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Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

Hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) are two surface proteins of influenza viruses which are known to play important roles in the viral life cycle ...

Health Canada

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El tratamiento con interfer&#xF3;n recombinante pueden dar lugar a varios efectos secundarios comunes incluyen fiebre y dolor del sitio de inyecci&#xF3;n. Los pacientes a menudo se aconseja el uso de paracetamol u otros over-the-counter medicamentos para el dolor seg&#xFA;n sea necesario. Poco se sabe acerca de los cambios transcripcionales inducidos por tales co-administraci&#xF3;n.

El acetaminofeno modula la respuesta transcripcional a interfer&#xF3;n-beta

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Recombinant interferon treatment can result in several common side effects including fever and injection-site pain. Patients are often advised to use acetaminophen or other over-the-counter pain medications as needed. Little is known regarding the transcriptional changes induced by such co-administration.

Acetaminophen modulates the transcriptional response to recombinant interferon-beta.

Traitement par l&#x26;#39;interf&#xE9;ron recombinant peut entra&#xEE;ner plusieurs effets secondaires les plus courants, y compris la fi&#xE8;vre et la douleur au site d&#x26;#39;injection. Les patients sont souvent conseill&#xE9; d&#x26;#39;utiliser l&#x26;#39;ac&#xE9;taminoph&#xE8;ne ou d&#x26;#39;autres m&#xE9;dicaments contre la douleur over-the-counter, au besoin. On sait peu de changements en ce qui concerne les transcriptionnelles induites par une telle co-administration.

L&#x26;#39;ac&#xE9;taminoph&#xE8;ne module la r&#xE9;ponse transcriptionnelle &#xE0; l&#x26;#39;interf&#xE9;ron recombinant-b&#xEA;ta

Rekombinantes Interferon-Behandlung kann mehrere h&auml;ufige Nebenwirkungen einschlie&szlig;lich Fieber und Einstichstelle Schmerzen f&uuml;hren. Patienten sind oft geraten, Paracetamol oder andere rezeptfreie Schmerzmittel nach Bedarf verwenden. Bez&uuml;glich der transcriptional &Auml;nderungen induziert durch solche gleichzeitige Gabe ist wenig bekannt.

Paracetamol moduliert die transkriptionelle Reaktion auf rekombinanten Interferon-Beta.

Trattamento con interferone ricombinante pu&ograve; provocare diversi effetti collaterali comuni, tra cui febbre e sito di iniezione dolore. I pazienti spesso si consiglia di usare il paracetamolo o altri farmaci per il dolore-the-counter come necessario. Poco &egrave; conosciuto riguardo le modifiche trascrizionale indotte da tale co-somministrazione.

Paracetamolo modula la risposta trascrizionale di interferone-beta ricombinante.

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&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x548C;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x4E9A;&#x578B;&#x6D41;&#x611F; A &#x548C; B &#x75C5;&#x6BD2;&#x6027; neuraminidases &#x4F7F;&#x7528;&#x6297;&#x4F53;&#x9776;&#x5411;&#x7684;&#x666E;&#x904D;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Neuraminidase-induced immune responses are correlated with protection of humans and animals from influenza. However, the amounts of neuraminidase in influenza vaccines are yet to be standardized. Thus, a simple method capable of quantifying neuraminidase would be desirable. Here we identified two universally conserved sequences in all influenza A and B neuraminidases, one representing a novel finding of nearly 100% conservation near the enzymatically active site. Antibodies generated against the two highly conserved sequences bound to all nine subtypes of influenza A neuraminidase and demonstrated remarkable specificity against the viral neuraminidase sequences without any cross-reactivity with allantoic and cellular proteins. Importantly, employing these antibodies for the analyses of vaccines from eight manufacturers using the same vaccine seeds revealed marked variations of neuraminidase levels in addition to considerable differences between lots from the same producer. The reasons for the absence or low level of neuraminidase in vaccine preparations are complex and could be multi-factorial. The antibody-based assays reported here could be of practical value for better vaccine quality control.

Qualitative and quantitative analyses of virtually all subtypes of influenza A and B viral neuraminidases using antibodies targeting the universally conserved sequences.

La neuraminidase r&#xE9;ponses immunitaires induites sont en corr&#xE9;lation avec la protection des humains et les animaux de la grippe. Toutefois, les montants de la neuraminidase dans les vaccins antigrippaux ne sont pas encore normalis&#xE9;es. Ainsi, une m&#xE9;thode simple permettant de quantifier la neuraminidase serait souhaitable. Ici, nous avons identifi&#xE9; deux s&#xE9;quences universellement conserv&#xE9;es dans tous influenza A et B neuraminidases, l&#x26;#39;un repr&#xE9;sentant une nouvelle d&#xE9;couverte de pr&#xE8;s de 100% de conservation &#xE0; proximit&#xE9; du site enzymatiquement active. Anticorps g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; contre les deux s&#xE9;quences hautement conserv&#xE9;es li&#xE9;s &#xE0; des sous-types de chacun des neuf grippe A sp&#xE9;cificit&#xE9; neuraminidase et d&#xE9;montr&#xE9; remarquable contre les s&#xE9;quences virales neuraminidase sans r&#xE9;activit&#xE9; crois&#xE9;e avec des prot&#xE9;ines allanto&#xEF;de et cellulaire. Surtout, l&#x26;#39;emploi de ces anticorps pour les analyses de vaccins &#xE0; partir de huit fabricants en utilisant les graines de m&#xEA;me vaccin a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; de fortes variations des niveaux de la neuraminidase, en plus de diff&#xE9;rences consid&#xE9;rables entre les lots provenant du m&#xEA;me producteur. Les raisons de l&#x26;#39;absence ou le faible niveau de la neuraminidase dans les pr&#xE9;parations vaccinales sont complexes et pourraient &#xEA;tre multi-factorielle. Les tests &#xE0; base d&#x26;#39;anticorps pr&#xE9;sent&#xE9;s ici pourraient avoir une valeur pratique pour le contr&#xF4;le de vaccin contre la meilleure qualit&#xE9;.

Des analyses qualitatives et quantitatives de pratiquement toutes sous-types de l&#x26;#39;influenza A et B neuraminidases virales en utilisant des anticorps dirig&#xE9;s contre les s&#xE9;quences universellement conserv&#xE9;es

Neuraminidase-induzierte Immunantworten korrelieren mit dem Schutz von Menschen und Tieren an Grippe. Allerdings sind die Betr&auml;ge der Neuraminidase in Influenza-Impfstoffe noch standardisiert werden. Eine einfache Methode zur Quantifizierung der Neuraminidase f&auml;hig w&auml;re daher w&uuml;nschenswert. Hier haben wir zwei universell konservierte Sequenzen in alle Grippe A und B Neuraminidasen, neuartige Feststellung einer fast 100 % Erhaltung in der N&auml;he des enzymatisch aktiv darstellt. Antik&ouml;rper gegen die beiden hoch konservierten Sequenzen erzeugt zwangsl&auml;ufig alle neun Subtypen der Influenza eine Neuraminidase und demonstrierte bemerkenswerte Spezifit&auml;t gegen die viralen Neuraminidase-Sequenzen ohne Kreuzreaktivit&auml;t mit Allantois und zellul&auml;re Proteine. Wichtig ist, offenbart die besch&auml;ftigt diese Antik&ouml;rper f&uuml;r die Analysen von Impfstoffen aus acht Hersteller verwenden die gleichen Impfstoff-Samen markierte Variationen der Neuraminidase Ebenen neben erheblichen Unterschiede zwischen viel vom gleichen Hersteller. Die Gr&uuml;nde f&uuml;r die Abwesenheit oder niedrige Niveau der Neuraminidase Impfstoff Vorbereitungen sind komplex und multifaktorielle k&ouml;nnte. Die Antik&ouml;rper-basierte Assays berichtet hier k&ouml;nnte von praktischem Wert f&uuml;r besseren Impfstoff-Qualit&auml;tskontrolle.

Qualitative und Quantitative Analysen der praktisch alle Subtypen der Grippe A und B virale Neuraminidasen unter Verwendung der Antik&ouml;rper, die gezielt der universell konservierten Sequenzen.

Neuraminidasi-indotto risposte immunitarie sono correlate con la protezione degli esseri umani e gli animali dall&#39;influenza. Tuttavia, gli importi di neuraminidasi nei vaccini influenzali sono ancora di essere standardizzati. Pertanto, sarebbe auspicabile un semplice metodo in grado di quantificare la neuraminidasi. Qui abbiamo identificato due sequenze conservate universalmente in tutti l&#39;influenza A e B neuraminidases, uno che rappresenta un romanzo ritrovamento di quasi il 100% conservazione nei pressi del sito enzimaticamente attivo. Anticorpi generati contro le due sequenze altamente conservate associato a tutti i nove sottotipi dell&#39;influenza A neuraminidasi e ha dimostrato notevole specificit&agrave; contro le sequenze virali neuraminidasi senza alcuna reattivit&agrave; crociata con le proteine cellulari e allantoico. Importante, che impiegano questi anticorpi per le analisi dei vaccini da otto produttori utilizzando i semi di vaccino stesso rivelato contrassegnati variazioni dei livelli di neuraminidasi oltre a notevoli differenze tra lotti da parte del produttore stesso. Le ragioni per l&#39;assenza o il basso livello di neuraminidasi nei preparativi del vaccino sono complesse e potrebbero essere multifattoriali. La base di anticorpi dosaggi qui riportati potrebbero essere di valore pratico per il controllo di qualit&agrave; migliore vaccino.

Qualitativa e analisi quantitative di praticamente tutti i sottotipi di neuraminidases virale dell&#39;influenza A e B usando gli anticorpi targeting per le sequenze conservate universalmente.

&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x304B;&#x3089;&#x4EBA;&#x9593;&#x3084;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x91CF;&#x306F;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x5316;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x5B9A;&#x91CF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x304C;&#x671B;&#x307E;&#x3057;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;A&#x304A;&#x3088;&#x3073;B&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x306B;&#x3001;&#x307B;&#x307C;100&#xFF05;&#x306E;&#x4FDD;&#x5168;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x77E5;&#x898B;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3072;&#x3068;&#x3064;&#x306E;&#x30D1;&#x30C3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x5185;&#x306B;2&#x3064;&#x306E;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x5C3F;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;9&#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;2&#x3064;&#x306E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7A2E;&#x5B50;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;8&#x306E;&#x30E1;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x751F;&#x7523;&#x8005;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x9593;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x88FD;&#x5264;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4F4E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x7406;&#x7531;&#x306F;&#x8907;&#x96D1;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x4F53;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x54C1;&#x8CEA;&#x7BA1;&#x7406;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B9F;&#x7528;&#x7684;&#x306A;&#x4FA1;&#x5024;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30E6;&#x30CB;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B5;&#x30EB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;A&#x304A;&#x3088;&#x3073;B&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x5206;&#x6790;

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&#xC815;&#xC131; &#xBC0F; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; A&#xC640; B &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; neuraminidases &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD558;&#xC704;.

Neuraminidasa inducidos por la respuesta inmune se correlacionan con la protecci&#xF3;n de los humanos y los animales de la influenza. Sin embargo, las cantidades de la neuraminidasa en vacunas contra la gripe est&#xE1;n por normalizarse. As&#xED;, un m&#xE9;todo simple capaz de cuantificar la neuraminidasa ser&#xED;a deseable. Aqu&#xED; hemos identificado dos secuencias universalmente conservadas en todos los de la gripe A y B neuraminidasas, uno en representaci&#xF3;n de un nuevo hallazgo de la conservaci&#xF3;n de casi el 100% cerca del sitio enzim&#xE1;ticamente activa. Los anticuerpos generados contra las dos secuencias altamente conservadas unidos a los nueve subtipos de influenza A especificidad notable neuraminidasa y demostrado contra las secuencias virales neuraminidasa sin ninguna reactividad cruzada con las prote&#xED;nas alantoideos y celulares. Es importante destacar que el empleo de estos anticuerpos para el an&#xE1;lisis de las vacunas a partir de ocho fabricantes de vacunas con las semillas mismas revelaron marcadas variaciones de los niveles de la neuraminidasa, adem&#xE1;s de diferencias considerables entre los lotes del mismo productor. Las razones de la ausencia o bajo nivel de la neuraminidasa en preparaciones de vacunas son complejas y podr&#xED;a ser multi-factorial. Los ensayos basados &#x200B;&#x200B;en anticuerpos presentados aqu&#xED; pueden ser de valor pr&#xE1;ctico para un mejor control de calidad de las vacunas.

Los an&#xE1;lisis cualitativos y cuantitativos de pr&#xE1;cticamente todos los subtipos de influenza A y B neuraminidasa viral utilizando anticuerpos dirigidos a las secuencias universalmente conservadas

&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FEB;&#x901F;&#x5206;&#x8272;&#x4E0A;&#x975E;&#x591A;&#x5B54;&#x4E8C;&#x6C27;&#x5316;&#x7845;&#x56FA;&#x5B9A;&#x76F8; [1] &#x662F;&#x4F18;&#x5316;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x8840;&#x51DD;&#x7D20; (HA) &#x9650;&#x5B9A;&#x5728;&#x6D41;&#x611F;&#x75AB;&#x82D7;&#x5236;&#x5242;&#x4E2D;&#x524D;&#x9762;&#x6240;&#x8FF0;&#x53CD;&#x76F8;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5; (HPLC) &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x68AF;&#x5EA6;&#x6D17;&#x8131;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x4F18;&#x5316;&#x4ECE;&#x5176;&#x4ED6;&#x75AB;&#x82D7;&#x6210;&#x5206;&#x5BFC;&#x81F4; HA1 &#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x672C;&#x673A;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x9020;&#x6210;&#x4E0E;&#x7D2B;&#x5916;&#x53EF;&#x89C1;&#x68C0;&#x6D4B;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x7EA6; 10 &#x500D;&#x3002;&#x542F;&#x7528;&#x6B64;&#x9009;&#x9879;&#x539F;&#x59CB;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E2D;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x76F4;&#x63A5;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x5236;&#x5242;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x6B65;&#x7684;&#x6D88;&#x9664;&#x3002;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x9650;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x7EBF;&#x6027;&#x3001; &#x8303;&#x56F4;&#x3001; &#x68C0;&#x6D4B;&#x9650;&#x3001; &#x5B9A;&#x91CF;&#x548C;&#x7CBE;&#x5EA6;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x5B83;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x68C0;&#x67E5;&#x7684; 2.5 100 &mu; &#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;/mL &#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x662F;&#x7EBF;&#x6027;&#x7684;&#x3002;&#x6B64;&#x8303;&#x56F4;&#x6DB5;&#x76D6; 50-150%&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E3A;&#x4E2A;&#x4F53;&#x83CC;&#x682A;&#x5728;&#x5B63;&#x8282;&#x6027;&#x6D41;&#x611F;&#x75AB;&#x82D7;&#x548C;&#x7532;&#x578B; h1n1 &#x6D41;&#x611F;&#x5927;&#x6D41;&#x884C;&#x75AB;&#x82D7;&#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x3002;&#x6781;&#x9650;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x4E3A;&#x6BCF;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x53EF;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x8BE5;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x548C;&#x4E95;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x7531;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x5F84;&#x5411;&#x6269;&#x6563;&#x6CD5; (SRID&#xFF09; &#x627E;&#x5230;&#x7684;&#x503C;&#x3002;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x53EF;&#x91CD;&#x590D;&#x6027;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x7559;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x5CF0;&#x7ED9;&#x4E86; RSD &#x503C; 5%&#x4EE5;&#x4E0B;&#x9886;&#x57DF;&#x3002;&#x4E2D;&#x95F4;&#x7CBE;&#x5BC6;&#x7684;&#x9884;&#x671F;&#xFF0C;&#x8F83;&#x5927;&#x7684; RSD &#x503C;&#x4E3A;&#x5C71;&#x9876;&#x533A;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E86;&#x4F46;&#x4F4E;&#x4E8E; 10 &#xFF05; &#x548C;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63A5;&#x53D7;&#x3002;&#x53CD;&#x76F8;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x7ED3;&#x679C;&#x8FDB;&#x884C;&#x6BD4;&#x8F83;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E00;&#x5957; 15 &#x5355;&#x4EF7; A &#x4F7F;&#x7528;&#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;&#x666E;&#x904D;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x5370;&#x8FF9;&#x5206;&#x6790; / &#x52A0;&#x5DDE;&#x7532;&#x578B; h1n1 &#x6D41;&#x611F;&#x7684;&#x7B79;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x51FA;&#x5F88;&#x597D;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x3002;&#x540C;&#x6837;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x7528;&#x4E8E;&#x6279;&#x91CF;&#x6297;&#x539F;&#x548C;&#x6700;&#x540E;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x5236;&#x5242;&#x4E2D;&#x7684;&#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;&#x542B;&#x91CF;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A; SRID &#x8BC4;&#x4F30;&#x5B9A;&#x91CF;&#x53CD;&#x76F8;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x6CD5;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;23 &#x5355;&#x4EF7; A &#x5E03;&#x91CC;&#x65AF;&#x73ED; 59/2007 H1N1 &#x9A73;&#x8239;&#xFF0C;&#x81F3; 12.7 &#x548C; 15.9 &mu; &#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;/mL SRID&#xFF0C;&#x7531;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x627E;&#x5230;&#x503C;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x5E38;&#x597D;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x81F3; 11.9 &#x548C; 14.1 &mu; &#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;/mL (n = 5) &#x4E94;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4E0D;&#x540C; 5 &#x65E5;&#x8FDB;&#x884C;&#x3002;2009-10 &#x7532;&#x578B; H1N1 &#x6D41;&#x611F;&#x5927;&#x6D41;&#x884C;&#x671F;&#x95F4;&#x65C1;&#x8FB9;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5305;&#x62EC;&#x6279;&#x91CF;&#x6297;&#x539F;&#x548C;&#x6700;&#x540E;&#x75AB;&#x82D7;&#x7684;&#x5927;&#x6D41;&#x884C;&#x7532;&#x578B; h1n1 &#x6D41;&#x611F;&#x75AB;&#x82D7;&#x5236;&#x5242;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684; HPLC &#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;&#x5185;&#x5BB9;&#x7684;&#x5236;&#x5B9A;&#x5728; 15 &#x6216; 30 &#x5FAE;&#x514B;/&#x6BEB;&#x5347;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x7528;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x548C; SRID &#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;&#x5185;&#x5BB9;&#x786E;&#x5B9A;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x76F8;&#x5173;&#x5F88;&#x597D;&#x5730;&#x786E;&#x5B9A;&#x7531; SRID &#x548C;&#x5370;&#x8FF9;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x4EF7;&#x503C;&#x89C2;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BC1;&#x636E;&#x7684;&#x53CD;&#x76F8;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7684;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x548C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7814;&#x7A76;&#x533B;&#x7BA1;&#x5C40;&#x7684;&#x5185;&#x5BB9;&#x4E00;&#x65E6;&#x786E;&#x7ACB;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53C2;&#x8003;&#x6807;&#x51C6;&#x3002;

&#x4F18;&#x5316;&#x548C;&#x6D41;&#x611F;&#x7684;&#x7B79;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x548C;&#x751F;&#x5316;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53CA;&#x5176;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x8840;&#x51DD;&#x7D20;&#x5B9A;&#x91CF;&#x53CD;&#x76F8;&#x9AD8;&#x6548;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;&#x6CD5;&#x7684;&#x8D44;&#x683C;&#x3002;

A previously described reversed-phase HPLC (RP-HPLC) method based on fast separations on a non-porous silica stationary phase [1] was optimized and qualified for the quantitative determination of hemagglutinin (HA) in influenza vaccine preparations. Optimization of the gradient elution conditions led to improved separation of the HA1 subunit from other vaccine constituents. The sensitivity of the method was significantly increased by using native fluorescence detection, resulting in an approximately 10-fold increase as compared to UV-vis detection. This enabled the elimination of the concentration step described in the original method and allowed direct analysis of vaccine preparations. The method was qualified for linearity, range, limit of detection, limit of quantitation and precision. Overall, it was found to be linear over the range of 2.5-100 Î¼g HA/mL for all subtypes examined. This range covered 50-150% of the concentration found for individual strains in seasonal influenza vaccines and in the pandemic H1N1 vaccine. The limit of detection and limit of quantitation for each subtype were found to be suitable for the method's intended purpose and compared well to values found by the single radial immunodiffusion (SRID). The repeatability of the method gave RSD values below 5% for both retention time and peak areas. As expected for intermediate precision, larger RSD values for peak area were obtained but were below 10% and deemed acceptable. The RP-HPLC results were compared to Western blot analysis using a HA universal antibody for a set of 15 monovalent A/California H1N1 preparations and showed good correlation. Similarly, the quantitative nature of the RP-HPLC method was assessed in relation to the SRID assay currently used for the determination of the HA content in bulk antigen and final vaccine preparations. Thus, for a series of 23 monovalent A/Brisbane/59/2007 H1N1 bulks, ranging between 12.7 and 15.9 Î¼g HA/mL by SRID, the RP-HPLC values were found to be in very good agreement, ranging between 11.9 and 14.1 Î¼g HA/mL (n=5) for five determinations carried out on 5 different days. During the 2009-10 H1N1 influenza pandemic the quantitative RP-HPLC method was used alongside several other test methods for the analysis of pandemic H1N1 vaccine preparations that included bulk antigen and final vaccines. The HA content of vaccines formulated at 15 or 30 Î¼g/mL was measured by RP-HPLC and SRID and results showed that the HA content determined by RP-HPLC correlated well to that determined by SRID and to values determined by Western blot. Overall, the results provided further evidence of the usefulness of RP-HPLC for the detection and quantitation of the HA content once a reference standard has been established.

Optimization and qualification of a quantitative reversed-phase HPLC method for hemagglutinin in influenza preparations and its comparative evaluation with biochemical assays.

Une d&#xE9;crit pr&#xE9;c&#xE9;demment HPLC en phase inverse (RP-HPLC) m&#xE9;thode fond&#xE9;e sur des s&#xE9;parations rapides sur une phase de silice non-stationnaire poreuse [1] a &#xE9;t&#xE9; optimis&#xE9; et s&#x26;#39;est qualifi&#xE9;e pour la d&#xE9;termination quantitative de l&#x26;#39;h&#xE9;magglutinine (HA) dans les pr&#xE9;parations de vaccins antigrippaux. Optimisation des conditions d&#x26;#39;&#xE9;lution de gradient conduit &#xE0; la s&#xE9;paration am&#xE9;lior&#xE9;e de la sous-unit&#xE9; HA1 de constituants autres vaccins. La sensibilit&#xE9; de la m&#xE9;thode a &#xE9;t&#xE9; significativement augment&#xE9;e en utilisant la d&#xE9;tection par fluorescence native, r&#xE9;sultant en une augmentation d&#x26;#39;environ 10 fois par rapport &#xE0; d&#xE9;tection UV-VIS. Cela a permis l&#x26;#39;&#xE9;limination de l&#x26;#39;&#xE9;tape de concentration d&#xE9;crit dans la m&#xE9;thode originale et a permis une analyse directe de pr&#xE9;parations vaccinales. La m&#xE9;thode a &#xE9;t&#xE9; qualifi&#xE9; pour la lin&#xE9;arit&#xE9;, la port&#xE9;e, limite de d&#xE9;tection, limite de quantification et de pr&#xE9;cision. Dans l&#x26;#39;ensemble, il a &#xE9;t&#xE9; constat&#xE9; &#xE0; &#xEA;tre lin&#xE9;aire sur toute la gamme de 2,5 &#xE0; 100 ug HA / ml pour toutes les sous-types examin&#xE9;s. Cette gamme couverte 50-150% de la concentration mesur&#xE9;e pour les souches individuelles dans les vaccins contre la grippe saisonni&#xE8;re et le vaccin pand&#xE9;mique H1N1. La limite de d&#xE9;tection et limite de quantification pour chaque sous-type ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s &#xE0; &#xEA;tre adapt&#xE9; &#xE0; la destination de la m&#xE9;thode et par rapport &#xE0; des valeurs bien trouv&#xE9;s par l&#x26;#39;immunodiffusion radiale simple (SRID). La r&#xE9;p&#xE9;tabilit&#xE9; de la m&#xE9;thode a donn&#xE9; des valeurs inf&#xE9;rieures &#xE0; 5% RSD pour le temps de r&#xE9;tention et des zones &#xE0; la fois de pointe. Comme pr&#xE9;vu pour la pr&#xE9;cision interm&#xE9;diaire, des valeurs plus grandes de DSR pour l&#x26;#39;aire du pic ont &#xE9;t&#xE9; obtenus, mais &#xE9;taient en dessous de 10% et jug&#xE9;es acceptables. Les r&#xE9;sultats RP-HPLC ont &#xE9;t&#xE9; compar&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;analyse Western blot en utilisant un anticorps HA universel pour un ensemble de 15 monovalents A / pr&#xE9;parations contre la grippe H1N1 en Californie et a montr&#xE9; une bonne corr&#xE9;lation. De m&#xEA;me, la nature quantitative de la m&#xE9;thode RP-HPLC a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;e par rapport &#xE0; l&#x26;#39;essai SRID actuellement utilis&#xE9; pour la d&#xE9;termination de la teneur en HA antig&#xE8;ne en vrac et des pr&#xE9;parations vaccinales finales. Ainsi, pour une s&#xE9;rie de 23 monovalent H1N1 virus analogue &#xE0; A/Brisbane/59/2007 vracs, comprise entre 12,7 et 15,9 ug HA / ml par SRID, les valeurs RP-HPLC ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s en tr&#xE8;s bon accord, comprise entre 11,9 et 14,1 mg HA / mL (n = 5) pour cinq d&#xE9;terminations effectu&#xE9;es sur 5 jours diff&#xE9;rents. Au cours de la pand&#xE9;mie de grippe H1N1 2009-10 Le RP-HPLC quantitative m&#xE9;thode a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e aux c&#xF4;t&#xE9;s de plusieurs autres m&#xE9;thodes d&#x26;#39;essai pour l&#x26;#39;analyse de la pand&#xE9;mie H1N1 pr&#xE9;parations vaccinales qui comprenaient antig&#xE8;ne en vrac et les vaccins finales. Le contenu des vaccins HA formul&#xE9;es &#xE0; 15 ou 30 ug / ml a &#xE9;t&#xE9; mesur&#xE9;e par RP-HPLC et du SRID et les r&#xE9;sultats ont montr&#xE9; que la teneur en HA d&#xE9;termin&#xE9;e par RP-HPLC est bien corr&#xE9;l&#xE9;e &#xE0; celle d&#xE9;termin&#xE9;e par SRID et &#xE0; des valeurs d&#xE9;termin&#xE9;es par Western blot. Dans l&#x26;#39;ensemble, les r&#xE9;sultats ont fourni une preuve suppl&#xE9;mentaire de l&#x26;#39;utilit&#xE9; de RP-HPLC pour la d&#xE9;tection et la quantification de la teneur en HA fois une norme de r&#xE9;f&#xE9;rence a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tabli.

Optimisation et qualification d&#x26;#39;un quantitative en phase inverse M&#xE9;thode HPLC pour l&#x26;#39;h&#xE9;magglutinine dans les pr&#xE9;parations de la grippe et son &#xE9;valuation comparative avec dosages biochimiques

Eine zuvor beschriebene Umkehrphasen-HPLC (RP-HPLC) Methode basiert auf schnelle Trennungen auf eine porenlose Kiesels&auml;ure station&auml;re Phase [1] wurde optimiert und qualifizierte sich f&uuml;r die quantitative Bestimmung von H&auml;magglutinin (HA) im Grippe-Impfstoff-Vorbereitungen. Optimierung der gradient Elution Bedingungen f&uuml;hrte zu verbesserte Trennung von der HA1-Untereinheit von anderen Impfstoff-Bestandteile. Die Empfindlichkeit der Methode wurde stark erh&ouml;ht, mithilfe der systemeigenen Fluoreszenzdetektion, verglichen mit UV-Vis-Detektion etwa 10fach verbesserter anfallen. Dies erm&ouml;glichte die Beseitigung der Konzentration-Schritt in die urspr&uuml;ngliche Methode beschrieben und erlaubt die direkte Analyse von Impfstoff-Zubereitungen. Die Methode wurde f&uuml;r Linearit&auml;t, Range, Nachweisgrenze, Quantisierung und Pr&auml;zision qualifiziert. Insgesamt ergab linear &uuml;ber den Bereich von 2.5-100 &mu;g HA/mL f&uuml;r alle Subtypen gepr&uuml;ft werden. Dieser Bereich abgedeckt 50-150 % der Konzentration f&uuml;r einzelne St&auml;mme in saisonalen Influenza-Impfstoffe und die Pandemie H1N1-Impfstoff gefunden. Nachweisgrenze und Grenze der Quantisierung f&uuml;r jeden Subtyp wurden gefunden, um f&uuml;r die Methode vorgesehenen Zweck geeignet und im Vergleich gut zu Werten, die von den einzelnen radialen Immunodiffusion (SRID) gefunden. Die Wiederholbarkeit der Methode gab RSD-Werte unter 5 % f&uuml;r die Retentionszeit und Peak Gebiete. F&uuml;r fortgeschrittene Genauigkeit erwartungsgem&auml;&szlig; gr&ouml;&szlig;ere RSD-Werte f&uuml;r Peakfl&auml;che wurden aber wurden unter 10 % und als annehmbar erachtet. Die RP-HPLC-Ergebnisse waren im Vergleich zu Western-Blot-Analyse mit einen HA-universal-Antik&ouml;rper f&uuml;r eine Reihe von 15 monovalenten A / H1N1 Kalifornien Zubereitungen und zeigte gute Korrelation. Ebenso wurde die quantitative Natur der RP-HPLC-Methode im Zusammenhang mit dem SRID-Assay, der derzeit f&uuml;r die Bestimmung des HA in Massen Antigen und endg&uuml;ltige Impfstoff Zubereitungen verwendet bewertet. Also f&uuml;r eine Reihe von 23 monovalenten A/Brisbane/59/2007 H1N1-Klumpen, zwischen 12,7 und 15.9 &mu;g HA/mL von SRID, die RP-HPLC-Werte wurden festgestellt, dass in sehr guter &Uuml;bereinstimmung, zwischen 11.9 und 14,1 &mu;g HA/mL (n = 5) f&uuml;r 5 Bestimmungen an 5 verschiedenen Tagen durchgef&uuml;hrt. W&auml;hrend der 2009-10-H1N1-Influenza-Pandemie war die quantitative RP-HPLC-Methode neben mehrere andere Testmethoden f&uuml;r die Analyse der Pandemie H1N1-Impfstoff-Zubereitungen verwendet, die Massen-Antigen und endg&uuml;ltige Impfstoffe enthalten. Der HA-Inhalt von Impfstoffen bei 15 oder 30 &mu;g/mL formuliert wurde mittels RP-HPLC und SRID und Ergebnisse zeigten, dass die HA-Inhalte durch RP-HPLC korreliert gut mit, die bestimmt von SRID und Werten, die durch Westernblot bestimmt bestimmt. Die Ergebnisse mitgeteilt insgesamt weitere Beweise f&uuml;r die N&uuml;tzlichkeit von RP-HPLC zur Detektion und Quantifizierung von der HA-Inhalt, nachdem als Standard etabliert hat.

Optimierung und Qualifikation einer quantitativen Umkehrphasen-HPLC-Methode zur H&auml;magglutinin an Grippe Vorbereitungen und seine vergleichende Bewertung mit biochemischen Proben.

&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &alpha; (&alpha;) &#x7528;&#x6765;&#x6CBB;&#x7597;&#x6076;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x3001; &#x6162;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x6709;&#x964D;&#x4F4E;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7387;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; p450 &#x6C27;&#x5316;&#x7684;&#x9176;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x7814;&#x7A76;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86; &alpha; &#x6CBB;&#x7597;&#x5BF9; CYP3A4 &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8D1F;&#x8D23;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7684;&#x540E;&#x679C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76;&#x4E86; &alpha; &#x5BF9; CYP3A4 &#x50AC;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x53CA;&#x5728;&#x809D;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; &alpha; &#x6291;&#x5236; CYP3A4 &#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FC5;&#x901F;&#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282;&#x7684; CYP3A4&#xFF0C;&#x72EC;&#x7ACB; de novo &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x548C;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x8868;&#x8FBE;&#x8D28;&#x7C92;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x89E3;&#x5256;&#x6240;&#x9700;&#x7684; CYP3A4 &#x6291;&#x5236;&#xFF0C;&#x63ED;&#x793A;&#x89D2;&#x8272; Jak1 &#x548C; Stat1 &#x548C;&#x6D88;&#x9664;&#x53C2;&#x4E0E; p38 &#x4E1D;&#x88C2;&#x7D20;&#x6D3B;&#x5316;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x6FC0;&#x9176;&#x5206;&#x5B50;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x6CBB;&#x7597;&#x809D;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; &alpha; &#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x6216; Sp1 &#x548C; Sp3 &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; &alpha; &#x7684; CYP3A4 &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4ECE;&#x6291;&#x5236; Sp3 &#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E30;&#x5EA6; out-competing Sp1&#x3002;&#x5C31;&#x6211;&#x4EEC;&#x6240;&#x77E5;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x89C4;&#x5B9A; &alpha; &#x4E0B;-&#x4E86; CYP3A4 &#x8868;&#x8FBE;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A; &alpha; &#x6291;&#x5236; CYP3A4 &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x8C28;&#x614E;&#x5F53; &alpha; &#x836F;&#x4E0E; CYP3A4 &#x5E95;&#x7269;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x907F;&#x514D;&#x53D1;&#x751F;&#x4E0D;&#x5229;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; p450 &#x6C27;&#x5316; 3A4 &#x5728;&#x809D;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5BF9;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;-&alpha; &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Interferon Î± (IFNÎ±) is used to treat malignancies and chronic viral infections. It has been found to decrease the rate of drug metabolism by acting on cytochrome P450 enzymes, but no studies have investigated the consequences of IFNÎ± treatment on the CYP3A4 isoform, responsible for the metabolism of a majority of drugs. In this study, we have examined the effect of IFNÎ± on CYP3A4 catalytic activity and expression in human hepatoma cells. We found that IFNÎ± inhibits CYP3A4 activity and rapidly down-regulates the expression of CYP3A4, independent of de novo protein synthesis. Pharmacologic inhibitors and a dominant-negative mutant expression plasmid were used to dissect the molecular pathway required for CYP3A4 suppression, revealing roles for Jak1 and Stat1 and eliminating the involvement of the p38 mitogen-activated and extracellular regulated kinases. Treatment of hepatoma cells with IFNÎ± did not affect the nuclear localization or relative abundance of Sp1 and Sp3 transcription factors, suggesting that the suppression of CYP3A4 by IFNÎ± does not result from inhibitory Sp3 out-competing Sp1. To our knowledge, this is the first report that IFNÎ± down-regulates CYP3A4 expression largely through the JAK-STAT pathway. Since IFNÎ± suppresses CYP3A4 expression, caution is warranted when IFNÎ± is administered in combination with CYP3A4 substrates to avoid the occurrence of adverse drug interactions.

The effect of interferon-Î± on the expression of cytochrome P450 3A4 in human hepatoma cells.

L&#x26;#39;interf&#xE9;ron &#x3B1; (IFN) est utilis&#xE9; pour traiter les tumeurs malignes et des infections virales chroniques. Il a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; pour diminuer le taux de m&#xE9;tabolisme des m&#xE9;dicaments en agissant sur les enzymes du cytochrome P450, mais aucune &#xE9;tude n&#x26;#39;a &#xE9;tudi&#xE9; les cons&#xE9;quences d&#x26;#39;un traitement d&#x26;#39;IFNa sur l&#x26;#39;isoforme CYP3A4, responsable du m&#xE9;tabolisme de la majorit&#xE9; des m&#xE9;dicaments. Dans cette &#xE9;tude, nous avons examin&#xE9; l&#x26;#39;effet de l&#x26;#39;IFNa sur l&#x26;#39;activit&#xE9; du CYP3A4 catalytique et d&#x26;#39;expression dans les cellules d&#x26;#39;h&#xE9;patome humain. Nous avons constat&#xE9; que l&#x26;#39;IFNa inhibe l&#x26;#39;activit&#xE9; du CYP3A4 et rapidement r&#xE9;gule &#xE0; la baisse l&#x26;#39;expression du CYP3A4, ind&#xE9;pendante de la synth&#xE8;se prot&#xE9;ique de novo. Inhibiteurs pharmacologiques et une expression dominante-n&#xE9;gative mutant plasmidique ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour diss&#xE9;quer la voie mol&#xE9;culaire requise pour la r&#xE9;pression du CYP3A4, r&#xE9;v&#xE9;lant des r&#xF4;les pour Jak1 et Stat1 et d&#x26;#39;&#xE9;liminer la participation des p38 MAPK et extracellulaire kinases r&#xE9;glement&#xE9;s. Le traitement des cellules d&#x26;#39;h&#xE9;patome avec IFNa n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;incidence sur la localisation nucl&#xE9;aire ou de l&#x26;#39;abondance relative des facteurs de transcription Sp1 et Sp3, ce qui sugg&#xE8;re que la suppression du CYP3A4 par l&#x26;#39;IFNa ne r&#xE9;sulte pas d&#x26;#39;inhibiteurs Sp3 hors comp&#xE9;tition Sp1. &#xC0; notre connaissance, c&#x26;#39;est le premier rapport que l&#x26;#39;IFNa r&#xE9;gule &#xE0; la baisse du CYP3A4 expression en grande partie par la voie JAK-STAT. Depuis l&#x26;#39;IFNa supprime CYP3A4 expression, la prudence est recommand&#xE9;e lors de l&#x26;#39;IFNa est administr&#xE9; en association avec des substrats du CYP3A4 pour &#xE9;viter la survenue d&#x26;#39;interactions m&#xE9;dicamenteuses ind&#xE9;sirables.

L&#x26;#39;effet de l&#x26;#39;interf&#xE9;ron &#x3B1;-sur l&#x26;#39;expression du cytochrome P450 3A4 dans des cellules d&#x26;#39;h&#xE9;patome de l&#x26;#39;homme

Interferon &alpha; (IFN&alpha;) dient zur Behandlung von malignen Erkrankungen und chronische Virusinfektionen. Es, um die Rate des Metabolismus zu verringern durch Einwirkung auf Zellfarbstoff P450 Enzyme gefunden wurde, aber keine Studien haben die Folgen von IFN&alpha;-Behandlung auf die Isoform CYP3A4, verantwortlich f&uuml;r den Stoffwechsel der Mehrheit der Drogen untersucht. In dieser Studie haben wir die Wirkung der IFN&alpha; auf CYP3A4 katalytische Aktivit&auml;t und Expression in menschlichen berechnete Zellen gepr&uuml;ft. Wir fanden, dass IFN&alpha; CYP3A4-Aktivit&auml;t hemmt und schnell nach unten-den Ausdruck von CYP3A4, unabh&auml;ngig von de-Novo-Protein-Synthese reguliert. Pharmakologische Inhibitoren und eine dominante Negative mutant Ausdruck-Plasmid wurden verwendet, um die molekulare Pathway erforderlich zur Unterdr&uuml;ckung von CYP3A4, Rollen f&uuml;r Jak1 und Stat1 offenbart und die Einbeziehung der p38 Mitogen-aktivierte und extrazellul&auml;re geregelten Kinasen zu sezieren. Behandlung der berechnete Zellen mit IFN&alpha; hatte keine Auswirkungen auf die nukleare Lokalisierung oder relative H&auml;ufigkeit des Sp1 und Sp3 Transkriptionsfaktoren, die darauf hindeutet, dass die Unterdr&uuml;ckung von CYP3A4 durch IFN&alpha; nicht hemmenden Sp3 bedingt out-competing Sp1. Unseres Wissens ist dies der erste Bericht, dass IFN&alpha; nach unten-CYP3A4 Ausdruck weitgehend durch den JAK-STAT-Signalweg reguliert. Da IFN&alpha; CYP3A4 Ausdruck unterdr&uuml;ckt, ist Vorsicht geboten, wenn IFN&alpha; in Kombination mit CYP3A4-Substraten, das Auftreten von unerw&uuml;nschten Wechselwirkungen zu vermeiden verabreicht wird.

Die Wirkung von Interferon-&alpha; &uuml;ber die Expression des Cytochrom P450 3A4 in menschlichen berechnete Zellen.

Interferone &alpha; (IFN&alpha;) &egrave; usato per trattare i tumori maligni e infezioni virali croniche. &Egrave; stato trovato per ridurre il tasso di metabolismo del farmaco agendo sugli enzimi del citocromo P450, ma non gli studi hanno indagato le conseguenze del trattamento IFN&alpha; sull&#39;isoforma CYP3A4, responsabile del metabolismo della maggior parte dei farmaci. In questo studio, abbiamo esaminato l&#39;effetto di IFN&alpha; sull&#39;attivit&agrave; catalitica CYP3A4 ed espressione in cellule di epatoma umano. Abbiamo trovato che IFN&alpha; inibisce l&#39;attivit&agrave; di CYP3A4 e rapidamente gi&ugrave;-regola l&#39;espressione del CYP3A4, indipendente del de novo sintesi proteica. Farmacologici inibitori e un plasmide espressione mutante dominante-negativo sono stati utilizzati per sezionare il pathway molecolare richiesto per la soppressione del CYP3A4, rivelando i ruoli di Jak1 e Stat1 ed eliminando il coinvolgimento di p38 mitogene-attivato e chinasi regolate extracellulare. Trattamento di cellule di epatoma con IFN&alpha; non ha interessato la localizzazione nucleare o abbondanza relativa dei fattori di trascrizione Sp1 e Sp3, suggerendo che la soppressione del CYP3A4 di IFN&alpha; non derivano da Sp3 inibitorio out-competing Sp1. A nostra conoscenza, questo &egrave; il primo rapporto che IFN&alpha; gi&ugrave;-regola espressione CYP3A4 in gran parte attraverso la via JAK-STAT. Poich&eacute; IFN&alpha; sopprime CYP3A4 espressione, &egrave; sempre consigliata cautela quando IFN&alpha; &egrave; somministrato in combinazione con substrati di CYP3A4 per evitare il verificarsi di interazioni farmacologiche avverse.

L&#39;effetto dell&#39;interferone-&alpha; sull&#39;espressione del citocromo P450 3A4 in cellule di epatoma umano.

&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x3B1;&#xFF08;IFN&#x3B1;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x60AA;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x3001;&#x6162;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0;P450&#x9175;&#x7D20;&#x306B;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x85AC;&#x7269;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x898B;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x7269;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;CYP3A4&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;&#x4E0A;IFN&#x3B1;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x809D;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;CYP3A4&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;IFN&#x3B1;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;IFN&#x3B1;&#x306F;CYP3A4&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x6025;&#x901F;&#x306B;de novo&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;CYP3A4&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3068;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;JAK1&#x3068;STAT1&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;p38&#x30DE;&#x30A4;&#x30C8;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5236;&#x5FA1;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3057;&#x3001;CYP3A4&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; IFN&#x3B1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x809D;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;IFN&#x3B1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;CYP3A4&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x304C;&#x963B;&#x5BB3;Sp3&#x306E;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x7AF6;&#x5408;SP1&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x307E;&#x305F;&#x306F;SP1&#x3068;SP3&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x91CF;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x77E5;&#x308B;&#x9650;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;IFN&#x3B1;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;JAK-STAT&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;CYP3A4&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; IFN&#x3B1;&#x306F;CYP3A4&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;IFN&#x3B1;&#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x85AC;&#x7269;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x3092;&#x907F;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;CYP3A4&#x306E;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x6295;&#x4E0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6CE8;&#x610F;&#x304C;&#x4FDD;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D2;&#x30C8;&#x809D;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C1;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30E0;P450 3A4&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;-&#x3B1;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

&#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &alpha; (IFN&alpha;)&#xB294; &#xC545;&#xC131; &#xC885;&#xC591;&#xACFC; &#xB9CC;&#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; P450 &#xD6A8;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB300;&#xC0AC; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC544;&#xBB34; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC870;&#xC0AC; CYP3A4 isoform &#xB9C8;&#xC57D;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; IFN&alpha; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; CYP3A4 &#xCD09;&#xB9E4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04;&#xC740; &#xC140;&#xC5D0; &#xC2DD;&#xC5D0; IFN&alpha;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB97C; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF4;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; IFN&alpha; CYP3A4 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC544;&#xB798;&#xB85C; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xC870;&#xC808; CYP3A4, &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. CYP3A4 &#xC5B5;&#xC81C; Jak1 &#xBC0F; Stat1 &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xADDC;&#xC81C; kinases&#xC640; p38 &#xBB3C;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xACBD;&#xB85C; &#xD574; &#xBD80; pharmacologic &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC640; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2DD; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. IFN&alpha;&#xC740; &#xC140;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB294; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB610;&#xB294; IFN&alpha;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; CYP3A4 &#xC5B5;&#xC81C; &#xAE08;&#xC9C0; s p 3&#xC5D0;&#xC11C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; s p 1&#xC640; s p 3 &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xD48D;&#xC694;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; out-competing s p 1. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC9C0;&#xC2DD;, &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xB294; IFN&alpha; &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xADDC;&#xC81C; JAK &#xD569;&#xACC4; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC8FC;&#xB85C; CYP3A4 &#xC2DD;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; IFN&alpha; &#xC2DD; CYP3A4 &#xC5B5;&#xC81C;, IFN&alpha; &#xBD88;&#xB9AC; &#xD55C; &#xC57D;&#xBB3C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC744; &#xD53C;&#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; CYP3A4 &#xAE30;&#xD310;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC8FC;&#xC758; &#xBCF4;&#xC99D; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; P450 3A4 &#xC778;&#xAC04;&#xC740; &#xC140;&#xC5D0; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860;-&alpha;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;.

El interfer&#xF3;n &#x3B1; (IFNa) se utiliza para tratar tumores malignos y las infecciones virales cr&#xF3;nicas. Se ha encontrado para disminuir la tasa de metabolismo de los f&#xE1;rmacos al actuar sobre las enzimas del citocromo P450, pero ning&#xFA;n estudio ha investigado las consecuencias del tratamiento IFNa de la isoforma CYP3A4, responsable del metabolismo de la mayor&#xED;a de las drogas. En este estudio, hemos examinado el efecto de IFNa de la CYP3A4, la actividad catal&#xED;tica y la expresi&#xF3;n en c&#xE9;lulas de hepatoma humano. Se encontr&#xF3; que el IFNa inhibe la actividad de CYP3A4 y r&#xE1;pidamente abajo-regula la expresi&#xF3;n de la enzima CYP3A4, independiente de la s&#xED;ntesis de prote&#xED;nas de novo. Inhibidores farmacol&#xF3;gicos y un pl&#xE1;smido de expresi&#xF3;n dominante negativo mutante se utiliza para diseccionar el mecanismo molecular necesaria para la supresi&#xF3;n del CYP3A4, dejando al descubierto los papeles de Jak1 y STAT1 y la eliminaci&#xF3;n de la participaci&#xF3;n de las quinasas reguladas p38 activadas por mit&#xF3;genos y extracelular. El tratamiento de c&#xE9;lulas de hepatoma con IFNa no afecta a la localizaci&#xF3;n nuclear o la abundancia relativa de los factores Sp1 y Sp3 de transcripci&#xF3;n, lo que sugiere que la supresi&#xF3;n de la CYP3A4 por IFNa no resulta de la inhibici&#xF3;n SP3 fuera de la competencia SP1. Hasta donde sabemos, este es el primer informe que IFNa regula a la baja la expresi&#xF3;n de CYP3A4 en gran medida a trav&#xE9;s de la v&#xED;a JAK-STAT. Desde IFNa suprime la expresi&#xF3;n del CYP3A4, se recomienda precauci&#xF3;n cuando se IFNa se administra en combinaci&#xF3;n con sustratos del CYP3A4 para evitar la ocurrencia de interacciones farmacol&#xF3;gicas adversas.

Caroline Gravel

Centre for Vaccine Evaluation,
Biologics and Genetic Therapies Directorate,
HPFB,
Centre for Vaccine Evaluation, Biologics and Genetic Therapies Directorate, HPFB

Health Canada

Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

Caroline Gravel

Centre for Vaccine Evaluation,Biologics and Genetic Therapies Directorate,HPFB,Centre for Vaccine Evaluation, Biologics and Genetic Therapies Directorate, HPFB

Health Canada

Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

Centre for Vaccine Evaluation,
Biologics and Genetic Therapies Directorate,
HPFB,
Centre for Vaccine Evaluation, Biologics and Genetic Therapies Directorate, HPFB