Microvolume Protein Concentration Determination using the NanoDrop 2000c Spectrophotometer

Traditional spectrophotometry requires placing samples into cuvettes or capillaries. This is often impractical due to the limited sample volumes often ...

NanoDrop Microvolume Quantitation of Nucleic Acids

Biomolecular assays are continually being developed that use progressively smaller amounts of material, often precluding the use of conventional ...

Thermo Scientific NanoDrop Products

&#x5FC3;&#x808C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x94FE; &#xFF08;MyHC&#xFF09; &#x662F;&#x6A2A;&#x7EB9;&#x808C;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6536;&#x7F29;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x516D;&#x4E2A;&#x4E32;&#x8054;&#x4E0E;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C; MyHC &#x57FA;&#x56E0;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; 17 &#x548C; 14 &#x53F7;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5FC3;&#x810F; MyHC &#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x5148;&#x524D;&#x6240;&#x8FF0;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4E09;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5FC3;&#x808C; MyHC &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; 3&#x3001; 7 &#x548C; 20&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5185;&#x542B;&#x5B50;-&#x5916;&#x663E;&#x5B50;&#x7ED3;&#x6784;&#x53CA;&#x5176;&#x975E;&#x5178;&#x578B;&#x5927;&#x5C0F;&#x800C;&#x8457;&#x79F0;&#x3002;&#x800C;&#x7B2C;&#x4E09;&#x4E2A;&#x662F;&#x6210;&#x4EBA;&#x5FEB;&#x901F; IIb &#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x6700;&#x63A5;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x6700;&#x50CF;&#x6162; beta MyHC&#x3002;&#x4ECE;&#x5BF9;&#x9F50;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x6210;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x8F83;&#x6570;&#x636E;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x7956;&#x5148;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E13;&#x7528;&#x7684;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C; MyHC &#x57FA;&#x56E0;&#x51FA;&#x73B0;&#x4E4B;&#x524D;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5FC3;&#x808C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FDB;&#x5316;&#x5173;&#x7CFB;&#x4E0D;&#x540C;&#x5FC3;&#x808C;&#x548C; nonsarcomeric &#x6746;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x5E76;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x6CE8;&#x660E;&#x5BF9;&#x5E94; 14 &#x7B2C; II &#x7C7B; MyHCs &#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65F6;&#x95F4;&#x8F74;&#x5185;&#x542B;&#x5B50;&#x5F97;&#x5931;&#x3001; &#x57FA;&#x56E0;&#x6536;&#x7F29;&#x548C;&#x6269;&#x5F20;&#x4E0E;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801; II &#x7C7B;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8F6C;&#x6362;&#x3002;&#x627E;&#x5230;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x9635;&#x5730;&#x53EA;&#x6709;&#x5171;&#x4EAB;&#x7684;&#x8F6F;&#x4F53;&#x52A8;&#x7269;&#x78B0;&#x4E0A;/MyHC &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BC1;&#x636E;&#x7684;&#x524D;&#x5BD2;&#x6B66;&#x7EAA;&#x7684;&#x7956;&#x5148;&#x57FA;&#x56E0;&#x7ED3;&#x6784;&#x6709;&#x5185;&#x542B;&#x5B50;&#x3002;

&#x4E09;&#x4E2A;&#x65B0;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5FC3;&#x808C;&#x808C;&#x7403;&#x86CB;&#x767D;&#x91CD;&#x94FE;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;

Sarcomeric myosin heavy chain (MyHC) is the major contractile protein of striated muscle. Six tandemly linked skeletal MyHC genes on chromosome 17 and two cardiac MyHC genes on chromosome 14 have been previously described in the human genome. We report the identification of three novel human sarcomeric MyHC genes on chromosomes 3, 7, and 20, which are notable for their atypical size and intron-exon structure. Two of the encoded proteins are structurally most like the slow-beta MyHC, whereas the third one is closest to the adult fast IIb isoform. Data from pairwise comparisons of aligned coding sequences imply the existence of ancestral genomes with four sarcomeric genes before the emergence of a dedicated smooth muscle MyHC gene. To further address the evolutionary relationships of the distinct sarcomeric and nonsarcomeric rod sequences, we have identified and further annotated human genomic DNA sequences corresponding to 14 class-II MyHCs. An extensive analysis provides a timeline for intron gain and loss, gene contraction and expansion, and gene conversion among genes encoding class-II myosins. One of the novel human genes is found to have introns at positions shared only with the molluscan catchin/MyHC gene, providing evidence for the structure of a pre-Cambrian ancestral gene.

Evolutionary implications of three novel members of the human sarcomeric myosin heavy chain gene family.

La cha&icirc;ne lourde de myosine du sarcom&egrave;re (myosine) est la principale prot&eacute;ine contractile du muscle stri&eacute;. Six li&eacute; en tandem de g&egrave;nes de myosine squelettiques sur le chromosome 17 et deux g&egrave;nes de la myosine cardiaques sur le chromosome 14 ont &eacute;t&eacute; d&eacute;crites pr&eacute;c&eacute;demment dans le g&eacute;nome humain. Nous rapportons l&#39;identification de trois nouveaux humaines du sarcom&egrave;re cha&icirc;ne g&egrave;nes sur les chromosomes 3, 7 et 20, qui se distinguent par leur taille atypique et structure exon-intron. Deux des prot&eacute;ines cod&eacute;es sont structurellement plus comme la myosine b&ecirc;ta ralentir, alors que le troisi&egrave;me est le plus proche de l&#39;isoforme de IIb rapide adulte. Donn&eacute;es de comparaisons par paires de s&eacute;quences codantes align&eacute;es impliquent l&#39;existence de g&eacute;nomes ancestraux avec quatre g&egrave;nes du sarcom&egrave;re avant l&#39;&eacute;mergence d&#39;un g&egrave;ne de la myosine le muscle lisse d&eacute;di&eacute;. Autre adresse les relations &eacute;volutives des s&eacute;quences distinctes de tige du sarcom&egrave;re et nonsarcomeric, nous avons identifi&eacute; et annot&eacute; plus humaines des s&eacute;quences d&#39;ADN g&eacute;nomique correspondant aux cha&icirc;nes lourdes de myosine classe II 14. Une analyse approfondie fournit une chronologie de l&#39;intron gain et perte, g&egrave;ne contraction et expansion et conversion des g&egrave;nes chez les g&egrave;nes codant les myosines de classe II. Un des nouveaux g&egrave;nes humains se trouve avoir introns aux positions partag&eacute;es uniquement avec le g&egrave;ne catchin/myosine chez les mollusques, fournissant des preuves de la structure d&#39;un g&egrave;ne ancestral pr&eacute;cambrienne.

Implications &eacute;volutives de trois nouveaux membres de la famille de g&egrave;nes de cha&icirc;ne lourde de myosine du sarcom&egrave;re humaine.

Evolution&#xE4;ren Implikationen von drei neuen Mitgliedern der menschlichen Sarkomer Myosin schwere Kette-Gen-Familie.

Catena pesante della miosina sarcomero (MyHC) &egrave; la principale proteina contrattile del muscolo striato. Sei collegato tandemly scheletrici MyHC geni sul cromosoma 17 e due cardiaci MyHC geni sul cromosoma 14 sono state descritte in precedenza nel genoma umano. Riportiamo l&#39;identificazione di tre nuovi umani sarcomero MyHC geni sui cromosomi 3, 7 e 20, che sono notevoli per la loro dimensione atipica e struttura dell&#39;introne-esone. Due delle proteine codificate sono strutturalmente pi&ugrave; simile la MyHC lento-beta, mentre il terzo &egrave; pi&ugrave; vicina all&#39;adulto isoforma IIb veloce. Dati dai confronti coppie di sequenze codificanti allineati implicano l&#39;esistenza di genomi ancestrali con quattro geni sarcomero prima della nascita di un muscolo liscio dedicato MyHC gene. All&#39;indirizzo ulteriormente le relazioni evolutive delle sequenze distinte canna sarcomero e nonsarcomeric, abbiamo identificato e annotati ulteriori sequenze di DNA genomiche umane corrispondente a 14 MyHCs di classe II. Un&#39;analisi estesa fornisce una timeline per introne guadagno e perdita, contrazione di gene e l&#39;espansione e conversione genica tra i geni che codificano myosins di classe II. Uno dei geni umani romanzo &egrave; trovato ad per avere introno a posizioni condivise solo con il gene catchin/MyHC cotti, fornendo le prove per la struttura di un gene ancestrale precambriani.

Implicazioni evolutive dei tre membri romanzo della famiglia del gene di catena pesante della miosina sarcomero umana.

&#x30B5;&#x30EB;&#x30B3;&#x30E1;&#x30A2; &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x91CD;&#x9396; (MyHC) &#x6A2A;&#x7D0B;&#x7B4B;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x53CE;&#x7E2E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;6 &#x7E26;&#x5217; 17 &#x756A;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E; MyHC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; 14 &#x4E8C;&#x5FC3;&#x81D3; MyHC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x4EE5;&#x524D;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53; 3&#x3001;7&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x975E;&#x5B9A;&#x578B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3; &#x30FB; &#x30A8;&#x30AF;&#x30BD;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x6CE8;&#x76EE;&#x306B;&#x5024;&#x3059;&#x308B; 20 3 &#x5C0F;&#x8AAC;&#x4EBA;&#x9593;&#x30B5;&#x30EB;&#x30B3;&#x30E1;&#x30A2; MyHC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;3 &#x3064;&#x76EE;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30C0;&#x30EB;&#x30C8;&#x9AD8;&#x901F; IIb &#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x8FD1;&#x3044;&#x3042;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x7B26;&#x53F7;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x9045;&#x3044;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248; MyHC &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x6574;&#x5217;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x30EF;&#x30A4;&#x30BA;&#x6BD4;&#x8F03;&#x304B;&#x3089;&#x7956;&#x5148;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3092;&#x5C02;&#x7528;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B; MyHC &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B; 4 &#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30EB;&#x30B3;&#x30E1;&#x30A2;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5225;&#x500B;&#x306E;&#x30B5;&#x30EB;&#x30B3;&#x30E1;&#x30A2;&#x3068; nonsarcomeric &#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x304C;&#x8B58;&#x5225;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; DNA &#x914D;&#x5217;&#x306E; 14 &#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; II &#x306E; MyHCs &#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x6CE8;&#x91C8;&#x4ED8;&#x304D;&#x3002;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x5229;&#x5F97;&#x3068;&#x640D;&#x5931;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3068;&#x5C55;&#x958B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x63DB;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; II &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x65B0;&#x898F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x307F;&#x8EDF;&#x4F53;&#x52D5;&#x7269; catchin/MyHC &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5148;&#x30AB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x30A2;&#x7956;&#x5148;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x5171;&#x6709;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3067;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

3 &#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x4EBA;&#x9593;&#x30B5;&#x30EB;&#x30B3;&#x30E1;&#x30A2; &#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x91CD;&#x9396;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x610F;&#x7FA9;&#x3002;

Sarcomeric myosin &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778; (MyHC) &#xAD74;&#xB9AC;&#xB294; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC218;&#xCD95; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. 6 Tandemly &#xACE8;&#xACA9; MyHC &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 17&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; &#xB450; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 14&#xC5D0; MyHC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xC778;&#xAC04; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 3, 7, &#xBC0F;&#xB294; &#xBE44;&#xC815;&#xD615; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; intron exon &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC8FC;&#xBAA9;&#xD560; &#xB9CC;&#xD55C; 20 &#xC138; &#xC18C;&#xC124; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; sarcomeric MyHC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xC138; &#xBC88;&#xC9F8;&#xB294; &#xC131;&#xC778; &#xBE60;&#xB978; IIb isoform&#xC5D0; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; &#xBC18;&#xBA74; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; 2 &#xAC1C;&#xB294; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB290;&#xB9B0; &#xBCA0;&#xD0C0; MyHC &#xAC19;&#xC740; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758;. &#xC815;&#xB82C; &#xB41C; &#xCF54;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC778;&#xB371;&#xC2A4;&#xB3C4; &#xBE44;&#xAD50;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC804;&#xC6A9;&#xB41C; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xADFC;&#xC721; MyHC &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xCD9C;&#xD604; &#xC804;&#xC5D0; 4 sarcomeric &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC0C1;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC758;&#xBBF8;. &#xCD94;&#xAC00; &#xC8FC;&#xC18C;&#xB97C; &#xBCC4;&#xAC1C; sarcomeric&#xC640; nonsarcomeric &#xB9C9;&#xB300; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xAD00;&#xACC4; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xCD94;&#xAC00; &#xC8FC;&#xC11D; 14 &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II Myhcs&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;. &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; intron &#xC774;&#xB4DD; &#xBC0F; &#xC190;&#xC2E4;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC218;&#xCD95; &#xBC0F; &#xD655;&#xC7A5;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD658; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II myosins &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB4E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xC815;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xC124; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC911; &#xD558;&#xB098; introns molluscan &#xC7A1;&#xAE30;/MyHC &#xC720;&#xC804;&#xC790;, pre-Cambrian &#xC870;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xB41C; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;.

3 &#xC18C;&#xC124; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; sarcomeric myosin &#xBB34;&#xAC70;&#xC6B4; &#xCCB4;&#xC778; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xC758;&#xBBF8;.

Cadenas pesadas de miosina sarcomeric (MyHC) es la principal prote&iacute;na contr&aacute;ctil del m&uacute;sculo estriado. Seis t&aacute;ndem vinculados esquel&eacute;ticos MyHC genes en el cromosoma 17 y dos cardiacos MyHC genes en el cromosoma 14 se han descrito previamente en el genoma humano. Divulgamos la identificaci&oacute;n de tres nuevos humanos sarcomeric MyHC genes en los cromosomas 3, 7 y 20, que destacan por su tama&ntilde;o anormal y estructura del intr&oacute;n-ex&oacute;n. Dos de las prote&iacute;nas codificadas son estructuralmente m&aacute;s la MyHC lenta-beta, mientras que la tercera es m&aacute;s cercana a la isoforma de IIb r&aacute;pida para adultos. Datos de las comparaciones pares de secuencias de codificaci&oacute;n alineadas implican la existencia de genomas ancestrales con cuatro genes sarcomeric antes de la aparici&oacute;n de un m&uacute;sculo liso dedicado MyHC gene. Para atender las relaciones evolutivas de las secuencias sarcomeric y nonsarcomeric distintas de la barra, hemos identificado y anotado m&aacute;s secuencias de ADN gen&oacute;micas humanas correspondiente a 14 MyHCs de clase II. Un extenso an&aacute;lisis proporciona una l&iacute;nea de tiempo para intr&oacute;n ganancia y p&eacute;rdida, contracci&oacute;n de gene y expansi&oacute;n y conversi&oacute;n del gene entre genes que codifican miosinas de clase II. Uno de los nuevos genes humanos se encontraron para tener intrones en posiciones compartidos s&oacute;lo con el gen catchin/MyHC moluscos, proporcionando la evidencia para la estructura de un gen ancestral Prec&aacute;mbrico.

Implicaciones evolutivas de tres nuevos miembros de la familia de genes de cadenas pesadas de miosina sarcomeric humano.

&#x6838;&#x9178;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x662F;&#x8981;&#x6C42;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3001; &#x53EF;&#x9760;&#x6027;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x5730;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x5377;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x672C;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x672C;&#x5355;&#x5143;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4F20;&#x7EDF;&#x5438;&#x5149;&#x5EA6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5728; 260 nm &#x548C;&#x4E09;&#x66F4;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x4EEA;&#x5668;&#x4EEA;&#x8868;&#x5149;&#x7EA4;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A; microvolume &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5141;&#x8BB8;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5B9A; DNA &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4ECE; 1 pg/l &#x5230; 50 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#x3002;

&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5B9A; DNA &#x548C; RNA &#x4E0E;&#x5438;&#x6536;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x5149;&#x8C31;&#x3002;

Quantitation of nucleic acids is a fundamental tool in molecular biology that requires accuracy, reliability, and the use of increasingly smaller sample volumes. This unit describes the traditional absorbance measurement at 260 nm and three more sensitive fluorescence techniques, as well as three microvolume methods that use fiber optic technology in specialized cells or instrumentation. These procedures allow quantitation of DNA solutions ranging from 1 pg/l to 50 mg/ml.

Quantitation of DNA and RNA with absorption and fluorescence spectroscopy.

Quantification des acides nucl&eacute;iques est un outil essentiel en biologie mol&eacute;culaire qui exige la pr&eacute;cision, la fiabilit&eacute; et l&#39;utilisation de plus en plus petites quantit&eacute;s d&#39;&eacute;chantillon. Cette unit&eacute; d&eacute;crit la mesure de l&#39;absorbance traditionnel &agrave; 260 nm et trois techniques de fluorescence plus sensibles, ainsi que trois microvolume m&eacute;thodes qui utilisent la technologie optique de fibre en cellules sp&eacute;cialis&eacute;es ou instrumentation. Ces proc&eacute;dures permettent la quantification des solutions d&#39;ADN allant de 1 pg/l &agrave; 50 mg/ml.

Quantification d&#39;ADN ou d&#39;ARN par spectroscopie d&#39;absorption et de fluorescence.

Quantifizierung von Nukleins&auml;uren ist ein grundlegendes Instrument in der Molekularbiologie, die Genauigkeit, Zuverl&auml;ssigkeit und die Verwendung zunehmend kleinere Probenvolumina ben&ouml;tigt. Diese Ma&szlig;einheit beschreibt die Messung der traditionellen Absorption bei 260 nm und drei empfindlicher Fluoreszenz-Techniken, sowie drei Microvolume Methoden, mit denen Glasfasertechnik in spezialisierten Zellen oder Instrumentation. Diese Verfahren erm&ouml;glichen quantitative Bestimmung der DNA-L&ouml;sungen von 1 Pg/l bis 50 mg/ml.

Quantitative Bestimmung von DNA und RNA mit Absorption und Fluoreszenz-Spektroskopie.

Quantificazione degli acidi nucleici &egrave; uno strumento fondamentale in biologia molecolare che richiede precisione, affidabilit&agrave; e l&#39;utilizzo di sempre pi&ugrave; piccoli volumi di campione. Questa unit&agrave; descrive la misura tradizionale di assorbanza a 260 nm e tre tecniche di fluorescenza pi&ugrave; sensibili, come pure microvolume tre metodi che utilizzano la tecnologia in fibra ottica in cellule specializzate o strumentazione. Queste procedure consentono la quantificazione delle soluzioni di DNA che vanno da 1 pg/l a 50 mg/ml.

Quantificazione del DNA e RNA con spettroscopia di assorbimento e fluorescenza.

&#x6838;&#x9178;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3001;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x3059;&#x5C0F;&#x3055;&#x304F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x5438;&#x5149;&#x5EA6;&#x6E2C;&#x5B9A; 260 &#x306E; nm &#x3068; 3 &#x3064;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x6280;&#x8853;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5149;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0;&#x30FC;&#x6280;&#x8853;&#x5C02;&#x9580;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EB;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; 3 &#x3064;&#x306E;&#x5FAE;&#x91CF;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306F;&#x3001;1 pg/l &#x304B;&#x3089; 50 mg/ml &#x306B;&#x53CA;&#x3076; DNA &#x6EB6;&#x6DB2;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5438;&#x53CE;&#x30FB;&#x86CD;&#x5149;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B; DNA &#x304A;&#x3088;&#x3073; RNA &#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x3002;

&#xC815;&#xB7C9; &#xD575; &#xC0B0;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xC131;, &#xC2E0;&#xB8B0;&#xC131;, &#xC810;&#xC810; &#xB354; &#xC791;&#xC740; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBCFC;&#xB968;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB2E8;&#xC704; &#xC804;&#xBB38;&#xB41C; &#xC140; &#xB610;&#xB294; &#xACC4;&#xCE21;&#xC5D0; &#xAD11;&#xC12C;&#xC720; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; 3 &#xAC1C;&#xC758; microvolume &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; 260 nm&#xC640; 3 &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xD615;&#xAD11; &#xAE30;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xD761; &#xAD11;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC808;&#xCC28;&#xB97C; 1 pg/l&#xC5D0;&#xC11C; 50 mg/ml&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xB294; DNA &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xC0AC;&#xC6A9;.

&#xD761;&#xC218; &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xACFC; DNA&#xC640; RNA&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;.

Cuantificaci&oacute;n de &aacute;cidos nucleicos es una herramienta fundamental en biolog&iacute;a molecular que requiere exactitud, confiabilidad y el uso de vol&uacute;menes de muestra cada vez m&aacute;s peque&ntilde;os. Esta unidad describe la medida tradicional de la absorbancia a 260 nm y tres t&eacute;cnicas de fluorescencia m&aacute;s sensibles, as&iacute; como m&eacute;todos de tres microvolume que utilizan la tecnolog&iacute;a &oacute;ptica de fibra en c&eacute;lulas especializadas o instrumentaci&oacute;n. Estos procedimientos permiten la cuantificaci&oacute;n de soluciones de ADN que van desde 1 pg/l a 50 mg/ml.

Cuantificaci&oacute;n de ADN y ARN con espectroscopia de absorci&oacute;n y fluorescencia.

&#x6838;&#x9178;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x662F;&#x8981;&#x6C42;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3001; &#x53EF;&#x9760;&#x6027;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x5730;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x5377;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x672C;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x672C;&#x5355;&#x5143;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4F20;&#x7EDF;&#x5438;&#x5149;&#x5EA6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5728; 260 nm &#x548C;&#x4E09;&#x66F4;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x4EEA;&#x5668;&#x4EEA;&#x8868;&#x5149;&#x7EA4;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A; microvolume &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5141;&#x8BB8;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5B9A; DNA &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848; 1 pg/microl &#x81F3; 50 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#x4E0D;&#x7B49;&#x3002;

Quantitation of nucleic acids is a fundamental tool in molecular biology that requires accuracy, reliability, and the use of increasingly smaller sample volumes. This unit describes the traditional absorbance measurement at 260 nm and three more sensitive fluorescence techniques, as well as three microvolume methods that use fiber optic technology in specialized cells or instrumentation. These procedures allow quantitation of DNA solutions ranging from 1 pg/microl to 50 mg/ml.

Quantification des acides nucl&eacute;iques est un outil essentiel en biologie mol&eacute;culaire qui exige la pr&eacute;cision, la fiabilit&eacute; et l&#39;utilisation de plus en plus petites quantit&eacute;s d&#39;&eacute;chantillon. Cette unit&eacute; d&eacute;crit la mesure de l&#39;absorbance traditionnel &agrave; 260 nm et trois techniques de fluorescence plus sensibles, ainsi que trois microvolume m&eacute;thodes qui utilisent la technologie optique de fibre en cellules sp&eacute;cialis&eacute;es ou instrumentation. Ces proc&eacute;dures permettent la quantification des solutions d&#39;ADN allant de 1 pg/microl &agrave; 50 mg/ml.

Quantifizierung von Nukleins&auml;uren ist ein grundlegendes Instrument in der Molekularbiologie, die Genauigkeit, Zuverl&auml;ssigkeit und die Verwendung zunehmend kleinere Probenvolumina ben&ouml;tigt. Diese Ma&szlig;einheit beschreibt die Messung der traditionellen Absorption bei 260 nm und drei empfindlicher Fluoreszenz-Techniken, sowie drei Microvolume Methoden, mit denen Glasfasertechnik in spezialisierten Zellen oder Instrumentation. Diese Verfahren erm&ouml;glichen quantitative Bestimmung der DNA-L&ouml;sungen von 1 Pg/Microl bis hin zu 50 mg/ml.

Quantificazione degli acidi nucleici &egrave; uno strumento fondamentale in biologia molecolare che richiede precisione, affidabilit&agrave; e l&#39;utilizzo di sempre pi&ugrave; piccoli volumi di campione. Questa unit&agrave; descrive la misura tradizionale di assorbanza a 260 nm e tre tecniche di fluorescenza pi&ugrave; sensibili, come pure microvolume tre metodi che utilizzano la tecnologia in fibra ottica in cellule specializzate o strumentazione. Queste procedure consentono la quantificazione delle soluzioni di DNA che vanno da 1 pg/microl a 50 mg/ml.

&#x6838;&#x9178;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3001;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x3059;&#x5C0F;&#x3055;&#x304F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x5438;&#x5149;&#x5EA6;&#x6E2C;&#x5B9A; 260 &#x306E; nm &#x3068; 3 &#x3064;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x6280;&#x8853;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5149;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0;&#x30FC;&#x6280;&#x8853;&#x5C02;&#x9580;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EB;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; 3 &#x3064;&#x306E;&#x5FAE;&#x91CF;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306F;&#x3001;DNA &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; 1 pg/microl &#x304B;&#x3089; 50 mg/ml &#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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Cuantificaci&oacute;n de &aacute;cidos nucleicos es una herramienta fundamental en biolog&iacute;a molecular que requiere exactitud, confiabilidad y el uso de vol&uacute;menes de muestra cada vez m&aacute;s peque&ntilde;os. Esta unidad describe la medida tradicional de la absorbancia a 260 nm y tres t&eacute;cnicas de fluorescencia m&aacute;s sensibles, as&iacute; como m&eacute;todos de tres microvolume que utilizan la tecnolog&iacute;a &oacute;ptica de fibra en c&eacute;lulas especializadas o instrumentaci&oacute;n. Estos procedimientos permiten la cuantificaci&oacute;n de soluciones de ADN que van desde 1 pg/microl a 50 mg/ml.

&#x6838;&#x9178;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x662F;&#x8981;&#x6C42;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3001; &#x53EF;&#x9760;&#x6027;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x591A;&#x5730;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x5377;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x672C;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x672C;&#x5355;&#x5143;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4F20;&#x7EDF;&#x5438;&#x5149;&#x5EA6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5728; 260 nm &#x548C;&#x4E09;&#x66F4;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x4EEA;&#x5668;&#x4EEA;&#x8868;&#x5149;&#x7EA4;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A; microvolume &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5141;&#x8BB8;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5B9A; DNA &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4ECE; 1 pg/&#x5347;&#x5230; 50 &#x6BEB;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#x3002;

Quantitation of nucleic acids is a fundamental tool in molecular biology that requires accuracy, reliability, and the use of increasingly smaller sample volumes. This unit describes the traditional absorbance measurement at 260 nm and three more sensitive fluorescence techniques, as well as three microvolume methods that use fiber optic technology in specialized cells or instrumentation. These procedures allow quantitation of DNA solutions ranging from 1 pg/liter to 50 mg/ml.

Quantification des acides nucl&eacute;iques est un outil essentiel en biologie mol&eacute;culaire qui exige la pr&eacute;cision, la fiabilit&eacute; et l&#39;utilisation de plus en plus petites quantit&eacute;s d&#39;&eacute;chantillon. Cette unit&eacute; d&eacute;crit la mesure de l&#39;absorbance traditionnel &agrave; 260 nm et trois techniques de fluorescence plus sensibles, ainsi que trois microvolume m&eacute;thodes qui utilisent la technologie optique de fibre en cellules sp&eacute;cialis&eacute;es ou instrumentation. Ces proc&eacute;dures permettent la quantification des solutions d&#39;ADN allant de 1 pg/litre &agrave; 50 mg/ml.

Quantifizierung von Nukleins&auml;uren ist ein grundlegendes Instrument in der Molekularbiologie, die Genauigkeit, Zuverl&auml;ssigkeit und die Verwendung zunehmend kleinere Probenvolumina ben&ouml;tigt. Diese Ma&szlig;einheit beschreibt die Messung der traditionellen Absorption bei 260 nm und drei empfindlicher Fluoreszenz-Techniken, sowie drei Microvolume Methoden, mit denen Glasfasertechnik in spezialisierten Zellen oder Instrumentation. Diese Verfahren erm&ouml;glichen quantitative Bestimmung der DNA-L&ouml;sungen von 1 Pg/Liter bis hin zu 50 mg/ml.

Quantificazione degli acidi nucleici &egrave; uno strumento fondamentale in biologia molecolare che richiede precisione, affidabilit&agrave; e l&#39;utilizzo di sempre pi&ugrave; piccoli volumi di campione. Questa unit&agrave; descrive la misura tradizionale di assorbanza a 260 nm e tre tecniche di fluorescenza pi&ugrave; sensibili, come pure microvolume tre metodi che utilizzano la tecnologia in fibra ottica in cellule specializzate o strumentazione. Queste procedure consentono la quantificazione delle soluzioni di DNA che vanno da 1 pg/litro a 50 mg/ml.

&#x6838;&#x9178;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3001;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x3059;&#x5C0F;&#x3055;&#x304F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x5438;&#x5149;&#x5EA6;&#x6E2C;&#x5B9A; 260 &#x306E; nm &#x3068; 3 &#x3064;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x6280;&#x8853;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5149;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0;&#x30FC;&#x6280;&#x8853;&#x5C02;&#x9580;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EB;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; 3 &#x3064;&#x306E;&#x5FAE;&#x91CF;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306F;&#x3001;DNA &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; 1 pg/&#x30EA;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EB;&#x304B;&#x3089; 50 mg/ml &#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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Cuantificaci&oacute;n de &aacute;cidos nucleicos es una herramienta fundamental en biolog&iacute;a molecular que requiere exactitud, confiabilidad y el uso de vol&uacute;menes de muestra cada vez m&aacute;s peque&ntilde;os. Esta unidad describe la medida tradicional de la absorbancia a 260 nm y tres t&eacute;cnicas de fluorescencia m&aacute;s sensibles, as&iacute; como m&eacute;todos de tres microvolume que utilizan la tecnolog&iacute;a &oacute;ptica de fibra en c&eacute;lulas especializadas o instrumentaci&oacute;n. Estos procedimientos permiten la cuantificaci&oacute;n de soluciones de ADN que van desde 1 pg/litro a 50 mg/ml.

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Microvolume &#x5206;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x6CD5;&#x3001; &#x8367;&#x5149;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;

Methods for determining protein concentration that use progressively smaller amounts of material are continually being developed. A new way of minimizing the amount of sample used for spectroscopic analysis is providing more opportunities for greater quality control. Traditional spectrophotometric and fluorometric methods for determination of protein concentrations have long required placing samples into containment devices such as cuvettes or capillaries. A microsample retention system is changing that paradigm by using natural surface tension properties to capture and hold microvolume samples in place during measurement without traditional containment devices. The advantage of such a system is to dramatically reduce the amount of sample required (1 to 2 microl) while greatly increasing the dynamic range of protein concentrations that can be measured. Modifications to classic protein concentration determination protocols are presented to provide a microvolume alternative to traditional cuvette-based methods.

Microvolume spectrophotometric and fluorometric determination of protein concentration.

M&#xE9;thodes de d&#xE9;termination de la concentration de prot&#xE9;ines qui utilisent des quantit&#xE9;s progressivement plus petites de mat&#xE9;riel sont continuellement en cours d&#x26;#39;&#xE9;laboration. Une nouvelle fa&#xE7;on de minimiser la quantit&#xE9; de l&#x26;#39;&#xE9;chantillon utilis&#xE9; pour l&#x26;#39;analyse spectroscopique offre plus de possibilit&#xE9;s pour un meilleur contr&#xF4;le de la qualit&#xE9;. Les m&#xE9;thodes traditionnelles de spectrophotom&#xE9;triques et fluorim&#xE9;trique pour la d&#xE9;termination des concentrations des prot&#xE9;ines sont depuis longtemps n&#xE9;cessaire de placer les &#xE9;chantillons dans des dispositifs de confinement tels que cuvettes ou des capillaires. Un syst&#xE8;me de r&#xE9;tention est micro&#xE9;chantillon changer ce paradigme en utilisant naturelles propri&#xE9;t&#xE9;s de tension superficielle pour capturer et retenir des &#xE9;chantillons microvolumes en place lors de la mesure, sans dispositifs de confinement traditionnels. L&#x26;#39;avantage d&#x26;#39;un tel syst&#xE8;me est de r&#xE9;duire consid&#xE9;rablement la quantit&#xE9; d&#x26;#39;&#xE9;chantillon n&#xE9;cessaire (1 &#xE0; 2 microl) tout en augmentant consid&#xE9;rablement la plage dynamique des concentrations des prot&#xE9;ines qui peuvent &#xEA;tre mesur&#xE9;s. Modifications apport&#xE9;es classiques protocoles de prot&#xE9;ines de concentration de d&#xE9;termination sont pr&#xE9;sent&#xE9;s afin de fournir une alternative aux traditionnels microvolume cuvette des m&#xE9;thodes bas&#xE9;es sur.

D&#xE9;termination spectrophotom&#xE9;trique et fluorim&#xE9;trique microvolume de la concentration prot&#xE9;ique

Methoden zur Bestimmung der Proteinkonzentration, mit denen schrittweise kleinere Mengen von Material werden st&auml;ndig entwickelt. Eine neue Art der Minimierung des Beispiels verwendet f&uuml;r spektroskopische Analyse verringert bietet mehr M&ouml;glichkeiten f&uuml;r gr&ouml;&szlig;ere Qualit&auml;tskontrolle. Traditionelle spektralphotometrische und fluorometrische Methoden zur Bestimmung der Protein-Konzentrationen haben lange ben&ouml;tigt, Proben in Eind&auml;mmung Ger&auml;te wie K&uuml;vetten oder Kapillaren platzieren. Einem Microsample-R&uuml;ckhaltesystem ist das Paradigma &auml;ndern, mithilfe von nat&uuml;rliche Oberfl&auml;chenspannung Eigenschaften erfassen und halten Microvolume Proben in Kraft w&auml;hrend der Messung ohne traditionelle Eind&auml;mmung Ger&auml;te. Der Vorteil eines solchen Systems ist drastisch reduzieren die Menge der Probe erforderlich (1-2 Microl) w&auml;hrend eine starke Erh&ouml;hung des dynamischen Bereichs der Protein-Konzentrationen, die gemessen werden kann. &Auml;nderungen an klassischen Protein-Konzentration-Bestimmung-Protokolle werden vorgestellt, um eine Microvolume alternative zu herk&ouml;mmlichen K&uuml;vette basierenden Methoden bereitzustellen.

Microvolume spektralphotometrischen und fluorometrische Bestimmung der Proteinkonzentration.

Metodi per la determinazione della concentrazione nella proteina che utilizzano progressivamente piccole quantit&agrave; di materiale sono continuamente in fase di sviluppo. Un nuovo modo di ridurre al minimo la quantit&agrave; di campione utilizzato per l&#39;analisi spettroscopica &egrave; fornire maggiori opportunit&agrave; per un maggiore controllo di qualit&agrave;. Tradizionali metodi spettrofotometrici e fluorometriche per la determinazione delle concentrazioni di proteina hanno a lungo necessaria immissione campioni in dispositivi di contenimento come le provette o capillari. Un sistema di ritenzione Microcampionamento sta cambiando quel paradigma utilizzando propriet&agrave; naturale tensione superficiale per catturare e tenere microvolume campioni in posizione durante la misurazione senza dispositivi di contenimento tradizionali. Il vantaggio di tale sistema &egrave; quello di ridurre drasticamente la quantit&agrave; di campione necessaria (1-2 microl) aumentando notevolmente la gamma dinamica delle concentrazioni di proteina che pu&ograve; essere misurata. Modifiche ai protocolli di determinazione di concentrazione di proteina classico sono presentate per fornire un microvolume alternativa ai tradizionali metodi basati su provetta.

Microvolume Determinazione spettrofotometrica e fluorometriche di concentrazione nella proteina.

&#x6750;&#x6599;&#x306E;&#x5F90;&#x3005;&#x306B;&#x5C11;&#x91CF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5206;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x91CF;&#x3092;&#x6700;&#x5C0F;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x54C1;&#x8CEA;&#x7BA1;&#x7406;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4F1D;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x8A08;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x9577;&#x3044;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3084;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D4;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5C01;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306B;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x7F6E;&#x304F;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x4FDD;&#x6301;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x5C01;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x306B;&#x5FAE;&#x91CF;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x81EA;&#x7136;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x5F35;&#x529B;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x3064;&#x3064;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x91CF;&#xFF08;1&#x301C;2 microl&#xFF09;&#x3092;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30E1;&#x200B;&#x200B;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x5FAE;&#x91CF;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5FAE;&#x91CF;&#x5438;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x5B9A;&#x91CF;

&#xC810;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC740; &#xC591;&#xC758; &#xC7AC;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBD84; &#xAD11; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xC591;&#xC744; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xB354; &#xD488;&#xC9C8; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xACB0;&#xC2EC;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; spectrophotometric &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xC640; fluorometric &#xC624;&#xB798; cuvettes &#xB610;&#xB294; &#xBAA8;&#xC138; &#xD608;&#xAD00; &#xB4F1;&#xC758; &#xACAC;&#xC81C; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBC30;&#xCE58; &#xC694;&#xAD6C; &#xD588;&#xB2E4;. Microsample &#xBCF4;&#xC874; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xCEA1;&#xCC98;&#xD558;&#xACE0; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xACAC;&#xC81C; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC5C6;&#xC774; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC7A5;&#xC18C;&#xC5D0; microvolume &#xC0D8;&#xD50C;&#xC744; &#xC7A1;&#xC544; &#xC790;&#xC5F0; &#xC2A4;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xD45C;&#xBA74; &#xC7A5;&#xB825; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xADF8; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC744; &#xBC14;&#xAFB8;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC7A5;&#xC810;&#xC740; &#xD06C;&#xAC8C; &#xCE21;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xBC94;&#xC704;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC694;&#xAD6C; (1 ~ 2 microl)&#xC758; &#xC591;&#xC744; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC904;&#xC77C;. &#xD074;&#xB798;&#xC2DD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4; &#xACB0;&#xC815; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xC218;&#xC815; microvolume &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xCCB4; &#xBA67; &#xAE30;&#xBC18; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xB418; &#xAC8C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; Microvolume spectrophotometric &#xBC0F; fluorometric &#xACB0;&#xC815;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los m&#xE9;todos para determinar la concentraci&#xF3;n de prote&#xED;nas que utilizan cantidades progresivamente m&#xE1;s peque&#xF1;as de material continuamente se desarrollan. Una nueva forma de minimizar la cantidad de muestra utilizada para el an&#xE1;lisis espectrosc&#xF3;pico est&#xE1; proporcionando m&#xE1;s oportunidades para el control de calidad superior. Los m&#xE9;todos tradicionales de espectrofotom&#xE9;tricos y fluorom&#xE9;trico para la determinaci&#xF3;n de las concentraciones de prote&#xED;na desde hace mucho tiempo se requiere la colocaci&#xF3;n de muestras en los dispositivos de contenci&#xF3;n tales como cubetas o capilares. Un sistema de retenci&#xF3;n micromuestra est&#xE1; cambiando ese paradigma mediante el uso de las propiedades naturales de la tensi&#xF3;n superficial para capturar y retener las muestras microvolumen en su lugar durante la medici&#xF3;n, sin dispositivos de contenci&#xF3;n tradicionales. La ventaja de este sistema es para reducir dr&#xE1;sticamente la cantidad de muestra necesaria (1 a 2 microlitros), mientras que aumentando enormemente el rango din&#xE1;mico de las concentraciones de prote&#xED;nas que pueden ser medidos. Modificaciones de los protocolos cl&#xE1;sicos de determinaci&#xF3;n de la concentraci&#xF3;n de prote&#xED;nas se presentan para ofrecer una alternativa a los tradicionales microvolumen cubeta de m&#xE9;todos basados &#x200B;&#x200B;en.

Microvolumen espectrofotom&#xE9;trica y fluorom&#xE9;trico Determinaci&#xF3;n de la concentraci&#xF3;n de prote&#xED;nas

&#x5438;&#x6536;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x5149;&#x8C31;&#x6CD5;&#x7684; DNA &#x548C; RNA &#x5B9A;&#x91CF;&#x51E0;&#x5341;&#x5E74;&#x6765;&#x4E00;&#x76F4;&#x5728;&#x751F;&#x547D;&#x79D1;&#x5B66;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x7ECF;&#x5178;&#x7684;&#x6838;&#x9178;&#x5B9A;&#x91CF;&#x65B9;&#x6CD5;&#x9700;&#x8981;&#x586B;&#x8865;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#x5982; cuvettes &#x548C;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x8840;&#x7BA1;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6837;&#x672C; (&#x4F20;&#x7EDF;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8BE6;&#x89C1;&#x9644;&#x5F55; 3D&#xFF09;&#x3002;Microvolume &#x6837;&#x54C1;&#x5206;&#x6790;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x968F;&#x7740;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x6280;&#x672F;&#x4EA7;&#x91CF;&#x9010;&#x6B65;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x5B64;&#x7ACB;&#x6837;&#x672C;&#x91CF;&#x53CA;&#x9700;&#x8981;&#x51C6;&#x786E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x6838;&#x9178;&#x6837;&#x54C1;&#x7684;&#x6700;&#x4F4E;&#x6D88;&#x8D39;&#x3002;&#x5149;&#x5B50;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x8FDB;&#x6B65;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5149;&#x7EA4;&#x6280;&#x672F;&#x7ED3;&#x5408;&#x56FA;&#x6709;&#x7269;&#x7406;&#x6027;&#x8D28;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#xFF0C;&#x663E;&#x8457;&#x964D;&#x4F4E;&#x4E86;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5377;&#xFF0C;&#x5220;&#x9664; cuvettes &#x548C;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x8840;&#x7BA1;&#x7684;&#x9700;&#x8981;&#x5F00;&#x62D3;&#x7684; microvolume &#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x4EE5;&#x6765;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x9879; microvolume &#x6587;&#x4E66;&#x4ECB;&#x7ECD;&#xFF0C;&#x51E0;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x73B0;&#x53EF;&#x63D0;&#x4F9B;&#x673A;&#x4F1A;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x6838;&#x9178;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x6750;&#x6599;&#x8F83;&#x5C11;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x603B;&#x5171;&#x6709;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x964D;&#x4F4E;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5377; &#xFF08;&#x4E3A; 0.5 &#x81F3; 2 &micro; l)&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x5F80;&#x5F80;&#x4E5F;&#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x7387; time-wise &#x6BD4;&#x4F20;&#x7EDF;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x7528;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x6837;&#x672C;&#x5145;&#x6C9B;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x5355;&#x4F4D;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6700;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x63A5;&#x53D7;&#x7684; microvolume &#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5C06;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5B9E;&#x9645;&#x66FF;&#x4EE3;&#x4F20;&#x7EDF;&#x6838;&#x9178;&#x5B9A;&#x91CF;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Microvolume &#x6838;&#x9178;&#x5B9A;&#x91CF;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;

Quantitation of DNA and RNA by absorbance and fluorescence spectroscopy has been a powerful tool in life sciences for decades. Classic methods of nucleic acid quantitation require the filling of devices, such as cuvettes and capillaries, with sample (traditional methodologies are described in APPENDIX 3D). Analysis of microvolume samples has become of paramount importance as more molecular biology techniques yield progressively smaller amounts of isolated sample and require accurate quantitation of nucleic acids with minimal consumption of sample. Advances in photonic technologies have resulted in a pioneering microvolume system that combines fiber optic technology with the inherent physical properties of the sample to dramatically reduce measurement volumes, removing the need for cuvettes and capillaries. Since the introduction of the first microvolume instrument, several new designs are now available, providing opportunities to measure nucleic acids using much smaller amounts of material. Altogether, these systems not only reduce measurement volume (as little as 0.5 to 2 Âµl), but also tend to be more efficient time-wise than traditional methods, making them useful even when sample is plentiful. The protocols in this unit are based on the most widely accepted microvolume systems and are intended as practical alternatives to traditional nucleic acid quantitation methodology.

Microvolume quantitation of nucleic acids.

La quantification de l&#x26;#39;ADN et l&#x26;#39;ARN par absorption et spectroscopie de fluorescence a &#xE9;t&#xE9; un outil puissant dans les sciences de la vie pendant des d&#xE9;cennies. Les m&#xE9;thodes classiques de quantification d&#x26;#39;acides nucl&#xE9;iques n&#xE9;cessitent le remplissage des appareils, tels que cuvettes et capillaires, avec l&#x26;#39;&#xE9;chantillon (les m&#xE9;thodes traditionnelles sont d&#xE9;crites &#xE0; l&#x26;#39;annexe 3D). L&#x26;#39;analyse des &#xE9;chantillons microvolumes est devenu d&#x26;#39;une importance primordiale en tant que techniques de biologie mol&#xE9;culaire plus fournir des quantit&#xE9;s progressivement plus petites de l&#x26;#39;&#xE9;chantillon isol&#xE9; et n&#xE9;cessitent une quantification pr&#xE9;cise des acides nucl&#xE9;iques avec une consommation minimale de l&#x26;#39;&#xE9;chantillon. Les progr&#xE8;s des technologies photoniques ont abouti &#xE0; un syst&#xE8;me pionnier microvolume qui combine la technologie des fibres optiques avec des propri&#xE9;t&#xE9;s inh&#xE9;rentes physiques de l&#x26;#39;&#xE9;chantillon pour r&#xE9;duire consid&#xE9;rablement les volumes de mesure, en supprimant la n&#xE9;cessit&#xE9; pour les cuvettes et les capillaires. Depuis l&#x26;#39;introduction du premier instrument microvolume, plusieurs nouveaux mod&#xE8;les sont maintenant disponibles, offrant des possibilit&#xE9;s de mesurer les acides nucl&#xE9;iques en utilisant des quantit&#xE9;s beaucoup plus faibles de mat&#xE9;riel. Au total, ces syst&#xE8;mes non seulement de r&#xE9;duire le volume de mesure (aussi peu que 0,5 &#xE0; 2 pi), mais ont aussi tendance &#xE0; &#xEA;tre plus efficace du temps sage que les m&#xE9;thodes traditionnelles, ce qui les rend utile m&#xEA;me lorsque l&#x26;#39;&#xE9;chantillon est abondante. Les protocoles de cette unit&#xE9; sont bas&#xE9;es sur les syst&#xE8;mes de microvolumes les plus largement accept&#xE9;es et sont con&#xE7;us comme des solutions de rechange concr&#xE8;tes aux m&#xE9;thode traditionnelle d&#x26;#39;acide nucl&#xE9;ique quantification.

La quantification des acides nucl&#xE9;iques microvolume

Quantitative Bestimmung von DNA und RNA durch Absorption und Fluoreszenz-Spektroskopie ist seit Jahrzehnten ein m&auml;chtiges Werkzeug in den Biowissenschaften. Klassische Methoden der Nukleins&auml;ure-Quantisierung erfordern die F&uuml;llung der Ger&auml;te wie K&uuml;vetten oder Kapillaren, mit Beispiel (traditionelle Methoden sind in Anlage 3D beschrieben). Analyse von Microvolume Proben ist von h&ouml;chster Bedeutung geworden, weitere molekularbiologische Techniken schrittweise kleinere Mengen von isolierten Beispiel Ausbeute und erfordern genaue Quantifizierung von Nukleins&auml;uren mit minimaler Verbrauch der Probe. Fortschritte in der Photonische Technologien f&uuml;hrten eine bahnbrechende Microvolume-System, die Glasfasertechnik mit der innewohnenden physikalischen Eigenschaften der Probe Messung B&auml;nde kombiniert, wodurch die Notwendigkeit f&uuml;r K&uuml;vetten und Kapillaren drastisch zu reduzieren. Seit der Einf&uuml;hrung des ersten Microvolume Instruments stehen mehrere neue Designs nun, M&ouml;glichkeiten, Nukleins&auml;uren, die mit viel kleinere Mengen von Material zu messen. Insgesamt, die diese Systeme nicht nur reduzieren Messvolumen (weniger als 0,5 bis 2 &micro;l) an, sondern tendenziell auch effizienter sein als die herk&ouml;mmlichen Methoden, wodurch sie n&uuml;tzlich, auch wenn Beispiel reichlich ist zeitlich. Die Protokolle in dieser Einheit basieren auf der am meisten akzeptierte Microvolume-Systeme und dienen als praktische Alternative zu traditionellen Nukleins&auml;ure-Quantisierung Methodik.

Microvolume Quantifizierung von Nukleins&auml;uren.

La quantificazione di DNA e RNA mediante spettroscopia di assorbimento e fluorescenza &egrave; stato un potente strumento nelle scienze della vita per decenni. Metodi classici di quantificazione degli acidi nucleici richiedono il riempimento di dispositivi, quali le provette e i capillari, con campione (metodologie tradizionali sono descritti in appendice 3D). Analisi di campioni di microvolume sono diventato di fondamentale importanza come tecniche di biologia molecolare pi&ugrave; resa progressivamente piccole quantit&agrave; di campione isolato e richiedono accurata quantificazione degli acidi nucleici con un consumo minimo di campione. Progressi nelle tecnologie fotoniche hanno provocato un pionieristico sistema di microvolume che combina la tecnologia in fibra ottica con le propriet&agrave; fisiche intrinseche del campione per ridurre drasticamente i volumi di misura, eliminando la necessit&agrave; di cuvette e capillari. Poich&eacute; l&#39;introduzione del primo strumento di microvolume, diversi nuovi disegni sono ora disponibili, fornendo opportunit&agrave; per misurare gli acidi nucleici, utilizzando molto piccole quantit&agrave; di materiale. Complessivamente, questi sistemi non solo riducono il volume di misura (appena da 0,5 a 2 &micro; l), ma tendono anche ad essere momentaneamente pi&ugrave; efficiente rispetto ai metodi tradizionali, che li rende utili anche quando il campione &egrave; abbondante. I protocolli in questa unit&agrave; sono basati sui sistemi di microvolume pi&ugrave; ampiamente accettati e sono intesi come pratiche alternative alla metodologia di quantificazione dell&#39;acido nucleico tradizionale.

Microvolume quantificazione degli acidi nucleici.

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&#x6838;&#x9178;&#x306E;&#x5FAE;&#x91CF;&#x5B9A;&#x91CF;

DNA&#xC640; RNA&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xD761; &#xAD11;&#xB3C4; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218;&#xC2ED; &#xB144; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0DD;&#xBA85;&#xACFC;&#xD559;&#xC5D0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD575; &#xC0B0; &#xC815;&#xB7C9;&#xC758; &#xACE0;&#xC804;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95; &#xD544;&#xC694; &#xC7A5;&#xCE58; cuvettes &#xC0D8;&#xD50C; &#xBAA8;&#xC138; &#xD608;&#xAD00; &#xB4F1;&#xC758; &#xC791;&#xC131; (&#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860; &#xBD80;&#xB85D; 3 &#xCC28;&#xC6D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85;). &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xBD84;&#xC790; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xAE30;&#xBC95; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC810;&#xCC28;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC740; &#xC591;&#xC758; &#xD56D;&#xBCF5; &#xD558; &#xACE0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xC18C;&#xBE44;&#xC640; &#xD575; &#xC0B0;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; microvolume &#xC0D8;&#xD50C; &#xD30C;&#xB77C;&#xB9C8;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC758; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xAD11;&#xD559;&#xC801; &#xAE30;&#xC220; &#xBC1C;&#xC804;&#xC744; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; cuvettes&#xACFC; &#xBAA8;&#xC138; &#xD608;&#xAD00;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xB294; &#xCE21;&#xC815; &#xBCFC;&#xB968;&#xC744; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC758; &#xACE0;&#xC720;&#xC758; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131; &#xAD11;&#xC12C;&#xC720; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xC120;&#xAD6C;&#xC801;&#xC778; microvolume &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; microvolume &#xC545;&#xAE30;&#xC758; &#xB3C4;&#xC785; &#xC774;&#xD6C4; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC740; &#xC774;&#xC81C; &#xD6E8;&#xC52C; &#xC791;&#xC740; &#xC591;&#xC758; &#xC7AC;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD575; &#xC0B0;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xC608; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xCE21;&#xC815; &#xBCFC;&#xB968; (&#xC791;&#xC740; 0.5 ~ 2 &mu;) &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xAC00;&#xAE5D;&#xAE30; &#xC0D8;&#xD50C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558; &#xAC8C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB420; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; microvolume &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC548; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xD575; &#xC0B0; &#xC815;&#xB7C9; &#xBC29;&#xBC95;&#xB860;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Microvolume &#xC815;&#xB7C9; &#xD575; &#xC0B0;&#xC758;.

La cuantificaci&#xF3;n de ADN y ARN mediante la absorci&#xF3;n y la espectroscopia de fluorescencia ha sido una herramienta poderosa en ciencias de la vida durante d&#xE9;cadas. Los m&#xE9;todos cl&#xE1;sicos de cuantificaci&#xF3;n de &#xE1;cidos nucleicos requieren el relleno de los dispositivos, tales como cubetas y los capilares, con la muestra (metodolog&#xED;as tradicionales se describe en el Ap&#xE9;ndice 3D). An&#xE1;lisis de muestras microvolumen se ha convertido de vital importancia como t&#xE9;cnicas de biolog&#xED;a molecular m&#xE1;s producir cantidades progresivamente m&#xE1;s peque&#xF1;as de muestra aislada y requieren cuantificaci&#xF3;n precisa de los &#xE1;cidos nucleicos con un consumo m&#xED;nimo de muestra. Los avances en tecnolog&#xED;as fot&#xF3;nicas han dado lugar a un sistema pionero de microvolumen que combina la tecnolog&#xED;a de fibra &#xF3;ptica con las propiedades f&#xED;sicas inherentes de la muestra para reducir dr&#xE1;sticamente los vol&#xFA;menes de medici&#xF3;n, eliminando la necesidad de cubetas y vasos capilares. Desde la introducci&#xF3;n del primer instrumento microvolumen, varios nuevos dise&#xF1;os ya est&#xE1;n disponibles, proporcionando oportunidades para medir los &#xE1;cidos nucleicos utilizando cantidades mucho m&#xE1;s peque&#xF1;as de material. En conjunto, estos sistemas no s&#xF3;lo reducir el volumen de medici&#xF3;n (tan poco como 0,5 a 2 l), pero tambi&#xE9;n tienden a ser m&#xE1;s eficiente en cuanto a tiempo que los m&#xE9;todos tradicionales, haci&#xE9;ndolos &#xFA;tiles incluso cuando la muestra es abundante. Los protocolos de esta unidad se basan en la m&#xE1;s ampliamente aceptada sistemas microvolumen y est&#xE1;n destinados como alternativas pr&#xE1;cticas al tradicional metodolog&#xED;a nucleico cuantificaci&#xF3;n &#xE1;cido.

Philippe Desjardins

Wilmington,
Delaware,
Wilmington, Delaware

Thermo Scientific NanoDrop Products

Microvolume Protein Concentration Determination using the NanoDrop 2000c Spectrophotometer

NanoDrop Microvolume Quantitation of Nucleic Acids

Philippe Desjardins

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Wilmington,Delaware,Wilmington, Delaware

Thermo Scientific NanoDrop Products

Microvolume Protein Concentration Determination using the NanoDrop 2000c Spectrophotometer

NanoDrop Microvolume Quantitation of Nucleic Acids

Wilmington,
Delaware,
Wilmington, Delaware