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Robust Generation of Hepatocyte-like Cells from Human Embryonic Stem Cell Populations

Despite progress in modelling human drug toxicity, many compounds fail during clinical trials due to unpredicted side effects. The cost of clinical ...

University of Edinburgh

In the present study, it is shown that mice heterozygous for wt1 develop glomerular sclerosis and the nature and time course of events leading to the glomerular scarring are determined. Wt1-heterozygous (wt1het) mice and their wild-type littermates were closely monitored from birth and plasma levels of urea, creatinine, and albumin were compared with histological data and clinical features. One of the first indications of nephropathy in the wt1het mouse was the development of proteinuria, accompanied by progressive elevation of the plasma levels of urea and creatinine. Subsequently, the mice developed albuminuria, which correlated with thickening of the glomerular basement membrane and fusion of the podocyte foot processes. Glomerulosclerosis was a relatively late event, accompanied by severe albuminuria and loss of WT1, nephrin, CD2AP, and alpha-actinin-4.

The wt1-heterozygous mouse; a model to study the development of glomerular sclerosis.

Nel presente studio, &egrave; dimostrato che topi eterozigoti per wt1 sviluppano sclerosi glomerulare e il corso di natura e tempo di eventi che porta le cicatrici glomerulare sono determinati. Topi Wt1-eterozigoti (wt1het) e loro littermates wild-type sono stati attentamente controllati dalla nascita e livelli plasmatici di albumina, creatinina e urea sono stati confrontati con i dati istologici e caratteristiche cliniche. Una delle prime indicazioni della nefropatia nel topo wt1het fu lo sviluppo della proteinuria, accompagnato dalla progressiva elevazione dei livelli plasmatici di urea e creatinina. Successivamente, i topi svilupparono albuminuria, che correlato con ispessimento della membrana basale glomerulare e la fusione dei processi piede Podocita. Glomerulosclerosi &egrave; stata un evento relativamente tardo, accompagnato da albuminuria grave e perdita di WT1, Nefrina, CD2AP e alfa-actinina-4.

Il mouse wt1-eterozigote; un modello per studiare lo sviluppo della sclerosi glomerulare.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x7CF8;&#x7403;&#x4F53;&#x786C;&#x5316; wt1 &#x7528;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x7CF8;&#x7403;&#x4F53;&#x306E;&#x7622;&#x75D5;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x3068;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x304C;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Wt1 &#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53; (wt1het) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x540C;&#x8179;&#x4ED4;&#x8A95;&#x751F;&#x304B;&#x3089;&#x304C;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x76E3;&#x8996;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5C3F;&#x7D20;&#x3001;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x7684;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x7279;&#x5FB4;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Wt1het &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x814E;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5146;&#x5019;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x306F;&#x86CB;&#x767D;&#x5C3F;&#x3001;&#x5C3F;&#x7D20;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x8840;&#x6F3F;&#x4E2D;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x7684;&#x306A;&#x6607;&#x683C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x540C;&#x884C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x76F8;&#x95A2;&#x7CF8;&#x7403;&#x4F53;&#x57FA;&#x5E95;&#x819C;&#x306E;&#x80A5;&#x539A;&#x3068;&#x30DD;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x8DB3;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7CF8;&#x7403;&#x4F53;&#x786C;&#x5316;&#x75C7;&#x306F;&#x3001;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x5C3F;&#x3068; WT1 &#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;CD2AP&#x3001;&alpha;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;-4 &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x3001;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x9045;&#x304F;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Wt1 &#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;;&#x7CF8;&#x7403;&#x4F53;&#x786C;&#x5316;&#x75C7;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3002;

Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, il est montr&eacute; que les souris h&eacute;t&eacute;rozygotes pour wt1 d&eacute;veloppent scl&eacute;rose glom&eacute;rulaire et la nature et l&#39;&eacute;volution temporelle des &eacute;v&eacute;nements qui ont conduit &agrave; la formation de cicatrices glom&eacute;rulaire sont d&eacute;termin&eacute;s. Wt1 h&eacute;t&eacute;rozygotes (wt1het) souris et leur port&eacute;e de type sauvage ont &eacute;t&eacute; &eacute;troitement surveill&eacute;e d&egrave;s la naissance et les taux plasmatiques de l&#39;ur&eacute;e, de cr&eacute;atinine et de l&#39;albumine ont &eacute;t&eacute; compar&eacute;s avec les donn&eacute;es histologiques et cliniques caract&eacute;ristiques. Une des premi&egrave;res indications de la n&eacute;phropathie chez la souris wt1het &eacute;tait le d&eacute;veloppement de la prot&eacute;inurie, accompagn&eacute;e d&#39;une &eacute;l&eacute;vation progressive des niveaux plasmatiques d&#39;ur&eacute;e et de cr&eacute;atinine. Par la suite, les souris ont d&eacute;velopp&eacute; albuminurie, corr&eacute;l&eacute;es avec un &eacute;paississement de la membrane basale glom&eacute;rulaire et fusion des montants pied processus. Glom&eacute;ruloscl&eacute;rose est un &eacute;v&eacute;nement relativement tardif, accompagn&eacute; d&#39;albuminurie grave et perte de WT1, n&eacute;phrine, CD2AP et alpha-actinine-4.

La souris h&eacute;t&eacute;rozygote de wt1 ; un mod&egrave;le pour &eacute;tudier le d&eacute;veloppement de la scl&eacute;rose glom&eacute;rulaire.

Das WT1-heterozygoten Maus, ein Modell f&#xFC;r die Entwicklung von Glomerulosklerose studieren.

&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x8868;&#x660E;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x4E3A; wt1 &#x53D1;&#x5C55;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7403;&#x786C;&#x5316;&#x548C;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x5BFC;&#x81F4;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7403;&#x75A4;&#x75D5;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;&#x4ECE;&#x51FA;&#x751F;&#x5BC6;&#x5207;&#x76D1;&#x5BDF; Wt1 &#x663E;&#x6027; (wt1het) &#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x5176;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; littermates &#x548C;&#x5C3F;&#x7D20;&#x3001; &#x808C;&#x9150;&#x548C;&#x767D;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8840;&#x6D46;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0E;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x6570;&#x636E;&#x548C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x7279;&#x70B9;&#x4F5C;&#x4E86;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;Wt1het &#x9F20;&#x6807;&#x80BE;&#x75C5;&#x7684;&#x6700;&#x521D;&#x8FF9;&#x8C61;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x86CB;&#x767D;&#x5C3F;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x8840;&#x6D46;&#x5C3F;&#x7D20;&#x548C;&#x808C;&#x9150;&#x6C34;&#x5E73;&#x9010;&#x6B65;&#x63D0;&#x5347;&#x3002;&#x968F;&#x540E;&#xFF0C;&#x53D1;&#x8FBE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x86CB;&#x767D;&#x5C3F;&#xFF0C;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7403;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x8840;&#x7BA1;&#x57FA;&#x5E95;&#x819C;&#x589E;&#x539A;&#x548C;&#x8DB3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x811A;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x4E0E;&#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x3002;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7403;&#x786C;&#x5316;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8D77;&#x6B65;&#x8F83;&#x665A;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x4E25;&#x91CD;&#x86CB;&#x767D;&#x5C3F;&#x548C;&#x635F;&#x5931; WT1&#x3001; &#x7814;&#x7A76;&#x3001; CD2AP &#x548C;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5;-actinin-4&#x3002;

Wt1 &#x663E;&#x6027;&#x7684;&#x9F20;&#x6807; &#xFF1B;&#x8981;&#x7814;&#x7A76;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7403;&#x786C;&#x5316;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

&#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC950; wt1 heterozygous &#xC0AC; &#xACBD;&#xD654; &#xC99D; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xACFC; &#xC0AC; &#xD749;&#xD130;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC790;&#xC5F0;&#xACFC; &#xC2DC;&#xAC04; &#xCF54;&#xC2A4;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Wt1 heterozygous (wt1het) &#xC0DD;&#xC950;&#xC640; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; littermates &#xCD9C;&#xC0DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC694;&#xC18C;, creatinine, &#xBC0F; &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC640; &#xC784;&#xC0C1; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4;. Wt1het &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0; &#xC7A5;&#xBCD1;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC9D5;&#xD6C4; &#xC911; &#xD558;&#xB098; proteinuria, &#xC6B0; &#xB808; &#xC544; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC218;&#xC900; creatinine&#xC758; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC801;&#xC778; &#xACE0;&#xB3C4; &#xD568;&#xAED8; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xD6C4;, &#xC950; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xB1E8;&#xB97C; &#xC0AC; &#xC9C0;&#xD558;&#xC2E4; &#xB9C9;&#xC758; &#xB450;&#xAECD;&#xAC8C;&#xC640; &#xD4E8;&#xC804; podocyte &#xBC1C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00;. Glomerulosclerosis&#xB294; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2A6;&#xAC8C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xB3D9;&#xBC18; &#xD558;&#xB294; &#xC2EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xB1E8;&#xC640; WT1, nephrin, CD2AP, &#xBC0F; &#xC54C;&#xD30C;-actinin-4.

Wt1 heterozygous &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;; &#xC0AC; &#xACBD;&#xD654;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBAA8;&#xB378;.

En el presente estudio se muestra que ratones heterocigotos para wt1 desarrollan esclerosis glomerular y se determinan el curso de la naturaleza y el tiempo de acontecimientos que condujeron a la formaci&oacute;n de cicatrices glomerulares. Ratones WT1-heterozig&oacute;tico (wt1het) y sus hermanos de camada de tipo salvaje fueron severamente vigiladas desde el nacimiento y los niveles plasm&aacute;ticos de urea, creatinina y alb&uacute;mina se compararon con datos histol&oacute;gicos y caracter&iacute;sticas cl&iacute;nicas. Uno de los primeros indicios de la nefropat&iacute;a en el rat&oacute;n de wt1het fue el desarrollo de proteinuria, acompa&ntilde;ado por la progresiva elevaci&oacute;n de los niveles plasm&aacute;ticos de urea y creatinina. Los ratones desarrollaron posteriormente, albuminuria, que correlaciona con engrosamiento de la membrana basal glomerular y la fusi&oacute;n de los procesos de pie Podocito. Glomeruloesclerosis fue un evento relativamente tarde, acompa&ntilde;ado de albuminuria severa y p&eacute;rdida de WT1, nefrina, CD2AP y alfa-actinina-4.

El rat&oacute;n wt1-heterozig&oacute;tico; un modelo para estudiar el desarrollo de la esclerosis glomerular.

Eukaryotische Membranen ist eine konservierte Prozess unter engen zeitlichen und r&auml;umlichen Verordnung, in dem die Verschmelzung der Membranen durch Gr&uuml;ndung der tern&auml;ren SNARE Komplex angetrieben wird. Syntaxin 1a, eine wesentliche Komponente der Exocytic SNARE-Komplex in Neuronen und neuroendokrinen Zellen, wird direkt durch munc18-1, seinen Verwandten Sec1p/munc18 (SM)-Protein reguliert. SM-Proteine zeigen bemerkenswerte strukturelle Erhaltung w&auml;hrend Entwicklung, Angabe eines gemeinsamen Bindungsmechanismus und Funktion. SM-Proteine besitzt jedoch unterschiedliche Bindungsmechanismen und regulatorischen Effekte mit munc18-1, der gro&szlig;e Gehirn-Isoform, sowohl in seiner Bindung Besonderheit als auch in seinen Modus als atypische eingestuft. Wir zeigen nun, dass munc18-1 mit Syntaxin-1a durch zwei mechanistisch verschiedenen Betriebsmodi binding, sowohl in-vitro- und in lebenden Zellen, im Gegensatz zu aktuellen Modellen interagiert. Diese funktionell unterschiedlichen Interaktionen auftreten au&szlig;erdem an verschiedene zellul&auml;re Standorten. Diese Erkenntnisse bieten eine molekulare Erkl&auml;rung f&uuml;r das Vielfache r&auml;umlich unterschiedliche Rollen von munc18-1.

Funktional und r&auml;umlich unterschiedliche Arten der munc18-Syntaxin-1 Interaktion.

Traffico di membrana eucariotico &egrave; un processo conservato sotto stretto regolamento spaziale e temporale in cui la fusione delle membrane &egrave; guidata dalla formazione del SNARE ternario complessa. Sintaxina 1a, un componente di nucleo del exocytic SNARE complesso in neuroni e cellule neuroendocrine, &egrave; regolata direttamente da munc18-1, sua proteina affine di Sec1p/munc18 (SM). Le proteine SM mostrano notevole conservazione strutturale in evoluzione, che indica un meccanismo di associazione e la funzione comune. Tuttavia, le proteine SM possiedono meccanismi di associazione disparati ed effetti normativi con munc18-1, l&#39;isoforma cerebrali principali, classificata come atipica nella sua specificit&agrave; di legame e la sua modalit&agrave;. Mostriamo ora che munc18-1 interagisce con 1a Sintaxina attraverso due meccanicistico distinte modalit&agrave; di associazione, entrambi in vitro e in cellule viventi, in contrasto con i modelli attuali. Inoltre, queste interazioni funzionalmente divergenti si verificano in sedi cellulari distinti. Questi risultati forniscono una spiegazione molecolare per il multiplo, spazialmente distinti ruoli di munc18-1.

Funzionalmente e spazialmente distinte modalit&agrave; di interazione munc18-Sintaxina 1.

&#x771F;&#x6838;&#x819C;&#x8D29;&#x8FD0;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x819C;&#x7531;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x4E09;&#x5143;&#x5708;&#x5957;&#x5668;&#x5F62;&#x6210;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7D27;&#x65F6;&#x7A7A;&#x8C03;&#x63A7;&#x4E0B;&#x7684;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;Syntaxin 1a&#xFF0C;&#x7F51;&#x7F57;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;exocytic &#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x662F;&#x76F4;&#x63A5;&#x53D7; munc18-1&#xFF0C;&#x5176;&#x540C;&#x6E90;&#x7684; Sec1p/munc18 (SM) &#x86CB;&#x767D;&#x3002;SM &#x86CB;&#x767D;&#x663E;&#x793A;&#x6574;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x5316;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5171;&#x540C;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x663E;&#x8457;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B88;&#x6027;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;SM &#x86CB;&#x767D;&#x62E5;&#x6709;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x76D1;&#x7BA1;&#x6548;&#x679C;&#x4E0E; munc18-1&#x3001; &#x5927;&#x8111;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5217;&#x4E3A;&#x975E;&#x5178;&#x578B;&#x53CA;&#x5176;&#x7ED3;&#x5408;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x548C;&#x5B83;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x663E;&#x793A;&#x4EA4;&#x4E92; syntaxin 1a &#x901A;&#x8FC7;&#x4E24;&#x79CD;&#x673A;&#x68B0;&#x5316;&#x4E0D;&#x540C;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5F53;&#x524D;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#xFF0C;munc18-1&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D1;&#x73B0;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x591A;&#x4E2A;&#x5206;&#x5B50;&#x89E3;&#x91CA; munc18-1 &#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E0A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

Munc18-syntaxin 1 &#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0A;&#x548C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E0A;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;

Eukaryotic membrane trafficking is a conserved process under tight temporal and spatial regulation in which the fusion of membranes is driven by the formation of the ternary SNARE complex. Syntaxin 1a, a core component of the exocytic SNARE complex in neurons and neuroendocrine cells, is regulated directly by munc18-1, its cognate Sec1p/munc18 (SM) protein. SM proteins show remarkable structural conservation throughout evolution, indicating a common binding mechanism and function. However, SM proteins possess disparate binding mechanisms and regulatory effects with munc18-1, the major brain isoform, classed as atypical in both its binding specificity and its mode. We now show that munc18-1 interacts with syntaxin 1a through two mechanistically distinct modes of binding, both in vitro and in living cells, in contrast to current models. Furthermore, these functionally divergent interactions occur at distinct cellular locations. These findings provide a molecular explanation for the multiple, spatially distinct roles of munc18-1.

Functionally and spatially distinct modes of munc18-syntaxin 1 interaction.

Trafic membranaire eucaryote est un processus conserv&eacute; conform&eacute;mentaur&egrave;glement serr&eacute; temporelle et spatiale dans laquelle la fusion des membranes est entra&icirc;n&eacute;e par la formation de la pi&egrave;ge ternaire complexe. Syntaxine 1 a, un composant essentiel de la s&eacute;cr&eacute;tion complexe dans les neurones et les cellules neuroendocrines, SNARE est r&eacute;gl&eacute;e directement par munc18-1, sa prot&eacute;ine apparent&eacute;e de Sec1p/munc18 (SM). Prot&eacute;ines SM montrent une conservation structurale remarquable tout au long de l&#39;&eacute;volution, ce qui indique une fonction et le m&eacute;canisme de liaison commun. Cependant, les prot&eacute;ines SM poss&egrave;dent des m&eacute;canismes de liaison disparates et des effets r&eacute;gulateurs avec munc18-1, l&#39;isoforme majeur du cerveau, class&eacute; comme atypique dans sa sp&eacute;cificit&eacute; de liaison et son mode. Maintenant, nous montrons que munc18-1 interagit avec la syntaxine 1 a par le biais de deux modes distincts de fa&ccedil;on m&eacute;caniste de binding, deux &eacute;tudes in vitro et dans les cellules vivantes, contrairement aux mod&egrave;les actuels. En outre, ces interactions fonctionnellement divergentes se produisent &agrave; des endroits cellulaires distincts. Ces r&eacute;sultats fournissent une explication mol&eacute;culaire pour les multiples r&ocirc;les distincts dans l&#39;espace de munc18-1.

Modes distincts sur le plan fonctionnel et dans l&#39;espace d&#39;interaction munc18-syntaxine 1.

&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x8F38;&#x9001;&#x3001;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x819C;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x4E09;&#x5143;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x99C6;&#x52D5;&#x3067;&#x3059;&#x30BF;&#x30A4;&#x30C8;&#x306A;&#x6642;&#x7A7A;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; 1 a, exocytic &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2; &#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5; munc18-1 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x540C;&#x65CF;&#x306E; Sec1p/munc18 (SM) &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;SM &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x69CB;&#x9020;&#x4FDD;&#x5168;&#x5171;&#x901A;&#x7D50;&#x5408;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x9032;&#x5316;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;SM &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x898F;&#x5236;&#x52B9;&#x679C; munc18 1 &#x3068;&#x3001;&#x975E;&#x5B9A;&#x578B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D50;&#x5408;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8133;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x4ECA;&#x305D;&#x306E; munc18 1 &#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; 1 a 2 &#x3064;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x8AD6;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E; in vitro &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x3067;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3084;&#x308A;&#x53D6;&#x308A;&#x306F;&#x3001;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x767A;&#x6563;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x660E;&#x77AD;&#x306A;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684; munc18 1 &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x3082;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9; munc18 &#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; 1 &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x3002;

&#xC9C4; &#xD575; &#xB9C9; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC758; &#xC735;&#xD569;&#xC740; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xC0BC;&#xD56D; &#xC62C; &#xBB34;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAF49; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xBC0F; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xADDC;&#xC815; &#xC544;&#xB798; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xACFC;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;. Syntaxin 1a, &#xC62C; &#xBB34; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC0F; neuroendocrine &#xC140;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; exocytic&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; munc18-1, &#xB3D9;&#xC871;&#xC758; Sec1p/munc18 (SM) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB41C;&#xB2E4;. SM &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC9C4;&#xD654;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC0F; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xAD6C;&#xC870; &#xBCF4;&#xC874; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, SM &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC0F; munc18-1 &#xADDC;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xBC0F; &#xD574;&#xB2F9; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD754;&#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#39;&#xB85C; &#xBD84;&#xB958; &#xD558;&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xB450;&#xB1CC; isoform &#xBCF4;&#xC720;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; munc18-1 &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB450; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xD604;&#xC7AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xACFC; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB450; mechanistically &#xACE0;&#xC720; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; syntaxin 1a&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xAE30; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBD84;&#xC790; &#xC124;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; munc18-1&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Munc18-syntaxin 1 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBAA8;&#xB4DC;.

Tr&aacute;fico de membranas eucariotas es un proceso conservado bajo estrecha regulaci&oacute;n temporal y espacial en el que la fusi&oacute;n de membranas es conducida por la formaci&oacute;n de la trampa ternaria compleja. Sintaxina 1a, un componente esencial de la exoc&iacute;ticas SNARE complex en neuronas y c&eacute;lulas neuroendocrinas, est&aacute; regulada directamente por munc18-1, su cognado prote&iacute;na de Sec1p/munc18 (SM). Prote&iacute;nas SM muestran notable conservaci&oacute;n estructural a lo largo de la evoluci&oacute;n, que indica un mecanismo de enlace y funci&oacute;n com&uacute;n. Sin embargo, prote&iacute;nas SM poseen mecanismos vinculantes dispares y efectos reglamentarios con munc18-1, la isoforma cerebro principales, clasificado como anormal en su especificidad de Uni&oacute;n tanto a su modo. Mostramos ahora que munc18-1 interact&uacute;a con la sintaxina 1a a trav&eacute;s de dos modos mec&aacute;nico distintos de vinculantes, tanto in vitro y en c&eacute;lulas vivas, en contraste con los modelos actuales. Adem&aacute;s, estas interacciones funcionalmente divergentes se producen en distintas localizaciones celulares. Estos resultados proporcionan una explicaci&oacute;n molecular para el m&uacute;ltiplo, espacialmente diferentes roles de munc18-1.

Funcionalmente y espacialmente distintos modos de interacci&oacute;n munc18-sintaxina 1.

&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x4E8B;&#x6001;&#x53D1;&#x5C55;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#x73B0;&#x5728;&#x5141;&#x8BB8;&#x5FAE;&#x521B;&#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5982;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5F88;&#x5C11;&#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#x5B64;&#x7ACB;&#xFF0C;&#x800C;&#x5728;&#x4E8E;&#x5F62;&#x6210;&#x8702;&#x7A9D;&#x673A;&#x68B0;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x56FD;&#x5BB6;&#x4E00;&#x9053;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8FDB;&#x6B65;&#x90FD;&#x662F;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x5BB6;&#x7684;&#x6781;&#x5927;&#x5174;&#x8DA3;&#x3002;&#x76F4;&#x5230;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0D;&#x5F97;&#x4E0D;&#x786E;&#x5B9A;&#x4F7F;&#x7528;&#x751F;&#x5316;&#x9014;&#x5F84;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x751F;&#x5316;&#x9057;&#x4EA7;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x5BB6;&#x4E0E;&#x57FA;&#x7840;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x5185;&#x90E8;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x73B0;&#x5728;&#x8FD8;&#x4E0E;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x3002;&#x66F4;&#x591A;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x4E8B;&#x6001;&#x53D1;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5728; TCSPC &#x6210;&#x50CF;&#x73B0;&#x5728;&#x8FD8;&#x9A7E;&#x9A76;&#x8FC8;&#x8FDB;&#xFF0C;&#x80FD;&#x591F;&#x786E;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7387;&#x4E0E;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#xFF0C;&#x548C;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#x8BA9;&#x8C03;&#x67E5;&#x4EBA;&#x5458;&#x6765;&#x6267;&#x884C;&#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x751F;&#x5316;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E00;&#x8DEF;&#x8D70;&#x6765;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6709;&#x76CA;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x5BB6;&#x8003;&#x8651;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

&#x65F6;&#x95F4;&#x76F8;&#x5173;&#x5355;&#x5149;&#x5B50;&#x8BA1;&#x6570;&#x80F6;&#x7247;&#xFF1A; &#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x5BB6;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x6CE8;&#x610F;&#x4E8B;&#x9879;&#x3002;

Recent developments in cellular imaging now permit the minimally invasive study of protein interactions in living cells. These advances are of enormous interest to cell biologists, as proteins rarely act in isolation, but rather in concert with others in forming cellular machinery. Up until recently, all protein interactions had to be determined in vitro using biochemical approaches. This biochemical legacy has provided cell biologists with the basis to test defined protein-protein interactions not only inside cells, but now also with spatial resolution. More recent developments in TCSPC imaging are now also driving towards being able to determine protein interaction rates with similar spatial resolution, and together, these experimental advances allow investigators to perform biochemical experiments inside living cells. Here, we discuss some findings we have made along the way which may be useful for physiologists to consider.

Time-correlated single photon counting FLIM: some considerations for physiologists.

R&eacute;cents d&eacute;veloppements en imagerie cellulaire maintenant permettent l&#39;&eacute;tude minimalement invasive des interactions de prot&eacute;ine dans les cellules vivantes. Ces avances sont d&#39;un int&eacute;r&ecirc;t &eacute;norme pour les biologistes cellulaires, comme les prot&eacute;ines agissent rarement isol&eacute;ment, mais plut&ocirc;t en concert avec les autres en formant la machinerie cellulaire. Jusqu&#39;&agrave; tout r&eacute;cemment, toutes les interactions de prot&eacute;ine devaient &ecirc;tre tranch&eacute;e in vitro en utilisant des approches biochimiques. Cet h&eacute;ritage biochimique a fourni des biologistes cellulaires avec la base pour tester les interactions entre prot&eacute;ines d&eacute;termin&eacute;es non seulement &agrave; l&#39;int&eacute;rieur des cellules, mais maintenant aussi avec une r&eacute;solution spatiale. Plus r&eacute;cents d&eacute;veloppements en imagerie TCSPC sont maintenant &eacute;galement conduite pour &ecirc;tre en mesure de d&eacute;terminer le taux d&#39;interaction de prot&eacute;ines avec une r&eacute;solution spatiale semblable, et ensemble, ces avanc&eacute;es exp&eacute;rimentales aux chercheurs de r&eacute;aliser des exp&eacute;riences biochimiques &agrave; l&#39;int&eacute;rieur de cellules vivantes. Ici, nous discutons de certaines constatations que nous avons fait le long du chemin qui peut &ecirc;tre utile pour les physiologistes &agrave; envisager.

Monophotonique corr&eacute;l&eacute;e temps compter FLIM : quelques consid&eacute;rations pour les physiologistes.

J&uuml;ngste Entwicklungen in zellul&auml;ren imaging jetzt erlauben die minimal-invasive Untersuchung von Protein-Interaktionen in lebenden Zellen. Diese Fortschritte sind enorm interessant f&uuml;r Zelle Biologen, wie Proteine selten isoliert, sondern im Konzert mit anderen bei der Bildung der zellul&auml;ren Maschinerie handeln. Bis vor kurzem mussten alle Protein-Interaktionen in-vitro mit biochemische Methoden bestimmt werden. Dieses biochemische Erbe hat Zelle Biologen die Basis um definierte Proteinprotein Interaktionen nicht nur innerhalb der Zellen, sondern jetzt auch mit r&auml;umlicher Aufl&ouml;sung Testen zur Verf&uuml;gung gestellt. Neuere Entwicklungen in der Bildgebung TCSPC treiben nun auch in Richtung Protein Interaktion Preise mit &auml;hnlicher r&auml;umlicher Aufl&ouml;sung bestimmen k&ouml;nnen und gemeinsam diese experimentelle Fortschritte erm&ouml;glichen Ermittler in lebenden Zellen biochemische Experimente durchf&uuml;hren. Hier diskutieren wir einige Erkenntnisse, die wir auf dem Weg gemacht haben, die was hilfreich f&uuml;r Physiologen zu ber&uuml;cksichtigen sein kann.

Korrelierte Zeit single-Photon counting FLIM: einige &Uuml;berlegungen zum Physiologen.

Recenti sviluppi in imaging cellulare ora permettono lo studio minimamente invasivo delle interazioni della proteina in cellule viventi. Questi progressi sono di enorme interesse per i biologi delle cellule, come proteine raramente agiscono isolatamente, ma piuttosto in concerto con gli altri a formare macchinario cellulare. Fino a poco tempo fa, tutte le interazioni della proteina &egrave; stata determinata in vitro utilizzando approcci biochimici. Questa eredit&agrave; biochimica ha fornito i biologi delle cellule con la base per testare le interazioni proteina-proteina definita non solo all&#39;interno delle cellule, ma ora anche con risoluzione spaziale. Gli sviluppi pi&ugrave; recenti nell&#39;imaging TCSPC ora sono anche guidando verso l&#39;essere in grado di determinare i tassi di interazione della proteina con risoluzione spaziale simile, e insieme, questi progressi sperimentali consentono gli investigatori effettuare esperimenti biochimici all&#39;interno delle cellule viventi. Qui, discuteremo alcuni risultati che abbiamo fatto lungo la strada che pu&ograve; essere utile per fisiologi di prendere in considerazione.

Correlati nel tempo singolo fotone conteggio FLIM: alcune considerazioni per fisiologi.

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&#x6642;&#x9593;&#x76F8;&#x95A2;&#x5358;&#x4E00;&#x5149;&#x5B50;&#x8A08;&#x6570; FLIM: &#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x8005;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x8003;&#x616E;&#x4E8B;&#x9805;&#x3002;

&#xC774;&#xC81C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xADFC; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C; &#xCE68; &#xC2B5; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9C4;&#xBCF4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC70;&#xC758; &#xACE0;&#xB9BD;, &#xC544;&#xB2CC; &#xC131;&#xD615; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xAE30;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC790;&#xC640; &#xCF58;&#xC11C;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD589;&#xB3D9;&#xC73C;&#xB85C;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC5D0; &#xC5C4;&#xCCAD;&#xB09C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC678; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC0DD; &#xD654; &#xD559;&#xC801; &#xC720;&#xC0B0; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xACF5;&#xAC04; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;&#xC640; &#xC9C0;&#xAE08;&#xC740; &#xC140; &#xC548;&#xC5D0; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xC140; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. TCSPC &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC9C0;&#xAE08; &#xB610;&#xD55C; &#xC6B4;&#xC804;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACF5;&#xAC04; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xD655;&#xC778;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC778; &#xC9C4;&#xBCF4; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xB0B4; &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD568;&#xAED8;, &#xCD5C;&#xADFC;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xACE0;&#xB824; &#xD558;&#xB294; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAE38;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; &#xB9CC;&#xB4E0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300;&#xD574;.

&#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAD11;&#xC790; FLIM &#xACC4;&#xC0B0;: &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xACE0;&#xB824; &#xC0AC;&#xD56D;.

Novedades en im&aacute;genes celulares ahora permiten el estudio m&iacute;nimamente invasivo de las interacciones de la prote&iacute;na en las c&eacute;lulas vivas. Estos avances son de gran inter&eacute;s para los bi&oacute;logos celulares, como prote&iacute;nas raramente act&uacute;an aisladamente, sino en concierto con otros en la formaci&oacute;n de la maquinaria celular. Hasta hace poco, todas las interacciones de la prote&iacute;na que se determin&oacute; in vitro utilizando m&eacute;todos bioqu&iacute;micos. Este legado bioqu&iacute;mico ha proporcionado los bi&oacute;logos celulares con la base para probar las interacciones prote&iacute;na-prote&iacute;na definida no s&oacute;lo dentro de las c&eacute;lulas, pero ahora tambi&eacute;n con resoluci&oacute;n espacial. Acontecimientos m&aacute;s recientes en proyecci&oacute;n de imagen de TCSPC ahora est&aacute;n conduciendo tambi&eacute;n para ser capaces de determinar las tasas de interacci&oacute;n de la prote&iacute;na con resoluci&oacute;n espacial similar, y juntos, estos avances experimentales permiten investigadores realizar experimentos bioqu&iacute;micos dentro de las c&eacute;lulas vivas. Aqu&iacute; discutimos algunos resultados que hemos hecho a lo largo de la manera que puede ser &uacute;til para los fisi&oacute;logos a considerar.

Fotones individuales correlacionados tiempo contando FLIM: algunas consideraciones para los fisi&oacute;logos.

&#x5728;&#x65F6;&#x95F4;&#x4E0A;&#x548C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x8D29;&#x5356;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x819C;&#x5FC5;&#x987B;&#x4E25;&#x683C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x4E09;&#x5143;&#x5708;&#x5957;&#x5668;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5F62;&#x6210; syntaxin1a&#xFF0C;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143; 25 &#x548C;&#x978B;&#x9762;&#xFF0C;&#x662F;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x9AD8;&#x6548;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x5DF2;&#x77E5;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7F51;&#x7F57;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x6DF7;&#x6742;&#x5728;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x975E;&#x540C;&#x6E90;&#x5708;&#x5957;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8981;&#x6C42;&#x4EA4;&#x901A;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7F51;&#x7F57;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x901A;&#x8FC7;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x548C;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x907F;&#x514D;&#x5F02;&#x4F4D;&#x7F51;&#x7F57;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; syntaxin1a &#x8D29;&#x5356;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#xFF0C;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7A97;&#x4F53;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x5173;&#x95ED;&#x7A97;&#x4F53;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4E0E; munc18-1&#x3002;&#x5982;&#x679C; syntaxin &#x5141;&#x8BB8;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143; 25 &#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5931;&#x8D25;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#xFF0C;&#x6210;&#x4E3A;&#x56F0;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x9694;&#x95F4;&#x7684;&#x901A;&#x8BAF;&#x91CF;&#x3002;Munc18-1-syntaxin &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5FC5;&#x987B;&#x5F62;&#x6210;&#x4E4B;&#x524D; syntaxin &#x5728;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#xFF0C;&#x9632;&#x6B62;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7F51;&#x7F57;&#x914D;&#x5408;&#x90A3;&#x91CC;&#x9047;&#x5230;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143; 25&#x3002;&#x540E;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7F51;&#x7F57;&#x96C6;&#x7FA4;&#x7684;&#x9759;&#x606F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x4EA7;&#x751F;&#x63A2;&#x6D4B;&#x97F3;&#x54C1;&#x4E4B;&#x95F4; t &#x7F51;&#x7F57;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x4E2D;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x8D29;&#x8FD0; syntaxin&#xFF0C;munc18-1 &#x5267;&#x672C;&#x7A81;&#x51FA;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Munc18-1 &#x53EF;&#x9632;&#x6B62;&#x5F02;&#x4F4D;&#x7F51;&#x7F57;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

Membrane trafficking in eukaryotic cells must be strictly regulated both temporally and spatially. The assembly at the plasma membrane of the ternary SNARE complex, formed between syntaxin1a, SNAP-25 and VAMP, is essential for efficient exocytotic membrane fusion. These exocytotic SNAREs are known to be highly promiscuous in their interactions with other non-cognate SNAREs. It is therefore an important cellular requirement to traffic exocytotic SNARE proteins through the endoplasmic reticulum and Golgi complex while avoiding ectopic interactions between SNARE proteins. Here, we show that syntaxin1a traffics in an inactive form to the plasma membrane, requiring a closed-form interaction, but not N-terminal binding, with munc18-1. If syntaxin is permitted to interact with SNAP-25, both proteins fail to traffic to the plasma membrane, becoming trapped in intracellular compartments. The munc18-1-syntaxin interactions must form before syntaxin encounters SNAP-25 in the Golgi complex, preventing the formation of intracellular exocytotic SNARE complexes there. Upon delivery to the plasma membrane, most SNARE clusters in resting cells do not produce detectable FRET between t-SNARE proteins. These observations highlight the crucial role that munc18-1 plays in trafficking syntaxin through the secretory pathway.

Munc18-1 prevents the formation of ectopic SNARE complexes in living cells.

Membrane traite des cellules eucaryotes doit &ecirc;tre strictement r&eacute;glement&eacute; tant temporellement et spatialement. L&#39;Assembl&eacute;e &agrave; la membrane plasmique de la pi&egrave;ge ternaire complexe, form&eacute; entre syntaxin1a, SNAP-25 et VAMP, est essentiel pour la fusion membranaire exocytotique efficace. Ces Futs exocytotique sont connus pour &ecirc;tre tr&egrave;s promiscuit&eacute; dans leurs interactions avec les autres pi&egrave;ges non apparent&eacute;. C&#39;est donc une exigence cellulaire importante aux prot&eacute;ines SNARE exocytotique de trafic &agrave; travers le r&eacute;ticulum endoplasmique et l&#39;appareil de Golgi, tout en &eacute;vitant les interactions entre prot&eacute;ines SNARE ectopiques. Ici, nous montrons que syntaxin1a trafics sous une forme inactive &agrave; la membrane plasmique, n&eacute;cessitant une interaction sous forme finie, mais ne pas la liaison de N-terminal, avec munc18-1. Si la syntaxine est autoris&eacute; &agrave; interagir avec SNAP-25, les deux prot&eacute;ines ne parviennent pas au trafic vers la membrane plasmique, devenant pi&eacute;g&eacute; dans les compartiments intracellulaires. Les interactions munc18-1-syntaxine doivent former avant syntaxine rencontre SNAP-25 dans le complexe de Golgi, emp&ecirc;chant la formation d&#39;intracellulaires complexes SNARE exocytotique l&agrave;. Lors de la livraison &agrave; la membrane plasmique, la plupart SNARE grappes dans les cellules au repos ne produisent pas de frette d&eacute;tectable entre prot&eacute;ines SNARE-t. Ces observations mettent en &eacute;vidence le r&ocirc;le crucial que joue munc18-1 dans la syntaxine trafic par le biais de la voie de s&eacute;cr&eacute;tion.

Munc18-1 emp&ecirc;che la formation de complexes SNARE ectopiques dans les cellules vivantes.

Membran Menschenhandel in eukaryotischen Zellen muss sowohl zeitlich als auch r&auml;umlich streng geregelt. Der Versammlung in der Plasmamembran von der tern&auml;ren SNARE-Komplex, gebildet zwischen syntaxin1a, SNAP-25 und VAMP, ist wesentlich f&uuml;r die effiziente exocytotic Membrane Fusion. Diese exocytotic SNAREs sind bekannterma&szlig;en sehr vermischten in ihren Interaktionen mit anderen nicht-Cognate SNAREs. Es ist daher eine wichtige zellul&auml;re Voraussetzung zum Verkehr exocytotic SNARE-Proteine durch die Endoplasmatisches Reticulum und Golgi Komplex ektopische Interaktionen zwischen SNARE-Proteine zu vermeiden. Hier zeigen wir, dass syntaxin1a Verkehre in einer inaktiven Form an die Plasmamembran erfordern eine geschlossener Form-Interaktion, aber nicht N-terminale Bindung mit munc18-1. Wenn Syntaxin Interaktion mit SNAP-25 zul&auml;ssig ist, nicht beide Proteine Datenverkehr an der Plasmamembran, immer gefangen in intrazellul&auml;ren Depots. Die munc18-1-Syntaxin-Interaktionen m&uuml;ssen bilden, bevor Syntaxin SNAP-25 in der Golgi-Komplex, verhindert die Bildung von intrazellul&auml;ren exocytotic SNARE-komplexe dort trifft. Mit der Lieferung an die Plasmamembran produzieren die meisten SNARE-Cluster in Ruhestellung Zellen nicht nachweisbar FRET zwischen t-SNARE-Proteine. Diese Beobachtungen unterstreichen der entscheidenden Rolle im Menschenhandel Syntaxin durch die sekretorischen Pathway, munc18-1 spielt.

Munc18-1 verhindert die Bildung von ektopische SNARE-komplexe in lebenden Zellen.

Membrana traffico nelle cellule eucariotiche dovr&agrave; essere rigorosamente disciplinata sia temporalmente e spazialmente. L&#39;Assemblea alla membrana del plasma del ternario SNARE complessa, formata tra syntaxin1a, SNAP-25 e VAMP, &egrave; essenziale per la fusione di membrana questo efficiente. Queste insidie questo sono noti per essere altamente promiscua nelle loro interazioni con altre insidie non affine. &Egrave; quindi un requisito importante cellulare alle proteine del rullante questo traffico attraverso il reticolo endoplasmatico e il complesso di Golgi, evitando ectopiche interazioni tra proteine SNARE. Qui, ci mostra che syntaxin1a traffici in una forma inattiva alla membrana del plasma, che richiedono un&#39;interazione di forma chiusa, ma non vincolante del N-terminale, con munc18-1. Se Sintaxina &egrave; consentito di interagire con SNAP-25, entrambe le proteine non riescono a traffico verso la membrana plasmatica, diventando intrappolato in compartimenti intracellulari. Le interazioni munc18-1-Sintaxina devono formare prima Sintaxina incontri SNAP-25 nel complesso di Golgi, impedendo la formazione di complessi di rullante questo intracellulare ci. Al momento della consegna alla membrana plasmatica, la maggior parte dei cluster rullante in riposo le cellule non producono FRET rilevabile tra le proteine t-SNARE. Queste osservazioni sottolineano il ruolo cruciale che gioca munc18-1 nel traffico Sintaxina attraverso la via secretiva.

Munc18-1 impedisce la formazione di complessi SNARE ectopiche in cellule viventi.

&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306F;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x3001;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x4E09;&#x5143;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306E;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x9593;&#x306B;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F; syntaxin1a&#x3001;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7; 25 &#x3068;&#x30F4;&#x30A1;&#x30F3;&#x30D7;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;, &#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x4ED6; &#x25CF; &#x540C;&#x7CFB;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3067;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x5DEE;&#x5225;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;SNARE &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9593;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x8981;&#x4EF6;&#x306B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5206;&#x6CCC; SNARE &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x3068;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F; syntaxin1a &#x306E;&#x4F1D;&#x9001;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5F62;&#x3067;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x793A;&#x9589;&#x3058;&#x305F;&#x5F62;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;N &#x672B;&#x7AEF;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; munc18 1 &#x3067;&#x3002;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; &#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;-25 &#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x9589;&#x3058;&#x8FBC;&#x3081;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x3078;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; &#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7; 25 &#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306E;&#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B; munc18 1 &#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x3078;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x6642;&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2; &#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x9759;&#x6B62;&#x671F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30D5;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8; t SNARE &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x9593;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x305D;&#x308C; munc18 1 &#x6F14;&#x5287;&#x306E;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306E;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Munc18 1 &#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x9632;&#x304E;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; temporally&#xACFC; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; &#xADDC;&#xC81C; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;, &#xC0BC;&#xD56D; &#xC62C; &#xBB34;&#xC758; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC774; &#xD615;&#xC131; syntaxin1a, &#xC2A4;&#xB0C5;-25&#xC640; &#xBC40;&#xD30C;&#xC774;&#xC5B4;, &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; exocytotic &#xB9C9; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; exocytotic SNAREs &#xB9E4;&#xC6B0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xB2E4;&#xB978; &#xBE44; &#xB3D9;&#xACC4;&#xC5B4; Snares&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB34;&#xCC28;&#xBCC4; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC62C; &#xBB34; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC04;&#xC758; &#xC18C;&#xC131; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD53C;&#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; Golgi &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D; exocytotic &#xC62C; &#xBB34; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC694;&#xAD6C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC790;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xADF8; syntaxin1a &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC744; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; traffics &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0; &#xB2EB;&#xD78C; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; munc18-1 N &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;. Syntaxin &#xC2A4;&#xB0C5;-25 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0; &#xAC07;&#xD600; &#xB418; &#xACE0; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B8;&#xB798;&#xD53D;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0;. Munc18-1-syntaxin &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; syntaxin &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; exocytotic &#xC62C; &#xBB34; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xAC70;&#xAE30;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; Golgi &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2A4;&#xB0C5;-25 &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC804;&#xC5D0; &#xD615;&#xC131; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC744; &#xBC30;&#xB2EC; &#xC2DC; &#xD734;&#xC2DD; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC62C; &#xBB34; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; t SNARE &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAC10;&#xC9C0; &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; &#xBD84; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4; syntaxin&#xC5D0;&#xC11C; munc18-1 &#xC5F0;&#xADF9; &#xADF8; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;.

Munc18-1 &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC131; &#xBB34; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Membrana trata de las c&eacute;lulas eucariotas debe ser estrictamente regulada tanto temporal como espacial. La Asamblea en la membrana plasm&aacute;tica de la trampa ternaria compleja, formado entre syntaxin1a, SNAP-25 y VAMP, es esencial para la fusi&oacute;n de membrana exocit&oacute;tico eficiente. Estas trampas exocit&oacute;ticas son conocidos por ser muy promiscua en sus interacciones con otras trampas no cognado. Por lo tanto es un requisito importante de celular a las prote&iacute;nas SNARE exocit&oacute;ticas tr&aacute;fico a trav&eacute;s del ret&iacute;culo endopl&aacute;smico y aparato de Golgi evitando ect&oacute;picas interacciones entre prote&iacute;nas SNARE. A continuaci&oacute;n, os mostramos eso syntaxin1a trafique en una forma inactiva a la membrana plasm&aacute;tica, que requieren una interacci&oacute;n de forma cerrada, pero no vinculante del N-terminal, con munc18-1. Si sintaxina permite interactuar con SNAP-25, ambas prote&iacute;nas incapaces de tr&aacute;fico a la membrana plasm&aacute;tica, quede atrapada en los compartimientos intracelulares. Las interacciones munc18-1-sintaxina deben formar antes sintaxina SNAP-25 encuentra en el complejo de Golgi, previniendo la formaci&oacute;n de intracelulares complejos SNARE exocit&oacute;ticas all&iacute;. En la entrega a la membrana plasm&aacute;tica, la mayor&iacute;a grupos de trampa en las c&eacute;lulas de reclinaci&oacute;n no producen traste perceptible entre prote&iacute;nas t-SNARE. Estas observaciones destacan el papel crucial juega munc18-1 en sintaxina tr&aacute;fico a trav&eacute;s de la v&iacute;a secretora.

Munc18-1 previene la formaci&oacute;n de complejos de trampa ect&oacute;picos en c&eacute;lulas vivas.

&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x7684;&#x51FA;&#x73B0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E86;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x5728;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x7406;&#x89E3;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x548C;&#x7406;&#x8BBA;&#x4E0A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5927;&#x91CF;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6F5C;&#x5728;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x8FD9;&#x6837;&#x7684;&#x8D44;&#x6E90;&#x5DF2;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x4E86;&#x89E3;&#x3001; &#x5EFA;&#x6A21;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75BE;&#x75C5;&#x548C;&#x836F;&#x7269;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x4EE3;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x5927;&#x91CF;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7597;&#x6CD5;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#xFF0C;&#x809D;&#x79FB;&#x690D;&#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x6709;&#x6548;&#x6CBB;&#x7597;&#x7EC8;&#x672B;&#x671F;&#x809D;&#x75C5;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x6B64;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x8FDB;&#x884C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4F8B;&#x884C;&#x7684;&#x809D;&#x810F;&#x79FB;&#x690D;&#x5668;&#x5B98;&#x6350;&#x52A9;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x53D7;&#x5230;&#x4E25;&#x91CD;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x5176;&#x7ED3;&#x679C;&#x662F;&#xFF0C;&#x96C6;&#x4E2D;&#x6CE8;&#x610F;&#x4EE5;&#x53E6;&#x7C7B;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4ECE;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x8BBE;&#x5907;&#x5230;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x6062;&#x590D;&#x809D;&#x810F;&#x4F53;&#x79EF;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x6B21;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x7740;&#x91CD;&#x4ECE;&#x4E0D;&#x540C;&#x5E72;/&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x53CA;&#x5176;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x4E2D;&#x7684;&#x6548;&#x7528;&#x4EE5;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x3002;

&#x8FDB;&#x5C55;&#x548C;&#x672A;&#x6765;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#xFF0C;&#x5728;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x809D;&#x6280;&#x672F;&#x3002;

The emergence of regenerative medicine has led to significant advances in the identification and understanding of human stem cells and adult progenitor cells. Both cell populations exhibit plasticity and theoretically offer a potential source of somatic cells in large numbers. Such a resource has an important role to play in the understanding of human development, in modeling human disease and drug toxicity, and in the generation of somatic cells in large numbers for cell-based therapies. Presently, liver transplantation is the only effective treatment for end-stage liver disease. Although this procedure can be carried out with high levels of success, the routine transplant of livers is severely limited by organ donor availability. As a result, attention has focused on the ability to restore liver mass and function by alternative approaches ranging from the bioartificial device to transplantation of human hepatocytes. In this review we will focus on the generation of human hepatic endoderm from different stem/progenitor cell populations with a view to its utility in regenerative medicine.

Progress and future challenges in stem cell-derived liver technologies.

L&#x26;#39;&#xE9;mergence de la m&#xE9;decine r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rative a permis des avanc&#xE9;es significatives dans l&#x26;#39;identification et la compr&#xE9;hension des cellules souches humaines et des cellules prog&#xE9;nitrices adultes. Les deux populations de cellules preuve de plasticit&#xE9; et th&#xE9;oriquement offrir une source potentielle de cellules somatiques dans un grand nombre. Une telle ressource a un r&#xF4;le important &#xE0; jouer dans la compr&#xE9;hension du d&#xE9;veloppement humain, dans la mod&#xE9;lisation des maladies humaines et la toxicit&#xE9; des m&#xE9;dicaments, et dans la g&#xE9;n&#xE9;ration de cellules somatiques en grand nombre pour des th&#xE9;rapies cellulaires. Actuellement, la transplantation h&#xE9;patique est le seul traitement efficace de la maladie h&#xE9;patique au stade terminal. Bien que cette proc&#xE9;dure peut &#xEA;tre effectu&#xE9;e avec des niveaux &#xE9;lev&#xE9;s de succ&#xE8;s, la greffe de foie de routine est s&#xE9;v&#xE8;rement limit&#xE9;e par la disponibilit&#xE9; des donneurs d&#x26;#39;organes. En cons&#xE9;quence, l&#x26;#39;attention s&#x26;#39;est concentr&#xE9;e sur la capacit&#xE9; de restaurer la masse du foie et de la fonction par des approches alternatives allant de l&#x26;#39;appareil bioartificiel &#xE0; la transplantation d&#x26;#39;h&#xE9;patocytes humains. Dans cette revue, nous allons nous concentrer sur la g&#xE9;n&#xE9;ration de l&#x26;#39;endoderme h&#xE9;patique humain &#xE0; partir de diff&#xE9;rentes populations de cellules souches / prog&#xE9;nitrices en vue de son utilit&#xE9; en m&#xE9;decine r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rative.

Progr&#xE8;s et enjeux de l&#x26;#39;avenir dans les technologies de souches h&#xE9;patiques d&#xE9;riv&#xE9;s de cellules

Die Entstehung der regenerativen Medizin f&uuml;hrte zu bedeutende Fortschritte bei der Identifizierung und Verst&auml;ndnis der menschlichen Stammzellen und Vorl&auml;uferzellen erwachsen. Beide Zelle Bev&ouml;lkerungen ausstellen Plastizit&auml;t und theoretisch bieten eine potentielle Quelle von somatischen Zellen in gro&szlig;er Zahl. Solche Ressource hat eine wichtige Rolle im Verst&auml;ndnis der menschlichen Entwicklung, bei der Modellierung menschlicher Erkrankungen und Drogen Toxizit&auml;t und der Generation der somatischen Zellen in gro&szlig;er Zahl f&uuml;r zellbasierte Therapien zu spielen. Gegenw&auml;rtig ist eine Lebertransplantation die einzige wirksame Behandlung f&uuml;r Endstadium Lebererkrankung. Obwohl dieses Verfahren mit hohem Erfolg durchgef&uuml;hrt werden kann, ist die Routine Transplantation der Leber stark durch Spender Organverf&uuml;gbarkeit begrenzt. Infolgedessen konzentriert sich die Aufmerksamkeit auf die F&auml;higkeit zur Wiederherstellung von Leber Masse und Funktion durch alternative Ans&auml;tze, die Transplantation von menschlichen Hepatozyten von Bioartificial Ger&auml;t bis. In diesem Bericht konzentrieren wir uns auf die Erzeugung von menschlichen Leber Entoderm aus verschiedenen Vorbau/Stammvater Zelle Bev&ouml;lkerungen im Hinblick auf ihren Nutzen in der regenerativen Medizin.

Fortschritte und Herausforderungen der Zukunft in Stammzellen Cell-derived Leber Technologien.

L&#39;emergere della medicina rigenerativa ha portato a significativi progressi nella identificazione e comprensione delle cellule staminali e cellule progenitrici adulte. Entrambe le popolazioni di cellule esibiscono plasticit&agrave; e teoricamente offrono una fonte potenziale di cellule somatiche in grandi numeri. Una risorsa di questo tipo ha un ruolo importante nella comprensione dello sviluppo umano, nella modellazione di malattia umana e la tossicit&agrave; del farmaco e nella generazione delle cellule somatiche in grandi numeri per le terapie cell-based. Attualmente, il trapianto di fegato &egrave; il trattamento efficace solo per estremit&agrave;-fase malattia del fegato. Anche se questa procedura pu&ograve; essere effettuata con elevati livelli di successo, il trapianto di routine dei fegati &egrave; gravemente limitato dalla disponibilit&agrave; di donatori di organi. Come risultato, attenzione &egrave; focalizzata sulla capacit&agrave; di ripristinare la massa epatica e funzione di approcci alternativi che vanno dal dispositivo infraepatica per trapianto di epatociti umani. In questa recensione ci concentreremo sulla generazione di endoderma epatico umano da popolazioni di cellule staminali/progenitrici differenti al fine di sua utilit&agrave; nella medicina rigenerativa.

Progressi e sfide future tecnologie fegato cellule staminali derivate.

&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6210;&#x4F53;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x9032;&#x6B69;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x306F;&#x3001;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x7406;&#x8AD6;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x3068;&#x85AC;&#x7269;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5316;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5927;&#x91CF;&#x306B;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x809D;&#x79FB;&#x690D;&#x306F;&#x672B;&#x671F;&#x809D;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x306F;&#x6210;&#x529F;&#x306E;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x884C;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x79FB;&#x690D;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x81D3;&#x5668;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6CE8;&#x76EE;&#x304C;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x30D2;&#x30C8;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x79FB;&#x690D;&#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x307E;&#x3067;&#x4EE3;&#x66FF;&#x7684;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x8CEA;&#x91CF;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x306E;&#x89B3;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;/&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x96C6;&#x56E3;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x809D;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC9C4;&#xD589; &#xBC0F; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xAC04; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD5A5;&#xD6C4; &#xACFC;&#xC81C;.

El surgimiento de la medicina regenerativa ha dado lugar a avances significativos en la identificaci&#xF3;n y comprensi&#xF3;n de las c&#xE9;lulas madre humanas y las c&#xE9;lulas progenitoras adultas. Las dos poblaciones de c&#xE9;lulas exhiben la plasticidad y, te&#xF3;ricamente, ofrecen una fuente potencial de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas en grandes cantidades. Este recurso tiene un papel importante que desempe&#xF1;ar en la comprensi&#xF3;n del desarrollo humano, en la modelizaci&#xF3;n de enfermedades humanas y toxicidad de los medicamentos, y en la generaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas en un gran n&#xFA;mero de terapias basadas en c&#xE9;lulas. En la actualidad, el trasplante de h&#xED;gado es el &#xFA;nico tratamiento efectivo para la enfermedad hep&#xE1;tica en fase terminal. Aunque este procedimiento puede llevarse a cabo con altos niveles de &#xE9;xito, el trasplante de h&#xED;gado rutina est&#xE1; severamente limitada por la disponibilidad de donantes de &#xF3;rganos. Como resultado, la atenci&#xF3;n se ha centrado en la capacidad de restaurar la funci&#xF3;n hep&#xE1;tica y la masa por enfoques alternativos que van desde el dispositivo bioartificial para el trasplante de hepatocitos humanos. En esta revisi&#xF3;n se centrar&#xE1; en la generaci&#xF3;n de endodermo hep&#xE1;tico humano de diferentes poblaciones de c&#xE9;lulas madre / progenitoras, con miras a su utilidad en medicina regenerativa.

Avances y retos para el futuro en Tecnolog&#xED;as de la madre del h&#xED;gado derivadas de c&#xE9;lulas

&#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300;&#xC0C1; (t-) &#xC62C; &#xBB34; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (syntaxin &#xBC0F; &#xC2A4;&#xB0C5;-25)&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB450; t SNAREs &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; conformations &#xC800;&#xC870;&#xD55C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC288;&#xD37C; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xAD11;&#xD559; &#xAE30;&#xC220; &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; &#xC218;&#xBA85; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD00;&#xCC30; &#xADF8; t-&#xC62C; &#xBB34; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; syntaxin &#xBC0F; &#xC2A4;&#xB0C5;-25 &#xBD84;&#xC790; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC6A9;, &#xC911;&#xAC04; t-&#xC62C; &#xBB34; &#xC774;&#xC9C4;&#xC758; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; conformations &#xD615;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xCCB4; &#xC678; &#xAD00;&#xCC30; 2 &#xBC0F; 3 &#xD5EC;&#xB9AC;&#xCEEC; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; conformations &#xC8FC;&#xB85C; &#xC804;&#xC2DC; &#xAC01; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xCC28;&#xBCC4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00;&#xC774; &#xB450; t-&#xC62C; &#xBB34; &#xC911;&#xAC04; conformations &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xC720;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC790; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC21C;&#xC11C;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; t-&#xC62C; &#xBB34; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xC9C0;&#xAE08; 3 &#xD5EC;&#xB9AC;&#xCEEC; t &#xC62C; &#xBB34; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xCC44;&#xD0DD; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC44;&#xD0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB098; &#xB780; &#xC218; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; t &#xC62C; &#xBB34; &#xC911;&#xAC04; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xC815;&#xC758; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

t-&#xC62C; &#xBB34; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; conformations &#xC9C0;&#xC9C8; microenvironment&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAF43;&#xBB34;&#xB2AC;.

&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x76EE;&#x6807; (t) &#x7F51;&#x7F57;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; &#xFF08;syntaxin &#x548C;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143; 25&#xFF09; &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x4E0A;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6784;&#x8C61;&#x548C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A; t-&#x7F51;&#x7F57;&#x539F;&#x4F4D;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x660E;&#x786E;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x8D85;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x5149;&#x5B66;&#x6280;&#x672F;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x663E;&#x5FAE;&#x6210;&#x50CF;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230; t &#x7F51;&#x7F57;&#x96C6;&#x7FA4; syntaxin &#x548C;&#x7BA1;&#x7406;&#x5355;&#x5143; 25 &#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5F62;&#x6210;&#x4E24;&#x79CD;&#x4E0D;&#x540C;&#x6784;&#x8C61;&#x7684;&#x4E2D;&#x95F4; t &#x7F51;&#x7F57;&#x4E8C;&#x8FDB;&#x5236;&#x6587;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E3B;&#x8981;&#x5C55;&#x793A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6784;&#x8C61;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x4EE5;&#x524D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x548C;&#x4E09;&#x4E2A;&#x87BA;&#x65CB;&#x5F62;&#x5F0F;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7FA4;&#x96C6;&#x4E0A;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x88AB;&#x5206;&#x5F00;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BD5;&#x56FE;&#x89E3;&#x91CA;&#x4E3A;&#x4EC0;&#x4E48;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A; t &#x7F51;&#x7F57;&#x4E2D;&#x95F4;&#x6784;&#x8C61;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x4E0A;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E0D;&#x540C;&#x7FA4;&#x96C6;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7834;&#x574F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x8102;&#x8D28;&#x79E9;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x6240;&#x6709; t &#x7F51;&#x7F57;&#x7FA4;&#x96C6;&#x73B0;&#x5728;&#x901A;&#x8FC7;&#x5BF9;&#x5E94;&#x4E09;&#x4E2A;&#x87BA;&#x65CB; t &#x7F51;&#x7F57;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x6784;&#x8C61;&#x4E00;&#x4E2A;&#x56FD;&#x5BB6;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x5982;&#x4F55;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E26;&#x56FE;&#x6848;&#x7531;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x73AF;&#x5883;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E0D;&#x540C; t &#x7F51;&#x7F57;&#x4E2D;&#x95F4;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;

t &#x7F51;&#x7F57;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6784;&#x8C61;&#x56FE;&#x6848;&#x7531;&#x8102;&#x8D28;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x3002;

The spatial distribution of the target (t-)SNARE proteins (syntaxin and SNAP-25) on the plasma membrane has been extensively characterized. However, the protein conformations and interactions of the two t-SNAREs in situ remain poorly defined. By using super-resolution optical techniques and fluorescence lifetime imaging microscopy, we observed that within the t-SNARE clusters syntaxin and SNAP-25 molecules interact, forming two distinct conformations of the t-SNARE binary intermediate. These are spatially segregated on the plasma membrane with each cluster exhibiting predominantly one of the two conformations, representing the two- and three-helical forms previously observed in vitro. We sought to explain why these two t-SNARE intermediate conformations exist in spatially distinct clusters on the plasma membrane. By disrupting plasma membrane lipid order, we found that all of the t-SNARE clusters now adopted a single conformational state corresponding to the three helical t-SNARE intermediates. Together, our results define spatially distinct t-SNARE intermediate states on the plasma membrane and how the conformation adopted can be patterned by the underlying lipid environment.

t-SNARE protein conformations patterned by the lipid microenvironment.

La r&#xE9;partition spatiale de la cible (t-) prot&#xE9;ines SNARE (syntaxine et SNAP-25) sur la membrane plasmique a &#xE9;t&#xE9; largement caract&#xE9;ris&#xE9;e. Toutefois, les conformations de prot&#xE9;ines et les interactions des deux t-SNARE in situ demeurent mal d&#xE9;finis. En utilisant de super-r&#xE9;solution des techniques optiques et d&#x26;#39;imagerie de fluorescence en microscopie dur&#xE9;e de vie, nous avons observ&#xE9; que dans le t-SNARE syntaxine et SNAP-groupes de 25 mol&#xE9;cules interagissent, formant deux conformations distinctes de l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire t-SNARE binaire. Ceux-ci sont s&#xE9;par&#xE9;s spatialement sur la membrane plasmique avec chaque groupe pr&#xE9;sentant principalement l&#x26;#39;un des deux conformations, repr&#xE9;sentant les deux-et trois-h&#xE9;lico&#xEF;dales formes pr&#xE9;c&#xE9;demment observ&#xE9;s in vitro. Nous avons cherch&#xE9; &#xE0; expliquer pourquoi ces deux t-SNARE conformations interm&#xE9;diaires existent dans spatialement groupes distincts sur la membrane plasmique. En perturbant l&#x26;#39;ordre des lipides de la membrane plasmique, nous avons constat&#xE9; que tous les groupes t-SNARE maintenant adopt&#xE9; un seul &#xE9;tat conformationnel correspondant aux trois h&#xE9;lico&#xEF;daux t-SNARE interm&#xE9;diaires. Ensemble, nos r&#xE9;sultats d&#xE9;finissent spatialement distinctes t-SNARE &#xE9;tats interm&#xE9;diaires sur la membrane plasmique et la fa&#xE7;on dont la conformation adopt&#xE9;e peut &#xEA;tre model&#xE9; par l&#x26;#39;environnement lipidique sous-jacente.

Conformations des prot&#xE9;ines t-SNARE model&#xE9;e par le microenvironnement des lipides

Die r&auml;umliche Verteilung der Ziel (t-)-SNARE-Proteine (Syntaxin und SNAP-25) auf der Plasmamembran war umfassend charakterisiert. Die Protein-Konformationen und Wechselwirkungen zwischen den beiden t-SNAREs an Ort und Stelle bleiben jedoch unzureichend definierte. Durch superaufl&ouml;sende optische Verfahren und Fluoreszenz-Lebensdauer-imaging Mikroskopie, beobachteten wir, dass innerhalb der t-SNARE-Clustern Syntaxin und SNAP-25 Molek&uuml;len interagieren, bilden zwei unterschiedliche Konformationen des mittleren t-SNARE-binaries. Diese werden r&auml;umlich getrennt auf der Plasmamembran mit jedem ausstellenden &uuml;berwiegend eine der die beiden Konformationen, darstellt die zwei und drei-Kegelrad Formen, die vorher beobachtet in-vitro-Cluster. Wir versuchten zu erkl&auml;ren, warum diese beiden t-SNARE-Mittelstufe-Konformationen in r&auml;umlich unterschiedlichen Clustern auf der Plasmamembran existieren. Durch Unterbrechung der Plasmamembran Lipid Reihenfolge, fanden wir, dass alle die t-SNARE-Cluster jetzt entsprechend den drei spiralf&ouml;rmige t-SNARE-Zwischenprodukte Konformations&auml;nderungen Einzelstaats angenommen. Unsere Ergebnisse definieren zusammen Zwischenzust&auml;nde r&auml;umlich unterschiedliche t-SNARE auf der Plasmamembran und wie die Beschaffenheit, angenommen von der zugrunde liegenden Lipid-Umgebung gemustert werden kann.

t-SNARE Protein Konformationen von der Lipid-Mikromilieu gemustert.

La distribuzione spaziale delle proteine SNARE bersaglio (t-) (Sintaxina e SNAP-25) sulla membrana del plasma &egrave; stato estesamente caratterizzata. Tuttavia, le conformazioni della proteina e interazioni di due t-SNAREs in situ rimangono mal definite. Utilizzando tecniche di Super-risoluzione ottica e fluorescenza lifetime imaging microscopia, abbiamo osservato che all&#39;interno del t-SNARE cluster Sintaxina e SNAP-25 molecole interagiscono, formando due distinte conformazioni del binario t-SNARE intermedio. Queste sono spazialmente segregate sulla membrana del plasma con ogni cluster espositrici prevalentemente uno dei due conformazioni, che rappresentano le forme elicoidali a due e tre precedentemente osservate in vitro. Abbiamo cercato di spiegare perch&eacute; queste due conformazioni intermedie t-SNARE esistono in cluster spazialmente distinti sulla membrana del plasma. Interrompendo l&#39;ordine del lipido della membrana plasmatica, abbiamo scoperto che tutti i cluster t-SNARE ora adottato un unico stato conformazionale, corrispondenti alle tre t-SNARE elicoidale intermedi. Insieme, i nostri risultati definiscono gli Stati intermedi spazialmente distinti t-SNARE sulla membrana del plasma e come la conformazione adottata pu&ograve; essere modellata dall&#39;ambiente lipidico sottostante.

conformazioni di proteina t-SNARE modellate dal microambiente lipidico.

&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x5E03;&#xFF08;T-&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x4E0A;&#x306E;SNARE&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;SNAP-25&#xFF09;&#x304C;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5834;&#x3067;2&#x30C8;&#x30F3;&#xB7;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x307E;&#x307E;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8D85;&#x89E3;&#x50CF;&#x5149;&#x5B66;&#x6280;&#x8853;&#x3068;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;t-SNARE&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;SNAP-25&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x3067;T-SNARE&#x30D0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30EA;&#x4E2D;&#x9593;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x5404;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306B;&#x306F;&#x4E3B;&#x306B;&#x8868;&#x3059;2&#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;1&#x3064;&#x3001;2&#x3064;&#x3092;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;in vitro&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;3&#x91CD;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x5F62;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x4E0A;&#x306B;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;T-SNARE&#x4E2D;&#x9593;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x4E0A;&#x3067;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x5185;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x7406;&#x7531;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x306E;&#x9806;&#x5E8F;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;t-SNARE&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306F;3&#x3064;&#x306E;&#x3089;&#x305B;&#x3093;&#x72B6;&#x306E;T-SNARE&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x4E0A;&#x306B;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;T-SNARE&#x4E2D;&#x9593;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x3001;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x8102;&#x8CEA;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8102;&#x8CEA;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;T-SNARE&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

La distribuci&#xF3;n espacial de la meta (t) de las prote&#xED;nas SNARE (syntaxin y SNAP-25) en la membrana plasm&#xE1;tica ha sido ampliamente caracterizado. Sin embargo, las conformaciones de las prote&#xED;nas y las interacciones de los dos t-SNARE in situ siguen estando mal definidas. Mediante el uso de t&#xE9;cnicas de super-resoluci&#xF3;n &#xF3;ptica y microscop&#xED;a de fluorescencia por vida de im&#xE1;genes, se observ&#xF3; que en el t-SNARE syntaxin grupos y las mol&#xE9;culas de SNAP-25 interact&#xFA;an, formando dos conformaciones distintas de la sustancia intermedia t-SNARE binario. Estos est&#xE1;n espacialmente separados en la membrana plasm&#xE1;tica con cada grupo exhibiendo predominantemente una de las dos conformaciones, que representa el dos y tres formas helicoidales previamente observados in vitro. Hemos tratado de explicar por qu&#xE9; estos dos t-SNARE conformaciones intermedias existen en distintos grupos espacialmente en la membrana plasm&#xE1;tica. Al alterar la membrana plasm&#xE1;tica de l&#xED;pidos fin, se encontr&#xF3; que todos los grupos t-SNARE adoptado ahora un solo estado conformacional correspondiente a los tres helicoidales t-SNARE intermedios. Juntos, nuestros resultados definen espacialmente distintos de t-SNARE estados intermedios en la membrana plasm&#xE1;tica y c&#xF3;mo la conformaci&#xF3;n adoptada puede ser modelado por el entorno lip&#xED;dico subyacente.

T-SNARE conformaciones de prote&#xED;nas modeladas por el microambiente lip&#xED;dico

&#x809D;&#x810F;&#x8FDB;&#x884C;&#x5FC5;&#x8981;&#x7684;&#x8EAB;&#x4F53;&#x5185;&#x7A33;&#x6001;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x8303;&#x56F4;&#x3002;&#x809D;&#x810F;&#x529F;&#x80FD;&#x53D7;&#x635F;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E86;&#x4E25;&#x91CD;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x8D1F;&#x8D23;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7684;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x548C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x9AD8;&#x5229;&#x7387;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#xFF0C;&#x809D;&#x79FB;&#x690D;&#x4ECD;&#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6350;&#x52A9;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x9650;&#x5236;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x5E76;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x751F;&#x7269;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x809D;&#x88C5;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x5F25;&#x8865;&#x5BF9;&#x809D;&#x79FB;&#x690D;&#x75C5;&#x4EBA;&#x3002;&#x73B0;&#x6709;&#x652F;&#x6301;&#x8BBE;&#x5907;&#x6539;&#x5584;&#x809D;&#x6027;&#x8111;&#x75C5;&#x5728;&#x4E00;&#x5B9A;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A; &#xFF1B;&#x4F46;&#x662F;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x7528;&#x6CD5;&#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x526F;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x809D;&#x8BBE;&#x5907;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x969C;&#x788D;&#x662F;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x539F;&#x4EE3;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x90FD;&#x96BE;&#x4EE5;&#x7EF4;&#x62A4;&#x548C;&#x968F;&#x65F6;&#x95F4;&#x751A;&#x81F3;&#x4E0E;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x57F9;&#x517B;&#x5A92;&#x4F53;&#x5931;&#x53BB;&#x809D;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x514B;&#x670D;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5C40;&#x9650;&#x6027;&#xFF0C;&#x6B63;&#x5728;&#x63A2;&#x7D22;&#x53EF;&#x518D;&#x751F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D44;&#x6E90;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x8981;&#x751F;&#x6210;&#x53EF;&#x9760;&#x7684;&#x3001; &#x53EF;&#x91CD;&#x590D;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x4F9B;&#x5E94;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5185;&#x80DA;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x809D;&#x5C42;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7ED3;&#x5408;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E3A;&#x53D1;&#x5C55;&#x94FA;&#x5E73;&#x9053;&#x8DEF;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x751F;&#x7269;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x809D;&#x88C5;&#x7F6E;&#x548C;&#x9884;&#x6D4B;&#x836F;&#x7269;&#x6BD2;&#x6027;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x3002;

&#x4E09;&#x7EF4;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884D;&#x751F;&#x809D;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x548C;&#x5176;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x809D;&#x5EFA;&#x8BBE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The liver carries out a range of functions essential for bodily homeostasis. The impairment of liver functions has serious implications and is responsible for high rates of patient morbidity and mortality. Presently, liver transplantation remains the only effective treatment, but donor availability is a major limitation. Therefore, artificial and bioartificial liver devices have been developed to bridge patients to liver transplantation. Existing support devices improve hepatic encephalopathy to a certain extent; however their usage is associated with side effects. The major hindrance in the development of bioartificial liver devices and cellular therapies is the limited availability of human hepatocytes. Moreover, primary hepatocytes are difficult to maintain and lose hepatic identity and function over time even with sophisticated tissue culture media. To overcome this limitation, renewable cell sources are being explored. Human embryonic stem cells are one such cellular resource and have been shown to generate a reliable and reproducible supply of human hepatic endoderm. Therefore, the use of human embryonic stem cell-derived hepatic endoderm in combination with tissue engineering has the potential to pave the way for the development of novel bioartificial liver devices and predictive drug toxicity assays.

Three-dimensional culture of human embryonic stem cell derived hepatic endoderm and its role in bioartificial liver construction.

Le foie effectue une s&#xE9;rie de fonctions essentielles pour l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie corporelle. La d&#xE9;ficience des fonctions du foie a des cons&#xE9;quences graves et il est responsable des taux &#xE9;lev&#xE9;s de morbidit&#xE9; et la mortalit&#xE9;. Actuellement, la transplantation h&#xE9;patique reste le seul traitement efficace, mais la disponibilit&#xE9; des bailleurs de fonds constitue une limitation majeure. Par cons&#xE9;quent, les dispositifs de foie bioartificiel artificiels et ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9;s pour combler les patients &#xE0; la transplantation du foie. Dispositifs de soutien existants d&#x26;#39;am&#xE9;liorer l&#x26;#39;enc&#xE9;phalopathie h&#xE9;patique dans une certaine mesure, mais leur utilisation est associ&#xE9;e &#xE0; des effets secondaires. L&#x26;#39;obstacle majeur dans le d&#xE9;veloppement de dispositifs de foie bioartificiel et des th&#xE9;rapies cellulaires est la disponibilit&#xE9; limit&#xE9;e des h&#xE9;patocytes humains. En outre, les h&#xE9;patocytes primaires sont difficiles &#xE0; maintenir et &#xE0; perdre son identit&#xE9; et de la fonction h&#xE9;patique au fil du temps, m&#xEA;me avec sophistiqu&#xE9;es milieux de culture tissulaire. Pour surmonter cette limitation, les sources de cellules renouvelables sont &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tude. Cellules souches embryonnaires humaines sont une ressource telle cellulaire et il a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9; pour g&#xE9;n&#xE9;rer un approvisionnement fiable et reproductible de l&#x26;#39;endoderme h&#xE9;patique humain. Par cons&#xE9;quent, l&#x26;#39;utilisation des ressources humaines endoderme souches h&#xE9;patiques embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;s de cellules en combinaison avec le g&#xE9;nie tissulaire a le potentiel d&#x26;#39;ouvrir la voie pour le d&#xE9;veloppement de nouveaux dispositifs de pr&#xE9;vision et foie bioartificiel tests de toxicit&#xE9; des m&#xE9;dicaments.

Trois dimensions de la culture des droits de l&#x26;#39;endoderme cellules souches embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;es h&#xE9;patique et son r&#xF4;le dans la construction du foie bioartificiel

Die Leber f&uuml;hrt eine Reihe von Funktionen f&uuml;r k&ouml;rperliche Hom&ouml;ostase. Die Beeintr&auml;chtigung der Leberfunktion hat ernste Auswirkungen und ist verantwortlich f&uuml;r hohe Patienten Morbidit&auml;t und Mortalit&auml;t. Derzeit eine Lebertransplantation bleibt die einzig wirksame Behandlung, aber Spender Verf&uuml;gbarkeit ist eine wichtige Einschr&auml;nkung. Deshalb, k&uuml;nstliche und Bioartificial Leber Ger&auml;te wurden entwickelt, um Patienten eine Lebertransplantation zu &uuml;berbr&uuml;cken. Vorhandene Unterst&uuml;tzung Ger&auml;te verbessern hepatische Enzephalopathie zu einem gewissen Grad; Ihre Verwendung ist jedoch mit Nebenwirkungen verbunden. Das gro&szlig;e Hindernis bei der Entwicklung von Bioartificial Leber Ger&auml;te und zellul&auml;re Therapien ist die begrenzte Verf&uuml;gbarkeit von menschlichen Hepatozyten. Dar&uuml;ber hinaus sind prim&auml;re Hepatozyten schwer zu pflegen und hepatische Identit&auml;t und Funktion im Laufe der Zeit auch mit anspruchsvollen Gewebekultur Medien zu verlieren. Um diese Einschr&auml;nkung zu umgehen, werden erneuerbare Zelle Quellen erforscht. Menschlicher embryonaler Stammzellen sind eine solche zellul&auml;re Ressource und sind gezeigt worden, um eine zuverl&auml;ssige und reproduzierbare Versorgung der menschlichen Leber Endodermis zu generieren. Daher kann die Verwendung von menschlichen embryonalen Stammzellen Cell-derived hepatische Endodermis in Kombination mit Tissue-Engineering, ebnen den Weg f&uuml;r die Entwicklung von neuartigen Bioartificial Leber Ger&auml;te und vorausschauende Drogen Toxizit&auml;t Assays.

Dreidimensionale Kultur von menschlichen embryonalen Stammzellen abgeleitet hepatische Endodermis und seine Rolle bei Bioartificial Leber Bau.

Il fegato svolge una vasta gamma di funzioni essenziali per l&#39;omeostasi corporea. La compromissione delle funzioni epatiche ha gravi implicazioni ed &egrave; responsabile di alti tassi di mortalit&agrave; e morbilit&agrave; paziente. Attualmente, il trapianto di fegato rimane l&#39;unico efficacia trattamento, ma disponibilit&agrave; di donatore &egrave; una limitazione importante. Pertanto, artificiale e dispositivi infraepatica fegato sono stati sviluppati per colmare i pazienti per trapianto di fegato. Dispositivi di sostegno esistenti migliorare l&#39;encefalopatia epatica in una certa misura; Tuttavia il loro uso &egrave; associato con gli effetti collaterali. L&#39;ostacolo principale nello sviluppo di terapie cellulari e dispositivi infraepatica fegato &egrave; la limitata disponibilit&agrave; di epatociti umani. Inoltre, gli epatociti primari sono difficili da mantenere e perdere identit&agrave; epatica e funzione nel corso del tempo anche con mezzi di coltura di tessuti sofisticati. Per ovviare a questa limitazione, fonti rinnovabili cella vengono valutate. Cellule staminali embrionali umane sono una risorsa di questo tipo cellulare e hanno dimostrate di generare una fornitura affidabile e riproducibile di endoderma epatico umano. Pertanto, l&#39;uso di umana embrionale cellule staminali derivate epatica endoderma in combinazione con ingegneria tissutale ha il potenziale per spianare la strada per lo sviluppo di dispositivi romanzo infraepatica fegato e saggi di tossicit&agrave; farmaco predittiva.

Cultura tridimensionale di cellule staminali embrionali umane derivate endoderma epatica e il suo ruolo nella costruzione infraepatica fegato.

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&#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xBB38;&#xD654; &#xD30C;&#xC0DD; &#xAC04;&#xC7A5; endoderm bioartificial &#xAC04; &#xAC74;&#xC124;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB428;.

El h&#xED;gado lleva a cabo una serie de funciones esenciales para la homeostasis corporal. El deterioro de las funciones del h&#xED;gado tiene serias implicaciones y es responsable de las altas tasas de morbilidad y mortalidad. En la actualidad, el trasplante de h&#xED;gado sigue siendo el &#xFA;nico tratamiento efectivo, pero la disponibilidad de donantes es una limitaci&#xF3;n importante. Por lo tanto, los dispositivos de h&#xED;gado bioartificial artificiales y se han desarrollado para cubrir a los pacientes a un trasplante de h&#xED;gado. Los dispositivos existentes de apoyo a mejorar la encefalopat&#xED;a hep&#xE1;tica, hasta cierto punto, sin embargo su uso se asocia con efectos secundarios. El mayor obst&#xE1;culo en el desarrollo de dispositivos de h&#xED;gado bioartificial y terapias celulares es la limitada disponibilidad de hepatocitos humanos. Por otra parte, los hepatocitos primarios son dif&#xED;ciles de mantener y perder la identidad de la funci&#xF3;n hep&#xE1;tica y con el tiempo, incluso con sofisticados medios de cultivo de tejidos. Para superar esta limitaci&#xF3;n, las fuentes renovables de c&#xE9;lulas se est&#xE1;n explorando. Las c&#xE9;lulas madre embrionarias son un recurso m&#xF3;vil tales y se ha demostrado para generar un suministro fiable y reproducible de endodermo hep&#xE1;tico humano. Por lo tanto, el uso de endodermo hep&#xE1;tico humano con c&#xE9;lulas madre embrionarias derivadas en combinaci&#xF3;n con la ingenier&#xED;a de tejidos tiene el potencial de allanar el camino para el desarrollo de nuevos dispositivos de h&#xED;gado bioartificial y predictivos ensayos de toxicidad de la droga.

Tridimensional Cultura de los Derechos Humanos endodermo hep&#xE1;tica con c&#xE9;lulas madre embrionarias deriva y su papel en la construcci&#xF3;n h&#xED;gado bioartificial

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x836F;&#x7269;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x51C6;&#x786E;&#x9884;&#x6D4B;&#x662F;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5B89;&#x5168;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x88AB;&#x53D7;&#x5230;&#x963B;&#x788D;&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x548C;&#x8D28;&#x91CF;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x6A21;&#x578B;&#x7528;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x836F;&#x7269;&#x6BD2;&#x6027;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x514B;&#x670D;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5C40;&#x9650;&#x6027;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76;&#x96C6;&#x4E2D;&#x5728;&#x4EA7;&#x751F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6765;&#x6E90;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4ECE;&#x80CE;&#x513F;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6570;&#x91CF;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x809D;&#x810F;&#xFF0C;&#x809D;&#x810F;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x6E90;&#x81EA;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6C38;&#x751F;&#x4EBA;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x53EF;&#x4F38;&#x7F29;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x5173;&#x5361;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x4FDD;&#x771F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x548C;&#x80CE;&#x513F;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5DF2;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3001; &#x5747;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x3001; &#x77ED;&#x671F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x8FC5;&#x901F;&#x4E27;&#x5931;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x5F88;&#x6709;&#x5FC5;&#x8981;&#x5BFB;&#x627E;&#x66FF;&#x4EE3;&#x6765;&#x6E90;&#x7684;&#x4EBA;&#x7684;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7ED5;&#x8FC7;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7EC4;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x91CD;&#x70B9;&#x4ECE;&#x53EF;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x3001; &#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x4EBA;&#x4F53;&#x809D;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x9AD8;&#x6548;&#x3001; &#x53EF;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7FA4;&#x4F53;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x809D;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x663E;&#x793A;&#x8BB8;&#x591A;&#x4EBA;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x73B0;&#x5728;&#x7740;&#x91CD;&#x53D1;&#x5C55;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x548C;&#x6539;&#x5584;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x8FDB;&#x884C;&#x5408;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x809D;&#x810F;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5C06;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5185;&#x80DA;&#x5BBD;&#x8303;&#x56F4;&#x8FD0;&#x4F5C;&#x809D;&#x5C42;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x91C7;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x76F8;&#x4FE1;&#x5B83;&#x5C06;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x6539;&#x5584;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#x6027;&#x8D28;&#x3001; &#x9769;&#x547D;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5728;&#x54EA;&#x4E9B;&#x884C;&#x4E1A;&#x4E2D;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x836F;&#x7269;&#x6BD2;&#x6027;&#x7684;&#x63AA;&#x65BD;&#x548C;&#x5BF9;&#x836F;&#x7269;&#x81EA;&#x7136;&#x51CF;&#x5458;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x5185;&#x80DA;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x809D;&#x5C42;&#x4EBA;&#x4F53;&#x836F;&#x7269;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Accurate prediction of human drug toxicity is a vital part of the drug discovery process. However, the safety evaluation process is hindered by the availability and quality of primary human liver models with which to study drug toxicity. In an attempt to overcome this limitation, research has focused on deriving human hepatocytes from a number of sources, including progenitors from fetal and adult liver, human cell lines derived from liver tumours, immortalized human hepatocytes and pluripotent stem cells. The major hurdles in developing scalable and high-fidelity human hepatocytes from hepatic cell lines and fetal and adult progenitors have been limited organ availability, homogeneous cell purification, short-term cell culture, and the rapid loss of hepatocyte phenotype and function in culture. Therefore it has been necessary to find alternative sources of human hepatocytes which circumvent these issues. The research in our group has focused on generating human hepatic endoderm from the scalable pluripotent stem cell populations, human embryonic stem cells and induced pluripotent stem cells. We have developed efficient and scalable models of human hepatocyte differentiation from these cell populations. Moreover, stem-cell-derived hepatic endoderm displays many of the functional attributes of primary human hepatocytes. Our research is now focused on developing defined culture systems and improving cell culture microenvironments in order to improve our understanding of the mechanisms regulating human liver development. This will in turn facilitate the generation of broad-range functioning hepatic endoderm in vitro. By taking these approaches, we believe that it will be possible to improve the predictive nature of our in vitro models, revolutionizing the manner in which industry measures human drug toxicity and having an impact on drug attrition.

Role of stem-cell-derived hepatic endoderm in human drug discovery.

La pr&#xE9;diction exacte de la toxicit&#xE9; des m&#xE9;dicaments humaine est une partie essentielle du processus de d&#xE9;couverte de m&#xE9;dicaments. Cependant, le processus d&#x26;#39;&#xE9;valuation de s&#xE9;curit&#xE9; est entrav&#xE9; par la disponibilit&#xE9; et la qualit&#xE9; des mod&#xE8;les primaires du foie de l&#x26;#39;homme avec lequel pour &#xE9;tudier la toxicit&#xE9; des m&#xE9;dicaments. Dans une tentative pour surmonter cette limitation, la recherche s&#x26;#39;est concentr&#xE9;e sur des h&#xE9;patocytes humains provenant d&#x26;#39;un certain nombre de sources, y compris les prog&#xE9;niteurs de foie f&#x153;tal et adulte, des lign&#xE9;es cellulaires humaines d&#xE9;riv&#xE9;es de tumeurs du foie, les h&#xE9;patocytes humains immortalis&#xE9;s et des cellules souches pluripotentes. Les principaux obstacles &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;laboration &#xE9;volutive et haute-fid&#xE9;lit&#xE9; h&#xE9;patocytes humains &#xE0; partir de lign&#xE9;es de cellules h&#xE9;patiques et des prog&#xE9;niteurs f&#x153;taux et adultes ont &#xE9;t&#xE9; limit&#xE9;s disponibilit&#xE9; d&#x26;#39;organes, la purification cellulaire homog&#xE8;ne, la culture cellulaire &#xE0; court terme, et la perte rapide du ph&#xE9;notype des h&#xE9;patocytes et la fonction dans la culture. Par cons&#xE9;quent, il a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire de trouver d&#x26;#39;autres sources d&#x26;#39;h&#xE9;patocytes humains qui contournent ces questions. La recherche de notre groupe a mis l&#x26;#39;accent sur la g&#xE9;n&#xE9;ration de l&#x26;#39;endoderme h&#xE9;patique humain des populations &#xE9;volutives de cellules souches pluripotentes, les cellules souches embryonnaires humaines et cellules souches pluripotentes induites. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; des mod&#xE8;les efficaces et &#xE9;volutifs de diff&#xE9;renciation h&#xE9;patocytaire humaine de ces populations cellulaires. En outre, l&#x26;#39;endoderme h&#xE9;patique de cellules souches d&#xE9;riv&#xE9;es affiche la plupart des attributs fonctionnels de h&#xE9;patocytes humains primaires. Notre recherche se concentre maintenant sur le d&#xE9;veloppement de syst&#xE8;mes de culture d&#xE9;finies et l&#x26;#39;am&#xE9;lioration de microenvironnements de culture cellulaire afin d&#x26;#39;am&#xE9;liorer notre compr&#xE9;hension des m&#xE9;canismes r&#xE9;gulant le d&#xE9;veloppement du foie humain. Ce sera &#xE0; son tour faciliter la g&#xE9;n&#xE9;ration d&#x26;#39;une large gamme endoderme h&#xE9;patique fonctionnement in vitro. En prenant ces approches, nous croyons qu&#x26;#39;il sera possible d&#x26;#39;am&#xE9;liorer le caract&#xE8;re pr&#xE9;dictif de notre mod&#xE8;le in vitro, en train de r&#xE9;volutionner la mani&#xE8;re dont l&#x26;#39;industrie mesure la toxicit&#xE9; des m&#xE9;dicaments humains et ayant un impact sur l&#x26;#39;attrition des m&#xE9;dicaments.

R&#xF4;le de de cellules souches d&#xE9;riv&#xE9;es endoderme h&#xE9;patique chez Discovery m&#xE9;dicaments pour usage humain

Genaue Vorhersage von Arzneimitteln f&uuml;r Menschen Toxizit&auml;t ist ein wichtiger Teil der Droge-Discovery-Prozess. Jedoch wird der Prozess der Sicherheits-Evaluierung durch die Verf&uuml;gbarkeit und Qualit&auml;t der prim&auml;ren menschlichen Leber Modelle mit denen Drogen Toxizit&auml;t zu studieren behindert. In einem Versuch, diese Einschr&auml;nkung zu umgehen Forschung konzentriert sich auf menschliche Hepatozyten aus einer Reihe von Quellen, einschlie&szlig;lich Vorfahren von fetalen ableiten und Erwachsenen Leber, menschliche Zelllinien abgeleitet von Lebertumoren, verewigt, menschliche Hepatozyten und pluripotenten Stammzellen. Die gro&szlig;en H&uuml;rden bei der Entwicklung von skalierbaren und High-Fidelity-menschliche Hepatozyten aus Leber Zelllinien und fetalen und adulten Vorfahre wurden begrenzte Organverf&uuml;gbarkeit, homogene Betriebszellen-Reinigung, kurzfristige Zellkultur und die rasche Verlust der Hepatozyten Ph&auml;notyp und Funktion in der Kultur. Es war daher notwendig, alternative Energiequellen des menschlichen Hepatozyten zu finden, die diese Probleme zu umgehen. Die Forschung in unserer Gruppe konzentriert sich auf die Erzeugung von menschlichen Leber Entoderm aus skalierbare pluripotenten Stammzellen-Populationen und induzierten pluripotenten Stammzellen menschlicher embryonaler Stammzellen. Wir haben effiziente und skalierbare Modelle der menschlichen Hepatozyten Differenzierung aus dieser Zelle Populationen entwickelt. Dar&uuml;ber hinaus zeigt die Vorbau-Cell-derived hepatische Endodermis viele funktionelle Attribute des prim&auml;ren menschlichen Hepatozyten. Unsere Forschung auf entwickelnden definierte Kultur-Systemen und Verbesserung Zelle Kultur Mikroumgebungen konzentriert sich jetzt um unser Verst&auml;ndnis der Mechanismen, die zur Regelung der menschlichen Leber Entwicklung zu verbessern. Dadurch wird wiederum die Generation der breiten Palette funktionierende Leber Endodermis in-vitro erleichtert. Wenn man diese Ans&auml;tze, glauben wir, dass es m&ouml;glich sein wird, die vorausschauende Natur unserer in-vitro-Modelle zu verbessern, revolutioniert die Art und Weise, in welcher Branche misst Toxizit&auml;t von Arzneimitteln f&uuml;r Menschen und, die Auswirkungen auf Droge Abrieb.

Rolle der Vorbau-Cell-derived hepatische Endodermis in der menschlichen Drogeentdeckung.

Accurata previsione della tossicit&agrave; del farmaco umano &egrave; una parte vitale del processo di drug discovery. Tuttavia, il processo di valutazione di sicurezza &egrave; ostacolato dalla disponibilit&agrave; e qualit&agrave; dei modelli di fegato umani primari con cui lo studio sulla tossicit&agrave; del farmaco. Nel tentativo di superare questa limitazione, ricerca &egrave; focalizzata sulla derivazione di epatociti umani da un certo numero di fonti, tra cui progenitori da fetale e fegato adulto, linee cellulari umane derivate da tumori epatici, immortalati negli epatociti umani e cellule staminali pluripotenti. I principali ostacoli allo sviluppo scalabile e ad alta fedelt&agrave; epatociti umani da linee di cellule epatiche e progenitori embrionali e adulte sono stati organo limitata disponibilit&agrave;, purificazione cellulare omogenea, coltura cellulare a breve termine e la rapida perdita di fenotipo degli epatociti e funzione nella cultura. Pertanto &egrave; stato necessario trovare fonti alternative di epatociti umani che aggirare questi problemi. La ricerca nel nostro gruppo si &egrave; concentrato su generazione endoderma epatico umano dalle popolazioni di cellule staminali pluripotenti scalabile, cellule staminali embrionali umane e cellule staminali pluripotenti indotte. Abbiamo sviluppato modelli efficienti e scalabili di differenziazione degli epatociti umani da queste popolazioni cellulari. Inoltre, gambo-cellula-derivato epatica endoderma Visualizza molti degli attributi funzionali di epatociti umani primari. La nostra ricerca &egrave; ora focalizzata su sistemi di coltura definiti in via di sviluppo e miglioramento microambienti di coltura delle cellule al fine di migliorare la nostra comprensione dei meccanismi che regolano lo sviluppo di fegato umano. Questo a sua volta faciliter&agrave; la generazione della vasta gamma funzionamento epatico endoderma in vitro. Prendendo questi approcci, crediamo che sar&agrave; possibile migliorare la natura predittiva dei nostri modelli in vitro, rivoluzionando il modo in cui l&#39;industria misure di tossicit&agrave; del farmaco umano e avere un impatto sull&#39;attrito droga.

Ruolo della gambo-cellula-derivato epatica endoderma nella scoperta della droga umana.

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vitro&#x3067;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x809D;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x53D6;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x696D;&#x754C;&#x304C;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x85AC;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x85AC;&#x7269;&#x306E;&#x6469;&#x8017;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x9769;&#x547D;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3068;&#x4FE1;&#x3058;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC5D0; &#xAC04;&#xC7A5; endoderm &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

La predicci&#xF3;n exacta de la toxicidad de los medicamentos humanos es una parte vital del proceso de descubrimiento de f&#xE1;rmacos. Sin embargo, el proceso de evaluaci&#xF3;n de la seguridad se ve obstaculizada por la disponibilidad y la calidad de los modelos primarios de h&#xED;gado humano con el que para estudiar la toxicidad del f&#xE1;rmaco. En un intento de superar esta limitaci&#xF3;n, la investigaci&#xF3;n se ha centrado en hepatocitos humanos derivados de un n&#xFA;mero de fuentes, incluyendo progenitores de h&#xED;gado fetal y adulto, las l&#xED;neas celulares humanas derivadas de tumores de h&#xED;gado, inmortalizadas hepatocitos humanos y c&#xE9;lulas madre pluripotentes. Los obst&#xE1;culos principales en el desarrollo escalable y de alta fidelidad hepatocitos humanos a partir de l&#xED;neas celulares hep&#xE1;ticas y progenitores fetales y adultos se han limitado la disponibilidad de &#xF3;rganos, la purificaci&#xF3;n celular homog&#xE9;nea, a corto plazo el cultivo de c&#xE9;lulas, y la p&#xE9;rdida r&#xE1;pida del fenotipo y la funci&#xF3;n de los hepatocitos en cultivo. Por lo tanto, ha sido necesario encontrar fuentes alternativas de hepatocitos humanos que eluden estos temas. La investigaci&#xF3;n en nuestro grupo se ha centrado en la generaci&#xF3;n de endodermo hep&#xE1;tico humano de las poblaciones escalables pluripotentes de c&#xE9;lulas madre, c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas y c&#xE9;lulas madre pluripotentes inducidas. Hemos desarrollado modelos eficientes y escalables de la diferenciaci&#xF3;n de hepatocitos humanos de estas poblaciones de c&#xE9;lulas. Por otra parte, endodermo hep&#xE1;tica con c&#xE9;lulas madre derivadas de muestra muchos de los atributos funcionales de hepatocitos humanos primarios. Nuestra investigaci&#xF3;n se centra ahora en el desarrollo de sistemas definidos por la cultura y la mejora de los microambientes de cultivo celular con el fin de mejorar nuestra comprensi&#xF3;n de los mecanismos que regulan el desarrollo del h&#xED;gado humano. Esto a su vez facilitar&#xE1; la generaci&#xF3;n de una amplia gama de endodermo hep&#xE1;tica funcionamiento in vitro. Al tomar estos enfoques, creemos que ser&#xE1; posible mejorar el car&#xE1;cter predictivo de nuestro modelos in vitro, revolucionando la manera en que rama de actividad mide la toxicidad del f&#xE1;rmaco humano y tener un impacto en el desgaste de drogas.

Papel de c&#xE9;lulas madre derivadas de endodermo hep&#xE1;tica en Drug Discovery Humanos

Malgr&#xE9; des progr&#xE8;s consid&#xE9;rables dans la mod&#xE9;lisation de la toxicit&#xE9; du foie humain, le besoin subsiste pour l&#x26;#39;efficacit&#xE9;, pr&#xE9;dictive et rentable dans des mod&#xE8;les in vitro pour r&#xE9;duire l&#x26;#39;attrition pendant le d&#xE9;veloppement de m&#xE9;dicaments. Des milliers de compos&#xE9;s &#xE9;chouer dans ce processus, &#xE0; une h&#xE9;patotoxicit&#xE9; &#xE9;tant une des causes importantes d&#x26;#39;&#xE9;chec. Le co&#xFB;t des &#xE9;tudes cliniques est importante, il est donc essentiel que le d&#xE9;pistage toxicologique est effectu&#xE9; t&#xF4;t dans le processus de d&#xE9;veloppement de m&#xE9;dicaments. H&#xE9;patocytes humains repr&#xE9;sentent le mod&#xE8;le &#xE9;talon-or pour l&#x26;#39;&#xE9;valuation de la toxicit&#xE9; des m&#xE9;dicaments, mais ils sont une ressource limit&#xE9;e. Les mod&#xE8;les actuels de remplacement sont fond&#xE9;es sur des lign&#xE9;es cellulaires immortalis&#xE9;es et les tissus des animaux, mais ceux-ci sont limit&#xE9;es par un mauvais fonctionnement de la variabilit&#xE9; des esp&#xE8;ces exposition et de l&#x26;#39;instabilit&#xE9; dans la culture spectacle. Les cellules souches pluripotentes sont une alternative int&#xE9;ressante car ils sont capables d&#x26;#39;auto-renouvellement et de diff&#xE9;renciation &#xE0; tous les trois feuillets embryonnaires, et donc repr&#xE9;senter une source potentiellement in&#xE9;puisable de cellules somatiques. La diff&#xE9;renciation des cellules souches embryonnaires humaines et cellules souches pluripotentes induites &#xE0; des h&#xE9;patocytes fonctionnels comme des cellules a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;cemment signal&#xE9;e. Poursuite du d&#xE9;veloppement de cette technologie pourrait conduire &#xE0; la production &#xE9;volutive de h&#xE9;patocyte comme des cellules de d&#xE9;pistage de la toxicit&#xE9; du foie et des th&#xE9;rapies cliniques. En outre, induite par les cellules souches pluripotentes comme les cellules d&#xE9;riv&#xE9;es des h&#xE9;patocytes peut permettre &#xE0; la mod&#xE9;lisation in vitro des polymorphismes des g&#xE8;nes et des maladies g&#xE9;n&#xE9;tiques.

Sur les cellules souches pluripotentes comme les cellules h&#xE9;patocytes et leur potentiel dans d&#xE9;pistage de la toxicit&#xE9;

&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5728;&#x6A21;&#x62DF;&#x4EBA;&#x4F53;&#x809D;&#x810F;&#x6BD2;&#x6027;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x8FDB;&#x5C55;&#xFF0C;&#x8981;&#x6C42;&#x4ECD;&#x7136;&#x5B58;&#x5728;&#x6548;&#x7387;&#x3001; &#x9884;&#x6D4B;&#x548C;&#x6210;&#x672C;&#x6548;&#x76CA;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x5C11;&#x836F;&#x54C1;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x81EA;&#x7136;&#x51CF;&#x5458;&#x3002;&#x6570;&#x4EE5;&#x5343;&#x8BA1;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x5931;&#x8D25;&#x5728;&#x6B64;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x836F;&#x6027;&#x6B63;&#x5728;&#x5931;&#x8D25;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x539F;&#x56E0;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x4E34;&#x5E8A;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x8D39;&#x7528;&#x5F88;&#x5927;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x6BD2;&#x7406;&#x5B66;&#x7B5B;&#x67E5;&#x65E9;&#x671F;&#x4ECE;&#x4E8B;&#x836F;&#x7269;&#x7684;&#x7814;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x4EBA;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE3;&#x8868;&#x9EC4;&#x91D1;&#x6807;&#x51C6;&#x6A21;&#x578B;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x836F;&#x7269;&#x6BD2;&#x6027;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x8D44;&#x6E90;&#x3002;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x6A21;&#x5F0F;&#x57FA;&#x4E8E; immortalised &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x51CF;&#x9000;&#x3001; &#x5C55;&#x54C1;&#x7269;&#x79CD;&#x53D8;&#x5F02;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x3002;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6709;&#x5438;&#x5F15;&#x529B;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x80FD;&#x591F;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x5230;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x80DA;&#x5C42;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4EE3;&#x8868;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x4E0D;&#x7AED;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x62A5;&#x544A;&#x4E86;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5411;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x53D1;&#x5C55;&#x53EF;&#x5BFC;&#x81F4;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x7EC6;&#x80DE;&#x809D;&#x810F;&#x6BD2;&#x6027;&#x7B5B;&#x9009;&#x53CA;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6CBB;&#x7597;&#x53EF;&#x4F38;&#x7F29;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884D;&#x751F;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x50CF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x51C6;&#x8BB8;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x62DF;&#x57FA;&#x56E0;&#x591A;&#x6001;&#x6027;&#x4E0E;&#x9057;&#x4F20;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;

&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D6;&#x81EA;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6BD2;&#x6027;&#x7B5B;&#x9009;&#x7684;&#x6F5C;&#x80FD;&#x3002;

Despite considerable progress in modelling human liver toxicity, the requirement still exists for efficient, predictive and cost effective in vitro models to reduce attrition during drug development. Thousands of compounds fail in this process, with hepatotoxicity being one of the significant causes of failure. The cost of clinical studies is substantial, therefore it is essential that toxicological screening is performed early on in the drug development process. Human hepatocytes represent the gold standard model for evaluating drug toxicity, but are a limited resource. Current alternative models are based on immortalised cell lines and animal tissue, but these are limited by poor function, exhibit species variability and show instability in culture. Pluripotent stem cells are an attractive alternative as they are capable of self-renewal and differentiation to all three germ layers, and thereby represent a potentially inexhaustible source of somatic cells. The differentiation of human embryonic stem cells and induced pluripotent stem cells to functional hepatocyte like cells has recently been reported. Further development of this technology could lead to the scalable production of hepatocyte like cells for liver toxicity screening and clinical therapies. Additionally, induced pluripotent stem cell derived hepatocyte like cells may permit in vitro modelling of gene polymorphisms and genetic diseases.

Pluripotent stem cell derived hepatocyte like cells and their potential in toxicity screening.

Trotz erheblicher Fortschritte in der Modellierung menschlichen Lebertoxizit&auml;t besteht die Anforderung noch effizienter, vorausschauende und kosteng&uuml;nstiger in-vitro-Modelle zur Verringerung der Fluktuation w&auml;hrend der Medikamentenentwicklung. Tausende von Verbindungen fehl in diesem Prozess mit Hepatotoxizit&auml;t, die als eine der wesentlichen Ursachen des Scheiterns. Die Kosten f&uuml;r klinische Studien ist betr&auml;chtlich, daher ist es unerl&auml;sslich, dass die toxikologische Pr&uuml;fung schon fr&uuml;h in der Arzneimittelentwicklung durchgef&uuml;hrt wird. Menschliche Hepatozyten das Gold-Standard-Modell f&uuml;r die Bewertung der Toxizit&auml;t von Medikamenten dar, sondern sind eine begrenzte Ressource. Aktuelle alternative Modelle basieren auf unsterbliche Zelllinien und tierischem Gewebe, aber diese sind nur durch schlechte Funktion, Ausstellung Arten Variabilit&auml;t und Karte Instabilit&auml;t in Kultur. Pluripotente Stammzellen sind eine attraktive Alternative, da sie der Selbsterneuerung und Differenzierung auf alle drei Ebenen der Germ sind, und damit eine potentiell unersch&ouml;pfliche Quelle von somatischen Zellen darstellen. Die Differenzierung von humanen embryonalen Stammzellen und induzierte pluripotente Stammzellen zu funktionalen Hepatozyten wie Zellen wurde k&uuml;rzlich berichtet. Weiterentwicklung dieser Technologie k&ouml;nnte der skalierbare Produktion von Hepatozyten wie Zellen f&uuml;r Lebertoxizit&auml;t Screening und klinische Therapien f&uuml;hren. Dar&uuml;ber hinaus abgeleitet induzierten pluripotenten Stammzellen Hepatozyten, wie Zellen gestatten in-vitro-Modellierung von Gen-Polymorphismen und Erbkrankheiten.

Pluripotente Stammzellen abgeleitet Hepatozyten wie Zellen und ihr Potenzial im Toxizit&auml;t-Screening.

Nonostante i notevoli progressi nella modellazione umana tossicit&agrave; epatica, l&#39;obbligo esiste ancora per i modelli in vitro efficiente, predittivi e costo efficace per ridurre l&#39;attrito durante lo sviluppo di farmaci. Migliaia di composti non riesce in questo processo, con epatotossicit&agrave;, essendo una delle cause significative di fallimento. Il costo degli studi clinici &egrave; notevole, pertanto &egrave; essenziale che lo screening tossicologico viene eseguito precocemente nel processo di sviluppo del farmaco. Epatociti umani rappresentano il modello di gold standard per valutare la tossicit&agrave; del farmaco, ma sono una risorsa limitata. Attuali modelli alternativi sono basati su linee cellulari immortalised e tessuti animali, ma questi sono limitati dalla scarsa funzione, esposizione specie variabilit&agrave; e instabilit&agrave; Visualizza nella cultura. Cellule staminali pluripotenti sono un&#39;alternativa attraente come sono in grado di auto-rinnovamento e differenziazione per tutti i tre strati germinali e rappresentano quindi una fonte potenzialmente inesauribile di cellule somatiche. Recentemente &egrave; stata segnalata la differenziazione delle cellule staminali embrionali umane e cellule staminali pluripotenti indotte a epatociti funzionale come cellule. Ulteriore sviluppo di questa tecnologia potrebbe portare alla produzione scalabile di epatociti come celle per lo screening di tossicit&agrave; epatica e terapie cliniche. Inoltre, cellule staminali pluripotenti indotte derivato degli epatociti come cellule possono permettere modellistica in vitro dei polimorfismi del gene e malattie genetiche.

Cellule staminali pluripotenti derivate degli epatociti come le cellule e il loro potenziale nello screening di tossicit&agrave;.

&#x30D2;&#x30C8;&#x809D;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x8981;&#x4EF6;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x85AC;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306E;&#x6D88;&#x8017;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3068;in vitro&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x8CBB;&#x7528;&#x5BFE;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6570;&#x5343;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306F;&#x809D;&#x6BD2;&#x6027;&#x304C;&#x5931;&#x6557;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x539F;&#x56E0;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x30B3;&#x30B9;&#x30C8;&#x306F;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x6BD2;&#x6027;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x85AC;&#x5264;&#x958B;&#x767A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x65E9;&#x3044;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x5264;&#x306E;&#x6BD2;&#x6027;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91D1;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3084;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x8CA7;&#x3057;&#x3044;&#x95A2;&#x6570;&#x306F;&#x3001;&#x5C55;&#x793A;&#x7A2E;&#x306E;&#x5909;&#x52D5;&#x3068;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x518D;&#x751F;&#x3068;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x80DA;&#x8449;&#x3078;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x9B45;&#x529B;&#x7684;&#x306A;&#x4EE3;&#x66FF;&#x624B;&#x6BB5;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x7121;&#x5C3D;&#x8535;&#x306E;&#x6E90;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x304C;&#x6700;&#x8FD1;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x809D;&#x6BD2;&#x6027;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30E9;&#x30D6;&#x30EB;&#x306A;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x591A;&#x578B;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6BD2;&#x6027;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC04; &#xB3C5;&#xC131; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC694;&#xAD6C;&#xB294; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xC2E0;&#xC57D; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9C8;&#xCC30;&#xC744; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;, &#xC608;&#xCE21; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xBE44;&#xC6A9; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC218;&#xCC9C; hepatotoxicity &#xC2E4;&#xD328;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC6D0;&#xC778; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xAC00; &#xB418; &#xACE0;&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xD328; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC784;&#xC0C1; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBE44;&#xC6A9;&#xC740; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB3C5;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC57D;&#xBB3C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC218;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; hepatocytes &#xC57D;&#xBB3C; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xD45C;&#xC900; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD55C;&#xC815; &#xB41C; &#xC790;&#xC6D0;. &#xD604;&#xC7AC; &#xB300;&#xC548; &#xBAA8;&#xB378; immortalised &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xACFC; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC;&#xC774; &#xAC00;&#xB09C;&#xD55C; &#xD568;&#xC218;, &#xC804;&#xC2DC; &#xC885; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xBC0F; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xC5F0; &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB4E0; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC138;&#xADE0; &#xCE35;&#xC744; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBB34; &#xC9C4; &#xC7A5; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB9E4;&#xB825;&#xC801;&#xC778; &#xB300;&#xC548;. &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xCC98;&#xB7FC; &#xAE30;&#xB2A5; hepatocyte&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xCD5C;&#xADFC; &#xBCF4;&#xB3C4; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAC04; &#xB3C5;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC140; &#xCC98;&#xB7FC; hepatocyte&#xC758; &#xD655;&#xC7A5; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xCC98;&#xB7FC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; polymorphisms &#xBC0F; &#xC720;&#xC804; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xB2E4; hepatocyte &#xD30C;&#xC0DD;.

Pluripotent &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xCC98;&#xB7FC; hepatocyte &#xB3C5;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xD30C;&#xC0DD;.

A pesar del progreso considerable en el modelado de toxicidad en el h&#xED;gado humano, la exigencia sigue existiendo eficiente, predecible y rentable en los modelos in vitro para reducir el desgaste durante el desarrollo de f&#xE1;rmacos. Miles de compuestos no en este proceso, con la hepatotoxicidad es una de las causas importantes de fracaso. El costo de los estudios cl&#xED;nicos es importante, por lo tanto, es esencial que la evaluaci&#xF3;n toxicol&#xF3;gica se lleva a cabo desde el principio en el proceso de desarrollo de f&#xE1;rmacos. Hepatocitos humanos representan el modelo est&#xE1;ndar de oro para evaluar la toxicidad de los medicamentos, pero son un recurso limitado. Los actuales modelos alternativos se basan en las l&#xED;neas de c&#xE9;lulas inmortalizadas y los tejidos de los animales, pero &#xE9;stos est&#xE1;n limitados por una mala funci&#xF3;n, variabilidad de las especies de exhibici&#xF3;n y espect&#xE1;culo en la cultura de la inestabilidad. Las c&#xE9;lulas madre pluripotenciales son una alternativa atractiva, ya que son capaces de auto-renovaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n de las tres capas germinales, y por lo tanto representan una fuente potencialmente inagotable de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas. La diferenciaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas madre embrionarias y c&#xE9;lulas madre pluripotentes inducidas a los hepatocitos funcionales, como las c&#xE9;lulas recientemente se ha informado. Un mayor desarrollo de esta tecnolog&#xED;a podr&#xED;a conducir a la producci&#xF3;n escalable de hepatocitos como las c&#xE9;lulas para la detecci&#xF3;n de toxicidad hep&#xE1;tica y las terapias cl&#xED;nicas. Adem&#xE1;s, las c&#xE9;lulas madre pluripotentes inducidas derivada de hepatocitos como las c&#xE9;lulas puede permitir que en la modelizaci&#xF3;n in vitro de polimorfismos de genes y enfermedades gen&#xE9;ticas.

C&#xE9;lula madre pluripotente derivado de hepatocitos como las c&#xE9;lulas y su potencial en la detecci&#xF3;n de toxicidad

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (hESCs) &#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x7EC6;&#x80DE; (HLCs) &#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x804C;&#x80FD;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x809D;&#x810F;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6837;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x635F;&#x5BB3;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6301;&#x7EED;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

Human embryonic stem cells (hESCs) can be efficiently differentiated to hepatocyte-like cells (HLCs) in vitro and demonstrate many of the functions and gene expression found in the adult liver.

Persistence of functional hepatocyte-like cells in immune-compromised mice.

Cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) peut &#xEA;tre efficacement diff&#xE9;renci&#xE9;s pour les h&#xE9;patocytes, comme les cellules (CLH) in vitro et de d&#xE9;montrer la plupart des fonctions et l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes trouv&#xE9;s dans le foie adulte.

Persistance de la h&#xE9;patocytes fonctionnels-comme les cellules dans des souris immuno-compromis

Menschlicher embryonaler Stammzellen (Zellkulturen) k&ouml;nnen effizient zu Hepatozyten-&auml;hnlichen Zellen (HLCs) in vitro differenziert werden und zeigen viele der Funktionen und Genexpression in der Erwachsenen Leber gefunden.

Ausdauer von funktionalen Hepatozyten-wie Zellen im Immunsystem gef&auml;hrdet M&auml;use.

Cellule staminali embrionali umane (hESC) possono essere differenziate in modo efficiente a epatociti-come le cellule (HLCs) in vitro e dimostrare molte delle funzioni e l&#39;espressione di gene trovato nel fegato adulto.

Persistenza di funzionale degli epatociti-come le cellule nei topi immunitario compromesso.

&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x3088;&#x304F;in vitro&#x3067;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x69D8;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;HLCs&#xFF09;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x6210;&#x4F53;&#x306E;&#x809D;&#x81D3;&#x306B;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x514D;&#x75AB;&#x529B;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x69D8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x6027;

&#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hESCs) hepatocyte &#xAC19;&#xC740; &#xC140; (HLCs) &#xCCB4; &#xC678;&#xB85C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xD654; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; &#xACE0; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC131;&#xC778; &#xAC04; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB9CE;&#xC740;.

&#xBA74;&#xC5ED; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC950;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; hepatocyte &#xAC19;&#xC740; &#xC140;&#xC758; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131;.

Las c&#xE9;lulas madre embrionarias (hESCs) puede ser eficaz para diferenciar los hepatocitos como las c&#xE9;lulas (HLC) in vitro y demostrar muchas de las funciones y la expresi&#xF3;n de genes que se encuentran en el h&#xED;gado adulto.

Persistencia de los hepatocitos funcionales similares a las c&#xE9;lulas en ratones un sistema inmunol&#xF3;gico debilitado

&#x7EF4;&#x62A4;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x7684;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x5BF9;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x96C7;&#x7528;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B; (&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E0E;&#x751F;&#x7269;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x809D;&#x548C;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x6BD2;&#x7406;&#x5B66;&#x6D4B;&#x8BD5;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F9B;&#x5E94;&#x3001; &#x652F;&#x51FA;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x751F;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x683D;&#x57F9;&#x57FA;&#x8D28;&#x4E0A;&#x7684;&#x53D7;&#x5230;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x4E3A;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5236;&#x9020;&#x5230; GMP &#x6807;&#x51C6;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x57FA;&#x8D28;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x6539;&#x5584;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#x5185;&#x80DA;&#x809D;&#x5C42; (&#x4ED6;) &#x4ECE;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x662F;&#x5206;&#x6790;&#x4E0D;&#x540C;&#x3001; &#x4EF7;&#x683C;&#x4FBF;&#x5B9C;&#xFF0C;&#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x6765;&#x6E90;&#xFF0C;&quot;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&quot;&#xFF1B;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x7684;&#x65E5;&#x5E38;&#x5E94;&#x7528;&#x662F;&#x6709;&#x9650;&#x7531;&#x4E8E;&#x8868;&#x578B;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x80FD;&#x591F;&#x652F;&#x6301;&#x957F;&#x671F;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x5236;&#x9020;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x77E9;&#x9635;&#x5C06;&#x662F;&#x5411;&#x524D;&#x8FC8;&#x51FA;&#x4E00;&#x6B65;&#x5F00;&#x53D1;&#x53EF;&#x6269;&#x5C55;&#x548C;&#x8868;&#x7A33;&#x5B9A; hESC &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x91C7;&#x7528;&#x4E0D;&#x5E26;&#x504F;&#x89C1;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5C4F;&#x853D;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5FAE;&#x9635;&#x5217;&#x548C;&#x786E;&#x5B9A;&#x805A;&#x6C28;&#x916F;&#x77E9;&#x9635;&#x53EF;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x4ED6;&#x751F;&#x5B58;&#x80FD;&#x529B;&#x3001; &#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x809D;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x8BF1;&#x5BFC;&#x836F;&#x7269;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x652F;&#x6301;&#x805A;&#x6C28;&#x916F;&#x65F6;&#x6D82;&#x4E0A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6279;&#x51C6;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x809D;&#x57FA;&#x8D28;&#x3001; &#x957F;&#x671F;&#x7684;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x4E0D;&#x5E26;&#x504F;&#x89C1;&#x7684;&#x7B5B;&#x9009;&#x65B9;&#x6CD5;&#x53EF;&#x4EE5;&#x786E;&#x5B9A;&#x52A0;&#x5F3A;&#x5C0F;&#x5B66;&#x548C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D44;&#x6E90;&#x8868;&#x578B;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B; substrate(s)&#x3002;

&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5E93;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E3A;&#x529F;&#x80FD;&#x6027;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x836F;&#x7269;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4E0E;&#x65B0;&#x578B;&#x57FA;&#x677F;&#x7684;&#x65E0;&#x504F;&#x89C1;&#x7684;&#x7B5B;&#x67E5;&#x3002;

Maintaining stable differentiated somatic cell function in culture is essential to a range of biological endeavors. However, current technologies, employing, for example, primary hepatic cell culture (essential to the development of a bio-artificial liver and improved drug and toxicology testing), are limited by supply, expense, and functional instability even on biological cell culture substrata. As such, novel biologically active substrates manufacturable to GMP standards have the potential to improve cell culture-based assay applications. Currently hepatic endoderm (HE) generated from pluripotent stem cells is a genotypically diverse, cheap, and stable source of "hepatocytes"; however, HE routine applications are limited due to phenotypic instability in culture. Therefore a manufacturable subcellular matrix capable of supporting long-term differentiated cell function would represent a step forward in developing scalable and phenotypically stable hESC-derived hepatocytes. Adopting an unbiased approach we screened polymer microarrays and identified a polyurethane matrix which promoted HE viability, hepatocellular gene expression, drug-inducible metabolism, and function. Moreover, the polyurethane supported, when coated on a clinically approved bio-artificial liver matrix, long-term hepatocyte function and growth. In conclusion, our data suggest that an unbiased screening approach can identify cell culture substrate(s) that enhance the phenotypic stability of primary and stem cell-derived cell resources.

Unbiased screening of polymer libraries to define novel substrates for functional hepatocytes with inducible drug metabolism.

Le maintien stable fonction diff&#xE9;renci&#xE9;e de cellules somatiques dans la culture est essentielle &#xE0; une s&#xE9;rie d&#x26;#39;activit&#xE9;s biologiques. Cependant, les technologies actuelles, en employant, par exemple, des cultures primaires de cellules h&#xE9;patiques (indispensable pour le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un foie bio-artificiel et de m&#xE9;dicaments am&#xE9;lior&#xE9;s et des analyses toxicologiques), sont limit&#xE9;es par l&#x26;#39;offre, les frais, et de l&#x26;#39;instabilit&#xE9; fonctionnelle, m&#xEA;me sur des substrats de culture de cellules biologiques. Ainsi, les nouveaux substrats biologiquement actifs manufacturables aux normes GMP ont le potentiel d&#x26;#39;am&#xE9;liorer les applications cellulaires essai de culture &#xE0; base de. Endoderme h&#xE9;patique Actuellement (HE) g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; &#xE0; partir de cellules souches pluripotentes est une source g&#xE9;notypiquement diversifi&#xE9;, pas cher, et stable de &#xAB;h&#xE9;patocytes&#xBB;; cependant, il les applications de routine sont limit&#xE9;es en raison de l&#x26;#39;instabilit&#xE9; ph&#xE9;notypique dans la culture. Par cons&#xE9;quent, une matrice de manufacturable subcellulaire capable de supporter &#xE0; long terme la fonction des cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es repr&#xE9;senterait un pas en avant dans le d&#xE9;veloppement &#xE9;volutives et ph&#xE9;notypiquement stables CSEh d&#xE9;riv&#xE9;es h&#xE9;patocytes. L&#x26;#39;adoption d&#x26;#39;une approche impartiale nous avons cribl&#xE9; puces polym&#xE8;res et identifi&#xE9; une matrice de polyur&#xE9;thane qui a favoris&#xE9; la viabilit&#xE9; SE, l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes h&#xE9;patocellulaire, la drogue inductible du m&#xE9;tabolisme, et la fonction. En outre, le polyur&#xE9;thane pris en charge, lorsqu&#x26;#39;elle est appliqu&#xE9;e sur une matrice de foie bio-artificiel approuv&#xE9; cliniquement, &#xE0; long terme la fonction des h&#xE9;patocytes et la croissance. En conclusion, nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;une approche impartiale de d&#xE9;pistage permet d&#x26;#39;identifier substrat de culture cellulaire (s) qui am&#xE9;liorent la stabilit&#xE9; ph&#xE9;notypique des primaires et de la tige des ressources cellulaires d&#xE9;riv&#xE9;es de cellules.

D&#xE9;pistage impartiale des biblioth&#xE8;ques de polym&#xE8;res pour d&#xE9;finir de nouveaux substrats pour les h&#xE9;patocytes fonctionnels avec le m&#xE9;tabolisme des m&#xE9;dicaments inductible

Aufrechterhaltung stabiler differenzierte somatische Funktion in Kultur ist wichtig, eine Reihe von biologischen Unternehmungen. Aktuelle Technologien, Einsatz, z. B. prim&auml;re hepatische Zellkultur (wesentlich f&uuml;r die Entwicklung eines Bio-k&uuml;nstliche Leber und verbesserte Drogen-und Toxikologie Tests), sind jedoch durch Lieferung, Kosten und funktionelle Instabilit&auml;t auch auf biologische Zelle Kultur Substraten beschr&auml;nkt. Als solche haben neuartige biologisch aktive Substraten herstellbarer nach GMP-Standards, die Zelle Kultur-gegr&uuml;ndeten Probe Anwendungen zu verbessern. Derzeit ist Leber Endodermis (HE) aus pluripotenten Stammzellen erzeugt eine genotypisch verschiedene, g&uuml;nstige und stabile &quot;Hepatozyten&quot;; HE Routineanwendungen sind jedoch begrenzt durch die ph&auml;notypische Instabilit&auml;t in Kultur. Daher w&uuml;rde eine bearbeitbare subzellulare Matrix unterst&uuml;tzt langfristige differenzierte Zelle-Funktion einen Schritt nach vorn bei der Entwicklung von skalierbarer und ph&auml;notypisch stabiler hESC gewonnenen Hepatozyten darstellen. Eine unvoreingenommene Ansatz wir geschirmt Polymer-Microarrays und identifiziert eine Polyurethan-Matrix die er Lebensf&auml;higkeit, hepatozellul&auml;res Genexpression, Droge-inducible Stoffwechsel und Funktion bef&ouml;rdert. Dar&uuml;ber hinaus unterst&uuml;tzt das Polyurethan, wenn eine klinisch zugelassenen Bio-k&uuml;nstliche Leber Matrix, langfristige Hepatozyten-Funktion und Wachstum beschichtet. Abschlie&szlig;end zufolge unsere Daten ein unvoreingenommene Pr&uuml;fung Ansatz Zelle Kultur Substrate(s) identifizieren kann, die die ph&auml;notypische Stabilit&auml;t der Prim&auml;r- und Stammzellen Cell-derived Zelle Ressourcen zu verbessern.

Unvoreingenommene Screening von Polymer-Bibliotheken, um neuartige Substrate f&uuml;r funktionale Hepatozyten mit Induktion Medikamentenstoffwechsel definieren.

Mantenendo stabile di cellule somatiche differenziate funzione nella cultura &egrave; essenziale per una vasta gamma di attivit&agrave; biologiche. Tuttavia, tecnologie attuali, che impiegano, per esempio, coltura di cellule epatiche primario (essenziale per lo sviluppo di un fegato bio-artificiale e droga migliorato e tossicologia test), sono limitati dalla fornitura, spese e instabilit&agrave; funzionale anche su substrati di coltura biologica delle cellule. Come tale, romanzo substrati biologicamente attivi manufacturable agli standard GMP hanno il potenziale per migliorare applicazioni dosaggio basato su colture delle cellule. Endoderma epatica (HE) generato da cellule staminali pluripotenti &egrave; attualmente una fonte genotipicamente diversa, economico e stabile di &quot;epatociti&quot;; Tuttavia, egli sistematiche applicazioni sono limitate a causa di instabilit&agrave; fenotipica nella cultura. Quindi una matrice sottocellulare manufacturable capace di supportare la funzione delle cellule differenziate a lungo termine rappresenterebbe un passo avanti nello sviluppo di epatociti derivato da hESC fenotipicamente stabili e scalabili. Adottando un approccio imparziale abbiamo proiettato microarrays del polimero e identificato una matrice poliuretanica che ha promosso vitalit&agrave;, espressione genica epatocellulare, droga-inducible metabolismo e funzione. Inoltre, il poliuretano supportati, quando rivestiti su una matrice fegato bio-artificiale clinicamente, funzione degli epatociti a lungo termine e crescita. In conclusione, i nostri dati suggeriscono che un approccio imparziale lo screening pu&ograve; identificare la cella cultura substrate(s) che migliorano la stabilit&agrave; fenotipica delle risorse cella primario e derivato da cellule staminali.

Selezione imparziale delle librerie di polimero per definire nuovi substrati per epatociti funzionali con metabolismo del farmaco inducibile.

&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x52AA;&#x529B;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x539F;&#x767A;&#x6027;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#xFF08;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x809D;&#x81D3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6539;&#x5584;&#x85AC;&#x3068;&#x6BD2;&#x6027;&#x8A66;&#x9A13;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x6B20;&#x304B;&#x305B;&#x306A;&#x3044;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x63A1;&#x7528;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3092;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3001;&#x8CBB;&#x7528;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;GMP&#x57FA;&#x6E96;&#x306B;&#x88FD;&#x9020;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x306A;&#x57FA;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x73FE;&#x5728;&#x809D;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306F;&#xFF08;HE&#xFF09; &#x26;quot;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x26;quot;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x304C;&#x3001;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x3001;&#x5B89;&#x4FA1;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;HE&#x30EB;&#x30FC;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x88FD;&#x9020;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30E9;&#x30D6;&#x30EB;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;hESC&#x7531;&#x6765;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x4E00;&#x6B69;&#x524D;&#x9032;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;&#x516C;&#x5E73;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;HE&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3001;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x85AC;&#x7269;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3084;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A6;&#x30EC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x627F;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x884C;&#x5217;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x5857;&#x5E03;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A6;&#x30EC;&#x30BF;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x516C;&#x5E73;&#x306A;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x57FA;&#x677F;&#xFF08;s&#xFF09;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x8A98;&#x5C0E;&#x85AC;&#x7269;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3068;&#x809D;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x516C;&#x5E73;&#x306A;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;

&#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC9C0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xB178;&#xB825;&#xC5D0; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD604;&#xC7AC; &#xAE30;&#xC220;, &#xACE0;&#xC6A9;, &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xAE30;&#xBCF8; &#xAC04;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; (&#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC778;&#xACF5; &#xAC04; &#xBC0F; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xB3C5;&#xADF9;&#xBB3C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778;) &#xACF5;&#xAE09;, &#xBE44;&#xC6A9;, &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; substrata&#xC5D0;&#xB3C4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC640; &#xAC19;&#xC774; &#xC18C;&#xC124; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131; &#xAE30;&#xD310; &#xC81C;&#xC791; GMP &#xD45C;&#xC900; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xAC04;&#xC7A5; endoderm (&#xADF8;&#xB294;) pluripotent &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB418;&#xB294; &quot;hepatocytes&quot;;&#xC758; genotypically &#xC800;&#xB834;, &#xB2E4;&#xC591; &#xD558; &#xACE0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC18C;&#xC2A4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xADF8;&#xB294; &#xC77C;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xBB38;&#xD654; phenotypic &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC81C;&#xC791; subcellular &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xC7A5;&#xAE30; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD655;&#xC7A5; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; phenotypically hESC &#xD30C;&#xC0DD; hepatocytes &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC55E;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; microarrays &#xC0C1;&#xC601; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xC874;, &#xAC04;&#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;, &#xB9C8;&#xC57D;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5; &#xADF8;&#xB294; &#xC2B9;&#xC9C4; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC6B0;&#xB808;&#xD0C4; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xACF5;&#xD3C9;&#xD55C; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xCC44;&#xD0DD;. &#xB610;&#xD55C;,&#xB294; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xC6B0;&#xB808;&#xD0C4; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xC784;&#xC0C1; &#xC2B9;&#xC778; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC778;&#xACF5; &#xAC04; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;, &#xC7A5;&#xAE30; hepatocyte &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xCF54;&#xD305; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. &#xACB0;&#xB860;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xACF5;&#xD3C9;&#xD55C; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xBC29;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xC138;&#xD3EC; &#xC790;&#xC6D0;&#xC758; phenotypic &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xBB38;&#xD654; substrate(s) &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB300;&#xC0AC;&#xC640; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; hepatocytes &#xC18C;&#xC124; &#xAE30;&#xD310; &#xC815;&#xC758;&#xC758; &#xACF5;&#xD3C9;&#xD55C; &#xC2EC;&#xC0AC;.

Mantener estable la funci&#xF3;n de c&#xE9;lula som&#xE1;tica diferenciada de la cultura es esencial para una amplia gama de esfuerzos biol&#xF3;gicos. Sin embargo, las tecnolog&#xED;as actuales, empleando, por ejemplo, cultivo primario de c&#xE9;lulas hep&#xE1;ticas (esencial para el desarrollo de un h&#xED;gado bioartificial y f&#xE1;rmaco mejorada y pruebas toxicol&#xF3;gicas), est&#xE1;n limitadas por la oferta, los gastos y la inestabilidad funcional incluso en biol&#xF3;gicos sustratos de cultivo celular. Como dichos sustratos, novela biol&#xF3;gicamente activos manufacturable a las normas GMP tiene el potencial de mejorar la cultura de c&#xE9;lulas basadas en las aplicaciones de ensayo. Actualmente endodermo hep&#xE1;tica (EH) generado a partir de c&#xE9;lulas madre pluripotentes es una fuente genot&#xED;picamente diversa, barata y estable de &#x26;quot;hepatocitos&#x26;quot;, sin embargo, el Excmo aplicaciones de rutina son limitadas debido a la inestabilidad fenot&#xED;pica en la cultura. Por lo tanto una matriz manufacturable subcelular capaz de soportar a largo plazo la funci&#xF3;n de c&#xE9;lulas diferenciadas que representan un paso adelante en el desarrollo escalables y estables fenot&#xED;picamente derivados hESC-hepatocitos. La adopci&#xF3;n de un enfoque imparcial, se revisaron las micromatrices de pol&#xED;mero y se identificaron una matriz de poliuretano que promovi&#xF3; el Excmo viabilidad, la expresi&#xF3;n de genes hepatocelular, el metabolismo de las drogas-inducible, y la funci&#xF3;n. Adem&#xE1;s, el poliuretano apoyo, cuando est&#xE1;n cubiertas en una matriz de h&#xED;gado cl&#xED;nicamente aprobado bioartificial, a largo plazo de la funci&#xF3;n del hepatocito y el crecimiento. En conclusi&#xF3;n, nuestros datos sugieren que un enfoque exclusivamente de cribado pueden identificar sesgos sustrato de cultivo celular (s) que mejoran la estabilidad fenot&#xED;pica de los recursos primarios de c&#xE9;lulas y c&#xE9;lulas madre derivadas.

Evaluaci&#xF3;n objetiva de las Bibliotecas de pol&#xED;mero para definir nuevos sustratos de hepatocitos funcionales, con metabolismo inducible de Drogas

Claire N. Medine

Medical Research Council Centre for Regenerative Medicine

University of Edinburgh

Robust Generation of Hepatocyte-like Cells from Human Embryonic Stem Cell Populations

Claire N. Medine

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Robust Generation of Hepatocyte-like Cells from Human Embryonic Stem Cell Populations

Medical Research Council Centre for Regenerative Medicine