paired-whole-cell-recordings-in-organotypic-hippocampal-slices

Paired Whole Cell Recordings in Organotypic Hippocampal Slices

Pair recordings involve simultaneous whole cell patch clamp recordings from two synaptically connected neurons, enabling not only direct ...

Stanford University

Recent studies have revealed the presence of postnatal stem cells in tissues of dental origin. Our objective was to establish a standardized in vitro model system to investigate periodontal regenerative procedures for potential clinical application. We aimed to prepare primary cell cultures from human periodontal ligament and to identify clonogenic progenitor cells. After scraping PDL tissue from extracted wisdom teeth, the extracellular matrix was enzymatically degraded to obtain isolated cells for culturing. The effect of FCS and Emdogain on cell viability of the cultures was estimated by MTT-assay. Cell populations expressing STRO-1 mesenchymal, c-kit embryonic and CD34 hematopoietic stem cell markers were identified by FACS-analysis. We successfully established primary cell cultures from the human PDL. The proliferation rate of the cultures was enhanced by the supplementation of the culture medium by serum or Emdogain. The PDL cultures contained cells capable of colony-formation, as well as cells with STRO-1, c-kit and CD-34 expression. The primary cultures were maintained through multiple passages. These findings present a novel opportunity to further investigate the differentiation and proliferation of PDL derived cells potentially capable of periodontal regeneration.

[Isolation, cultivation and characterisation of stem cells in human periodontal ligament].

The plasticity of dental pulp stem cells (DPSCs) has been demonstrated by several studies showing that they appear to self-maintain through several passages, giving rise to a variety of cells. The aim of the present study was to differentiate DPSCs to mature neuronal cells showing functional evidence of voltage gated ion channel activities in vitro. First, DPSC cultures were seeded on poly-l-lysine coated surfaces and pretreated for 48h with a medium containing basic fibroblast growth factor and the demethylating agent 5-azacytidine. Then neural induction was performed by the simultaneous activation of protein kinase C and the cyclic adenosine monophosphate pathway. Finally, maturation of the induced cells was achieved by continuous treatment with neurotrophin-3, dibutyryl cyclic AMP, and other supplementary components. Non-induced DPSCs already expressed vimentin, nestin, N-tubulin, neurogenin-2 and neurofilament-M. The inductive treatment resulted in decreased vimentin, nestin, N-tubulin and increased neurogenin-2, neuron-specific enolase, neurofilament-M and glial fibrillary acidic protein expression. By the end of the maturation period, all investigated genes were expressed at higher levels than in undifferentiated controls except vimentin and nestin. Patch clamp analysis revealed the functional activity of both voltage-dependent sodium and potassium channels in the differentiated cells. Our results demonstrate that although most surviving cells show neuronal morphology and express neuronal markers, there is a functional heterogeneity among the differentiated cells obtained by the in vitro differentiation protocol described herein. Nevertheless, this study clearly indicates that the dental pulp contains a cell population that is capable of neural commitment by our three step neuroinductive protocol.

Simultaneous PKC and cAMP activation induces differentiation of human dental pulp stem cells into functionally active neurons.

Evidence has been accumulating for the presence of stem cells in dental tissues. The authors' studies aimed to produce primary culture from human dental pulp. Furthermore, they wanted to identify clonogenic cells with progenitor properties in these cultures, and to characterize their proliferative capacity. The dental pulp was isolated from surgically removed wisdom teeth. The extracellular matrix was enzymatically degraded to obtain isolated cells for culturing. Identification of STRO-1 mesenchymal stem cell marker was achieved by immunocytochemistry. Osteogenic differentiation was detected by the application of Alizarin Red. The proliferative activity of the cell cultures in response to serum, EGF and BMP2 was estimated by MTT assay. The authors' most important finding is the successful establishment of stable primary cell culture from human dental pulp tissue. The cultures can be passaged multiple times and they contain clonogenic, STRO-1 immunopositive cells. Their mineralization capacity was shown by mineralized deposits as a result of induction by suitable medium. The presence of serum increased, while both EGF and BMP2 concentration-dependently decreased the cell proliferation in the cultures. The authors' model provides the foundation for studies of the proliferation and differentiation of dental pulp cells at molecular level, and opens a new direction towards the biological regeneration of dental tissues.

[Isolating, culturing and characterizing stem cells of human dental pulp origin].

The absorption of water and ions (especially Na(+) and Cl(-)) is an important function of colonic epithelial cells in both physiological and pathophysiological conditions. Despite the comprehensive animal studies, there are only scarce available data on the ion transporter activities of the normal and inflamed human colon.

New therapeutic targets in ulcerative colitis: the importance of ion transporters in the human colon.

&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5D74;&#x6E0A;&#x6E90;&#x4F7F;&#x7259;&#x9AD3;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (DPSCs) &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66FF;&#x6362;&#x5438;&#x5F15;&#x6350;&#x52A9;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x9886;&#x57DF;&#x7684;&#x6700;&#x8FD1;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x9F13;&#x821E;&#x7684;&#x6210;&#x679C;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x79FB;&#x690D; DPSC &#x6D3E;&#x751F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; pecursors &#x878D;&#x5165;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FD9;&#x4E00;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;neuronally &#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x7684; DPSCs&#xFF0C;&#x6807;&#x6709; Vybrant &#x6CA1;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC6;&#x80DE;&#x67D3;&#x6599;&#x5F15;&#x8FDB;&#x4E86;&#x4EA7;&#x540E;&#x5927;&#x9F20;&#x8111;&#x3002;DPSCs &#x88AB;&#x79FB;&#x690D;&#x5230; 3 &#x65E5;&#x9F84;&#x96C4;&#x6027;&#x5927;&#x9F20;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x3002;&#x76AE;&#x8D28;&#x75C5;&#x53D8;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x524D;&#x80A2;&#x8FD0;&#x52A8;&#x76AE;&#x5C42;&#x4E0A;&#x89E6;&#x6478;&#x5230;&#x9885;&#x9AA8;&#x7684;&#x51B7; (-60 &deg; C) &#x91D1;&#x5C5E;&#x90AE;&#x7968;&#x3002;&#x56DB;&#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x540E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6807;&#x8BB0;&#x7269;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x79FB;&#x690D;&#x3001; &#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0; DPSCs &#x7684;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x7279;&#x6027;&#xFF0C;&#x7F16;&#x5199;&#x4E86; 300 &#x5FAE;&#x7C73;&#x539A;&#x6C34;&#x5E73;&#x8111;&#x5207;&#x7247;&#x5E76;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5939;&#x7D27;&#x6240;&#x5F55;&#x5F97;&#x7684;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x94A0;&#x548C;&#x94BE;&#x901A;&#x9053;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x6350;&#x52A9; DPSCs &#x6CE8;&#x5165;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;&#x65B0;&#x751F;&#x5927;&#x9F20;&#x6210;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x533A;&#x57DF;&#x8FC1;&#x79FB;&#x4E3A;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x5728;&#x5927;&#x8111;&#x7684;&#x8111;&#x5BA4;&#x4E0B;&#x533A; &#xFF08;SVZ)&#x3001; &#x9897;&#x7C92;&#x533A; &#xFF08;SGZ) &#x548C; subcallosal &#x533A; (SCZ) &#x533A;&#x6B63;&#x5E38;&#x795E;&#x7ECF;&#x524D;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x79FB;&#x690D;&#x7684; DPSCs &#x8868;&#x793A; N-&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6807;&#x8BB0;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4E1D;&#x86CB;&#x767D; NF-M&#x3001; postmitotic &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6807;&#x8BB0;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6838;&#x5FC3;&#x6297;&#x539F;&#x548C;&#x80F6;&#x8D28;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x9178;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x793A;&#x6CB3;&#x8C5A;&#x6BD2;&#x7D20;&#x654F;&#x611F;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56; &#xFF08;VD&#xFF09; &#x94A0;&#x7535;&#x6D41; &#xFF08;I(Na)) &#x548C;&#x8336;&#x654F;&#x611F;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x6574;&#x6D41;&#x94BE;&#x7535;&#x6D41; (K(DR))&#x3002;&#x5DF4;&#x80FA;&#x76AE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E86;&#x635F;&#x4F24;&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x540E;&#x56DB;&#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x3002;&#x5728;&#x8367;&#x5149;&#x53D7;&#x4F24;&#x7684;&#x8111;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x76AE;&#x8D28;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x5730;&#x533A;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684; DPSCs &#x4E2D;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7279;&#x6807;&#x8BB0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;&#x6CB3;&#x8C5A;&#x6BD2;&#x7D20;&#x654F;&#x611F; VD &#x94A0;&#x7535;&#x6D41;&#x548C;&#x8336;&#x654F;&#x611F; K(DR) &#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x6807;&#x6709; cortically &#x53D7;&#x5BB3;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x79FB;&#x690D;&#x7684; DPSC &#x7EC6;&#x80DE;&#x878D;&#x5165;&#x4E1C;&#x9053;&#x56FD;&#x8111;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x8868;&#x793A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x8FD8;&#x901A;&#x8FC7;&#x5C55;&#x793A;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x94A0;&#x548C;&#x94BE;&#x901A;&#x9053;&#x663E;&#x793A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x8BC1;&#x660E;&#x7684;&#x6982;&#x5FF5;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; predifferentiated hDPSCs &#x53EF;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C; gliogenesis &#x6765;&#x6E90;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x5927;&#x8111;&#x53D7;&#x4F24;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x3002;

Neuronally &#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x4EBA;&#x7259;&#x9AD3;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EB3;&#x5165;&#x5927;&#x9F20;&#x8111;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;

Pluripotency and their neural crest origin make dental pulp stem cells (DPSCs) an attractive donor source for neuronal cell replacement. Despite recent encouraging results in this field, little is known about the integration of transplanted DPSC derived neuronal pecursors into the central nervous system. To address this issue, neuronally predifferentiated DPSCs, labeled with a vital cell dye Vybrant DiD were introduced into postnatal rat brain. DPSCs were transplanted into the cerebrospinal fluid of 3-day-old male Wistar rats. Cortical lesion was induced by touching a cold (-60Â°C) metal stamp to the calvaria over the forelimb motor cortex. Four weeks later cell localization was detected by fluorescent microscopy and neuronal cell markers were studied by immunohistochemistry. To investigate electrophysiological properties of engrafted, fluorescently labeled DPSCs, 300 Î¼m-thick horizontal brain slices were prepared and the presence of voltage-dependent sodium and potassium channels were recorded by patch clamping. Predifferentiated donor DPSCs injected into the cerebrospinal fluid of newborn rats migrated as single cells into a variety of brain regions. Most of the cells were localized in the normal neural progenitor zones of the brain, the subventricular zone (SVZ), subgranular zone (SGZ) and subcallosal zone (SCZ). Immunohistochemical analysis revealed that transplanted DPSCs expressed the early neuronal marker N-tubulin, the neuronal specific intermediate filament protein NF-M, the postmitotic neuronal marker NeuN, and glial GFAP. Moreover, the cells displayed TTX sensitive voltage dependent (VD) sodium currents (I(Na)) and TEA sensitive delayed rectifier potassium currents (K(DR)). Four weeks after injury, fluorescently labeled cells were detected in the lesioned cortex. Neurospecific marker expression was increased in DPSCs found in the area of the cortical lesions compared to that in fluorescent cells of uninjured brain. TTX sensitive VD sodium currents and TEA sensitive K(DR) significantly increased in labeled cells of the cortically injured area. In conclusion, our data demonstrate that engrafted DPSC-derived cells integrate into the host brain and show neuronal properties not only by expressing neuron-specific markers but also by exhibiting voltage dependent sodium and potassium channels. This proof of concept study reveals that predifferentiated hDPSCs may serve as useful sources of neuro- and gliogenesis in vivo, especially when the brain is injured.

Integration of neuronally predifferentiated human dental pulp stem cells into rat brain in vivo.

Pluripotence et leur origine de la cr&#xEA;te neurale faire des cellules souches dentaires de p&#xE2;te &#xE0; papier (DPSC) une source attrayante des bailleurs de fonds pour le remplacement des cellules neuronales. Malgr&#xE9; les r&#xE9;cents r&#xE9;sultats encourageants dans ce domaine, on sait peu sur l&#x26;#39;int&#xE9;gration des DPSC transplant&#xE9; provient pecursors neuronales dans le syst&#xE8;me nerveux central. Pour r&#xE9;soudre ce probl&#xE8;me, DPSC neuronale predifferentiated, marqu&#xE9; avec un colorant Vybrant cellule vitale DiD ont &#xE9;t&#xE9; introduites dans le cerveau de rat postnatal. DPSC ont &#xE9;t&#xE9; transplant&#xE9;s dans le liquide c&#xE9;phalo-rachidien de 3 jours d&#x26;#39;&#xE2;ge des rats m&#xE2;les Wistar. L&#xE9;sion corticale a &#xE9;t&#xE9; induite en touchant un froid (-60 &#xB0; C) timbre de m&#xE9;tal &#xE0; la calvaria sur le cortex moteur des membres ant&#xE9;rieurs. Quatre semaines plus tard localisation cellulaire a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;e par microscopie &#xE0; fluorescence et des marqueurs de cellules neuronales ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;s par immunohistochimie. Pour &#xE9;tudier les propri&#xE9;t&#xE9;s &#xE9;lectrophysiologiques de implant&#xE9;e, DPSC marqu&#xE9;s par fluorescence, 300 um d&#x26;#39;&#xE9;paisseur des tranches de cerveau horizontales ont &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;par&#xE9;s et la pr&#xE9;sence de voltage-d&#xE9;pendants canaux sodiques et potassiques ont &#xE9;t&#xE9; enregistr&#xE9;s par patch-clamp. DPSC donateurs Predifferentiated inject&#xE9; dans le liquide c&#xE9;phalo-rachidien de rats nouveau-n&#xE9;s ont migr&#xE9; comme des cellules individuelles dans une vari&#xE9;t&#xE9; de r&#xE9;gions du cerveau. La plupart des cellules ont &#xE9;t&#xE9; localis&#xE9;s dans les zones normales prog&#xE9;nitrices neurales du cerveau, la zone sous-ventriculaire (ZSV), zone subgranulaire (SGZ) et subcallosal zone (SCZ). L&#x26;#39;analyse immunohistochimique a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que DPSC transplant&#xE9;s exprim&#xE9; le marqueur pr&#xE9;coce neuronale N-tubuline, le neuronale sp&#xE9;cifique filament interm&#xE9;diaire prot&#xE9;ine NF-M, le marqueur de NeuN postmitotiques neuronale, gliale et de la GFAP. En outre, les cellules sensibles affich&#xE9; TTX d&#xE9;pendant de la tension des courants de sodium (VD) (I (Na)) et le th&#xE9; sensibles retard&#xE9; courants potassiques (K redresseurs (DR)). Quatre semaines apr&#xE8;s la l&#xE9;sion, les cellules marqu&#xE9;es par fluorescence ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s dans le cortex l&#xE9;s&#xE9;. L&#x26;#39;expression du marqueur neurosp&#xE9;cifique a &#xE9;t&#xE9; augment&#xE9; en DPSC trouv&#xE9;s dans la zone des l&#xE9;sions corticales par rapport &#xE0; celle de cellules fluorescentes du cerveau indemne. TTX sensibles courants sodiques VD et TEA sensibles K (DR) a significativement augment&#xE9; dans les cellules marqu&#xE9;es de la zone corticale bless&#xE9;s. En conclusion, nos donn&#xE9;es montrent que greff&#xE9;es DPSC des cellules d&#xE9;riv&#xE9;es de s&#x26;#39;int&#xE9;grer dans le cerveau h&#xF4;te et pr&#xE9;sentent des propri&#xE9;t&#xE9;s neuronales non seulement en exprimant des marqueurs sp&#xE9;cifiques des neurones, mais aussi en montrant la tension d&#xE9;pendant du sodium et de canaux potassiques. Cette preuve de concept de l&#x26;#39;&#xE9;tude r&#xE9;v&#xE8;le que hDPSCs predifferentiated peut servir de sources utiles de la neuro-et gliog&#xE9;n&#xE8;se in vivo, en particulier lorsque le cerveau est bless&#xE9;.

Int&#xE9;gration de l&#x26;#39;homme neuronale Predifferentiated cellules souches dentaires de p&#xE2;te &#xE0; papier dans le cerveau de rat in vivo

Pluripotenz und ihrer Herkunft der Neuralleiste machen dental Zellstoff-Stammzellen (DPSCs) eine attraktive Spender-Quelle f&uuml;r neuronale Zelle Ersatz. Trotz der j&uuml;ngsten ermutigende Ergebnisse auf diesem Gebiet ist wenig bekannt &uuml;ber die Integration von transplantierten DPSC abgeleitet neuronale Pecursors in das zentrale Nervensystem. Um dieses Problem zu beheben, wurden neuronally predifferentiated DPSCs, beschriftet mit einem vital Zelle Farbstoff Vybrant Tat postnatale Rattenhirn eingef&uuml;hrt. DPSCs wurden in die cerebrospinale Fl&uuml;ssigkeit von 3 Tage alten m&auml;nnlichen Wistar-Ratten verpflanzt. Kortikale L&auml;sion wurde ausgel&ouml;st durch ber&uuml;hren ein kalten (-60 &deg; C) aus Metall versehen, die Sch&auml;delknochen &uuml;ber das Vorderbein motorischen Kortex. Vier Wochen sp&auml;ter Zelle Lokalisierung wurde festgestellt durch Fluoreszenz-Mikroskopie und neuronale Zelle Marker wurden durch Immunhistochemie untersucht. Um elektrophysiologische Eigenschaften des engrafted, Leuchtstoff beschriftetem DPSCs zu untersuchen, wurden 300 &mu;m dicke horizontale Gehirn Scheiben vorbereitet und das Vorhandensein von Spannung-abh&auml;ngigen Natrium und Kalium-Kan&auml;le wurden aufgenommen von Patch zu spannen. Predifferentiated Spender DPSCs in der Zerebrospinalfl&uuml;ssigkeit von Neugeborenen Ratten injiziert, die als einzelne Zellen in verschiedene Hirnregionen migriert werden. Die meisten Zellen wurden in den normalen neuronalen Vorl&auml;uferzellen Zonen des Gehirns, die subventrikul&auml;re Zone (SVZ), subgranular Zone (SGZ) und Subcallosal Zone (SCZ) lokalisiert. Immunohistochemical Analyse ergab, dass die transplantierten DPSCs der fr&uuml;hen neuronalen Marker N-Tubulin, das neuronale spezifische Heizfadens Protein NF-M, postmitotischen neuronale Markierung NeuN und Gliazellen GLIAL ausgedr&uuml;ckt. Dar&uuml;ber hinaus die Zellen angezeigt TTX sensible Spannung abh&auml;ngige (VD) Natrium Str&ouml;mungen (I(Na)) und Tee sensible verz&ouml;gerten Gleichrichter Kalium Str&ouml;me (K(DR)). Vier Wochen nach Verletzung, fluorescently beschriftete Zellen wurden bei den lesioned Cortex festgestellt. Neurospecific Markierung Ausdruck wurde in DPSCs im Bereich der kortikalen L&auml;sionen im Vergleich zu Leuchtstofflampen Zellen des Gehirns unverletzt gefunden erh&ouml;ht. TTX sensible VD Natrium Str&ouml;mungen und Tee sensible K(DR) deutlich erh&ouml;ht beschriftet Zellen des Bereichs cortically verletzten. Abschlie&szlig;end zeigen unsere Daten, dass engrafted DPSC gewonnenen Zellen integrieren Sie in das Host-Gehirn und neuronale Eigenschaften zeigen, nicht nur zum Ausdruck bringen Neuron-spezifische Marker, sondern auch um die Darstellungen der Spannung-abh&auml;ngigen Natrium und Kalium-Kan&auml;le. Dieser Nachweis der Konzept-Studie zeigt, die hDPSCs predifferentiated kann als n&uuml;tzliche Quellen f&uuml;r Neuro- und Gliogenesis in vivo dienen vor allem, wenn das Gehirn verletzt ist.

Integration von neuronally predifferentiated menschlichen dental Zellstoff-Stammzellen in Rattenhirn in-vivo.

Pluripotenza e la loro origine cresta neurale fanno cellule staminali polpa dentale (DPSCs) una fonte attraente donatore per la sostituzione delle cellule neuronali. Nonostante i recenti risultati incoraggianti in questo campo, poco si sa circa l&#39;integrazione del trapiantato DPSC derivato pecursors neuronale nel sistema nervoso centrale. Per risolvere questo problema, DPSCs neuronally predifferentiated, marcato con un colorante vitale delle cellule Vybrant ha fatto sono state introdotte nel cervello del ratto postnatale. DPSCs sono stati trapiantati nel fluido cerebrospinale di ratti Wistar maschi 3-giorno-vecchio. Lesione corticale &egrave; stata indotta da toccare un timbro di metallo freddo (-60 &deg; C) per la calvaria sopra la corteccia motoria degli arti anteriori. Quattro settimane pi&ugrave; tardi localizzazione cellulare &egrave; stato rilevato da microscopia di fluorescenza e marcatori di cellule neuronali sono stati studiati da immunohistochemistry. Per indagare sulle propriet&agrave; elettrofisiologiche di DPSCs engrafted, fluorescente contrassegnati, 300 fette di cervello orizzontale &mu;m di spessore sono stati preparati e la presenza dei canali di sodio e potassio voltaggio-dipendenti sono stati registrati da patch di serraggio. Donatore predifferentiated DPSCs iniettato nel fluido cerebrospinale dei ratti neonati migrati come le singole cellule in una variet&agrave; di regioni del cervello. La maggior parte delle cellule erano localizzata nelle zone normali progenitrici neurali del cervello, la zona subventricolare (SVZ), SGZ (SGZ) e zona subcallosal (SCZ). L&#39;analisi di immunohistochemical ha rivelato che trapiantati DPSCs espresso il primo marker neuronale N-tubulina, la proteina dei filamenti intermedi specifici neuronale NF-M, il marker neuronale postmitotic NeuN e gliale GFAP. Inoltre, le cellule visualizzato correnti TTX sensibile tensione dipendente (VD) sodio (t&egrave; e I(Na)) sensibili ritardato raddrizzatore potassio correnti (K(DR)). Quattro settimane dopo l&#39;infortunio, fluorescente etichettato le cellule sono state rilevate nella corteccia elettivamente. Neurospecific espressione marcatore &egrave; stato aumentato in DPSCs trovato nella zona delle lesioni corticali rispetto a quello in cellule di cervello illeso. TTX sensibili VD sodio correnti e t&egrave; K(DR) sensibile significativamente aumentato etichettato le cellule della zona lesa nella corteccia. In conclusione, i nostri dati dimostrano che cellule derivate da DPSC engrafted integrano il cervello di host e mostrano Propriet&agrave; neuronali non solo esprimendo marcatori specifici del neurone, ma anche esibendo dipendenti canali sodio e potassio voltaggio. Questa prova di rivela studio di concetto che predifferentiated hDPSCs pu&ograve; servire come utili fonti di neuro - e gliogenesis in vivo, soprattutto quando il cervello &egrave; ferito.

Integrazione del neuronally predifferentiated polpa dentale umana le cellule staminali nel cervello del ratto in vivo.

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DPSCs&#x306F;3&#x65E5;&#x9F62;&#x306E;Wistar&#x7CFB;&#x96C4;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x8133;&#x810A;&#x9AC4;&#x6DB2;&#x306B;&#x79FB;&#x690D;&#x3057;&#x200B;&#x200B;&#x305F;&#x3002;&#x76AE;&#x8CEA;&#x75C5;&#x5909;&#x306F;&#x524D;&#x80A2;&#x904B;&#x52D5;&#x76AE;&#x8CEA;&#x4E0A;&#x306E;&#x982D;&#x84CB;&#x306B;&#x51B7;&#xFF08;-60&#x2103;&#xFF09;&#x91D1;&#x5C5E;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D7;&#x3092;&#x89E6;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 4&#x9031;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79FB;&#x690D;&#x3057;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;DPSCs&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;300&#x3BC;m&#x306E;&#x539A;&#x3055;&#x306E;&#x6C34;&#x5E73;&#x8133;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AB;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A18;&#x9332;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Predifferentiated&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;DPSCs&#x306F;&#x3001;&#x8133;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306B;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x305F;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x8133;&#x810A;&#x9AC4;&#x6DB2;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x8133;&#x3001;&#x8133;&#x5BA4;&#x4E0B;&#x5E2F;&#xFF08;SVZ&#xFF09;&#x3001;&#x4E0B;&#x5E2F;&#xFF08;SGZ&#xFF09;&#x3068;&#x6881;&#x4E0B;&#x306E;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#xFF08;SCZ&#xFF09;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x524D;&#x99C6;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x79FB;&#x690D;DPSCs&#x304C;&#x65E9;&#x671F;&#x795E;&#x7D4C;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;N-&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x6709;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x5F84;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;NF-M&#x3001;&#x6709;&#x7CF8;&#x5206;&#x88C2;&#x5F8C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;NeuN&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;GFAP&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;TTX&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x96FB;&#x5727;&#x4F9D;&#x5B58;&#xFF08;VD&#xFF09;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x96FB;&#x6D41;&#xFF08;I&#xFF08;Na&#xFF09;&#x306E;&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;TEA&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x9045;&#x5EF6;&#x6574;&#x6D41;&#x30AB;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x96FB;&#x6D41;&#xFF08;K&#xFF08;DR&#xFF09;&#xFF09;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x56DB;&#x9031;&#x9593;&#x306E;&#x50B7;&#x5BB3;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x75C5;&#x5909;&#x76AE;&#x8CEA;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; Neurospecific&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x50B7;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x76AE;&#x8CEA;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;DPSCs&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002; TTX&#x654F;&#x611F;VD&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x96FB;&#x6D41;&#x304A;&#x3088;&#x3073;TEA&#x611F;&#x53D7;&#x6027;K&#xFF08;DR&#xFF09;&#x304C;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x76AE;&#x8CEA;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x30A8;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x6A19;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x79FB;&#x690D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;DPSC&#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x8133;&#x306B;&#x7D71;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x96FB;&#x5727;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x30AB;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x306E;&#x307F;&#x306A;&#x3089;&#x305A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6982;&#x5FF5;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x8A3C;&#x660E;&#x306F;predifferentiated hDPSCs&#x306F;&#x3001;&#x8133;&#x304C;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x7279;&#x306B;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x3068;gliogenesis&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x60C5;&#x5831;&#x6E90;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

in vivo&#x3067;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x8133;&#x306B;Neuronally Predifferentiated&#x30D2;&#x30C8;&#x6B6F;&#x9AC4;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;

Pluripotency&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD;&#xB3C4;&#xAC00; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC720;&#xB798; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD50;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xC18C;&#xC2A4; &#xCE58;&#xACFC; &#xD384;&#xD504;&#xC758; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (DPSCs)&#xB97C; &#xD655;&#xC778;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBD84;&#xC57C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xACE0;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xACB0;&#xACFC;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xB97C; &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; DPSC &#xD30C;&#xC0DD; &#xC2E0;&#xACBD; pecursors &#xD1B5;&#xD569;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; neuronally predifferentiated DPSCs, Vybrant &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC140; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xC950; &#xB450;&#xB1CC;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC785; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. DPSCs 3-&#xD558;&#xB8E8;-&#xC624;&#xB798; &#xB41C; &#xB0A8;&#xC131; Wistar &#xC950;&#xC758; &#xCC99;&#xC218;&#xC5D0; &#xC774;&#xC2DD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC740; &#xAC10;&#xAE30; (-60 &#x2103;) &#xAE08;&#xC18D; &#xC2A4;&#xD0EC;&#xD504;&#xB97C; calvaria forelimb &#xBAA8;&#xD130; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC5D0; &#xAC10;&#xB3D9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xB3C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. 4 &#xC8FC; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC140; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC80;&#xC0C9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. 300 &Mu; m &#xB450;&#xAED8; &#xAC00;&#xB85C; &#xB1CC; &#xC870;&#xAC01; &#xC900;&#xBE44; electrophysiological engrafted &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; DPSCs &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968;&#xACFC; &#xCE7C;&#xB968; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD551;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE30;&#xB85D; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Predifferentiated &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; &#xC950;&#xC758; &#xCC99;&#xC218;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC785; &#xD558;&#xB294; DPSCs &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB1CC; &#xC601;&#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#x5E2F; (SVZ), subgranular &#xC601;&#xC5ED; (SGZ) &#xBC0F; subcallosal &#xC601;&#xC5ED; (SCZ)&#xB294; &#xB1CC;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC0C1; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C;. Immunohistochemical &#xBD84;&#xC11D; &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; DPSCs &#xCD08;&#xAE30; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB9C8;&#xCEE4; N tubulin, &#xD2B9;&#xC815; &#xC911;&#xAC04; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; NF-M, postmitotic &#xC2E0;&#xACBD; &#xB9C8;&#xCEE4; NeuN, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAD50; GFAP &#xD45C;&#xD604; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC140; &#xD45C;&#xC2DC; TTX &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; (VD) &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; &#xC804;&#xB958; (I(Na)) &#xBC0F; &#xCC28; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC815;&#xB958;&#xAE30; &#xCE7C;&#xB968; &#xC804;&#xB958; (K(DR)). &#xBD80;&#xC0C1;, &#xBD99;&#xC77C; &#xC140;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xD6C4;&#xC5D0; 4 &#xC8FC; lesioned &#xD53C; &#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Neurospecific &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC2DD; Dpscs&#xC5D0; &#xC190;&#xC0C1; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB1CC;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xC140;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. TTX &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; VD &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; &#xC804;&#xB958;&#xC640; &#xCC28; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; K(DR) &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; cortically &#xBD80;&#xC0C1; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC140; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xB860;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBCF4;&#xC5EC; engrafted DPSC &#xD30C;&#xC0DD; &#xC140; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB450;&#xB1CC;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xBC0F; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968;&#xACFC; &#xCE7C;&#xB968; &#xCC44;&#xB110; &#xC804;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAD00;&#xB828; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xC5EC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. HDPSCs predifferentiated &#xAC1C;&#xB150; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC1D;&#xD600;&#xAC00;&#xC774; &#xC99D;&#xAC70; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC18C;&#xC2A4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC0F; gliogenesis&#xC758; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB1CC;&#xAC00; &#xC190;&#xC0C1; &#xB418;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788;.

&#xC950; &#xB1CC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xACFC; &#xD384;&#xD504; neuronally predifferentiated &#xC778;&#xAC04; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD1B5;&#xD569;.

Pluripotencia y su origen de la cresta neural que las c&#xE9;lulas madre de pulpa dental (DPSCs) una fuente atractiva de los donantes para el reemplazo de las c&#xE9;lulas neuronales. A pesar de los &#xFA;ltimos resultados alentadores en este campo, se sabe poco sobre la integraci&#xF3;n de la DPSC trasplantado deriva pecursors neuronales en el sistema nervioso central. Para solucionar este problema, DPSCs neuronalmente predifferentiated, marcado con un tinte de c&#xE9;lula vital Vybrant DiD se introdujeron en el cerebro de rata postnatal. DPSCs fueron trasplantados en el l&#xED;quido cefalorraqu&#xED;deo de los tres d&#xED;as de edad ratas Wistar macho. Lesi&#xF3;n cortical fue inducida por tocar un fr&#xED;o (-60 &#xB0; C) el sello de metal a la b&#xF3;veda craneal sobre la corteza extremidad anterior del motor. Cuatro semanas m&#xE1;s tarde localizaci&#xF3;n celular fue detectado por microscop&#xED;a fluorescente y los marcadores de c&#xE9;lulas neuronales fueron estudiados por inmunohistoqu&#xED;mica. Para investigar las propiedades electrofisiol&#xF3;gicas de implantada, la DPSCs marcados con fluorescencia, de 300 micras de espesor rodajas de cerebro horizontales se prepararon y la presencia de tensi&#xF3;n dependiente de canales de sodio y potasio fueron registrados por patch clamp. DPSCs predifferentiated donantes se inyecta en el l&#xED;quido cefalorraqu&#xED;deo de ratas reci&#xE9;n nacidas migran como c&#xE9;lulas individuales en una variedad de regiones del cerebro. La mayor&#xED;a de las c&#xE9;lulas se localizan en las zonas normales progenitoras neuronales del cerebro, la zona subventricular (SVZ), zona subgranular (SGZ) y subcallosal zona (SCZ). El an&#xE1;lisis inmunohistoqu&#xED;mico revel&#xF3; que DPSCs trasplantados expres&#xF3; el marcador temprano neuronal N-tubulina, la neuronal espec&#xED;fica de filamentos intermedios prote&#xED;na NF-M, el marcador neuronal NeuN postmitotic, y GFAP glial. Por otra parte, las c&#xE9;lulas muestran TTX sensibles dependientes de voltaje (VD) las corrientes de sodio (I (Na)) y TEA sensibles retrasadas las corrientes de potasio rectificador (K (RD)). Cuatro semanas despu&#xE9;s de la lesi&#xF3;n, las c&#xE9;lulas marcadas fluorescentemente se detectaron en la corteza lesionada. Expresi&#xF3;n de los marcadores neuroespec&#xED;fica se increment&#xF3; en DPSCs encontradas en el &#xE1;rea de las lesiones corticales en comparaci&#xF3;n con la de las c&#xE9;lulas fluorescentes de cerebro no lesionado. TTX sensibles a las corrientes de sodio VD y TEA sensibles K (DR) aument&#xF3; significativamente en las c&#xE9;lulas marcadas de la zona cortical heridos. En conclusi&#xF3;n, nuestros datos demuestran que los injertados DPSC c&#xE9;lulas derivadas de integrarse en el cerebro de host y mostrar propiedades neuronales no s&#xF3;lo mediante la expresi&#xF3;n de marcadores espec&#xED;ficos de neuronas, sino tambi&#xE9;n mediante la exhibici&#xF3;n de sodio dependiente de voltaje y los canales de potasio. Este estudio de prueba de concepto pone de manifiesto que hDPSCs predifferentiated pueden servir como fuentes &#xFA;tiles de neuro y gliog&#xE9;nesis in vivo, sobre todo cuando el cerebro se lesiona.

Marianna Kiraly

Department of Molecular and Cellular Physiology

Stanford University

Paired Whole Cell Recordings in Organotypic Hippocampal Slices

Marianna Kiraly

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Stanford University

Paired Whole Cell Recordings in Organotypic Hippocampal Slices

Department of Molecular and Cellular Physiology