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Techniques for Imaging Ca<sup>2+</sup> Signaling in Human Sperm

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

University of Birmingham

&#x51B2;&#x6D6A;&#x86E4; (Spisula solidissima) &#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210; &#x2170; &#x671F;&#x524D;&#x671F;&#x7684;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#xFF0C;&#x548C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x76F4;&#x81F3;&#x88AB;&#x6355;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x9636;&#x6BB5;&#x65BD;&#x80A5;&#x3002;&#x5B8C;&#x6574;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x91CD;&#x65B0;&#x5F00;&#x5C55;&#xFF0C;&#x9996;&#x5148;&#x8BC1;&#x660E;&#x751F;&#x53D1;&#x6CE1;&#x7834;&#x88C2; (&#x53D1;&#x6CE1;) &#x53EF;&#x80FD;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5668;&#x6A21;&#x4EFF;&#x7CBE;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5982;&#x9AD8; K(+) &#x6216; 5-&#x7F9F;&#x8272;&#x80FA;&#x3002;&#x524D;&#x51E0;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x6307;&#x51FA;&#x6CBB;&#x7597;&#x601D;&#x60F3;&#x63D0;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8425;&#x5730;&#x6291;&#x5236;&#x7CBE;&#x5B50;-&#x6216; 5-&#x7F9F;&#x8272;&#x80FA;&#x8BF1;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5F15;&#x8D77;&#x6C2F;&#x5316;&#x94BE;&#x53D1;&#x6CE1;&#x86E4;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x6269;&#x5C55;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x6EF4;&#x8425;&#x5730;&#x6C34;&#x5E73;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#xFF0C;&#x4E24;&#x6816;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x6216;&#x6D77;&#x661F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x652F;&#x6301;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4E0B;&#x964D;&#x662F;&#x666E;&#x904D;&#x91CD;&#x8981;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x52A8;&#x7269;&#x738B;&#x56FD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x91CD;&#x65B0;&#x5BA1;&#x67E5;&#x53D1;&#x6CE1;&#x86E4;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5173;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x5404;&#x79CD;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8425;&#x5730;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0D;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5F71;&#x54CD;&#x4EFB;&#x4E00;&#x6C2F;&#x5316;&#x94BE;-&#x6216; 5-&#x7F9F;&#x8272;&#x80FA;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x53D1;&#x6CE1;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x53D1;&#x6CE1;&#x540E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x672A;&#x80FD;&#x4FDD;&#x9669;&#x4E1D;/&#x7A7F;&#x900F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF1B;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4E0D;&#x662F;&#x6291;&#x5236;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x76F4;&#x63A5;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; 5-&#x7F9F;&#x8272;&#x80FA;&#x96BE;&#x6C11;&#x8425;&#x5728;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3001; &#x6C2F;&#x5316;&#x94BE;&#x6216;&#x7CBE;&#x5B50;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x9884;&#x671F;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x662F;&#x524D;&#x53D1;&#x6CE1;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0A;&#x5347;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; SQ22536&#xFF0C;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185; cAMP &#x542B;&#x91CF;&#x589E;&#x52A0;&#x90E8;&#x5206;&#x53D7;&#x963B;&#x548C;&#x53D1;&#x6CE1;&#x63A5;&#x7740;&#xFF0C;&#x4F46;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x8FDF;&#x7F13;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x4E0A;&#x5347;&#x6709;&#x5229;&#x4E8E;&#x53D1;&#x6CE1;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5F3A;&#x79EF;&#x91D1;&#x7684;&#x4E0A;&#x6E38;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x548C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5373;&#x51CF;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x91CD;&#x65B0;&#x5F00;&#x5C55;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x4E0D;&#x80FD;&#x51CF;&#x5C11;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8425;&#x5730;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

&#x4ECE;&#x524D;&#x671F;&#x902E;&#x6355;&#x51B2;&#x6D6A;&#x86E4;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x91CA;&#x653E;&#x540E;&#x9635;&#x8425;&#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;

Surf clam (Spisula solidissima) oocytes are spawned at the prophase I stage of meiosis, and they remain arrested at this stage until fertilization. Full oocyte meiosis reinitiation, first evidenced by germinal vesicle breakdown (GVBD), may be induced by artificial activators mimicking sperm, such as high K(+) or serotonin. Previous reports indicated that treatments thought to increase the level of oocyte cAMP inhibited sperm- or serotonin-induced, but not KCl-induced, GVBD in clam oocytes. These observations extend the well known requirement for a drop in oocyte cAMP levels in mammalian, amphibian or starfish oocytes and support the view that such a drop is universally important throughout the animal kingdom. We have re-examined the cAMP dependency of GVBD in clam oocytes and found that various treatments that raise oocyte cAMP levels did not, surprisingly, affect either KCl- or serotonin-induced GVBD. Such treatments, however, inhibited GVBD upon insemination of the oocytes, but this was due to the failure of sperm to fuse/penetrate the oocytes; thus, it was not an inhibition of oocyte activation as such. Direct measurements of oocyte cAMP levels after activation by serotonin, KCl or sperm showed that, contrary to expectations, there is a rise in cAMP levels before GVBD. Using SQ22536, an adenylyl cyclase inhibitor, the increase in oocyte cAMP level was partly prevented and GVBD proceeded, but with a significant retardation, indicating that the normal cAMP rise facilitates GVBD. Our work sheds light on the diversity of upstream pathways leading to activation of MPF and provides a unique model whereby the onset of meiosis reinitiation is associated with an increase, not a decrease, in oocyte cAMP levels.

Increase of cAMP upon release from prophase arrest in surf clam oocytes.

Mactre (Spisula solidissima) ovocytes fraient &agrave; la prophase, j&#39;ai l&#39;&eacute;tape de la m&eacute;iose, et ils restent arr&ecirc;t&eacute;es &agrave; ce stade jusqu&#39;&agrave; la f&eacute;condation. Reprise de la m&eacute;iose ovocyte complet, t&eacute;moigne tout d&#39;abord de ventilation v&eacute;sicule germinale (GVBD), peut-&ecirc;tre &ecirc;tre induit par les activateurs artificielles imitant le sperme, comme k haute ou la s&eacute;rotonine. Les rapports pr&eacute;c&eacute;dents ont indiqu&eacute; que les traitements pensaient pour augmenter le niveau des ovocytes cAMP inhib&eacute; sperme - ou induite par la s&eacute;rotonine, mais pas induite par le KCl, administr&eacute;es dans des ovocytes de palourde. Ces observations s&#39;&eacute;tendent l&#39;exigence bien connue d&#39;une goutte dans l&#39;ovocyte taux d&#39;AMPc dans les mammif&egrave;res, soutien et amphibiens ou &eacute;toile de mer ovocytes estime qu&#39;une telle baisse est universellement important tout au long du r&egrave;gne animal. Nous avons r&eacute;examin&eacute; la d&eacute;pendance cAMP d&#39;administr&eacute;es dans des ovocytes de palourde et constat&eacute; que divers traitements qui augmentent les taux d&#39;AMPc ovocyte n&#39;affectent pas, &eacute;tonnamment, soit KCl s&eacute;rotonine induite ou administr&eacute;es. De tels traitements, cependant, inhibent administr&eacute;es apr&egrave;s ins&eacute;mination des ovocytes, mais c&#39;&eacute;tait en raison de l&#39;&eacute;chec du sperme de fusible/p&eacute;n&eacute;trer les ovocytes ; ainsi, il n&#39;&eacute;tait pas une inhibition de l&#39;activation ovocytaire comme tel. Les mesures directes d&#39;ovocyte cAMP niveaux apr&egrave;s activation par la s&eacute;rotonine, KCl ou sperme a montr&eacute; que, contrairement aux attentes, il y a une hausse des taux d&#39;AMPc avant GVBD. &Agrave; l&#39;aide de SQ22536, un inhibiteur de l&#39;ad&eacute;nylyl cyclase, l&#39;augmentation de niveau cAMP ovocyte n&#39;a pu en partie et administr&eacute;es a proc&eacute;d&eacute;, mais avec un retard consid&eacute;rable, ce qui indique que le cAMP normal rise facilite GVBD. Notre travail met en lumi&egrave;re la diversit&eacute; des voies en amont, conduisant &agrave; l&#39;activation du MPF et fournit un mod&egrave;le unique, auquel cas le d&eacute;but de la reprise de la m&eacute;iose est associ&eacute; &agrave; une augmentation, non pas une diminution, taux d&#39;AMPc ovocyte.

Augmentation du cAMP &agrave; la lev&eacute;e de la saisie de la prophase dans des ovocytes de mactre.

Erh&#xF6;hung von cAMP bei der Freigabe von Prophase Verhaftung im Surf-Muschel Oozyten.

Surf clam (Spisula solidissima) ovociti sono distribuiti presso la profase stadio I della meiosi, e rimangono arrestati in questa fase fino a fertilizzazione. Alimentato di meiosi ovocitaria completa, in primo luogo evidenziato dalla rottura della vescicola germinale (GVBD), pu&ograve; essere indotta da attivatori artificiali che mimano lo sperma, come K(+) alta o serotonina. Precedenti rapporti indicano che trattamenti pensiero per aumentare il livello dell&#39;ovocita cAMP inibito sperma o serotonina-indotta, ma non KCl-indotta, GVBD in ovociti di vongola. Queste osservazioni estendono l&#39;obbligo ben noto per un calo nell&#39;ovocita livelli campi in mammiferi, supporto e ovociti di anfibi o stella marina la visione che una goccia &egrave; universalmente importante in tutto il Regno animale. Abbiamo riesaminato la dipendenza accampamento di GVBD in ovociti di vongola e trovato che vari trattamenti che aumentare i livelli di cAMP ovocita non, sorprendentemente, incidano o KCl - o serotonina indotta GVBD. Tali trattamenti, tuttavia, inibiscono GVBD su inseminazione di ovociti, ma questo era a causa del fallimento di sperma di fusibile/penetrare gli ovociti; cos&igrave;, non era un&#39;inibizione dell&#39;attivazione di ovociti come tale. Misurazioni dirette dell&#39;ovocita campo livelli dopo l&#39;attivazione di serotonina, KCl o sperma ha dimostrato che, contrariamente alle aspettative, c&#39;&egrave; un aumento nei livelli di campi prima di GVBD. Utilizzando SQ22536, un inibitore di adenil ciclasi, parzialmente &egrave; stato evitato l&#39;aumento nel livello di accampamento ovocita e procedette GVBD, ma con un ritardo significativo, che indica che il campo normale salire facilita la GVBD. Il nostro lavoro mette in luce la diversit&agrave; dei percorsi che portano all&#39;attivazione di MPF e fornisce un modello unico per cui l&#39;insorgenza di alimentato meiosi &egrave; associata con un aumento, non una diminuzione, in livelli cAMP ovocita.

Aumento del campo dopo il rilascio dall&#39;arresto profase in surf clam ovociti.

&#x30DB;&#x30C3;&#x30AD;&#x8C9D; (Spisula solidissima) &#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C; I &#x671F;&#x524D;&#x671F;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x306E;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2;&#x3068;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x53D7;&#x7CBE;&#x307E;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x902E;&#x6355;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5375;&#x5B50;&#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2; reinitiation&#x3001;&#x307E;&#x305A;&#x80DA;&#x80DE;&#x5D29;&#x58CA; (GVBD) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A3C;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x9AD8;&#x306B;&#x65BC;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x30BB;&#x30ED;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3057;&#x305F;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x6291;&#x5236;&#x7CBE;&#x5B50;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30BB;&#x30ED;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;-&#x8A98;&#x8D77;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x3044; KCl &#x8A98;&#x8D77;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4E0A;&#x3052;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8003;&#x3048;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x30A2;&#x30B5;&#x30EA;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; GVBD&#x3002;CAMP &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x3088;&#x304F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8981;&#x4EF6;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3001;&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x3084;&#x30D2;&#x30C8;&#x30C7;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8; &#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3001;&#x30C9;&#x30ED;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x52D5;&#x7269;&#x754C;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;GVBD &#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30CF;&#x30DE;&#x30B0;&#x30EA;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x518D;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE; cAMP &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x4E0A;&#x3052;&#x308B;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x3069;&#x3061;&#x3089;&#x304B; KCl &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30BB;&#x30ED;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;-&#x8A98;&#x8D77; GVBD &#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306E; GVBD&#x3001;&#x5375;&#x5B50;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x6642;&#x306B;&#x6291;&#x5236;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x30D2;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BA;/&#x5375;&#x5B50;&#x306B;&#x4FB5;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3063;&#x305F;;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5375;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; &#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x5F8C;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BB;&#x30ED;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;, KCl &#x3084;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x306B;&#x53CD;&#x3057;&#x3066;&#x3001;GVBD &#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;SQ22536&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; cAMP &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x59A8;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3068; GVBD &#x3059;&#x3059;&#x307F;&#x304C;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x9045;&#x5EF6;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x3092;&#x793A;&#x3059; GVBD &#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x3001;MPF &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x306B;&#x5149;&#x3092;&#x6295;&#x3052;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;whereby &#x6E1B;&#x6570;&#x5206;&#x88C2; reinitiation &#x306E;&#x767A;&#x75C7;, &#x306A;&#x3044;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE; cAMP &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x524D;&#x671F;&#x902E;&#x6355;&#x30DB;&#x30C3;&#x30AD;&#x8C9D;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x6642;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3002;

&#xD30C;&#xB3C4; &#xC870;&#xAC1C; (Spisula solidissima) oocytes&#xB97C; &#xB0B4;&#xAC00; &#xBB34;&#xB300; &#xC758;&#xD5A5;&#xC5D0; &#xC591;&#xC0B0; meiosis&#xC758; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB0A8;&#xC544; &#xCCB4;&#xD3EC;&#xC774; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC815;&#xAE4C;&#xC9C0;. &#xC804;&#xCCB4; oocyte meiosis reinitiation, &#xBA3C;&#xC800; germinal &#xAE30; &#xC1E0; &#xC57D; (GVBD)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC785;&#xC99D; &#xB192;&#xC740; K(+) &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xB85C;&#xD1A0;&#xB2CC; &#xB4F1; &#xC815;&#xC790;&#xB97C; &#xD749;&#xB0B4; &#xB0B8; &#xC778;&#xACF5; &#xD65C;&#xC131; &#xC81C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD2B8;&#xB9AC; &#xD2B8; &#xBA3C; &#xD2B8;&#xC758; oocyte &#xCEA0;&#xD504; &#xC800;&#xD574; &#xC815;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xB85C;&#xD1A0;&#xB2CC;-&#xC720;&#xB3C4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; KCl &#xC720;&#xBC1C;, &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xB192;&#xC77C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xC870;&#xAC1C; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; GVBD. &#xBCF4;&#xAE30; &#xAC19;&#xC740; &#xB4DC;&#xB86D;&#xC740; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xC655;&#xAD6D;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC591;&#xC11C;&#xB958; &#xB098; &#xBD88;&#xAC00;&#xC0AC;&#xB9AC; oocytes &#xBC0F; &#xC9C0;&#xC6D0;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; &#xD655;&#xC7A5; oocyte&#xC5D0; &#xD558;&#xB77D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC798; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC694;&#xAD6C; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xCEA0;&#xD504; &#xC218;&#xC900;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xAC1C; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; GVBD&#xC758; &#xCEA0;&#xD504; &#xC885;&#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; oocyte &#xCEA0;&#xD504; &#xC218;&#xCE58;&#xB97C; &#xB192;&#xC774; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD2B8;&#xB9AC; &#xD2B8; &#xBA3C; &#xD2B8;, &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A; &#xC558; &#xC5B4; &#xC5B4;&#xB290; KCl &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xB85C;&#xD1A0;&#xB2CC;-&#xC720;&#xB3C4; GVBD &#xBC1C;&#xACAC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB294; oocytes, &#xC218;&#xC815; &#xC2DC; GVBD&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xD4E8;&#xC988;/&#xCE68;&#xD22C; oocytes; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xC2E4;&#xD328; &#xB54C;&#xBB38;&#xC774; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, oocyte &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB4F1;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xC544;&#xB2C8;&#xC5C8;&#xB2E4;. Oocyte&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xCE21;&#xC815; &#xC138;&#xB85C;&#xD1A0;&#xB2CC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD6C4; &#xB808;&#xBCA8; &#xCEA0;&#xD504;, KCl &#xB610;&#xB294; &#xC815;&#xC790;, &#xAE30;&#xB300;, &#xBC18;&#xB300;&#xB294; GVBD &#xC804;&#xC5D0; &#xCEA0;&#xD504; &#xB808;&#xBCA8; &#xC0C1;&#xC2B9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. SQ22536, adenylyl cyclase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; oocyte &#xCEA0;&#xD504; &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC29;&#xD574;&#xC640; GVBD &#xC9C4;&#xD589; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC9C0;&#xCCB4;&#xC640; GVBD&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xC77C;&#xBC18; &#xCEA0;&#xD504; &#xC0C1;&#xC2B9;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC791;&#xC5C5; MPF&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xACBD;&#xB85C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;&#xC5D0; &#xBE5B;&#xC774; &#xB098; &#xACE0;&#xAC00; &#xBA74; meiosis reinitiation&#xC758; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xC99D;&#xAC00;, &#xD558;&#xC9C0; oocyte &#xCEA0;&#xD504; &#xB808;&#xBCA8;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xACE0;&#xC720; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD30C;&#xB3C4; &#xC870;&#xAC1C; oocytes &#xC758;&#xD5A5; &#xCCB4;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00;.

Surf almeja (Spisula solidissima) ovocitos se gener&oacute; en la profase de la etapa de la meiosis, y permanecen detenidos en esta etapa hasta la fertilizaci&oacute;n. Reinicio de la meiosis del ovocito completo, primero evidenciado por la ruptura de la ves&iacute;cula germinal (GVBD), puede ser inducida por los activadores artificiales imitando el esperma, como alta capacidad o serotonina. Informes anteriores indican que los tratamientos pensaban para aumentar el nivel de ovocitos campo inhibido esperma serotonina por o, pero no inducidas por el KCl, GVBD en ovocitos de almeja. Estas observaciones extienden el requisito conocido por una ca&iacute;da de ovocitos campo niveles en mam&iacute;feros, apoyo y ovocitos de anfibios o estrellas de mar la vista una gota es universalmente importante en todo el reino animal. Hemos revisado la dependencia campamento de GVBD en ovocitos de almeja y encontr&oacute; que varios tratamientos que elevar los niveles de campo de ovocitos no, sorprendentemente, afect&oacute; ambos KCl serotonina por o GVBD. Tales tratamientos, sin embargo, inhibici&oacute;n GVBD sobre inseminaci&oacute;n de los ovocitos, pero esto fue debido a la falta de espermatozoides fusible/penetrar los ovocitos; as&iacute;, no era una inhibici&oacute;n de la activaci&oacute;n de ovocitos como tal. Mediciones directas de ovocitos campo niveles despu&eacute;s de la activaci&oacute;n de serotonina, KCl o esperma demostr&oacute; que, contrariamente a lo esperado, hay un aumento en los niveles de campo antes de GVBD. Con SQ22536, un inhibidor de la ciclasa del adenylyl, el aumento en el nivel de campo de ovocitos en parte fue prevenido y GVBD procedi&oacute;, pero con un retraso significativo, indicando que el campo normal aumentar facilita GVBD. Nuestro trabajo arroja luz sobre la diversidad de caminos r&iacute;o arriba hacia la activaci&oacute;n del MPF y proporciona un modelo &uacute;nico por el que la aparici&oacute;n de reinicio de la meiosis se asocia con un aumento, no una disminuci&oacute;n, en los niveles de campo de ovocitos.

Aumento del campo sobre el lanzamiento de la detenci&oacute;n de la profase en ovocitos de almeja de surf.

&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6D3B;&#x529B;&#x3001; &#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x3001; &#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x53D7;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x3002;&#x7531;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x9176;&#xFF0C;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x4E8C;&#x916F;&#x9176; (&#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B;)&#xFF0C;&#x540E;&#x8005;&#x662F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x96BE;&#x6C11;&#x8425;&#x9000;&#x5316;&#x63A7;&#x5236;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x3002;&#x9499;&#x8C03;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027; PDE (PDE1) &#x548C;&#x8425;&#x7279;&#x5B9A; PDE &#xFF08;PDE4&#xFF09; &#x6D3B;&#x52A8;&#x4EE5;&#x524D;&#x6807;&#x8BC6;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B;&#x4E0E;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C; (50%-60%&#xFF09; &#x548C;&#x5FAE;&#x7C92;&#x7684;&#x5206;&#x6570; &#xFF08;30%-50%&#xFF09; &#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x548C;&#x6709;&#x8425; cGMP &#x6BD4;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; PDE1A&#xFF0C;PDE1&#xFF0C;&#x5907;&#x9009;&#x6848;&#x6587;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5934;&#x90E8;&#x7684;&#x8D64;&#x9053;&#x90E8;&#x5206;&#x548C;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7684;&#x4E2D;&#x671F;&#x548C;&#x4E3B;&#x8981;&#x90E8;&#x5206;&#x548C; PDE3A &#x53D1;&#x73B0;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5934;&#x90E8;&#x7684; postacrosomal &#x7F51;&#x6BB5;&#x4E0A;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x786E;&#x8BA4; PDE1A &#x548C; PDE3A &#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#xFF0C;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x7C73;&#x529B;&#x519C;&#x3001; PDE3 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0A;&#x5347;&#x7EA6; 15%&#xFF0C;&#x4F46;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x7CBE;&#x5B50;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A; PDE3 &#x8868;&#x793A;&#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x5C0F;&#x90E8;&#x5206;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6D3B;&#x52A8;&#x603B;&#x91CF;&#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B; &#xFF08;10%&#x548C; 25%&#x4E2D;&#x6D77;&#x536B; X 100 &#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x548C;&#x5FAE;&#x7C92;&#x5206;&#x6570;&#x5206;&#x522B;&#xFF09;&#x3002;PDE1A &#x6D3B;&#x52A8;&#x6216;&#x4E4B;&#x540E;&#x90E8;&#x5206;&#x7EAF;&#x5316;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x4EA4;&#x6362;&#x8272;&#x8C31;&#x4E0D;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E86;&#x9499; + &#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#x3002;&#x7535;&#x6CF3;&#x6280;&#x672F;&#x5728;&#x672C;&#x673A;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0E;&#x53D6;&#x5F97;&#x7684;&#x6210;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x7D27;&#x7D27;&#x5730;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; PDE1A&#x3002;EGTA + EDTA&#x3001; &#x4E09;&#x6C1F;&#x62C9;&#x55EA;&#x6216;&#x5C3F;&#x7D20;&#x4E0E;&#x5B75;&#x5316;&#x5E76;&#x4E0D;&#x6E38;&#x79BB; PDE1A-&#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x590D;&#x6742;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; PDE1A &#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6C38;&#x4E45;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x4E0E;&#x9499;&#x8C03;&#x7D20;&#x548C; PDE3A &#x5728;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E2D;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x4E8C;&#x916F;&#x9176; PDE1A&#xFF0C;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

Mammalian sperm motility, capacitation, and the acrosome reaction are regulated by signal transduction systems involving cAMP as a second messenger. Levels of cAMP are controlled by two key enzymes, adenylyl cyclase and phosphodiesterases (PDEs), the latter being involved in cAMP degradation. Calmodulin-dependent PDE (PDE1) and cAMP-specific PDE (PDE4) activities were previously identified in spermatozoa via the use of specific inhibitors. Here we report that human sperm PDEs are associated with the plasma membrane (50%-60%) as well as with the particulate fraction (30%-50%) and have more affinity for cAMP than cGMP. Immunocytochemical data indicated that PDE1A, a variant of PDE1, is localized on the equatorial segment of the sperm head as well as on the mid and principal pieces of the flagellum, and that PDE3A is found on the postacrosomal segment of the sperm head. Immunoblotting confirmed the presence of PDE1A and PDE3A isoforms in spermatozoa. Milrinone, a PDE3 inhibitor, increased intracellular levels of cAMP by about 15% but did not affect sperm functions, possibly because PDE3 represents only a small proportion of the sperm total PDE activity (10% and 25% in Triton X-100 soluble and particulate fractions, respectively). PDE1A activity in whole sperm extract or after partial purification by anion-exchange chromatography was not stimulated by calcium + calmodulin. Results obtained with electrophoresis in native conditions indicated that calmodulin is tightly bound to PDE1A. Incubation with EGTA + EDTA, trifluoperazine, or urea did not dissociate the PDE1A-calmodulin complex. These results suggest that PDE1A is permanently activated in human spermatozoa.

Presence of cyclic nucleotide phosphodiesterases PDE1A, existing as a stable complex with calmodulin, and PDE3A in human spermatozoa.

La motilit&eacute; des spermatozo&iuml;des chez les mammif&egrave;res, capacitation et la r&eacute;action acrosomique sont r&eacute;gies par des syst&egrave;mes de transduction de signal impliquant le cAMP comme un second messager. Taux d&#39;AMPc sont contr&ocirc;l&eacute;s par deux enzymes-cl&eacute;s, l&#39;ad&eacute;nylcyclase et phosphodiest&eacute;rases (PDE), ce dernier &eacute;tant impliqu&eacute;e dans la d&eacute;gradation de l&#39;AMPc. PDE de la calmoduline-d&eacute;pendante (PDE1) et activit&eacute;s cAMP-PDE (PDE4) ont d&eacute;j&agrave; &eacute;t&eacute; identifi&eacute;es dans les spermatozo&iuml;des gr&acirc;ce &agrave; l&#39;utilisation d&#39;inhibiteurs sp&eacute;cifiques. Nous rapportons ici qu&#39;EDP de sperme humain est associ&eacute;s avec la membrane plasmique (50 % - 60 %), ainsi qu&#39;avec la fraction particulaire (30 % - 50 %) et ont plus d&#39;affinit&eacute; pour le cAMP de cGMP. Donn&eacute;es immunocytochimiques indiquent que la PDE1A, une variante de la PDE1, est localis&eacute;e sur le segment &eacute;quatorial de la t&ecirc;te des spermatozo&iuml;des, ainsi que sur les pi&egrave;ces moyennes et principales du flagelle, et que PDE3A se trouve sur la partie postacrosomal de la t&ecirc;te du spermatozo&iuml;de. Immunobuvardage ont confirm&eacute; la pr&eacute;sence des isoformes de PDE1A et PDE3A dans les spermatozo&iuml;des. Milrinone, un inhibiteur de la PDE3, augmente la concentration intracellulaire d&#39;AMPc d&#39;environ 15 % mais n&#39;affecte pas fonctions de sperme, peut-&ecirc;tre parce que la PDE3 repr&eacute;sente seulement une petite proportion de l&#39;activit&eacute; PDE totale de spermatozo&iuml;des (10 % et 25 % dans les fractions solubles et particulaires de Triton X-100, respectivement). Activit&eacute; PDE1A dans l&#39;extrait de sperme entier ou apr&egrave;s que purification partielle par chromatographie &eacute;changeuse d&#39;anions n&#39;a pas &eacute;t&eacute; stimul&eacute;e par le calcium + calmoduline. Les r&eacute;sultats obtenus par &eacute;lectrophor&egrave;se en conditions natives a indiqu&eacute; que la calmoduline est intimement li&eacute;e &agrave; PDE1A. L&#39;incubation avec l&#39;EGTA + EDTA, trifluop&eacute;razine ou l&#39;ur&eacute;e ne pas dissocier le complexe PDE1A-calmoduline. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que la PDE1A est d&eacute;finitivement activ&eacute; dans les spermatozo&iuml;des humains.

Pr&eacute;sence de nucl&eacute;otides cycliques phosphodiest&eacute;rases PDE1A, existant en tant qu&#39;un complexe avec la calmoduline et PDE3A dans les spermatozo&iuml;des humains stable.

Vorhandensein von zyklisch-nukleotid Phosphodiesterasen PDE1A bestehenden als stabilen Komplex mit Calmodulin und PDE3A in menschlichen Spermien.

Motilit&agrave; degli spermatozoi dei mammiferi, capacitazione e la reazione acrosomiale sono regolati da sistemi di trasduzione del segnale che coinvolgono cAMP come secondo messaggero. Livelli di cAMP sono controllati da due enzimi chiave, adenil ciclasi e fosfodiesterasi (PDE), l&#39;essere quest&#39;ultimo coinvolto nella degradazione di cAMP. CAMP-specifiche PDE (PDE4) attivit&agrave; e PDE calmodulina-dipendente (PDE1) precedentemente sono state identificate in spermatozoi attraverso l&#39;uso di inibitori specifici. Qui riportiamo che PDEs sperma umano sono associate con la membrana del plasma (50% - 60%) cos&igrave; come con la frazione di particolato (30-50%) e hanno pi&ugrave; affinit&agrave; per il cAMP di cGMP. Immunocitochimica dati hanno indicato che la PDE1A, una variante di PDE1, &egrave; localizzato sul segmento equatoriale della testa degli spermatozoi, cos&igrave; come sui pezzi principali e met&agrave; del flagello, e che PDE3A si trova sul segmento di postacrosomal della testa degli spermatozoi. Immunoblotting ha confermato la presenza di isoforme di PDE1A e PDE3A in spermatozoi. Milrinone, un inibitore di PDE3, livelli intracellulari di cAMP &egrave; aumentato di circa il 15%, ma non influisce sulle funzioni di sperma, forse perch&eacute; PDE3 rappresenta solo una piccola percentuale dell&#39;attivit&agrave; dello sperma totale PDE (10% e 25% nelle frazioni solubili e particolato Triton X-100, rispettivamente). Attivit&agrave; PDE1A in tutta sperma Estratto o dopo parziale purificazione mediante cromatografia a scambio anionico non era stimolato da calcio + calmodulina. Risultati ottenuti con l&#39;elettroforesi in condizioni native indicano che quello calmodulina &egrave; strettamente associato a PDE1A. Incubazione con EGTA + EDTA, trifluoperazina o urea non ha fatto dissociare il complesso PDE1A-calmodulina. Questi risultati suggeriscono che la PDE1A &egrave; permanentemente attivato in spermatozoi umani.

Presenza di nucleotide ciclico fosfodiesterasi PDE1A, esistente come un complesso con la calmodulina e PDE3A in spermatozoi umani stabile.

&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3068;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F1D;&#x9054;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B8;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;Pde&#xFF09;&#x3001;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x5F8C;&#x8005; 2 &#x3064;&#x306E;&#x9375;&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027; PDE (PDE1) &#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x56FA;&#x6709;&#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B;&#x5F0F; (PDE4) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50; PDEs &#x304C;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C; &#xFF08;50 &#xFF05; &#x301C; 60 &#xFF05;&#xFF09; &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7C92;&#x5B50;&#x753B;&#x5206; (30%-50%) &#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068; cGMP &#x3088;&#x308A;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3001;&#x97AD;&#x6BDB;&#x306E;&#x534A;&#x3070;&#x3001;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30D1;&#x30EB;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x982D;&#x90E8;&#x306E;&#x8D64;&#x9053;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x3001;PDE1A&#x3001;PDE1 &#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x304C;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068; PDE3A &#x7CBE;&#x5B50;&#x982D;&#x90E8;&#x306E; postacrosomal &#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x4E0A;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x306F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E; PDE1A &#x3068; PDE3A &#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DF;&#x30EB;&#x30EA;&#x30CE;&#x30F3;&#x306F; PDE3 &#x963B;&#x5BB3;&#x5264; cAMP &#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x7D04; 15 &#xFF05; &#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x306B; PDE3 &#x3060;&#x3051;&#x306F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x7DCF; PDE &#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x5272;&#x5408;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x7CBE;&#x5B50;&#x95A2;&#x6570;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093; (10 &#xFF5E; 25% &#x30C8;&#x30EA;&#x30C8;&#x30F3; X 100 &#x306E;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x3068;&#x7C92;&#x5B50;&#x72B6;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x6570;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;)&#x3002;PDE1A &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x5168;&#x4F53;&#x7CBE;&#x5B50;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; + &#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x4EA4;&#x63DB;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x90E8;&#x5206;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306B;&#x523A;&#x6FC0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x5F8C;&#x3002;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C7;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3068; PDE1A &#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; egta &#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8457;&#x3057;&#x304F; + EDTA&#x3001;&#x30B8;&#x30D1;&#x30EB;&#x30DF;&#x30C8;&#x30A4;&#x30EB;&#x30EC;&#x30B7;&#x30C1;&#x30F3;&#x30FC;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x5C3F;&#x7D20;&#x3068; PDE1A &#x30FB; &#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30C7;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;PDE1A &#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x6C38;&#x4E45;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x74B0;&#x72B6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; &#x30FB; &#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B8;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; PDE1A &#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;, &#x3068; PDE3A &#x3068;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

&#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC815;&#xC790; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, capacitation, &#xBC0F; acrosome &#xBC18;&#xC751; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800;&#xB85C; &#xCEA0;&#xD504;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; &#xB808;&#xBCA8; adenylyl cyclase &#xBC0F; phosphodiesterases (PDEs) &#xD6C4;&#xC790; &#xB418; &#xACE0; &#xCEA0;&#xD504; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD575;&#xC2EC; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Calmodulin &#xC885;&#xC18D; PDE (PDE1) &#xBC0F; &#xCEA0;&#xD504; &#xAD00;&#xB828; PDE (PDE4) &#xD65C;&#xB3D9; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; PDEs &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; (50%-60%) &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xBBF8; &#xB9BD; &#xC790; &#xBD84;&#xC218; (30%-50%)&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xBA70; cGMP &#xBCF4;&#xB2E4; &#xCEA0;&#xD504;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Immunocytochemical &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD45C;&#xC2DC; PDE1A, &#xBCC0;&#xC885; PDE1, &#xC2E0;&#xC124;, &#xC911;&#xC559;&#xACFC; &#xC8FC; &#xC870;&#xAC01; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC815;&#xC790; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC758; &#xC801;&#xB3C4; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; PDE3A &#xC815;&#xC790; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC758; postacrosomal &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;. Immunoblotting &#xBD84;&#xC2E0;&#xC5D0; isoforms PDE1A &#xBC0F; pde3a&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. Milrinone, PDE3 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xCEA0;&#xD504; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC57D; 15% &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A; &#xC558; &#xC5B4; &#xC815;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; PDE3 &#xC815;&#xC790; &#xCD1D; PDE &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC791;&#xC740; &#xBE44;&#xC728;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xBBC0;&#xB85C; (10%&#xC640; 25 %x-100 &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;&#xACFC; &#xBBF8; &#xB9BD; &#xC790; &#xBD84;&#xC218;&#xC5D0; &#xAC01;&#xAC01;). PDE1A &#xC804;&#xCCB4; &#xC815;&#xC790; &#xCD94;&#xCD9C; &#xB610;&#xB294; &#xBD80;&#xBD84; &#xC815;&#xD654; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xAD50;&#xD658; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE7C;&#xC298; + calmodulin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294; &#xD6C4; &#xD65C;&#xB3D9;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5BB;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; calmodulin pde1a&#xC5D0; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. EGTA + EDTA, trifluoperazine, &#xB610;&#xB294; &#xC6B0; &#xB808; &#xC544;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBD80; &#xD654; PDE1A calmodulin &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xC744; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; PDE1A &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBD84;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xC601;&#xAD6C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; calmodulin, &#xBC0F; pde3a&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC548;&#xC815;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xC874; &#xC21C;&#xD658; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; phosphodiesterases PDE1A&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;.

La motilidad esperm&aacute;tica mam&iacute;feros, capacitaci&oacute;n y la reacci&oacute;n acros&oacute;mica est&aacute;n regulados por sistemas de transducci&oacute;n de se&ntilde;al que el campamento como un segundo mensajero. Niveles de campo est&aacute;n controlados por dos enzimas claves, cyclase del adenylyl y las fosfodiesterasas (SEEP), siendo &eacute;sta &uacute;ltima implicado en la degradaci&oacute;n del campo. PDE dependiente de calmodulina (PDE1) y actividades de campo espec&iacute;fico PDE (PDE4) fueron identificadas previamente en espermatozoides mediante el uso de inhibidores espec&iacute;ficos. Aqu&iacute; divulgamos que PDEs espermatozoides humanos est&aacute;n asociadas con la membrana plasm&aacute;tica (50-60%), as&iacute; como con la fracci&oacute;n particulada (30% - 50%) y tienen m&aacute;s afinidad por el campamento de cGMP. Immunocytochemical datos indicaron que la PDE1A, una variante del PDE1, se localiza en la parte Ecuatorial de la cabeza del espermatozoide, as&iacute; como en las piezas principales y mediadas del flagelo, y que PDE3A se encuentra en el segmento postacrosomal de la cabeza del espermatozoide. Immunoblotting confirm&oacute; la presencia de isoformas de PDE1A y PDE3A en espermatozoides. Milrinona, un inhibidor de la PDE3, incrementaron los niveles intracelulares del campo alrededor del 15% pero no afect&oacute; las funciones de la esperma, posiblemente porque PDE3 representa s&oacute;lo una peque&ntilde;a proporci&oacute;n de la actividad PDE total de esperma (10% y 25% en fracciones soluble y particulada de Triton X-100, respectivamente). Actividad PDE1A en esperma todo extracto o despu&eacute;s de la purificaci&oacute;n parcial por cromatograf&iacute;a de intercambio ani&oacute;nico no fue estimulada por Calcio + calmodulina. Resultados obtenidos con electroforesis en condiciones nativas indicaron que calmodulina est&aacute; estrechamente unido al PDE1A. Incubaci&oacute;n con EGTA + EDTA, trifluoperazina o urea no disociar el complejo PDE1A-calmodulina. Estos resultados sugieren que el PDE1A est&aacute; activado permanentemente en espermatozoides humanos.

Presencia de nucle&oacute;tico c&iacute;clico fosfodiesterasas PDE1A, existiendo como un establo complejo con la calmodulina y PDE3A en espermatozoides humanos.

&#x7CBE;&#x5B50;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x5404;&#x79CD;&#x671F;&#x95F4;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x751F;&#x6D3B;&#x662F;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x6210;&#x719F;&#x548C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x9E21;&#x86CB;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x5148;&#x51B3;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x548C;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x53D7;&#x6D89;&#x53CA;&#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7; &#xFF08;cAMP&#xFF09; &#x4F5C;&#x4E3A;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x8FD9;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x901A;&#x8FC7;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#xFF08;PKA&#xFF09; &#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x95F4;&#x63A5;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x63A7;&#x5236;&#x78F7;&#x9178;&#x4E8C;&#x916F;&#x9176; (&#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B;) &#x4E0E;&#x817A;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176; (AC) &#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x5E73;&#x8861;&#xFF0C;&#x7531;&#x54EA;&#x4E9B;&#x8D1F;&#x8D23;&#x5176;&#x9000;&#x5316;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8BC4;&#x4F30;&#x671F;&#x95F4;&#x81F4;&#x80CE;&#x513F;&#x8110;&#x8840;&#x8840;&#x6E05;&#x8D85;&#x6EE4;&#x6DB2; (FCSu) &#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x548C;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9499;&#x79BB;&#x5B50;&#x8F7D;&#x4F53; A23187 &#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x6C34;&#x5E73;&#x3001; &#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B;&#x548C; PKA &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A; PKA &#x6D3B;&#x52A8;&#x662F;&#x9AD8;&#x6BD4;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5728; noncapacitating &#x7CBE;&#x5B50;&#x548C;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0B;&#x964D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x79CD;&#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#x3002;A23187 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x662F;&#x589E;&#x52A0;&#x5728;&#x8425;&#x5730;&#x548C; PKA &#x6D3B;&#x52A8;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728;&#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x51C0;&#x8425;&#x96C6;&#x4E2D;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x4EA4;&#x6D41;&#xFF0C;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x662F;&#x6052;&#x5B9A;&#x7684;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x548C;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x90FD;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x548C; PKA &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;/&#x6216;&#x8861;&#x91CF;&#x6574;&#x4E2A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x8425;&#x5730;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5E76;&#x4E0D;&#x53CD;&#x6620;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x80DE;&#x5185;&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x548C;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A&#x3002;

Spermatozoa undergo a variety of changes during their life that are prerequisites to their maturation and ability to fertilize eggs. Mammalian sperm capacitation and acrosome reaction are regulated by signal transduction systems involving cyclic adenosine monophosphate (cAMP) as a second messenger. This second messenger acts through the activation of protein kinase A (PKA) and indirectly regulates protein tyrosine phosphorylation. cAMP levels are controlled by a balance of phosphodiesterases (PDEs) and adenylyl cyclase (AC) enzymatic activities, which are responsible for its degradation and production, respectively. The aim of this study was to evaluate the possible relationship between the intracellular levels of cAMP and PDE and PKA activities during human sperm capacitation induced by fetal cord serum ultrafiltrate (FCSu) and acrosome reaction induced by calcium ionophore A23187. We report that PKA activity was higher in capacitating than in noncapacitating spermatozoa and that intracellular levels of cAMP decreased but that PDE activity remained constant during capacitation. The acrosome reaction induced by A23187 was associated with increases in cAMP and PKA activity but not in PDE activity. These results strongly suggest that net cAMP concentration is under the control of AC, since PDE activity is constant during sperm capacitation and the acrosome reaction. Moreover, the results suggest that low levels of cAMP are sufficient for capacitation and PKA activation and/or that the cAMP concentration measured in whole spermatozoa does not reflect the effective intracellular cAMP levels present in specific compartments of these cells.

Activation of protein kinase A during human sperm capacitation and acrosome reaction.

Les spermatozo&iuml;des subissent diff&eacute;rentes modifications au cours de leur vie qui sont indispensables &agrave; leur maturation et leur capacit&eacute; &agrave; f&eacute;conder les &oelig;ufs. Capacitation des spermatozo&iuml;des chez les mammif&egrave;res et la r&eacute;action acrosomique sont r&eacute;gies par des syst&egrave;mes de transduction de signal impliquant l&#39;ad&eacute;nosine monophosphate cyclique (AMPc) comme un second messager. Ce second messager agit par l&#39;interm&eacute;diaire de l&#39;activation de la prot&eacute;ine kinase A (PKA) et r&eacute;glemente indirectement la phosphorylation de tyrosine des prot&eacute;ines. taux d&#39;AMPc sont contr&ocirc;l&eacute;s par la pr&eacute;pond&eacute;rance des phosphodiest&eacute;rases (PDE) et les activit&eacute;s enzymatiques de l&#39;ad&eacute;nylate cyclase (AC), qui sont responsables de sa d&eacute;gradation et de la production, respectivement. Le but de cette &eacute;tude &eacute;tait d&#39;&eacute;valuer la relation possible entre les taux intracellulaires d&#39;AMPc et PDE et PKA des activit&eacute;s au cours de la r&eacute;action acrosomique induite par l&#39;ionophore calcique A23187 et de capacitation des spermatozo&iuml;des humains induite par ultrafiltrat de s&eacute;rum foetal de cordon (FSCC). Les auteurs rapportent qu&#39;activit&eacute; PKA &eacute;tait plus &eacute;lev&eacute;e chez les permettre que dans les spermatozo&iuml;des noncapacitating et diminution de la concentration intracellulaire d&#39;AMPc, mais cette activit&eacute; de PDE est demeur&eacute;e constante au cours de la capacitation. La r&eacute;action acrosomique induite par l&#39;A23187 a &eacute;t&eacute; associ&eacute;e &agrave; des augmentations dans le cAMP et l&#39;activit&eacute; de la PKA, mais pas dans l&#39;activit&eacute; de PDE. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent fortement que la concentration d&#39;AMPc nette est sous le contr&ocirc;le de l&#39;AC, &eacute;tant donn&eacute; que l&#39;activit&eacute; de PDE est constante au cours de la capacitation des spermatozo&iuml;des et la r&eacute;action acrosomique. En outre, les r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que les faibles niveaux de cAMP sont suffisantes pour capacitation et activation PKA et/ou que la concentration d&#39;AMPc mesur&eacute;e dans les spermatozo&iuml;des entiers ne refl&egrave;te pas les taux d&#39;AMPc intracellulaire efficaces pr&eacute;sents dans des milieux sp&eacute;cifiques de ces cellules.

Activation de la prot&eacute;ine kinase A, au cours de la r&eacute;action d&#39;acrosome et de capacitation des spermatozo&iuml;des humains.

Aktivierung der Proteinkinase A bei menschlichen Spermien Kapazitation und Akrosomreaktion.

Gli spermatozoi subiscono una serie di modifiche nel corso della loro vita che sono prerequisiti per la loro maturazione e la capacit&agrave; di fecondare le uova. Capacitazione degli spermatozoi dei mammiferi e reazione acrosomiale sono regolati da sistemi di trasduzione del segnale che coinvolgono monofosfato di adenosina ciclico (accampamento) come secondo messaggero. Questo secondo messaggero agisce attraverso l&#39;attivazione della chinasi di proteina A (PKA) e regola indirettamente la fosforilazione della tirosina della proteina. livelli di campi sono controllati da un equilibrio della fosfodiesterasi (PDE) e attivit&agrave; enzimatica adenilato ciclasi (AC), che sono responsabili per la degradazione e la produzione, rispettivamente. Lo scopo di questo studio era di valutare la possibile relazione tra i livelli intracellulari di cAMP e PDE e PKA attivit&agrave; durante la capacitazione degli spermatozoi umani indotta dal cordone fetale siero ultrafiltrato (FCSu) e reazione acrosomiale indotta da ionoforo calcio A23187. Segnaliamo che la PKA attivit&agrave; era superiore in capacitating che in noncapacitating spermatozoi e che livelli intracellulari di cAMP &egrave; diminuito, ma tale attivit&agrave; PDE &egrave; rimasto costante durante la capacitazione. La reazione acrosomiale indotta da A23187 &egrave; stata associata con aumenti in campo e l&#39;attivit&agrave; PKA, ma non in attivit&agrave; PDE. Questi risultati suggeriscono fortemente che netta concentrazione cAMP &egrave; sotto il controllo dell&#39;AC, poich&eacute; l&#39;attivit&agrave; PDE &egrave; costante durante la capacitazione degli spermatozoi e la reazione acrosomiale. Inoltre, i risultati suggeriscono che bassi livelli di cAMP sono sufficienti per la capacitazione e l&#39;attivazione di PKA e/o che la concentrazione di cAMP misurata in tutto spermatozoi non riflette l&#39;efficace cAMP intracellulare presente in specifici compartimenti di queste cellule.

Attivazione della chinasi di proteina A durante la reazione di capacitazione e Acrosoma degli spermatozoi umani.

&#x7CBE;&#x5B50;&#x306B;&#x306F;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x524D;&#x63D0;&#x6761;&#x4EF6;&#x3068;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3068;&#x5375;&#x3092;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x4E2D;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x751F;&#x6D3B;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3068;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x74B0;&#x72B6;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CE;&#x30B7;&#x30F3;&#x4E00;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; &#xFF08;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#xFF09; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x542B;&#x3080;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F1D;&#x9054;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x306F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A(PKA) &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;cAMP &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304C;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B8;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;Pde&#xFF09; &#x3068;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (AC) &#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x3068;&#x904B;&#x7528;&#x3067;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x8A98;&#x8D77;&#x80CE;&#x5150;&#x81CD;&#x5E2F;&#x8840;&#x6E05;&#x9650;&#x5916;&#x308D;&#x904E; &#xFF08;FCSu&#xFF09; &#x3068;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x8A98;&#x8D77;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30A4;&#x30AA;&#x30CE;&#x30D5;&#x30A9;&#x30A2; A23187 &#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x306F; cAMP &#x6FC3;&#x5EA6;&#x3068;&#x504F;&#x5FAE;&#x5206;&#x65B9;&#x7A0B;&#x5F0F;&#x3068; PKA &#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;.PKA &#x6D3B;&#x6027;&#x304C; noncapacitating &#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x3088;&#x308A; capacitating &#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3068; cAMP &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x304C;&#x305D;&#x306E; PDE &#x6D3B;&#x6027;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x4E2D;&#x306B;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;A23187 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC; PDE &#x6D3B;&#x6027;&#x3067;&#x306F;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x3068; PKA &#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3068;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x4E2D; PDE &#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x4E00;&#x5B9A;&#x3067;&#x3059;&#x306E;&#x3067;&#x7D14;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E; AC&#x3001;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5F37;&#x304F;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x304C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3068; PKA &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x304C;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; cAMP &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x533A;&#x753B;&#x5185;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A &#x306E;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3068;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x4E2D;&#x3002;

&#xBD84;&#xC2E0; &#xB2E4;&#xC591;&#xC744; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0DD;&#xD65C; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC131;&#xC219;&#xACFC; &#xACC4;&#xB780;&#xC744; &#xAE30;&#xB984; &#xC9C0; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC804;&#xC81C; &#xC870;&#xAC74;&#xC740; &#xBCC0;&#xACBD; &#xBC1B; &#xB2E4;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xBC0F; acrosome &#xBC18;&#xC751; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800;&#xB85C; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xC544;&#xB370;&#xB178;&#xC2E0; monophosphate (&#xCEA0;&#xD504;)&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A (PKA)&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xC9C1;&#xC811; &#xC870;&#xC808;. &#xCEA0;&#xD504; &#xB808;&#xBCA8; &#xC81C;&#xC5B4; (PDEs) phosphodiesterases &#xBC0F; adenylyl cyclase (AC) &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xADE0;&#xD615;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xCC45;&#xC784;&#xC740; &#xC800;&#xD558;&#xC640; &#xC0DD;&#xC0B0;, &#xAC01;&#xAC01;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xC801;&#xC740; &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xCF54;&#xB4DC; &#xD608; &#xCCAD; ultrafiltrate (FCSu)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xBC0F; &#xCE7C;&#xC298; ionophore a23187&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; acrosome &#xBC18;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC218;&#xC900;&#xACFC; PDE, PKA &#xD65C;&#xB3D9; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xB294;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; PKA &#xD65C;&#xB3D9; noncapacitating &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xB2E4; capacitating&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC558;&#xB2E4; &#xACE0; &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC218;&#xC900; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8; PDE &#xD65C;&#xB3D9; capacitation &#xB3D9;&#xC548; &#xC77C;&#xC815; &#xD558; &#xAC8C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. A23187&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; acrosome &#xBC18;&#xC751; PDE &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xCEA0;&#xD504;&#xC640; PKA &#xD65C;&#xB3D9; &#xC99D;&#xAC00;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAC15;&#xD558;&#xAC8C; PDE &#xD65C;&#xB3D9; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xBC0F; acrosome &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC77C;&#xC815; &#xB54C;&#xBB38; net &#xCEA0;&#xD504; &#xB18D;&#xB3C4; AC, &#xD1B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xACB0;&#xACFC; &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; &#xC800;&#xAE09;&#xC740; capacitation &#xBC0F; PKA&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xBC0F;/&#xB610;&#xB294; &#xCEA0;&#xD504; &#xB18D;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815; &#xC804;&#xCCB4; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC140;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xCEA0;&#xD504; &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xBC18;&#xC601; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xBC0F; acrosome &#xBC18;&#xC751; &#xC911; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;.

Espermatozoides se someten a una variedad de cambios durante su vida que son requisitos previos para su maduraci&oacute;n y su capacidad para fertilizar los huevos. Mam&iacute;feros esperm&aacute;tica y reacci&oacute;n acros&oacute;mica son reguladas por sistemas de transducci&oacute;n de se&ntilde;al que implican monofosfato de adenosina c&iacute;clico (cAMP) como un segundo mensajero. Este segundo mensajero act&uacute;a mediante la activaci&oacute;n de la prote&iacute;na quinasa A (PKA) y regula indirectamente la fosforilaci&oacute;n de la tirosina de la prote&iacute;na. los niveles de campo son controlados por un equilibrio de las fosfodiesterasas (SEEP) y actividades enzim&aacute;ticas de adenylyl ciclasa (AC), que son responsables de su degradaci&oacute;n y producci&oacute;n, respectivamente. El objetivo de este estudio fue evaluar la posible relaci&oacute;n entre los niveles intracelulares de campamento y actividades PDE y PKA durante la capacitaci&oacute;n esperm&aacute;tica humana inducida por cord&oacute;n fetal suero ultrafiltrado (FSCC) y reacci&oacute;n acros&oacute;mica inducida por ion&oacute;foro del calcio A23187. Divulgamos que la actividad PKA fue mayor en la capacitaci&oacute;n que en noncapacitating de espermatozoides y disminuci&oacute;n de los niveles intracelulares de campo que esa actividad de la PDE se mantuvo constante durante la capacitaci&oacute;n. La reacci&oacute;n del acrosoma inducida por A23187 se asoci&oacute; con incrementos en el campo y la actividad PKA pero no en la actividad de la PDE. Estos resultados sugieren fuertemente que neto campo concentraci&oacute;n est&aacute; bajo el control de la CA, puesto que la actividad de la PDE es constante durante la capacitaci&oacute;n esperm&aacute;tica y la reacci&oacute;n acros&oacute;mica. Por otra parte, los resultados sugieren que niveles bajos de campo son suficientes para la capacitaci&oacute;n y la activaci&oacute;n de la PKA y/o que el campo concentraci&oacute;n medida en espermatozoides todo no refleja los niveles de campo intracelulares efectivos presentes en compartimentos espec&iacute;ficos de estas c&eacute;lulas.

Activaci&oacute;n del kinase de prote&iacute;na A durante la reacci&oacute;n acros&oacute;mica y capacitaci&oacute;n de espermatozoides humanos.

&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x9996;&#x5148;&#x8981;&#x4E86;&#x89E3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x6761;&#x6B3E;&#xFF0C;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5982;&#x4F55;&#x51C6;&#x5907;&#x65BD;&#x80A5;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#xFF0C;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x54EA;&#x4E9B;&#x56E0;&#x7D20;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x5375;&#x5B50;&#x548C;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x521D;&#x59CB;&#x4FE1;&#x53F7;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x5B9E;&#x73B0;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x6B63;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6210;&#x50CF;&#x3001; &#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5939;&#x7D27;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x3002;&#x5355;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x663E;&#x793A;&#x9690;&#x85CF;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x548C;&#x975E;&#x5747;&#x8D28;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E2D;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7406;&#x8868;&#x5F81;&#x5FC5;&#x987B;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x672A;&#x6765;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x529F;&#x80FD;&#x7814;&#x7A76;&#x7531;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5939;&#x7D27;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x5728;&#x4E8E;&#x67E5;&#x660E;&#x7279;&#x5B9A;&#x5206;&#x7EC4;&#x7684;&#x7537;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5982;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4E0E; globozoospermia &#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3; prefertilization &#x4E8B;&#x4EF6;&#x5C06;&#x5141;&#x8BB8;&#x57FA;&#x4E8E;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x80B2;&#x3001; &#x975E;&#x8F85;&#x52A9;&#x751F;&#x6B96;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

&#x751F;&#x7406;&#x4E0E;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5728;&#x4EBA;&#x7684; prefertilization &#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;

This research aims firstly to understand, in cellular and molecular terms, how a mature human spermatozoon is prepared for fertilization, and secondly, to identify what factors are involved in the initial signalling interactions between the egg and spermatozoon. In order to achieve these objectives, a combination of approaches is being used, including single-cell imaging, patch clamping and proteomics. Single-cell imaging reveals hidden complexity and heterogeneity in signalling responses in spermatozoa. Characterization of cell physiology at the single-cell level must be a future aim, including the study of ion channel expression and function by patch clamping. Proteomic experiments are aimed at identifying defects in protein expression in specific subgroups of men, e.g. those with globozoospermia. A better understanding of prefertilization events will allow the development of non-assisted reproductive therapy, drug-based treatments for male infertility.

Physiological and proteomic approaches to studying prefertilization events in the human.

Cette recherche vise d&#x26;#39;abord &#xE0; comprendre, en termes mol&#xE9;culaires et cellulaires, comment un spermatozo&#xEF;de humain mature est pr&#xEA;t pour la f&#xE9;condation, et d&#x26;#39;autre part, d&#x26;#39;identifier quels sont les facteurs impliqu&#xE9;s dans les interactions initiales de signalisation entre l&#x26;#39;&#x153;uf et le spermatozo&#xEF;de. Afin d&#x26;#39;atteindre ces objectifs, une combinaison d&#x26;#39;approches est utilis&#xE9;e, y compris une seule cellule d&#x26;#39;imagerie, patch clamp et de la prot&#xE9;omique. Simple-imagerie cellulaire r&#xE9;v&#xE8;le la complexit&#xE9; et l&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rog&#xE9;n&#xE9;it&#xE9; cach&#xE9;e dans la signalisation des r&#xE9;ponses dans les spermatozo&#xEF;des. Caract&#xE9;risation de la physiologie cellulaire au niveau unicellulaire doit &#xEA;tre un objectif futur, y compris l&#x26;#39;&#xE9;tude de l&#x26;#39;expression des canaux ioniques et de la fonction par patch-clamp. Exp&#xE9;riences prot&#xE9;omiques visent &#xE0; identifier les d&#xE9;fauts dans l&#x26;#39;expression des prot&#xE9;ines dans les sous-groupes sp&#xE9;cifiques d&#x26;#39;hommes, par exemple ceux qui globozoospermia. Une meilleure compr&#xE9;hension des &#xE9;v&#xE9;nements prefertilization permettra le d&#xE9;veloppement de la non-th&#xE9;rapie assist&#xE9;e par la reproduction, la drogue &#xE0; base de traitements pour l&#x26;#39;infertilit&#xE9; masculine.

Approches physiologiques et prot&#xE9;omique &#xE0; &#xE9;tudier les faits dans le Prefertilization humaines

Physiologische und Proteom-Ans&#xE4;tze f&#xFC;r das Studium prefertilization Ereignisse in der menschlichen.

Questa ricerca mira in primo luogo per capire, in termini di cellulari e molecolari, come uno spermatozoo umano maturo &egrave; preparato per la fecondazione, e in secondo luogo, di identificare quali fattori sono coinvolti nelle interazioni segnalazione iniziale tra l&#39;uovo e spermatozoo. Per conseguire questi obiettivi, una combinazione di approcci sta usanda, tra cui cella singola imaging, patch di serraggio e proteomica. Cella singola imaging rivela nascosta complessit&agrave; ed eterogeneit&agrave; nella segnalazione responses in spermatozoi. Caratterizzazione della fisiologia cellulare a livello di cella singola deve essere un obiettivo futuro, compreso lo studio dell&#39;espressione di canale ionico e la funzione di patch di serraggio. Proteomic esperimenti sono finalizzati all&#39;individuazione di difetti di espressione della proteina in alcuni sottogruppi di uomini, ad esempio quelli con globozoospermia. Una migliore comprensione degli eventi prefertilization permetter&agrave; l&#39;evoluzione della terapia riproduttiva non assistita, trattamenti a base di farmaci per l&#39;infertilit&agrave; maschile.

Fisiologica e proteomic si avvicina allo studio di eventi prefertilization nell&#39;essere umano.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x304C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6E96;&#x5099;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x7528;&#x8A9E;&#x3067;&#x3001;&#x7406;&#x89E3;&#x3057;&#x3001;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306B;&#x3001;&#x5375;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x8981;&#x56E0;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x307E;&#x305A;&#x76EE;&#x6307;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x3084;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x96A0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8907;&#x96D1;&#x6027;&#x3068;&#x7570;&#x8CEA;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x3067;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x7537;&#x6027;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3067;&#x306F;&#x3001;globozoospermia&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3001;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x76EE;&#x7684;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; prefertilization&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x826F;&#x3044;&#x7406;&#x89E3;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x751F;&#x6B96;&#x88DC;&#x52A9;&#x6CBB;&#x7642;&#x3001;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x598A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x85AC;&#x5264;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D2;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Prefertilization&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x5B66;&#x3076;&#x306B;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB85C; &#xCCAB;&#xC9F8; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; &#xC218;&#xC815;, &#xC900;&#xBE44; &#xBC29;&#xBC95; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC774; &#xACE0; &#xBD84;&#xC790; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xB458;&#xC9F8;, &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC694;&#xC18C;&#xAC00; &#xACC4;&#xB780;&#xACFC; &#xC815;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2E0;&#xD638; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBC29;&#xBC95; &#xC870;&#xD569; &#xC0AC;&#xC6A9;, &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xC601;&#xC0C1; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD551;&#xACFC; proteomics&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2F1;&#xAE00; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC228;&#xACA8;&#xC9C4;&#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131;&#xACFC; &#xBD84;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC9C8;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC758; &#xD328;&#xCE58; &#xD074;&#xB7A8;&#xD551; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xC628; &#xCC44;&#xB110; &#xC2DD; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C; &#xC5EC;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xBA74; globozoospermia&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xADF8; &#xB0A8;&#xC790;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xD558;&#xC704; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD45C;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xD568; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xACA8;&#xB0E5; Proteomic &#xC2E4;&#xD5D8;. Prefertilization &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xBE44; &#xBCF4;&#xC870; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC694;&#xBC95;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; &#xC218; &#xC788;&#xAC8C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC0DD;&#xB9AC; &#xBC0F; proteomic &#xC778;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; prefertilization &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xC811;&#xADFC; &#xD55C;&#xB2E4;.

Esta investigaci&#xF3;n tiene como objetivo principal entender, en t&#xE9;rminos moleculares y celulares, como un espermatozoide humano maduro se prepara para la fertilizaci&#xF3;n, y en segundo lugar, para identificar qu&#xE9; factores est&#xE1;n implicados en las interacciones iniciales de se&#xF1;alizaci&#xF3;n entre el &#xF3;vulo y el espermatozoide. Con el fin de alcanzar estos objetivos, una combinaci&#xF3;n de enfoques que se est&#xE1;n utilizando, incluso una sola c&#xE9;lula de im&#xE1;genes, de sujeci&#xF3;n de parches y la prote&#xF3;mica. Una sola c&#xE9;lula de im&#xE1;genes revela la complejidad y la heterogeneidad oculta en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de las respuestas en los espermatozoides. Caracterizaci&#xF3;n de la fisiolog&#xED;a celular en el nivel de c&#xE9;lulas individuales debe ser un objetivo futuro, incluyendo el estudio de la expresi&#xF3;n de los canales de iones y la funci&#xF3;n de patch clamp. Experimentos prote&#xF3;micos se dirigen a la identificaci&#xF3;n de defectos en la expresi&#xF3;n de la prote&#xED;na en subgrupos espec&#xED;ficos de los hombres, por ejemplo, aquellos con globozoospermia. Una mejor comprensi&#xF3;n de los acontecimientos prefertilizaci&#xF3;n permitir&#xE1; el desarrollo de la terapia asistida no reproductiva, drogas a base de tratamientos para la infertilidad masculina.

Enfoques fisiol&#xF3;gicos y Prote&#xF3;mica para el estudio Eventos prefertilizaci&#xF3;n en el humano

&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x662F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D7;&#x7CBE;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x52A8;&#x529B;&#x53CA;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x53D7;&#x8425;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x88AB;&#x5377;&#x5165;&#x5916;&#x89C2;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x8425;&#x5730;/&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; (PK-A) &#x9014;&#x5F84;&#x53C2;&#x4E0E;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E;&#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x54FA;&#x4E73;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x5728;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6F84;&#x6E05;&#x8425; PK &#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#x5E76;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8FD9;&#x5BF9; p32 &#x7CBE;&#x5B50;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x5916;&#x89C2;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;P32 &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x662F;&#x5B75;&#x5316; IBMX/db-&#x8425;&#x5730;&#xFF0C;H-89&#x3001; PK A &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x6216; bistyrphostin&#x3001; capacitating &#xFF08;&#x5398;&#x7C73;&#xFF09; &#x6216;&#x975E;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x6761;&#x4EF6; (NCM) &#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x6297;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5; SDS &#x63D0;&#x53D6;&#x548C;&#x5206;&#x79BB;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x65B0;&#x9C9C;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x540E;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x5F53;&#x732A;&#x4E86;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5728;&#x8F85;&#x4E4B;&#x4EE5; H-89 &#x5398;&#x7C73; &#xFF08;50 microM&#xFF09; &#x6216; bistyrphostin &#xFF08;1.2 microM&#xFF09;&#xFF0C;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11; (P &lt; 0.001&#xFF09;&#x3002;P32 &#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x524D;&#x6240;&#x793A;&#x8981;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4E0D;&#x4E00;&#x5B9A;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x73B0;&#x8C61;&#x7684;&#x7ED3;&#x675F;&#x70B9;&#x6CA1;&#x6709;&#x8C03;&#x5236;&#x7684; IBMX/db-&#x8425;&#x5730; &#xFF08;100 microM/1 &#x6BEB;&#x7C73;&#xFF09;&#xFF0C;H-89 (50 microM&#xFF09; &#x6216; bistyrphostin &#xFF08;1.2 microM&#xFF09;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7BA1;&#x63A7;&#x65B9;&#x5F0F;&#x7565;&#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x6BD4;&#x4E3A;&#x5176;&#x4ED6;&#x54FA;&#x4E73;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x867D;&#x7136;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x7684;&#x8425;&#x5730; PK &#x4E3A;&#x548C;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x5916;&#x89C2;&#x7684; p32&#x3002;

&#x8425;&#x5730;&#x7684;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;

Second messengers are involved in sperm fertilizing potential, as both motility and the acrosome reaction are influenced by cAMP. Moreover, the activity of cyclic nucleotides is implicated in the appearance of tyrosine phosphorylated sperm proteins, which is associated with capacitation in the mammalian spermatozoa. Nevertheless, the involvement of the cAMP/protein kinase A (PK-A) pathway during pig sperm capacitation may be different from that observed in other mammals. The objective of the present study was to clarify the cAMP/PK-A pathway during the capacitation of porcine spermatozoa and to evaluate this impact on the p32 sperm tyrosine phosphoprotein appearance. The presence of p32 was assessed after incubating fresh pig sperm with IBMX/db-cAMP, H-89, a PK-A inhibitor or bistyrphostin, a tyrosine kinase inhibitor, in capacitating (CM) or non-capacitating conditions (NCM) by immunoblotting SDS-extracted and separated sperm proteins using an anti-phosphotyrosine antibody. When pig spermatozoa were incubated in CM supplemented with H-89 (50 microM) or bistyrphostin (1.2 microM), capacitation decreased significantly (P < 0.001). The p32 sperm tyrosine phosphoprotein, previously shown to be associated with capacitation of porcine sperm though not necessarily an end point of this phenomenon, was not modulated by IBMX/db-cAMP (100 microM/1 mM), H-89 (50 microM) nor bistyrphostin (1.2 microM). Our results indicate, therefore, that pig sperm are regulated somewhat differently than as described for other mammals, because although the cAMP/PK-A and tyrosine kinase pathways are involved in capacitation, they do not influence the appearance of p32.

Implication of cAMP during porcine sperm capacitation and protein tyrosine phosphorylation.

Seconds messagers sont impliqu&eacute;s dans les spermatozo&iuml;des f&eacute;conder potentiel, que tant la motilit&eacute; et la r&eacute;action de l&#39;acrosome sont influenc&eacute;es par le cAMP. En outre, l&#39;activit&eacute; des nucl&eacute;otides cycliques est impliqu&eacute;e dans l&#39;apparition des prot&eacute;ines de tyrosine phosphoryl&eacute;e de sperme, qui est associ&eacute; de capacitation dans les spermatozo&iuml;des chez les mammif&egrave;res. N&eacute;anmoins, l&#39;implication de la cAMP/prot&eacute;ine kinase une voie (PK-A) au cours de la capacitation des spermatozo&iuml;des de porc peut &ecirc;tre diff&eacute;rente de celle observ&eacute;e chez les autres mammif&egrave;res. La pr&eacute;sente &eacute;tude visait &agrave; clarifier la voie cAMP/PK-A au cours de la capacitation des spermatozo&iuml;des porcins et d&#39;&eacute;valuer cet impact sur l&#39;apparence de phosphoprot&eacute;ine p32 sperme tyrosine. La pr&eacute;sence de la p32 a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;e apr&egrave;s incubation de sperme de porc frais avec IBMX/db-cAMP, H-89, un inhibiteur de la PK-A ou bistyrphostin, un inhibiteur de kinase de tyrosine, dans des conditions de non-PFNL (NCM) par des prot&eacute;ines extraites &agrave; l&#39;aide de SDS et s&eacute;par&eacute;s des spermatozo&iuml;des immunoblotting utilisant un anticorps anti-phosphotyrosine ou responsabilisation (CM). Lorsque les spermatozo&iuml;des de porc sont incub&eacute;s en CM additionn&eacute; de H-89 (50 microM) ou bistyrphostin (1,2 microM), capacitation diminue significativement (P &lt; 0,001). La phosphoprot&eacute;ine de tyrosine de sperme p32, montr&eacute;e pr&eacute;c&eacute;demment de s&#39;associer &agrave; la capacitation des spermatozo&iuml;des porcin, bien que pas n&eacute;cessairement un point de terminaison de ce ph&eacute;nom&egrave;ne, n&#39;est pas modul&eacute;e par IBMX/db-cAMP (100 microM/1 mM), H-89 (50 microM) ni bistyrphostin (1,2 microM). Par cons&eacute;quent, nos r&eacute;sultats indiquent que sperme de porcs est r&eacute;glement&eacute;s un peu diff&eacute;remment que comme pour les autres mammif&egrave;res, parce que bien que les voies de cAMP/PK-A et de la tyrosine kinase sont impliqu&eacute;s dans la capacitation, ils n&#39;affectent pas l&#39;apparence de la p32.

Implication du cAMP au cours de la phosphorylation de sperme porcin capacitation et prot&eacute;ine de tyrosine.

Implikation von cAMP bei Schweinen Spermienkapazitation und Protein-Tyrosin-Phosphorylierung.

Secondo messaggeri sono coinvolti in sperma di fertilizzazione potenziale, come la reazione acrosomiale e motilit&agrave; sono influenzati da cAMP. Inoltre, l&#39;attivit&agrave; dei nucleotidi ciclici &egrave; implicato nella comparsa di tirosina fosforilato sperma proteine, che &egrave; associato con capacitazione negli spermatozoi dei mammiferi. Tuttavia, il coinvolgimento del cAMP/chinasi di proteina un pathway (PK-A) durante la capacitazione degli spermatozoi di suino pu&ograve; essere diverso da quella osservata in altri mammiferi. L&#39;obiettivo del presente studio &egrave; stato di chiarire il pathway cAMP/PK-A durante la capacitazione degli spermatozoi di suini e di valutare tale impatto sull&#39;aspetto della fosfoproteina p32 sperma tirosina. Dopo incubazione di sperma di maiale fresca con IBMX/db-cAMP, H-89, un inibitore di PK-A o bistyrphostin, un inibitore tirosina chinasi, in capacitating (CM) o in condizioni di non-capacitating (NCM) da proteine SDS-estratte e separate sperma immunoblotting utilizzando un anticorpo anti-phosphotyrosine &egrave; stata valutata la presenza di p32. Quando gli spermatozoi di maiale sono stati incubati in CM, integrate con H-89 (50 microM) o bistyrphostin (1.2 microM), capacitazione &egrave; diminuito significativamente (P &lt; 0.001). La fosfoproteina p32 sperma tirosina, in precedenza mostrata di essere associato con capacitazione degli spermatozoi di suini anche se non necessariamente un punto finale di questo fenomeno, non &egrave; stata modulata da IBMX/db-cAMP (100 microM/1 mM), H-89 (50 microM) n&eacute; bistyrphostin (1.2 microM). I nostri risultati indicano, pertanto, che lo sperma di maiale &egrave; regolato in modo un po&#39; diverso rispetto a come descritto per altri mammiferi, perch&eacute; anche se i percorsi della chinasi cAMP/PK-A e tirosina sono coinvolti nella capacitazione, non influenzano l&#39;aspetto del p32.

Implicazione dell&#39;accampamento durante la fosforilazione della tirosina della proteina e di capacitazione dello sperma dei suini.

&#x904B;&#x52D5;&#x3068;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x306F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x80A5;&#x3084;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x74B0;&#x72B6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5916;&#x89B3;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;/&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;PK-A&#xFF09; &#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x30D6;&#x30BF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x4E2D;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x304B;&#x3089;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x30D6;&#x30BF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x4E2D;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;/PK &#x306F;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x89E3;&#x660E;&#x3068;&#x3053;&#x306E; p32 &#x7CBE;&#x5B50;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; &#x30EA;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5916;&#x89B3;&#x306B;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;P32 &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x9BAE;&#x306A;&#x8C5A;&#x7CBE;&#x5B50; IBMX/db-&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x3068; H 89&#x3001;PK &#x306F;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x307E;&#x305F;&#x306F; bistyrphostin&#x3001;capacitating (CM) &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x975E; capacitating &#x306E;&#x6761;&#x4EF6; (NCM) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6297;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x514D;&#x75AB;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8; SDS &#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x3068;&#x5206;&#x96E2;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x5F8C;&#x67FB;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D6;&#x30BF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3044;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8; H-89 &#x3067;&#x88DC;&#x308F; CM &#x3067; (50 microM) &#x307E;&#x305F;&#x306F; bistyrphostin (1.2 microM&#xFF09;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97; (P &lt; 0.001&#xFF09;&#x3002;P32 &#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; &#x30EA;&#x30F3;&#x304C;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x5FC5;&#x305A;&#x3057;&#x3082;&#x7AEF;&#x70B9;&#x304C;&#x3053;&#x306E;&#x73FE;&#x8C61;&#x306E;&#x30D6;&#x30BF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x8FF0; IBMX/db-&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x3067; &#xFF08;100 microM/1 mM&#xFF09; H 89 &#x5909;&#x8ABF;&#x3057;&#x305F;&#x306A;&#x3044; (50 microM&#xFF09; &#x3082; bistyrphostin &#xFF08;1.2 microM&#xFF09;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;/PK &#x3068;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F; p32 &#x306E;&#x5916;&#x89B3;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x306E;&#x3067;&#x30D6;&#x30BF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x591A;&#x5C11;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x4ED6;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D6;&#x30BF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x542B;&#x610F;&#x3002;

&#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800;&#xB294; &#xC815;&#xC790; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;, &#xBE44; &#xC625;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC0F; acrosome &#xBC18;&#xC751; &#xCEA0;&#xD504;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; capacitation&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;, &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xB3D9;&#xC548; &#xCEA0;&#xD504;/&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (PK-A) &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xD3EC;&#xC720;&#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC2E0; capacitation &#xB3D9;&#xC548; &#xCEA0;&#xD504;/PK-A &#xD1B5;&#xB85C; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; p32 &#xC815;&#xC790; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphoprotein &#xBAA8;&#xC591;&#xC5D0;&#xC774; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00;. P32&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; IBMX/db-&#xCEA0;&#xD504;&#xC640; H-89, PK A &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xB610;&#xB294; bistyrphostin, capacitating (CM) &#xB610;&#xB294; &#xBE44; capacitating immunoblotting SDS &#xCD94;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC548;&#xD2F0;-phosphotyrosine &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xAC74; (NCM) &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBB3C; &#xC2E0;&#xC120;&#xD55C; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790; &#xC7A0;&#xBCF5;&#xAE30; &#xD6C4; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC5B8;&#xC81C; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xBD84;&#xC2E0; cm H-89 &#xBCF4;&#xC644; incubated &#xD588;&#xB2E4; (50 microM) &#xB610;&#xB294; bistyrphostin (1.2 microM), capacitation &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; (P &lt; 0.001). &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB85D;&#xC774; &#xD604;&#xC0C1;&#xC758; &#xB05D; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xB97C; &#xBC18;&#xB4DC;&#xC2DC; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xC5F0;&#xACB0; &#xB418;&#xB3C4;&#xB85D; &#xD45C;&#xC2DC; p32 &#xC815;&#xC790; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphoprotein IBMX/db-&#xCEA0;&#xD504; (100 microM/1 m m), H-89&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294; (50 microM) &#xC774;&#xB098; bistyrphostin (1.2 microM). &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790;&#xB294; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E4;&#xC18C; &#xB2E4;&#xB974;&#xAC8C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB2E4;&#xB978; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xBA85; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; &#xCEA0;&#xD504;/PK-A&#xC640; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xACBD;&#xB85C; capacitation&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD560; &#xD558;&#xC9C0; p32&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB3FC;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xB3D9;&#xC548; &#xCEA0;&#xD504;&#xC758; &#xC758;&#xBBF8;.

Segundos mensajeros participan en esperma fertiliza potencial, como tanto la motilidad y la reacci&oacute;n acros&oacute;mica est&aacute;n influenciados por el campo. Por otra parte, la actividad de nucle&oacute;tidos c&iacute;clicos est&aacute; implicada en la aparici&oacute;n de prote&iacute;nas tirosina fosforilado esperma que se asocia a la capacitaci&oacute;n de los espermatozoides mam&iacute;feros. Sin embargo, la participaci&oacute;n del campamento/prote&iacute;na quinasa un camino (PK-A) durante la capacitaci&oacute;n del esperma de cerdo puede ser diferente de la observada en otros mam&iacute;feros. El objetivo del presente estudio fue para aclarar el camino de campo/PK-A durante la capacitaci&oacute;n de espermatozoides porcinos y evaluar este impacto en el aspecto de fosfoprote&iacute;na p32 esperma tirosina. Se evalu&oacute; la presencia de p32 despu&eacute;s de incubar los espermatozoides de cerdo fresco con IBMX/db-cAMP, H-89, un inhibidor de la PK-A o bistyrphostin, un inhibidor de la tirosina cinasa, en capacitaci&oacute;n (CM) o en condiciones no-capacitaci&oacute;n (NCM) por prote&iacute;nas de esperma extra&iacute;do de SDS y separados immunoblotting usando un anticuerpo anti-phosphotyrosine. Cuando los espermatozoides de cerdo se incubaron en CM complementado con H-89 (50 microM) o bistyrphostin (1.2 microM), capacitaci&oacute;n disminuida significativamente (P &lt; 0.001). La fosfoprote&iacute;na de tirosina esperma p32, demostrado previamente para asociarse con capacitaci&oacute;n de esperma porcina, aunque no necesariamente un punto final de este fen&oacute;meno, no fue modulada por IBMX/db-campo (100 microM/1 mM), H-89 (50 microM) ni bistyrphostin (1.2 microM). Por lo tanto, nuestros resultados indican que espermatozoides de cerdo est&aacute;n reguladas algo diferentemente que como se ha descrito para otros mam&iacute;feros, porque aunque los caminos de campo/PK-A y de la tirosina quinasa participan en capacitaci&oacute;n, no influyen en la aparici&oacute;n de p32.

Implicaci&oacute;n del campo durante la fosforilaci&oacute;n de esperma porcino capacitaci&oacute;n y prote&iacute;na tirosina.

&#x666E;&#x904D;&#x63A5;&#x53D7;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#x4ECB;&#x5BFC;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7684;&#x5916;&#x89C2;&#x867D;&#x7136;&#x6709;&#x4E0D;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#x548C; kinase(s) &#x53C2;&#x4E0E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5148;&#x751F; 32,000 &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&quot;p32&quot;&#xFF0C;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x4E0E;&#x91CD;&#x5408;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x53D1;&#x73B0;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5148;&#x751F; 32 000 &#xFF08;&quot;TK-32&quot;) &#x4E2D;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x6837;&#x9176;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E0E;&#x589E;&#x5F3A;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x63CF;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x786E;&#x5B9A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; protein(s)&#x3002;&#x65B0;&#x9C9C;&#x7684;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x88AB;&#x5B75;&#x5316;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x7136;&#x540E;&#x6C89;&#x6DC0;&#x3001; &#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x4E03;&#x4E2A;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E2D;&#x5148;&#x751F;&#x5177;&#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7B49;&#x7535;&#x805A;&#x7126; pH &#x503C; (pI) &#x8303;&#x56F4; 30,000 &#x7684;&#x5BF9;&#x9F50;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;p32 &#x53EF;&#x80FD;&#x7EC4;&#x6210;&#x51E0;&#x4E2A;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x3002;&#x4E09;&#x4E2A;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x9876;&#x4F53;&#x9176;&#x7ED1;&#x5B9A; sp32 (pI 6.5&#xFF09;&#xFF0C;&#x548C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x78F7;&#x9178;&#x4E19;&#x7CD6;&#x5F02;&#x6784;&#x9176;&#x4E9A;&#x578B; (pI 7.1 &#x548C; 7.9)&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6CA1;&#x6709;&#x900F;&#x9732;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6FC0;&#x9176;&#x5728;&#x5148;&#x751F; 32,000&#x3002;&#x6C89;&#x6DC0;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; p32 &#x548C; TK-32 &#x662F;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4F20;&#x7EDF;&#x77E5;&#x8BC6; 32 &#x6D3B;&#x52A8;&#x4ECD;&#x7136;&#x5728; antiphosphotyrosine &#x6C89;&#x6DC0;&#x4E0A;&#x6E05;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5728;&#x51DD;&#x80F6;&#x590D;&#x6027;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x8868;&#x660E;&#x4F20;&#x7EDF;&#x77E5;&#x8BC6; 32 &#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; (MAPK)&#x3002;P32 &#x548C; MAPK &#x6837; TK-32 &#x7684;&#x53D1;&#x73B0;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5173;&#x4E8E;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x65B0;&#x89C1;&#x89E3;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x732A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6FC0;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x3002;

It is generally accepted that sperm capacitation is associated with the protein kinase A-mediated appearance of tyrosine phosphoproteins, although the substrates and kinase(s) involved have not been identified. We described a Mr 32,000 tyrosine phosphoprotein, "p32", appearing in porcine sperm coincident with capacitation. We also discovered a tyrosine kinase-like enzyme in boar sperm of Mr 32,000 ("TK-32") with enhanced activity during capacitation. The present work was conducted to further characterize and to identify these capacitation-related protein(s). Fresh porcine sperm were incubated to induce capacitation then immunoprecipitation, immunoblotting and proteomic analysis revealed seven tyrosine-phosphorylated proteins aligned in the range of Mr 30,000 with different isoelectric pH values (pI). Therefore, p32 may be composed of several tyrosine phosphoproteins. Three were identified as acrosin-binding sp32 (pI 6.5), and two triosephosphate isomerase isoforms (pI 7.1 and 7.9). At present, however, proteonomic analysis has not revealed any kinase at Mr 32,000. Immunoprecipitation experiments show that p32 and TK-32 are different molecules, as TK-32 activity remains in the supernatant of the antiphosphotyrosine precipitates. Finally, in-gel renaturation and immunoblotting suggest that TK-32 is a mitogen-activated protein kinase (MAPK). The discovery of p32 and the MAPK-like TK-32 provides new insight regarding the mechanisms underlying capacitation in the pig.

Use of phosphoproteomics to study tyrosine kinase activity in capacitating boar sperm. Kinase activity and capacitation.

Il est g&eacute;n&eacute;ralement admis que capacitation des spermatozo&iuml;des est associ&eacute;e &agrave; la prot&eacute;ine kinase induite par A apparence des phosphoprot&eacute;ines tyrosine, bien que les substrats et les kinase(s) concern&eacute;s n&#39;ont pas &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s. Nous avons d&eacute;crit une phosphoprot&eacute;ine 32 000 M. de tyrosine, &laquo; p32 &raquo;, figurant dans le sperme porcin qui co&iuml;ncide avec la capacitation. Nous avons &eacute;galement d&eacute;couvert une enzyme de type kinase de tyrosine dans le sperme de verrat de M. 32 000 (&quot;TK-32&quot;) avec l&#39;augmentation de l&#39;activit&eacute; au cours de capacitation. Cette &eacute;tude a &eacute;t&eacute; men&eacute;e pour mieux caract&eacute;riser et d&#39;identifier ces ou des prot&eacute;ines de la capacitation. Sperme de porc fra&icirc;che ont &eacute;t&eacute; incub&eacute; pour induire la capacitation puis immunopr&eacute;cipitation, immunotransfert et prot&eacute;omique de l&#39;analyse a r&eacute;v&eacute;l&eacute; sept prot&eacute;ines phosphoryl&eacute;es de tyrosine dans la gamme de Mr 30 000 avec diff&eacute;rents pH iso&eacute;lectrique (pI). Par cons&eacute;quent, p32 peut &ecirc;tre compos&eacute; de plusieurs phosphoprot&eacute;ines de tyrosine. Trois ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s comme liant l&#39;acrosine sp32 (pI 6,5) et deux triosephosphate isom&eacute;rase isoformes (pI 7.1 et 7,9). &Agrave; l&#39;heure actuelle, cependant, proteonomic l&#39;analyse n&#39;a r&eacute;v&eacute;l&eacute; aucune kinase &agrave; 32 000 M.. Exp&eacute;riences d&#39;immunopr&eacute;cipitation montrent que p32 et TK-32 sont des mol&eacute;cules diff&eacute;rentes, comme toujours l&#39;activit&eacute; TK-32 dans le surnageant des antiphosphotyrosine pr&eacute;cipit&eacute;s. Enfin, l&#39;immunotransfert et renaturation de dans-gel sugg&egrave;rent que TK-32 est une kinase de la prot&eacute;ine mitog&egrave;ne (MAPK). La d&eacute;couverte de p32 et la MAPK ressemblant TK-32 offre nouvel &eacute;clairage sur les m&eacute;canismes de responsabilisation chez le porc.

Utilisation de phosphoprot&eacute;omique pour &eacute;tudier l&#39;activit&eacute; de la tyrosine kinase dans permettre &agrave; sperme de verrat. Activit&eacute; de la kinase et capacitation.

Verwenden von Phosphoproteomics zu Tyrosinkinase-Aktivit&#xE4;t in bef&#xE4;higenden Eberspermien studieren. Kinaseaktivit&#xE4;t und Kapazitation.

&Egrave; generalmente accettato che capacitazione degli spermatozoi &egrave; associato con la chinasi di proteina A-mediata aspetto di fosfoproteine tirosina, anche se non sono stati identificati i substrati e kinase(s) coinvolti. Abbiamo descritto una fosfoproteina tirosina Signor 32.000, &quot;p32&quot;, apparendo in sperma suino coincida con la capacitazione. Abbiamo anche scoperto un enzima tirosina chinasi-come sperma di cinghiale del signor 32.000 (&quot;TK-32&quot;) con una maggiore attivit&agrave; durante la capacitazione. Il presente lavoro &egrave; stato condotto per caratterizzare ulteriormente e per identificare queste proteine correlate capacitazione. Sperma fresco suino sono stato incubato per indurre la capacitazione quindi immunoprecipitazione, immunoblotting e proteomic analysis ha rivelato sette proteine tirosina fosforilata allineate nella gamma del signor 30.000 con valori differenti pH isoelettrico (pI). Pertanto, p32 pu&ograve; essere composto di diversi fosfoproteine tirosina. Tre sono stati identificati come acrosin-associazione SP332 (pI 6.5) e due isoforme di isomerasi di triosephosphate (pI 7.1 e 7,9). Attualmente, tuttavia, proteonomic analisi ha non rivelato alcun chinasi al signor 32.000. Immunoprecipitazione esperimenti mostrano che p32 e TK-32 sono diverse molecole, come resti di attivit&agrave; TK-32 nel surnatante dei precipitati di antiphosphotyrosine. Infine, immunoblotting e rinaturalizzazione in gel suggeriscono che TK-32 &egrave; una chinasi di proteina mitogene-attivata (MAPK). La scoperta del p32 e MAPK-come TK-32 fornisce nuove informazioni per quanto riguarda i meccanismi sottostanti capacitazione del suino.

Uso di phosphoproteomics per studiare l&#39;attivit&agrave; della chinasi tirosina in capacitating sperma di cinghiale. L&#39;attivit&agrave; della chinasi e capacitazione.

&#x57FA;&#x677F;&#x3068; kinase(s) &#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x304C;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x305D;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x5916;&#x89B3;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; &#x30EA;&#x30F3;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x4E00;&#x822C;&#x306B;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6C0F; 32,000 &#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&quot;p32&#x300C;&#x30D6;&#x30BF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x306B;&#x73FE;&#x308C;&#x308B;&#x8AAC;&#x660E;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3082;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x4E2D;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x9175;&#x7D20;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30B7;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6C0F; 32,000 (&#x300C;TK-32&#x300D;&#xFF09; &#x306E;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x4ED5;&#x4E8B;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x8AAD;&#x53D6;&#x88C5;&#x7F6E;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x65B0;&#x9BAE;&#x306A;&#x30D6;&#x30BF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3057;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;, &#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x6CD5;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790; 7 &#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x304C;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E; Mr 30,000 &#x7B49;&#x96FB; ph (pI) &#x3067;&#x63C3;&#x3048;.&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;p32 &#x30EA;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;3 &#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3; &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; sp32 &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F; (pI 6.5) &#x3068; 2 triosephosphate &#x7570;&#x6027;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; (pI 7.1 &#x3068; 7.9)&#x3002;&#x73FE;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;proteonomic &#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x4EFB;&#x610F;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6C0F; 32,000 &#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x5B9F;&#x9A13; p32 &#x3068; TK-32 &#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;, TK 32 &#x6D3B;&#x52D5;&#x6B8B;&#x308B; antiphosphotyrosine &#x6790;&#x51FA;&#x7269;&#x306E;&#x4E0A;&#x6F84;&#x307F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3067;&#x3059;.&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x753B;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8; TK 32 &#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;MAPK&#xFF09; &#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;P32 &#x3068; MAPK &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; TK 32 &#x306E;&#x767A;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x30D6;&#x30BF;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529B;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C1;&#x30BF;&#x30CB;&#x30A2;&#x306E;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30B7;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3092; capacitating &#x3067;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x3002;

&#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xADF8; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphoproteins&#xC758; &#xBAA8;&#xC591; &#xD55C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAE30;&#xD310; &#xBC0F; kinase(s) &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBBF8;&#xC2A4;&#xD130; 32000 &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphoprotein &quot;p32&quot; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xC77C;&#xCE58;&#xC5D0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xB294; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; capacitation &#xC911; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBBF8;&#xC2A4;&#xD130; 32000 (&quot;TK-32&quot;)&#xC758; &#xBA67;&#xB3FC;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xAC19;&#xC740; &#xD6A8;&#xC18C;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC791;&#xC5C5; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; capacitation &#xAD00;&#xB828; protein(s) &#xD655;&#xC778;&#xC744; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xC120;&#xD55C; &#xB3FC;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790; capacitation &#xB2E4;&#xC74C; immunoprecipitation &#xC720;&#xB3C4; incubated &#xD588;&#xB2E4;, immunoblotting &#xBC0F; proteomic &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; 7 &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphorylated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC758; &#xBBF8;&#xC2A4;&#xD130; 30000 &#xB2E4;&#xB978; isoelectric pH &#xAC12; (pI)&#xC5D0; &#xC815;&#xB82C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, p32 &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; phosphoproteins &#xAD6C;&#xC131; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3 Acrosin &#xBC14;&#xC778;&#xB529; sp32&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB410;&#xB2E4; (6.5 &#xD30C;&#xC774;)&#xC640; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; triosephosphate isomerase isoforms (pI 7.1 &#xBC0F; 7.9). &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xD604;&#xC7AC;,, proteonomic &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xC9C0; &#xB4DC;&#xB7EC;&#xB0AC;&#xB2E4; &#xBBF8;&#xC2A4;&#xD130; 32000&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC544;&#xB97C;. Immunoprecipitation &#xC2E4;&#xD5D8; p32&#xC640; TK 32 antiphosphotyrosine &#xCE68;&#xC804;&#xC758; &#xC0C1;&#xCF8C;&#xD55C;&#xC5D0; TK 32 &#xD65C;&#xB3D9; &#xB0A8;&#xC544; &#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBD84;&#xC790;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;,&#xC5D0; &#xC824; renaturation &#xBC0F; immunoblotting TK 32 &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; (MAPK)&#xC740; &#xC81C;&#xC548;. P32&#xC640; MAPK &#xAC19;&#xC740; TK 32 &#xBC1C;&#xACAC; &#xB3FC;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; capacitation &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xBA67;&#xB3FC;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790; capacitating&#xB97C; phosphoproteomics&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; capacitation&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Est&aacute; generalmente aceptado que la capacitaci&oacute;n esperm&aacute;tica se asocia a la prote&iacute;na quinasa A mediada por la aparici&oacute;n de fosfoprote&iacute;nas de tirosina, aunque los substratos y kinase(s) implicados no han sido identificados. Describimos una fosfoprote&iacute;na Se&ntilde;or 32.000 de tirosina, &quot;p32&quot;, apareciendo en esperma porcina coincidente con la capacitaci&oacute;n. Tambi&eacute;n descubrimos una enzima de tirosina quinasa-como en semen de verraco de Se&ntilde;or 32.000 (&quot;TK-32&quot;) con mayor actividad durante la capacitaci&oacute;n. El presente trabajo se realiz&oacute; para caracterizar e identificar estas prote&iacute;nas relacionadas con la capacitaci&oacute;n. Esperma porcina fresca se incubaron para inducir la capacitaci&oacute;n entonces inmunoprecipitaci&oacute;n, immunoblotting y an&aacute;lisis prote&oacute;mico revel&oacute; siete prote&iacute;nas fosforiladas en tirosina, alineadas en la gama del Se&ntilde;or 30.000 con valores de diferentes pH isoel&eacute;ctrico (pI). Por lo tanto, p32 se compone de varias fosfoprote&iacute;nas de tirosina. Tres fueron identificados como acrosin vinculante sp32 (pI 6.5) y dos Triosa fosfato isomerasa isoformas (pI 7.1 y 7.9). En la actualidad, sin embargo, proteonomic an&aacute;lisis no ha revelado cualquier quinasa en 32.000 Se&ntilde;or. Inmunoprecipitaci&oacute;n experimentos demuestran que p32 y TK-32 son mol&eacute;culas diferentes, como restos de actividad de TK-32 en el sobrenadante de los precipitados de antiphosphotyrosine. Finalmente, immunoblotting y renaturalizaci&oacute;n en gel sugieren que TK-32 es una quinasa de prote&iacute;nas activadas por mit&oacute;genos (MAPK). El descubrimiento de p32 y la MAPK-como TK-32 ofrece nuevas perspectivas sobre los mecanismos subyacentes de la capacitaci&oacute;n en el cerdo.

Uso de fosfoprote&oacute;mico para estudiar la actividad tirosina quinasa en capacitaci&oacute;n de semen de verraco. Quinasa y capacitaci&oacute;n.

&#x808C;&#x6D46;&#x7F51;&#x5185;&#x8D28;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51; Ca(2+) ATPase &#xFF08;SERCA&#xFF09; &#x6291;&#x5236;&#x5242; thapsigargin (0.1-1 microM&#xFF09; &#x548C;&#x5706;&#x5F27;&#x5076;&#x6C2E;&#x9178; (10 microM&#xFF09;&#xFF0C;&#x672A;&#x80FD;&#x5F71;&#x54CD;&#x9759;&#x606F; [&#x7ECF;] &#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;&#x6162;&#x5B55;&#x6FC0;&#x7D20;&#x8BF1;&#x5BFC; [Ca &#xFF08;2 + i)](i) &#x632F;&#x8361;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6D89;&#x53CA;&#x5FAA;&#x73AF;&#x6392;&#x7A7A;-&#x52A0;&#x6C14;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x7ECF;&#x5546;&#x5E97;&#x4E5F;&#x662F;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4E0D;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x3002;Thapsigargin 50-300 &#x500D; SERCA &#x6291;&#x5236;&#x9971;&#x548C;&#x5242;&#x91CF; 5-30 microM&#xFF09;&#xFF0C;&#x975E;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5242;&#x91CF;&#x9020;&#x6210;&#x6D77;&#x62D4;&#x9759;&#x606F; [Ca(2+)](i) &#x53CA;&#x90E8;&#x5206;&#x3001; &#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x4E2D;&#x65AD;&#x7684;&#x632F;&#x8361;&#x3002;10-40 MicroM &#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4E24;&#x6761;&#x4E4B;&#x4E8C; (2-hydroxy-3-tert-butyl-5-methyl-phenyl) &#x7532;&#x70F7; (&#x53CC;&#x915A;&#xFF09;&#xFF0C;thapsigargin &#x654F;&#x611F;&#x548C;&#x4E0D;&#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x5FAE;&#x7C92;&#x4F53;&#x7ECF;&#x4E09;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x6D77;&#x62D4;&#x9759;&#x606F; [Ca(2+)](i) &#x53CA; [&#x7B26;&#x5408; thapsigargin &#x8010;&#x3001; &#x5FAE;&#x7C92;&#x4F53; ATPase &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5242;&#x91CF; Ca(2+)](i) &#x632F;&#x8361;&#x3002; &#x548C;&#x5B58;&#x50A8;&#x7ECF;&#x89E3;&#x653E;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x7684;&#x53CC;&#x915A;&#x6807;&#x5FD7;&#x7740;&#x5F71;&#x54CD; [Ca(2+)](i) &#x632F;&#x52A8;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x3002;&#x96CC;&#x3001; &#x5B55;&#x6FC0;&#x7D20;&#x4EE5;&#x524D;&#x523A;&#x6FC0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x5E94;&#x7528;&#x4E86;&#x975E;&#x5E38;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5F53;&#x5B83;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x9759;&#x6001;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5B55;&#x6FC0;&#x7D20;&#x6301;&#x7EED;&#x7684;&#x7ECF;&#x6D8C;&#x5165;&#x4E0D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x52A8;&#x7ECF;&#x5546;&#x5E97;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x8868;&#x660E;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x7ECF; ATPase (SPCA1) &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;Immunolocalisation &#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x540E;&#x9762;&#x6838;&#x5FC3;&#x533A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x6240;&#x6709;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684; SPCA1 &#x5C06;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x4E2D;&#x6BB5;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;SERCA&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x884C;&#x67D3;&#x8272;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x6CA1;&#x6709;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E0A;&#x8FF0;&#x4EFB;&#x4E00;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x8FD9;&#x6837;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; (1) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x7ECF;&#x5B58;&#x50A8;&#x548C;&#x5B58;&#x50A8;&#x4F9D;&#x8D56; [&#x632F;&#x8361;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E3B;&#x8981;&#x4F9D;&#x9760;&#x7684;&#x4E0D;&#x662F;&#x662F;&#x5728;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF1B; &#x5C06;&#x586B;&#x62A5; SERCA thapsigargin/&#x5706;&#x5F27;&#x5076;&#x6C2E;&#x9178;&#x4E0D;&#x533A;&#x5206;&#x7ECF;&#x6CF5; Ca(2+)](i)(2) &#x7684;&#x9AD8;&#x5242;&#x91CF; thapsigargin &#x5BF9;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E3B;&#x8981;&#x53CD;&#x6620;&#x975E;&#x7279;&#x5B9A;&#x884C;&#x52A8;&#x5BF9;&#x975E; SERCAs &#x548C; &#xFF1B;(3) &#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x7ECF;&#x4E09;&#x8D21;&#x732E;&#x81F3;&#x5C11;&#x6B64;&#x975E; SERCA &#x7ECF;&#x6CF5;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;

&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84; Ca(2+)-ATPase (SPCA1) Ca(2) + &#x6CF5;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x662F; SERCAs&#xFF0C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x590D;&#x6742; [Ca(2+)](i) &#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;

The sarcoplasmic-endoplasmic reticulum Ca(2+)-ATPase (SERCA) inhibitors thapsigargin (0.1-1 microM) and cyclopiazonic acid (10 microM), failed to affect resting [Ca(2+)] in human spermatozoa. Slow progesterone-induced [Ca(2+ i)](i) oscillations in human spermatozoa, which involve cyclic emptying-refilling of an intracellular Ca(2+) store were also insensitive to these inhibitors. Non-selective doses of thapsigargin (5-30 microM, 50-300 times the saturating dose for SERCA inhibition), caused elevation of resting [Ca(2+)](i) and partial, dose-dependent disruption of oscillations. A 10-40 microM concentration of bis(2-hydroxy-3-tert-butyl-5-methyl-phenyl)methane (bis-phenol), which inhibits both thapsigargin-sensitive and -insensitive microsomal Ca(2+) ATPases, caused elevation of resting [Ca(2+)](i) and inhibition of [Ca(2+)](i) oscillations at doses consistent with inhibition of thapsigargin-resistant, microsomal ATPase and liberation of stored Ca(2+). Low doses of bis-phenol had marked effects on [Ca(2+)](i) oscillation kinetics. Application of the drug to cells previously stimulated with progesterone had effects very similar to those observed when it was applied to unstimulated cells, suggesting that the sustained Ca(2+) influx induced by progesterone is not mediated via mobilisation of Ca(2+) stores. Western blotting for human sperm proteins showed expression of secretory pathway Ca(2+) ATPase (SPCA1). Immunolocalisation studies revealed expression of SPCA1 in all cells in an area behind the nucleus, extending into the midpiece. Staining for SERCA, carried out in parallel, detected no expression with either technique. We conclude that: (1) intracellular Ca(2+) store(s) and store-dependent [Ca(2+)](i) oscillations in human spermatozoa rely primarily on a thapsigargin/cyclopiazonic acid-insensitive Ca(2+) pump, which is not a SERCA as characterised in somatic cells; (2) effects of high-dose thapsigargin on spermatozoa primarily reflect non-specific actions on non-SERCAs and; (3) secretory pathway Ca(2+) ATPases contribute at least part of this non-SERCA Ca(2+) pump activity.

Secretory pathway Ca(2+)-ATPase (SPCA1) Ca(2)+ pumps, not SERCAs, regulate complex [Ca(2+)](i) signals in human spermatozoa.

Le r&eacute;ticulum sarcoplasmique-endoplasmique Ca(2+)-ATPase (SERCA) inhibiteurs de la thapsigargine (0,1-1 microM) et l&#39;acide cyclopiazonique (10 microM), n&#39;a pas affect&eacute; au repos [Ca(2+)] dans les spermatozo&iuml;des humains. Lent induite par la progest&eacute;rone [Ca (2 + i)](i) oscillations dans les spermatozo&iuml;des humains, qui impliquent la vidange-remplissage cyclique d&#39;un magasin de Ca(2+) intracellulaire sont &eacute;galement insensibles &agrave; ces inhibiteurs. Doses non s&eacute;lectif de l&#39;&eacute;l&eacute;vation de la thapsigargine 5.30 microM (50 &agrave; 300 fois la dose saturante d&#39;inhibition SERCA) caus&eacute; de repos [Ca(2+)](i) et rupture partielle, dose-d&eacute;pendante des oscillations. Une concentration de microM 10-40 de bis (2-hydroxy-3-tert-butyl-5-methyl-phenyl) m&eacute;thane (bis-ph&eacute;nol), qui inhibe les deux sensibles &agrave; la thapsigargine et - insensible ATPases microsomique de Ca(2+), provoqu&eacute; l&#39;&eacute;l&eacute;vation de repos [Ca(2+)](i) et inhibition de [Ca(2+)](i) oscillations &agrave; des doses compatibles avec inhibition de l&#39;ATPase thapsigargine r&eacute;sistant, microsomique. et lib&eacute;ration de Ca(2+) stock&eacute;es Faibles doses du bis-ph&eacute;nol avaient marqu&eacute; effets sur [Ca(2+)](i) oscillation cin&eacute;tique. Application du m&eacute;dicament aux cellules pr&eacute;alablement stimul&eacute;es avec progest&eacute;rone ont eu des effets tr&egrave;s semblables &agrave; ceux observ&eacute;s lorsqu&#39;il a &eacute;t&eacute; appliqu&eacute; aux cellules non stimul&eacute;es, ce qui sugg&egrave;re que l&#39;afflux de Ca(2+) soutenue induite par la progest&eacute;rone n&#39;est pas v&eacute;hicul&eacute; par mobilisation des magasins Ca(2+). Western Blot pour les prot&eacute;ines de sperme humain ont montr&eacute; une expression de la voie de s&eacute;cr&eacute;tion Ca(2+) ATPase (SPCA1). Immunolocalisation &eacute;tudes r&eacute;v&egrave;lent l&#39;expression de SPCA1 dans toutes les cellules dans une zone situ&eacute;e derri&egrave;re le noyau, qui s&#39;&eacute;tend dans la pi&egrave;ce. Coloration pour SERCA, men&eacute;e en parall&egrave;le, ne d&eacute;tect&eacute; aucune expression avec chaque technique. Nous concluons que: (1) du point de vente Ca(2+) intracellulaire et d&eacute;pendante du magasin [Ca(2+)](i) oscillations dans les spermatozo&iuml;des humains s&#39;appuient principalement sur une pompe thapsigargine/cyclopiazonique insensible &agrave; l&#39;acide Ca(2+), qui n&#39;est pas un SERCA se caract&eacute;rise dans les cellules somatiques ; (2) les effets des fortes doses thapsigargine sur spermatozo&iuml;des refl&egrave;tent principalement des actions non sp&eacute;cifique sur la non-SERCAs et ; (3) voie de la s&eacute;cr&eacute;tion Ca(2+) ATPases contribuent au moins une partie de cette activit&eacute; non - SERCA Ca(2+) de la pompe.

Pompes Ca(2+)-ATPase (SPCA1) Ca(2) + voie de s&eacute;cr&eacute;tion, pas SERCAs, r&eacute;glementent le complexe [Ca(2+)](i) des signaux dans les spermatozo&iuml;des humains.

Sekretionsweg Ca (2 +)-ATPase (SPCA1) Ca (2) + Pumpen, nicht SERCAs, regulieren Komplex [Ca (2 +)] (i) Signale in menschlichen Spermien.

Il reticolo sarcoplasmatico endoplasmic Ca(2+)-ATPasi (SERCA) inibitori thapsigargin (0,1-1 microM) e acido cyclopiazonic (10 microM), non &egrave; riuscito a incidere riposo [Ca(2+)] in spermatozoi umani. Lento progesterone-indotta [Ca (2++ i)](i) oscillazioni in spermatozoi umani, che coinvolgono ciclico svuotamento-riempimento di un deposito intracellulare di Ca(2+) erano anche insensibile a questi inibitori. Dosi non selettivi di elevazione thapsigargin (5-30 microM, 50 - 300 volte la dose saturante per inibizione SERCA), causato del riposo [Ca(2+)](i) e rottura parziale, dose-dipendente delle oscillazioni. Una 10-40 microM concentrazione di metano bis (2-hydroxy-3-tert-butyl-5-methyl-phenyl) (bis-fenolo), che inibisce entrambi thapsigargin sensibili e - insensibile microsomiale Ca(2+) ATPasi, causato elevazione di riposo [Ca(2+)](i) e inibizione della [Ca(2+)](i) oscillazioni a dosi coerente con l&#39;inibizione della ATPasi thapsigargin-resistente, microsomiale. e liberazione di stored Ca(2+) Basse dosi di bis-fenolo avevano segnato gli effetti su [Ca(2+)](i) cinetica di oscillazione. Applicazione del farmaco alle cellule precedentemente stimolate con il progesterone ha effetti molto simili a quelli osservati quando fu applicato alle cellule sia, suggerendo che l&#39;afflusso Ca(2+) sostenuta indotta dal progesterone non &egrave; mediato attraverso la mobilitazione dei depositi Ca(2+). Macchiarsi occidentale per le proteine dello sperma umano ha mostrato espressione di secretory pathway Ca(2+) ATPasi (SPCA1). Immunolocalisation studi hanno rivelato espressione di SPCA1 in tutte le cellule in un&#39;area dietro il nucleo, si estende il midpiece. Colorazione per SERCA, svolte in parallelo, non rilevato alcuna espressione con una tecnica. Possiamo concludere che: (1) intracellulare Ca(2+) archivi e negozio-dipendente [Ca(2+)](i) oscillazioni in spermatozoi umani si basano principalmente su una thapsigargin/cyclopiazonic pompa di Ca(2+) acido-insensibile, che non &egrave; un SERCA come caratterizzato nelle cellule somatiche; (2) gli effetti della alto-dose thapsigargin su spermatozoi riflettono principalmente non specifiche azioni su non-SERCAs e; (3) secretory pathway Ca(2+) ATPasi contribuiscono almeno una parte di questa attivit&agrave; di pompa non - SERCA Ca(2+).

Secretory pathway Ca(2+)-ATPasi (SPCA1) Ca(2) + pompe, non SERCAs, regolano il complesso [Ca(2+)](i) segnali in spermatozoi umani.

&#x7B4B;&#x6F3F;&#x9762;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53; Ca(2+) ATPase (SERCA) &#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC; (0.1-1 microM&#xFF09; &#x3068;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D4;&#x30A2;&#x30BE;&#x30F3;&#x9178; (10 microM) [&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;] &#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9045;&#x3044;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x8A98;&#x767A; [Ca (2++ &#x306E; i)](i) &#x632F;&#x52D5;&#x7E70;&#x8FD4;&#x3057;&#x3092;&#x7A7A;&#x306B;&#x3059;&#x308B;-&#x88DC;&#x5145;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3082;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3002;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC; &#xFF08;5-30 microM, 50-300 &#x56DE; SERCA &#x963B;&#x5BB3;&#x30B5;&#x30C1;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x7DDA;&#x91CF;) &#x306E;&#x975E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x7528;&#x91CF;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6A19;&#x9AD8;&#x306E;&#x4F11;&#x606F; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3068;&#x632F;&#x52D5;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3002;10-40 MicroM &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x30D3;&#x30B9; (2-hydroxy-3-tert-butyl-5-methyl-phenyl) &#x30E1;&#x30BF;&#x30F3; (bis &#x30D5;&#x30A7;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;)&#x3001;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x3068;&#x5C0F;&#x6587;&#x5B57;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30BE;&#x30FC;&#x30E0; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3068;&#x963B;&#x5BB3; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x632F;&#x52D5;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x8010;&#x6027;&#x3001;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30BE;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; atp &#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x7528;&#x91CF;&#x3068;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x89E3;&#x653E;&#x306E;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x306E;&#x6A19;&#x9AD8;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F; Atpase,&#x3002;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x30D3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x52B9;&#x679C; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x632F;&#x52D5;&#x52D5;&#x614B;&#x3002; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x85AC;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x4EE5;&#x524D;&#x523A;&#x6FC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7528;&#x52B9;&#x679C;&#x975E;&#x5E38;&#x3068;&#x304D;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x5E97;&#x8217;&#x306E;&#x52D5;&#x54E1;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A98;&#x8D77;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x6D41;&#x5165;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x7121;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A6;&#x30A8;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x5206;&#x6CCC;&#x7CFB;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; ATPase (SPCA1) &#x306E;&#x8868;&#x60C5;&#x3092;&#x898B;&#x305B;&#x305F;&#x3002;Immunolocalisation &#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306B; midpiece &#x306E;&#x62E1;&#x5F35; SPCA1 &#x3067;&#x306F;&#x6838;&#x306E;&#x80CC;&#x5F8C;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5F0F;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;&#x4E26;&#x5217;&#x306B;&#x5B9F;&#x65BD; SERCA &#x67D3;&#x8272;&#x306F;&#x3001;&#x5F0F;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x6280;&#x6CD5;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x7D50;&#x8AD6;: (1) &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x3001;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x632F;&#x52D5;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306F; SERCA &#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;; &#x7279;&#x5FB4;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x4E3B;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;/&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D4;&#x30A2;&#x30BE;&#x30F3;&#x9178;&#x7121;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30DD;&#x30F3;&#x30D7;&#xFF08;&#x52B9;&#x679C; 2&#xFF09; &#x9AD8;&#x7528;&#x91CF;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x4E3B;&#x306B;&#x975E; SERCAs &#x4E0A;&#x306E;&#x975E;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;;(3) &#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; Atpase &#x8CA2;&#x732E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x3053;&#x306E; SERCA &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30DD;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3002;

&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF; Ca(2+) ATPase (SPCA1) Ca(2) + &#x30DD;&#x30F3;&#x30D7;&#x3001;&#x306A;&#x3044; SERCAs &#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x3002;

Endoplasmic sarcoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; Ca(2+) ATPase (SERCA) &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; thapsigargin (0.1-1 microM) &#xBC0F; cyclopiazonic &#xC0B0; (10 microM) [Ca(2+)] &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD734;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC9C;&#xCC9C;&#xD788; &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xC720;&#xB3C4; [Ca (2 + i)](i) &#xC9C4;&#xB3D9; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xBE44;&#xC6B0;&#xB294;-&#xCC44;&#xC6B0;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. [Ca(2+)](i)&#xC640; &#xC9C4;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD80;&#xBD84;, &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xC7A5;&#xC560; &#xD734;&#xC2DD;&#xC758; thapsigargin (5-30 microM, 50-300 &#xBC88; SERCA &#xC800;&#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; saturating &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;) &#xC778; &#xD55C; &#xC0C1;&#xC2B9;&#xC758; &#xBE44; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;. &#xB458; &#xB2E4;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; bis (2-hydroxy-3-tert-butyl-5-methyl-phenyl) &#xBA54;&#xD0C4; (&#xB450;&#xBC88;&#xC9F8;-&#xD398; &#xB180;)&#xC758; 10-40 microM &#xB18D;&#xB3C4; thapsigargin &#xAD6C;&#xBD84; &#xBC0F;-&#xAD6C;&#xBD84; microsomal Ca(2+) ATPases, &#xD734;&#xC2DD; [Ca(2+)](i) &#xBC0F; &#xC5B5;&#xC81C; [thapsigargin &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294;, microsomal Atpase&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xBCF5;&#xC6A9; Ca(2+)](i) &#xC9C4;&#xB3D9;. &#xBC0F; &#xC800;&#xC7A5; &#xB41C; ca(2+)&#xC758; &#xD574;&#xBC29;&#xC758; &#xD574;&#xBC1C; &#xACE0;&#xB3C4; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xB450;&#xBC88;&#xC9F8;-&#xD398; &#xB180;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; [Ca(2+)](i) &#xC9C4;&#xB3D9; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC140; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC744; &#xC790;&#xADF9;&#xB41C; &#xD558;&#xB294; &#xC57D;&#xBB3C;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB54C; &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; Ca(2+) &#xC720;&#xC785; Ca(2+) &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC6D0;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC81C;&#xC548; unstimulated &#xC140;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xAC83;&#xACFC; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC11C;&#xCABD; blotting &#xBD84; &#xD1B5;&#xB85C; Ca(2+) ATPase (SPCA1)&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. Immunolocalisation &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; midpiece&#xB85C; &#xD655;&#xC7A5;, &#xD575;&#xC758; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140;&#xC758; spca1&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5BC;&#xB8E9; SERCA, &#xBCD1;&#xB82C;&#xB85C; &#xC218;&#xD589;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xC220; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC544;&#xBB34; &#xC2DD;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;: (1) &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca(2+) &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C; &#xBC0F; &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C; &#xC885;&#xC18D; [Ca(2+)](i) thapsigargin/cyclopiazonic &#xC0B0;&#xC744; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; Ca(2+) &#xD38C;&#xD504;, &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC73C;&#xB85C; SERCA &#xC544;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xB3D9; (2) &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; thapsigargin&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBE44; Sercas&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC791;&#xC5C5; &#xBC18;&#xC601; &#xD558; &#xACE0;; (3) &#xBD84; &#xD1B5;&#xB85C; Ca(2+) ATPases &#xAE30;&#xC5EC; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4;&#xC774; SERCA Ca(2+) &#xD38C;&#xD504; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xD55C; &#xBD80;&#xBD84;.

&#xBD84; &#xD1B5;&#xB85C; Ca(2+)-ATPase (SPCA1) Ca(2) + &#xD38C;&#xD504;, SERCAs &#xD558;&#xC9C0; &#xC870;&#xC808; &#xBCF5;&#xD569;&#xCCB4; [&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; Ca(2+)](i) &#xC2E0;&#xD638;.

La sarcopl&aacute;smica ret&iacute;culo endopl&aacute;smico Ca(2+)-ATPasa (SERCA) inhibidores thapsigargin (0.1-1 microM) y &aacute;cido cyclopiazonic (10 microM), no afectan el descanso [CA] en espermatozoides humanos. Lento inducida por la progesterona [Ca (2 + i)](i) oscilaciones en espermatozoides humanos, que implican vaciado c&iacute;clico-recarga de una tienda de CA intracelular tambi&eacute;n eran insensibles a estos inhibidores. Dosis no selectivo de elevaci&oacute;n thapsigargin (microM 5-30, 50 - 300 veces la dosis de saturaci&oacute;n para la inhibici&oacute;n de SERCA), causado de reposo [Ca(2+)](i) e interrupci&oacute;n parcial, dependiente de la dosis de oscilaciones. Una concentraci&oacute;n de 10-40 microM de bis (2-hydroxy-3-tert-butyl-5-methyl-phenyl) metano (bis-fenol), que inhibe tanto thapsigargin sensible y - insensible microsomal CA ATPasas, caus&oacute; elevaci&oacute;n de reposo [Ca(2+)](i) e inhibici&oacute;n de [Ca(2+)](i) oscilaciones en dosis constantes con la inhibici&oacute;n de la ATPasa thapsigargin-resistente, microsomal. y liberaci&oacute;n de CA almacenados Dosis bajas de bis-fenol hab&iacute;an marcado efectos en [Ca(2+)](i) cin&eacute;tica de oscilaci&oacute;n. Aplicaci&oacute;n de la droga a las c&eacute;lulas previamente estimuladas con progesterona ten&iacute;a efectos muy similares a los observados cuando se aplic&oacute; sin estimular c&eacute;lulas, lo que sugiere que la continua afluencia de CA inducida por la progesterona no es mediada por movilizaci&oacute;n de CA tiendas. Western blot para prote&iacute;nas de espermatozoides humanos demostr&oacute; la expresi&oacute;n de la v&iacute;a secretora ATPasa CA (SPCA1). Estudios de inmunolocalizaci&oacute;n revelaron la expresi&oacute;n de SPCA1 en todas las c&eacute;lulas en un &aacute;rea detr&aacute;s del n&uacute;cleo, que se extiende en el midpiece. Coloraci&oacute;n para SERCA, llevado a cabo en paralelo, no detectado ninguna expresi&oacute;n con cualquier t&eacute;cnica. Se concluye que: (1) almacenes de CA intracelular y dependiente de tienda [Ca(2+)](i) oscilaciones en espermatozoides humanos dependen principalmente de una bomba de CA resistente al &aacute;cido thapsigargin/cyclopiazonic, que no es un SERCA como en c&eacute;lulas som&aacute;ticas; (2) efectos de la alto-dosis thapsigargin sobre espermatozoides reflejan principalmente acciones inespec&iacute;ficas en no-SERCAs y; (3) secretora v&iacute;a CA ATPasas contribuir al menos parte de esta actividad de la bomba de CA no - SERCA.

Bombas Ca(2+)-ATPasa (SPCA1) Ca(2) + v&iacute;a secretora, no SERCAs, regulan el complejo [Ca(2+)](i) se&ntilde;ales en espermatozoides humanos.

&#x867D;&#x7136;&#x7CBE;&#x5B50;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x662F;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x539F;&#x56E0;&#x7684;&#x4E0D;&#x5B55;&#x75C7;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x5DEE;&#x8BCA;&#x65AD;&#x548C;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6; &#xFF08;&#x4E0D;&#x5305;&#x62EC;&#x8F85;&#x52A9;&#x751F;&#x6B96;&#x6280;&#x672F;&#xFF09; &#x6CA1;&#x6709;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6311;&#x6218;&#x57FA;&#x672C;&#x7CBE;&#x6DB2;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x7528;&#x5904;&#x548C;&#x8FA9;&#x79F0;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x8303;&#x4F8B;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7ACB;&#x5373;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x5165;&#x6237;&#x7B5B;&#x67E5;&#x53EF;&#x80FD;&#x63D0;&#x9AD8;&#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7B80;&#x5316;&#x7BA1;&#x7406;&#x7684; sub-fertile &#x592B;&#x5987;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4F1A;&#x4F7F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x65B0;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E3A;&#x4F8B;&#xFF0C;&#x7B80;&#x8981;&#x8BF4;&#x660E;&#x5916;&#x5730;&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x53D6;&#x5F97;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x77E5;&#x8BC6;&#x4F1A;&#x6539;&#x53D8;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x4E00;&#x53F0;&#x673A;&#x5668;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6211;&#x4EEC;&#x7406;&#x89E3;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7537;&#x6027;&#x7CBE;&#x5B50;&#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x975E;&#x827A;&#x672F;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

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Although sperm dysfunction is the single most common cause of infertility, we have poor methods of diagnosis and surprisingly no effective treatment (excluding assisted reproductive technology). In this review, we challenge the usefulness of a basic semen analysis and argue that a new paradigm is required immediately. We discuss the use of at-home screening to potentially improve the diagnosis of the male and to streamline the management of the sub-fertile couple. Additionally, we outline the recent progress in the field, for example, in proteomics, which will allow the development of new biomarkers of sperm function. This new knowledge will transform our understanding of the spermatozoon as a machine and is likely to lead to non-ART treatments for men with sperm dysfunction.

Counting sperm does not add up any more: time for a new equation?

Bien que la dysfonction du sperme est la cause la plus fr&#xE9;quente de l&#x26;#39;infertilit&#xE9;, nous avons des m&#xE9;thodes de diagnostic et pauvres &#xE9;tonnamment pas de traitement efficace (&#xE0; l&#x26;#39;exclusion des techniques de reproduction assist&#xE9;e). Dans cette revue, nous remettons en question l&#x26;#39;utilit&#xE9; d&#x26;#39;une analyse du sperme de base et font valoir qu&#x26;#39;un nouveau paradigme est n&#xE9;cessaire imm&#xE9;diatement. Nous discutons de l&#x26;#39;utilisation de d&#xE9;pistage &#xE0; domicile pour potentiellement am&#xE9;liorer le diagnostic du m&#xE2;le et de rationaliser la gestion du couple sous-fertiles. En outre, nous d&#xE9;crivons les progr&#xE8;s r&#xE9;cents dans le domaine, par exemple, en prot&#xE9;omique, ce qui permettra le d&#xE9;veloppement de nouveaux biomarqueurs de la fonction des spermatozo&#xEF;des. Cette nouvelle connaissance va transformer notre compr&#xE9;hension du spermatozo&#xEF;de comme une machine et est susceptible de conduire &#xE0; la non-ART traitements pour les hommes atteints de dysfonction du sperme.

Comptage des spermatozo&#xEF;des ne tient pas debout plus: Le temps d&#x26;#39;une nouvelle &#xE9;quation?

Obwohl Spermien Dysfunktion die h&auml;ufigste Ursache f&uuml;r Unfruchtbarkeit ist, haben wir schlechte Methoden der Diagnostik und &uuml;berraschend keine wirksame Behandlung, (ausgenommen unterst&uuml;tzte reproduktive Technologie). In diesem Bericht wir fordern die N&uuml;tzlichkeit einer grundlegenden Sperma-Analyse und argumentieren, dass ein neues Paradigma sofort erforderlich ist. Wir besprechen die Verwendung des at-Home Screening die Diagnose des M&auml;nnchens potenziell zu verbessern und das Betreiben des sub-fertile Paares. Dar&uuml;ber hinaus beschreiben wir die j&uuml;ngste Fortschritte auf dem Gebiet, z. B. in Proteomics, die die Entwicklung von neuen Biomarkern der Spermienfunktion erm&ouml;glichen. Dieses neue Wissen wird unser Verst&auml;ndnis des Spermiums als Maschine zu verwandeln und kann zu nicht-Kunst-Behandlungen f&uuml;r M&auml;nner mit Sperma Dysfunktion f&uuml;hren.

Z&auml;hlung der Spermien nicht mehr hinzu: Zeit f&uuml;r eine neue Gleichung?

Sebbene la disfunzione degli spermatozoi &egrave; la causa pi&ugrave; comune di infertilit&agrave;, abbiamo scarso metodi di diagnosi e sorprendentemente nessun trattamento efficace (esclusa la procreazione assistita). In questa recensione, ci sfida l&#39;utilit&agrave; di un spermiogramma base e sostengono che un nuovo paradigma &egrave; richiesto immediatamente. Discutiamo l&#39;uso dello screening a domicilio potenzialmente migliorare la diagnosi del maschio e di snellire la gestione della coppia subfertili. Inoltre, noi delineare i recenti progressi nel campo, ad esempio, in proteomica, che permetter&agrave; lo sviluppo di nuovi biomarcatori della funzione dello sperma. Questa nuova conoscenza si trasformer&agrave; la nostra comprensione dello spermatozoo come una macchina e pu&ograve; portare a trattamenti non-arte per gli uomini con la disfunzione degli spermatozoi.

Conteggio dello sperma non tornano pi&ugrave;: tempo per una nuova equazione?

&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x304C;&#x4E0D;&#x598A;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x8A3A;&#x65AD;&#x306E;&#x8CA7;&#x3057;&#x3044;&#x4EBA;&#x3005;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3068;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#xFF08;&#x751F;&#x6B96;&#x88DC;&#x52A9;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x9664;&#x304F;&#xFF09;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x7CBE;&#x6DB2;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x3057;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x304C;&#x5373;&#x5EA7;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x7537;&#x6027;&#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30B5;&#x30D6;&#x80A5;&#x6C83;&#x306A;&#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x7BA1;&#x7406;&#x3092;&#x5408;&#x7406;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x81EA;&#x5B85;&#x3067;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305F;&#x3068;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x5185;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x9032;&#x5C55;&#x3092;&#x6982;&#x8AAC;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x77E5;&#x8B58;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x5909;&#x9769;&#x3057;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x7537;&#x6027;&#x306E;&#x975E;ART&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC815;&#xC790; &#xACC4;&#xC0B0;&#xC744; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xCD94;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;: &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xC815;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;?

Aunque la disfunci&#xF3;n de esperma es la causa m&#xE1;s com&#xFA;n de infertilidad, contamos con m&#xE9;todos de diagn&#xF3;stico pobres y sorprendentemente no hay un tratamiento eficaz (con exclusi&#xF3;n de las t&#xE9;cnicas de reproducci&#xF3;n asistida). En esta revisi&#xF3;n, desafiamos a la utilidad de un an&#xE1;lisis de semen b&#xE1;sico y argumentan que un nuevo paradigma se requiere de inmediato. Se discute el uso de la evaluaci&#xF3;n en el hogar para mejorar potencialmente el diagn&#xF3;stico del var&#xF3;n y de racionalizar la gesti&#xF3;n de la pareja sub-f&#xE9;rtil. Adem&#xE1;s, se exponen los avances recientes en el campo, por ejemplo, en la prote&#xF3;mica, que permitir&#xE1; el desarrollo de nuevos biomarcadores de la funci&#xF3;n esperm&#xE1;tica. Este nuevo conocimiento va a transformar nuestra comprensi&#xF3;n del espermatozoide como una m&#xE1;quina y es probable que conduzca a la no-ART tratamientos para hombres con disfunci&#xF3;n esperma.

Conteo de esperma no suma m&#xE1;s: Tiempo para una nueva ecuaci&#xF3;n?

&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E; (NO) &#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6D3B;&#x529B;&#x548C;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x4E0D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x9E1F;&#x82F7;&#x9170;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E5F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4FEE;&#x6539;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x901A;&#x8FC7; S nitrosylation &#x7684;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x673A;&#x5236;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5728;&#x86EE;&#x8352;&#x4E4B;&#x5730;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4F9D;&#x8D56;&#x53CA;&#x5176;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4FEE;&#x9970;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8FBE;&#x5230;&#x53D7;&#x7CBE;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x662F;&#x786E;&#x5B9A;&#x76EE;&#x6807;&#x7684; S nitrosylation &#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E0E;&#x6CA1;&#x6709;&#x6350;&#x52A9;&#x56FD;&#x548C; S-&#x4E9A;&#x785D;&#x57FA;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x7D20;&#x5F00;&#x5173;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x7528; MS/&#x5973;&#x58EB; 240 S-&#x4E9A;&#x785D;&#x57FA;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x65F6;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5B75;&#x5316;&#x4E0E; S-&#x4E9A;&#x785D;&#x57FA;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x3002;&#x4E2D;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518;&#x80BD;&#x6216;&#x672A;&#x7ECF;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x6837;&#x672C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6700;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x4E00;&#x8D2F;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x57FA;&#x4E8E;&#x591A;&#x80BD;&#x5217;&#x5165;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x76EE;&#x6807; S nitrosylation &#x5728;&#x5176;&#x4ED6;&#x5982;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5546;&#x54C1;&#x53CA;&#x670D;&#x52A1;&#x7A0E;&#x548C;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x4F46;&#x8FD8;&#x5305;&#x62EC; A &#x6FC0;&#x9176;&#x951A;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D; (AKAP) &#x7C7B;&#x578B; 3 &#x548C; 4&#xFF0C;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x901A;&#x9053;&#x86CB;&#x767D; 3 &#x548C; semenogelin 1 &#x548C; 2 &#x7684;&#x65B0;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x539F;&#x4F4D;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x663E;&#x793A; postacrosomal &#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x5934;&#x90E8;&#x548C;&#x6574;&#x4E2A;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7684; S-&#x4E9A;&#x785D;&#x57FA;&#x5316;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;S nitrosylation &#x5728;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E2D;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x76EE;&#x6807;&#x5305;&#x62EC;&#x4EE5;&#x524D;&#x672A;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x91CD;&#x8981;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x9274;&#x5B9A;&#x5C06;&#x65B0;&#x578B;&#x6D1E;&#x5BDF; NO &#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x673A;&#x7406;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x542B;&#x6709;&#x86CB;&#x767D; S nitrosylation &#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#xFF1A; &#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x8C03;&#x5236;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x66FF;&#x4EE3;&#x673A;&#x5236;&#x5417;&#xFF1F;

Nitric oxide (NO) enhances human sperm motility and capacitation associated with increased protein phosphorylation. NO activates soluble guanylyl cyclase, but can also modify protein function covalently via S-nitrosylation of cysteine. Remarkably, this mechanism remains unexplored in sperm although they depend on post-translational protein modification to achieve changes in function required for fertilisation. Our objective was to identify targets for S-nitrosylation in human sperm. Spermatozoa were incubated with NO donors and S-nitrosylated proteins were identified using the biotin switch assay and a proteomic approach using MS/MS. 240 S-nitrosylated proteins were detected in sperm incubated with S-nitroso-glutathione. Minimal levels were observed in glutathione or untreated samples. Proteins identified consistently based on multiple peptides included established targets for S-nitrosylation in other cells e.g. tubulin, GST and HSPs but also novel targets including A-kinase anchoring protein (AKAP) types 3 and 4, voltage-dependent anion-selective channel protein 3 and semenogelin 1 and 2. In situ localisation revealed S-nitrosylated targets on the postacrosomal region of the head and throughout the flagellum. Potential targets for S-nitrosylation in human sperm include physiologically significant proteins not previously reported in other cells. Their identification will provide novel insight into the mechanism of action of NO in spermatozoa.

Human spermatozoa contain multiple targets for protein S-nitrosylation: an alternative mechanism of the modulation of sperm function by nitric oxide?

L&#39;oxyde nitrique (non) am&eacute;liore la motilit&eacute; des spermatozo&iuml;des humains et capacitation associ&eacute;e &agrave; la phosphorylation de la prot&eacute;ine accrue. N&#39;active guanylyl cyclase soluble, mais peut &eacute;galement modifier la fonction de prot&eacute;ine par covalence via S-nitrosylation de la cyst&eacute;ine. Fait remarquable, ce m&eacute;canisme demeure inexplor&eacute; en sperme bien qu&#39;elles d&eacute;pendent de la modification post-traductionnelle de prot&eacute;ines pour produire des changements dans la fonction requise pour la f&eacute;condation. Notre objectif &eacute;tait d&#39;identifier des cibles pour S-nitrosylation dans le sperme humain. Les spermatozo&iuml;des ont &eacute;t&eacute; incub&eacute;es avec aucun des donateurs et S-nitrosyl&eacute;s prot&eacute;ines ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;es &agrave; l&#39;aide de l&#39;essai de commutateur de biotine et une approche prot&eacute;omique en utilisant MS/MS. 240 S-nitrosyl&eacute;s prot&eacute;ines ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s dans le sperme incub&eacute;es avec le glutathion-S-nitroso. Des taux minimaux ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s en glutathion ou &eacute;chantillons non trait&eacute;s. Prot&eacute;ines identifi&eacute;es de mani&egrave;re coh&eacute;rente bas&eacute;e sur plusieurs peptides cibles &eacute;tablis inclus S-nitrosylation dans d&#39;autres cellules par exemple tubuline, TPS et HSP mais &eacute;galement nouvelles cibles, y compris la kinase-a ancrage (AKAP) types 3 et 4, voltage-d&eacute;pendants canal anionique s&eacute;lective prot&eacute;ine 3 et semenogelin 1 et 2. Localisation in situe a r&eacute;v&eacute;l&eacute; S-nitrosyl&eacute;s cibles sur la r&eacute;gion postacrosomal de la t&ecirc;te et tout au long du flagelle. Des cibles potentielles pour S-nitrosylation dans le sperme humain comprennent des prot&eacute;ines physiologiquement significatives non signal&eacute;s auparavant dans d&#39;autres cellules. Leur identification fournira de nouveaux mieux comprendre le m&eacute;canisme d&#39;action du NO dans les spermatozo&iuml;des.

Les spermatozo&iuml;des humains contiennent plusieurs cibles pour la prot&eacute;ine S-nitrosylation : un m&eacute;canisme alternatif de la modulation de la fonction spermatique par l&#39;oxyde nitrique ?

Stickstoffmonoxid (NO) erh&ouml;ht menschliche Spermien-Motilit&auml;t und Kapazitation erh&ouml;hte Proteinphosphorylierung zugeordnet. NICHT l&ouml;slichen Guanylatzyklase Guanylatcyclase aktiviert, sondern k&ouml;nnen auch Proteinfunktion kovalent &uuml;ber S-Nitrosylation von Cystein &auml;ndern. Bemerkenswert ist, bleibt dieser Mechanismus unerforschte in Sperma, obwohl sie, POSTTRANSLATIONELLE Protein &Auml;nderungen abh&auml;ngen, &Auml;nderungen in der Funktion, die f&uuml;r die Befruchtung zu erreichen. Unser Ziel war es, die Ziele f&uuml;r S-Nitrosylation in den menschlichen Samenzellen zu identifizieren. Spermatozoen wurden keine Geber inkubiert und S-Nitrosylated-Proteine wurden identifiziert mit der Biotin-Switch-Assay und Proteomic Ansatz using die MS/MS 240 S-Nitrosylated Proteine im Sperma inkubiert mit S-Nitroso-Glutathion festgestellt wurden. Minimale Stufen wurden in Glutathion oder unbehandelten Proben beobachtet. Proteine, die konsequent identifiziert anhand mehrerer Peptide enthalten festgelegte Ziele f&uuml;r S-Nitrosylation in anderen z.B. Tubulin, GST und HSPs Zellen sondern auch neue Ziele, darunter A-Kinase Verankerung Protein (AKAP) Typen 3 und 4, Spannung-abh&auml;ngigen Anion-selektive Kanal Protein 3 und Semenogelin 1 und 2. In-situ Lokalisierung offenbart S-Nitrosylated Zielen auf die postacrosomal Region des Kopfes und die Gei&szlig;el. M&ouml;gliche Ziele f&uuml;r S-Nitrosylation in den menschlichen Samenzellen enthalten physiologisch wichtige Proteine, die nicht bereits in anderen Zellen berichtet. Ihre Identifikation bieten neuartige Einblicke in die Wirkungsweise von No in Spermien.

Menschliche Spermien enthalten mehrere Ziele f&uuml;r Protein S-Nitrosylation: ein alternativer Mechanismus, der die Modulation der Spermienfunktion von Stickstoffmonoxid?

L&#39;ossido nitrico (NO) migliora la motilit&agrave; degli spermatozoi umani e capacitazione associati con la fosforilazione della proteina aumentata. NON si attiva solubile guanil ciclasi, ma pu&ograve; anche modificare la funzione della proteina covalentemente tramite S-nitrosilazione della cisteina. Notevolmente, questo meccanismo rimane inesplorato in sperma anche se esse dipendono dalla modifica alberino-di traduzione proteica per ottenere cambiamenti nella funzione necessaria per la fecondazione. Il nostro obiettivo era quello di identificare gli obiettivi per la S-nitrosilazione in sperma umano. Gli spermatozoi sono stati incubati con donatori di NO e S-nitrosylated proteine sono state identificate mediante il dosaggio di biotina interruttore e un approccio proteomico utilizzando MS/MS 240 S-nitrosylated proteine sono state rilevate in spermatozoi incubati con S-nitroso-glutathione. Livelli minimi sono stati osservati in campioni non trattati o glutatione. Proteine identificate in modo coerente basato su peptidi multipli inclusi gli obiettivi stabiliti per la S-nitrosilazione in altre cellule per esempio tubulina, GST e HSP ma anche nuovi bersagli compreso A-chinasi ancoraggio (AKAP) tipi 3 e 4, voltaggio-dipendente selettivo anione canale proteina 3 e semenogelin 1 e 2. Localizzazione in situ ha rivelato gli obiettivi di S-nitrosylated sulla regione postacrosomal della testa e tutto il flagello. Bersagli potenziali per la S-nitrosilazione in sperma umano includono proteine fisiologicamente significative non precedentemente segnalate in altre cellule. Loro identificazione fornir&agrave; romanzo spaccato il meccanismo di azione del NO in spermatozoi.

Spermatozoi umani contengono pi&ugrave; bersagli per le proteine S-nitrosilazione: un meccanismo alternativo della modulazione della funzione dello sperma di ossido nitrico?

&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3068;&#x53D7;&#x7CBE;&#x80FD;&#x7372;&#x5F97;&#x5897;&#x52A0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20; (NO) &#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x3044;&#x3048;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3082;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x304C;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x672A;&#x8E0F;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x306A;&#x3044;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x57F9;&#x990A;&#x3001;S nitrosylated &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30D3;&#x30AA;&#x30C1;&#x30F3; &#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1; &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0; &#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; MS &#x3055;&#x3093; 240 S nitrosylated &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; S-&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30BD;-&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x7279;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x672A;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x76EE;&#x6A19;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;GST &#x3068; HSPs &#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x3082; A &#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; &#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (AKAP) &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; 3 &#x3068; 4&#x3001;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x9670;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; 3 &#x3068; semenogelin 1 &#x3068; 2 &#x306A;&#x3069;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6A19;&#x7684;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x304C;&#x3002;In situ &#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; S nitrosylated &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; postacrosomal &#x5730;&#x57DF;&#x306E;&#x982D;&#x3068;&#x97AD;&#x6BDB;&#x5168;&#x4F53;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x306F;&#x4ED6;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x305F;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E; NO &#x306E;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB;&#x306E;: &#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x624B;&#x6BB5;&#x3067;&#x3059;&#x304B;&#xFF1F;

&#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C; (NO)&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC0F; capacitation &#xC99D;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB2C8; &#xC6A9; &#xD574; guanylyl cyclase&#xB97C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#x70AD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;&#xC758; S-nitrosylation&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218;&#xC815;&#xD560; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;,&#xC774; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xD568;&#xC218; &#xC815;&#xC758;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB2E2; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC815; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xAC1C;&#xCC99; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; S nitrosylation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC2E0; &#xD588;&#xB2E4; &#xC544;&#xBB34; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790;&#xC640; &#xC778; &#xD050;&#xBCA0;&#xC774; &#xD305; &#xBC0F; S nitrosylated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; MS/&#xC591; 240 S nitrosylated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; S-nitroso-glutathione&#xB97C; incubated &#xC815;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; biotin &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; proteomic &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC740; glutathione &#xB610;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xAD00; &#xB418; &#xAC8C; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAE30;&#xBC18; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC124;&#xC815; &#xB41C; &#xBAA9;&#xD45C; &#xB2E4;&#xB978; S-nitrosylation tubulin, GST&#xC640; HSPs &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4; &#xC140;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC18C;&#xC124; &#xB300;&#xC0C1; A &#xD0A4; &#xACE0;&#xC815; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (AKAP) &#xC720;&#xD615; 3, 4, &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xCC44;&#xB110; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 3, semenogelin 1, 2 &#xB4F1;. &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD604;&#xC9C0;&#xD654;&#xB97C; &#xC2E0;&#xC124;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC758; postacrosomal &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; S nitrosylated &#xB300;&#xC0C1; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; S nitrosylation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC0C1; &#xB2E4;&#xB978; &#xC140;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xC21C;&#xC218; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC544;&#xB2C8; &#xBD84;&#xC2E0;&#xC758; &#xD589;&#xB3D9;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; S nitrosylation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;: &#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC815;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBCC0;&#xC870;&#xC758; &#xB300;&#xCCB4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;?

&Oacute;xido n&iacute;trico (NO) mejora la motilidad del esperma humano y la capacitaci&oacute;n asociada a la fosforilaci&oacute;n de la prote&iacute;na creciente. NO activa ciclasa soluble guanylyl, pero tambi&eacute;n puede modificar la funci&oacute;n de la prote&iacute;na covalentemente v&iacute;a S-nitrosilaci&oacute;n de ciste&iacute;na. Notable, este mecanismo permanece inexplorado en espermatozoides aunque dependen de la modificaci&oacute;n poste-de translaci&oacute;n de la prote&iacute;na para lograr cambios en la funci&oacute;n necesaria para la fecundaci&oacute;n. Nuestro objetivo fue identificar objetivos para S-nitrosilaci&oacute;n en espermatozoides humanos. Espermatozoides se incubaron con NO donantes y S-nitrosylated las prote&iacute;nas fueron identificadas mediante el ensayo de interruptor de biotina y un enfoque prote&oacute;mico usar MS/MS. 240 S-nitrosylated prote&iacute;nas fueron detectadas en espermatozoides incubados con S-nitroso-glutati&oacute;n. Se observaron niveles m&iacute;nimos en glutati&oacute;n o muestras no tratadas. Prote&iacute;nas identificadas consistentemente basan en m&uacute;ltiples p&eacute;ptidos incluidos objetivos establecidos para S-nitrosilaci&oacute;n en otras c&eacute;lulas por ejemplo tubulina, GST y HSPs pero tambi&eacute;n nuevas dianas como quinasa A anclaje (AKAP) tipos 3 y 4, dependientes de voltaje canal ani&oacute;nico selectivo prote&iacute;na 3 y semenogelin 1 y 2. Localizaci&oacute;n in situ revel&oacute; objetivos de S-nitrosylated en la regi&oacute;n postacrosomal de la cabeza y a lo largo del flagelo. Objetivos potenciales para S-nitrosilaci&oacute;n en espermatozoides humanos incluyen prote&iacute;nas fisiol&oacute;gicamente significativas divulgadas no previamente en otras c&eacute;lulas. Su identificaci&oacute;n proporcionar&aacute; nueva penetraci&oacute;n en el mecanismo de acci&oacute;n del NO en espermatozoides.

&iquest;Espermatozoides humanos contienen m&uacute;ltiples objetivos para la prote&iacute;na S-nitrosilaci&oacute;n: un mecanismo alternativo de la modulaci&oacute;n de la funci&oacute;n de la esperma por &oacute;xido n&iacute;trico?

&#x9499;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x673A;&#x80FD;&#xFF0C;&#x6B63;&#x5728;&#x5BC6;&#x5207;&#x53C2;&#x4E0E;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x3001; &#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x548C; hyperactivation &#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4E3E;&#x8DB3;&#x8F7B;&#x91CD;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x7B80;&#x8981;&#x8BF4;&#x660E;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CA;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x673A;&#x5236;&#x5DF2;&#x9002;&#x5E94;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6210;&#x719F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9499;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x7136;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E09;&#x79CD;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x5BF9;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#xFF1A; &#x5B55;&#x916E;&#x548C;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E; (&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x5375;&#x4E18;&#x900F;&#x660E;&#x8D28;&#x9178;)&#x3001; 4-&#x6C28;&#x57FA;&#x5421;&#x5576;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9499;&#x4FE1;&#x53F7;&#x540E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5934;&#x90E8;&#x53CA;&#x9888;&#x90E8;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x65F6;&#x4FEE;&#x6539;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x4E0D;&#x5BF9;&#x79F0;&#x5F2F;&#x66F2;&#x7684;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x7684;&#x97AD;&#x6BDB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6548;&#x679C;&#x53CD;&#x6620;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x52A8;&#x5458;&#x7684;&#x9499;&#x50A8;&#x5B58;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9888;&#x90E8;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x9499;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8FD9;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E13;&#x4E1A;&#x5316;&#x7684;&#x548C;&#x6781;&#x5176;&#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4F7F;&#x7528;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x9499;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x90A3;&#x4E9B;&#x4FE1;&#x53F7; &#39;&#x5DE5;&#x5177;&#39; &#x96C7;&#x7528;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6765;&#x751F;&#x6210;&#x4E0D;&#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#xFF0C;&#x5C06;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38; &#39;&#x786C;&#x8FDE;&#x7EBF;&#39; &#x9499;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#39;&#x6F0F;&#39; &#x4E4B;&#x95F4;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9499;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x5C06;&#x751F;&#x6210;&#x4F5C;&#x51FA;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x635F;&#x5BB3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x3002;

&#x7B79;&#x96C6;&#x8D44;&#x91D1;&#x5B58;&#x50A8;&#x4E2D;&#x7684;&#x9499;&#x5BF9;&#x9888;&#x90E8;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50; &mdash; &mdash; &#x4E00;&#x79CD;&#x97AD;&#x6BDB;&#x6D3B;&#x6027;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Calcium signalling plays a pivotal role in sperm physiology, being intimately involved in the regulation of acrosome reaction, chemotaxis and hyperactivation. Here we describe briefly the mechanisms of calcium regulation in somatic cells and the ways in which these mechanisms have been adapted to function in mature spermatozoa. We then consider recent data from this and other laboratories on the responses of sperm to three compounds: progesterone and nitric oxide (both products of the cumulus oophorus) and 4-aminopyridine. All of these compounds induce calcium signals in the posterior sperm head and neck region and, when applied at appropriate concentrations, modify flagellar activity, causing asymmetric bending of the proximal flagellum. We argue that these effects reflect a common mode of action, mobilisation of calcium stored in the sperm neck region. Finally we consider the nature of calcium signalling pathways in sperm. We suggest that this highly specialised and extremely polarised cell, though working with the same calcium signalling 'tools' as those of somatic cells, employs them to generate unusually 'hard-wired' calcium signals that do not act to integrate stimuli. 'Leakage' between these calcium signalling pathways will generate inappropriate responses, compromising functioning of the cell.

Mobilisation of stored calcium in the neck region of human sperm--a mechanism for regulation of flagellar activity.

Signalisation calcique joue un r&ocirc;le central dans la physiologie de sperme, &eacute;tant intimement impliqu&eacute;e dans la r&eacute;gulation de la r&eacute;action de l&#39;acrosome, chimiotactisme et hyperactivation. Ici, nous d&eacute;crivons bri&egrave;vement les m&eacute;canismes de r&eacute;gulation du calcium dans les cellules somatiques et les fa&ccedil;ons dont ces m&eacute;canismes ont &eacute;t&eacute; adapt&eacute;es pour fonctionner dans les spermatozo&iuml;des matures. Nous consid&eacute;rons ensuite les donn&eacute;es r&eacute;centes de ceci et d&#39;autres laboratoires sur les r&eacute;ponses de sperme &agrave; trois compos&eacute;s : progest&eacute;rone et monoxyde d&#39;azote (les deux produits de l&#39;oophorus cumulus) et 4-aminopyridine. Tous ces compos&eacute;s induisent les signaux calciques dans la r&eacute;gion de t&ecirc;te et du cou de sperme post&eacute;rieur et, lorsqu&#39;il est appliqu&eacute; &agrave; des concentrations appropri&eacute;es, modifier l&#39;activit&eacute; flagellaire, provoquant la d&eacute;formation asym&eacute;trique du flagelle proximal. Nous croyons que ces effets refl&egrave;tent un mode commun d&#39;action, mobilisation du calcium stock&eacute; dans la r&eacute;gion de cou de sperme. Enfin, nous consid&eacute;rons la nature du calcium dans le sperme, les voies de signalisation. Nous sugg&eacute;rons que cela hautement sp&eacute;cialis&eacute;e et cellule extr&ecirc;mement polaris&eacute;, bien que travaillant avec le calcium m&ecirc;me signalisation &laquo; outils &raquo; que ceux des cellules somatiques, emploie pour g&eacute;n&eacute;rer des signaux de calcium anormalement &laquo; c&acirc;bl&eacute; &raquo; qui n&#39;agissent pas pour int&eacute;grer des stimuli. &laquo; Fuite &raquo; entre ces calcium signalisation des voies vont g&eacute;n&eacute;rer des r&eacute;actions inappropri&eacute;es, de compromettre le fonctionnement de la cellule.

Mobilisation du calcium stock&eacute; dans la r&eacute;gion du cou du sperme humain--un m&eacute;canisme de r&eacute;gulation de l&#39;activit&eacute; flagellaire.

Signalisieren von Kalzium spielt eine zentrale Rolle im Sperma Physiologie, eng in die Regulierung des Akrosom Reaktion, Chemotaxis und Hyperactivation beteiligt. Hier beschreiben wir kurz die Mechanismen der Kalzium-Verordnung in K&ouml;rperzellen und die M&ouml;glichkeiten, in denen diese Mechanismen Funktion in reifer Spermien angepasst wurden. Wir halten dann den letzten Daten aus diesem und anderen Labors auf die Antworten der Spermien drei Verbindungen: Progesteron und Stickstoffmonoxid (beide Produkte von der Cumulus Oophorus) und 4-Pyridinamin. Alle diese Verbindungen induzieren Calcium-Signale in der hinteren Sperma Kopf und Hals-Region und, wenn bei geeigneten Konzentrationen angewendet &auml;ndern Flimmerband Aktivit&auml;t verursacht asymmetrische Biegen von der proximalen Flagellen. Wir argumentieren, dass diese Effekte einer gemeinsamen Wirkmechanismus, Mobilisierung von Calcium gespeichert in der Spermien-Hals-Region widerspiegeln. Schlie&szlig;lich betrachten wir die Natur des Kalzium-Signalisierung Wege im Sperma. Wir schlagen vor, da&szlig; diese hochspezialisierte und extrem verh&auml;rteten Zellen, arbeiten aber mit der gleichen Kalzium Signalisierung &#39;Extras&#39;, wie die der somatischen Zellen, sie ungew&ouml;hnlich &#39;verdrahtet&#39; Calcium-Signale zu generieren, die nicht handeln besch&auml;ftigt, um Reize zu integrieren. &quot;Leckage&quot; zwischen diesen Kalzium signalisieren, dass Wege unpassende Antworten erstellt werden, beeintr&auml;chtigen die Funktionsweise der Zelle.

Mobilisierung der gespeicherte Kalzium in der Hals-Region des menschlichen Samenzellen--einen Mechanismus zur Regelung der Flimmerband T&auml;tigkeit.

Segnalazione di calcio gioca un ruolo cruciale nella fisiologia dello sperma, essendo intimamente coinvolto nella regolazione della reazione acrosomiale, chemiotassi e hyperactivation. Qui descriviamo brevemente i meccanismi di regolazione del calcio nelle cellule somatiche e i modi in cui questi meccanismi sono stati adattati alla funzione in spermatozoi maturi. Consideriamo quindi dati recenti da questo e da altri laboratori sulle risposte degli spermatozoi a tre composti: progesterone e ossido nitrico (entrambi prodotti oophorus del cumulus) e 4-aminopiridina. Tutti questi composti indurre segnali di calcio nella regione testa e collo posteriore dello sperma e, quando applicato a concentrazioni appropriate, modificare attivit&agrave; flagellari, causando una curvatura asimmetrica del flagello prossimale. Ci sostengono che questi effetti riflettono una modalit&agrave; comune di azione, mobilitazione di calcio memorizzato nella regione del collo di sperma. Infine, consideriamo la natura del calcio segnalazione percorsi nello sperma. Suggeriamo che questo altamente specializzati e cellule estremamente polarizzata, per&ograve; lavorando con il calcio stesso segnalazione &#39;strumenti&#39; come quelli delle cellule somatiche, li impiega per generare segnali di calcio insolitamente &#39;filo&#39; che non agiscono per integrare stimoli. &#39;Perdite&#39; tra questi calcio segnalazione percorsi generer&agrave; risposte inappropriate, compromettendo il funzionamento della cellula.

Mobilitazione del calcio memorizzato nella regione del collo di sperma umano - un meccanismo per la regolazione dell&#39;attivit&agrave; flagellari.

&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5BC6;&#x63A5;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;, &#x904A;&#x8D70;&#x80FD;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x3067;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x3067;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x95A2;&#x6570;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x304B;&#x3089;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B; 3 &#x3064;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3092;&#x8003;&#x616E;: &#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20; (&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x3042;&#x305A;&#x304B;&#x308B;&#x5375;&#x5B50;&#xFF09; &#x3068; 4-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30D4;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x5F8C;&#x90E8;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x982D;&#x9838;&#x90E8;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306E;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x306E;&#x97AD;&#x6BDB;&#x975E;&#x5BFE;&#x79F0;&#x66F2;&#x3052;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x9996;&#x306B;&#x84C4;&#x3048;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x52D5;&#x54E1;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5C02;&#x9580;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x3092;&#x7D71;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x52D5;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x7570;&#x5E38;&#x306B; &#39;&#x30CF;&#x30FC;&#x30C9;&#x30EF;&#x30A4; &#x30E4;&#x30FC;&#x30C9;&#39; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A; &#39;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#39; &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x540C;&#x3058;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3068;&#x50CD;&#x3044;&#x3066;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x504F;&#x5149;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#39;&#x30EA;&#x30FC;&#x30AF;&#39; &#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E0D;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x640D;&#x306A;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x3002;

&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;--&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x9838;&#x90E8;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x52D5;&#x54E1;&#x3002;

&#xCE7C;&#xC298; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; acrosome &#xBC18;&#xC751;&#xACFC; chemotaxis hyperactivation&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828; &#xB418; &#xACE0; &#xC815;&#xC790; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xCD94;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC640;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC131;&#xC219; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE7C;&#xC298; &#xC870;&#xC808; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xAC04;&#xB7B5;&#xD558;&#xAC8C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC774; &#xACE0; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xACE0;&#xB824;: &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xACFC; &#xC9C8;&#xC18C;&#xC758; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C; (&#xC801; &#xC6B4; oophorus&#xC758; &#xB450; &#xC81C;&#xD488; &#xBAA8;&#xB450;) &#xBC0F; 4-aminopyridine. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD6C4;&#xBD80; &#xC815;&#xC790; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC640; &#xBAA9; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xCE7C;&#xC298; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0;, &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC801;&#xC6A9; &#xB420; &#xB54C; &#xC218;&#xC815; flagellar &#xD65C;&#xB3D9;, &#xADFC; &#xC704; &#xC2E0;&#xC124;&#xC758; &#xBE44;&#xB300;&#xCE6D; &#xD728; &#xBC1C;&#xC0DD;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC18;&#xC601; &#xC791;&#xC5C5;, &#xC815;&#xC790; &#xBAA9; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC800;&#xC7A5; &#xB41C; &#xCE7C;&#xC298;&#xC758; &#xB3D9;&#xC6D0;&#xC758; &#xACF5;&#xD1B5; &#xBAA8;&#xB4DC; &#xC8FC;&#xC7A5; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCE7C;&#xC298; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xACE0;&#xB824; &#xD558;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xC774; &#xB192;&#xC740; &#xC804;&#xBB38; &#xD558; &#xACE0; &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;, &#39;&#xB3C4;&#xAD6C;&#39; &#xC2E0;&#xD638; &#xAC19;&#xC740; &#xCE7C;&#xC298; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB9E4;&#xC6B0; polarised &#xC140; &#xC790;&#xADF9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xD589;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA74; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#39;&#xC720;&#xC120;&#39; &#xCE7C;&#xC298; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#39; &#xB204;&#xC124; &#39;&#xC774; &#xCE7C;&#xC298; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xBD80;&#xC801; &#xC808; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xC0DD;&#xC131;, &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC800;&#xD558; &#xC0AC;&#xC774;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;-flagellar &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xBAA9; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC800;&#xC7A5; &#xB41C; &#xCE7C;&#xC298;&#xC758; &#xB3D9;&#xC6D0;.

Se&ntilde;alizaci&oacute;n de calcio desempe&ntilde;a un papel fundamental en la fisiolog&iacute;a de la esperma, estar &iacute;ntimamente involucrado en la regulaci&oacute;n de la reacci&oacute;n acros&oacute;mica, Quimiotaxis y hyperactivation. Aqu&iacute; describimos brevemente los mecanismos de regulaci&oacute;n del calcio en las c&eacute;lulas som&aacute;ticas y las formas en que estos mecanismos han sido adaptados para funcionar en espermatozoides maduros. Luego consideramos los datos recientes de este y otros laboratorios en las respuestas de los espermatozoides a tres compuestos: progesterona y &oacute;xido n&iacute;trico (ambos productos de la c&uacute;mulo o&oacute;foro) y 4-aminopiridina. Todos estos compuestos inducen se&ntilde;ales de calcio en la regi&oacute;n de cabeza y cuello posterior esperma y, cuando se aplica en concentraciones adecuadas, modifican la actividad flagelar, provocando flexi&oacute;n asim&eacute;trica del flagelo proximal. Argumentamos que estos efectos reflejan un modo com&uacute;n de acci&oacute;n, la movilizaci&oacute;n de calcio almacenado en la regi&oacute;n del cuello del espermatozoide. Finalmente, consideramos la naturaleza del calcio v&iacute;as en espermatozoides de se&ntilde;alizaci&oacute;n. Sugerimos que esta altamente especializada y celular extremadamente polarizado, aunque trabajando con el mismo calcio se&ntilde;alizaci&oacute;n &#39;herramientas&#39; como los de las c&eacute;lulas som&aacute;ticas, emplea para generar se&ntilde;ales de calcio inusualmente &#39;hard-wired&quot;que no act&uacute;an para integrar est&iacute;mulos. &#39;Fuga&#39; entre estos calcio se&ntilde;alizaci&oacute;n v&iacute;as generar&aacute; respuestas inadecuadas, comprometer el funcionamiento de la c&eacute;lula.

Movilizaci&oacute;n de calcio almacenado en la regi&oacute;n del cuello de espermatozoides humanos--un mecanismo para la regulaci&oacute;n de la actividad flagelar.

No &#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x5408;&#x9176; (NOS) &#x7684;&#x4E00;&#x4EE3;&#x88AB;&#x5377;&#x5165;&#x914D;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x63A5;&#x89E6;&#x9020;&#x6210;&#x5B58;&#x50A8;&#x7ECF;&#x52A8;&#x5458;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x9E1F;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#xFF0C;&#x4F46;&#x88AB;&#x6A21;&#x4EFF;&#x7684;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518; S-&#x4E9A;&#x785D;&#x57FA;-&#x80BD; &#xFF08;GSNO &#xFF1B; S nitrosylating &#x4EE3;&#x7406;&#xFF09;&#x3002;&#x5E94;&#x7528;&#x9187;&#x5904;&#x7406;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x5C11;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-SNO &#x7FA4;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FC5;&#x901F;&#x626D;&#x8F6C;&#x7684;&#x65E0;&#x884C;&#x52A8;&#x548C; GSNO &#x4E0A; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x4E0D;&#x662F;&#xFF0C;GSNO &#x548C;&#x9187;&#x5904;&#x7406;&#x5BF9;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D; S nitrosylation&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x7D20;&#x5F00;&#x5173;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x4F3C;&#x5176;&#x884C;&#x52A8;&#x5BF9; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x900F;&#x9732;&#x672C;&#x6784;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B; NOS &#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8F93;&#x5375;&#x7BA1;&#x548C;&#x79EF; &#xFF08;&#x6295;&#x8D44;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C42;&#xFF09;&#x3002;4&#xFF0C;5-diaminofluorescein &#xFF08;DAF&#xFF09; &#x67D3;&#x8272;&#x8868;&#x660E; no &#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x5B75;&#x5316;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E0E;&#x8F93;&#x5375;&#x7BA1;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; S nitrosylation &#x7C7B;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x548C; GSNO &#x6240;&#x81F4;&#x3002;&#x5B55;&#x916E; &#xFF08;&#x5375;&#x4E18;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4EA7;&#x7269;&#xFF09; &#x8FD8;&#x7B79;&#x96C6;&#x5B58;&#x50A8;&#x7684;&#x7ECF;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;&#x9884;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6CA1;&#x6709;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x5F3A;&#x5B55;&#x6FC0;&#x7D20;&#x5F71;&#x54CD; [Ca(2+)](i)&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x97AD;&#x6BDB;&#x6E38;&#x89C8;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x8FD9;&#x6837;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x4E0D;&#x89C4;&#x8303;&#x52A8;&#x5458;&#x5B58;&#x50A8;&#x7ECF;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D; S-nitrosylation&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x884C;&#x52A8;&#x662F;&#x534F;&#x540C;&#x4E0E;&#x5B55;&#x916E;&#xFF0C;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6B64;&#x589E;&#x6548;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53D7;&#x7CBE;&#x914D;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;

Ca2 + &#x5546;&#x5E97;&#x53CA;&#x7531; S nitrosylation &#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x97AD;&#x6BDB;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x52A8;&#x5458;&#xFF1A; NO &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x5973;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x9053;&#x5408;&#x6210;&#x3002;

Generation of NO by nitric oxide synthase (NOS) is implicated in gamete interaction and fertilisation. Exposure of human spermatozoa to NO donors caused mobilisation of stored Ca(2+) by a mechanism that did not require activation of guanylate cyclase but was mimicked by S-nitroso-glutathione (GSNO; an S-nitrosylating agent). Application of dithiothreitol, to reduce protein -SNO groups, rapidly reversed the actions of NO and GSNO on [Ca(2+)](i). The effects of NO, GSNO and dithiothreitol on sperm protein S-nitrosylation, assessed using the biotin switch method, closely paralleled their actions on [Ca(2+)](i). Immunofluorescent staining revealed constitutive and inducible NOS in human oviduct and cumulus (the cellular layer investing the oocyte). 4,5-diaminofluorescein (DAF) staining demonstrated production of NO by these tissues. Incubation of human sperm with oviduct explants induced sperm protein S-nitrosylation resembling that induced by NO donors and GSNO. Progesterone (a product of cumulus cells) also mobilises stored Ca(2+) in human sperm. Pre-treatment of sperm with NO greatly enhanced the effect of progesterone on [Ca(2+)](i), resulting in a prolonged increase in flagellar excursion. We conclude that NO regulates mobilisation of stored Ca(2+) in human sperm by protein S-nitrosylation, that this action is synergistic with that of progesterone and that this synergism is potentially highly significant in gamete interactions leading to fertilisation.

Mobilisation of Ca2+ stores and flagellar regulation in human sperm by S-nitrosylation: a role for NO synthesised in the female reproductive tract.

G&eacute;n&eacute;ration de NO par l&#39;oxyde nitrique synthase (NOS) est impliqu&eacute;e dans la fertilisation et l&#39;interaction de gam&egrave;tes. L&#39;exposition des spermatozo&iuml;des humains &agrave; aucun donateurs provoqu&eacute; mobilisation de Ca(2+) stock&eacute;es par un m&eacute;canisme qui ne n&eacute;cessitait pas d&#39;activation de la guanylate cyclase, mais a &eacute;t&eacute; imit&eacute; par le S-nitroso-glutathion (GNSO ; un agent S-nitrosylating). Application de dithiothr&eacute;itol, pour r&eacute;duire les groupes SNO - prot&eacute;ine, invers&eacute;e rapidement les actions du non et le GNSO sur [Ca(2+)](i). Les effets de NO, le GNSO et le dithiothr&eacute;itol sur la prot&eacute;ine S-nitrosylation, &eacute;valu&eacute;e &agrave; l&#39;aide de la m&eacute;thode de commutateur de biotine, de sperme parall&egrave;lement &eacute;troitement leurs actions sur [Ca(2+)](i). Immunofluorescence a r&eacute;v&eacute;l&eacute; NOS constitutives et inductibles dans l&#39;oviducte humaine et cumulus (la couche cellulaire investir l&#39;ovocyte). 4, 5-diaminofluoresc&eacute;ine (DAF) coloration a d&eacute;montr&eacute; la production de NO par ces tissus. L&#39;incubation de sperme humain avec des explants oviducte induite par la prot&eacute;ine S-nitrosylation ressemblant &agrave; celle induite par aucun des donateurs et le GNSO de sperme. Progest&eacute;rone (un produit de cellules du cumulus) mobilise &eacute;galement Ca(2+) stock&eacute;e dans le sperme humain. Pr&eacute;traitement du sperme non a grandement am&eacute;lior&eacute; l&#39;effet de la progest&eacute;rone sur [Ca(2+)](i), r&eacute;sultant en une augmentation prolong&eacute;e des excursion flagellaire. Nous concluons que non r&eacute;glemente la mobilisation de Ca(2+) stock&eacute;e dans le sperme humain par la prot&eacute;ine S-nitrosylation, que cette action est synergique avec celui de la progest&eacute;rone et que cette synergie est potentiellement tr&egrave;s important dans les interactions de gam&egrave;tes conduisant &agrave; la f&eacute;condation.

Mobilisation des r&eacute;serves de Ca2 + et r&egrave;glement flagellaire dans le sperme humain par S-nitrosylation : un r&ocirc;le pour non synth&eacute;tis&eacute;e dans l&#39;appareil reproducteur f&eacute;minin.

Generation Nr. von Stickstoffmonoxid-Synthase (NOS) ist in Gamet Interaktion und Befruchtung verwickelt. Gef&auml;hrdung der menschlichen Spermien keine Spender verursacht Mobilisierung der gespeicherten Ca(2+) durch einen Mechanismus, der Aktivierung der Guanylatcyclase nicht erforderlich aber von S-Nitroso-Glutathion (GSNO; ein S-Nitrosylating-Agent) nachgeahmt wurde. Anwendung von Dithiothreitol, Protein - SNO Gruppen reduzieren schnell umgekehrt die Aktionen von NO und GSNO auf [Ca(2+)](i). Die Auswirkungen von Nein, GSNO und Dithiothreitol auf Sperma Protein S-Nitrosylation, anhand der Biotin-Switch-Methode, eng parallel ihre Aktionen auf [Ca(2+)](i). Immunfluoreszenz-F&auml;rbung ergab konstitutiven und durch Induktion NOS in menschlichen Eileiter und Cumulus (der zellul&auml;ren Ebene der Eizelle zu investieren). 4,5-Diaminofluorescein (DAF) F&auml;rbung zeigte Produktion von NO durch diese Gewebe. Inkubation von menschlichen Samenzellen mit Legedarm Explantaten verursachte Sperma Protein S-Nitrosylation &auml;hnlich, die induziert durch keine Spender und GSNO. Progesteron (ein Produkt von Cumulus Zellen) mobilisiert auch gespeicherte Ca(2+) in den menschlichen Samenzellen. Vorbehandlung der Samenzellen mit Nr. verbessert erheblich die Wirkung von Progesteron auf [Ca(2+)](i), wodurch eine anhaltende Zunahme der Flimmerband Ausflug. Wir schlie&szlig;en, dass Nr. regelt die Mobilisierung der gespeicherten Ca(2+) in den menschlichen Samenzellen von Protein S-Nitrosylation, die diese Aktion mit der Progesteron synergistische ist und dass dieser Synergismus ist potenziell hoch signifikante Gamet Interaktionen zur Befruchtung.

Mobilisierung von Ca2 + L&auml;den und Flimmerband Verordnung in den menschlichen Samenzellen von S-Nitrosylation: eine Rolle f&uuml;r NO synthetisiert in der weiblichen Fortpflanzungsorgane.

Generazione di NO di ossido nitrico sintasi (NOS) &egrave; implicato nella fertilizzazione e l&#39;interazione di gameti. Esposizione degli spermatozoi umani di donatori di NO causato mobilitazione di Ca(2+) memorizzati da un meccanismo che non ha richiesto l&#39;attivazione della guanilato ciclasi ma fu imitato da S-nitroso-glutathione (elettroforesi; un agente S-nitrosylating). Applicazione di ditiotreitolo, per ridurre i gruppi di proteine - SNO, invertito rapidamente le azioni del NO ed elettroforesi su [Ca(2+)](i). Gli effetti del NO, elettroforesi e ditiotreitolo sulla proteina sperma S-nitrosilazione, valutata utilizzando il metodo di switch di biotina, strettamente parallelo le loro azioni su [Ca(2+)](i). Colorazione di immunofluorescenza ha rivelato NOS costitutivi e inducibili nell&#39;ovidotto umana e cumulus (lo strato cellulare investendo l&#39;ovocita). 4,5-diaminofluorescein (DAF) colorazione ha dimostrato la produzione di NO da questi tessuti. Incubazione di sperma umano con ovidotto espianti indotta da proteina S-nitrosilazione simile a quella indotta da NO elettroforesi e donatori di sperma. Progesterone (un prodotto di cellule cumulo) mobilita anche Ca(2+) stored in sperma umano. Pre-trattamento degli spermatozoi con NO notevolmente migliorato l&#39;effetto del progesterone sulla [Ca(2+)](i), con un aumento prolungato in escursione flagellari. Concludiamo che non regola la mobilitazione di Ca(2+) stored in sperma umano dalla proteina S-nitrosilazione, che questa azione &egrave; sinergica con quella di progesterone e che questa sinergia &egrave; potenzialmente altamente significativo nelle interazioni di gameti che portano alla fecondazione.

Mobilizzazione del Ca2 + negozi e flagellari regolamento in sperma umano da S-nitrosilazione: un ruolo per NO sintetizzato nel tratto riproduttivo femminile.

&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20; (NOS) &#x306B;&#x3088;&#x308B; NO &#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x306F;&#x3001;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3068;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x306A;&#x3057;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x306B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x52D5;&#x54E1;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;S-&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30BD;-&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; (GSNO; S nitrosylating &#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;) &#x3092;&#x307E;&#x306D;&#x305F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - SNO &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30B8;&#x30C1;&#x30AA;&#x30C8;&#x30EC;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x9006;&#x8EE2;&#x306A;&#x3057;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068; GSNO &#x3092;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x5F71;&#x97FF;&#x306A;&#x3057;&#x306E; GSNO &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B8;&#x30C1;&#x30AA;&#x30C8;&#x30EC;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB; &#x30D3;&#x30AA;&#x30C1;&#x30F3; &#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3001;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x4E26;&#x5217;&#x306E;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3092;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x69CB;&#x6210;&#x3068;&#x8A98;&#x5C0E;&#x578B; NOS &#x30D2;&#x30C8;&#x5375;&#x7BA1;&#x3068;&#x7A4D;&#x96F2; &#xFF08;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6295;&#x8CC7;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C64;&#xFF09; &#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;4, 5-diaminofluorescein (DAF) &#x67D3;&#x8272;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x3088;&#x308B; NO &#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5375;&#x7BA1;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x3068;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068; GSNO &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3; (&#x5375;&#x4E18;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#xFF09; &#x3082;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067; mobilises &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3001;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x9060;&#x8DB3;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306A;&#x3057;&#x306E; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x76F8;&#x4E57;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x76F8;&#x4E57;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x52D5;&#x54E1;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Ca 2 + &#x5E97;&#x8217;&#x3068;&#x306E; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x52D5;&#x54E1;: NO &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C; synthase (NOS) &#xD558; &#xC5EC; NO&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xC740; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xC544;&#xBB34; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBD84;&#xC2E0;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C; guanylate cyclase&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; S-nitroso-glutathione (GSNO; S-nitrosylating &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xC7A5; &#xB41C; ca(2+)&#xC758; &#xB3D9;&#xC6D0;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC6A9; dithiothreitol, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-SNO &#xADF8;&#xB8F9;&#xC744; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC18;&#xC804; &#xC5C6;&#xC74C; &#xC791;&#xC5C5; &#xBC0F; GSNO&#xC5D0; [Ca(2+)](i). &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5C6;&#xC74C;, GSNO &#xBC0F; dithiothreitol &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; S-nitrosylation, biotin &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3C9;&#xAC00;&#xC5D0; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; paralleled [ca(2+)](i)&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD589;&#xB3D9;. Immunofluorescent &#xC5BC;&#xB8E9; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB780; &#xACE0; &#xC801; &#xC6B4; (&#xD22C;&#xC790;&#xB294; oocyte &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; NOS &#xACF5;&#xAC1C;. 4, 5-diaminofluorescein (DAF) &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB780; explants&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xC778;&#xD050;&#xBCA0;&#xC774;&#xC158; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; S nitrosylation &#xB2EE;&#xC740; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790;&#xC640; GSNO&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC720;&#xB3C4;. &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; (&#xC801; &#xC6B4; &#xC140; &#xC81C;&#xD488;)&#xB3C4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; &#xC800;&#xC7A5;&#xB41C; Ca(2+) mobilises. &#xC804;&#xCC98;&#xB9AC; &#xC5C6;&#xC774; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; [flagellar &#xC5EC;&#xD589;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04;&#xB41C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C;, ca(2+)](i)&#xC5D0; &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xACB0;&#xB860; &#xC544;&#xB2C8; &#xC870;&#xC808; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; S nitrosylation&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xC800;&#xC7A5; &#xB41C; ca(2+)&#xC774;&#xC774; &#xC791;&#xC5C5;&#xC740; &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC758; &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0;&#xC640;&#xC774; &#xC131;&#xBD84;&#xC774; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC815;&#xC758;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;&#xC758; &#xD559;&#xC790;&#xC758;.

Ca2 + &#xC0C1;&#xC810; &#xBC0F; S nitrosylation&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; flagellar &#xADDC;&#xC815;&#xC758; &#xB3D9;&#xC6D0;: &#xC5EC;&#xC131;&#xC758; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0; synthesised &#xC5C6;&#xC74C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Generaci&oacute;n de NO por &oacute;xido n&iacute;trico sintasa (NOS) est&aacute; implicada en la fecundaci&oacute;n y la interacci&oacute;n de los gametos. Exposici&oacute;n de espermatozoides humanos a NO donantes caus&oacute; movilizaci&oacute;n de CA almacenado por un mecanismo que no requieren activaci&oacute;n de la guanilato ciclasa pero fue imitado por S-nitroso-glutati&oacute;n (GSNO; agente S-nitrosylating). Aplicaci&oacute;n de Ditiotreitol, para reducir los grupos SNO - prote&iacute;na, invirti&oacute; r&aacute;pidamente las acciones de NO y GSNO en [Ca(2+)](i). Los efectos de NO, GSNO y Ditiotreitol en prote&iacute;na de esperma S-nitrosilaci&oacute;n, evaluada mediante el m&eacute;todo de interruptor de biotina, estrechamente en paralelo sus acciones en [Ca(2+)](i). Tinci&oacute;n inmunofluorescente revel&oacute; NOS constitutivas e inducibles en oviducto humana y c&uacute;mulos (la capa celular invertir el ovocito). la coloraci&oacute;n de 4,5-diaminofluorescein (DAF) demostr&oacute; la producci&oacute;n de NO por estos tejidos. Incubaci&oacute;n de los espermatozoides humanos con explantes de oviducto inducida por prote&iacute;na de esperma S-nitrosilaci&oacute;n parecido inducida por los donantes ni GSNO. Progesterona (un producto de c&eacute;lulas del c&uacute;mulo) tambi&eacute;n moviliza CA almacenados en espermatozoides humanos. Pre-tratamiento de esperma con NO ha mejorado considerablemente el efecto de la progesterona en [Ca(2+)](i), resultando en un incremento prolongado en excursi&oacute;n flagelar. Concluimos que NO regula la movilizaci&oacute;n de CA almacenados en espermatozoides humanos por prote&iacute;na S-nitrosilaci&oacute;n, que esta acci&oacute;n es sin&eacute;rgica con la de la progesterona y que este sinergismo es potencialmente muy importante en las interacciones de gametos que conduce a la fertilizaci&oacute;n.

Movilizaci&oacute;n de Ca2 + tiendas y regulaci&oacute;n flagelar en espermatozoides humanos por S-nitrosilaci&oacute;n: un papel para NO sintetizado en el tracto reproductor femenino.

&#x80DE;&#x5185; Ca2 + &#x5546;&#x5E97;&#x53D1;&#x6325;&#x6838;&#x5FC3;&#x4F5C;&#x7528;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x8702;&#x7A9D; [Ca2+](i) &#x548C;&#x590D;&#x6742; [Ca2 +] &#x632F;&#x52A8;&#x548C;&#x6CE2;&#x7B49;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x3002;Ca2 + &#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x90A3;&#x91CC;&#x662F;&#x8BB8;&#x591A;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8; &#xFF08;&#x5305;&#x62EC;&#x7CBE;&#x5B50;&#x83B7;&#x80FD;&#x3001; hyperactivation&#x3001; &#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x548C;&#x9876;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF09; &#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x592E;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x5C1A;&#x672A;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x548C;&#x4F5C;&#x4E3A; Ca2 + &#x5728;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5B58;&#x50A8;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x5177;&#x6709;&#x7279;&#x522B;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5; i) &#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5206;&#x5B50;&#x7EC4;&#x4EF6; &#xFF08;&#x6CF5;&#x548C;&#x6E20;&#x9053;&#xFF09; &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A; Ca2 + &#x7684;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5546;&#x5E97;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x548C; ii) &#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x529F;&#x80FD; Ca2 + &#x5546;&#x5E97;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8BC1;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x9876;&#x4F53;&#x9176;&#x5730;&#x533A;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x5730;&#x533A;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9888;&#x90E8;&#x548C;&#x4E2D;&#x6BB5;&#x7684;&#x53E6;&#x4E00;&#x79CD;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5B58;&#x50A8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x518D;&#x53BB;&#x4E0A;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x548C;&#x5176;&#x79BB;&#x6563;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x8EAB;&#x4EFD;&#xFF1A; &#x9876;&#x4F53;&#x81EA;&#x8EAB;&#x5206;&#x6CCC;&#x548C;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9888;&#x819C;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5668;&#x7684; &#xFF08;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#xFF09; &#x89C4;&#x4F8B;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x97AD;&#x6BDB;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C; hyperactivation&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x8C28;&#x614E;&#x63A7;&#x5236;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x95E8;&#x5E97;&#x7684;&#x52A8;&#x5458;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x5B58;&#x50A8; Ca2 + &#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9888;&#x90E8;/&#x4E2D;&#x6BB5;&#x4E0E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528; CatSper &#x6E20;&#x9053;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E3B;&#x8981;&#x7247;&#x4E2D;&#x76D1;&#x7BA1;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

Ca2 +-&#x5728;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E2D;&#x5B58;&#x50A8;&#xFF1A; &#x4ED6;&#x4EEC;&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x548C;&#x804C;&#x8D23;&#x3002;

Intracellular Ca2+ stores play a central role in the regulation of cellular [Ca2+](i) and the generation of complex [Ca2+] signals such as oscillations and waves. Ca2+ signalling is of particular significance in sperm cells, where it is a central regulator in many key activities (including capacitation, hyperactivation, chemotaxis and acrosome reaction) yet mature sperm lack endoplasmic reticulum and several other organelles that serve as Ca2+ stores in somatic cells. Here, we review i) the evidence for the expression in sperm of the molecular components (pumps and channels) which are functionally significant in the activity of Ca2+ stores of somatic cells and ii) the evidence for the existence of functional Ca2+ stores in sperm. This evidence supports the existence of at least two storage organelles in mammalian sperm, one in the acrosomal region and another in the region of the sperm neck and midpiece. We then go on to discuss the probable identity of these organelles and their discrete functions: regulation by the acrosome of its own secretion and regulation by membranous organelles at the sperm neck (and possibly by the mitochondria) of flagellar activity and hyperactivation. Finally, we consider the ability of the sperm discretely to control mobilisation of these stores and the functional interaction of stored Ca2+ at the sperm neck/midpiece with CatSper channels in the principal piece in regulation of the activities of mammalian sperm.

Ca2+-stores in sperm: their identities and functions.

Les r&eacute;serves de Ca2 + intracellulaires jouent un r&ocirc;le central dans la r&eacute;gulation des syst&egrave;mes cellulaires [Ca2+](i) et la g&eacute;n&eacute;ration de signaux complexes [Ca2 +] comme les oscillations et ondes. Signalisation du Ca2 + est d&#39;une importance particuli&egrave;re dans les spermatozo&iuml;des, o&ugrave; c&#39;est un r&eacute;gulateur central dans de nombreuses activit&eacute;s cl&eacute;s (y compris la capacitation, hyperactivation, r&eacute;action de chimiotactisme et acrosome) mais manquent de spermatozo&iuml;des matures du r&eacute;ticulum endoplasmique et plusieurs autres organites qui servent de Ca2 + stocke dans les cellules somatiques. Nous r&eacute;sumons ici, i) le t&eacute;moignage de l&#39;expression dans le sperme des composants mol&eacute;culaires (pompes et canaux) qui sont fonctionnellement importants dans l&#39;activit&eacute; des r&eacute;serves de Ca2 + des cellules somatiques et ii) la preuve de l&#39;existence de r&eacute;serves de Ca2 + fonctionnelles dans le sperme. Cette preuve appuie l&#39;existence d&#39;au moins deux organites de stockage dans des spermatozo&iuml;des chez les mammif&egrave;res, l&#39;un dans la r&eacute;gion acrosomique et un autre dans la r&eacute;gion du cou de sperme et bien. Nous passons ensuite &agrave; discuter l&#39;identit&eacute; probable de ces organites et leurs fonctions discr&egrave;tes : r&egrave;glement de l&#39;acrosome, de sa propre s&eacute;cr&eacute;tion et le r&egrave;glement par des organites membraneuses au niveau du col de sperme (et &eacute;ventuellement par les mitochondries) d&#39;activit&eacute; flagellaire et hyperactivation. Enfin, nous consid&eacute;rons la capacit&eacute; des spermatozo&iuml;des discr&egrave;tement &agrave; contr&ocirc;ler l&#39;interaction fonctionnelle du stock&eacute;e Ca2 + dans le cou de sperme/pi&egrave;ce avec cha&icirc;nes CatSper dans la pi&egrave;ce principale dans la r&eacute;glementation de l&#39;activit&eacute; des spermatozo&iuml;des chez les mammif&egrave;res et la mobilisation de ces magasins.

Ca2 +-stocke dans le sperme : leurs identit&eacute;s et leurs fonctions.

Intrazellul&auml;ren Ca2 + L&auml;den Rolle eine zentrale bei der Regulation des zellularen [Ca2+](i) und die Generierung von komplexen [Ca2 +] Signale wie Schwingungen und Wellen. Signalisieren von Ca2 + ist von besonderer Bedeutung in Spermazellen, wo es ist ein zentraler Regulator in vielen wichtigen Aktivit&auml;ten (einschlie&szlig;lich der Kapazitation, Hyperactivation, Chemotaxis und Akrosom Reaktion) noch Reife Spermien fehlt Endoplasmatisches Reticulum und mehreren anderen Organellen, die als Ca2 + in K&ouml;rperzellen speichert dienen. Hier &uuml;berpr&uuml;fen wir i) die Beweise f&uuml;r den Ausdruck in Sperma &uuml;ber die molekularen Bestandteile (Pumpen und Kan&auml;le), die funktionell in der Aktivit&auml;t von Ca2 + L&auml;den der somatischen Zellen sind und Ii) die Belege f&uuml;r die Existenz von funktionalen Ca2 + L&auml;den in Sperma. Diese Beweise unterst&uuml;tzt die Existenz von mindestens zwei Speicher Organellen in S&auml;ugetier-Samenzellen, eine in der acrosomal Region und eine weitere in der Region der Spermien Hals und Midpiece. Wir gehen dann auf zu diskutieren die wahrscheinliche Identit&auml;t dieser Organellen und diskreten Funktionen: Regulierung durch das Akrosom eigenen Sekretion und Verordnung von membran&ouml;se Organellen am Hals Spermien (und m&ouml;glicherweise die Mitochondrien) Flimmerband und Hyperactivation. Schlie&szlig;lich betrachten wir die F&auml;higkeit der Spermien diskret, Mobilisierung dieser Gesch&auml;fte und das funktionelle Zusammenspiel der gespeicherten Ca2 + an die Spermien Hals/Midpiece mit daraus Kan&auml;le in das wichtigste St&uuml;ck in Vorschriften f&uuml;r die T&auml;tigkeit von S&auml;ugetier-Samenzellen zu steuern.

Ca2 +-speichert im Sperma: ihre Identit&auml;t und Funktionen.

Negozi di Ca2 + intracellulare giocano un ruolo centrale nella regolazione del cellulare [Ca2+](i) e la generazione di segnali complessi [Ca2 +] come oscillazioni e onde. Ca2 + segnalazione &egrave; di particolare importanza in cellule dello sperma, dove &egrave; un regolatore centrale in molte attivit&agrave; chiave (tra cui capacitazione, hyperactivation, reazione di chemiotassi e acrosomiale) ancora sperma maturo mancanza del reticolo endoplasmatico e diversi altri organelli che servono come Ca2 + negozi nelle cellule somatiche. Qui, passiamo in rassegna i) le prove per l&#39;espressione nello sperma dei componenti molecolari (pompe e canali) che sono funzionalmente significativo nell&#39;attivit&agrave; della Ca2 + negozi delle cellule somatiche e ii) la prova dell&#39;esistenza di funzionale Ca2 + negozi in sperma. Questa evidenza sostiene l&#39;esistenza di almeno due degli organelli di archiviazione in sperma dei mammiferi, uno nella regione acrosomale e un altro nella regione del collo di sperma e midpiece. Andiamo quindi a discutere la probabile identit&agrave; di questi organelli e loro funzioni discrete: regolamento dall&#39;Acrosoma della propria secrezione e regolazione di membranous organelli al collo dello sperma (e possibilmente dai mitocondri) di attivit&agrave; flagellari e hyperactivation. Infine, consideriamo la capacit&agrave; degli spermatozoi discretamente per controllare la mobilitazione di questi negozi e l&#39;interazione funzionale delle stored Ca2 + al collo/midpiece sperma con Jury canali nel pezzo principale nel regolamento delle attivit&agrave; degli spermatozoi dei mammiferi.

Ca2 +-memorizza nello sperma: loro identit&agrave; e funzioni.

&#x643A;&#x5E2F; [Ca2+](i) &#x3068;&#x632F;&#x52D5;&#x3084;&#x6CE2;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; [ca 2 +] &#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3002; &#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ca 2 + &#x5E97;&#x3092;&#x518D;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ca 2 + &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x3069;&#x3053;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4E2D;&#x592E;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF; &#xFF08;&#x539F;&#x8457;&#x3001;&#x9670;&#x56A2;&#x3001;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3068;&#x5148;&#x4F53;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#xFF09; &#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3067;&#x307E;&#x3060;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x304A;&#x3088;&#x3073; ca 2 + &#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x683C;&#x7D0D;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x4ED6;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5668;&#x5B98;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x3001;i) &#x6A5F;&#x80FD;&#x7684; ca 2 + &#x5E97;&#x8217;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8; &#xFF08;&#x30DD;&#x30F3;&#x30D7; &#x30FB; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF09; &#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3068; ii) &#x6A5F;&#x80FD;&#x306E; ca 2 + &#x5E97;&#x8217;&#x3067;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B8; &#x30FB; &#x30AA;&#x30EB;&#x30AC;&#x30CD;&#x30E9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3001;&#x5148;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9996;&#x3068; midpiece &#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x3067;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x884C;&#x304F;&#x306B;&#x8A71;&#x3057;&#x5408;&#x3046;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x96E2;&#x6563;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C6;&#x30A3;: &#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5206;&#x6CCC;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C0F;&#x5668;&#x5B98;&#x3067;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9996; (&#x3084;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;) &#x898F;&#x5236;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x9670;&#x56A2;&#x306E;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x96E2;&#x6563;&#x7684;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5E97;&#x8217;&#x306E;&#x52D5;&#x54E1;&#x30FB; &#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; ca 2 + &#x7CBE;&#x5B50;&#x9996;/midpiece &#x3067;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3067;&#x533B;&#x5B66;: CatSper &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x898F;&#x5236;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x90E8;&#x5206;&#x3067;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3001;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;

Ca 2 +-&#x4FDD;&#x5B58;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;: &#x8EAB;&#x5143;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3002;

&#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca2 + &#xB9E4;&#xC7A5; &#xD734;&#xB300; [ca2+](i)&#xC640;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; [Ca2 +] &#xC9C4;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xD30C;&#xB3C4; &#xAC19;&#xC740; &#xC138;&#xB300; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;. Ca2 + &#xC2E0;&#xD638; &#xC815;&#xC790; &#xC138;&#xD3EC;, &#xB9CE;&#xC740; &#xC8FC;&#xC694; &#xD65C;&#xB3D9; (capacitation, hyperactivation, chemotaxis &#xBC0F; acrosome &#xBC18;&#xC751; &#xD3EC;&#xD568;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC559; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB294; &#xC544;&#xC9C1; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xC815;&#xC790; &#xBD80;&#xC871; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C;&#xC5D0; Ca2 + &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC800;&#xC7A5; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB2E4;&#xB978; organelles &#xD2B9;&#xC815; &#xC758;&#xBBF8; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; i) &#xBD84;&#xC790; &#xBD80;&#xD488; (&#xD38C;&#xD504; &#xBC0F; &#xCC44;&#xB110;)&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; Ca2 + &#xC0C1;&#xC810; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70; &#xBC0F; ii) &#xAE30;&#xB2A5; Ca2 + &#xC810;&#xD3EC; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xAC80;&#xD1A0;. &#xC774; &#xC99D;&#xAC70; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC815;&#xC790;, acrosomal &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC815;&#xC790; &#xBAA9; midpiece &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC2A4;&#xD1A0;&#xB9AC;&#xC9C0; organelles&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; organelles&#xC640; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC744; &#xB17C;&#xC758;&#xB85C; &#xC774;&#xB3D9;: &#xC790;&#xCCB4;&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;&#xC640; &#xC815;&#xC790; &#xBAA9;&#xC5D0; &#xB9C9; organelles, (&#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xB294; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;) &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; acrosome&#xC5D0;&#xC11C; &#xADDC;&#xC815; flagellar &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; hyperactivation. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBAB0;&#xB798; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC800;&#xC7A5;&#xC18C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC6D0; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC8FC; &#xC870;&#xAC01;&#xC5D0;&#xC11C; CatSper &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xC800;&#xC7A5; Ca2 + &#xC815;&#xC790; &#xBAA9;/midpiece&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xACE0;&#xB824; &#xD558;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;.

Ca2 +-&#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xC800;&#xC7A5;: &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xACFC; &#xAE30;&#xB2A5;.

Tiendas de Ca2 + intracelulares juegan un papel central en la regulaci&oacute;n de celulares [Ca2+](i) y la generaci&oacute;n de complejas [Ca2 +] se&ntilde;ales como oscilaciones y ondas. Ca2 + se&ntilde;alizaci&oacute;n es de particular importancia en las c&eacute;lulas de la esperma, que es un regulador central en muchas actividades claves (incluyendo capacitaci&oacute;n, hyperactivation, reacci&oacute;n de Quimiotaxis y acrosoma) pero esperma madura carece de ret&iacute;culo endoplasm&aacute;tico y varios otros organelos que sirven como Ca2 + almacena en las c&eacute;lulas som&aacute;ticas. Aqu&iacute; repasamos i) la evidencia de la expresi&oacute;n en el esperma de los componentes moleculares (bombas y canales) que son funcionalmente importantes en la actividad de Ca2 + tiendas de c&eacute;lulas som&aacute;ticas y ii) la evidencia de la existencia de tiendas funcionales de Ca2 + en el esperma. Esta evidencia apoya la existencia de al menos dos organelos de almacenamiento en espermatozoides mam&iacute;feros, en la regi&oacute;n acros&oacute;mica y otro en la regi&oacute;n del cuello de la esperma y midpiece. Entonces vamos a discutir la identidad probable de estos org&aacute;nulos y sus funciones discretas: regulaci&oacute;n por el acrosoma de su propia secreci&oacute;n y regulaci&oacute;n por organelos membranosos en el cuello de la esperma (y posiblemente por la mitocondria) de la actividad flagelar y hyperactivation. Finalmente, consideramos la capacidad de los espermatozoides discretamente para controlar la movilizaci&oacute;n de estas tiendas y la interacci&oacute;n funcional de almacenado Ca2 + en el cuello/del espermatozoide con CatSper canales en la pieza principal en la regulaci&oacute;n de las actividades de los espermatozoides mam&iacute;feros.

Ca2 +-almacena en espermatozoides: sus identidades y funciones.

&#x901A;&#x8FC7;&#x4FE1;&#x53F7; [Ca(2+)](i) &#x662F;&#x4E2D;&#x592E;&#x5BF9;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4ECE;&#x5973;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x9053;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7CBE;&#x5B50;&#x8FD0;&#x52A8;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x6700;&#x8FD1; paper1 &#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x63A5;&#x89E6;&#x52A8;&#x5458;&#x5B58;&#x50A8;&#x7684;&#x7ECF;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x86CB;&#x767D;&#x786B;&#x9187; nitrosylation &#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x672A;&#x627E;&#x5230; NO * &#x4EBA;&#x7C7B;&#x5973;&#x6027;&#x9053;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x4EA7;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x5C06;&#x5F81;&#x6C42;&#x6B64;&#x6548;&#x679C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5B55;&#x916E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E5F;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x5973;&#x6027;&#x9053;&#x548C;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CD5;&#x8863;&#xFF0C;&#x534F;&#x540C;&#x529E;&#x4E8B; NO * &#x8C03;&#x52A8;&#x7ECF;&#x548C;&#x52A0;&#x5F3A;&#x97AD;&#x6BDB;&#x6BB4;&#x6253;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FA9;&#x7ECF;&#x5B58;&#x50A8;&#x533A;&#x4EA4;&#x754C;&#x5904;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5934;&#x90E8;&#x548C;&#x97AD;&#x6BDB;&#x662F;&#x7531;&#x5B55;&#x6FC0;&#x7D20;&#x53CA; NO * &#x76D1;&#x7BA1;&#x548C;&#x5170;&#x5C3C;&#x78B1;&#x53D7;&#x4F53;&#x5728;&#x5546;&#x5E97;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x54EA;&#x4E9B;&#x5DE7;&#x5408;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x534F;&#x540C;&#x4E92;&#x52A8;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;

&#x5973;&#x6027;&#x9053;&#x4E0E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x6C9F;&#x901A;&#xFF1A; &#x8BF4; NO * &#x5F53;&#x4F60;&#x7684;&#x610F;&#x601D;&#x662F;&#x662F;&#x3002;

Signaling through [Ca(2+)](i) is central to regulation of sperm activity and is likely to be the mechanism that transduces signals from the female reproductive tract to regulate sperm motility. In a recent paper1 we showed that exposure of sperm to nitric oxide mobilizes stored Ca(2+) in human sperm, an effect that occurs through nitrosylation of protein thiols. Not only did we find that NO* production by cells of the human female tract would be sufficient to elicit this effect, but progesterone, which is also present in the female tract and is synthesized by the oocyte vestments, acted synergistically with NO* to mobilize Ca(2+) and enhance flagellar beating. Here we argue that a Ca(2+) store at the junction of the sperm head and flagellum is subject to regulation by both progesterone and NO* and that ryanodine receptors at the store may be the point at which coincidence detection and synergistic interaction occurs.

Communication between female tract and sperm: Saying NO* when you mean yes.

Signalisation &agrave; travers [Ca(2+)](i) est au centre de r&eacute;gulation de l&#39;activit&eacute; de sperme et est susceptible d&#39;&ecirc;tre le m&eacute;canisme qui transduit de signaux provenant de l&#39;appareil reproducteur f&eacute;minin pour r&eacute;guler la motilit&eacute; des spermatozo&iuml;des. Dans une r&eacute;cente paper1 que nous a montr&eacute; qu&#39;exposition des spermatozo&iuml;des &agrave; l&#39;oxyde nitrique mobilise Ca(2+) stock&eacute;e dans le sperme humain, un effet qui se produit par le biais de nitrosylation de thiols prot&eacute;iques. Nous n&#39;avons pas seulement trouv&eacute; que non * production par les cellules du tractus femelle humain serait suffisante pour obtenir cet effet, mais la progest&eacute;rone, qui est &eacute;galement pr&eacute;sent dans l&#39;appareil f&eacute;minin et est synth&eacute;tis&eacute; par les v&ecirc;tements de l&#39;ovocyte, a agi en synergie avec non * Ca(2+) de mobiliser et renforcer les battements flagellaires. Ici, nous croyons qu&#39;un magasin de Ca(2+) &agrave; la jonction de la t&ecirc;te du spermatozo&iuml;de et le flagelle est assujettie &agrave; la r&eacute;glementation de la progest&eacute;rone et non * et que les r&eacute;cepteurs de la ryanodine au magasin peuvent &ecirc;tre le moment &agrave; quelle co&iuml;ncidence de d&eacute;tection et l&#39;interaction synergique se produit.

Communication entre l&#39;appareil femelle et le sperme : non disant * quand vous voulez dire oui.

Signalisierung durch [Ca(2+)](i) ist zentral zur Regulierung der Spermien Aktivit&auml;t und ist wahrscheinlich der Mechanismus, die Signale von der weiblichen Fortpflanzungsorgane, Spermien-Motilit&auml;t zu regulieren transduces. In einer j&uuml;ngsten 20011, die wir, dass zeigten mobilisiert die Gef&auml;hrdung der Spermien durch Stickstoffmonoxid gespeicherten Ca(2+) in den menschlichen Samenzellen, ein Effekt, der durch Nitrosylation von Protein Thiole auftritt. Nicht nur konnten wir feststellen, dass NO * Produktion von Zellen des menschlichen weiblichen Trakt ausreichen w&uuml;rde, zu diesem Effekt, aber Progesteron, zu entlocken, die ist auch in der weiblichen-Darm-Trakt und wird von der Eizelle Ornat agierte synergistisch mit NO * Ca(2+) zu mobilisieren und zu verbessern Flimmerband schlagen synthetisiert. Hier argumentieren wir, dass ein Ca(2+) Store an der Kreuzung der Spermien Kopf und Flagellen reglementiert durch Progesteron und NO * und Ryanodin-Rezeptoren im Store welcher Zufall Erkennung und synergistische Interaktion erfolgt sein k&ouml;nnen.

Kommunikation zwischen weiblich-Darm-Trakt und Spermien: sagen NO * wenn du, ja meinst.

Segnalazione attraverso [Ca(2+)](i) &egrave; centrale nella regolazione dell&#39;attivit&agrave; degli spermatozoi ed &egrave; probabile che sia il meccanismo che transduces segnali dal tratto riproduttivo femminile per regolare la motilit&agrave; degli spermatozoi. In un recente paper1 che ci ha mostrato che l&#39;esposizione dello sperma di ossido nitrico mobilita Ca(2+) stored in sperma umano, un effetto che si verifica attraverso la nitrosilazione dei tioli di proteine. Non solo abbiamo trovato che NO * produzione di cellule del tratto femminile umano sarebbe sufficiente a suscitare questo effetto, ma il progesterone, che &egrave; anche presente nel tratto femmina ed &egrave; sintetizzato dai paramenti degli ovociti, ha agiti in sinergia con NO a mobilitare Ca(2+) e migliorare flagellari pestaggio. Qui ci sostengono che un negozio di Ca(2+) all&#39;incrocio della testa degli spermatozoi e del flagello &egrave; soggetta a regolamento di progesterone e NO * e che i recettori rianodinico presso il negozio possono essere il punto al quale coincidenza rilevamento e sinergica interazione si verifica.

Comunicazione tra apparato femminile e dello sperma: dicendo NO * Quando vuoi dire s&igrave;.

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Linda Lefievre

School of Medicine

University of Birmingham

Techniques for Imaging Ca²⁺ Signaling in Human Sperm

Linda Lefievre

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University of Birmingham

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

School of Medicine

Techniques for Imaging Ca²⁺ Signaling in Human Sperm