이 절차의 전반적인 목표는 쥐 고환과 난소를 빠르고 안전하며 효과적인 방식으로 외과적으로 제거하는 것입니다. 쥐 고환 절제술은 음낭에 복부 정중선을 절개하여 고환을 분리하고 제거한 후 피부 절개를 봉합하여 시행합니다. 쥐 난소 절제술은 난소를 분리하여 제거하는 복부의 배측 절개 후 피부 절개를 봉합하여 수행하며, 반대쪽에서도 이 절차를 반복하여 양측 난소 절제술을 수행할 수 있습니다.
쥐 고환 절제술을 시작하려면 먼저 수컷 쥐의 체중을 기록하고 기관 지침에 따라 적절한 진통제와 마취제를 투여할 준비를 하십시오. 마우스가 마취되면 윤활 아이 젤로 눈을 덮어 시술 중에 눈이 건조해지지 않도록 보호하십시오. 계속하기 전에 발가락 꼬집기 반응 테스트를 수행하여 마우스가 적절한 마취 평면에 있는지 확인하십시오.
다음으로 마우스의 서혜부와 음낭 부분을 면도합니다. 솜 팁 어플리케이터를 사용하여 제모 제모 크림을 수술 부위와 주변 부위에 얇게 바릅니다. 30초 후 깨끗한 거즈 스펀지로 제모 크림을 제거합니다.
마우스를 수술 부위로 옮기고 열원을 사용할 수 있는지 확인합니다. 부드러운 접착 테이프를 사용하여 쥐의 발을 수술용 매트에 부착합니다. 고환이 복부로 올라간 경우 복부에 부드러운 압력을 가하여 고환이 하강할 수 있도록 합니다.
베타딘 용액으로 수술 부위 중앙에서 시작하여 면도 부위의 경계를 향해 바깥쪽으로 피부를 문지릅니다. 베타딘 스크럽을 따라 비슷한 방식으로 알코올 스크럽을 수행합니다. 적절한 피부 소독을 위해 이 과정을 세 번 반복합니다.
수술용 드레이프로 마우스를 덮습니다. 피부를 잡고 약 1-1 1/2cm 길이의 정중선을 절개합니다. 피부의 잘린 경계를 잡고 끝이 뭉툭한 기구를 사용하여 피부와 기저 조직을 분리합니다.
절개 부위의 측면, 상부 및 하부 경계에서 시간을 내어 이 작업을 수행합니다. 그런 다음 피부 절개 부위를 밀어 고환 바로 위에 올려 놓아 한쪽 고환을 분리합니다. 한 쌍의 집게를 사용하여 고환을 둘러싸고 있는 얇고 투명한 크레마스터 근육을 잡습니다.
정확한 조직의 식별은 투명성과 그 안에 둘러싸인 기본 조직과 독립적으로 움직일 수 있는 능력으로 확인할 수 있습니다. 다음으로 조직의 정점을 절개하여 크레마스터 근육을 절개합니다. 절단된 크레마스터 근육의 뒤쪽 경계에 잠금 클램프를 배치하여 조직에 장력을 유지합니다.
한 쌍의 집게를 사용하여 고환을 잡고 cremaster 칼집에서 외부화하십시오. 고환이 나오면 조직을 옆으로 굴리고 고환 뒤쪽의 고환 및 부고환과 크레마스터 근육을 연결하는 크레마스터 삽입 지점을 국소화합니다. 이 연결을 끊으려면 이 조직을 Clamp 찢습니다.
서혜부 지방 패드를 천천히 당겨 외부로 빼냅니다. 이 과정에서 출혈의 징후를 관찰하고 그 과정에서 혈관을 손상시키지 않도록 하십시오. 다음으로, 한 쌍의 잠금 지혈제를 사용하여 정자와 혈관을 고정합니다.
고환에 약간의 긴장을 유지하면서 지혈제 클램프 원위부의 정자와 혈관을 소작합니다. 천천히 지혈제를 풀고 조직 그루터기가 지혈이 잘 되고 출혈이 계속되지 않는지 확인합니다. 크레마스터 근육에 약간의 바깥쪽 압력을 가하면 이 조직 그루터기가 체강 안으로 들어갈 수 있습니다.
크레마스터 근육의 양쪽을 하나로 모으십시오. 4-0 또는 5-0 흡수성 봉합사를 사용하여 봉합사를 넣어 크레마스터 근육의 양쪽 끝을 연결합니다. 봉합사가 완성되면 봉합사 재료의 끝을 길이가 1/2 센티미터가 되도록 자릅니다.
피부 절개 부위를 반대쪽 위로 밀어 다른 쪽 고환에 대해 이 과정을 반복하고 첫 번째 고환을 제거할 때와 동일한 단계를 따릅니다. 양쪽 고환을 제거하고 크레마스터의 양쪽을 봉합한 후 피부를 위쪽으로 올리고 해당 부위에 상처 클립을 적용할 준비를 합니다. 봉합사 끝이 상처 클립에 걸리지 않도록 하십시오.
이제 마우스가 수술 후 모니터링을 계속할 준비가 되었습니다. 쥐 난소 절제술을 준비하려면 암컷 쥐의 체중을 측정하고 기관 지침에 따라 진통제와 마취제를 투여하십시오. 윤활 아이 젤을 바르고 마우스에 발가락 꼬집기 반응이 없는지 확인합니다.
수술 부위를 준비하기 위해 쥐 등의 배외측 부위를 면도합니다. 면봉 어플리케이터를 사용하여 면도 부위에 제모 제모 크림을 바릅니다. 30초 후 깨끗한 거즈 스폰지로 크림을 제거합니다.
마우스를 수술용 매트로 옮기고 열원을 사용할 수 있는지 확인합니다. 베타딘 용액으로 피부를 문지르고 중앙에서 시작하여 면도 부위의 경계를 향해 바깥쪽으로 쉽게 문지릅니다. 그런 다음 비슷한 방식으로 70% 알코올 용액으로 피부를 문지릅니다.
적절한 피부 소독을 위해 이 과정을 총 3회 반복합니다. 서면 프로토콜에 자세히 설명된 대로 수술 절개를 계획하십시오. 쥐의 수술 부위에 수술용 드레이프를 놓습니다.
집게로 피부를 잡고 1cm 절개로 피부를 절개합니다. 끝이 뭉툭한 기구나 일반 지혈제를 사용하여 피부와 기저 조직을 분리합니다. 절개 부위의 측면, 상부 및 하부 경계에서 시간을 내어 이 작업을 수행합니다.
복벽을 잡고 1/2cm 절개로 절개합니다. 한 쌍의 집게를 사용하여 절개 부위 내에서 난소를 찾고 당겨 바깥쪽으로 만듭니다. 조직이 확인되면 한 쌍의 지혈제를 사용하여 원위 자궁 뿔을 고정하고 으깬다.
두 번째 한 쌍의 지혈제 또는 한 쌍의 집게를 사용하여 첫 번째 클램프의 원위부를 고정합니다. 아래쪽 지혈제를 가만히 유지한 상태에서 위쪽 클램프를 위로 당겨 몸에서 떼어내어 원위 자궁 뿔을 으스러뜨리고 찢습니다. 천천히 지혈제를 풀고 수술 부위에서 과도한 출혈이 나오지 않는지 확인합니다.
복벽의 양쪽을 함께 가져와 4-0 흡수성 봉합사 재료가 있는 단일 봉합사를 사용하여 절개 부위를 봉합합니다. 봉합사가 고정되면 봉합사 재료의 끝을 길이가 1/2cm가 되도록 자릅니다. 피부의 양쪽을 다시 모으고 상처 클립을 놓을 준비를 합니다.
피부를 절개하면서 절개 부위에 상처 클립을 놓습니다. 이제 마우스가 수술 후 모니터링을 계속할 준비가 되었습니다. 기관 지침에 따라 시술 날짜 및 시간과 진통제 투여를 문서화하십시오.
쥐가 고환 절제술 또는 난소 절제술을 받은 후에는 깨끗하고 가열된 케이지로 옮깁니다. 쥐가 흉골 누움을 회복하면 깨끗한 케이지에 넣고 촉촉한 차우와 물을 제공합니다. 회복하는 동안 쥐의 수술 부위를 자주 확인하고 감염이나 출혈의 징후가 있는지 확인하십시오.
상처 클립의 손상을 방지하려면 수술 후 일주일 동안 난소 절제술 마우스의 케이지에서 설치류 이글루 서식지를 제거하십시오. 14일 후 쥐의 피부에서 상처 클립을 제거합니다. 시연된 프로토콜은 생쥐에서 고환 절제술 및 난소 절제술을 수행하여 성 호르몬이 고갈된 모델을 생성하는 방법을 자세히 설명합니다.
음낭의 정중선 절개를 통해 고환을 제거한 후 고환을 외부화하고 혈관 내의 정삭을 절단하여 고환, 부고환, 서혜부 지방 패드를 제거합니다. 외과적 난소 절제술은 배쪽을 절개하고 난소, 난관 및 원위 자궁 뿔을 외부로 절개하여 수행할 수 있습니다. 그 다음에는 원위 자궁 뿔을 절단하여 난소와 난관을 제거합니다.
신중한 수술 기법과 적절한 수술 후 관리로 수술 부위가 잘 치유됩니다. 이러한 수술 절차는 고환 절제술 1주일 후 마우스 혈청 샘플의 호르몬 수치를 분석하여 추가로 검증할 수 있습니다. 난소 절제술은 난소 제거 후 자궁 위축을 관찰하여 확인할 수 있습니다.
이 프로토콜은 생쥐에서 난소와 고환을 빠르고 효과적으로 외과적으로 제거하여 성 호르몬이 고갈된 모델을 생성할 수 있습니다. 이것은 이러한 호르몬의 고갈이 다양한 장기와 생리적 과정에 어떻게 영향을 미치는지 연구하는 데 많은 용도로 사용될 수 있습니다.
