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A Calcium Bioluminescence Assay for Functional Analysis of Mosquito (<em>Aedes aegypti</em>) and Tick (<em>Rhipicephalus microplus</em>) G Protein-coupled Receptors

Arthropod hormone receptors are potential targets for novel pesticides as they regulate many essential physiological and behavioral processes.  The ...

Texas A&M University (TAMU)

Zwei Isoformen der A-Untereinheit der vakuol&#xE4;ren H (+)-ATPase in Lycopersicon esculentum: sehr &#xE4;hnliche Proteine, sondern unterschiedliche Muster von Gewebelokalisierung.

&#x690D;&#x7269;&#x6DB2;&#x6CE1; H (+)-&#x8DE8;&#x6DB2;&#x6CE1;&#x819C;&#x8F6C;&#x8FD0; ATPase EC 3.6.1.34 V ATPase&#xFF09; &#x751F;&#x6210; H + &#x7535;-&#x5316;&#x5B66;&#x68AF;&#x5EA6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9694;&#x79BB;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5168;&#x957F; cDNA &#x514B;&#x9686; &#xFF08;&#x884C;-A1 &#x548C;&#x884C; A2&#xFF09; &#x4ECE;&#x756A;&#x8304; (&#x756A;&#x8304;&#x756A;&#x8304;&#x78E8;.&#x7B80;&#x5386;&#x5927;&#x6A31;&#x6843;&#x7EA2;&#xFF09; &#x7F16;&#x7801;&#x4E3A; V ATPase &#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D; (V &#x4E09; A1 &#x548C; A2) &#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x578B;&#x3002;CDNA &#x514B;&#x9686;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x4E00;&#x7EA7;&#x4E24;&#x79CD;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x4EFD;&#x989D; 90%&#x8EAB;&#x4EFD;&#x548C;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x4E00;&#x7EA7; 96%&#x8EAB;&#x4EFD;&#x3002;5&#39;-3&#39; &#x975E;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E0D;&#x540C;&#x3002;V ATPase A1 &#x548C; A2 &#x4E9A;&#x578B;&#x5206;&#x522B;&#x7F16;&#x7801; 623 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#xFF0C;&#x4E0E; 68,570 &#x548C; 68,715&#xFF0C;&#x8BA1;&#x7B97;&#x51FA;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x3002;&#x5BA1;&#x67E5;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x884C;-A1 &#x8868;&#x8FBE;&#x548C; V ATPase A1 &#x591A;&#x80BD;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x5728;&#x76D0;&#x5EA6;&#x4E3A;&#x54CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x8C08;&#x8BDD;&#x5168;&#x6587; (&#x884C;-A1&#xFF09; &#x548C;&#x86CB;&#x767D; (V ATPase A1) A1 &#x9F3B;&#x606F;&#x8089;&#x53F6;&#x7247;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E30;&#x5EA6;&#x51E0;&#x4E4E;&#x7FFB;&#x4E00;&#x756A;&#x3002;A1 &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x884C; A2 &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x53CA; V ATPase A2 &#x591A;&#x80BD;&#x53EA;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E30;&#x5EA6;&#x5728;&#x6839;&#xFF0C;&#x548C;&#x5C11;&#x91CF;&#x7684;&#x6210;&#x719F;&#x679C;&#x5B9E;&#x3002;&#x6839;&#x3001; &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x53CA;&#x591A;&#x80BD;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x6CA1;&#x6709;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x6216;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x76D0;&#x5EA6;&#x3002;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x8868;&#x793A;&#x6700;&#x9AD8;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684; V ATPase A1 &#x548C; A2 &#x4E9A;&#x578B;&#x5728;&#x6DB2;&#x6CE1;&#x4E2D;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x819C;&#x4E0E;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; &#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x5173;&#x8054;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;Immunoprecipitation &#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x8868;&#x660E; V1 &#x57DF;&#x7531; V ATPase A1 &#x6216; A2 &#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x57FA;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x6E38;&#x79BB; V1 &#x57DF;&#x3002;

&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x578B; A &#x4E9A;&#x7684;&#x6DB2;&#x6CE1; H (+)-ATPase &#x5728;&#x756A;&#x8304;&#xFF1A; &#x9AD8;&#x5EA6;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4F46;&#x4E0D;&#x540C;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;

The plant vacuolar H(+)-translocating ATPase (V-ATPase, EC 3.6.1.34) generates a H+ electro-chemical gradient across the tonoplast membrane. We isolated two full-length cDNA clones (VHA-A1 and VHA-A2) from tomato (Lycopersicon esculentum Mill. cv. Large Cherry Red) coding for two isoforms of the V-ATPase catalytic subunit (V-ATPases A1 and A2). The cDNA clones encoding the two isoforms share 90% identity at the nucleotide level and 96% identity at the amino acid level. The 5'- and 3'-untranslated regions, however, are highly diverse. Both V-ATPase A1 and A2 isoforms encode polypeptides of 623 amino acids, with calculated molecular masses of 68,570 and 68,715, respectively. The expression of VHA-A1 and accumulation of V-ATPase A1 polypeptide were ubiquitous in all tissues examined. In response to salinity, the abundances of both transcript (VHA-A1) and protein (V-ATPase A1) of the A1 isoform in leaves were nearly doubled. In contrast to the A1 isoform, VHA-A2 transcript and V-ATPase A2 polypeptide were only detected in abundance in roots, and in minor quantities in mature fruit. In roots, accumulation of transcripts and polypeptides did not change in response to salinity for either isoform. Subcellular localization indicated that the highest levels of both V-ATPase A1 and A2 isoforms were in the tonoplast. However, significant quantities of both isoforms were detected in membranes associated with endoplasmic reticulum and/or Golgi. Immunoprecipitation of dissociated V1 domains using isoform-specific antibodies showed that V1 domains consist of either V-ATPase A1 or A2 catalytic subunit isoforms.

Two isoforms of the A subunit of the vacuolar H(+)-ATPase in Lycopersicon esculentum: highly similar proteins but divergent patterns of tissue localization.

L&#39;usine vacuolaire H (+)-ATPase (V-ATPase, EC 3.6.1.34) de translocation g&eacute;n&egrave;re un gradient H + &eacute;lectrochimique &agrave; travers la membrane du tonoplaste. Les auteurs ont isol&eacute; deux clones d&#39;ADNc pleine longueur (VHA-A1 et A2 de VHA) de la tomate (Lycopersicon esculentum Mill. var. grand Cherry Red) codant pour deux isoformes de la sous-unit&eacute; catalytique de V-ATPase (V-ATPases A1 et A2). Clones de la cDNA codant les deux isoformes part 90 % au niveau du nucl&eacute;otide et 96 % au niveau des acides amin&eacute;s. Les r&eacute;gions 5&#39;-et 3&#39;-non traduite, cependant, sont tr&egrave;s diverses. V-ATPase A1 et A2 isoformes encodent polypeptides de 623 acides amin&eacute;s, avec des masses mol&eacute;culaires calcul&eacute;s de 68 570 et 68 715, respectivement. L&#39;expression de VHA-A1 et l&#39;accumulation du polypeptide A1 de la V-ATPase sont omnipr&eacute;sents dans tous les tissus examin&eacute;s. En r&eacute;ponse &agrave; la salinit&eacute;, les abondances de transcription (VHA-A1) et prot&eacute;ines (V-ATPase A1) de l&#39;isoforme A1 dans les feuilles ont presque doubl&eacute;s. &Agrave; la diff&eacute;rence de l&#39;isoforme A1, transcription de VHA-A2 et A2 de la V-ATPase polypeptide ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;s seulement en abondance dans les racines et en quantit&eacute;s mineures dans les fruits m&ucirc;rs. Dans les racines, l&#39;accumulation des transcriptions et des polypeptides n&#39;a pas chang&eacute; en r&eacute;action &agrave; la salinit&eacute; ou l&#39;autre isoforme. Localisation sous-cellulaire indique que les niveaux les plus &eacute;lev&eacute;s des isoformes de la V-ATPase A1 et A2 sont dans le tonoplaste. Cependant, des quantit&eacute;s importantes des deux isoformes ont &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;es dans les membranes associ&eacute;s au r&eacute;ticulum endoplasmique et/ou appareil de Golgi. Immunopr&eacute;cipitation de dissoci&eacute; V1 domaines utilisant des anticorps sp&eacute;cifiques isoforme a montr&eacute; que les domaines V1 sont constitu&eacute;s des isoformes de la sous-unit&eacute; catalytique de V-ATPase A1 ou A2.

Deux isoformes de la sous-unit&eacute; A de la vacuole H (+)-ATPase chez Lycopersicon esculentum : prot&eacute;ines tr&egrave;s similaires mais des tendances divergentes de la localisation tissulaire.

La pianta vacuolar H (+)-ATPasi (V-ATPasi, CE 3.6.1.34) di translocating genera un gradiente elettrochimico H + attraverso la membrana tonoplasto. Abbiamo isolato due cloni di cDNA full-length (VHA-A1 e A2 VHA) dal pomodoro (Lycopersicon esculentum Mill. CV grande rosso ciliegia) che codifica per due isoforme della subunit&agrave; catalitica V-ATPasi (V-ATPasi A1 e A2). Il cDNA cloni codifica le due isoforme quota 90% identit&agrave; a livello del nucleotide e l&#39;identit&agrave; di 96% a livello dell&#39;amminoacido. Le regioni 5&#39;-e 3&#39;-untranslated, tuttavia, sono molto diverse. Sia V-ATPasi A1 e A2 isoforme codificano polipeptidi di 623 aminoacidi, con calcolate masse molecolari dei 68.570 e 68.715, rispettivamente. L&#39;espressione di VHA-A1 e accumulo di polipeptide A1 V-ATPasi erano onnipresenti in tutti i tessuti esaminati. In risposta alla salinit&agrave;, l&#39;abbondanza di trascrizione (VHA-A1) e di proteine (V-ATPasi A1) dell&#39;isoforma A1 in foglie era quasi raddoppiato. In contrasto con l&#39;isoforma A1, trascrizione VHA-A2 e A2 V-ATPasi polipeptide sono stati rilevati solo in abbondanza nelle radici e in minore quantit&agrave; nel frutto maturo. Nelle radici, accumulo di trascrizioni e polipeptidi non ha cambiato in risposta alla salinit&agrave; per entrambi isoforma. Localizzazione sottocellulare hanno indicato che i livelli elevati di isoforme sia V-ATPasi A1 e A2 erano nel tonoplasto. Tuttavia, quantit&agrave; significative di due isoforme sono state rilevate nelle membrane associate al reticolo endoplasmatico e/o di Golgi. Immunoprecipitazione di dissociata V1 domini utilizzando anticorpi specifici isoform ha mostrati che V1 domini costituiti da V-ATPasi A1 o A2 isoforme della subunit&agrave; catalitica.

Due isoforme della subunit&agrave; A del vacuolar H (+)-ATPasi in Lycopersicon esculentum: proteine altamente simili ma divergenti modelli di localizzazione di tessuto.

&#x690D;&#x7269;&#x80DE; H (+)-&#x8F38;&#x9001;&#x6027; ATPase (V-atpase&#x3001;EC 3.6.1.34) H + &#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66;&#x52FE;&#x914D;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x819C;&#x9593;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8; &#xFF08;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8; &#x30C8;&#x30DE;&#x30C8; &#x30DF;&#x30EB;&#x3002; &#x54C1;&#x7A2E;&#x5927;&#x30C1;&#x30A7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C9;) V-atpase &#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; (V &#x578B; Atpase &#x306E; A1 &#x3068; A2) &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x304B;&#x3089; 2 &#x5B8C;&#x5168;&#x9577; cDNA &#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3; (VHA A1 &#x3068; A2 VHA) &#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;CDNA &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B7;&#x30A7;&#x30A2; 90 %id &#x3068;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067; 96 %id &#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;5&#39;-&#x3068; 3&#39;-&#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;, &#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x591A;&#x69D8;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;V &#x578B; ATPase A1 &#x3068; A2 &#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C; 623 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;, 68,570 &#x3068; 68,715 &#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5206;&#x5B50;&#x8CEA;&#x91CF;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;VHA A1 &#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3068; V &#x578B; ATPase A1 &#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x5168;&#x3066;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x3002;&#x5869;&#x5206;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8; (VHA A1) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CB;&#x767D; (V-atpase A1) &#x8449;&#x3067; A1 &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x91CF;&#x306F;&#x307B;&#x307C;&#x500D;&#x5897;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;A1 &#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;VHA A2 &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3; &#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073; V &#x578B; ATPase A2 &#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3060;&#x3051;&#x8C4A;&#x304B;&#x3055;&#x306E;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C4;&#x3068;&#x6210;&#x719F;&#x679C;&#x5B9F;&#x3067;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x306A;&#x91CF;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6839;&#x3067;&#x3001;&#x6210;&#x7E3E;&#x8A3C;&#x660E;&#x66F8;&#x3068;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5869;&#x5206;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C40;&#x5728;&#x306F;&#x3001;V &#x578B; ATPase A1 &#x3068; A2 &#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6700;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5927;&#x91CF;&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x3084;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x819C;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D; V-atpase A1 &#x307E;&#x305F;&#x306F; A2 &#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E; V1 &#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x89E3;&#x96E2; V1 &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x3002;

2 &#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6DB2;&#x80DE; H (+) A &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;-atp &#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x308D;&#x7D19;&#x3067;: &#x7D44;&#x7E54;&#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x767A;&#x6563;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x304C;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3002;

&#xACF5;&#xC7A5; vacuolar H (+)-tonoplast &#xB9C9;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; H + &#xC804;&#xAE30; &#xD654;&#xD559; &#xAE30;&#xC628; &#xBCC0;&#xD654;&#xB3C4; &#xC0DD;&#xC131; ATPase (V ATPase, EC 3.6.1.34) translocating. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC804;&#xC7A5; cDNA &#xD074;&#xB860; (VHA-a 1&#xACFC; A2 VHA) &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; (Lycopersicon esculentum &#xBC00;. cv. &#xB300;&#xD615; &#xCCB4;&#xB9AC; &#xB808;&#xB4DC;) (V ATPases a 1&#xACFC; A2) V ATPase &#xC18C; &#xCD09;&#xB9E4; &#xB2E8;&#xC704;&#xB294; &#xB450; isoforms &#xCF54;&#xB529;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD;. CDNA &#xD074;&#xB860; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; isoforms &#xACF5;&#xC720; 90 %id &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; 96 %id &#xC778;&#xCF54;&#xB529;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; 5&#39;-3&#39;-untranslated &#xC9C0;&#xC5ED;,, &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB418; &#xACE0;. V ATPase a 1&#xACFC; A2 isoforms &#xAC01;&#xAC01; 68,570&#xC640; 68,715, &#xACC4;&#xC0B0;&#xB41C; &#xBD84;&#xC790; &#xC9C8;&#xB7C9;&#xC73C;&#xB85C; 623 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC758; polypeptides&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. VHA A1 &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; V ATPase A1 polypeptide &#xCD95;&#xC801; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5FC; &#xBD84;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;, &#xC0AC;&#xBCF8; (VHA A1)&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (V ATPase A1) &#xC78E;&#xC5D0; A1 isoform &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB294;&#xB370; &#xAC70;&#xC758; &#xB450; &#xBC30;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. A1 isoform &#xB2EC;&#xB9AC; VHA A2 &#xC0AC;&#xBCF8; &#xBC0F; V ATPase A2 polypeptide&#xB9CC; &#xBFCC;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xACFC;&#xC77C;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740; &#xC218;&#xB7C9; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBFCC;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C;&#xC640; polypeptides&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xC5B4;&#xB290; isoform&#xC5D0; &#xC5FC; &#xBD84;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Subcellular &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD45C;&#xC2DC; &#xCD5C;&#xACE0; &#xC218;&#xC900;&#xC758; V ATPase a 1&#xACFC; A2 isoforms tonoplast&#xC5D0;&#xC11C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB450; isoforms &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC591;&#xC758; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xB610;&#xB294; Golgi&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. V1 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; V ATPase A1 &#xB610;&#xB294; A2 &#xCD09;&#xB9E4; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; isoforms &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; isoform &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCC9C;&#xC5F0;&#xB41C; V1 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; Immunoprecipitation.

(+) Vacuolar H A &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC758; &#xB450; isoforms-Lycopersicon esculentum&#xC5D0; ATPase: &#xC870;&#xC9C1; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xBD84;&#xAE30; &#xD328;&#xD134; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;.

La planta vacuolar H (+)-translocaci&oacute;n ATPasa (V-ATpasa, EC 3.6.1.34) genera un gradiente electroqu&iacute;mico H + a trav&eacute;s de la membrana tonoplast. Se aislaron dos clones de cDNA de larga duraci&oacute;n (VHA-A1 y A2-VHA) de tomate (Lycopersicon esculentum Mill. CV grande rojo cereza) codificaci&oacute;n para dos isoformas de la subunidad catal&iacute;tica de la V-ATpasa (V-ATPasas A1 y A2). El cDNA clones de codificaci&oacute;n de la identidad de 96% en el nivel de amino&aacute;cidos y dos isoformas compartir identidad de 90% en el nivel de nucle&oacute;tido. El 5&#39;-y regiones no traducidas 3&#39;, sin embargo, son muy diversas. Tanto V-ATpasa A1 y A2 isoformas codifican polip&eacute;ptidos de 623 amino&aacute;cidos, con masas moleculares calculadas de 68.570 y 68.715, respectivamente. La expresi&oacute;n de VHA-A1 y acumulaci&oacute;n de V-ATpasa A1 polip&eacute;ptido eran omnipresentes en todos los tejidos examinados. En respuesta a la salinidad, la abundancia de transcripci&oacute;n (VHA-A1) y prote&iacute;na (V-ATpasa A1) del isoform A1 en hojas casi se duplic&oacute;. En contraste con el isoform A1, transcripci&oacute;n de VHA-A2 y V-ATpasa A2 polip&eacute;ptido detectaron s&oacute;lo en abundancia en las ra&iacute;ces y en menores cantidades en fruta madura. En ra&iacute;ces, acumulaci&oacute;n de transcritos y polip&eacute;ptidos no cambiaron en respuesta a la salinidad para cada isoforma. Localizaci&oacute;n subcelular indic&oacute; que los niveles m&aacute;s altos de las isoformas tanto V-ATpasa A1 y A2 se en la tonoplast. Sin embargo, cantidades significativas de ambas isoformas fueron detectadas en las membranas asociadas con el ret&iacute;culo endopl&aacute;smico o Golgi. Inmunoprecipitaci&oacute;n de dominios de V1 disociados utilizando anticuerpos espec&iacute;ficos a la isoforma demostrados que V1 dominios consisten en V-ATpasa A1 o A2 isoformas de la subunidad catal&iacute;tica.

Dos isoformas de la subunidad vacuolar h (+)-ATPasa en Lycopersicon esculentum: prote&iacute;nas muy similares pero divergentes patrones de localizaci&oacute;n de tejido.

&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E24;&#x4E2A;&#x53D7;&#x4F53;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5F02;&#x6E90;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E0A;&#x7684;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x7684;&#x6784;&#x6548;&#x5173;&#x7CFB;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5357;&#x90E8;&#x7684;&#x725B;&#x8731;&#x3001; &#x5FAE;&#x5C0F;&#x725B;&#x8731;&#x6027; &#xFF08;Canestrini&#xFF09; &#x548C;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x5A92;&#x4ECB;&#xFF0C;&#x57C3;&#x53CA;&#x868A;&#x4F0A;&#x868A; (L.&#xFF09; &#x6FC0;&#x80BD;&#x53D7;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6709;&#x4EBA; CHO K1 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x786E;&#x5B9A;&#x54EA;&#x4E9B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x5BF9;&#x80BD;&#x53D7;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x6FC0;&#x80BD;&#x6838;&#x5FC3;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x88AB;&#x5408;&#x6210;&#x80BD; FFSWGa Ala &#x66F4;&#x6362;&#x7CFB;&#x5217;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x548C;&#x7531;&#x9499;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x677F;&#x6280;&#x672F;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178; Phe(1) &#x548C; Trp(4) &#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x6D3B;&#x52A8;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x5B83;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x6291;&#x7D20;&#x6FC0;&#x80BD;&#x6838;&#x5FC3;&#x662F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6700;&#x4F4E;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x9170;&#x80FA;&#x4E5F;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x3002;&#x523B;&#x5EA6;&#x7EBF;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6548;&#x80FD;&#x5927;&#x5E45;&#x589E;&#x52A0;&#x662F;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x868A;&#x4F53;&#x65F6; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x6291;&#x7D20;&#x662F; N-&#x672B;&#x671F;&#x6269;&#x5C55;&#x81F3; hexapeptide&#x3002;Aminoisobutyric &#x9178; (Aib)-&#x5305;&#x542B;&#x6A21;&#x62DF;&#xFF0C;FF [Aib] WGa &#x662F;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x79EF;&#x6781;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x868A;&#x5B50;&#x4E0E;&#x523B;&#x5EA6;&#x7EBF;&#x53D7;&#x4F53;&#x53D7;&#x4F53; superagonist FFFSWGa &#x90A3;&#x91CC;&#x6BD4;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6570;&#x91CF;&#x7EA7;&#x7684; FFFSWGa &#x7EDF;&#x8BA1;&#x5B66;&#x4E0A;&#x66F4;&#x52A0;&#x79EF;&#x6781;&#x3002;&#x6B64;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x6784;&#x8C61; Aib &#x6A21;&#x62DF;&#x6784;&#x8C61;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x53D7;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6A21;&#x62DF; FF [Aib] WGa &#x66FE;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x6297;&#x9000;&#x5316;&#x7684; ACE &#x548C; nephrilysin &#x7684; peptidases&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x523B;&#x5EA6;&#x548C;&#x868A;&#x5B50;&#x4E0D;&#x80FD;&#x968F;&#x65F6;&#x505C;&#x7528;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7EBF;&#x7D22;&#x3002;

&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x6838;&#x5FC3;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x5728;&#x4ECE;&#x5357;&#x90E8;&#x725B;&#x8731;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x725B;&#x8731;&#x6027;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6FC0;&#x80BD;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0A;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7ED3;&#x6784;&#x6D3B;&#x6027;&#x5206;&#x6790; (&#x8731;&#x87A8;&#x4E9A;&#x7EB2;&#xFF1A; Ixodidae&#xFF09; &#x548C;&#x57C3;&#x53CA;&#x4F0A;&#x868A;&#x868A; (&#x53CC;&#x7FC5;&#x76EE;&#xFF1A; &#x868A;&#x79D1;)&#x3002;

The systematic analysis of structure-activity relationships of insect kinins on two heterologous receptor-expressing systems is described. Previously, kinin receptors from the southern cattle tick, Boophilus microplus (Canestrini), and the dengue vector, the mosquito Aedes aegypti (L.), were functionally and stably expressed in CHO-K1 cells. In order to determine which kinin residues are critical for the peptide-receptor interaction, kinin core analogs were synthesized as an Ala-replacement series of the peptide FFSWGa and tested by a calcium bioluminescence plate assay. The amino acids Phe(1) and Trp(4) were essential for activity of the insect kinins in both receptors. It was confirmed that the pentapeptide kinin core is the minimum sequence required for activity and that the C-terminal amide is also essential. In contrast to the tick receptor, a large increase in efficacy is observed in the mosquito receptor when the C-terminal pentapeptide is N-terminally extended to a hexapeptide. The aminoisobutyric acid (Aib)-containing analog, FF[Aib]WGa, was as active as superagonist FFFSWGa on the mosquito receptor in contrast to the tick receptor where it was statistically more active than FFFSWGa by an order of magnitude. This restricted conformation Aib analog provides information on the conformation associated with the interaction of the insect kinins with these two receptors. Furthermore, the analog FF[Aib]WGa has been previously shown to resist degradation by the peptidases ACE and nephrilysin and represents an important lead in the development of biostable insect kinin analogs that ticks and mosquitoes cannot readily deactivate.

Comparative structure-activity analysis of insect kinin core analogs on recombinant kinin receptors from Southern cattle tick Boophilus microplus (Acari: Ixodidae) and mosquito Aedes aegypti (Diptera: Culicidae).

L&#x26;#39;analyse syst&#xE9;matique des relations structure-activit&#xE9; des kinines insectes sur deux h&#xE9;t&#xE9;rologues exprimant le r&#xE9;cepteur des syst&#xE8;mes est d&#xE9;crite. Auparavant, r&#xE9;cepteurs des kinines de la tique du b&#xE9;tail sud, Boophilus microplus (Canestrini), et le vecteur de la dengue, le moustique Aedes aegypti (L.), &#xE9;taient fonctionnellement et exprim&#xE9; de fa&#xE7;on stable dans des cellules CHO-K1. Afin de d&#xE9;terminer quels r&#xE9;sidus kinines sont essentiels pour l&#x26;#39;interaction peptide-r&#xE9;cepteur, analogues de base des kinines ont &#xE9;t&#xE9; synth&#xE9;tis&#xE9;s comme une s&#xE9;rie Ala-remplacement de la FFSWGa peptide et test&#xE9; par un essai sur plaque de calcium bioluminescence. Les acides amin&#xE9;s Phe (1) et Trp (4) ont &#xE9;t&#xE9; essentiels pour l&#x26;#39;activit&#xE9; des insectes dans les kinines deux r&#xE9;cepteurs. Il a &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9; que le noyau pentapeptide kinine est la s&#xE9;quence minimale requise pour l&#x26;#39;activit&#xE9; et que l&#x26;#39;amide C-terminal est &#xE9;galement essentiel. En revanche au r&#xE9;cepteur tique, une forte augmentation de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; est observ&#xE9;e dans le r&#xE9;cepteur lorsque le moustique pentapeptide C-terminal est le N-terminale &#xE9;tendue &#xE0; un hexapeptide. L&#x26;#39;acide aminoisobutyrique (Aib) contenant analogique, FF [Aib] WGA, &#xE9;tait aussi actif que FFFSWGa superagoniste sur le r&#xE9;cepteur de moustiques contrairement au r&#xE9;cepteur tique o&#xF9; il &#xE9;tait statistiquement plus actif que FFFSWGa par un ordre de grandeur. Cette conformation restreinte Aib analogique fournit des informations sur la conformation associ&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;interaction des insectes avec les kinines ces deux r&#xE9;cepteurs. En outre, la FF analogique [Aib] WGA a &#xE9;t&#xE9; pr&#xE9;c&#xE9;demment montr&#xE9; pour r&#xE9;sister &#xE0; la d&#xE9;gradation par l&#x26;#39;ACE et peptidases nephrilysin et repr&#xE9;sente une avance importante dans le d&#xE9;veloppement de biostables insectes analogues des kinines que les tiques et les moustiques ne peuvent pas facilement d&#xE9;sactiver.

Comparative structure-activit&#xE9; Analyse des insectes analogues de base sur les kinines recombinants r&#xE9;cepteurs des kinines du sud de b&#xE9;tail Boophilus microplus (Acari: Ixodidae) et moustique Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

Die systematische Analyse von Struktur-Aktivit&auml;ts-Beziehungen von Insekt Kinins auf zwei heterologe Rezeptor-Ausdr&uuml;cken-Systemen wird beschrieben. Fr&uuml;her wurden Kinine Rezeptoren von der s&uuml;dlichen Rinder-Tick, Boophilus Microplus (Canestrini) und der Dengue-Vektor, die M&uuml;cke Aedes Aegypti (L.), funktionell und stabil in CHO-K1 Zellen ausgedr&uuml;ckt. Um festzustellen, welche R&uuml;ckst&auml;nde Kinine sind kritisch f&uuml;r die Peptid-Rezeptor-Interaktion, wurden durch eine Kalzium-Biolumineszenz-Platte-Probe Kinine Kern Analoga als eine Ala-Serie des Peptids FFSWGa synthetisiert und getestet. Die Aminos&auml;uren, Phe(1) und Trp(4) waren wichtig f&uuml;r die Aktivit&auml;t der Insekten Kinins beide Rezeptoren. Es wurde best&auml;tigt, dass Zunahme Kinine Kern der minimale Sequenz f&uuml;r die T&auml;tigkeit erforderlich ist und der C-terminalen Amid auch unerl&auml;sslich ist. Im Gegensatz zu den Tick-Rezeptor ist eine starke Zunahme der Wirksamkeit in den Moskito-Rezeptor beobachtet, wenn die Zunahme der C-terminalen N-unheilbar auf ein Hexapeptid ausgedehnt ist. Die Aminoisobutyric S&auml;ure (Aib)-mit Analog, FF [Aib] WGa, war so aktiv wie Superagonist FFFSWGa auf den Moskito-Rezeptor im Gegensatz zu den Tick-Rezeptor, wo war es statistisch aktiver als FFFSWGa durch eine Gr&ouml;&szlig;enordnung. Diese eingeschr&auml;nkte Konformation Aib analog enth&auml;lt Informationen &uuml;ber die Beschaffenheit, die das Zusammenspiel von dem Insekt Kinins mit diesen zwei Rezeptoren zugeordnet. Dar&uuml;ber hinaus die analoge FF [Aib] WGa zuvor nachweislich widerstehen, Abbau von der Peptidasen Ass und Nephrilysin und stellt die F&uuml;hrungsrolle bei der Entwicklung von Biostable Insekt Kinine Analoga, die Zecken und M&uuml;cken k&ouml;nnen nicht ohne weiteres deaktivieren.

Struktur-Aktivit&auml;ts-vergleichende Analyse von Insekt Kinine Kern Analoga auf rekombinante Kinine Rezeptoren vom s&uuml;dlichen Rinder Tick Boophilus Microplus (Acari: Schildzecken) und M&uuml;cke Aedes Aegypti (Diptera: Culicidae).

L&#39;analisi sistematica delle relazioni struttura-attivit&agrave; delle chinine insetto su due sistemi che esprimono recettore eterologo &egrave; descritto. In precedenza, recettori chinine da southern tick bovini, Boophilus microplus (Canestrini) e il vettore di dengue, la zanzara Aedes aegypti (L.), erano funzionalmente e stabilmente espressa in cellule CHO-K1. Al fine di determinare quali residui di chinine sono fondamentali per l&#39;interazione del recettore del peptide, analoghi nucleo chinine sono stati sintetizzati come una serie di Ala-sostituzione del peptide FFSWGa e testati da un dosaggio di piastra calcio bioluminescenza. Gli amminoacidi, Phe(1) e Trp(4) sono stati essenziali per l&#39;attivit&agrave; dell&#39;insetto chinine in entrambi i recettori. &Egrave; stato confermato che il nucleo di chinine pentapeptide &egrave; la sequenza minima necessaria per l&#39;attivit&agrave; e che l&#39;ammide C-terminale &egrave; anche essenziale. In contrasto con il recettore tick, un grande aumento nell&#39;efficacia &egrave; osservato nel recettore zanzara quando il pentapeptide C-terminale &egrave; N-terminali esteso a un esapeptide. L&#39;acido aminoisobutyric (Aib)-contenente analogico, FF [Aib] WGa, era cos&igrave; attiva come superagonist FFFSWGa sul recettore zanzara in contrasto con il recettore tick dove era statisticamente pi&ugrave; attivo che FFFSWGa di un ordine di grandezza. Questa conformazione limitata Aib analogico fornisce informazioni sulla conformazione connesso con l&#39;interazione tra le chinine insetto con questi due recettori. Inoltre, l&#39;analogico FF [Aib] WGa &egrave; stato precedentemente dimostrato di resistere alla degradazione da peptidasi ACE e nephrilysin e rappresenta un vantaggio importante nello sviluppo di analoghi dell&#39;insetto chinine biostabili che zecche e zanzare non possono facilmente disattivare.

Analisi comparativa di struttura-attivit&agrave; di analoghi nucleo chinine insetti sui recettori ricombinanti chinine da sud bestiame zecca Boophilus microplus (Acari: Ixodidae) e la zanzara Aedes aegypti (Diptera: Culicidae).

2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x7A2E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x4E0A;&#x306E;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x6D3B;&#x6027;&#x76F8;&#x95A2;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x304C;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x3001;&#x5357;&#x90E8;&#x725B;&#x306E;&#x30C0;&#x30CB;&#x3001;&#x30A6;&#x30B7;&#x30DE;&#x30C0;&#x30CB;&#x5C5E;microplus&#xFF08;Canestrini&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3001;&#x868A;&#x30CD;&#x30C3;&#x30BF;&#x30A4;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB;&#xFF08;L.&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;CHO-K1&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3002;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x304C;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B3;&#x30A2;&#x985E;&#x4F3C;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;FFSWGa&#x306E;&#x30A2;&#x30E9;&#xB7;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#xB7;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5408;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x767A;&#x5149;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A66;&#x9A13;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;Phe&#x306E;&#xFF08;1&#xFF09;&#x3068;Trp&#xFF08;4&#xFF09;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x6606;&#x866B;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30DA;&#x30F3;&#x30BF;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B3;&#x30A2;&#x304C;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x200B;&#x200B;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6700;&#x5C0F;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x3001;C&#x672B;&#x7AEF;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9;&#x3082;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; C&#x672B;&#x7AEF;&#x30DA;&#x30F3;&#x30BF;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x304C;N&#x672B;&#x7AEF;&#x30D8;&#x30AD;&#x30B5;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306B;&#x307E;&#x3067;&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x30C0;&#x30CB;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x6709;&#x52B9;&#x6027;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x868A;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30A4;&#x30BD;&#x916A;&#x9178;&#xFF08;AIB&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x3001;FF [Aib&#x3067;] WGA&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306E;&#x9806;&#x306B;&#x7D71;&#x8A08;&#x7684;&#x306B;FFFSWGa&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x6D3B;&#x767A;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x30C0;&#x30CB;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x868A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;superagonist&#x306E;FFFSWGa&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;Aib&#x3067;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;2&#x3064;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;FF&#x306F;&#x3001;[Aib&#x3067;] WGA&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;ACE&#x3068;nephrilysin&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5206;&#x89E3;&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30C0;&#x30CB;&#x3084;&#x868A;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x7121;&#x52B9;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x751F;&#x4F53;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x985E;&#x4F3C;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x925B;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3068;&#x868A;&#x30CD;&#x30C3;&#x30BF;&#x30A4;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB;&#xFF08;&#x53CC;&#x7FC5;&#x76EE;&#xFF1A;&#x30AB;&#x79D1;&#xFF09;&#xFF1A;&#x5357;&#x90E8;&#x725B;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A6;&#x30B7;&#x30DE;&#x30C0;&#x30CB;&#x5C5E;Microplus&#xFF08;&#x30DE;&#x30C0;&#x30CB;&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B3;&#x30A2;&#x985E;&#x4F3C;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x69CB;&#x9020;&#x6D3B;&#x6027;&#x89E3;&#x6790;

&#xB450; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xACE4;&#xCDA9; kinins&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAD00;&#xACC4;&#xC758; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0;, &#xB0A8;&#xBD80; &#xC18C; &#xD2F1;, Boophilus microplus (Canestrini), &#xBC0F; &#xBCA1;&#xD130; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4;, &#xBAA8;&#xAE30; Aedes aegypti (L.) kinin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &#xC870; K1 &#xC140;&#xC5D0;. &#xC8FC;&#xBB38; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5B4;&#xB5A4; kinin &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xD655;&#xC778; kinin &#xCF54;&#xC5B4; &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; Ffswga&#xC758; Ala &#xAD50;&#xCCB4; &#xACC4;&#xC5F4;&#xB85C; &#xD569;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xCE7C;&#xC298; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11; &#xD310; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. Phe(1) &#xBC0F; Trp(4) &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC774; &#xB450; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE4;&#xCDA9; kinins&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. Pentapeptide kinin &#xD575;&#xC2EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xCD5C;&#xC18C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xACE0; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC544; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xB3C4; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4; &#xD655;&#xC778; &#xB410;&#xB2E4;. &#xD2F1; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC640; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xD6A8;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xD070; &#xC99D;&#xAC00; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; pentapeptide N-&#xB9D0;&#xAE30;&#xB294; hexapeptide &#xD655;&#xC7A5; &#xB54C; &#xBAA8;&#xAE30; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Aminoisobutyric &#xC0B0; (Aib)-&#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8;, FF [Aib] Wga&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD65C;&#xC131; superagonist FFFSWGa &#xD2F1; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xBAA8;&#xAE30; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAE30; &#xC21C;&#xC11C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; FFFSWGa &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD1B5;&#xACC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; &#xD65C;&#xBC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xB098; &#xB780; Aib &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xACE4;&#xCDA9; kinins&#xC774; &#xB450; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB098; &#xB780;&#xC5D0; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; FF [Aib] WGa &#xC120;&#xD0DD;&#xC131; &#xC5D0;&#xC774;&#xC2A4;&#xC640; nephrilysin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD56D; &#xC800;&#xD558; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC9C4;&#xB4DC;&#xAE30;&#xC640; &#xBAA8;&#xAE30; &#xC27D;&#xAC8C; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; biostable &#xACE4;&#xCDA9; kinin &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0A8;&#xBD80; &#xC18C; &#xD2F1; Boophilus microplus&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; kinin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xACE4;&#xCDA9; kinin &#xCF54;&#xC5B4; &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xAD6C;&#xC870; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBD84;&#xC11D; (&#xC9C4;&#xB4DC;&#xAE30;: Ixodidae) &#xACE0; Aedes aegypti &#xBAA8;&#xAE30; (Diptera: Culicidae).

El an&#xE1;lisis sistem&#xE1;tico de las relaciones estructura-actividad de cininas de insectos en dos heter&#xF3;logos que expresan los receptores de los sistemas se describe. Anteriormente, los receptores de cininas de la garrapata del ganado del sur, Boophilus microplus (Canestrini), y el vector del dengue, el mosquito Aedes aegypti (L.), eran funcionalmente y de forma estable expresado en c&#xE9;lulas CHO-K1. Con el fin de determinar que los residuos de cininas son cr&#xED;ticos para la interacci&#xF3;n p&#xE9;ptido-receptor, los an&#xE1;logos de cininas n&#xFA;cleo se sintetizaron como una serie Ala-sustituci&#xF3;n del p&#xE9;ptido FFSWGa y probado por un ensayo de calcio placa bioluminiscencia. El amino &#xE1;cidos Phe (1) y Trp (4) eran esenciales para la actividad de las cininas de insectos en ambos receptores. Se confirm&#xF3; que el pentap&#xE9;ptido n&#xFA;cleo cinina es la secuencia m&#xED;nima requerida para la actividad y que la amida C-terminal es tambi&#xE9;n esencial. En contraste con el receptor de garrapata, un gran aumento de la eficacia se observa en el receptor de mosquitos cuando el pentap&#xE9;ptido C-terminal es el N-terminal extendido a un hexap&#xE9;ptido. El &#xE1;cido aminoisobut&#xED;rico (AIB)-contiene anal&#xF3;gica, FF [Aib] WGA, era tan activo como FFFSWGa superagonista en el receptor de mosquitos en contraste con el receptor de garrapata donde fue estad&#xED;sticamente m&#xE1;s activo que FFFSWGa por un orden de magnitud. Esta conformaci&#xF3;n restringida Aib anal&#xF3;gico proporciona informaci&#xF3;n sobre la conformaci&#xF3;n asociada con la interacci&#xF3;n de las cininas insectos con estos dos receptores. Adem&#xE1;s, el FF anal&#xF3;gico [Aib] WGA se ha demostrado previamente para resistir la degradaci&#xF3;n por la ACE y peptidasas nephrilysin y representa una ventaja importante en el desarrollo de insectos bioestables an&#xE1;logos cininas que las garrapatas y mosquitos no puede f&#xE1;cilmente desactivar.

Comparado estructura-actividad An&#xE1;lisis de insectos an&#xE1;logos Core cininas en receptores recombinantes cininas del sur de la garrapata Boophilus microplus (Acari: Ixodidae) y Mosquito Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x8282;&#x80A2;&#x52A8;&#x7269; &#39;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#39; &#x5171;&#x4EAB;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x6291;&#x7D20;&#x6BCD;&#x9898; Phe-X1-X2-Trp-Gly-NH2&#xFF0C;where X 1 = &#x4ED6;&#x3001; Asn&#x3001; Ser&#xFF0C;&#x6216; Tyr &#x548C; X 2 = Ser&#x3001; &#x4E34;&#xFF0C;&#x6216;&#x963F;&#x62C9;&#x5DF4;&#x9A6C;&#x5DDE;&#x516B;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x7684;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x6291;&#x7D20;&#x6D3B;&#x52A8;&#x6838;&#x5FC3;&#x5173;&#x952E;&#x6B8B;&#x7559;&#x82EF;&#x4E19;&#x6C28;&#x9178; 1&#x3001; Pro3 &#x548C;&#x8DE8;&#x56FD;&#x6FC0;&#x8FDB;&#x515A; 4 &#x66FF;&#x6362;&#x4E3A;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684; &beta; 3-&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x6216; beta2-&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7684;&#x9178;&#x540C;&#x884C;&#x4ECE;&#x5357;&#x90E8;&#x725B;&#x8731;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x53D7;&#x4F53;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x725B;&#x8731;&#x6027; &#xFF08;Canestrini&#xFF09; &#x548C;&#x767B;&#x9769;&#x70ED;&#x5A92;&#x4ECB;&#xFF0C;&#x57C3;&#x53CA;&#x868A;&#x4F0A;&#x868A; (L.&#xFF09;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x82E5;&#x5E72;&#x4EE5;&#x524D;&#x8868;&#x73B0;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x62B5;&#x6297;&#x9000;&#x5316;&#x5230; peptidases&#x3002;&#x5355;&#x53D6;&#x4EE3;&#x6A21;&#x62DF; beta 2 &#x8DE8;&#x56FD;&#x6FC0;&#x8FDB;&#x515A; 4 &#x548C;&#x53CC;&#x7F6E;&#x6362;&#x6A21;&#x62DF; [beta 3 &#x82EF;&#x4E19;&#x6C28;&#x9178; 2&#x3001; &beta; 3 &#x4E34; 3] &#x6606;&#x866B;&#x7684;&#x6FC0;&#x80BD;&#x7684;&#x8BC1;&#x660E;&#x662F;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7684;&#x523B;&#x5EA6;&#x7EBF;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x800C;&#x5355;&#x66F4;&#x6362;&#x6A21;&#x62DF; beta 3 Pro 3 &#x548C;&#x53CC;&#x7F6E;&#x6362;&#x6A21;&#x62DF; [beta 3 &#x7ECF;&#x8425;&#x6743;&#xFF0C;beta 3 &#x4E34; 3] &#x88AB;&#x868A;&#x5B50;&#x548C;&#x523B;&#x5EA6;&#x7EBF;&#x7684;&#x5F3A;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x751F;&#x7269;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x8282;&#x80A2;&#x52A8;&#x7269;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E3A;&#x4EE3;&#x8868;&#x7684;&#x65B0;&#x5DE5;&#x5177;&#x548C;&#x6F5C;&#x529B;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x3001; &#x5BF9;&#x73AF;&#x5883;&#x53CB;&#x597D;&#x7684;&#x8282;&#x80A2;&#x52A8;&#x7269;&#x5BB3;&#x866B;&#x63A7;&#x5236;&#x5242;&#x80FD;&#x591F;&#x6270;&#x4E71;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x987E;&#x5BA2;&#x3002;

&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x548C;&#x975E;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5357;&#x90E8;&#x7684;&#x725B;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x7269; &beta;-&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x9178;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x52FE;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x725B;&#x8731;&#x6027;&#x548C;&#x868A;&#x5B50;&#x57C3;&#x53CA;&#x4F0A;&#x868A;&#x3002;

The multifunctional arthropod 'insect kinins' share the evolutionarily conserved C-terminal pentapeptide motif Phe-X1-X2-Trp-Gly-NH2, where X1=His, Asn, Ser, or Tyr and X2=Ser, Pro, or Ala. Eight different analogs of the insect kinin C-terminal pentapeptide active core in which the critical residues Phe 1, Pro3 and Trp 4 are replaced with beta 3-amino acid and/or their beta2-amino acid counterparts were evaluated on recombinant insect kinin receptors from the southern cattle tick, Boophilus microplus (Canestrini) and the dengue vector, the mosquito Aedes aegypti (L.). A number of these analogs previously demonstrated enhanced resistance to degradation by peptidases. Single-replacement analog beta 2 Trp 4 and double-replacement analog [beta 3 Phe 2, beta 3 Pro 3] of the insect kinins proved to be selective agonists for the tick receptor, whereas single-replacement analog beta 3 Pro 3 and double-replacement analog [beta 3 Phe, beta 3 Pro 3] were strong agonists on both mosquito and tick receptors. These biostable analogs represent new tools for arthropod endocrinologists and potential leads in the development of selective, environmentally friendly arthropod pest control agents capable of disrupting insect kinin-regulated processes.

Identification of selective and non-selective, biostable beta-amino acid agonists of recombinant insect kinin receptors from the southern cattle tick Boophilus microplus and mosquito Aedes aegypti.

Multifonctionnels arthropodes &laquo; insectes kinines &raquo; partagent le motif &eacute;volutivement conserv&eacute; de pentapeptides C-terminal Phe-X1-X2-Trp-Gly-NH2, o&ugrave; X 1 = sa, Asn, Ser, ou Tyr et X 2 = Ser, Pro, ou ala. huit diff&eacute;rents analogues le noyau actif C-terminale de la kinine insectes pentapeptide dans lequel les critiques r&eacute;sidus Phe 1, Pro3 et 4 Trp sont remplac&eacute;s avec de l&#39;acide amino-3 b&ecirc;ta et/ou leurs homologues acides amin&eacute;s beta2 ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;s sur les r&eacute;cepteurs de la kinine insectes recombinant de la tique du b&eacute;tail du SudBoophilus microplus (Canestrini) et le vecteur de la dengue, le moustique Aedes aegypti (L.). Un certain nombre de ces analogues d&eacute;j&agrave; d&eacute;montr&eacute; plus forte r&eacute;sistance &agrave; la d&eacute;gradation par les peptidases. Trp 4 et double-remplacement analogique de Single-remplacement analogique b&ecirc;ta 2 [b&ecirc;ta 3 Phe 2, b&ecirc;ta 3 Pro 3] des kinines insectes est av&eacute;r&eacute; pour &ecirc;tre des agonistes s&eacute;lectifs pour les r&eacute;cepteurs de la tique, tandis que single-remplacement analogique b&ecirc;ta 3 Pro 3 et double-remplacement analogique [b&ecirc;ta 3 Phe, b&ecirc;ta 3 Pro 3] &eacute;taient des agonistes puissants sur les moustiques et les tiques des r&eacute;cepteurs. Ces analogues biostable repr&eacute;sentent de nouveaux outils pour les endocrinologues arthropodes et potentiel conduit &agrave; l&#39;&eacute;laboration des agents antiparasitaires arthropodes s&eacute;lectifs, respectueux capables d&#39;appliquer proc&eacute;d&eacute;s r&eacute;glement&eacute;s kinine insectes perturbateurs.

Identification des s&eacute;lectifs et non s&eacute;lectifs, biostable b&ecirc;ta-amino acide agonistes des r&eacute;cepteurs de la kinine insectes recombinante de b&eacute;tail du Sud cocher Boophilus microplus et le moustique Aedes aegypti.

Die multifunktionale gliederf&uuml;&szlig;ler &#39;Insekt Kinins&#39; Teilen das evolution&auml;r konservierte C-Terminal-Zunahme-Motiv Phe-X1-X2-Trp-Gly-NH2, wo X 1 = His, Asn, Ser, oder Tyr und X 2 = Ser, Pro, oder Ala acht verschiedene Entsprechungen der Insekt Kinine C-terminalen Zunahme aktiven Kern, in dem die kritischen R&uuml;ckst&auml;nde Phe 1, Pro3 und Trp 4 mit Beta-3-amino-S&auml;ure ersetzt und/oder beta2-amino Acid Gegenst&uuml;cke auf rekombinante Insekt Kinine Rezeptoren aus dem s&uuml;dlichen Rinder-Tick bewertet wurden,Boophilus Microplus (Canestrini) und der Dengue-Vektor, die M&uuml;cke Aedes Aegypti (L.). Eine Anzahl von diesen Analoga zeigte zuvor erh&ouml;hte Resistenz gegen Abbau von Peptidasen. Einzel-Ersatz analoge Beta 2 Trp 4 und Doppel-Ersatz Analog [Beta 3 Phe 2, Beta 3 Pro 3] von dem Insekt Kinins erwies sich selektive Agonisten f&uuml;r den Tick-Rezeptor, w&auml;hrend Einzel-Ersatz analoge Beta 3 Pro 3 und Doppel-Ersatz Analog [Beta 3 Phe, Beta 3 Pro 3] wurden starke Agonisten auf Moskito und H&auml;ckchen Rezeptoren. Diese Biostable-Analoga neue Tools f&uuml;r gliederf&uuml;&szlig;ler Endokrinologen darstellen und Potenzial f&uuml;hrt in die Entwicklung der selektive, umweltfreundliche gliederf&uuml;&szlig;ler Pest Bek&auml;mpfungsmittel endokrinsch&auml;dlichen Insekt Kinine regulierte Prozesse geeignet.

Identifizierung der selektive und nichtselektive, kreuzen Biostable Beta-Aminos&auml;uren saure Agonisten rekombinante Insekt Kinine Rezeptoren aus dem s&uuml;dlichen Vieh Boophilus Microplus und M&uuml;cke Aedes Aegypti.

Gli artropodi multifunzionale &#39;insetto chinine&#39; condividono il motivo del pentapeptide C-terminale evolutivamente conservato Phe-X1-X2-Trp-Gly-NH2, dove X 1 = suo, Asn, Ser, o Tyr e X 2 = Ser, Pro, o ala otto diversi analoghi del nucleo attivo pentapeptide insetto chinine C-terminale in cui i critici residui Phe 1, Pro3 e Trp 4 vengono sostituiti con acido 3-amino beta o loro controparti beta2-amminici acidi sono stati valutati su recettori ricombinanti chinine insetto dal tick di bestiame meridionaleBoophilus microplus (Canestrini) e il vettore di dengue, la zanzara Aedes aegypti (L.). Un certo numero di questi analoghi precedentemente dimostrato una maggiore resistenza alla degradazione da peptidasi. Trp 4 e doppio-sostituzione analogico del singolo-sostituzione analogico beta 2 [beta 3 Phe 2, beta 3 3 Pro] delle chinine insetto ha dimostrato di essere agonisti selettivi per il recettore tick, mentre single-sostituzione analogico beta 3 Pro 3 e doppio-sostituzione analogico [beta 3 Phe, beta 3 3 Pro] erano forti agonisti su zanzare e zecche recettori. Questi analoghi biostabili rappresentano nuovi strumenti per endocrinologi artropodi e potenziale conduce allo sviluppo di agenti di controllo selettivo, rispettosi dei parassiti artropodi in grado di sconvolgere i processi dell&#39;insetto chinine-regolato.

Identificazione di selettivi e non selettivi, biostabile beta-amino acido agonisti dei recettori ricombinanti chinine insetto da bestiame meridionale spuntare Boophilus microplus e zanzara Aedes aegypti.

&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306F;&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7BC0;&#x8DB3;&#x52D5;&#x7269; &#39;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#39; &#x3092;&#x5171;&#x6709; Phe-X1-X2-Trp-Gly-NH2&#x3001;where X 1 &#x5F7C;&#x3001;Asn&#x3001;Ser&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F; Tyr &#x304A;&#x3088;&#x3073; X 2 = Ser = &#x306F;&#x3001;Pro&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6B8B;&#x57FA; Phe 1&#x3001;Pro3 &#x304A;&#x3088;&#x3073; Trp 4 &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; 3-&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3068;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3084;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; beta2 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3; &#x30B5;&#x30B6;&#x30F3;&#x725B;&#x30C0;&#x30CB;&#x304B;&#x3089;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; psk-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30B3;&#x30A2;&#x306E;&#x30A2;&#x30E9;&#x30D0;&#x30DE;&#x5DDE; 8 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x3001;Boophilus microplus (Canestrini)&#x3001;&#x30C7;&#x30F3;&#x30B0;&#x71B1;&#x5A92;&#x4ECB;&#x868A;&#x30CD;&#x30C3;&#x30BF;&#x30A4;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB; &#xFF08;l.&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x7269;&#x306E;&#x6570;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x52A3;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x62B5;&#x6297;&#x529B;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x4EA4;&#x63DB;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; 2 Trp 4 &#x3068;&#x4E8C;&#x91CD;&#x4EA4;&#x63DB;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0; [&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; 3 Phe 2&#x3001;3 &#x306E;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248; Pro 3] &#x6606;&#x866B;&#x306E;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x76EE;&#x76DB;&#x308A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306B;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; 3 &#x30D7;&#x30ED; 3 &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E8C;&#x91CD;&#x4EA4;&#x63DB;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0; [&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; 3 Phe&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; 3 Pro 3] &#x868A;&#x3084;&#x30C0;&#x30CB;&#x306B;&#x5F37;&#x3044;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7BC0;&#x8DB3;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30BB;&#x30E9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30D4;&#x30F3;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x3001;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x512A;&#x3057;&#x3044;&#x7BC0;&#x8DB3;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5BB3;&#x866B;&#x99C6;&#x9664;&#x5264;&#x64B9;&#x4E71;&#x306E;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x898F;&#x5236;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B; &#x3002;

&#x8EAB;&#x5206;&#x8A3C;&#x660E;&#x66F8;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x3068;&#x975E;&#x9078;&#x629E;&#x30BB;&#x30E9;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30D4;&#x30F3; &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x5357;&#x90E8;&#x306E;&#x725B;&#x304B;&#x3089;&#x306E; Boophilus microplus &#x3068;&#x868A;&#x30CD;&#x30C3;&#x30BF;&#x30A4;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB; &#x30AB;&#x30C1;&#x30AB;&#x30C1;&#x97F3;&#x3092;&#x305F;&#x3066;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; arthropod &#39;&#xACE4;&#xCDA9; kinins&#39; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; pentapeptide &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xB97C; &#xACF5;&#xC720; Phe-X1-X2-Trp-Gly-NH2, &#xC5B4;&#xB514;&#xC5D0; X 1 = &#xADF8;&#xC758; Asn, Ser, &#xB610;&#xB294; Tyr&#xC640; X 2 = Ser, &#xD504;&#xB85C;, &#xB610;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; Phe 1, Pro3, Trp 4 &#xBCA0;&#xD0C0; 3-&#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xCCB4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xB0A8;&#xBD80; &#xC18C; &#xD2F1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xACE4;&#xCDA9; kinin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; beta2 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; &#xB300;&#xC751; &#xD3C9;&#xAC00; &#xACE4;&#xCDA9; kinin C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; pentapeptide &#xD65C;&#xC131; &#xCF54;&#xC5B4;&#xC758; &#xC0B4;&#xB77C; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4;Boophilus microplus (Canestrini)&#xC640; &#xBCA1;&#xD130; &#xB385;&#xAE30;&#xC5F4;, &#xBAA8;&#xAE30; Aedes aegypti (L.). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4;&#xC758; &#xC218; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xB300;&#xCCB4; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xBCA0;&#xD0C0; 2 Trp 4&#xC640; &#xB354;&#xBE14; &#xAD50;&#xCCB4; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; [&#xBCA0;&#xD0C0; 3 &#xD398; 2 &#xC77C; &#xBCA0;&#xD0C0; 3 &#xD504;&#xB85C; 3] &#xACE4;&#xCDA9; kinins&#xC758; &#xC785;&#xC99D; &#xD2F1; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; agonists &#xBC18;&#xBA74; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAD50;&#xCCB4; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xBCA0;&#xD0C0; 3 &#xD504;&#xB85C; 3 &#xBC0F; &#xB354;&#xBE14; &#xAD50;&#xCCB4; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; [&#xBCA0;&#xD0C0; 3 &#xD398;, &#xBCA0;&#xD0C0; 3 &#xD504;&#xB85C; 3] &#xBAA8;&#xAE30;&#xC640; &#xC9C4;&#xB4DC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; agonists &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; biostable &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4; arthropod &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;, &#xD658;&#xACBD; &#xCE5C;&#xD654;&#xC801;&#xC778; arthropod &#xD574;&#xCDA9; &#xAD00;&#xB9AC; &#xC694;&#xC6D0; &#xBC29;&#xD574; &#xACE4;&#xCDA9; kinin &#xADDC;&#xC81C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xB9AC;&#xB4DC;.

&#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xBE44; &#xC120;&#xD0DD;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;, biostable &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; agonists &#xB0A8;&#xBD80; &#xAC00;&#xCD95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xACE4;&#xCDA9; kinin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; Boophilus microplus &#xBC0F; &#xBAA8;&#xAE30; Aedes aegypti&#xB97C; &#xB611; &#xB531; &#xAC70; &#xB9B0;&#xB2E4;.

Los artr&oacute;podos multifuncionales &#39;insectos Cininas&#39; compartan el motivo de pentap&eacute;ptido c-terminal evolutivamente conservado Phe-X1-X2-Trp-Gly-NH2, donde X 1 = His, Asn, Ser, o Tyr y X 2 = Ser, Pro, o Alabama ocho diferentes an&aacute;logos de la base activos pentap&eacute;ptido insectos cinina C-terminal en la que los residuos cr&iacute;ticos 1 Phe, Pro3 y Trp 4 se sustituyen con 3-amino &aacute;cido beta o sus hom&oacute;logos de beta2-amino&aacute;cidos &aacute;cidos se evaluaron en receptores de cinina insectos recombinante de la garrapata surBoophilus microplus (Canestrini) y el vector del dengue, el mosquito Aedes aegypti (L.). Un n&uacute;mero de estos an&aacute;logos previamente hab&iacute;a demostrado mayor resistencia a la degradaci&oacute;n por peptidasas. Anal&oacute;gico de 4 y doble-reemplazo de Trp solo reemplazo anal&oacute;gico beta 2 [beta 3 Phe 2, beta 3 Pro 3] de los insectos Cininas demostr&oacute; para ser agonistas selectivos para el receptor de la se&ntilde;al, mientras que solo reemplazo anal&oacute;gico de 3 y doble-reemplazo de Pro anal&oacute;gica beta 3 [beta 3 Phe, beta 3 Pro 3] fueron agonistas fuertes en mosquitos y garrapatas receptores. Estos an&aacute;logos bioestable representan nuevas herramientas para artr&oacute;podos endocrin&oacute;logos y potencial conduce en el desarrollo de agentes de control de plagas artr&oacute;podos selectiva, el medio ambiente capaces de disruptores insectos cinina-regula procesos.

Identificaci&oacute;n de selectivos y no selectivos, bioestable beta-amino &aacute;cido agonistas de receptores recombinantes cinina insectos de los ganados sur garrapata Boophilus microplus y el mosquito Aedes aegypti.

&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x8282;&#x80A2;&#x52A8;&#x7269; &#39;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#39; &#x5171;&#x4EAB;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x6291;&#x7D20;&#x6BCD;&#x9898; Phe-X(1)-X(2)-Trp-Gly-NH(2)&#xFF0C;where X (1) = &#x4ED6;&#x3001; Asn&#x3001; Ser &#x6216; Tyr &#x548C; (2) X = Ser&#x3001; Pro &#x6216;&#x4EA8;&#x8328;&#x7EF4;&#x5C14;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x8C03;&#x8282;&#x6606;&#x866B;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x7269;&#x79CD;&#x5229;&#x5C3F;&#x3002;&#x5177;&#x6709;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x53EF;&#x80FD;&#x5206;&#x522B;&#x5229;&#x7528;&#x57C3;&#x53CA;&#x868A;&#x4F0A;&#x868A; (L.&#xFF09; &#x548C;&#x5357;&#x90E8;&#x725B;&#x8731;&#x9570;&#x5F62;&#x6247; (&#x5FAE;&#x5C0F;&#x725B;&#x8731;) &#x6027; (Canestrini) &#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3001; &#x8F7D;&#x4F53;&#x7B49;&#x8282;&#x80A2;&#x52A8;&#x7269;&#x5BB3;&#x866B;&#x79CD;&#x7FA4;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#xFF0C;&#x662F;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D7;&#x5230;&#x4E25;&#x91CD;&#x9650;&#x5236;&#x5176;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5DE5;&#x5177;&#x7684;&#x866B;&#x5BB3;&#x63A7;&#x5236;&#x6216;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; peptidases &#x5FEB;&#x901F;&#x9176;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;&#x589E;&#x5F3A;&#x6297;&#x6027; peptidases&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x7EB3;&#x5165;&#x7B28;&#x91CD;&#x7684; alpha&#xFF0C;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x5408;&#x6210; &alpha;-&#x4E8C;&#x53D6;&#x4EE3;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x4E2D;&#x76F8;&#x90BB;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x5B66;&#x548C;&#x4E2D;&#x5B66;&#x7684;&#x80BD;&#x9176;&#x6C34;&#x89E3;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x7ACB;&#x573A;&#x3002;&#x4E0E;&#x63A7;&#x5236;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6709;&#x51E0;&#x4E2A;&#x662F;&#x964D;&#x89E3;&#x9176;&#x540D;&#x533B;&#x3001; neprilysin &#x548C;&#x4EAE;&#x6C28;&#x9178;&#x6C28;&#x57FA;&#x80BD;&#x9176;&#x6C34;&#x89E3;&#x5BF9;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3002;&#x516D;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x7684;&#x9499;&#x751F;&#x7269;&#x53D1;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6CD5;&#x5BF9;&#x91CD;&#x7EC4;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECE;&#x868A;&#x5B50;&#x548C;&#x523B;&#x5EA6;&#x7EBF;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5339;&#x914D;&#x6216;&#x8D85;&#x8FC7;&#x63A7;&#x5236;&#x6FC0;&#x80BD;&#x80BD;&#x4FC3;&#x6548;&#x5242;&#x7684;&#x6548;&#x529B;&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x6BD4;&#x63A7;&#x5236;&#x5BF9;&#x523B;&#x5EA6;&#x7EBF;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x7684;&#x7EA6; 5 &#x500D;&#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x3002;&#x8FD9;&#x6A21;&#x62DF;&#x4E86;&#x868A;&#x5B50;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x548C;&#x4E24;&#x6B21;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x6BD4; 8-fold &#x66F4;&#x6709;&#x6548;&#x6709;&#x529B;&#x6BD4;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x6FC0;&#x80BD;&#x4E8C;&#x3001; &#x767D;&#x7EB9;&#x4F0A;&#x868A;&#x3002;&#x6A21;&#x62DF;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x767D;&#x7EB9;&#x4F0A;&#x868A;&#x9A6C;&#x6C0F;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x6DB2;&#x5206;&#x6CCC;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E2D;&#x7684;&#x70C8;&#x6027;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5BF9;&#x523B;&#x5EA6;&#x7EBF;&#x6FC0;&#x80BD;&#x4F5C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6A21;&#x62DF;&#x6548;&#x80FD;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6CA1;&#x6709;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x6FC0;&#x80BD;&#x5DF2;&#x5C1A;&#x672A;&#x67E5;&#x660E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x70C8;&#x6027;&#xFF0C;&#x751F;&#x7269;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x4E3A;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7814;&#x7A76;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x4E3A;&#x523B;&#x5EA6;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x62DF;&#x8BBE;&#x7ACB;&#x7684;&#x8282;&#x80A2;&#x52A8;&#x7269;&#x6FC0;&#x80BD;&#x8C03;&#x8282;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x8868;&#x793A;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x65B0;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x751F;&#x7269;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x5339;&#x914D;&#x6216;&#x8D85;&#x8FC7;&#x672C;&#x673A;&#x6606;&#x866B;&#x6FC0;&#x80BD;&#x91CD;&#x7EC4;&#x8282;&#x80A2;&#x52A8;&#x7269; GPCRs &#x4E0A;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

The multifunctional arthropod 'insect kinins' share the evolutionarily conserved C-terminal pentapeptide motif Phe-X(1)-X(2)-Trp-Gly-NH(2), where X(1)=His, Asn, Ser, or Tyr and X(2)=Ser, Pro, or Ala. Insect kinins regulate diuresis in many species of insects. Compounds with similar biological activity could be exploited for the control of arthropod pest populations such as the mosquito Aedes aegypti (L.) and the southern cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini), vectors of human and animal pathogens, respectively. Insect kinins, however, are susceptible to fast enzymatic degradation by endogenous peptidases that severely limit their use as tools for pest control or for endocrinological studies. To enhance resistance to peptidases, analogs of the insect kinins incorporating bulky alpha,alpha-disubstituted amino acids in positions adjacent to both primary and secondary peptidase hydrolysis sites were synthesized. In comparison with a control insect kinin, several of these analogs are highly stable to hydrolysis by degradative enzymes ANCE, neprilysin and Leucine aminopeptidase. Six analogs were evaluated by calcium bioluminescence assay on recombinant receptors from mosquito and tick. Four of these analogs either matched or exceeded the potency of the control kinin peptide agonist. One of these was about 5-fold more potent than the control agonist on the tick receptor. This analog was 8-fold more potent than the control agonist on the mosquito receptor, and twice more potent than the endogenous Aedes kinin-II. The analog also demonstrated potent activity in an in vitro Aedes Malpighian tubule fluid secretion assay. Similar comparisons of analog potency cannot be made to tick kinins because no endogenous kinin has yet been identified. These potent, biostable analogs represent ideal new tools for endocrinologists studying arthropod kinin-regulated processes in vivo, particularly for ticks in which their role remains to be established.

Biostable agonists that match or exceed activity of native insect kinins on recombinant arthropod GPCRs.

&#xAB;Kinines insectes des arthropodes La multifonctionnel part du &#xE9;volutivement conserv&#xE9;e C-terminale motif pentapeptide Phe-X (1)-X (2)-Trp-Gly-NH (2), o&#xF9; X (1) = Sa, Asn, Ser, ou Tyr et X (2) kinines insectes = Ser, Pro, ou Ala r&#xE9;guler la diur&#xE8;se chez de nombreuses esp&#xE8;ces d&#x26;#39;insectes. Compos&#xE9;s ayant une activit&#xE9; biologique semblable pourrait &#xEA;tre exploit&#xE9; pour le contr&#xF4;le des populations de ravageurs arthropodes tels que le moustique Aedes aegypti (L.) et la tique Rhipicephalus sud du b&#xE9;tail (Boophilus) microplus (Canestrini), les vecteurs d&#x26;#39;agents pathog&#xE8;nes humains et animaux, respectivement. Kinines insectes, cependant, sont sensibles &#xE0; la d&#xE9;gradation enzymatique rapide par les peptidases endog&#xE8;nes qui limitent s&#xE9;rieusement leur utilisation comme outils de lutte contre les ravageurs ou pour des &#xE9;tudes endocrinologiques. Pour am&#xE9;liorer la r&#xE9;sistance aux peptidases, des analogues des kinines insectes incorporant alpha encombrants, alpha-disubstitu&#xE9;s acides amin&#xE9;s dans des positions adjacentes &#xE0; la fois primaires et secondaires des sites d&#x26;#39;hydrolyse peptidases ont &#xE9;t&#xE9; synth&#xE9;tis&#xE9;s. En comparaison avec une kinine lutte contre les insectes, plusieurs de ces analogues sont tr&#xE8;s stables &#xE0; l&#x26;#39;hydrolyse par l&#x26;#39;ANCE enzymes de d&#xE9;gradation, n&#xE9;prilysine et la leucine aminopeptidase. Six analogues ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;s par un test de bioluminescence de calcium sur les r&#xE9;cepteurs recombinants &#xE0; partir de moustiques et les tiques. Quatre de ces analogues, soit &#xE9;gal&#xE9; ou d&#xE9;pass&#xE9; la puissance de l&#x26;#39;agoniste de contr&#xF4;le peptide kinine. L&#x26;#39;un d&#x26;#39;eux &#xE9;tait environ 5 fois plus puissant que l&#x26;#39;agoniste de contr&#xF4;le sur le r&#xE9;cepteur tique. Cet analogue a &#xE9;t&#xE9; 8 fois plus puissant que l&#x26;#39;agoniste de contr&#xF4;le sur le r&#xE9;cepteur des moustiques, et deux fois plus puissant que le endog&#xE8;ne Aedes kinine-II. L&#x26;#39;analogue a &#xE9;galement d&#xE9;montr&#xE9; une puissante activit&#xE9; in vitro dans un test Aedes tubule de Malpighi s&#xE9;cr&#xE9;tion de liquide. Des comparaisons similaires de la puissance analogique ne peut pas &#xEA;tre fait de cocher les kinines, car aucun des kinines endog&#xE8;nes n&#x26;#39;a encore &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;. Ces puissants, analogues biostables repr&#xE9;sentent id&#xE9;ales de nouveaux outils pour &#xE9;tudier les endocrinologues arthropodes kinine processus r&#xE9;gul&#xE9;s in vivo, en particulier pour les tiques dans lequel leur r&#xF4;le reste &#xE0; &#xEA;tre &#xE9;tablie.

Agonistes biostables C&#x26;#39;est &#xE9;gal ou sup&#xE9;rieur &#xE0; l&#x26;#39;activit&#xE9; des insectes autochtones kinines sur recombinant arthropodes RCPG

Die multifunktionale gliederf&uuml;&szlig;ler &#39;Insekt Kinins&#39; Teilen das evolution&auml;r konservierte Motiv f&uuml;r die Zunahme an die C-terminalen Phe-X(1)-X(2)-Trp-Gly-NH(2), wo X (1) = sein, Asn, Ser oder Tyr und X (2) = Ser, Pro oder Ala Insekt Kinins regulieren Diurese bei zahlreichen Arten von Insekten. Verbindungen mit &auml;hnlichen biologische Aktivit&auml;t k&ouml;nnen f&uuml;r die Kontrolle der gliederf&uuml;&szlig;ler Sch&auml;dling-Bev&ouml;lkerungen wie die M&uuml;cke Aedes Aegypti (L.) und dem s&uuml;dlichen Rinder-Tick braune (Boophilus) Microplus (Canestrini), Vektoren menschlicher und tierischer Krankheitserreger, ausgenutzt werden. Insekt Kinins, sind jedoch anf&auml;llig f&uuml;r schnelle enzymatischen Abbau durch endogene Peptidasen, die ihre Verwendung als Werkzeuge f&uuml;r Sch&auml;dlingsbek&auml;mpfung oder endokrinologische Studien schr&auml;nken. Zur Verbesserung der Resistenz gegen Peptidasen, Analoga von dem Insekt Kinins Einbeziehung sperrige Alpha, wurden Alpha-Disubstituted Aminos&auml;uren in Positionen angrenzend an beide Seiten des prim&auml;ren und sekund&auml;ren Peptidase-Hydrolyse synthetisiert. Im Vergleich zu einem Steuerelement Insekt Kinine sind mehrere der diese Entsprechungen sehr stabil gegen&uuml;ber Hydrolyse durch Degradations Enzyme ANCE, Neprilysin und Leucin-Aminopeptidase. Sechs Analoga wurden von Kalzium-Biolumineszenz-Assay auf rekombinante Rezeptoren von Moskito und H&auml;ckchen bewertet. Vier von diesen Analoga abgestimmt oder &uuml;berschritten die Potenz der das Steuerelement Kinine Peptid-Agonist. Eines davon war etwa 5-fach st&auml;rker als die Steuerelement-Agonist auf den Tick-Rezeptor. Dieser Analog war die Steuerelement-Agonist auf den Moskito-Rezeptor und zweimal mehr 8-fach potenter als die endogene Aedes Kinine-II. Die analoge zeigte auch starke Aktivit&auml;t in einer in-vitro-Aedes Malpighische R&ouml;hrchens Fl&uuml;ssigkeit Sekretion Probe. &Auml;hnliche Vergleiche der analogen Potenz nicht zum Tick Kinins bestehen, da noch keine endogenen Kinine identifiziert wurde. Diese potente, Biostable-Analoga repr&auml;sentieren ideale neue Tools f&uuml;r Endokrinologen Studium gliederf&uuml;&szlig;ler Kinine regulierte Prozesse in-vivo, besonders gegen Zecken, in denen ihre Rolle noch eingerichtet werden.

Biostable-Agonisten, die erreichen oder &uuml;bertreffen T&auml;tigkeit des nativen Insekt Kinins auf rekombinante gliederf&uuml;&szlig;ler GPCRs.

Gli artropodi multifunzionale &#39;insetto chinine&#39; condividono il motivo evolutivamente conservato del C-terminale pentapeptide Phe-X(1)-X(2)-Trp-Gly-NH(2), dove X (1) = suo, Asn, Ser o Tyr e X (2) = chinine, Ser, Pro o insetto (Alabama) regolano la diuresi in molte specie di insetti. Composti con attivit&agrave; biologica simile potrebbero essere sfruttate per il controllo delle popolazioni di artropodi parassiti come la zanzara Aedes aegypti (L.) e il meridionale bestiame tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini), vettori di agenti patogeni umani e animali, rispettivamente. Insetto chinine, tuttavia, sono suscettibili di degradazione veloce enzimatica da peptidasi endogeni che limitano severamente l&#39;uso come strumenti per il controllo dei parassiti o per studi endocrinologico. Per migliorare la resistenza di peptidasi, analoghi dell&#39;insetto chinine che incorporano ingombrante alfa, alfa-disubstituted amminoacidi in posizioni adiacenti a entrambi i siti idrolisi peptidasi primaria e secondaria sono stati sintetizzati. Rispetto ad un chinine di controllo degli insetti, alcuni di questi analoghi sono altamente stabile all&#39;idrolisi di enzimi degradanti ANCE, neprilisina e leucina aminopeptidasi. Sei analoghi sono stati valutati mediante saggio bioluminescenza calcio sui recettori ricombinanti da zanzare e zecche. Quattro di questi analoghi o abbinati o superato la potenza dell&#39;agonista peptidico controllo chinine. Uno di questi era circa 5-fold pi&ugrave; potente agonista sul recettore tick control. Questo analogico era ad pi&ugrave; potente agonista controllo sul recettore della zanzara e due volte pi&ugrave; potente rispetto l&#39;endogeno Aedes chinine-II. L&#39;analogico ha anche dimostrato potente attivit&agrave; in un&#39;analisi di secrezione fluida del tubulo Aedes Malpighi in vitro. Simili confronti di potenza analogica non possono essere fatto per chinine tick perch&eacute; nessun chinine endogeno &egrave; stato ancora identificato. Questi potenti, biostabili analoghi rappresentano nuovi strumenti ideali per endocrinologi studiando processi regolamentati chinine artropodi in vivo, particolarmente per le zecche in cui loro ruolo rimane essere stabilito.

Biostabili agonisti che corrispondano o superino attivit&agrave; di chinine insetti nativi su GPCR artropodo ricombinante.

&#x591A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x7BC0;&#x8DB3;&#x52D5;&#x7269; &#x26;quot;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30B7;&#x30A7;&#x30A2;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3001;C&#x672B;&#x7AEF;&#x30DA;&#x30F3;&#x30BF;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;X&#xFF08;1&#xFF09;=&#x5F7C;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30B9;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AE;&#x30F3;&#x3001;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;Phe-X&#xFF08;1&#xFF09;-X&#xFF08;2&#xFF09;-TRP-&#x306E;Gly-NH&#x3001;&#xFF08;2&#xFF09; Tyr&#x304A;&#x3088;&#x3073;X&#xFF08;2&#xFF09;= SER&#x3001;Pro&#x307E;&#x305F;&#x306F;Ala&#x3067;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x6606;&#x866B;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7A2E;&#x3067;&#x5229;&#x5C3F;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x985E;&#x4F3C;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x868A;&#x30CD;&#x30C3;&#x30BF;&#x30A4;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB;&#xFF08;L.&#xFF09;&#x3068;&#x5357;&#x90E8;&#x725B;&#x30C0;&#x30CB;Rhipicephalus&#xFF08;&#x30A6;&#x30B7;&#x30DE;&#x30C0;&#x30CB;&#x5C5E;&#xFF09;microplus&#xFF08;Canestrini&#xFF09;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x3084;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7BC0;&#x8DB3;&#x52D5;&#x7269;&#x5BB3;&#x866B;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x60AA;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x5BB3;&#x866B;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x200B;&#x200B;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x304C;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x9AD8;&#x901F;&#x9175;&#x7D20;&#x5206;&#x89E3;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x3002;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x8010;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5DE8;&#x5927;&#x306A;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3093;&#x3060;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x3068;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x3001;&#x3B1;-&#x4E8C;&#x7F6E;&#x63DB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5236;&#x5FA1;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;ANCE&#x3001;&#x30CD;&#x30D7;&#x30EA;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x30ED;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x516D;&#x985E;&#x4F3C;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x868A;&#x3084;&#x30C0;&#x30CB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x767A;&#x5149;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x306E;4&#x4EBA;&#x306F;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x52B9;&#x529B;&#x306B;&#x30DE;&#x30C3;&#x30C1;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8D85;&#x3048;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x306F;&#x3001;&#x30C0;&#x30CB;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4F5C;&#x52D5;&#x85AC;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x7D04;5&#x500D;&#x5F37;&#x529B;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;8&#x500D;&#x868A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4F5C;&#x52D5;&#x85AC;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5F37;&#x529B;&#x3067;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30D2;&#x30C8;&#x30B9;&#x30B8;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;-II&#x306E;2&#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x5F37;&#x529B;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;in vitro&#x30D2;&#x30C8;&#x30B9;&#x30B8;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB;&#x30DE;&#x30EB;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AE;&#x306E;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x6DB2;&#x5206;&#x6CCC;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B0;&#x52B9;&#x529B;&#x306E;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x3092;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5B89;&#x5B9A;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x304C;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x6B8B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30C0;&#x30CB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x7BC0;&#x8DB3;&#x52D5;&#x7269;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7406;&#x60F3;&#x7684;&#x306A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;GPCR&#x306E;&#x7BC0;&#x8DB3;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x6606;&#x866B;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x4E00;&#x81F4;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8D85;&#x904E;&#x751F;&#x4F53;&#x5B89;&#x5B9A;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;

&#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; pentapeptide &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; Phe-X(1)-X(2)-Trp-Gly-NH(2), &#xACF5;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xAE30;&#xB2A5; arthropod &#39;&#xACE4;&#xCDA9; kinins&#39; &#xC5B4;&#xB514;&#xC5D0; (1) X = &#xADF8;&#xC758; Asn, Ser, &#xB610;&#xB294; &#xD2F0; &#xB974;&#xC640; X (2) = Ser, &#xD504;&#xB85C;, &#xB610;&#xB294; ala. &#xACE4;&#xCDA9; kinins &#xADDC;&#xC81C; diuresis &#xACE4;&#xCDA9;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; arthropod &#xD574;&#xCDA9; &#xC778;&#xAD6C; &#xBAA8;&#xAE30; Aedes aegypti (L.) &#xB4F1; &#xB0A8;&#xBD80; &#xC18C; &#xD2F1; Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini), &#xC778;&#xAC04;&#xACFC; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xBCA1;&#xD130; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAC01;&#xAC01; &#xC545;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xACE4;&#xCDA9; kinins&#xC740; &#xC0DD; &#xC120;&#xD0DD;&#xC131; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xD574;&#xCDA9; &#xB610;&#xB294; endocrinological &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558; &#xC5EC; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC800;&#xD558; &#xC801;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC120;&#xD0DD;&#xC131;, &#xBD80;&#xD53C;&#xAC00; &#xD070; &#xC54C;&#xD30C; &#xD1B5;&#xD569; &#xACE4;&#xCDA9; kinins&#xC758; &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB450; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBC0F; &#xBCF4;&#xC870; peptidase &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC54C;&#xD30C; disubstituted &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xD569;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC5B4; &#xACE4;&#xCDA9; kinin&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; degradative &#xD6A8;&#xC18C; &#xC5EC;&#xB4DC;&#xB984;, neprilysin &#xBC0F; &#xC2E0; aminopeptidase&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xB97C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. 6 &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4; &#xCE7C;&#xC298; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xAD11; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xBAA8;&#xAE30;&#xC640; &#xC9C4;&#xB4DC;&#xAE30;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD615; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. 4 &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4;&#xC758; &#xC77C;&#xCE58; &#xB610;&#xB294; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; kinin &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xD798;&#xC744; &#xCD08;&#xACFC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB4E4; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xD2F1; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC5B4; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC57D; 5-fold &#xB354; &#xAC15;&#xB825; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8;&#xB294; &#xBAA8;&#xAE30; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xB450; &#xBC88; &#xB354; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xBCF4;&#xB2E4; 8-fold &#xB354; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC0DD; Aedes kinin II &#xBCF4;&#xB2E4; &#xAC15;&#xB825; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8;&#xC5D0;&#xB294; &#xCCB4; &#xC678; Aedes Malpighian &#xAD00; &#xC720;&#xCCB4; &#xBD84; &#xBE44; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB2C8; &#xC0DD; kinin &#xC544;&#xC9C1; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xD798;&#xC758; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xBE44;&#xAD50; &#xB208;&#xAE08; kinins&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C;, biostable &#xC720;&#xC0AC; &#xCCB4; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; arthropod kinin &#xADDC;&#xC81C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, &#xD2B9;&#xD788; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xC9C4;&#xB4DC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Biostable agonists &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xCD08;&#xACFC; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; arthropod Gpcrs&#xC5D0; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xACE4;&#xCDA9; kinins&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;.

Cuota de &#x26;#39;cininas insecto El artr&#xF3;podos multifuncional el evolutivamente conservado pentap&#xE9;ptido C-terminal motivo Phe-X (1)-X (2)-Trp-Gly-NH (2), donde X (1) = Su, Asn, Ser, o Tyr y X (2) cininas insectos = Ser, Pro, o Alabama regular la diuresis en muchas especies de insectos. Los compuestos con actividad biol&#xF3;gica similar podr&#xED;a ser explotado para el control de las poblaciones de plagas de artr&#xF3;podos, tales como el mosquito Aedes aegypti (L.) y la garrapata Rhipicephalus sure&#xF1;a del ganado (Boophilus) microplus (Canestrini), los vectores de pat&#xF3;genos humanos y animales, respectivamente. Cininas de insectos, sin embargo, son susceptibles a la degradaci&#xF3;n enzim&#xE1;tica r&#xE1;pidamente por peptidasas end&#xF3;genas que limitan severamente su uso como herramientas para el control de plagas o para los estudios endocrinol&#xF3;gicos. Para mejorar la resistencia a las peptidasas, an&#xE1;logos de las cininas insectos incorporando alfa voluminoso, alfa-disustituidos amino&#xE1;cidos en posiciones adyacentes a los sitios de hidr&#xF3;lisis tanto primarios como secundarios peptidasa fueron sintetizados. En comparaci&#xF3;n con un control de insectos cininas, varios de estos an&#xE1;logos son muy estables a la hidr&#xF3;lisis por enzimas degradativas ANCE, neprilisina y leucina aminopeptidasa. Seis an&#xE1;logos fueron evaluadas por el ensayo de bioluminiscencia de calcio sobre los receptores recombinantes a partir de los mosquitos y garrapatas. Cuatro de estos an&#xE1;logos ya sea igualado o superado la potencia del agonista p&#xE9;ptido control cininas. Una de ellas fue aproximadamente 5 veces m&#xE1;s potente que el agonista en el receptor de control de garrapata. Este an&#xE1;logo era 8-veces m&#xE1;s potente que el agonista en el receptor de control de mosquitos, y dos veces m&#xE1;s potente que el end&#xF3;geno Aedes cinina-II. El an&#xE1;logo tambi&#xE9;n demostr&#xF3; una potente actividad in vitro en un ensayo de Aedes t&#xFA;bulo de Malpighi la secreci&#xF3;n de fluidos. Comparaciones similares de potencia anal&#xF3;gica no se pueden hacer para marcar cininas porque no cininas end&#xF3;geno ha sido identificado. Estos an&#xE1;logos potentes, ideales bioestables representan nuevas herramientas para los endocrin&#xF3;logos estudian artr&#xF3;podos cinina regulados por procesos in vivo, sobre todo la presencia de garrapatas en el que su papel est&#xE1; a&#xFA;n por establecerse.

Suparna Taneja-Bageshwar

Department of Entomology,
Department of Molecular and Cellular Medicine

Texas A&M University (TAMU)

A Calcium Bioluminescence Assay for Functional Analysis of Mosquito (Aedes aegypti) and Tick (Rhipicephalus microplus) G Protein-coupled Receptors

Suparna Taneja-Bageshwar

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Entomology,Department of Molecular and Cellular Medicine

Texas A&M University (TAMU)

A Calcium Bioluminescence Assay for Functional Analysis of Mosquito (Aedes aegypti) and Tick (Rhipicephalus microplus) G Protein-coupled Receptors

Department of Entomology,
Department of Molecular and Cellular Medicine