<p> Autorzy dziękują Karen Hilburn za doskonałą pomoc techniczną. Projekt ten był wspierany przez National Initiative Badania państwa USDA Spółdzielnia badań, edukacji i Extension Service (nagroda # 2004-35604-14327). Matias Pasquali jest obsługiwany przez Branco Weiss Fellowship. Pszenica USA i inicjatywy Scab Jęczmień jest także obecna na wsparcie kontynuacji badań. </p>

<ol><li> Agar marchwi (Klittich i Leslie, 1988) został przygotowany w 9-centymetrowych płytkach Petriego. </li><li> 2 mm kostka agar zawierający świeży grzybnia uprawiana na ziemniaków dekstroza agar został zastosowany do centrum każdej szalki Petriego. </li><li> Kultury hodowano w 25 ° C i 12-h oświetlenia do 96 godzin. </li><li> Jeden ml wodnego 2,5% Tween 60 był stosowany do powierzchni kultury (Trail i Common, 2000) i obejmują kultury plastikowy pręt, delikatnie naciskając. </li><li> Strzelanie Perithecia askospory opracowane 7-10 dni po tym leczeniu indukcyjnym, gdy jest przechowywany w warunkach wysokiej wilgotności w temperaturze 25 ° C z tym samym fotosyntezy. </li><li> Spore kolekcji wykonywana jest przez zmianę pokrywy płytki Petriego, pozostawiając perithecia strzelać w ograniczonym czasie (np. 12 godzin) w ciemności. </li><li> Sterylnej wody dodaje się do pokrywy, zawieszania askospory delikatnie ruchu wody na powierzchni. </li><li> Askospory gromadzone są w sterylnych probówek Falcon, myte i używane do dalszej analizy. </li></ol>

<ol>
	<li>Beyer, M., Verreet, J. A., Francl, L., Shaner, G., Bergstrom, G., Gilbert, J., Pedersen, W., Dill-Macky, R., Sweets, L., Corwin, B., Jin, Y., Gallenberg, D., Wiersma, J., Goswami, R. S., Kistler, H. C., Klittich, C. J. R., Leslie, J. F., Trail, F., Common, R., Tschantz, A. T., Horst, R. L., Nelson, P. E., Tschanz, A. T., Horst, R. K., Nelson, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Germination+of+Gibberella+zeae+ascospores+as+affected+by+age+of+spores+after+discharge+and+environmental+factors.">Germination of Gibberella zeae ascospores as affected by age of spores after discharge and environmental factors.</a> <em style='font-style: italic'>Genetics</em>. <b>118</b>, 417-2013 (2005).</li></ol>

<p> Protokół przedstawione tutaj opiera się na wcześniejszych procedur stosowanych perithecial produkcji Fusarium. (Klittich i Leslie, 1988; Trail i Common, 2000). Standaryzacja procedury, dzięki której duże ilości askospory (wystarcza do analizy mikromacierzy) były generowane było konieczne dla powtarzalności eksperymentu. Zanotowano, że czynniki środowiskowe, wiek i podłoża różnic biologicznych może zmienić charakter askospory (Beyer i Verreet, 2005). Dlatego stosowanie wideo mogą podkreślić drobnych szczegółów w spos...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Petri dish 9 cm Diameter</td>
<td>Tool</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tween 60 (20%)</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Carrot agar (20% w/v organic carrots and 1.5% w/v agar) </td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

gibberella zeae ascospore production and collection for microarray experiments.

<p class="jove_content">Fusarium graminearum Schwabe (teleomorph Gibberella zeae) jest patogenem roślin powoduje chorobę parcha na pszenicy i jęczmienia, która zmniejsza plony i jakość ziarna. F. graminearum powoduje także łodygi i ucha gnije kukurydzy i jest producentem mikotoksyn, takich jak trichotecenów, że skażenie zboża i są szkodliwe dla ludzi i zwierząt gospodarskich (Goswami i Kistler, 2004). Grzyb wytwarza dwa rodzaje zarodników. Askospory, zarodnikami w wyniku rozmnażania płciowego, są głównym źródłem infekcji pierwotnej. Te zarodniki są przymusowo zwolniony z dojrzałych perithecia i rozproszone przez wiatr (Francl i wsp. 1999). Wtórne infekcje spowodowane są głównie macroconidia które są produkowane przez bezpłciowe oznacza na powierzchni roślin. Do badania procesów rozwojowych z askospory w tego grzyba, procedurę ich gromadzenia w dużej ilości w warunkach sterylnych było wymagane. Nasz protokół został nakręcony w celu wygenerowania najwyższy poziom informacji w celu zrozumienia i powtarzalność; kluczowe aspekty, gdy pełne profile ekspresji genów genomu są generowane i interpretowane. W szczególności, zmienność ascospore kiełkowania i aktywności biologicznej są uzależnione od uprzedniego manipulacji materiału. Korzystanie z wideo dokumentujące każdy krok w ascospore produkcji proponuje w celu zwiększenia standaryzacji, zgodne z coraz bardziej rygorystyczne wymagania dotyczące analizy mikromacierzy. Procedura wymaga tylko standardowych urządzeń laboratoryjnych. Kroki zostały przedstawione w celu zapobieżenia zanieczyszczeniu i synchronizacji czasu za askospory.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Gibberella zeae Ascospore Production and Collection for Microarray Experiments. at JoVE.com

Gibberella zeae Ascospore Production and Collection for Microarray Experiments.

<p class="jove_content">Do badania procesów rozwojowych z askospory w Gibberella zeae, procedury zbierania w sterylnych warunkach jest filmowany w celu wygenerowania najwyższy poziom informacji dla opisu protokołu. Powinno to ułatwić powtarzalność eksperymentu, kluczowym aspektem, gdy pełne testy ekspresji genomu profil są realizowane.</p>

Gibberella zeae Produkcja Ascospore i Kolekcja dla Eksperymenty mikromacierzy.

Fusarium graminearum Schwabe (teleomorph Gibberella zeae) is a plant pathogen causing scab disease on wheat and barley that reduces crop yield and grain ...

gibberella-zeae-ascospore-production-collection-for-microarray

Research

JoVE Journal

Biology

14.1K Views.  USDA. Do badania procesów rozwojowych z askospory w Gibberella zeae, procedury zbierania w sterylnych warunkach jest filmowany w celu wygenerowania najwyższy poziom informacji dla opisu protokołu. Powinno to ułatwić powtarzalność eksperymentu, kluczowym aspektem, gdy pełne testy ekspresji genomu profil są realizowane.