two-photon-based-photoactivation-in-live-zebrafish-embryos

Two-Photon-Based Photoactivation in Live Zebrafish Embryos

Photoactivation of target compounds in a living organism has proven a valuable approach to investigate various biological processes such as embryonic ...

Weizmann Institute of Science

&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x671F;&#x95F4;&#x5B9E;&#x884C;&#x4E25;&#x683C;&#x7BA1;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x5B57;&#x7B26;&#x4E32;/Cdc25 &#x7684;&#x7EA7;&#x522B;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x5730;&#x70B9;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x88AB;&#x902E;&#x6355;&#x8005;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x9EBB;&#x82B1;&#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x5177;&#x4F53;&#x884C;&#x52A8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5B57;&#x7B26;&#x4E32;/cdc25 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; gastrulating &#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x5219;&#x5B57;&#x7B26;&#x4E32;/Cdc25 &#x6D88;&#x6781;&#x7531; Tribbles &#x7684;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x80DA;&#x80CE;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x63A7;&#x5236;&#x5B57;&#x7B26;&#x4E32;/cdc25 mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x7684; factor(s) &#x5C1A;&#x672A;&#x9610;&#x660E;&#x3002;

&#x679C;&#x8747;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x8F6C;&#x5F55;&#x540E;&#x6C34;&#x5E73;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x5B57;&#x7B26;&#x4E32;/cdc25 &#x5982;&#x4F55;&#x9547;&#x538B;&#x3002;

Cell-cycle progression is tightly regulated during embryonic development. In the Drosophila early embryo, the levels of String/Cdc25 define the precise timing and sites of cell divisions. However, cell-cycle progression is arrested in the mesoderm of gastrulating embryos despite a positive transcriptional string/cdc25 activation provided by the mesoderm-specific action of Twist. Whereas String/Cdc25 is negatively regulated by Tribbles in the mesoderm at these embryonic stages, the factor(s) controlling string/cdc25 mRNA levels has yet to be elucidated.

Cell divisions in the drosophila embryonic mesoderm are repressed via posttranscriptional regulation of string/cdc25 by HOW.

Progression du cycle cellulaire est &eacute;troitement contr&ocirc;l&eacute;e au cours du d&eacute;veloppement embryonnaire. Dans l&#39;embryon de drosophile, les niveaux de la cha&icirc;ne/Cdc25 d&eacute;finissent le minutage pr&eacute;cis et les sites des divisions cellulaires. Toutefois, la progression du cycle cellulaire est arr&ecirc;t&eacute;e dans le m&eacute;soderme d&#39;embryons gastrulating malgr&eacute; une activation transcriptionnelle positive de cha&icirc;ne/cdc25 fournie par l&#39;action du m&eacute;soderme sp&eacute;cifiques de torsion. Tandis que la cha&icirc;ne/Cdc25 est r&eacute;gul&eacute; n&eacute;gativement par Tribbles dans le m&eacute;soderme &agrave; ces stades embryonnaires, l&#39;ou les facteurs contr&ocirc;lant les niveaux d&#39;ARNm de cha&icirc;ne/cdc25 reste encore &agrave; &eacute;lucider.

Divisions cellulaires dans le m&eacute;soderme embryonnaire de la drosophile sont r&eacute;prim&eacute;es par l&#39;interm&eacute;diaire de r&eacute;gulation post-transcriptionnelle de cha&icirc;ne/cdc25 de combien.

Zellteilungen in der Drosophila embryonalen Mesoderms werden &#xFC;ber posttranskriptionelle Regulierung der string/cdc25 von HOW verdr&#xE4;ngt.

Progressione del ciclo cellulare &egrave; strettamente regolato durante lo sviluppo embrionale. Nell&#39;embrione precoce della drosofila, i livelli di stringa/Cdc25 definiscono il momento preciso e siti di divisioni cellulari. Tuttavia, progressione del ciclo cellulare &egrave; arrestato nel mesoderma degli embrioni gastrulating nonostante un positivo transcriptional stringa/cdc25 attivazione fornito dall&#39;azione mesoderma specifico di torsione. Considerando che la stringa/Cdc25 &egrave; regolato negativamente dai triboli nel mesoderma in queste fasi embrionali, il fattore (fattori) controllando i livelli di mRNA di stringa/cdc25 deve ancora essere chiarito.

Divisioni cellulari in mesoderma embrionale della drosofila sono repressi tramite regolamento posttranscriptional di stringa/cdc25 da come.

&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306F;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x6587;&#x5B57;&#x5217;/Cdc25 &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x306D;&#x3058;&#x308C;&#x306E;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x80AF;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x6587;&#x5B57;&#x5217;/cdc25 &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A; gastrulating &#x80DA;&#x306E;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x304C;&#x902E;&#x6355;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6587;&#x5B57;&#x5217;/Cdc25 &#x304C;&#x60AA;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D6;&#x30EB;&#x306B;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x6587;&#x5B57;&#x5217;/cdc25 &#x306E; mRNA &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x80DA;&#x306E;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x6587;&#x5B57;&#x5217;/cdc25 &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6291;&#x5727;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC9C4;&#xD589; &#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB41C;&#xB2E4;. Drosophila &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB38;&#xC790;&#xC5F4;/Cdc25 &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xBC0F; &#xC140; &#xBD84;&#xD560;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC815;&#xC758;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xC9C4;&#xD589; &#xD2B8;&#xC704;&#xC2A4;&#xD2B8; mesoderm &#xD2B9;&#xC815; &#xD589;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; transcriptional &#xBB38;&#xC790;&#xC5F4;/cdc25 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; gastrulating &#xBC30;&#xC544; mesoderm&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74; &#xBB38;&#xC790;&#xC5F4;/cdc25&#xC740; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC30;&#xC544; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; mesoderm&#xC5D0;&#xC11C; Tribbles&#xB85C; &#xADDC;&#xC81C;, &#xBB38;&#xC790;&#xC5F4;/cdc25 mRNA &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; factor(s)&#xB294; &#xC544;&#xC9C1; &#xD574;&#xBA85; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; &#xBC30;&#xC544; mesoderm&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xBD84;&#xD560; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBB38;&#xC790;&#xC5F4;/cdc25&#xC758; posttranscriptional &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5B5;&#xC555; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La progresi&oacute;n del ciclo celular est&aacute; regulada firmemente durante el desarrollo embrionario. En el embri&oacute;n de Drosophila, los niveles de la cadena/Cdc25 definen el momento exacto y sitios de divisiones celulares. Sin embargo, la progresi&oacute;n del ciclo celular es arrestada en el mesodermo de embriones gastrulating a pesar de una activaci&oacute;n transcripcional positiva cadena/cdc25 proporcionados por la acci&oacute;n del mesodermo espec&iacute;fico de torsi&oacute;n. Mientras que la cadena/Cdc25 es regulada negativamente por Tribbles en el mesodermo en estas etapas embrionarias, los factores de control de los niveles de mRNA de cadena/cdc25 todav&iacute;a tiene que ser aclarado.

Las divisiones de c&eacute;lula en el mesodermo embrionario de drosophila son reprimidas mediante regulaci&oacute;n postranscripcional de cadena/cdc25 por c&oacute;mo.

&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#xFF0C;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x751F;&#x6210;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x534F;&#x8C03;&#xFF0C;&#x4F46;&#x77E5;&#x4E4B;&#x751A;&#x5C11;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x5F7C;&#x6B64;&#x76F8;&#x90BB;&#x3002;&#x4ECD;&#x672A;&#x83B7;&#x89E3;&#x7B54;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x95EE;&#x9898;&#x662F;&#x5982;&#x4F55;&#x534F;&#x8C03;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7C7B;&#x578B;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x7A84;&#x7684;&#x89E3;&#x5256;&#x5730;&#x533A;&#x5B9E;&#x73B0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CE8;&#x91CD;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA; (DA) &#x548C;&#x50AC;&#x4EA7;&#x7D20; (OT) &#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x77E5;&#x540D;&#x7684;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684; DA &#x548C; OT &#x6837;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x53D1;&#x5C55;&#x7CBE;&#x5FC3;&#x7B56;&#x5212;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20; (Otp) Orthopedia homeodomain &#x542B;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; PAC1 G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53;&#x548C;&#x950C;&#x624B;&#x6307;&#x542B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50; Fezl &#x4E0A;&#x6E38;&#x5230;&#x68C0;&#x5BDF;&#x5B98;&#x529E;&#x516C;&#x5BA4;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x3002;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; Fezl &#x548C; PAC1 &#x89C4;&#x8303;&#x68C0;&#x5BDF;&#x5B98;&#x529E;&#x516C;&#x5BA4;&#x5728;&#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x65B0;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7F51;&#x7EDC;&#x63A7;&#x5236;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5173;&#x952E;&#x884C;&#x5217;&#x5F0F;&#x57FA;&#x7840; Fezl &#x548C; PAC1 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x5206;&#x5316;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x5730;&#x65B9;&#x68C0;&#x5BDF;&#x5B98;&#x529E;&#x516C;&#x5BA4;&#x7684;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x89C4;&#x8303;&#x3002;

Homeodomain &#x86CB;&#x767D; Orthopedia &#x53CC;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7531;&#x4E0B;&#x4E18;&#x8111;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x89C4;&#x8303;&#x3002;

In the developing hypothalamus, a variety of neurons are generated adjacent to each other in a highly coordinated, but poorly understood process. A critical question that remains unanswered is how coordinated development of multiple neuronal types is achieved in this relatively narrow anatomical region. We focus on dopaminergic (DA) and oxytocinergic (OT) neurons as a paradigm for development of two prominent hypothalamic cell types. We report that the development of DA and OT-like neurons in the zebrafish is orchestrated by two novel pathways that regulate the expression of the homeodomain-containing protein Orthopedia (Otp), a key determinant of hypothalamic neural differentiation. Genetic analysis showed that the G-protein-coupled receptor PAC1 and the zinc finger-containing transcription factor Fezl act upstream to Otp. In vivo and in vitro experiments demonstrated that Fezl and PAC1 regulate Otp at the transcriptional and the post-transcriptional levels, respectively. Our data reveal a new genetic network controlling the specification of hypothalamic neurons in vertebrates, and places Otp as a critical determinant underlying Fezl- and PAC1-mediated differentiation.

Specification of hypothalamic neurons by dual regulation of the homeodomain protein Orthopedia.

Dans l&#x26;#39;&#xE9;laboration de l&#x26;#39;hypothalamus, une vari&#xE9;t&#xE9; de neurones sont g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;s de fa&#xE7;on mutuellement adjacente dans un proc&#xE9;d&#xE9; hautement coordonn&#xE9;e, mais mal connu. Une question cruciale qui reste sans r&#xE9;ponse est de savoir comment le d&#xE9;veloppement coordonn&#xE9; de plusieurs types de neurones est atteint dans cette r&#xE9;gion relativement &#xE9;troite anatomique. Nous nous concentrons sur dopaminergique (DA) et oxytocinergic (OT) des neurones comme un paradigme pour le d&#xE9;veloppement de deux types de cellules hypothalamiques &#xE9;minents. Nous avons constat&#xE9; que le d&#xE9;veloppement de la DA et OT-comme les neurones dans le poisson-z&#xE8;bre est orchestr&#xE9;e par deux nouvelles voies qui r&#xE9;gulent l&#x26;#39;expression de la prot&#xE9;ine hom&#xE9;odomaine contenant orthop&#xE9;die (OTP), un facteur cl&#xE9; de diff&#xE9;renciation neurale hypothalamique. L&#x26;#39;analyse g&#xE9;n&#xE9;tique a montr&#xE9; que le r&#xE9;cepteur PAC1 G-coupl&#xE9; &#xE0; la prot&#xE9;ine et le doigt de zinc contenant du facteur de transcription Fezl acte amont &#xE0; ANP. In vivo et des exp&#xE9;riences in vitro ont d&#xE9;montr&#xE9; que Fezl et PAC1 r&#xE9;guler Otp &#xE0; la transcription et les niveaux post-transcriptionnels, respectivement. Nos donn&#xE9;es r&#xE9;v&#xE8;lent un nouveau r&#xE9;seau g&#xE9;n&#xE9;tique qui contr&#xF4;le la sp&#xE9;cification des neurones hypothalamiques chez les vert&#xE9;br&#xE9;s, et Otp endroits comme un facteur d&#xE9;terminant qui sous-tend la diff&#xE9;renciation Fezl et PAC1-m&#xE9;diation.

Sp&#xE9;cification des neurones hypothalamiques par le r&#xE8;glement de la double orthop&#xE9;die prot&#xE9;ine &#xE0; hom&#xE9;odomaine

Eine Vielzahl von Neuronen werden in den Entwicklungsl&auml;ndern Hypothalamus nebeneinander in eine gut koordinierte, aber schlecht verstandenen Prozess generiert. Eine wichtige Frage, die unbeantwortet bleibt ist wie koordinierte Entwicklung mehrerer neuronale Arten wird in diesem relativ engen anatomischen Region erreicht. Wir fokussieren auf dopaminergen (DA) und Oxytocinergic (OT) Neuronen als Paradigma f&uuml;r die Entwicklung von zwei prominenten hypothalamischen Zelltypen. Wir berichten, dass die Entwicklung DA und OT-wie Neuronen in der Zebrafisch durch zwei neuartige Wege inszeniert ist, die den Ausdruck des Proteins Hom&ouml;odom&auml;ne-haltigen Orthopedia (Otp), ein Schl&uuml;sselelement der hypothalamischen neuronale Differenzierung regulieren. Genetische Analyse zeigte, dass die G-Protein-gekoppelter Rezeptor PAC1 und Zink Finger-haltigen Transkriptionsfaktors Fezl stromaufw&auml;rts zu Otp handeln. In-vivo und in vitro-Experimente zeigten, dass Fezl und PAC1 Otp auf die transkriptionelle und den Posttranskriptionale Ebenen bzw. regulieren. Unsere Daten zeigen ein neues genetisches Netzwerk steuern die Spezifikation der hypothalamischen Neuronen in Wirbeltieren und Orten Otp als eine wichtige Determinante zugrunde liegenden Fezl - und PAC1-vermittelter Differenzierung.

Spezifikation der hypothalamischen Neuronen durch dual-Verordnung des Proteins Hom&ouml;odom&auml;ne Orthopedia.

Nell&#39;ipotalamo in via di sviluppo, una variet&agrave; di neuroni generati accanto a altro in un processo altamente coordinato, ma scarsamente comprensibile. Una questione fondamentale che rimane senza risposta &egrave; come coordinato lo sviluppo di molteplici tipi di un neurone &egrave; raggiunto in questa regione anatomica relativamente stretta. Ci concentriamo su dopaminergico (DA) e oxytocinergic (OT) neuroni come paradigma per lo sviluppo di due tipi di cellule dell&#39;ipotalamo prominente. Segnaliamo che lo sviluppo di DA e neuroni OT-like in the zebrafish &egrave; orchestrato da due percorsi di romanzo che regolano l&#39;espressione della proteina contenente homeodomain Orthopedia (Otp), un fattore determinante di differenziazione neurale ipotalamica. Analisi genetiche hanno mostrato che la G-protein-coupled receptor PAC1 e lo zinco dito contenenti fattore di trascrizione Fezl agire a Monte di Otp. Esperimenti in vivo e in vitro hanno dimostrato che Fezl e PAC1 regolare Otp presso il transcriptional e i livelli di espresione, rispettivamente. I nostri dati rivelano una nuova rete genetica controllando la specifica dei neuroni ipotalamici in vertebrati e luoghi Otp come una critico determinante sottostante Fezl - e PAC1-mediata differenziazione.

Specifica dei neuroni ipotalamici di doppia regolazione della proteina homeodomain Orthopedia.

&#x958B;&#x767A;&#x8996;&#x5E8A;&#x4E0B;&#x90E8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306A;&#x8ABF;&#x6574;&#x304C;&#x3001;&#x3088;&#x304F;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7B54;&#x3048;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x554F;&#x984C;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x5354;&#x8ABF;&#x7684;&#x767A;&#x5C55;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x72ED;&#x3044;&#x89E3;&#x5256;&#x5B66;&#x7684;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x9054;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2&#x3064;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x8457;&#x540D;&#x306A;&#x8996;&#x5E8A;&#x4E0B;&#x90E8;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#xFF08;DA&#xFF09;&#x3068;oxytocinergic&#xFF08;OT&#xFF09;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;DA&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;OT&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x542B;&#x6709;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;Orthopedia&#xFF08;OTP&#xFF09;&#x3001;&#x8996;&#x5E8A;&#x4E0B;&#x90E8;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;2&#x3064;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x753B;&#x7B56;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;PAC1&#x3068;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AF;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x542B;&#x6709;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;OTP&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;Fezl&#x884C;&#x70BA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; in vivo&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vitro&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;Fezl&#x3068;PAC1&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8EE2;&#x5199;&#x5F8C;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;OTP&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;Fezl&#x3068;PAC1&#x5A92;&#x4ECB;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8996;&#x5E8A;&#x4E0B;&#x90E8;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x5834;&#x6240;&#x306E;OTP&#x3002;

&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;Orthopedia&#x306E;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8996;&#x5E8A;&#x4E0B;&#x90E8;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;

&#xAC1C;&#xBC1C; &#xC2DC;&#xC0C1; &#xD558; &#xBD80; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xACE0;&#xB3C4;&#xC758; &#xC870;&#xC815; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2F5;&#xC774; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC9C8;&#xBB38;&#xC740; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xC5BC;&#xB9C8;&#xB098; &#xD611;&#xC870; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC774; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC881;&#xC740; &#xD574; &#xBD80; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; hypothalamic &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC73C;&#xB85C; dopaminergic (DA) &#xBC0F; oxytocinergic (OT) &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB2E4; &#xBC0F; &#xC624;&#xD2F0; &#xAC19;&#xC740; &#xB274;&#xB7F0;&#xC740; zebrafish&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Orthopedia (Otp) hypothalamic &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xD654;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xACB0;&#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xACBD;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC728; &#xB41C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D; G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; PAC1 &#xBC0F; &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; Fezl Otp&#xB97C; &#xC0C1;&#xB958; &#xD589;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xD558; &#xACE0; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; Fezl &#xBC0F; PAC1 &#xADDC;&#xC81C; Otp&#xB97C; transcriptional &#xBC0F; post-transcriptional &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC01;&#xAC01; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xACB0;&#xC815; &#xAE30;&#xBCF8; Fezl PAC1 &#xC911;&#xC7AC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB85C; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xC7A5;&#xC18C; Otp hypothalamic &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC0AC;&#xC591; &#xACF5;&#xAC1C;.

Homeodomain &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Orthopedia&#xC758; &#xC774;&#xC911; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; hypothalamic &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC0AC;&#xC591;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En el hipot&#xE1;lamo en desarrollo, una variedad de neuronas se generan adyacentes entre s&#xED; en un proceso altamente coordinado, pero mal entendido. Una cuesti&#xF3;n fundamental que queda sin respuesta es c&#xF3;mo el desarrollo coordinado de m&#xFA;ltiples tipos neuronales se logra en esta regi&#xF3;n anat&#xF3;mica relativamente estrecho. Nos centramos en dopamin&#xE9;rgico (DA) y oxitocina (OT), las neuronas como un paradigma para el desarrollo de dos tipos de c&#xE9;lulas hipotal&#xE1;micas prominentes. Nos informan de que el desarrollo de la DA y OT-como las neuronas en el pez cebra est&#xE1; orquestada por las dos nuevas v&#xED;as que regulan la expresi&#xF3;n de la prote&#xED;na que contiene Ortopedia homeodominio (OTP), un determinante clave de la diferenciaci&#xF3;n neuronal hipotal&#xE1;mico. El an&#xE1;lisis gen&#xE9;tico mostr&#xF3; que la PAC1 receptor de la prote&#xED;na G de acoplamiento y el dedo de zinc que contiene el factor de transcripci&#xF3;n Fezl acto aguas arriba de la Fiscal&#xED;a. En vivo y en experimentos in vitro han demostrado que Fezl y PAC1 regular Otp en la transcripci&#xF3;n y de los niveles post-transcripcional, respectivamente. Nuestros datos revelan una nueva red gen&#xE9;tica que controla la especificaci&#xF3;n de las neuronas del hipot&#xE1;lamo en los vertebrados, y la Fiscal&#xED;a lugares como un factor determinante que subyace a la diferenciaci&#xF3;n Fezl y PAC1 mediada.

Especificaci&#xF3;n de las neuronas hipotal&#xE1;micas por el Reglamento doble de la Ortopedia prote&#xED;na homeodominio

&#x6211;&#x4EEC;&#x63A2;&#x8BA8;&#x4E86;&#x9C81;&#x68D2;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x9635;&#x5217;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x5982; Wnt&#xFF0C;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x914D;&#x7F6E;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x95F4;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E9A;&#x578B;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6444;&#x52A8;&#x7684; Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x6CA1;&#x6709;&#x6574;&#x4F53;&#x6548;&#x679C;&#x4E0A;&#x7684; diencephalic &#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#xFF0C;&#x89C4;&#x8303;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA; (DA) &#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6570;&#x76EE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5149;&#x5B50;&#x7684; uncaging &#x65B9;&#x6CD5;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F; diencephalic &#x7D20;&#x8D28; DA &#x7956;&#x533A;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x6765;&#x81EA;&#x6B64;&#x7956;&#x533A;&#x975E; DA &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6570;&#x76EE;&#x5E76;&#x4E0D;&#x6539;&#x53D8;&#x7531; Wnt &#x8870;&#x51CF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; birthdating &#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x6700;&#x540E;&#x4E00;&#x4E2A; DA &#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5B89;&#x6392;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0; DA &#x7EC6;&#x80DE;&#x6570;&#x4EE5;&#x4E0B; Wnt &#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x9000;&#x51FA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6761;&#x4EF6;&#x6291;&#x5236; Wnt &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x8BC1;&#x660E; Wnt &#x671F;&#x95F4;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x7684;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x7684;&#x7A97;&#x53E3;&#x9650;&#x5236;&#x4E86; DA &#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; Wnt8b &#x662F;&#x8C03;&#x5236;&#x5668;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x901A;&#x8FC7; Fz8a &#x7684; DA &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6570; (Fzd8a) &#x53D7;&#x4F53;&#x548C;&#x5176;&#x4E0B;&#x6E38;&#x6548;&#x5E94; Lef1&#xFF0C;&#x5E76;&#x8981;&#x6C42;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684; Fezl (Fezf2) &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x540C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5BF9; Wnt &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5FAE;&#x5206;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E0D;&#x662F;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x89E3;&#x91CA;&#xFF0C;&#x5176;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7684;&#x4F53;&#x4F4D;&#x3002;&#x8BE5;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x9884;&#x671F;&#x7684;&#x8981;&#x65E9;&#x5F97;&#x591A;&#xFF0C;diencephalic DA &#x4EBA;&#x53E3;&#x89C4;&#x6A21;&#x8C03;&#x5236;&#x5185;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x4F34;&#x4ECB;&#x5BFC; Wnt &#x533A;&#x57DF;&#x9635;&#x5217;&#x64CD;&#x4F5C;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

&#x591A;&#x5DF4;&#x80FA;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7C07;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x662F;&#x5728;&#x65E9;&#x524D;&#x8111;&#x9635;&#x5217;&#x65F6;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;

We have explored the effects of robust neural plate patterning signals, such as canonical Wnt, on the differentiation and configuration of neuronal subtypes in the zebrafish diencephalon at single-cell resolution. Surprisingly, perturbation of Wnt signaling did not have an overall effect on the specification of diencephalic fates, but selectively affected the number of dopaminergic (DA) neurons. We identified the DA progenitor zone in the diencephalic anlage of the neural plate using a two-photon-based uncaging method and showed that the number of non-DA neurons derived from this progenitor zone is not altered by Wnt attenuation. Using birthdating analysis, we determined the timing of the last cell division of DA progenitors and revealed that the change in DA cell number following Wnt inhibition is not due to changes in cell cycle exit kinetics. Conditional inhibition of Wnt and of cell proliferation demonstrated that Wnt restricts the number of DA progenitors during a window of plasticity, which occurs at primary neurogenesis. Finally, we demonstrated that Wnt8b is a modulator of DA cell number that acts through the Fz8a (Fzd8a) receptor and its downstream effector Lef1, and which requires the activity of the Fezl (Fezf2) transcription factor for this process. Our data show that the differential response of distinct neuronal populations to the Wnt signal is not a simple interpretation of their relative anteroposterior position. This study also shows, for the first time, that diencephalic DA population size is modulated inside the neural plate much earlier than expected, concomitant with Wnt-mediated regional patterning events.

Dopaminergic neuronal cluster size is determined during early forebrain patterning.

Nous avons explor&#xE9; les effets de robustes neuronaux signaux de structuration des plaques, comme voie de signalisation Wnt canonique, sur la diff&#xE9;renciation et la configuration des sous-types de neurones dans le dienc&#xE9;phale poisson-z&#xE8;bre &#xE0; une seule cellule de r&#xE9;solution. &#xC9;tonnamment, la perturbation de la signalisation Wnt n&#x26;#39;a pas eu d&#x26;#39;effet global sur la sp&#xE9;cification des destins dienc&#xE9;phaliques, mais de mani&#xE8;re s&#xE9;lective le nombre de touch&#xE9;s dopaminergiques (DA) des neurones. Nous avons identifi&#xE9; la zone anc&#xEA;tre de DA dans l&#x26;#39;&#xE9;bauche dienc&#xE9;phalique de la plaque neurale en utilisant une m&#xE9;thode uncaging &#xE0; deux photons &#xE0; base et a montr&#xE9; que le nombre de non-DA neurones d&#xE9;riv&#xE9;s de cette zone g&#xE9;niteur n&#x26;#39;est pas alt&#xE9;r&#xE9;e par l&#x26;#39;att&#xE9;nuation Wnt. En utilisant l&#x26;#39;analyse birthdating, nous avons d&#xE9;termin&#xE9; le calendrier de la division cellulaire des prog&#xE9;niteurs derni&#xE8;re DA et a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que le changement du nombre de cellules DA suite &#xE0; l&#x26;#39;inhibition Wnt n&#x26;#39;est pas due &#xE0; des changements dans la cin&#xE9;tique du cycle cellulaire de sortie. L&#x26;#39;inhibition conditionnelle de Wnt et de la prolif&#xE9;ration cellulaire a d&#xE9;montr&#xE9; que Wnt limite le nombre de prog&#xE9;niteurs DA pendant une fen&#xEA;tre de la plasticit&#xE9;, qui se produit &#xE0; la neurogen&#xE8;se primaire. Enfin, nous avons d&#xE9;montr&#xE9; que Wnt8b est un modulateur du nombre de cellules DA qui agit par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire du Fz8a (Fzd8a) r&#xE9;cepteur et son aval LEF1 effecteur, et qui n&#xE9;cessite l&#x26;#39;activit&#xE9; du facteur de transcription Fezl (Fezf2) pour ce processus. Nos donn&#xE9;es montrent que la r&#xE9;ponse diff&#xE9;rentielle des diff&#xE9;rentes populations neuronales au signal Wnt n&#x26;#39;est pas une simple interpr&#xE9;tation de leur position ant&#xE9;ro-post&#xE9;rieure relative. Cette &#xE9;tude montre &#xE9;galement, pour la premi&#xE8;re fois, que la taille de la population dienc&#xE9;phalique DA est modul&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur de la plaque neurale beaucoup plus t&#xF4;t que pr&#xE9;vu, concomitante avec Wnt-m&#xE9;di&#xE9;es par les &#xE9;v&#xE9;nements de structuration r&#xE9;gionales.

Dopaminergique taille de cluster neuronale est d&#xE9;termin&#xE9; au cours de Mod&#xE9;lisation du cerveau ant&#xE9;rieur pr&#xE9;coce

Wir haben die Auswirkungen der robuste neurale Platte Musterung Signale, z. B. kanonischer Wnt, auf die Differenzierung und die Konfiguration von neuronalen Untertypen in der Zebrafisch-Zwischenhirn bei einzelligen Aufl&ouml;sung untersucht. &Uuml;berraschenderweise St&ouml;rung Wnt signalisieren haben keine ausgleichende Wirkung auf die Spezifikation der Dienzephalisches Schicksale, aber gezielt beeinflusst die Anzahl der (DA) dopaminergen Neuronen. Wir DA Stammvater Zone in der Dienzephalisches Anlage der Neural-Platte mit einer zwei-Photonen-basierte uncaging Methode erkannt und zeigte, dass die Zahl der nicht-DA Neuronen abgeleitet aus dieser Zone Vorl&auml;uferzellen von Wnt D&auml;mpfung nicht ge&auml;ndert werden kann. Birthdating Analyse verwenden, wir bestimmt den Zeitpunkt der letzten Zellteilung DA Vorreiter und zeigte, dass die Ver&auml;nderung DA Zelle Nummer folgenden Wnt Hemmung nicht aufgrund von &Auml;nderungen an der Ausfahrt Zellzykluskinetik. Bedingte Hemmung des Wnt und der Zellproliferation gezeigt, dass Wnt die Anzahl der DA Vorl&auml;uferzellen w&auml;hrend ein Fenster der Plastizit&auml;t, beschr&auml;nkt, die am prim&auml;ren Neurogenese auftritt. Schlie&szlig;lich wir bewiesen, dass Wnt8b ein Modulator der DA-Zellen-Zahl ist, die durch die Fz8a wirkt (Fzd8a) Rezeptor und seine nachgeschaltete Effektor Lef1 und denen die Aktivit&auml;t der Transkription Fezl (Fezf2) erfordert Faktor f&uuml;r diesen Prozess. Unsere Daten zeigen, dass die differenzielle Reaktion der unterschiedlichen neuronalen Populationen zum Wnt Signal keine einfache Erkl&auml;rung f&uuml;r ihre relative anteroposterioren-Position. Diese Studie zeigt auch, zum ersten Mal, das Dienzephalisches DA Bev&ouml;lkerungsgr&ouml;&szlig;e viel fr&uuml;her als erwartet, innerhalb der Neural-Platte moduliert ist damit einhergehende mit regionalen Musterung Wnt-vermittelten Veranstaltungen.

Dopaminergen neuronale Clustergr&ouml;&szlig;e wird w&auml;hrend der fr&uuml;hen Stirnhirn Musterung festgelegt.

Abbiamo esplorato gli effetti della robusta piastra neurale creazione di serie di segnali, come ad esempio Wnt canonico, la differenziazione e la configurazione dei sottotipi neuronali nel diencefalo zebrafish a cella singola risoluzione. Sorprendentemente, perturbazione di segnalazione Wnt non ha avuto un effetto complessivo sulla specifica dei destini Diencefalica, ma colpite selettivamente il numero di Neuroni dopaminergici (DA). Abbiamo individuato la zona di progenitore DA nel anlage Diencefalica della piastra neurale utilizzando un metodo uncaging basati su due-fotone e ha mostrato che il numero di neuroni non-DA derivati da questa zona progenitore non &egrave; alterato da Wnt attenuazione. Utilizzando l&#39;analisi birthdating, abbiamo determinato i tempi della divisione cellulare ultimo DA progenitori e ha rivelato che il cambiamento nella inibizione seguente Wnt DA cellulare numero non &egrave; a causa di cambiamenti nel ciclo cellulare uscita cinetica. Inibizione condizionale di Wnt e della proliferazione cellulare hanno dimostrato che Wnt limita il numero di progenitori DA durante una finestra di plasticit&agrave;, che si verifica nella neurogenesi primaria. Infine, abbiamo dimostrato che la Wnt8b &egrave; un modulatore del numero di cellule DA che agisce attraverso il Fz8a di fattore recettore (Fzd8a) e suoi effettori a valle Lef1, e che richiede l&#39;attivit&agrave; della trascrizione Fezl (Fezf2) per questo processo. I nostri dati mostrano che la risposta differenziale delle distinte popolazioni neuronali del segnale Wnt non &egrave; una semplice interpretazione della loro posizione relativa anteroposteriore. Questo studio mostra anche, per la prima volta, che la dimensione della popolazione DA Diencefalica &egrave; modulata all&#39;interno della piastra neurale molto prima del previsto, concomitante con eventi patterning regionale Wnt-mediata.

Dimensione dei cluster di un neurone dopaminergico &egrave; determinato durante primi patterning proencefalo.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5358;&#x4E00;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3067;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x9593;&#x8133;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4E0A;&#x3067;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;Wnt&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x9593;&#x8133;&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#xFF08;DA&#xFF09;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6570;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2&#x3064;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x5149;&#x5B50;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x9593;&#x8133;&#x539F;&#x57FA;&#x306E;DA&#x524D;&#x99C6;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x975E;DA&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x6E1B;&#x8870;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; birthdating&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;DA&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;&#x6700;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x963B;&#x5BB3;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;DA&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x7D42;&#x4E86;&#x52D5;&#x614B;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306F;&#x3001;Wnt&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x795E;&#x7D4C;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306E;&#x7A93;&#x306E;&#x9593;&#x306B;DA&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;Wnt8b&#x304C;Fz8a&#xFF08;Fzd8a&#xFF09;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;LEF1&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;Fezl&#xFF08;Fezf2&#xFF09;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;DA&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x5668;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x96C6;&#x56E3;&#x306E;&#x5DEE;&#x52D5;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x524D;&#x5F8C;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x89E3;&#x91C8;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9593;&#x8133;DA&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306F;&#x3001;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x4E88;&#x60F3;&#x3088;&#x308A;&#x65E9;&#x304F;Wnt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x5A92;&#x4ECB;&#x5730;&#x57DF;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x306E;&#x4F75;&#x7528;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x5909;&#x8ABF;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x524D;&#x8133;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E2D;&#x306B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; zebrafish diencephalon &#xC2E0;&#xACBD; &#xD558;&#xC704;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xACFC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC5D0; &#xC815;&#xC2DD; Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD0D0;&#xD5D8;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, Wnt &#xC2E0;&#xD638; &#xC12D; &#xB3D9; diencephalic &#xC6B4;&#xBA85; &#xC0AC;&#xC591;&#xC5D0; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; (&#xB2E4;) dopaminergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB450; &#xAD11;&#xC790; &#xAE30;&#xBC18; uncaging &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310;&#xC758; diencephalic &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB2E4; &#xC870;&#xC0C1; &#xC601;&#xC5ED; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xC870;&#xC0C1; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;-DA &#xB274;&#xB7F0; &#xC218; Wnt &#xAC10;&#xC1C4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. Birthdating &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB2E4; progenitors&#xC758; &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4; &#xC140; &#xBC88;&#xD638; &#xB2E4;&#xC74C; Wnt &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xCD9C;&#xAD6C; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654; &#xB54C;&#xBB38; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xC800;&#xD574; Wnt &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xC2DC;&#xC5F0; Wnt &#xC18C;&#xC131; &#xC8FC; &#xC131;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294;&#xC758; &#xCC3D; &#xB2E4; progenitors&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; wnt8b&#xB97C; fz8a&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5ED;&#xD560; &#xB2E4; &#xC140; &#xC218; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;&#xB294; &#xC2DC;&#xC5F0; (Fzd8a) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640;&#xC758; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC774;&#xD399;&#xD130; Lef1, Fezl (Fezf2) &#xC804;&#xC0AC;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC694;&#xC18C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; Wnt &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC751;&#xB2F5;&#xC740; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; anteroposterior &#xC704;&#xCE58;&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xD574;&#xC11D; &#xD558;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB610;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;, diencephalic DA &#xC778;&#xAD6C; &#xD06C;&#xAE30;&#xB294; &#xC608;&#xC0C1; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xC77C;&#xCC0D; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310; &#xB0B4;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xB294; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xD328;&#xD134;&#xD654; Wnt &#xC911;&#xC7AC; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294;.

Dopaminergic &#xC2E0;&#xACBD; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xD06C;&#xAE30;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos explorado los efectos de las fuertes se&#xF1;ales de los nervios de la placa de modelado, como la v&#xED;a can&#xF3;nica de Wnt, en la diferenciaci&#xF3;n y la configuraci&#xF3;n de los subtipos neuronales en el dienc&#xE9;falo pez cebra en una sola c&#xE9;lula de resoluci&#xF3;n. Sorprendentemente, la perturbaci&#xF3;n de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n Wnt no tienen un efecto general sobre la especificaci&#xF3;n de destinos diencef&#xE1;licas, pero de forma selectiva el n&#xFA;mero de afectados dopamin&#xE9;rgicas (DA), las neuronas. Se identific&#xF3; la zona progenitora DA en el esbozo diencef&#xE1;lico de la placa neural mediante un m&#xE9;todo uncaging de dos fotones con sede y mostr&#xF3; que el n&#xFA;mero de no-DA neuronas derivadas de c&#xE9;lulas progenitoras esta zona no se ve alterada por la atenuaci&#xF3;n de Wnt. Utilizando el an&#xE1;lisis de birthdating, se determin&#xF3; el tiempo de la &#xFA;ltima divisi&#xF3;n celular de los progenitores DA y revel&#xF3; que el cambio en el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas DA consecuencia de la inhibici&#xF3;n de Wnt no se debe a cambios en la cin&#xE9;tica de las c&#xE9;lulas de salida del ciclo. La inhibici&#xF3;n condicionada de Wnt y de la proliferaci&#xF3;n celular demostrado que Wnt restringe el n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas progenitoras de DA durante una ventana de la plasticidad, que se produce en la neurog&#xE9;nesis primaria. Por &#xFA;ltimo, hemos demostrado que Wnt8b es un modulador del n&#xFA;mero de c&#xE9;lulas DA que act&#xFA;a a trav&#xE9;s de la Fz8a (Fzd8a) del receptor y su efector Lef1, y que requiere la actividad del factor de transcripci&#xF3;n Fezl (Fezf2) para este proceso. Nuestros datos muestran que la respuesta diferencial de las distintas poblaciones neuronales a la se&#xF1;al Wnt no es una simple interpretaci&#xF3;n de su posici&#xF3;n anteroposterior relativa. Este estudio tambi&#xE9;n muestra, por primera vez, que el tama&#xF1;o de la DA diencef&#xE1;lico de la poblaci&#xF3;n es modulada en el interior de la placa neural mucho antes de lo esperado, concomitante con la Wnt-mediada por los acontecimientos de modelado regional.

Tama&#xF1;o de Cluster dopamin&#xE9;rgica neuronal se determina durante Patrones cerebro anterior Temprana

&#x95F4;&#x8111;&#x5145;&#x5F53;&#x611F;&#x5B98;&#x3001; &#x4E2D;&#x90E8;&#xFF0C;&#x548C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x7F51;&#x7AD9;&#xFF0C;&#x662F;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x5927;&#x8111;&#x4E2D;&#x6700;&#x7CBE;&#x81F4;&#x7684;&#x5EFA;&#x7B51;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x53CA;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x95F4;&#x8111;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5236;&#x8BA2;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x8C03;&#x4EA1;&#x7684; (uncaging)-&#x57FA;&#x4E8E;&#x6CBF;&#x88AD;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x7B56;&#x7565;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x67D0;&#x4E2A;&#x7ED9;&#x5B9A;&#x7684; diencephalic &#x7956;&#x57DF;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x4F4D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x884C;&#x9A7E;&#x9A76;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE; proneural &#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;Neurogenin1 &#xFF08;Neurog1&#xFF09;&#xFF0C;&#x5B83;&#x88AB;&#x7528;&#x4F5C;&#x53EF;&#x89C1;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CC;&#x7A0B;&#x7891;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7CBE;&#x786E;&#x8D34;&#x6807;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x51C6;&#x95F4;&#x8111;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x7EC4;&#x3002;&#x4EE5;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6807;&#x6709;&#x591A;&#x4E2A;&#x91CD;&#x53E0;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x95F4;&#x8111;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x786E;&#x4FDD;&#x51C6;&#x786E;&#x6027;&#x548C;&#x53EF;&#x91CD;&#x590D;&#x6027;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CBF;&#x88AD;&#x8DDF;&#x8E2A;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x8003;&#x8651;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x5148;&#x524D;&#x6240;&#x8FF0;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x95F4;&#x8111;&#x547D;&#x8FD0;&#x5730;&#x56FE;&#x3002;

&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x95F4;&#x8111;&#x547D;&#x8FD0;&#x5730;&#x56FE;&#x3002;

The diencephalon acts as an interactive site between the sensory, central, and endocrine systems and is one of the most elaborate structures in the vertebrate brain. To better understand the embryonic development and morphogenesis of the diencephalon, we developed an improved photoactivation (uncaging)-based lineage tracing strategy. To determine the exact position of a given diencephalic progenitor domain, we used a transgenic line driving green fluorescent protein (GFP) in cells expressing the proneural protein, Neurogenin1 (Neurog1), which was used as a visible neural plate landmark. This approach facilitated precise labeling of defined groups of cells in the prospective diencephalon of the zebrafish neural plate. In this manner, we labeled multiple overlapping areas of the diencephalon, thereby ensuring both accuracy and reproducibility of our lineage tracing regardless of the dynamic changes of the developing neural plate. We present a fate map of the zebrafish diencephalon at a higher spatial resolution than previously described.

High resolution fate map of the zebrafish diencephalon.

Le dienc&#xE9;phale agit comme un site interactif entre les syst&#xE8;mes sensoriels, centrale, et le syst&#xE8;me endocrinien et est l&#x26;#39;une des structures les plus &#xE9;labor&#xE9;es dans le cerveau des vert&#xE9;br&#xE9;s. Pour mieux comprendre le d&#xE9;veloppement embryonnaire et la morphogen&#xE8;se du dienc&#xE9;phale, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une photoactivation am&#xE9;lior&#xE9;e (uncaging)-bas&#xE9;e lign&#xE9;e tra&#xE7;age strat&#xE9;gie. Pour d&#xE9;terminer la position exacte d&#x26;#39;un domaine prog&#xE9;niteur dienc&#xE9;phalique donn&#xE9;, nous avons utilis&#xE9; une lign&#xE9;e transg&#xE9;nique de conduire la prot&#xE9;ine fluorescente verte (GFP) dans les cellules exprimant la prot&#xE9;ine proneural, Neurogenin1 (Neurog1), qui a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; comme un point de rep&#xE8;re visible de la plaque neurale. Cette m&#xE9;thode facilit&#xE9;e &#xE9;tiquetage pr&#xE9;cise de groupes d&#xE9;finis de cellules dans le dienc&#xE9;phale potentiel de la plaque de poisson-z&#xE8;bre neuronal. De cette mani&#xE8;re, nous avons appel&#xE9; plusieurs zones de chevauchement de la dienc&#xE9;phale, assurant ainsi l&#x26;#39;exactitude et la reproductibilit&#xE9; de notre lign&#xE9;e de tra&#xE7;age quelles que soient les changements dynamiques de la plaque neurale en d&#xE9;veloppement. Nous pr&#xE9;sentons une carte sort du dienc&#xE9;phale le poisson-z&#xE8;bre &#xE0; une r&#xE9;solution spatiale plus &#xE9;lev&#xE9;e que pr&#xE9;c&#xE9;demment d&#xE9;crit.

Haute R&#xE9;solution Plan destin du dienc&#xE9;phale poisson z&#xE8;bre

Das Zwischenhirn fungiert als interaktive Seite zwischen die sensorische, zentrale und endokrine Systeme und z&auml;hlt zu den aufwendigsten Strukturen im Gehirn Wirbeltiere. Zum besseren Verst&auml;ndnis der embryonalen Entwicklung und Morphogenese von dem Zwischenhirn entwickelten wir ein verbessertes Photoaktivierung (uncaging)-&Uuml;bertragungslinie Ablaufverfolgung Strategie basiert. Um die genaue Position einer bestimmten Dienzephalisches Stammvater-Dom&auml;ne zu ermitteln, haben wir eine transgene Linie fahren gr&uuml;nes fluoreszierendes Protein (GFP) in Zellen, die zum Ausdruck bringen des Proneural-Proteins, Neurogenin1 verwendet (Neurog1), die als Wahrzeichen sichtbar neurale Platte verwendet wurde. Dieser Ansatz erleichtert die genaue Kennzeichnung von definierten Gruppen von Zellen in der prospektiven Zwischenhirn der Zebrafisch-Neural-Platte. Auf diese Weise beschriftet wir mehrere &uuml;berlappende Bereiche im Zwischenhirn, wodurch sowohl die Genauigkeit als auch die Reproduzierbarkeit der unsere Linie-Ablaufverfolgung unabh&auml;ngig von den dynamischen &Auml;nderungen der entwickelnden Neural-Platte. Wir pr&auml;sentieren eine Schicksal-Karte von der Zebrafisch-Zwischenhirn mit einer h&ouml;heren r&auml;umlichen Aufl&ouml;sung als zuvor beschrieben.

Hochaufl&ouml;sende Schicksal Karte von Zebrafisch-Zwischenhirn.

Diencefalo &egrave; una delle strutture pi&ugrave; elaborate nel cervello vertebrato e agisce come un sito interattivo tra i sistemi sensoriali, centrali e sistema endocrini. Per comprendere meglio lo sviluppo embrionale e la morfogenesi del diencefalo, abbiamo sviluppato un photoactivation migliorata (uncaging)-basato su strategia di tracciatura di lignaggio. Per determinare la posizione esatta di un dominio dato progenitore Diencefalica, abbiamo utilizzato una linea transgenica guida proteina fluorescente verde (GFP) in cellule che esprimono la proteina proneural, Neurogenin1 (Neurog1), che &egrave; stato usato come punto di riferimento visibile piastra neurale. Questo approccio facilitato etichettatura precisa di gruppi definiti di cellule nel diencefalo prospettico della piastra neurale zebrafish. In questo modo, abbiamo etichettato pi&ugrave; aree sovrapposte del diencefalo, garantendo precisione e la riproducibilit&agrave; della nostra analisi di lineage indipendentemente i cambiamenti dinamici della piastra neurale in via di sviluppo. Vi presentiamo una mappa del destino del diencefalo zebrafish con una risoluzione spaziale superiore quanto descritto in precedenza.

Mappa di destino ad alta risoluzione del diencefalo zebrafish.

&#x9593;&#x8133;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x899A;&#x4E2D;&#x67A2;&#x3001;&#x53CA;&#x3073;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x7CBE;&#x5DE7;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x3068;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6539;&#x5584;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5149;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#xFF08;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF09;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x3059;&#x308B;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x9593;&#x8133;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x76EE;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E9;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;Neurogenin1&#xFF08;Neurog1&#xFF09;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x524D;&#x5411;&#x304D;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x8840;&#x7D71;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x3068;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x78BA;&#x4FDD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x6A19;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x524D;&#x8FF0;&#x3057;&#x305F;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9AD8;&#x3044;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x306E;&#x5730;&#x56F3;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x9593;&#x8133;&#x306E;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;

Diencephalon &#xAC10;&#xAC01;, &#xC911;&#xC559;, &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xAC04;&#xC758; &#xB300;&#xD654;&#xD615; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB418;&#xBA70; &#xCC99;&#xCD94; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC815;&#xAD50;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xACFC; diencephalon morphogenesis &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; photoactivation (uncaging) &#xAC1C;&#xBC1C;-&#xD608;&#xD1B5; &#xCD94;&#xC801; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xB41C; diencephalic &#xC870;&#xC0C1; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Neurogenin1 proneural &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP) &#xC6B4;&#xC804; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; (Neurog1)&#xC744; &#xBCF4;&#xC774;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310; &#xB79C;&#xB4DC;&#xB9C8;&#xD06C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC774;&#xB807;&#xAC8C; &#xC140; zebrafish &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310;&#xC758; &#xC608;&#xBE44; diencephalon&#xC5D0; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xB77C;&#xBCA8; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC815;&#xD655;&#xC131;&#xACFC; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310;&#xC758; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD608;&#xD1B5; &#xCD94;&#xC801; &#xB418;&#xB3C4;&#xB85D; diencephalon&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xACB9;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xC5ED; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC55E;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85;&#xD55C; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xACF5;&#xAC04; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; zebrafish diencephalon&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC2DC;.

&#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; zebrafish diencephalon&#xC758; &#xC6B4;&#xBA85; &#xC9C0;&#xB3C4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El dienc&#xE9;falo act&#xFA;a como un sitio interactivo entre los sistemas sensoriales, central y endocrino, y es una de las estructuras m&#xE1;s elaboradas en el cerebro de los vertebrados. Para comprender mejor el desarrollo embrionario y morfog&#xE9;nesis del dienc&#xE9;falo, hemos desarrollado una mejora de fotoactivaci&#xF3;n (uncaging)-basada linaje de rastreo de la estrategia. Para determinar la posici&#xF3;n exacta de un dominio determinado progenitor diencef&#xE1;lico, se utiliz&#xF3; una l&#xED;nea transg&#xE9;nica de conducir la prote&#xED;na verde fluorescente (GFP) en c&#xE9;lulas que expresan la prote&#xED;na proneural, Neurogenin1 (Neurog1), que fue utilizado como un punto de referencia visible la placa neural. Este enfoque facilita el etiquetado preciso de los grupos definidos de c&#xE9;lulas en el dienc&#xE9;falo prospectivo de la placa neural del pez cebra. De esta manera, hemos marcado varias &#xE1;reas de solapamiento del dienc&#xE9;falo, asegurando as&#xED; la precisi&#xF3;n y la reproducibilidad de nuestro linaje de seguimiento, independientemente de los cambios din&#xE1;micos de la placa neural en desarrollo. Se presenta un mapa del destino del dienc&#xE9;falo pez cebra con una mayor resoluci&#xF3;n espacial que se ha descrito anteriormente.

Helit Nabel-Rosen

Molecular Cell Biology

Weizmann Institute of Science

Two-Photon-Based Photoactivation in Live Zebrafish Embryos

Helit Nabel-Rosen

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Weizmann Institute of Science

Two-Photon-Based Photoactivation in Live Zebrafish Embryos

Molecular Cell Biology