state of lung tissue primarily due to microbial infection, claimed 52,306 lives in the United States in 20071 and resulted in the hospitalization of 1.1 million patients2. With an average length of in-patient hospital stay of five days2, pneumonia and influenza comprise significant financial burden costing the United States $40.2 billion in 20053. Under the current Infectious Disease Society of America/American Thoracic Society guidelines, standard-of-care recommendations include the rapid administration of an appropriate antibiotic regiment, fluid replacement, and ventilation (if necessary). Non-standard therapies include the use of corticosteroids and statins; however, these therapies lack conclusive supporting evidence4. (Figure 1)

Osteopathic Manipulative Treatment (OMT) is a cost-effective adjunctive treatment of pneumonia that has been shown to reduce patients&#8217; length of hospital stay, duration of intravenous antibiotics, and incidence of respiratory failure or death when compared to subjects who received conventional care alone5. The use of manual manipulation techniques for pneumonia was first recorded as early as the Spanish influenza pandemic of 1918, when patients treated with standard medical care had an estimated mortality rate of 33%, compared to a 10% mortality rate in patients treated by osteopathic physicians6. When applied to the management of pneumonia, manual manipulation techniques bolster lymphatic flow, respiratory function, and immunological defense by targeting anatomical structures involved in the these systems7,8, 9, 10.

The objective of this review video-article is three-fold: a) summarize the findings of randomized controlled studies on the efficacy of OMT in adult patients with diagnosed pneumonia, b) demonstrate established protocols utilized by osteopathic physicians treating pneumonia, c) elucidate the physiological mechanisms behind manual manipulation of the respiratory and lymphatic systems. Specifically, we will discuss and demonstrate four routine techniques that address autonomics, lymph drainage, and rib cage mobility: 1) Rib Raising, 2) Thoracic Pump, 3) Doming of the Thoracic Diaphragm, and 4) Muscle Energy for Rib 1.5,11

Pneumonia is one of the top ten leading causes of death in the U.S. Osteopathic manipulative techniques (OMT) may be utilized as an adjunctive therapy in the treatment of pneumonia to enhance biomechanical and immune function; and ultimately, to reduce hospital stay, duration of antibiotics, incidence of respiratory failure, and mortality. In this video-article, we will review randomized controlled studies on the use of OMT in pneumonia patients, as well as demonstrate specific hands-on techniques that are routinely practiced by osteopathic physicians when treating pulmonary infections.

Pneumonia, the inflammatory state of lung tissue primarily due to microbial infection, claimed 52,306 lives in the United States in 20071 and resulted in ...

A Next-generation Tissue Microarray (ngTMA) Protocol for Biomarker Studies

Biomarker research relies on tissue microarrays (TMA). TMAs are produced by repeated transfer of small tissue cores from a &#8216;donor&#8217; block into a &#8216;recipient&#8217; block and then used for a variety of biomarker applications. The construction of conventional TMAs is labor intensive, imprecise, and time-consuming. Here, a protocol using next-generation Tissue Microarrays (ngTMA) is outlined. ngTMA is based on TMA planning and design, digital pathology, and automated tissue microarraying. The protocol is illustrated using an example of 134 metastatic colorectal cancer patients. Histological, statistical and logistical aspects are considered, such as the tissue type, specific histological regions, and cell types for inclusion in the TMA, the number of tissue spots, sample size, statistical analysis, and number of TMA copies. Histological slides for each patient are scanned and uploaded onto a web-based digital platform. There, they are viewed and annotated (marked) using a 0.6-2.0 mm diameter tool, multiple times using various colors to distinguish tissue areas. Donor blocks and 12 &#8216;recipient&#8217; blocks are loaded into the instrument. Digital slides are retrieved and matched to donor block images. Repeated arraying of annotated regions is automatically performed resulting in an ngTMA. In this example, six ngTMAs are planned containing six different tissue types/histological zones. Two copies of the ngTMAs are desired. Three to four slides for each patient are scanned; 3 scan runs are necessary and performed overnight. All slides are annotated; different colors are used to represent the different tissues/zones, namely tumor center, invasion front, tumor/stroma, lymph node metastases, liver metastases, and normal tissue. 17 annotations/case are made; time for annotation is 2-3 min/case. 12 ngTMAs are produced containing 4,556 spots. Arraying time is 15-20 hr. Due to its precision, flexibility and speed, ngTMA is a powerful tool to further improve the quality of TMAs used in clinical and translational research.

A Next-generation Tissue Microarray ngTMA Protocol for Biomarker Studies

The protocol aims at optimizing the construction and quality of tissue microarrays for biomarker research. It includes aspects of planning and design, digital pathology, virtual slide annotation, and automated tissue arraying.

바이오 마커 연구 차세대 조직 마이크로 어레이 (ngTMA) 프로토콜

Biomarker research relies on tissue microarrays (TMA). TMAs are produced by repeated transfer of small tissue cores from a &#8216;donor&#8217; block into ...

Fundus Photography as a Convenient Tool to Study Microvascular Responses to Cardiovascular Disease Risk Factors in Epidemiological Studies

The microcirculation consists of blood vessels with diameters less than 150 &#181;m. It makes up a large part of the circulatory system and plays an important role in maintaining cardiovascular health. The retina is a tissue that lines the interior of the eye and it is the only tissue that allows for a non-invasive analysis of the microvasculature. Nowadays, high-quality fundus images can be acquired using digital cameras. Retinal images can be collected in 5 min or less, even without dilatation of the pupils. This unobtrusive and fast procedure for visualizing the microcirculation is attractive to apply in epidemiological studies and to monitor cardiovascular health from early age up to old age.
Systemic diseases that affect the circulation can result in progressive morphological changes in the retinal vasculature. For example, changes in the vessel calibers of retinal arteries and veins have been associated with hypertension, atherosclerosis, and increased risk of stroke and myocardial infarction. The vessel widths are derived using image analysis software and the width of the six largest arteries and veins are summarized in the Central Retinal Arteriolar Equivalent (CRAE) and the Central Retinal Venular Equivalent (CRVE). The latter features have been shown useful to study the impact of modifiable lifestyle and environmental cardiovascular disease risk factors.
The procedures to acquire fundus images and the analysis steps to obtain CRAE and CRVE are described. Coefficients of variation of repeated measures of CRAE and CRVE are less than 2% and within-rater reliability is very high. Using a panel study, the rapid response of the retinal vessel calibers to short-term changes in particulate air pollution, a known risk factor for cardiovascular mortality and morbidity, is reported. In conclusion, retinal imaging is proposed as a convenient and instrumental tool for epidemiological studies to study microvascular responses to cardiovascular disease risk factors.

Retinal image analysis is an unobtrusive procedure for visualizing the microcirculation. The impact of cardiovascular disease risk factors can result in changes of retinal vessel calibers. The procedures to acquire fundus images and the steps for calculating the vessel calibers are described.

편리한 도구로 안저 사진은 역학 연구에서 심혈관 질환의 위험 요인에 대한 미세 혈관 응답을 연구하기 위해

The microcirculation consists of blood vessels with diameters less than 150 &#181;m. It makes up a large part of the circulatory system and plays an ...

Therapeutic Effectiveness of a Dietary Supplement for Management of Halitosis in Dogs

Halitosis is a common complaint involving social and communicational problems in humans and also affects the pet-owner relationship. In this randomized placebo-controlled crossover clinical evaluation, we assessed&#160;the effectiveness of a dedicated dietary supplement to improve chronic halitosis in 32 dogs of different breeds and ages. This protocol describes how to evalute the presence of oral volatile suphur compunds, e.g. methyl mercaptan, hydrogen sulfide and dimethyl sulfide, by means of a portable gas chromatograph device coupled with a syringe, which was used to collect the breath, and a dedicated software, which allows the operator to monitor each compound concentration during each measurement, in a relatively short time (8 min).
A significant modification of halitosis parameters was observed after 30 days since the beginning of treatment (p &#60;0.05), while a long-lasting effect was still observed even 20 days after the suspension of the treatment. Portable gas chromatograph, which is also widely used in clinical practice, can be therefore used to confirm&#160;and control halitosis in humans and animals. Even though human and animal species present some differences,&#160;this innovative and alternative therapy for halitosis management might be extended to human clinical practice as an adjuvant dietary approach.

We describe a simple approach for diagnosis of halitosis in dogs as well as a dietary approach for its management. This protocol may be extended to the management of halitosis in humans in the near future.

개에서 구취 관리를위한 건강 기능 식품의 치료 효과

Halitosis is a common complaint involving social and communicational problems in humans and also affects the pet-owner relationship. In this randomized ...

Evaluation of the Efficacy of the H. pylori Protein HP-NAP as a Therapeutic Tool for Treatment of Bladder Cancer in an Orthotopic Murine Model

Bladder cancer is one of the most common malignancies of the urogenital tract. Intravesical injection of Bacillus Calmette-Gu&#233;rin (BCG) is the gold standard treatment for the high-grade non-muscle invasive bladder cancer (NMIBC). However, since the treatment-related side effects are relevant, newer biological response modifiers with a better benefit/side effects ratio are needed.
The tumour microenvironment can influence both tumour development and therapy efficacy. In order to obtain a good model, it is desirable to implant tumour cells in the organ from which the cancer originates.
In this protocol, we describe a method for establishing a tumour in the bladder cavity of female mice and subsequent delivery of therapeutic agents; the latter are exemplified by our use of Helicobacter pylori neutrophil activating protein (HP-NAP). A preliminary chemical burn of the mucosa, followed by the injection of mouse urothelial carcinoma cell line MB49 via urethral catheterization, enables the cells to attach to the bladder mucosa. After a period, required to allow an initial proliferation of the cells, mice are treated with HP-NAP, administrated again via catheterization. The anti-tumour activity of HP-NAP is evaluated comparing the tumour volume, the extent of necrosis and the degree of vascularization between vehicle- and HP-NAP-treated animals.

Evaluation of the Efficacy of the H. pylori Protein HP-NAP as a Therapeutic Tool for Treatment of Bladder Cancer in an Orthotopic Murine Model

Here the method to establish a syngeneic mouse model of orthotopic bladder tumour to evaluate the anti-tumour efficacy of the bacterial protein HP-NAP is described.

효능 평가<em&gt; H. 파이로리</em동소 이식 쥐 모델에서 방광암의 치료를위한 치료 도구로&gt; 단백질 HP-NAP

Bladder cancer is one of the most common malignancies of the urogenital tract. Intravesical injection of Bacillus Calmette-Gu&#233;rin (BCG) is the gold ...

MRI-guided dmPFC-rTMS as a Treatment for Treatment-resistant Major Depressive Disorder

Here we outline the protocol for magnetic resonance imaging (MRI) guided repetitive transcranial magnetic stimulation (rTMS) to the dorsal medial prefrontal cortex (dmPFC) in patients with major depressive disorder (MDD). Technicians used a neuronavigation system to process patient MRIs to generate a 3-dimensional head model. The head model was subsequently used to identify patient-specific stimulatory targets. The dmPFC was stimulated daily for 20 sessions. Stimulation intensity was titrated to address scalp pain associated with rTMS. Weekly assessments were conducted on the patients using the Hamilton Rating Scale for Depression (HamD17) and Beck Depression Index II (BDI-II). Treatment-resistant MDD patients achieved significant improvements on both HAMD and BDI-II. Of note, angled, double-cone coil rTMS at 120% resting motor threshold allows for optimal stimulation of deeper midline prefrontal regions, which results in a possible therapeutic application for MDD. One major limitation of the rTMS field is the heterogeneity of treatment parameters across studies, including duty cycle, number of pulses per session and intensity. Further work should be done to clarify the effect of stimulation parameters on outcome. Future dmPFC-rTMS work should include sham-controlled studies to confirm its clinical efficacy in MDD.

Here we outline the procedure for MRI-guided repetitive transcranial magnetic stimulation to the dorsomedial prefrontal cortex as an experimental treatment for major depressive disorder.

Here we outline the protocol for magnetic resonance imaging (MRI) guided repetitive transcranial magnetic stimulation (rTMS) to the dorsal medial ...

Scleral Cross-linking Using Riboflavin and Ultraviolet-A Radiation for Prevention of Axial Myopia in a Rabbit Model

Myopic individuals, especially those with severe myopia, are at higher-than-normal risk of cataract, glaucoma, retinal detachment and chorioretinal abnormalities. In addition, pathological myopia is a common irreversible cause of visual impairment and blindness1-3. Our study demonstrates the effect of scleral crosslinking using riboflavin and ultraviolet-A radiation on the development of axial myopia in a rabbit model. The axial length of the eyeball was measured by A-scan ultrasound in New Zealand white rabbits aged 13 days (male and female). The eye then underwent 360&#176; conjunctival peritomy with scleral crosslinking, followed by tarsorrhaphy. Axial elongation was induced in 13 day-old New Zealand rabbits by suturing their right eye eyelids (tarsorrhaphy). The eyes were divided into quadrants, and every quadrant had two scleral irradiation zones, each with an area of 0.2 cm&#178; and a radius of 4 mm. Crosslinking was performed by dropping 0.1% dextran-free riboflavin-5-phosphate onto the irradiation zones 20 sec before ultraviolet-A irradiation and every 20 sec during the 200 sec irradiation time. UVA radiation (370 nm) was applied perpendicular to the sclera at 57 mW/cm&#178; (total UVA light dose, 57 J/cm&#178;). Tarsorrhaphies were removed on day 55, followed by repeated axial length measurements. This study demonstrates that scleral crosslinking with riboflavin and ultraviolet-A radiation effectively prevents occlusion-induced axial elongation in a rabbit model.

We demonstrate the effect of scleral crosslinking with riboflavin and UVA on an axial elongation rabbit eye. Axial elongation was induced in 13 day-old New Zealand rabbits (male and female) by suturing their right eye eyelids (tarsorrhaphy).

공막 래빗 모델에 축 방향 근시의 예방 리보플라빈 및 자외선-A 방사선을 사용하여 교차 결합

Myopic individuals, especially those with severe myopia, are at higher-than-normal risk of cataract, glaucoma, retinal detachment and chorioretinal ...

Tubal Cytology of the Fallopian Tube as a Promising Tool for Ovarian Cancer Early Detection

Currently, it is widely accepted that the vast majority of ovarian high-grade serous carcinoma (HGSC) originate from the fallopian tube. However, due to the lack of markers or tools for the ovarian cancer identification, the early detection of HGSC remains challenging. Direct sampling of the fallopian tube can enhance sensitivity for detection of neoplastic cells when the tumor is not grossly visible. We developed a procedure to collect fallopian tube cells directly from freshly received surgical specimens, which has shown excellent correlation with histological findings. This approach lays a foundation for the future utility of minimally invasive laparoscopic screening in high-risk patient populations.

We explored a tubal cytologic method by sampling the fallopian tube directly post-surgical excision as a tool of ovarian cancer early detection. Here, we present a protocol to collect fallopian tube cells from freshly received surgical specimens.

난소 암 조기 발견을위한 유망한 도구로서의 난관 조영 세포학

Currently, it is widely accepted that the vast majority of ovarian high-grade serous carcinoma (HGSC) originate from the fallopian tube. However, due to ...

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful compared to other more aggressive methods such as retro-orbital plexus sample collection. However, this blood collection method is sometimes limited by an unsatisfactory success rate. Here, we introduce a method for blood collection through the subclavian vein puncture. The subclavian vein is located just under the clavicle and this vein is large enough to fulfill the volume requirements of blood collection. Our results show that this method is safe and applicable for blood collection sampling with the required blood volume. Blood collection through the subclavian vein puncture could serve as an alternative blood collection method in case of failed tail vein blood sampling in rats.

Here, we present a protocol to collect blood samples from the rat subclavian vein.

쥐에서 혈액 샘플 컬렉션의 대체 방법으로 빵 꾸 하 정 맥

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...